研 究 ) 関 す 遊 離 能( 好塩基球 疾 患 け 小児

1 2 4

金 沢大 学 十全 医 学 会 雑誌 第

^{1 0 1}

巻 第

1

号

1 2 巨 1 3 1

(

1 9 9 2

)

小 児^{ア レ ル ギ ー} 疾患 ^{に お}け^る好 塩 基 球 ^{ヒ ス タ ミ ン}遊離能 (^{H i}

^s

^t

^a

^{m i}

^{n e}

^Rel

^{e a s a}

^{b ili}t y) ^に関す ^る研究

Ⅰ^･ 気管支喘息お よ び

ア

ト ピ ^ー 性 皮膚炎 患 者^の重 水 存 在 下で の

好 塩 基 球

^{ヒ ス}

^タ

^ミ

^ン遊離能^の克 進^に

^{つ い}

^て

金沢 大 学 医 学 部 小 児 科 学 講 座 (

主

任^: 谷^口 昂 教授)

上 田 智 子

( 平 成⁴ 年

1 月1 3 日

受 付)

気 管 支 喘 息 患 者 (

b r o n c h i a l a s

t

h m a

,

B A

)

^{5 6}

名, ア ト ピ ^ー 性 皮膚炎 患者 (

^a

^t

^o

p

i c d e r m a

t

i

t

i s

,

A D

)

3 1

名

お よ び

非^{ア レ ル}

^ギ

^ー 対 照 著 (

^{n o n}

‑

^a

^t

^O

p

i c s u b

j

^{e c}

^t,

N S

)

1 9

名^の末 梢

^血

好 塩 基 球

か ら

^{の ヒ ス タ ミ}

ン

遊 離

^を

, 抗

^I

g

E

抗 体 使 用 時 (

^{a n}

^t

^トI

g

E i n d u c e d h i s

t

_a m i n e r e l e a s e

･

I

g

E

"

^{H R}

)

と

非 使 用 時 (

s

p

o n

t

a n e o u s h i s

t

a m i n e r e l e a s e

,

S = R

)

に ^つ

い

て

, 蒸 留水

を

使 用

した

緩 衝 液

^{ま た は 4 5}

% 重 水

を

使 用

し た

緩 衝 液

^で

比 較

^し

, 以下^の結 果

を

得

た

^･

S H R ほ 3

群

と

も^に有意

な 上

昇

は

な

か

っ

た が

, 重 水 存 在 下で

は B A

群^の

1 8

% ･

A D

群の

2 9

% に

2

% 以

上

の増 強

が

見

ら

れ

た

^･

I

_g

E

‑

^{H R は B A}

群 (

^{2 5}

^･

9 土2

^･

8

% ) で

N S

群 (

4

^.

1 土1

^.

7

% )

よ り

有 意

^に

高く (p

< 0

･

01

),

ま た

重 水 存 在 下^で

^{は B A}

群 (

4 7

^･

2 ±3

^･

6

% ),

A D

群 (

^{3 0}

^･

^{6 ±4}

^･

⁴

% ),

N S

群 (

1 1

.

0 土3

.

3

% )

^{と B A}

群 ( p

< 0

.

0 1

)

お よ び A D

群 (^p

< 0

^･

0 5

)

で N S

群

に

比

し

有 意^に

上

昇

が

見

ら

れ

た

･ 重 水

に よ り B A

群^の

1 6

% ,

A D

群^の

5 2

%

に 1 5

% 以

上

^の遊 離増 強

が み ら

れ

た

^■ こ の抗

I

_g

E

抗 体^の刺 激

^{に よ る}

^{ヒ ス タ ミ}

^ン

遊 離 率^の

上

昇

お よ び そ

の重 水^に

よ る

増 強

は

,

血

清 総

^I

g

E

値^の高 値 群 (

^{2 0 0I U}

/

^{m l}

以

^上

) ^で

よ り

強 く

み ら れ

,

ま た

末 梢

血

好 酸 球 数増 多 群 (

5 0 0

/

^{m m}

³以

^上

) ^で

よ り

強 く 認

め た

.

さ ら に B A

軋

A D

群^で 重 水^に

よ る

増 強 効 果^の見

ら

れ

な か

っ

た

もの

に は

, 特 異

^I

g

E

抗 体^の証 明

さ れ な

^い非^{ア ト ピ ー}型^の患 者

が

多

か

っ

た

. 以

上

の結 果

^よ り

,

B A お よ び A D

患 者

^{で は}

末 梢

血

好 塩基 球の ヒ ス タ ミ

ン

遊 離 能

が

克 進

し

て

お り

,

主 と し て そ

れ

^{は I}

g

E

抗 体

が

関 与 す

る

現 象^で あ

る

^こ

と が 示

唆

さ

れ

た

^.

K

e y

^{w o r}ds his

t a

min e, ba s

o p

hil

r e

l

e

a s

a

bili

_{t y}

, he a v

y

^{w a}

t

e

r

(^D20)^{, b}

^{r o}

^{n chi}

^a

^{l a}

^{s t}

^{h m a},

a t

O

p

i

c

de

r m a t

i

t

is

1 9 6 0

年 代,

I s hi z a k a ら

^{1) に}

よ

っ

て I

g

E が

発 見

さ れ

て以 来, 気 管 支喘 息

^や

鼻^{ア レ ル}

ギ

^ー

な ど Ⅰ

型^ア

レ

ル

ギ

^ーの関 与 す

る

疾 患^で

は

. 肥 満 細 胞

^や

好塩 基 球

か ら

の

I

g

E を

介

^{し た}

化学 伝 達 物 質^の遊 離 磯 序^に

^つ

い て研 究

さ れ て

き

た

^. ア

レ ル ギ

^ー疾患

を

有 す

る

個 体

ほ 吸 入

性 抗 原

や

食 物 抗 原

な ど

の ア レ

ル ゲ ン

に対

^し

^て抗 体

を

作

り や

す^い性 質

を

持っ

て お り

,

そ

^の

血

清 総

I

g

E

値

は

ア

レ

ル

ギ

^ー

を

持

た な

い個 体

に

比^べ

て

高 値

を 示

す^こ

と が

多^い2).

し か し 血

清 総

I

g

E

値^の高 低

が 必

ず

^し

も重 症 度

と

^一致

し な

^{い こ}

と は

諸 家^の報 告

に

も あ

^り

^{3 )4 )},

ま た

臨 床

上 し ば し ば

経 験 す

る と

^こ

ろ で

あ

る

. 他 方,

ア

ナ

^フ

ィ

ラ

ト キ

^シ

ソ

^{5) 6 )}

な

ど補 体 系

を

介 す

る

反 応

や

細 菌

^レ

^{ク チ}

ゾ

⁾

を

介 す

る

非 免 疫 学 的 刺 激機 序^に

^よ

^っ

^て

も 化 学 伝 達 物 質^の遊 離

が

認

め ら

れ, 抗 原 抗 体反 応^の

^{み で}

^{ア レ ル}

^ギ

^{ー の}病 態

を

説 明

で

き な^{い こ}

と

も 事実

で

あ

る

^.

そ

^こ

で L i c h

t

e n s

t

e i n ら に よ り

,

1 97 0

年 代

に

好塩 基 球

ヒ

ス

タ

ミ

ン

遊 離 能 (

^{b a s o}

p

hil r e l e a s a bili

_{t y})

と

^い う 概 念

^が

捉 唱

さ れ た

^8). 好 塩 基球

^{ヒ ス}

タ ミ

ン

遊離能

と は

,

一 定

の刺 激

に

対

し て

好 塩 基 球

が

遊 離 す

る

化 学 伝達 物 質^の畳^に

^よ

.

っ

て

表

^さ

れ

る

好塩 基 球^の反 応 性 全 体

を

評 価 す

る

もの

で

あ

る

^. 好 塩 基

球

か ら

化 学 伝 達 物 質

^が

遊 離

さ れ る

際^に

^ほ

, 細 胞 表 面で抗原

や

抗

I

g

E

抗 体^の結 合

し た ^{レ セ} プ

タ ^ー の架 橋 形 成^に始

ま り

, 細 胞 外

よ り

カ ル

シ ウ ム イ オ ン が

流

入 し

, ヒ

ス

タ ミ

ン

等^の化 学伝 達物 質

^が

顆 粒

か ら

放 出

さ れ る ま

で多 く^の過 樫

を

経^{て い}

る

^. 細胞 骨格 構 造

の ^一

つ を な

す^マ

イ

ク^ロ チ エ

ブ ル ス

も,

そ

の集 合

^と

細 胞 膜^{へ の}貫 通^に

^よ

^って顆 粒 内化 学 伝 達 物 質^の細 胞 外^{へ の}放 出に最 終 段 階

で

重 要

な

役 割

^を

果

た し て

い

る

^{9 ト 1 1 ).} 重 水 (

h e a v

y

^{w a}

t

e

r,

D

2

0

)

^は

^こ

の ^マ

イ

^{ク ロチ} ュ

ブ ル ス を

安 定 化

^し

^{1 2 )},

I

g

E を

介 す

る

^ヒ

^ス

^{タ ミ}

^ン

遊 離

を

増 強 す

る と

言

わ れ

て い

る

^{9 卜 1 1 ).} 今

回

著 者

は

, 気 管 支 喘 息

お よ び

ア ト ピ ^ー 性 皮 膚 炎 患 者

に お

け

る

^ヒ

ス

タ ミ

ン

遊 離 能

を

, 垂 水

^を

用^{い て ヒ}

^ス

^{タ ミ}

^ン

遊 離

を

測 定 す

る

^こ

と

に

よ り

健 康 人

と

比 較

し

て検 討

し た

^.

対 象 お

よ び

方 法

Ⅰ

^. 対 象 ( 表^‑

¹

)

対 象

^は

ア ト ピ ^ー 性 皮膚 炎 患 者 (

a

t

o

p

i c d e r m a

t

i

t

i s

,

A

b)

3 1

乱 売 管 支 喘 息患 者 (

b r o n c h i a l a s

t

h m a

,

B A

)

^{5 6}

名, 非^ア

^ト

^{ピ ー}対照

A b br

e

via

t

io n s

:

A D

, a

t O p

ic de

r

m a

t

i

t

is

;

B A , br o

n

ch ial

a

s

t

h m a

;

H N M T, hi

s t

a

m

in e N^‑m e

t

h

_y

l

t

r a n sfe

r

a s e

;

H R (^I

g

E), a m O u n

t

Of a n

t

i^‑I

_g

E indu c ed his

t

a min e r el

e

a

s

e

;

H R (^S)^{･ a m O}Pⁿ

^t

^{Of s}

^p

^{o n}

^{t a}

^{n e o u}

^s

^his

^{t a}

^mi

^{n e}

^{r ele}

^a

^{s e}

^;

I

g

E^‑H R, a n

t

i^一I

_g

E ind

u

c ed his

t

a min

e r

ele a s e

;

I

_g

E^‑H R (^D), a n

t

i^‑I

_g

E ind u c

e

d his

t

a

m

in e r ele a s e in he a v

y

^{‑W a}

t

e r

(^D20)^‑b

^a

^{s ed b}

^u

^ffe

^r ;

I

g

E^‑H R (^H), a n

t

i^‑I

g

E indu c ed hi

s t

ami n e

r

ele a s e in H

2

0 ^‑ba

s

ed b uff

e

r

;

I H R, a m O

u n t

Of

者 (

^{n o n}

‑

^a

^t

^O

^p

^{i c s u b}

^j

^{e c}

^t,

^{N S}

⁾

^{1 9}

^名の計

^{1 0 6}

^名

^で

あ

る

^. こ こ で

A D と ほ

,

H a n ifi n と R a

j

k a

の診 断 基 準^{1 3)}

と

北 郷^の診 断基 準^{1 4)}

^を

参 考^に

^し

, 横痺, 紅 軌 小

^丘

疹, 浸 潤,

び ら ん

, 苔 癖化

な ど

の

典 型的

な

形 態

お よ び

分 布

^{を 示}

す皮 疹

が

慢 性

に

経 過

し

て い

る

もの

と した

.

B A は

喘 鳴

を

伴 う^一過 性^の呼

^吸

困 難 発作

^が

, 気 管 支 拡 張 剤

に よ り

改善

^し

, こ

れ を

繰

り

返 す もの

で

あ

る

^.

N S は

, 気 管 支 喘息^{, ア ト ピー} 性 皮 膚 炎, ア

レ

ル

ギ

^ー性 鼻 炎, ア

レ ル ギ

^ー 性 結膜 炎

^{な ど}

^{の ア レ ル}

^ギ

^ー 症 状

^や

寄 生 虫 疾 患, 腎 疾 患, 免疫

不

全 症等^の疾 患

を

認めず,

2

親 等 以 内

に

ア レ ル

ギ

^ー疾 患^のな^いもの で,

さ ら

に

血

清 総

^I

g

E

値

^ほ

^二重 抗 体 法^で

³

才 以 下

^{5 0I U}

/

^{m l}

以 下,

4

^〜

7

才

1 00I U

/

^{m l}

^{以 下},

8

才 以

上 1 5 0 I U

/

^{m l}

以 下

を

満

た し

^{1 5 卜一7)}, ラ

ジ

オ ア

レ

ル ゴ ソ･^ル

^{ベ ン} ト

試 験 (

^{r a di o a ll e r}

g

o s o r b e n

t t

e s

t,

R A S T

)

^{に よ る}

^{ア レ ル}

^{ゲ ン}

検 査^で,

ダ

^ニ (

D e r m a

t

o

p

h a

g

o

‑

id e s

p t

e r o n

y

s s i n u s

) ^に対 す

る

特 異

I

g

E

抗体

を

証 明

し な

^いもの

で

あ

^る

^. 表

1

に各 群^の性 臥 年 令,

血

清 総

^I

g

E

値, 末 梢

血

好酸 球 数

を 示 した

^. 小 児 科

を

訪

れ る A D は

乳 幼 児

が

多^い

た め

,

B A

群

や N S

群^に比^べ

A D

群

で

^の平 均 年 令

^ほ

低

^{く な}

^{っ て い}

^る

^.

^{A D}

群

で は 2

名^に抗^{ア レ}

^{ル ギ}

^ー 剤

と

原 因 食物 除去 療 法

^を

行^い ,

4

名

に

抗^{ア レ ル}

ギ

^ー 剤

を

使用,

1

名^に除 去療 法

を

行

な

っ

て

^い

た

.

B A

群

^{で ほ}

,

3 8

名

^に

^テ

^オ

^フ

ィ

リ

ン

_,

1 5

名^に抗^ア

^レ

^ル

ギ

^ー剤,

3

名に

ス テ

^ロ

イ ド

剤

を

内服 投 与

し て

い

た

^.

Ⅱ

.

ヒ ス タ ミ ン

遊 離 方 法

1

^. 緩 衝 液^の作成

緩 衝 液

ほ 0

^.

0 2 5 M T r i s h

y

d r o x

y

m e

t

h

_y

l a m i n o m e

t

h a n e

,

0

.

1 2 M N a C l

,

0

.

0 0 5 M K C l

,

0

.

3 m

g/

^{m l}

^{ヒ ト ア ル}

^ブ

^ミ

^ン か ら な る

ト

リ ^ス A

緩 衝 液,

お よ び

ト

リ ^ス A

緩 衝 液

に 0

^.

6 m M C a C 1

2,

1 m M M

g

C 1

2

を

含

む ト リ ス A C M

緩 衝 液

^を

使 用

^{し た}

^.

と

も^に

2 5 ℃ で

p

H 7

.

6

に調整

^した

^.

2

^. 抗

I

g

E

抗 体^の調 整

抗^{ヒ ト}

^I

g

E

抗 体 (^ヒ

^{ツ ジ}

) (

^フ

^ナコ

^シ

, 東 京

) を 用

い て最終 濃 度

が 0

^.

0 0 1

,

0

^.

0 05

,

0

^.

01

,

0

^.

0 5

,

0

^.

1

,

0

^.

5

,

1

^.

0

/^Jg/

^{m l と な る}

よ

うに調 整

し た

.

3

^. 垂 水

( D

2

0 )

の調 整

ト リ

ス

緩 衝 液^に含

ま れ る

垂

水 (

和 光, 大 阪

)

^の最 終 濃 度

を 0

,

2 2

.

5

,

4 5

,

6 0

,

8 0

% ^に

な る よ

う^に調 整

し た

^.

4

^. 白

血

球

分

離 方 法

T a b l e l

^.

C h a r a c

t

e r i s

t

i c s o f

t

h e s u b

j

^{e c}

^t

^s

L i c h

t

e n s

t

e i n ら

^の方 法^{1 8) に}準

じ

, 末梢

よ り

^ヘ

^パ リ ^ン

加 静 脈

血 2 0 _m l を

採

血 し

,

デ キ ス ト

ラ

ン

^ー

デ キ ス ト

^{ロ ー}

ス

液

^{5 m l を}

加

え て

室 温

陀 て6 0

分 静置 後, 白

^血

球

を

含 む

上

清

を

採取

した

^. と

_{れ を} 4 ℃

に

て 1 1 0 G 8

分 間遠

^心

分 離

し

, 沈 鐘

を ト リ ス A

緩 衝 液

で 2 回

洗 浄 (

と

も^に

2 5 0 G 8

分 間遠

^心

)

^した

軋 細胞

を

^ト

リ ス A

緩 衝 液に再浮 遊

^{さ せ}

, 木 村 氏 液に て染色

した

好 塩 基球

^を

算 定

し

て調 整

し た

.

5

^. ヒ

ス

タ ミ

ン

遊 離 方 法

蒸 留 水

を

使 用

し た

ト

リ ^ス A C M

緩 衝 液 (

H

2

0

緩 衝 液)

^と

, 重 水

を

使 用

し た ト リ ス A C M

緩衝 液 (

^D

²

⁰

緩 衝 液)

^に

, 最 終 好塩 基 球 数

^{が 1 0}

ソ

^m l と な る よ

う調 整

し た

細 胞 浮 遊 液

を

加 え

て ヒ ス

タ ミ ン遊 離反 応

^を

行

な

っ

た

^. 抗

I

g

E

抗体 非 添 加

に て み ら れ る

ヒ

ス

タ ミ

ン

遊 離

を

^ヒ

ス

タ ミ

ン

自 然 遊 離 (

^s

p

o n

t

a n e o u s h i s

t

a m i n e r e l e a s e

,

S H R

), 抗

^I

g

E

抗 体 添 加^に

よ る

ヒ

ス

タ ミ

ン

遊 離

を

抗

I

g

E

抗 体 誘 導^ヒ

ス

タ ミ

ン

遊 離 (

^{a n}

^t

^{ト I}

g

E i n d u c e d h i s

t

a m i n e r e l e a s e

,

I

g

E

^‑

H R

)

^{と した}

^. 検 体

に

緩 衝 液

や

抗

I

g

E

抗 体

を

添加 す

る ま

で の操作

は

す^べ

て 4 ℃

で行

な

^い, 遊 離 反応

は3 7 ℃ で

行

^な

^っ

た

後

4 ℃

に

て

冷 却 遠

^{心 し}

,

上

情

^{を 2 00}

〃

1

採 取

^{し て}

直

ち

^{に ‑}

2 0 ℃

に冷 凍 保 存

^{し た}

^. 総^ヒ

^ス

タ ミ

ン

含 量^ほ, 細 胞 浮遊 液

を 3

分 間煮 沸 後, 同 様^に冷 却 遠

心

^{に て}

上

帝

^{を と り}

^‑

^{2 0 ℃ に}

冷 凍 保 存

^{し た}

^.

6

. ヒ ス タ ミ

ン

測定 方 法

ヒ

ス

タ ミ

ン は

同 位

元

素^二重 標 識 酵 素 法 (

d o u b王 e i s o

t

o

p

i c e n z

y

^{m a}

t

i c a s s a

y)^{1 9)} に

よ り

測 定

^{し た}

^.

^{ヒ ス}

^{タ ミ}

^ン

標 準 液

ほ hi s

ta

m i n e dih

y

d r o c l o r id e

(

S i

g

m a

,

セ ン

ト

ル イ ^ス

, 米

国

) ^の

2

倍 希 釈^に

よ る

希釈 系 列 (

2 0 0

^〜

0

.

7 8 n

g/

^{m l) を}

作 成

^し

^て

^用

^い

^た

^.

^ヒ

ス

タ ミ

ン

ー

^N

‑

^メ

^チ

^ル

^{ト ラ}

^{ン ス フ}

^{エ ラ ー ゼ}(

h i s

t

a m i n e

r

^N

L

^{m e}

^t

^h

‑

y

l

t

r a n s f e r a s e

^,

H N M T

)

ほ S h a ff ら

^の方 法^に

よ り ラ

ッ

ト

^の腎臓

よ り

抽 出

し

^{2 0)},

‑

2 0 ℃

に保存

^{し た}

も^の

を 用

い

た

.

3

H

標識^ヒ

^ス

^{タ ミ}

ン

,

) 4

c

標 識

S

‑ ^ア

^デ

^{ノ シ}

^ル

^{メ チ}

^オ

^ニ

^ン

(

S

‑

^{a d e n o s}

y

l m e

t

h i o n i

‑

n e

‑¹⁴

^C

^,

^{S A M}

‑^{1 4}

C ) は N E N R e s e

r

c h P r o d u c

t

( ボ ^ス ト ン

_, 米

国) よ り

購

^{入 し た}

^. 検 体^に

^{S A M}

‑^{1 4}

^C

^,

^{H N M T お よ び}

^ト

^レ

^{ー サ ー}

^{と し}

て極少 量^{の 3}

^H

‑

^{ヒ ス}

^{タ ミ}

^{ン を}

^加

^え

^て

^{3 7}

^℃

^で

^{反 応}

^さ

^せ

^{る と}

^{, 検 体} 中^{の ヒ}

ス

タ ミ

ン は H M N T

に

よ り S A M

‑^{1 4}

^{C か ら メ}

^{チ ル基}

^を

^受

け

取っ

て

^{1 4}

C

‑

^メ

^{チ ル ヒ}

^ス

^{タ ミ}

^ン

^に

^{な り}

, ト

レ

^鵬 サ ^ー の ³

汁

ヒ

ス

タ ミ

ン

ほ³

H

‑^‖

^C

‑

^メ

^チ

^ル

^ヒ

^ス

^{タ ミ}

^ン

^に

^{な る}

^.

^{ヒ ス}

^{タ ミ}

^ン

濃 度^ほ

t 4

C

/³

^H と 正

の相 関

を 示

す^こ

と

^に

よ り

知

る

^こ

と が で

き

る

^{. ヒ}

^ス

タ

N o n

^‑

a

t

O

p

i c s u b

j

^{e c}

^t

^A

^t

^o

p

i c d e r m a

t

i

t

i s B r o n c h i ^a l _{a s}

t

h m a

N u m b e r o f s u b

j

e c

t

M a l e

/

^{F e m m a l e}

M e a n a

g

e

(y

r

) (

^{r a n}

g

e

)

1 9 1 0

/

⁹

1 3

.

2

(

^l

^〜

^{3 6}

)

S e r u m l

g

E l e v e l

(

lU

/

^{m l}

)

5 5 士 1 0 P e r i

p

h e r a l e o s i n o

p

hil s 9 4 士 2 4

レ

^{m m}

³)

3 1 1 1

/

^{2 0}

3

.

3

(

0

^.

2

^〜

1 0

)

5 6 3 4

/

^{2 2}

1 6

.

9

(

2

^〜

5

引

8 5 8 ±3 7 3 1 2 8 0 土2 9 0

^*

66 2 ±1 3 0

^*

7 6 2 土8 4

^*

Ⅴ a l u e s a r e m e a n 士 S

^.

E

^.

M

^.

*

p

< 0

^.

0 5 a

g

a i n s

t

n o n

^‑

a

t

O

p

i c s u b

j

^{e c}

^t

ini

t

i

a

l his

t

a min e r ele

a s

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t O p

ic s ubj^{e c}

^t

^s

^;

^{R A S T, r adioal1e r}

g o

s o rb

e

n

t t e

s

t ;

S A M ^{‑1 4}C ,S ^‑ade n o s

y

lm

e t

h ト

O nin e^{‑1 4}C

_;

S HR ^s

p

^{o n}

t a

n e

o

u s his

t

a min

e

r ele a s

e ;

S H R (^D), S

p ^O

ⁿ

t a

n e O u S his

t

a min e r

e

Ie

a

s

e

in D20^hba

s

ed buffe r

;

S H R (^H),S

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^{O n}

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t

a m in e

r

ele

a s

e in H20^‑b

a

s ed buffe r

;

T H,

t

O

t a

l his

t

a min e

1 2 6 上

ミ

ソ

遊 離 量

^ほ

総^ヒ

^ス

^{タ ミ}

^ン

含 量 (^t

^o

^t

^{a l hi s}

^t

^{a m i n e}

,

T H

) ^に対 す

^る

割 合 ( %

^{ヒ ス}

^{タ ミ}

^ン

遊離) ^で表

し た

^.

1

)

2

)

S H R

(

^%

)⁼

H R

(

^S

) ^‑

^{I H R} T H

×

1 0 0

I

g

E

‑

^{H R}

(

%

)⁼

^{H R}

(

I

g

E

) ^‑

H R

(

^S

)

火

1 00 T H

S H R

; 無 刺 激 的^に自然 遊離

^{し た}

^ヒ

^ス

^{タ ミ}

^ン

^{遊 離 率}

I

_g

E

^‑

H R

; 抗

I

g

E

抗 体

で

刺 激

した

場 合^{の ヒ}

ス

タ ミ

ン

遊 離 率 初期^ヒ

^ス

^{タ ミ}

^ン

遊 離 量 (

^{a m o u n}

^t

^{o f i n i}

^t

^{i a l hi s}

^t

^{a m i n e r e l e a s e}

,

I H R

);

0

分

に お

け

る

ヒ

ス

タ ミ

ン

遊 離 量

ヒ

ス

タ ミ

ン

自 然 遊 離 量 (

^{a m o u n}

^t

^{o 王 s}

p

o n

t

a n e o u s h i s

t

a m i n e r e l e a s e

,

H R

(

S

))^; 抗 原 非 添 加^に

て

反 応

さ せ た

時^の自 然^{ヒ ス タ ミ}

ン

遊離 量

抗

^I

g

E

抗 体 誘 導^{ヒ ス タ ミ}

^ン

遊 離 量 (

^{a m o u n}

^t

^{o f a n}

^t

ⁱ

^‑

^I

g

E i n d u c e d h

i

s

t

a m i n e r e I e a s e

,

H R

(

I

g

E

));抗

I

g

E

抗 体

を

加

え

て反応

さ せ た

時^{の ヒ}

^ス

^{タ ミ}

^ン

遊 離 量

T H

; 総^ヒ

^ス

^{タ ミ}

^ン

含 量

0

0

▲

U (

ボ

)

○

芸

0

1

0

∝

加

用

O u

‑

∈ 旦【

巾

【

〓

0 3 0 ￠0 9 0

T I

m o ( ^m 叫

F i

g^.

l

.

T i m e c o u r s e o f

t

h e h i s

t

a m i n e r e l e a s e f r o m b a s o

p

h ト I s

^.

L e u k o c

y t

e s f r o m

t

w o

p

^a

t

i e n

t

s w i

t

h b r o n c h i a l a s

t

h m a

W e r e i n c u b a

t

e d f o r

t

h e i n di c a

t

e d

^t

i m e i n H

2

0

‑

^{b a s e d}

(^･･･)

o r

D

2

0

‑

^{b a s e d b u ff e r}

^{( ‑)}

^{w i}

^t

^h

^{(○, ●)}

^{o r w i}

^t

^{h o u}

^t(

^△

^,

^▲

⁾

a n

t

i

‑

^I

^g

^E

^.

^{T h e a m o u n}

^t

^{o f h i s}

^t

^{a m i n e r e l e a s e w a s r e}

^p

^{r e s e n}

^t

^{e d}

a s a

p

e r c e n

t

a

g

e o f

t

h e

t

o

t

a l hi s

t

a r n i n e

(

S e e M e

t

h o d s

)^.

棚

卸

劫

Ⅷ

(

辞

₎

○ 的 q O

I

O

∝

O

u

‑

E 虐

垂 童

0 0 1 .0 1 .1

A

n

t トI g E C

o n c o n

t

r a

tI

_{o n} (

t

^J

^{g /}

^m

^J

⁾

F i

g^.

2

^.

Hi s

t

a m i n e r e l e a s e i n d u c e d b

y

a

v

a r i o u s c o n c e n

t

r a

t

i o n O f a n

t

i

^‑

I

g

E

･

L ^{e u} k o c

y t

e s f r o 甲 ^a

^p

^a

^t

i e n

t

w i

t

h b r o n c h i a l

a s

t

h m a w e r e i n c u b a

t

e d w i

t

h a n i n di c a

t

e d c o n c e n

t

r a

t

i o n o f

a n

t

i

^一

I

g

E i n H

2

0

^‑

b a s e d

( ○)

^{o r D}

2

0

^･

b a s e d

(●)

^{b u ff e r s}

^.

7

. 統 計 学 的 処 理

得

ら れ た

数 値

は

すべ て平均 値

土

標 準 誤 差 (

m e a n ±S

^.

E

^.

M

)^. で

示 し た

. 多 群 間^の平 均 値の差の検 定^に

^ほ

^一元 配 置 分 散 分析 後,

S c h e ff e ま た は D ^{u n n e}

^{t の}多 重 比 較 法

を

用^い

た

^. p

< 0

^.

0 5

の場 合

を

有 意差 あ

り と

判 定

し た

^.

成 績

Ⅰ

.

ヒ

ス

タ ミ ン

遊 離 条 件

^に

関 す

^る

基 礎 的検 討

1

^. 重 水の

至

適 濃 度^{に つ い}

^て

垂 水^の濃 度

を2 2

.

5

,

4 5

,

6 0

,

8 0

% の条 件 下

で

遊 離反 応

^を

行

^な

う

^と

,

S H R お よ び I

g

E

‑

^{H R は}

^{濃 度依 存 的}

^に

^{増 加}

^した

^. 細 胞 障 害

を

認

め

ず^に

ヒ ス

タ ミ

ン

遊 離

を

増 強

し

,

そ れ

自 体^に

よ

って

は

遊 離

を

引 き起^こ

^{さ な}

^い濃 度

^{と し て}

, 重 水^の濃 度

^{を 4 5}

% ^{7 ト g )}

^{と し た}

^.

2

^. 反応 時 間

に ^つ

い

て

( 図

1

)

反 応 時 間

を

検 討す

る た め

,

S H R お よ び 0

.

0 5

F^Lg/

^{m l}

^抗

^I

g

E

抗 体 存 在

下 で

^の

I

g

E

^‑

H R を 3 0

,

6 0

,

9 0

,

1 8 0

分で比 較

し た

^.

以

後

H

2

0

緩 衝 液^に∴

お

け

る S H R

,

I

g

E

‑

^{H R を そ れ}

^ぞ

^{れ S H R}

⁽

^H

^),

I

g

E

‑

^{H R}

(

^H

),

D

2

0

緩 衝 液

^{に お}

け

^{る S H R}

,

I

g

E

‑

^{H R を そ れ}

^ぞ

^れ

S H R

(

D

)^,

I

g

E

^‑

H R

(

D

)

と

す

る

^.

S H R

(

H

),

S H R

(

D

)

は

時 間^の経 過

と と

も^に

わ

ず

か

^に

上

昇

が み ら

れ

た が

,

1 8 0

分

^で

も

2

%

を

こ

え な か

っ

た

^.

I

_g

E

^‑

H R

(

^H

),

I

_g

E

‑

^{H R}

⁽

^D

⁾

^{は3 0}

^分

^{ま で に ヒ ス タ}

^ミ

^ン

遊 離

を

認

め

, 以後

は

漸 増

し

て い

た が そ

^の

上

昇

ほ

ゆ

る や か で

あっ

た

. こ

れ よ り

, ヒ

ス

タ ミ

ン

遊 離 反 応^に

^お

け

る

反 応 時 間

^{は 6 0}

分

と した

^.

3

^. 抗

I

g

E

抗 体^の至 適 濃 度^に

^つ

^い

て

( 図

2

)

咄

加

(

辞

)

○

●

̲

○

【

○

∝

O u

】

∈

̲ l

虔

H

(

求

)

○ 愉

■

○

【

○

∝

O u

‑

∈ 雲

∞

≡

皿

糾

0 0

H20 D2

0

H20

D

20

日

20

D

20 N習忘畔^冒

｡

｡亡霊…;

ⁱ

^き ㌔;㌻ごエ㌘^l.

(

^{n ;…}

^{1 9} ) (

ⁿ⁼

3 1 ) (

^n三さ

6 )

F

i

g^.

3

^.

S

p

o n

t

a n e o u s h i s

t

a m i n e r e l e a s e

(

A

)

a n d a n

t

i

^‑

I

g

E

‑

^{i n}

^‑

d u c e d hi s

t

a m i n e r e l e a s e

(

B

)

王 r o m l e u k o c

y t

e s o f n o n

^‑

a

t

O

p

i c S u b

j

e c

t

s

,‑､^p

^a

^t

^{i e n}

^t

^{s w i}

^t

^{h a}

^t

^o

^p

^{i c d e r m a}

^t

ⁱ

^t

^{i s o r b r o n c hi a l}

a s

t

h ^{m a}

^.

V e r

t

i c a l b a r s r e

p

r e s e n

t

m e a n ± S

^.

E

^.

M

^.; ★, P

<

0

^.

0 1

; ★ ★, p

< 0

^.

0 5