siRffi cientを用いた遺伝子ノックダウン
マウス膝OAモデルにおける関節内Mmp13遺伝子複数回ノックダウンによる軟骨保護効果の検討
... siRNA の効果持続時間に関しては、本研究は少なくとも 1 週間持続した一方で、ラット椎 間板を用いた in vivo の研究では、ノックダウン効果は 24 週以上持続したと報告されてお り、対象組織によって siRNA の抑制効果持続時間は大きな差がある。この要因としては、 ...
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た遺伝子を切断し修復時に微小なエラーを生じさせて機能を破壊するノックアウトと 外部か ら任意の配列を挿入して事前設計した通りの機能を与えるノックインに大別される 外来遺伝 子をもった動物の作成や遺伝子治療には後者の技術が必要である しかし 動物胚への遺伝子ノックインには マイクロインジェクション法
... 一本鎖 DNA ウイルス。ヒトへの感染性を有するが、明らかな病原性は示さない。また、アデ ノウイルスと共感染しない限り、自己複製しない。野生型アデノ随伴ウイルスは、ヒトゲノム DNA の特定領域(AAVS1)に挿入される特性を持つが、研究用・臨床用に用いられるベクター は、遺伝子改変によりその性質を欠失している。ウイルスの殻（カプシド）のタイプ（血清型） ...
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た分子の過剰発現の実験においては アディポネクチンによる細胞内カルシウム濃度上昇には関わらないことが観察され またこの分子の遺伝子ノックダウンの実験においては アディポネクチンによる AMPK 活性化が有意に抑制されるのが認められた 3. 研究発表等 雑誌論文 計 5 件 ( 掲載済み - 査読有り
... 国 民 と の 科 学 ･ 技 術 対 話 の実施状況 読 売 テクノ・フォーラム科 学 講 演 会 ２０１１年 度 ゴールド・メダル賞 受 賞 記 念 講 演 会 科 学 の力 で、 日 本 を元 気 に 「メタボ・糖尿病の根本治療薬開発に挑む」 東京 日本青年館 中ホール 一般人 。また 自ら企画して高校生の東大見学会の際に、東大内の会議室にて高校生向けに発表し、質疑応答時間を十分 ...
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アルツハイマー病患者におけるcDNAサブトラクション法を用いた脳部位特異的遺伝子発現の解析
... 【図 9】に示すように、P9TLDR は C 末端側配列に NAV1 及び NEK5 と高い相同性を有 する部分が存在する。NAV1 は、主に神経系で発現し、C. elegans ホモログは軸索ガイダンス を誘導することが報告されている（Ref. 87）。マウスにおいて、神経発生段階にて発現し、神経 細胞の移入（migration）において微小管と結合し（Ref. 88）、また、ProteinArray ...
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アルツハイマー病患者におけるcDNAサブトラクション法を用いた脳部位特異的遺伝子発現の解析
... いても同様の傾向が検出された。培養神経芽腫細胞において MAP1B の発現をノックダウンしたところ、 neurite outgrowth が抑制され、生存細胞数が減少した。一方、MAP ファミリーに属する MAP2 は、MAP1B と相反し、AD／後頭葉皮質— 生理的老化／後頭葉皮質のサブトラクションで AD 後頭葉皮質にて発現が ...
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トランスジェニック動物を用いた遺伝子突然変異試験の開発 改良 ( ) トランスジェニック動物遺伝子突然変異試験は, 突然変異検出用のレポーター遺伝子をゲノム中に導入した遺伝子組換えマウスやラットを使用する in vivo 遺伝子突然変異試験である. 小核試験が染色体異常誘発性を検出
... gpt 遺伝子をレポーターに用いた gpt assay であり，点突然変異（塩基 置換とフレームシフト）を検出する．培地に添加された 6-thioguanine は gpt 遺伝子がコ ードする guanine phosphoribosyltransferase によって DNA に取り込まれる形になり毒性を 示すため，gpt ...
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Ptf1aおよびAtoh1遺伝子改変マウスを用いた蝸牛神経核神経細胞の発生の研究
... とが見いだされた。Ptf1a 遺伝子座への Cre ノックインマウスを用いて、Cre/loxP システムにより遺 伝学的に細胞系譜を標識したところ、蝸牛神経核の各種抑制性神経細胞（GABA およびグリシン作 動性神経細胞）は全て Ptf1a を発現する神経上皮（Ptf1a ドメイン）に由来すること、加えて Atoh1-Cre ...
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iPS細胞を用いた慢性骨髄単球性白血病の原因遺伝子の探索
... ADAMTS4 のノックダウンにより細胞周期に入っている CMMoL-iPS 細胞が減少 する CMMoL-iPS 細胞において ADAMTS4 のノックダウンを行い、iPS 細胞と血球分化後 の HPC の性質を調べた。その過程で iPS 細胞におけるトランスダクションは、細胞株と 比較して感染効率が非常に低いことが分かった（図 ...
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コスメトロジー研究報告 Vol.19, 実験 HAS 発現の定量トータルRNA はプールされたラット組織から抽出した cdnaの合成およびrt-pcrは過去の文献に記載された方法を用いた PCR 増幅に用いたプライマーの塩基配列はラットのものを用い 遺伝子バンクからの配列を元に合成し
... さらにアデノウイルスをもちいて、2型および6型サブ タイプの過大発現をおこしたところ、2型サブタイプの過 大発現においてはヒアルロン酸産生は上昇しなかったが、 6型サブタイプの過大発現によってヒアルロン酸産生が顕 著に増加することがわかった。以上の結果から、血管平滑 筋細胞に発現する多数のアデニル酸シクラーゼサブタイプ ...
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資料 1-1 ゲノム編集技術を用いた遺伝子治療 製品等のリスク評価や品質評価の考え方 第 29 回科学委員会
... 遺伝子修復効率は依然低く、オフターゲット効果への懸念もあることから、その臨床応用は現時点では遺伝子破 壊または遺伝子導入に限定されている。オフターゲット効果については、多数認められると報告された論文 （Schaefer KA et al, Nat Methods, 2017）が撤回になる等、評価は定まっておらず、サイエンスの更なる進展が求め ...
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軟骨特異的遺伝子破壊マウスを用いた変形性関節症におけるスフィンゴ糖脂質の機能解析
... ファミリータンパク質のなかで機能未知であっ た TRIM40 の解析を行い、 マウスにおいて、 正常胃 ・ 小腸及び大腸に高発現していること、 ユビキチン 様タンパク質である Nedd8 と結合することを明らかにした。TRIM40 は、NF- B シグナル伝達経路にお いて IKK 複合体(IKK )と相互作用して IKK の Nedd8 ...
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定 2) 糖鎖関連遺伝子に対するハエRNAiノックダウン体の網羅的作製と解析 3) 解析結果の哺乳類細胞での検討の3つの部分から構成されるが 2) が研究の中心となっている 1) ショウジョウバエ糖鎖関連遺伝子の網羅的単離と同定我々は 160 種にのぼるヒト糖転移酵素遺伝子や糖ヌクレオチド輸送体の配
... れていることが示され、線虫や植物に比較して、ハエでは、遺伝子のより特異的なノック ダウンが可能になることが明らかになった。また、一部の糖転移酵素のノックダウン体で は、その生産物である糖鎖構造の特異的減少が認められ、本システムが糖鎖機能解析に適 することが確認された。 ...
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遺伝子プローブAPEX2を用いたマウス心臓における生着ヒトiPS細胞由来心筋細胞のナノ構造解析
... （論文内容の要旨） 多くの動物実験でヒト iPS 細胞由来心筋細胞の心臓移植の有用性が示されて いる。しかしながら、移植後生着したヒト iPS 細胞由来心筋細胞のナノ構造を 電子顕微鏡で解析した報告はない。この理由の 1 つに、電子顕微鏡画像は倍率 が非常に高く、どの細胞が移植細胞であるかを証明するのが困難であることが ...
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軟骨特異的遺伝子破壊マウスを用いた変形性関節症におけるスフィンゴ糖脂質の機能解析
... 近年、 糖鎖生物学的アプローチによる重要な生命現象 （老化、 癌化等） の解析が行われている。 スフィンゴ糖脂質（ Glycosphingolipids; 以下 GSLs ）は脊椎動物の全身の細胞膜上に広く存在し、 膜を介するシグナル伝達の調節や、 細胞 - 細胞間・ 細胞 - 細胞外マトリックス間相互作用の媒介など 多様な役割を担っている。 大部分の GSLs ...
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網羅的遺伝子解析手法を用いたTGF-βのRANKL誘導性破骨細胞分化に対する作用機序の解明
... NfatC1 遺伝子の発現によって促進することから、 NfatC1 遺伝子におけるエピジェネティックな修飾変化を解析した。RANKL 刺激後の FAIREseq のシグナル量は TGF- 刺激で増加した。 Smad シグナル 阻害下では、NfatC1 遺伝子への c-Fos の結合シグナル量が減少した。また 逆に c-Fos ...
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た遺伝子については関連解析を行い統合失調症への 関わりを検討する 盻変異マウスを用いた解析 Mohnら(1999) により NMDA受容体のコアのサブユニットであるNR１受 容体の発現が正常の５ 程度に低下したノックダウ ンマウスでは運動亢進や社会行動の異常など 統合 失調症様症状を呈すること しか
... 衾）NMDA受容体NR１遺伝子（GRIN1）: GRIN１の発現 低下が統合失調症の死後脳で観察されている。また GRIN１の発現低下を来したマウスでは統合失調症様 の症状がみられ、それが統合失調症治療薬で軽減する ことが報告されている。そこで統合失調症における GRIN１の転写異常を考え、ラットパラログ（Grin１） で同定されているプロモーター領域に対応するGRIN ...
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分離ヒトアデノウイルスの遺伝子学的型別法を用いた同定法の確立
... 手足口病は、原因ウイルスが複数あり、年によって流 行する型が異なる。また、手足口病は、重症化や死亡 例があるため、ウイルスを検出、型別、解析することは 公衆衛生上、きわめて重要である。感染症発生動向調 査事業を通して得られた検出ウイルスの情報は、国内 での疫学解析のみならず、海外で進められているワク チン開発にも貴重な情報になると思われる。 ...
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ダイズさび病抵抗性遺伝子 Rpp の準同質遺伝子系統を用いたダイズ宿主抵抗性の解析
... エネルギー及び環境情報のセンシング、代謝、酸化、シグナル伝達、転写関連、防御の7つのカテゴリーに 類別できた。このうち、防御クラス遺伝子と類別された遺伝子のほとんどが、ダイズのファイトアレキシン であるグリセオリンの生合成を先導するフェニルプロパノイド経路とイソフラボノイド経路に関連してい ...
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染色体工学技術を用いたがん抑制遺伝子の同定
... 発現亢進が認められた 58） ．また，ノックアウトマ ウスの解析から後ろ足の形成に関与している遺 伝子として知られていた 59,60） ．さらに，最近RAS の抑制因子およびp53の活性化因子であることが 明らかにされ，大腸がん，前立腺がん，膀胱が ん，肺がん，胃がん，食道がん，口腔がん，悪性 黒色腫など様々なヒトがん組織でPITX1の高頻 度な発現低下が認められたことから，発がん過程 ...
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ホヤにおける新規母性因子特異的ノックダウン法によるmRNAの局在機構の解明
... mRNA を局在させる分子メカニズムについ てはほとんど分かっていないのが現状であ った。その理由の 1 つは、ホヤにおいては母 性因子研究にとって中心的な技術である遺 伝学的手法が発達しておらず、母性因子の機 能を阻害することが難しいことであった。 私の主宰する研究室では、ホヤの一種であ るカタユウレイボヤに、トランスジェニック 系統樹立や突然変異体作製方法などの遺伝 ...
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