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著者 岸上 佳史, 桜山 和美, 田崎 和江, 上島 雅人, 渡 辺 弘明

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(1)

著者 岸上 佳史, 桜山 和美, 田崎 和江, 上島 雅人, 渡 辺 弘明

著者別表示 Kishigami Yoshifumi, Sakurayama Kazumi, Tazaki Kazue, Ueshima Masato, Watanabe Hiroaki

雑誌名 地球科学

巻 53

号 1

ページ 19‑28

発行年 1999‑01‑25

URL http://doi.org/10.24517/00061688

doi: 10.15080/agcjchikyukagaku.53.1_19

(2)

±也球 毒斗学53巻

,

 19

〜

28 〔1999年)

Earth Science 〔Chikyu Kagaku) vol

.

53

,

19

−

28

.

 1999

尾 小屋 鉱 山

に

お け る Cu と Fe の 微生物 に よ る 固定 岸 上 佳史

*

・ 桜山和美

 

田 崎和 江

*

・

’ * ・

上 島 雅 人

 

渡 辺 弘明

*

Bacterial

 

fixation

 of 

Cu

 and  

Fe

 

in

 

Ogoya

 

Mine

, 

Ishikawa

 

Prefecture .

Yoshifumi

 

Kishigami

*, 

Kazumi

 

Sakurayama

’,

    Kazue

 

Tazaki

’

・

” , 

Masato

 

Ueshima

“

        and

 

Hiroaki

 

Watanabe

’

Abstract

 

Ogoya

 

Mine

 

in

 

lshikawa

 

Prefecture

, 

Japan

, 

is

 one  of the 

fissure − filling

 vein type copper

deposits

 

in

 the 

Green

 

Tuff

 region

.

 

The

 mine  contains 

pyrite ,

 chalcopyrjte, 

galena

 and  sphalerite

. Heavy

 metal  

ions

 

dissolveed

 

from

 abandoned  metal

−

mine  are common  

in

 waste  water  

pool

 and

stream

.

 

In

 the metal  mining  area, 

Fe,

 

Cu ,

 

Zn

 and  

Cd

 are releasing  

from

 

dumping

 area  to the

Kakehashi

 

River.

 

The

 

drainage

 water contains 

Fe

(

26 . 85

 mg

/ 1

)

, Cu

(

3 . 97

 mg

/ 1

)

, Zn

(

23 . 94

 mg

/

Dand

 

Cd ( 0 、 09

 mg

/ D . ln

 this mine

,

 various  colored  microbial  mats (

biomats

>are 

grown

 around the 

No . 6p

{t 

drainage

 system  

Abundant

 

brown

 

biomats

 covered  with 

green

 

biomats

 

have

 

fixed

 

heavy

metals  on  

the

 

drainage

 channel  

down

 the 

pithead.

 

These

 

biomats

 are observed  

by

 

both

 optical  and scanning  electron  microscopes

( SEM

)

. Minerals

 

in

 the 

biomat

 and  their chemical  compositions  were analyzed  

by

 

X −

ray 

diffraction ( XRD )

, 

X −

ray 月uorescence

( XRF )

and  energy  

dispersive

 

X −

ray

analyzer

( EDX

)

. The

 reddish  

biomats

 

fix

 

Cu

 selectively 丘om  

drainage

 water

,

 whereas  

the

 

dark

 

green biomats

 

fix

 

Fe .

 

Microorganisms

, such  as 

bacteria

 and  algae

,

 capture  most  of 

heavy

 metals  as 

Fe −

 and

Cu −

minerals  

in /

on  thecell」t 

is

 clarified that copper  and  cuprite  are 

formed

 

in

 reddish  

biomats

, and that 

goethite

 and  maghemite  are 

formed

 

in

 the 

brown

 

biomats .

Key

 veords :

heavy

 metal

,

 

Fe ,

 

Cu

, 

fixation

, 

biomineralization

, microbial  mats , optical  microscope ,

SEM − EDX ,

 

TEM ,

 

XRD

, 

Ogoya

 

Mine .

は じめ

に

 

日本で は戦前

・

戦 後の 工業の発 展に ともない鉱 山の開発 も進

ん だ

.

と こ ろ が

,

近 年鉱石は鉱 物 資 源が豊富でコス トの安い外 国か ら の輸入 に依存す る よ うになっ た

.

そのた め 日本の鉱山は 次々 と閉 山に追い込ま れ た

.

し か し, 操業 中の採 掘 や 製錬の過 程な ど で排出され た廃 水 や 煙によ り汚染された周辺の環境はす ぐに元に戻る こ と は困難で あっ た

.

そ れ ばか りか, 閉 山後に昔

の坑口 を埋め戻し て も, 坑内に浸透 し て き た地 下 水は大 量の重 金 属 イオンを含 ん だ強酸性廃水と し て坑道の外へ 湧 出し, 周 辺 の土壌

・

水質 を汚 染 し続 けてい る (久保田 ほか

1997

>

.

この よ

う な鉱山廃水の処理が ほ と ん どの鉱 山の半永 久 的 な問題と なっ

てい る

.

 重 金属には, クロ ム (

Cr

), マ ンガン (

Mn

), 鉄 (

Fe

), コ バ ル ト (

Co

)

,

銅 (

Cu

)

,

亜鉛 (

Zn

)な どがある

.

これら は微 量ではあるが, 生体に とっ て必須元素でもある

.

しか し, 必須 微量元素と さ れ る重金属もまたそ の化学的形態や濃度に よっ て

は著 しい毒性を示 す

.

鉱 山 廃 水中には高濃度の重 金属が溶存し

て おり

,

周 囲の土壌

・

水質を汚染し

,

生態系を変化さ せ る こ と

が問題と なっ ている (大竹

1996

)

.

 尾 小屋 鉱山も例外で はな く, 1972年に鉱 山は閉 山した もの

の周 辺の重金 属 汚染は閉 山 以 前から問題となっていた

.

本 鉱 山 は多い時で月産 20Dtの粗銅を生産し

,

石川県で最も大きな鉱 山で あっ た

.

そ の活動に と も ない, 周 辺に は重 金属を含ん だ鉱

 1998年3月25日受付

.

1998年11月

9

日受理

.

*金 沢 大学理学部地球 学科

,

〒920

−

1192 金沢 市角間町

,

 Department of Earth Sciences

,

 Kanazawa  University

,

 Kakumu

,

 Kanazawa 92G

.

U92

,

 Japan

* *北 陸支 部

(

19

>

(3)

2D 岸 上 佳 史

・

桜 山和 美

・

田崎和江

・

上島 雅 人

・

渡 辺 弘 明

山廃水 (坑 水 )によ る 土壌

・

水

鷺鷺裂 が

広がっ てい た

.

1969

年に尾小 屋 鉱 山地区か ら流下す る梯 川の中

・

下 流で水 田 土 壌 中にカ ド ミ ウム汚染が見 出され, その後 その汚 染が本格的に問 題視され始め た

.

石 川 県は

,

旧

atr

[

1

の坑水や ズ リ捨て場に対す

る公 害 防 止工事 を計 画 し

,

水田の土壌汚染の機構解明と対策に

つ いて検 討を行っ た

,

そ し て

1977

年に対 象 面 憤

・

170ha に対 する農用 地 土壌汚染対 策工事が始 まり

,1989

年に完了し た

(梯川 流域 汚染機構解 明 調 査会 1974;石

lIr

県環 境 部梯川流 域 汚 染 防止 対 策 室

1975

)

.

しか し, そ れ で根本的な問題が解 決した わ けで は なく

,

現在で も坑口 から湧 出 してくる毎 分 約ltの坑 水はpH 

3, 5

の強 酸性水であ り

,

 

Fe,

 

Cu,

 

Zn

な どの重 金 属イ ォンを大 量に含ん で い る

.

そのた め現 在で も坑水の中和処理 が 続 け られてい る

.

 

一

搬に

,

強酸 性の鉱山廃水中に は, 好酸 性 細 菌 などの微 生 物 が 生息し て毒 性の高い重 金 属に対して1耐性を持っ てい るこ とが 知 られている (田崎 1994)

.

また

,

微 生物によ る重金 属固定に 関 して はい くつ か の報告例が ある

.

例え ば

Ferris

 et a1

.

(1987)は

,

微生物に よ る

Mn

(

IV

)の酸 化によるマ ンガン鉱 床の生成につ い て報告し ている

.

更に

,

走 磁 性 細 菌は細 胞 内に 磁 鉄 鉱 を 形 成 し

,

いわ ゆ る

BCM

(

biologically

  controlled

mineralization )の代表例と し て そ の形 成 過程や鉱 物 学 的 特 性

に つい て多くの研 究例が あ る (Bazylinski et al

.

1988;

Malm

et al

,

1984)

.

そして, こ のような微 生 物を利 用し た環 境 浄 化 が 実 際に行 われてい る

.

岩 手 県の「目松尾鉱 山で は, 好酸性化学 独立栄養の鉄酸化細菌が自ら粘性多糖を生 産して, 粘性 糸 状バ

イ オマ ッ トを形 成し てい る (若 尾 1995)

.

また 自然 界の環境浄 化の例と して, 島根県の旧宝 満 山 銅鉱 山では 昔のグ リッ トに赤 褐 色のバイ オマ ッ トが広 く形成して お り, 電子顕微鏡観察に よ り繊維状シア ノバ ク テ リアが水 酸 化 鉄の球 粒 を細 胞 壁に作 り

,

ま た珪 藻 が細胞壁 な どに水酸 化 鉄 鉱 物 を形 成して いるのが認め られた (

Tazaki

 et al

. 1994

>

.

  こ の よ う に

,

微生物は そ の環境に順 応し

,

自然 界の様々な 汚 染環境の浄化を行っ ている

.

尾小屋鉱山に おい て もこのよ う な 微生物の働きが予想さ れ, その効 果 を探るために微 生 物 相を中 心に水 質 調 査

,

バイオマッ トの電 子 顕 微 鏡観察を行っ た

.

そ の 結果, 微生物の コ ロ ニ

ー

の周囲に

, 自然銅, 赤 銅 鉱, 針 鉄 鉱

,

マグヘ マ イ 】

・

な どの鉱 物 が 認 め られ

,Cu

お よ び

Fe

が固定さ

れ ているこ とが明らかとなっ た

.

それ らの生成 物に つ いて報 告 する

.

試 料

尾 小屋鉱山

 本 鉱 山は石 川 県 小松 市の南東

,

梯川の支流

,

郷 谷

1

「「の上 流に

位置す る

.

南西の方角には白山連 峰が存在し, 周 辺 は緩やかな 山間部によっ て構成されて い る (第 1図 )

.

本 鉱 山周辺の地層 は主に

,

第三紀 中 新 統のグリ

ー

ンタフか ら な る

.

鉱脈は主と し

て石英脈からなっ て お り, 火山活 動によっ て生 じた 断層 や 裂 け 目に熱水が入 りで き た

,

裂 罅 充 填型 浅 熱 水 性 鉱 床である

.

脈幅

37 ’

36

第1図

.

尾小 屋鉱山 (▲)の位 置 図

.

は数セ ンチメ

ー

トル か ら1メ

ー

トル に渡り

,

平行もしくは雁 行 状に配 列して いる

.

採 掘され てい た主要 鉱 石 鉱 物 とその粗鉱百 分 率 は

,

主に黄鉄釦、 (

5. Owt .

%), 黄銅鉱 (

6 . 5wt ,

%)

,

方鉛 鉱 (

0, 5wt ,

%)

,

閃亜鉛鉱 (

1. 5wt ,

%) で あ る (

紬

野

1993

; 地 質 調査所

1956

:北 陸土 木 地 質 図編 纂委 員 会

1990

)

.

サンプ リング地点

 

尾小屋鉱 山では, 閉山後 は第 六立坑を除いて すべて の坑凵を 閉鎖したの で, 坑 道 内に浸 透し た地 下水や雨水は重 金属を含 ん

だ坑 水として坑 内 を充 墳してい る

.

そ の た め第六 立 坑か ら坑 水 を湧 出さ せ てい る

.

現在でも毎分 約1t の坑 水が湧 出し てい る

.

これ らの坑 水は雨水 などの表層水と は混じ ら ないように水

路 を 設け てあり

,

途中で石灰水を混入 させ沈殿 池で溶 存 して い る重 金 属 イオンを沈 殿さ せ た後, 上澄み部分だ け を放 流 してい

る (第2図)

.

 

本研究に 用い た試 料の採 取地 点は

,

坑水の湧出凵であ る第 六 立坑の

POINTl ,

坑水が流れ てい る谷川の

POINT

 2で ある

(第

2

図 )

.P

⊂)

INTI

で は比較的 流 れの 少 ない部 分か ら,

POINT

 

2

で はバ イ オマ ッ トが最も繁殖し てい る場所か ら試 料

(4)

尾小屋鉱山 に お け る重金 属の微 生 物によ る固定

21

 

 

 

’

昌

伽

t

第2図

.

尾 小屋鉱 山の水系 図と サ ンプル採 取 地 点

(POINT /およ び

2

)

.

を採取し た (第

3

図 )

.

観察 ・分 析方法

 本 研 究で行っ た観 察お よび分析に用いた装置は以 下の通 りで ある

.

・

plI計 (堀場製

D −13

電極 6350)

・

酸 化 還 元電 位 計 (堀 場製

D13

電極

6861−

10C)

・

微 分 干渉お よび落射蛍光顕微鏡 (

Nicon

製 optiphoto

− 2

)

・X

線粉末回折 分 析 装 置 (理 学 電機製

RINTI20

 型);

XRD

・

蛍光

X

線分析装置 (理学電機 製 system3270 型 );XRF

・

走 査型 電子顕微鏡 (日本電子製

JSM −5200LV

);

SEM

・

エ ネル ギ

ー

分 散 分

析 装 置 (フ ィ リッ プス 社 製

EDAX .

 

PV9800STD

型 );

EDX

・

透 過型 電 子 顕微鏡 (日本 電 子 製

JSX −

3200);TEM

 

上述の

POINT1

, 2の現場で採取したバ イ オマ ッ ト試料は

そのま まスライ ドガラスに塗布し, 光学顕微鏡お よび蛍光 顕 微 鏡で観察し た

.

ま た

,

細胞の

DNA

を染色す る

DAPI

(

4

,

6−

diamido−2−phenylindole

)を用い て 生息して い る微 生物の存 在 を 確 認 した

.

更に細 胞の

DNA

や

RNA

を 染色する

AO

(

Acridine

 

Orange

) を用い て微 生 物の形 態や大き さ を観察し た

,

 

バ イ オマ ッ ト試料は乳鉢でペ

ー

ス ト状にし

, そ れ をス ラ イド ガ ラスに厚 く塗布し, 乾燥さ せ た後, 管電圧

40kV ,

管電 流

第3図

.

第六立 坑か ら 沈殿 池に続く谷1「「

.

本研究で 用いたバイ オマ ッ ト と坑 水の サ ンプル採集地 点 (POINT  2)を矢EI亅で 示 す

.

30mA

で

X

線粉末回折分析 (

XRD

)を行っ た

.

  POINT2 で堆積し てい る茶色のバ イ オマ ッ ト と そ こに流れ る坑 水にっい て蛍 光X 線分析 (

XRF

) を行っ た

.

茶色のバ イ オマ ッ トは自然 乾 燥 後に

,

坑 水 は蒸 発乾 固 させた後にそれぞれ を乳鉢で粉末に し

,

管竃 圧 50kV

,

管電流

20mA

で分 析 を行

っ た

.

 走 査 型 電 子 顕 微 鏡 (

SEM

) 試料は まずアル ミ の試料台に カ

ー

ボンテ

ー

プをは り

,

その上に バ イオマ ッ トを少 量の せ て自然 乾燥あるいは凍結乾燥 (鈴木ほ か

1995

)を行い

,

炭 素蒸着を 施し

,SEM

で観察し た

.

これ に よ りバ イ オマ ッ トの微 細 形 態 や構 成生 物相な どを観察した

.

同 時に

SEM

に取 り付けられ た

エ ネルギ

ー

分 散 分 析 装 置 を 用いて加速 電 圧

15kV

で定 性 分 析 を行っ た

.

 

SEM

で は観察不可能なバ ク テ リ ア の細胞 内部や表面の状態 を透 過 型 電 子 顕 微 鏡 (

TEM

> を用いて加 速 電 圧

200

 

kV

およ び 160kV で観察した

.

 また

,POINT

 

2

に おいて 河床を覆っ てい る緑 色の バ イ オマ

ッ ト の付 着速度 (過程)を 調べ る た め に, ス ラ イ ドの枠に

OIIP

シ

ー

トを挟 んだ ものを現 地に取 り付 け

,

その付 着状 況 を 観察し た

.

設置場所は

,

深緑色のバ イオマ ッ トが発 生して いる 流速の緩や か な ところ を選 び, 絶えず水面か ら

OIIP

シ

ー

ト部

分 が出ることのないよ うにして, 河 床 面に水 平に設 置 した

.

な お

,

上 流から土砂の流 入 を防 ぐた めに

,

ス ライド枠を載せ てあ

る プレ

ー

トの周辺には発泡スチロ

ー

ルで 壁 を作り

, 直 接 的に土 砂を被るこ と のない ようにした

.

実験は ’

97

年 11月

10

口

〜’ 97

年

12

月

10

目 まで の 1ヶ月 間行った

.

 また坑水中の元素の定量分析は二種類の方法で行っ た

.ICP

発光 分 光 分析装置 (

ICP . AES

;

SPS

 

7SeO

)による分 析はセ イ

コ

ー

電 子工 業   に

, エ ネル ギ

ー

分 散型 蛍光

X

線 分 析

(

EDXRF

;

JSX −3200

)による分 析は日本 電子   に依 頼 した

.

(

21

)

(5)

22

岸 ヒ佳 史

・

桜 山 和美

・

田崎 和江

・−h

島 雅人

・

渡 辺 弘 明

結 果

 1997

年

7

月工

9

日 に行っ た現 地で の水 質の調 査結果を第

1

表

に示す

.

また,

POINT

 1の坑 水の

ICP

 

AES

, EDXRF 分 析 結 果 を第2表

,

第

3

表に,

POINT2

の坑 水の

XRF

分 析 結 果 を第 4 表に示す

,

POINT

 

1

にお け るバイ オマ ッ トの付着状況

 

POINT

 

1

の坑口 の構造上比較的流れ の少ない ところ に

,

局 所的かっ 特異的にピンク色のパイ オマ ッ トが認め ら れ た

.

ピン

ク色バイ オマ ッ トは葉の葉 脈の部 分や木の折れ [ な ど に比較的 多く認 め られ る

.

ま た

,

深 緑色の バイ オマ ッ トが全体 的に存 在 して いる

.

これ は

,

浮遊物が多く集まっ ている場 所の葉の裏

,

木の表 面

,

坑[[の壁の壁 面な ど に普遍 的に見 られる

.

X

線粉 末 回折分析 (

XRD

)結果 (

POINT

])

 

ピン ク色バ イ オマ ッ トを

XRD

分析すると

,

強い 自然 銅

(

2. 09A ,1. 81A

)と石 英 (

3. 34A ,

4

.

26A )

,

弱 い 赤 銅 鉱

(

2. 46A

,

2. 12A

)の ピ

ー

クが 認められ た (第

4

図 )

.

ま た深 緑色バ イオマ ッ トを分析し た と こ ろ, 石膏の ピ

ー

ク (

7, 61A

) や 弱い石 英 (

3. 34A

>の ピ

ー

クが 認めら れ た

.

な お

2. 5A

付

第

1

表

,

尾小屋鉱 山 (

POINT

 1および2)に おけ る水 質 調査 結果 (WT ;水 温

,

測定;1997

.

7

.

19)

.

PQINTpHEh (mV )EC (μ S/cm )DO (mg /

DWT

(℃) 13

.

5370 O

.

86 1

.

4 15 23

.

9370 1

.

04 7

.

6 18

第2表

.

尾 小 屋 鉱 山 (POINT  1)に おけ る坑水の ICP

−

AES

によ る重 金 属の分析結果

.

Fe Pb Cu Zn Cd

36 0 . 4 10 50 tr.

mg /

1

第3表

.

尾小屋鉱 山 (POINT  l)におけ る坑 水のEDXRF に

よる化 学 分析結果 (tr

.

;微星

,

 N

.

D

,

;検 出せず )

,

NaM AlSiSClKGa

<

114tr , tr. 518N . D . 227 MnFeNiCuZnBrPb

412N . D . 635N . D . N . D ,

鯉

                            蕘 豆

,

乙: 瀧

1 尉

  30D

l : :

 

       CuK

α

2θ

r

 ] 第4図

.

P〔)INT 1か ら採 取 したピンク色バ イオマ ッ トのX線

粉末回折パタ

ー

ン

.

近には

,

マ グヘ マ イ ト

,

針 鉄 鉱

,

レ ピ ドクロ

ー

サイトといった

鉄 鉱物に対 応 する弱い ピ

ー

クが 認められた

.

光学顕微鏡観察結 果 (

pOINT

 

1

)

 光学 顕 微 鏡 観察によ る と ピンク色お よび深緑色バイ オマ ッ ト 中に は, 緑藻, 藍 藻

,

珪藻な どの藻 類や, バク テリア がコ ロ ニ

ー

を形成 してい る の が認め られ る

.

特に, ピンク色の バイ オマ ッ

i・

中に は藻 類の数 は少 な く

,

バ ク テリアのコ ロ ニ

ー

が顕 著に

見 られ た

.

ま た

,

バ クテ リア のコ ロニ

ー

中に黒 色の不 透 明物質

が多く存在し ているのが認め ら れ る (第

5

図

A

矢 印)

.

顕微鏡

の透 過光 源の光を さ ら に強くし て観察すると, 繊維状に広がっ

た藻類の コ ロニ

…

中にも銅赤 色の物 質 (

1

〔〕μm 程度)が存在し

てい る (第

5

図

B

矢 印)

.一

方

,

深緑色の部分に は褐 色の物 質

が存 在す る

.DAP

工染色に よ る紫外線 ド観 察で は, バ イ オマ ッ

ト中に見られ た藻 類は クロ ロフ ィ ル を持つ こと が認め ら れ た

.

走 査型電子顕微鏡 観 察 (

SEM

)お よびエ ネルギ

ー

分 散 分析

(

EDX

)結 果 (

POINT

 1)

 

ピンク色のバイ オマ ッ トの

SEM

観 察によ る と, 多く の針状 物質 (第

6

図

A

矢 印 ) と多面体結 晶 (第

6

図

A , C

)が認め

ら れ, EDX 分析に よ る と

,

強い

Cu

の ピ

ー

ク を 示 す (第6図

B

)

.

これ らは

XRD

分析の自然銅と赤銅鉱に対 応 す ると考 え

られ る

.

多面体結 品の表 面には多 くの空 隙が認め ら れ た

.

こ の

Cu

を含む物 質の周 辺に は糸状 菌と桿 菌が多数存 在して い る

(第

6

図

C

)

.

こ の糸状菌の表 面をEDX により分 析 する と, 

S

を 主 成 分 と し

,Fe

, 

Cu

, 

Si

, 

P

, 

Cl

な どの元 素が存 在する

(第

6

図

D

>

.

なお, 糸状 菌の他にも珪藻 や緑藻が確認さ れ た

.   ・

方

, 深 緑 色バ イ オマ ッ トには

SEM

観察に よ り, 緑 藻

,

藍 藻

,

珪藻が多数 認め られ た

.

第4表

. POINT2

で採取した坑 水と茶色のバ イ オマ ッ i

・

の

XRF 分 析 結 果

.

SCaFe  ECu     Zn 蒸 発 乾 固 さ せ た 抗 水  

’30.

26424

.

763   35

.

8

茶 色のバイ オ マ ッ ト    4

.

11

.

O140

.

814

.

  0

、

3

   

透過型電子 顕微鏡観 察 (

TEM

)結果 (

POINT

 

1

)

     ピ ンク色のバ イ オマ ッ トを

TEM

に よ り観察す ると

,

大き

   

さ約 1

〜

1

.

5μ 1/1の桿菌や長さ約

3

μm の繊 維 状のバ ク テリ ア     が 見 られ た (第

7

図

A

)

.

それらの表 面に は大き さ 10

〜

150

cps

   

mn の顆 粒状物質が 多 く付 着してい る (第7図

B

)

.

ま た, 細

参照

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