臨床検査
．髄液検査
髄液検査 神経細胞 破壊 伴 神経細胞 遊離 蛋白 測定
有効 あ Enolase 14-3-3 診断的価値 高い
現時点 ン病 確定診断 い 血液・髄液検査 い
．脳 波
PSD (Periodic synchronous discharges) 存在 有名 あ 古典的CJD 所見 あ 他 脳波所見 重要 PSD 脳 器 質的変化 示唆 う 徐波 存在 上 注意 い い症例
ン 105変異 GSS い 病末期 α波 認 あ
．脳の画像検査
初期診断 有効 MRI検査 あ 基底核部 T2強調画像 High 症例 認 基底核部 異常 FLAIRやDiffusion 強調 多い 基底核部 異常 認 場合 FLAIRやDiffusion 試 有効 あ
． オン蛋白遺伝子検索
ン蛋白遺伝子解析 ン病 診断 重要 検査 あ 遺伝子検索 臨床的 診断 可能 家族性 ン病 限 い 遺伝子変異 存 在 い孤発性 ン病 い ン蛋白 ン 129 ン219 解析 重要 意味 ン 129Met/Met 脳波 PSD 古典的 CJD 経 過 PSD 認 い 視床型CJD 考え い ン 129
Val/Met Val/Val あ 症例 脳波 PSD 認 ン病
取 扱う必要性 あ ン 129 解析 ン病 臨床診断 非常 重要 あ ン219 解析 ン219Lys 検出 孤発性
ン病 診断 可能性 低 他 疾患 考慮 い
ン219Lys 認 硬膜移植後 CJDや家族性 ン病
ン 102 GSS ン200 家族性CJD ン病 発病 症例 存在
ン219Lys 関 孤発性CJD 診断 際 考慮 適当 あ
特殊検査 異常 オン蛋白の検出
．異常 オン蛋白の検出法 (Western blot法)
異常 ン蛋白 検出法 最 確実 再現性 認 方法 あ 単 脳
ー Proteinase K 蛋白分解酵素 ー 一 あ 処理
検査 十分 あ 異常 ン蛋白 濃度 低い症例 特 孤発性 ン病 視床型CJDや家族性 ン病 FFIや ン 180 変異例 界 面活性剤存在下 不溶性分画 濃縮 必要 あ Western blot 法 異
常 ン蛋白 ン 可能 あ 異常 ン蛋白 Proteinase K処理後
分子量 大 分類 1～3
．異常 オン蛋白の検出法 切片の免疫染色
ー ー 用い 前処理法 導入後 症例 異常 ン蛋白 検
出 成功 い 検出法 利用可能 う 点
記載
）切片のオートクレー 処理
(1) 脱 ン後 切片 水洗 ー ー 処理 行う 切片 種類 応
種々 濃度 1mM 2mM 3mM 塩酸溶液 入 121℃ 10分間 ー ー 処理 行う ー ー 切片 入 溶液 出 後 30～60分 間 室温 戻 い
(2) 塩酸濃度 切片 異 いう 最 重要 点 あ 剖検後2 週間程度 固定脳 1～3mM 濃度 最良 結果 得 あ 固定期 間 長期 及 症例 30mMや 100mM 塩酸濃度 上 い い い切片 あ 塩酸濃度 組織破壊 起 一歩手前 濃度 最 適当 あ
最適 塩酸濃度 必要 あ
(3) ー ー 処理 行う容器 ン ー 深型容器 600ml 蒸留水 入 濃塩酸 10 濃度 60μl入 1mM塩酸 作製 い 塩 酸溶液中 完全 切片 浸 う 切片 入 切片 染色 用い 同時 何枚 処理可能 あ
） リオン蛋白抗体
(1) 免疫染色 用い 一次抗体 3F4 いう ー 抗体 市販 い Dako
岩井化学 ー 抗体 市販 い IBL) 一次抗体 希釈 5％溶液 効果的 あ
(2) 次抗体系 ン 使用 い系 方 い結果 得 ー ー 処
理 内因性 ン 問題 大脳白質 ン 染色 あ
ン 用い 十分除去 い 多 二次抗体系
ABC法 PAP法や 他 Envision法 用い 方法 薦
．扁桃のバイオ シー ｖCJDを疑 た場合
適 応：ｖCJD 中枢神経系以外 ン 組織 濾胞樹状細胞 異常 ン蛋白
沈着 知 い ン 組織 検出率 高い
扁桃 あ ｖCJD 以外 ン病 扁桃 異常 ン蛋白 検出 手術検査 出血 多い手技 あ 検査適応 十分検討 上 行う あ
手術方法：扁桃切除術 準 量 組織 必要 あ 切除術 用い 器具 使い捨 用い 望 い 器具 滅菌 関 消毒法 参照
組織の取り扱い：陽性 結果 十分 組織量 必要 あ ー
ー 陰性 あ 確実 陰性 評価 い 扁桃切除術 準 組織 切
除後 半分 中性 ン溶液 固定 ン固定 必 必要
日間程度 固定 後 蟻酸処理 行い 水洗後 ン包埋 切片 作製 感染性 問題 凍結切片 作製 避 あ 蟻酸処理 切片 感染性
消失 い 切片 免疫染色 行い 異常 ン蛋白 検出 行う 切除後 残 半分 組織 －80℃ 凍結 凍結組織 Western Blot 法 直接異常 ン蛋白 証明
異常 ン蛋白 直接 証明 現時点 中枢神経系 ン 装置 濾胞樹状
細胞 限 待望 血液 髄液 異常 ン蛋白 検出
あ 2001 年 相次い 注目 検査方法 報告 今後更 研究 進展 望
・異常 ン蛋白 試験管内増幅：Nature 報告 方法 異常 ン蛋白
種 正常 ン蛋白 加え 超音波処理 異常 ン蛋
白 性質 有 ン蛋白 増え いう あ 報告
異常 ン蛋白 3％ 新 異常型 97％ いう あ 今後
必要 検討 実際 血液 異常 ン蛋白 少量 存在 い状 態 方法 有効 いう点 う一 新 異常型
ン蛋白 本当 感染性 増幅 見 いう点 あ 5
・異常 ン蛋白 尿 検出：J. Biol. Chem. 報告 異常 ン
蛋白 尿中 検出 いう ー あ ー 以外
全 動物種 検出可能 あ 述 い 本来 感染性 低い 存在 い 考え 尿 PrPSc 検出 得 いう 驚 値
著者 述 い う 尿 PrPSc う 特別 あ UPrPSc 記載 い 理由 尿 分画 感染性 証明
あ 6 検査法
文 献
) Parchi P, Giese A, Capellari S, Brown P, Schulz-Schaeffer W, Windl O, Zerr I, Budka H, Kopp N, Piccardo P, Poser S, Rojiani A, Streichemberger N, Julien J, Vital C, Ghetti B, Gambetti P, Kretzschmar H. Classification of sporadic Creutzfeldt-Jakob disease based on molecular and phenotypic analysis of 300 subjects. Ann Neurol. 1999 46:224-233.
) Collinge J, Sidle KC, Meads J, Ironside J, Hill AF. Molecular analysis of prion strain variation and the aetiology of 'new variant' CJD. Nature. 1996, 383:685-690.
) Parchi P, Capellari S, Chen SG, Petersen RB, Gambetti P, Kopp N, Brown P, Kitamoto T, Tateishi J, Giese A, Kretzschmar H. Typing prion isoforms. Nature. 1997, 386:232-234.
) Kitamoto T, Shin RW, Doh-ura K, Tomokane N, Miyazono M, Muramoto T, Tateishi J. Abnormal isoform of prion proteins accumulates in the synaptic structures of the central nervous system in patients with Creutzfeldt-Jakob disease. Am J Pathol.
1992, 140:1285-1294.
) Saborio GP, Permanne B, Soto C. Sensitive detection of pathological prion protein by cyclic amplification of protein misfolding. Nature. 2001, 411:810-813.
) Shaked GM, Shaked Y, Kariv-Inbal Z, Halimi M, Avraham I, Gabizon R. A protease-resistant prion protein isoform is present in urine of animals and humans affected with prion diseases. J Biol Chem. 2001, 276:31479-31482.