ᩍ䠄◊✲≉௵䠅 : ▮㒊ಇᶞ㻌

䛆䛆◊✲άືሗ࿌䛇㻌㻌

䝝䜲䝤䝸䝑䝗䝘䝜䝞䜲䜸◊✲㒊

ᩍ ᤵ㻌 㻦㰻⸨ṇ⏨

ㅮ ᖌ㻌 㻦ᯇ஭ᩄ㧗㻌

ຓ ᩍ㻌 㻦ᾏ㔝ᫀ႐

10 8

ᅗ2 10-propyl-DH࡜GluK1ࡢ ┦஫స⏝ᵝᘧ

2. ࢢࣝࢱ࣑ࣥ㓟ཷᐜయ࡟㛵ࡍࡿ◊✲

࢖࢜ࣥࢳࣕࣥࢿࣝᆺࢢࣝࢱ࣑ࣥ㓟ཷᐜయ㸦iGluR㸧ࡣࢩࢼࣉࢫ⭷ୖ࡟Ꮡᅾࡍࡿ⺮ⓑ㉁࡛࠶ࡾࠊ⚄⤒ఏ 㐩≀㉁ࢢࣝࢱ࣑ࣥ㓟ࡢཷᐜ࡟ࡼࡾ㝧࢖࢜ࣥࢆ㏱㐣ࡉࡏࡿ࢖࢜ࣥࢳࣕࣥࢿࣝ࡜ࡋ࡚ᶵ⬟ࡍࡿࠋiGluRࡣ㏿

࠸⯆ዧᛶ⚄⤒ఏ㐩ࢆᢸ࠸ࠊグ᠈ࡸᏛ⩦࡞࡝ࡢ㧗ḟᶵ⬟࡟㛵୚ࡍࡿ

ࡓࡵࠊࡑࡢᶵ⬟ࢆ㑅ᢥⓗ࡟ไᚚࡍࡿ⸆๣ࡣ་Ꮫ࣭⸆Ꮫ࡞࡝ᵝࠎ࡞

ศ㔝࠿ࡽὀ┠ࢆ㞟ࡵ࡚࠸ࡿࠋࢲ࢖ࢩࣁ࣮࣋࢖ࣥ㸦DH㸧ࠊࢿ࢜ࢲ࢖

ࢩࣁ࣮࣋࢖ࣥ A㸦NDH㸧ࡣᾏ⥥࠿ࡽⓎぢ࣭༢㞳ࡉࢀࡓኳ↛࢔࣑

ࣀ㓟࡛࠶ࡾࠊ࢝࢖ࢽࣥ㓟ᆺࢧࣈࢱ࢖ࣉ࡟ᒓࡍࡿ㠀ᖖ࡟㢮ఝࡋࡓ஧

ࡘࡢ࢔࢖ࢯࣇ࢛࣮࣒㸦GluK1, GluK2㸧࡟ᙉࡃ⤖ྜࡋ࡚άᛶ໬ࡍࡿࠋ

ᡃࠎࡣࠊiGluR࡜DHᵓ㐀㢮⦕యࡢ≉␗࡞┦஫స⏝ࢆཎᏊࣞ࣋ࣝ

࡛ゎ᫂ࡍࡿࡓࡵࠊ໬ྜ≀࡜iGluRࣜ࢞ࣥࢻ⤖ྜ㒊఩࡜ࡢ」ྜయࡢ

⤖ᬗᵓ㐀ゎᯒࢆ㐍ࡵ࡚࠸ࡿࠋ

ᮏᖺࡣࠊ᫖ᖺࡲ࡛ࡢᵓ㐀ゎᯒࢆᇶ࡟ྜᡂࡉࢀࡓ᪂つ໬ྜ≀10-ethyl-DH, 10-propyl-DH࡜GluK1࡜ࡢ

」ྜయࡢ⤖ᬗᵓ㐀ゎᯒࢆ⾜࠸ࠊཎᏊࣞ࣋ࣝࡢ⤖ྜᵝᘧࢆ1.5 Åศゎ⬟࡛᫂ࡽ࠿࡟ࡋࡓ㸦ᅗ2㸧ࠋᡃࠎࡢ ண᝿࡟཯ࡋ࡚ࠊࡑࢀࡽࡢGluK1࡟ᑐࡍࡿぶ࿴ᛶࡣDH࡟ẚ࡭࡚పୗࡋ࡚ࡋࡲࡗࡓࡀࠊGluK2࡜ࡢ㑅ᢥ ᛶࢆ♧ࡍࡇ࡜ࡀ᫂ࡽ࠿࡟࡞ࡗࡓࠋࡲࡓࠊᡃࠎࡣࠊGluK2࡜DH, NDH࡜ࡢ」ྜయࡢᵓ㐀ゎᯒ࡟ࠊࡑࢀࡒ

ࢀ2.05 Å, 1.65 Åศゎ⬟࡛ᡂຌࡋࡓࠋGluK1࡜GluK2ࡢ඲యᵓ㐀ࡣ࡯ࡰྠࡌ࡛࠶ࡿࡀࠊ⤖ྜࡋࡓDHࡢ ࢥࣥࣇ࢛࣓࣮ࢩࣙࣥࠊ≉࡟㸴ဨ⎔㒊ࡢ㓄⨨࡟ࡣ኱ࡁ࡞㐪࠸ࡀぢࡽࢀࡓࠋࡇࢀࡽࡢᵓ㐀࠿ࡽࡣࠊGluK2 ࡣDH㢮ࡢ8఩⨨᥮ᇶ࡜ࡼࡾᙉࡃ┦஫స⏝ࡍࡿࡀࠊDH㏆ഐࡢAsn㸦GluK2࡛ࡣSer㸧ࡀ㔜ᗘࡢ❧య㞀 ᐖࢆᘬࡁ㉳ࡇࡍ࡜⪃࠼ࡽࢀࠊDH㢮⦕యࡢぶ࿴ᛶࡸ࢔࢖ࢯࣇ࢛࣮࣒㑅ᢥᛶࡢ≉␗ⓗ࡞ኚ໬ࢆㄝ᫂ࡍࡿࡇ

࡜ࡀྍ⬟࡜࡞ࡗࡓࠋ௒ᚋࠊࡇࢀࡽࡢཎᏊ࡛ࣞ࣋ࣝࡢᵓ㐀᝟ሗ࡟ᇶ࡙࠸࡚ࠊぶ࿴ᛶ࣭㑅ᢥᛶࡀࡉࡽ࡟㧗

࠸άᛶ໬࣭୙άᛶ໬๣ࢆ㛤ⓎࡋࠊiGluRࡢస⏝ᶵᗎࡸࢧࣈࢱ࢖ࣉ≉␗ⓗ࡞⏕⌮ᶵ⬟ࡢゎ᫂ࢆ┠ᣦࡍࠋ

ț࢔࣑ࣀࣞࣈࣜࣥ㓟ྜᡂ㓝⣲ࡢ࣒࣊࡟ࡼࡿάᛶㄪ⠇ᶵᵓࡢゎ᫂

-࢔࣑ࣀࣞࣈࣜࣥ㓟ྜᡂ㓝⣲㸦ALAS㸧ࡣ⣽⬊ෆ࡟࠾ࡅࡿ࣒࣊ྜᡂࡢึⓎ㓝⣲࡛࠶ࡾࠊࢢࣜࢩࣥ࡜ࢫ ࢡࢩࢽࣝCoA࠿ࡽ-࢔࣑ࣀࣞࣈࣜࣥ㓟㸦ALA㸧ࢆྜᡂࡍࡿࠋ့ங㢮࡟ࡣALAS1ࠊALAS2ࡢ㸰✀㢮ࡢ

࢔࢖ࢯࢨ࢖࣒ࡀᏑᅾࡋࠊALAS1ࡣ࣒࣊࡟ࡼࡗ࡚㈇ࡢㄪ⠇ࢆཷࡅࡿࡇ࡜ࡀ▱ࡽࢀ࡚࠸ࡿࠋࡋ࠿ࡋࠊࡇࢀ

ࡲ࡛ALAS1ࡢ㓝⣲Ꮫⓗ≉ᛶࡸ࣒࣊࡜ࡢ┦஫స⏝ᵝᘧࠊ࣒࣊࡟ࡼࡿάᛶㄪ⠇ᶵᵓࡢヲ⣽࡟㛵ࡋ࡚ࡣ࡯࡜

ࢇ࡝◊✲ࡉࢀ࡚ࡇ࡞࠿ࡗࡓࠋࡑࡇ࡛ࠊ኱⭠⳦ࢆ⏝࠸ࡓALAS1⤌᥮࠼ࢱࣥࣃࢡ㉁ࡢⓎ⌧⣔ࢆᵓ⠏ࡋࠊࡑ ࡢ㓝⣲Ꮫⓗ≉ᛶࡢゎ᫂ࢆ┠ᣦࡋࡓࠋࡲࡎ኱⭠⳦ࡢᇵ㣴᮲௳ࡸ⣽⬊ࡢ◚○᮲௳࡞࡝ࡢ᭱㐺໬ࢆ⾜࠸ࠊ

ALAS1ࢱࣥࣃࢡ㉁ࢆྍ⁐ᛶ⏬ศ࡟ㄪ〇ࡍࡿࡇ࡜࡟ᡂຌࡋࡓࠋḟ࠸࡛ALASάᛶࡢ ᐃἲࢆᨵⰋࡋࠊᅛ

┦ᢳฟ࡜⺯ග HPLC ࡢ⤌ࡳྜࢃࡏࡓ㧗ឤᗘ࢔ࢵࢭ࢖ἲࢆ㛤Ⓨࡋࡓࠋࡇࡢ⤖ᯝࠊ⢒㓝⣲⁐ᾮࢆ⏝࠸ࡓ㎿

㏿࡞άᛶࢫࢡ࣮ࣜࢽࣥࢢࡀྍ⬟࡟࡞ࡾࠊ⌧ᅾࡲ࡛ࡢணഛⓗ࡞⤖ᯝ࡜ࡋ࡚ࠊ࣒࣊࡟ࡼࡿALAS1㜼ᐖຠᯝ ࡢ┤᥋ほ ࡞࡝࡟ᡂຌࡋ࡚࠸ࡿࠋ௒ᚋࠊALAS1ࡢ㓝⣲Ꮫⓗ≉ᛶࡢゎᯒ࡜ྠ᫬࡟ࠊX⥺⤖ᬗᵓ㐀ゎᯒ࡟

ࡼࡿཎᏊ࡛ࣞ࣋ࣝࡢᵓ㐀ゎᯒࡶ㐍ࡵ࡚࠸ࡃࠋ

䛆䛆◊✲άືሗ࿌䛇㻌

㻌 ᮦᩱᇶ┙◊✲䝥䝻䝆䜵䜽䝖

ᩍ ᤵ㻌 㻦㈅἟ு௓㻌

ຓ ᩍ㻌 㻦ᱵὠ⌮ᜨ㻌

≉ูᩍ⫱◊✲ᩍဨ㻦㛗㏕㻌 ᐇ㻌

◊㻌 㻌 ✲㻌 㻌 ဨ㻦ఀᮾ㻌 ⯟㻌

኱㻌 Ꮫ㻌 㝔㻌 ⏕㻦኱ஂಖுᡂ䠈ᐑᮏ㝯ྐ䠈チ㻌 ⓦ䠈᪂ὠ⏥኱䠈ᮧ⏣㻌 ⪽㻌

㻌 㻌 㻌 㻌

ᮏ◊✲ศ㔝䛷䛿䠈䝭䜽䝻⤌⧊䛾⇕ຊᏛ䛻❧⬮䛧䛯┦Ᏻᐃᛶ䜔⤌⧊ไᚚ䛻䛴䛔䛶䛾◊✲άື䜢㏻䛧䛶᪂ᮦ

ᩱ䛾㛤Ⓨ䜢⾜䛳䛶䛔䜛䠊㻞㻜㻜㻥 ᖺ䛾◊✲άື䛿䠈௨ୗ䛾䜘䛖䛻ᴫᣓ䛥䜜䜛䠊㻌 㻌

㻝㻚㻌᪂つ☢ᛶᙧ≧グ᠈ྜ㔠ࡢ᥈⣴㻌

㻞㻜㻜㻢 ᖺ䠈ᡃ䚻䛿 㻺㼕㻯㼛㻹㼚㻵㼚 ྜ㔠䛜ᙉ☢ᛶẕ┦䛛䜙㠀☢ᛶ䝬䝹䝔䞁䝃䜲䝖┦䜈䛸ኚែ䛧䠈≉䛻☢ሙ䛾༳ຍ䛻 䜘䜚䠈ᩘ༑ᗘ䜒䛾ኚែ ᗘ䛾పୗ䛜ぢ䜙䜜䜛䛣䛸䜢☜ㄆ䛧䛯䠊䛥䜙䛻䠈䛒䜙䛛䛨䜑ṍ䜢௜୚䛧䛯ᮏྜ㔠༢⤖ᬗヨ

ᩱ䛻☢ሙ䜢༳ຍ䛩䜛䛣䛸䛻䜘䜚䠈䜋䜌᏶඲䛺ᙧ≧ᅇ᚟䛜ᚓ䜙䜜䜛஦䜢ୡ⏺䛻ඛ㥑䛡䛶ド᫂䛧䛯䠊㻌 㻞㻜㻜㻥 ᖺ䛿 㻲㼑㻹㼚 ⣔䛻ὀ┠䛧䛶᪂ྜ㔠䛾᥈⣴䜢⾜䛳䛯䛸䛣䜝䚸ᅗ 㻝 䛻♧䛩䜘䛖䛻 㻲㼑㻹㼚㻳㼍 ྜ㔠䛻䛚䛔䛶ᖖ☢ᛶẕ┦䛛䜙ᙉ

☢ᛶ┦䜈䛾䝬䝹䝔䞁䝃䜲䝖ኚែ䛜Ꮡᅾ䛩䜛䛣䛸䜢ぢฟ䛧䛯䚹䛣䛾ྜ㔠䛷䛿䚸☢ሙ䛾༳ຍ䛻䜘䜚䝬䝹䝔䞁䝃䜲䝖ኚ

ែ ᗘ䜢ୖ᪼䛥䛫䚸☢ሙㄏ㉳䝬䝹䝔䞁䝃䜲䝖ኚែ䜢⏕䛨䛥䛫䜛䛣䛸䛜ฟ᮶䜛䛣䛸䜢ぢฟ䛧䚸䛥䜙䛻 㻤䠰䛻䜘䜚⣙

㻙㻜㻚㻢䠂䛾⮬Ⓨṍ䜢⏕䛨䛥䛫䜛䛣䛸䛻ᡂຌ䛧䛯䚹䠄ᅗ 㻞䠅䛣䛾⌧㇟䛿䚸௒䜎䛷䛾 㻺㼕㻹㼚㻳㼍 ⣔䛻䛚䛡䜛཮ᬗ☢ṍ䜔 㻺㼕㻹㼚㻵㼚 ⣔䛻䛚䛡䜛☢ሙㄏ㉳㏫ኚែ䛸䛿␗䛺䜛➨䠏䛾☢Ẽㄏ㉳ṍ䛸ゝ䛘䜛䚹㻌

㻌 㻌

㻞㻚㻌࣓ࢱ☢ᛶᙧ≧グ᠈ྜ㔠ࡢ㹑㹎㹑↝⤖ᮦ㻌

㻌 㻺㼕㻹㼚㻵㼚 䜢ጞ䜑䛸䛧䛯䝯䝍☢ᛶᙧ≧グ᠈ྜ㔠䛿䚸☢ሙㄏ㉳㏫䝬䝹䝔䞁䝃䜲䝖ኚែ䛻䜘䜚グ᠈ᙧ≧䜢ᅇ᚟䛥䛫䜛 䛣䛸䛜ฟ᮶䜛䛯䜑ฟຊ䛸䛧䛶䛾኱䛝䛺ຊ䜢ᚓ䜛䛣䛸䛜ฟ᮶䜛䛯䜑ᗈ䛟◊✲䛜䛺䛥䜜䛶䛔䜛䠊䛧䛛䛧䚸⤖ᬗ⢏⏺䛜 㠀ᖖ䛻⬤ᙅ䛺䛯䜑஦ᐇୖ༢⤖ᬗ䛷䛾฼⏝䛻ไ⣙䛥䜜䚸ᐇ⏝䜢㜼䜣䛷䛔䜛䚹䛭䛣䛷䚸ᨺ㟁䝥䝷䝈䝬↝⤖䜢฼⏝

䛧䛯⢊ᮎ෬㔠䜢฼⏝䛧䛶ከ⤖ᬗᮦ䜢స〇䛧䚸䛭䛾ᙧ≧グ᠈䛚䜘䜃☢Ẽ≉ᛶ䜢ㄪᰝ䛧䛯䚹ᅗ䠏䛿䚸䜺䝇䜰䝖䝬䜲 䝈ἲ䛻䜘䜚స〇䛧䛯 㻺㼕㻯㼛㻹㼚㻿㼚 ⢊ᮎ䜢ཎᩱ䛻䚸䠯䠬䠯䜢฼⏝䛧䛶ᚓ䛯↝⤖య䛾ᅽ⦰ᛂຊ㻙ṍ⥺ᅗ䛷䛒䜛䚹ᙧ≧グ

᠈ྜ㔠≉᭷䛾䠯㻙䠯᭤⥺䛻䛚䛡䜛䝥䝷䝖䞊䛿♧䛥䛺䛔䜒䛾䛾⣙䠓䠂䛾◚᩿ṍ䜢♧䛧䚸ຍ⇕䛻䜘䜛᫂☜䛺ᙧ≧グ᠈

ᅗ 㻝㻌 㻌 㻲㼑㻹㼚㻳㼍 ⣔ᙧ≧グ᠈ྜ㔠䛾⇕☢໬᭤⥺㻌 㻌 㻌 㻌 㻌 㻌 㻌 ᅗ 㻞㻌 㻌 㻲㼑㻹㼚㻳㼍 ⣔ྜ㔠䛾☢Ẽṍ

ຠᯝ䜒☜ㄆ䛥䜜䛯䚹䜎䛯䚸ᐊ 䛷ண䜑 㻟㻚㻝䠂䛾ᅽ⦰ṍ䜢୚䛘䛯ヨᩱ䛻☢ሙ䜢༳ຍ䛧䛯䛸䛣䜝䚸ᅗ䠐䛻♧䛩䜘䛖䛻

⣙ 㻜㻚㻢䠂䛾☢ሙㄏ㉳ᙧ≧ᅇ᚟䛜☜ㄆ䛥䜜䛯䚹䛣䛾⤖ᯝ䛿䚸ᮏྜ㔠䛾ᐇ⏝໬䛻ᑐ䛧䛶䚸↝⤖ἲ䛾฼⏝䛿኱䛔䛻 ᮇᚅ䛷䛝䜛䛣䛸䜢♧䛧䛶䛔䜛䚹㻌

㻟㻟㻚㻌 ࢫࣆ࢚ࣥࣞࢡࢺࣟࢽࢡࢫᮦᩱ࡟㛵ࡍࡿ◊✲㻌

ḟୡ௦䛾୙᥹Ⓨᛶ䝯䝰䝸䛸䛧䛶ὀ┠䛥䜜䛶䛔䜛 㻹㻾㻭㻹 䛻䛚䛔䛶୰ᚰⓗ䛺ാ䛝䜢䛩䜛䛾䛜䝖䞁䝛䝹☢Ẽ᢬ᢠ 䠄㼀㻹㻾䠅⣲Ꮚ䛷䛒䜚䠈䛭䛾䝛䝑䜽䛸䛺䜛⣲ᮦ䛜䠈䝇䝢䞁䛾ྥ䛝䛻䜘䛳䛶䝖䞁䝛䝹㟁ὶ䛾᢬ᢠ䜢኱䛝䛟ኚ໬䛥䛫䜛䝝䞊 䝣䝯䝍䝹䠄㻴㻹䠅ᙉ☢ᛶయ䛷䛒䜛䠊ᡃ䚻䛿䠈㻯㼛 ᇶ䝩䜲䝇䝷䞊⣔ 㻴㻹 ྜ㔠䛾┦Ᏻᐃᛶ䠈つ๎䇷୙つ๎ኚែ ᗘ䠈䜻 䝳䝸䞊 ᗘ䠈㻴㻹 ᛶ䜢⥲ྜⓗ䛻ホ౯䛧䠈ᐇ⏝ⓗ䛻᭷ᮃ䛺ྜ㔠⣔䜢ᥦ᱌䛧䛶䛝䛯䠊ᮏᖺᗘ䛿䠈ᅗ䠑䠈䠒䛻♧䛩䜘䛖 䛻䝩䜲䝇䝷䞊ྜ㔠䛾䝩䝇䝖䝃䜲䝖䜢⨨᥮䛧䛯ሙྜ䛾ᙳ㡪䜢ㄪ䜉䜛䛯䜑䛻㻔㻺㼕㻘㻯㼛㻕㻞㻹㼚㻳㼍 ྜ㔠䜔㻔㻺㼕㻘㻯㼛㻕㻞㻹㼚㻭㼘 ྜ㔠 䜢୰ᚰ䛻ㄪᰝ䛧䛯䠊䛭䛾⤖ᯝ䚸㻯㼛㻞㻹㼚㻳㼍 䛾 㻯㼛 䜢 㻺㼕 䛷⨨᥮䛧㟁Ꮚ⃰ᗘ䜢ୖ䛢䛯ሙྜ䚸䠪䡅䛜䛚䜘䛭 㻝㻛㻟 䜋䛹⨨

᥮䛩䜛䜎䛷䛿୍⯡໬䛥䜜䛯䝇䝺䞊䝍䞊䝫䞊䝸䞁䜾᭤⥺䛻஌䜚䚸䛣䜜䛿➨୍ཎ⌮ィ⟬䛻䜘䜛⤖ᯝ䛸୍⮴䛩䜛䛣䛸䛜 ศ䛛䛳䛯䚹㻌

ᅗ䠏㻌 㻌 㻺㼕㻯㼛㻹㼚㻿㼚 ↝⤖ᮦ䛾ᅽ⦰ᛂຊ㻙ṍ᭤⥺㻌 㻌 㻌 㻌 㻌 㻌 㻌 ᅗ䠐㻌 㻌 㻺㼕㻯㼛㻹㼚㻿㼚 ↝⤖ᮦ䛾☢Ẽṍ

ᅗ䠑㻌 㻌 㻔㻺㼕㻘㻯㼛㻕㻞㻹㼚㻳㼍 ྜ㔠䛾つ๎ኚែⅬ䛸䜻䝳䝸䞊Ⅼ㻌 㻌 㻌 ᅗ䠒㻌 㻌 㻌 㻔㻺㼕㻘㻯㼛㻕㻞㻹㼚㻳㼍 ྜ㔠䛾⮬Ⓨ☢໬

࠙

࠙◊✲άືሗ࿌ࠚ ㉸⮫⏺ὶయ࣭཯ᛂ◊✲㒊

ᩍ ᤵ㸸ᶓᒣ༓᫛