1 ●S-バイオ事業部 マーケティング・営業部 〒140-0002 東京都品川区東品川2-5-8 天王洲パークサイドビル TEL.03-5462-4831 FAX.03-5462-4835 研究部・製造部（神戸） 〒651-2241 神戸市西区室谷1-1-5 TEL.078-992-3949 FAX.078-992-3919 201609 3K 製品に関するお問い合わせはS-バイオ事業部マーケティング・営業部 TEL.03-5462-4831 FAX.03-5462-4835 E-mail [email protected] 住友ベークライト株式会社ホームページ
http://www.sumibe.co.jp/
※商品の規格・概観・その他を改良するため、予告なく変更することがありますので ご了承下さい。 販売店バイオ関連製品総合カタログ
バ イ オ 関 連 製 品 総 合 カ タ ロ グ三次元培養関連製品
三次元培養用プレート ………… PrimeSurface
®……… 2
三次元培養用プレート ………… Cell-able
®……… 8
細胞積層培養キット ……… CellFeuille
®……… 11
高度品質管理製品
スミロンスーパークオリティ ……… 12
タンパク質低吸着製品
プロテオセーブ
®SS ……… 14
糖鎖関連製品
糖鎖精製ラベル化キット BlotGlyco
®……… 16
O 型糖鎖サンプル調製キット BlotGlyco
®……… 22
EZGlyco
™抗体糖鎖分析キット ……… 24
糖鎖分析用スタンダード ……… 25
糖鎖受託解析サービス ……… 27
糖鎖固定化アレイ ……… 30
リガンドバインディングアッセイ
ELISA 用プレート ……… 32
関連製品
リガンドバインディングアッセイ製品 … アビジンプレート／活性エステルプレートキット／ ……… 35
アフィニティビーズ／グリコサミノグリカン固定化アレイ
細胞培養関連製品
細胞培養用フラスコ ……… 38
細胞培養用シャーレ ……… 39
細胞培養用マルチプレート ……… 40
細胞外マトリックスコート製品 … セルタイトシリーズ ……… 42
その他 細胞培養製品 ……… セルデスク／セルスクレーパー／ iMatrix-511 ／ ……… 45
開発製品のご紹介 ……… 大量培養用ピールオフ培養容器／ピールオフフラスコ／ ……… 47
クリアボトムプレート／特殊用途ピペット
遠沈管 / コニカル関連製品
遠沈管 ……… PP 製半透明タイプ／ TPX 製透明タイプ ……… 48
コニカルチューブ ……… ステムフル
®／スナップコニカル ……… 50
ピペット・チップ関連製品
ディスポーザブルピペット ……… 52
ピペット関連製品 ……… アスピレーションピペット ……… 54
チップ関連製品 ……… P チップ／試薬リザーバー ……… 55
凍結保存関連製品
セラムチューブ ……… 56
セラムチューブ関連製品 ……… 58
各種アレイ/ 特注製品
マイクロアレイ関連製品 ……… 59
マイクロフルイディクス ………… カスタムメイドチップ／汎用流路チップ／ ……… 60
カスタムメイド ……… 61
その他理化学製品
微生物／臨床検査関連製品 ……… 62
サンプル保存・希釈用プレート／標本スライド染色・洗浄用ディスポーザブル容器 ……… 63
索引
……… 64
CONTENTS
目次
世 界 中 の お 客 様と共 に 、
バイオ医 薬・再 生 医 療・診 断 検 査 の 分 野 に
新しい 価 値を創って い きた い 。
●
S - B I O ®
は 私たち の 熱 い 想 いと
お 客 様 の 信 頼をの せ た
ブランドです 。
マーケティング・営業部
本社（東京）
Vaupell Holdings, Inc. (USA)
秋田住友ベーク株式会社
研究部・製造部（神戸）
は住友ベークライト株式会社の登録商標です。また、本製品は研究用です。
、
S-
バイオ事業部
S-BIO
®SUMILON
®S-BIO®
のコアテクノロジー
●
ポリマー設計と合成
●
プラスチック加工と表面処理
●
生体分子解析と評価
（2015年よりロゴマークが新しくなりました。）S-BIO®
のサブブランド
SUMILON®
国内で生産しているピペット、フラスコ、凍結保存チューブなどのプラスチック製ラボウェアのブランドです。
日本のお客様に３０年以上ご愛顧いただいております。
これからも商品ラインアップ拡大と品質向上を継続していきます。
2 3
三次元培養関連製品
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品番 品名 ウェル数 ウェル底形状 ウェル容量 包装 個/包・個/ケース 参考価格（円） 単価 ケース価格 MS-9096M PrimeSurface®プレート96M 96 紡錘底 0.2mL 1/包・20/ケース 2,000（税抜） 40,000（税抜） 品番 品名 ウェル数 ウェル底形状 ウェル容量 包装 個/包・個/ケース 参考価格（円） 単価 ケース価格 MS-9384U PrimeSurface®プレート384U 384 U底 0.1mL 1/包・20/ケース 2,500（税抜） 50,000（税抜） MS-9384W PrimeSurface®プレート384U白色 384 U底 0.1mL 1/包・20/ケース 3,125（税抜） 62,500（税抜）品番 品名 ウェル数 ウェル底形状 ウェル容量 包装 個/包・個/ケース 参考価格（円） 単価 ケース価格 MS-9096V PrimeSurface®プレート96V 96 V底 0.3mL 1/包・20/ケース 2,500（税抜） 50,000（税抜）
PrimeSurface
®
96M プレート
PrimeSurface
®
384U プレート
PrimeSurface
®
96V プレート
PrimeSurface
®
96U 白色プレート
【培養条件】 ◆使用細胞 ：ヒトiPS細胞 201B7* 京都大学およびiPSアカデミアジャパンの使用許諾を得て使用 ◆播種数 ：9,000 cells/well ◆培地 ：DMEM/F12 + 20%KSR + 1% NEAA + 2mM L-グルタミン + 0.1mM 2-ME + 30μm Y-27632 〈参考文献〉： Induction of pluripotentstem cells from adult human fibroblasts by defined factors
Takahashi K et al. Cell, 2007 Nov 30; 131(5):861-72 MS-9096U、MS-9096M及びMS-9096Vの ウェル形状及びウェル容量比較
特長
特長
特長
■幹細胞の高効率な凝集塊形成が可能です。 ■明瞭な顕微鏡観察が可能です。 ■培養液の低減が可能です。 ■サイズバラつきの小さい凝集塊を形成できます。 ■細胞アッセイに好適な容量100μL 以上を確保しています。 ■白色プレートは ATP などの 細 胞アッセイに好 適 です。 ■SBS 規格に対応したプレート寸法となります。 ■凝集しにくい細胞でも効率良く凝集塊が形成可能です。 保管温度：室温 保管温度：室温 保管温度：室温 保管温度：室温 品番 品名 ウェル数 ウェル底形状 ウェル容量 包装 個/包・個/ケース 参考価格（円） 単価 ケース価格 MS-9096W PrimeSurface®プレート96U白色 96 U底 0.3mL 1/包・20/ケース 2,000（税抜） 40,000（税抜）三次元培養関連製品
三次元培養関連製品
■
PrimeSurface
®PrimeSurface
®は超親水処理により、細胞の吸着が抑えられます。
幹細胞の凝集塊形成および分化誘導に好適です。
三次元モデルによる薬効試験・創薬スクリーニングに好適です。
三次元培養によるハイスループットスクリーニング（HTS）をご提供
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無菌生産 放射線滅菌済 無菌生産 放射線滅菌済 無菌生産 放射線滅菌済 無菌生産 放射線滅菌済特長
■1 枚のプレートで細胞凝集塊形成と発光測定を行うことが可能です。 〈参考文献〉Evaluation of novel high-throughput embryonic stem cell tests with new molecular markers for screening embryotoxic chemicals in vitro, Suzuki N, Ando S, Yamashita N, Horie N, Saito K, Toxicological Sciences. 2011 Dec;124(2):460-71. Epub 2011 Sep 29.
PrimeSurface
®
96U プレート
特長
■96 ウェルプレートに細胞を播種、静置培養するだけで、簡単に細胞の三 次元モデルが得られます。 ■特別な処理や準備なく、均一サイズの細胞凝集塊が得られます。 ■基材表面と化学的に結合した表面処理の為、処理剤の溶出がありません。 ■溶出物が無いため、基材の影響が抑えられます。分化研究、刺激応答研究 など外部因子に敏感な研究の安定性に寄与します。 保管温度：室温 放射線滅菌済 無菌生産 液面5mm 約125µl 約100µl MS-9096U MS-9096M MS-9096V ウェル容量 65µl 約 約 200µl 約300µl 約300µl 品番 品名 ウェル数 ウェル底形状 ウェル容量 包装 個/包・個/ケース 参考価格（円） 単価 ケース価格 MS-9096U PrimeSurface®プレート96U 96 U底 0.3mL 1/包・20/ケース 1,500（税抜） 30,000（税抜）ウェルサイズにつきましては 41 ページをご覧ください。 ウェルサイズにつきましては 41 ページをご覧ください。 ウェルサイズにつきましては 41 ページをご覧ください。 ウェルサイズにつきましては 41 ページをご覧ください。 ウェルサイズにつきましては 41 ページをご覧ください。
PrimeSurface
®384 白色プレートは、
スクリーニング試験などの大量サンプルの解析に好適です。
分注器：Freedom EVO® ， プレートリーダー： Infinite® 200 PRO 写真提供 テカンジャパン株式会社様スフェロイド培養から化学発光測定まで同じウェルで実験可能
アッセイステップの削減 ＆ スピードアップ
ⅰ）腫瘍細胞と候補化合物を分注
ⅱ）分析用試薬を分注
ⅲ）化学発光測定
Primesurface®を用いた細胞凝集塊の形成過程につきまし ては、こちらのQRコードまたはURLにアクセスいただき、 動画をご覧下さい。URL: http://www.sumibe.co.jp/product/s-bio
/primesurface-proteo/primesurface-96u
播種1日目 播種4日目 200μm 200μm 【ヒトiPS細胞の分化誘導に関する参考文献】 Generation of retinal ganglion cells with functional axons from human induced pluripotent stem cells Taku Tanaka1*, Tadashi Yokoi1*, Fuminobu Tamalu2, Shu-Ichi Watanabe2, Sachiko Nishina1 & Noriyuki Azuma11 Department of Ophthalmology and Laboratory for Visual Science, National Centre for Child Health and Development, Tokyo, Japan, 2 Department of Physiology, Faculty of Medicine, Saitama Medical University, Saitama, Japan.
（出典）Tanaka, T., Yokoi, T., Tamalu, F., Watanabe, S., Nishina, S., and Azuma, N. (2015). Sci Rep 5, 8344.
Figure 1 | Schematic diagram of the protocol for self-induction of retinal ganglion cells. This protocol consisted of a period of suspension culture (3D) followed by a period of adhesive culture (2D) and resulted in observation of axonal elongation from retinal ganglion cells (RGCs) from human iPSCs starting within 30 days. Two basal media, retinal differentiation medium (RDM) and retinal maturation medium (RDM) were used.
Significant morphological changes occurred after a medium change fromRDMto serum-freeRMMon D18, at which point optic vesicles (OVs) appeared to extrude from the cultured cell aggregates. Beginning with the start of adhesive culture on D26–29, axons grew out radially from the mass of newRGCbodies.
Phase contrast micrographs were taken on D6, D18, D24, and D30 and are shown in sequence from left to right. Scale bar, 500 mm.
三次元培養関連製品
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PrimeSurface
®は、癌細胞スフェロイドを各ウェルで再現良く作成します。
in vivo に近く、バラつきの小さな培養環境をご提供いたします。
凝集力の弱い細胞でも特殊なウェル形状によって
スフェロイドの形成をサポート
抗がん剤 研究開発への応用
プレート : PrimeSurface® MS-9096U 播種数 : 1x103 cells/well 培養条件 : MEM + 10%FBS,37℃ ,5%CO2 細胞種 : Hela 細胞 Ｉn house data 細胞 : MDA-MB-468 ヒト乳がん細胞株 播種数 : 2x103 cells/well 培地 : RPMI +10%FBS ( 37℃ ,5%CO2 ) 培養期間 : 7 日間 プレート ： PrimeSurface® MS-9096U 播種数 ： 2x103 cells/well 培養条件 ： RPMI + 10%FBS， 37℃，5%COs 細胞種 ： MDA-MB-231，BT-549，MCF-7（ 3 種ともにヒト乳がん細胞） データ提供 近畿大学医学部ゲノム生物学教室 西尾和人 先生 データ提供 近畿大学医学部ゲノム生物学教室 西尾和人 先生 データ提供 近畿大学医学部ゲノム生物学教室 西尾和人 先生各種の腫瘍細胞で良好なスフェロイド形成を確認
腫瘍細胞の凝集塊形成能に応じてウェル形状のご選択を。
スフェロイド形成の観察（48 時間）
スフェロイドの形成の観察（7 日間）
0Hrs
12Hrs
36Hrs
24Hrs
48Hrs
bar:200µmbar:200µm
ウェル容量
高さ：5mm
約125µl
65µl
約100µl
約
約
200µl
約300µl
約300µl
bar:200µm
Ｕ底
MS-9096U
MS-9096Ｍ
紡錘底
MS-9096Ｖ
Ｖ底
【培養方法】 : 単層培養 vs スフェロイド（PrimeSurface
®）
【細胞】
:HepG2 （ヒト肝臓がん細胞株）
【抗がん剤】 :5-FU（S-Fluorouracil） vs TPZ （Tirapazamine ）
【評価項目】 :ATP 活性測定を用いたバイアビリティアッセイ
PrimeSurface
®では低酸素のスフェロイド微小環境を構築可能です。これにより、生体内に近い環境下での薬効試験が可能です。
参考文献の情報は弊社ホームページ（http://www.sumibe.co.jp/product/s-bio/index.html）をご参照下さい。
5-FU では単層培養でより強い薬効を示す
のに対して、TPZ では，スフェロイド培養
でより強い薬効を示した。
抗がん剤薬効評価の薬効モードの比較（作用機序の相違）
低酸素プローブ（Lox-1）を用いたハイポキシアの観察（HePG2）
抗がん剤 5-FU と TPZ の作用機序の相違：IC
50値の比較
TPZ
ハイポキシアによって誘発され、
DNA に障害をきたす抗がん剤
5-FU
従来の細胞増殖阻害剤
0
20
40
60
80
100
120
140
160
1
100
TPZ (nM)
Viability (%of control)
10000
1000000
TPZ
0
20
40
60
80
100
120
140
160
1
100
5-FU (nM)
Viability (%of control)
10000
1000000
5-FU
0
20
40
60
80
100
120
140
160
1
100
TPZ (nM)
Viability (%of control)
10000
1000000
TPZ
0
20
40
60
80
100
120
140
160
1
100
5-FU (nM)
Viability (%of control)
10000
1000000
5-FU
0 20 40 60 80 100 120 140 160 1 100 10000 1000000TPZ
0 20 40 60 80 100 120 140 160 1 100 10000 10000005-FU
スフェロイド培養
単層培養
200μm
200μm
：単層培養 ：スフェロイド培養HepG2 HeLa HepG2 HeLa
600 500 400 300 200 100 0 5-FU IC50 （ μ M） TPZ
6 7
三次元培養関連製品
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PrimeSurface
®
PrimeSurface
®
96 スリットウェルプレート
保管温度：室温 保管温度：室温 放射線滅菌済 無菌生産 放射線滅菌済 無菌生産 品番 品名 サイズ 培養面積 ウェル容量 包装 個/包・個/ケース 参考価格（円） 単価 ケース価格 MS-9035X PrimeSurface® シャーレ35mm 外寸（35）φ×14（H）mm 9c㎡ — 5/包・50/ケース 180（税抜） 9,000（税抜） MS-9060X PrimeSurface® シャーレ60mm 外寸（60）φ×15（H）mm 21c㎡ — 10/包・100/ケース 400（税抜） 40,000（税抜） MS-9090X PrimeSurface® シャーレ90mm 外寸（90）φ×20（H）mm 57c㎡ — 10/包・50/ケース 750（税抜） 37,500（税抜） MS-9024X PrimeSurface® プレート24F 24ウェル・平底 1.8c㎡ 3.4mL 1/包・10/ケース 1,200（税抜） 12,000（税抜） 品番 品名 ウェル数 ウェル形状 個/包・個/ケース包装 参考価格（円） 単価 ケース価格 MS-9096S PrimeSurface®スリットウェルプレート 96well 紡錘底 1/包・15/ケース 4,500（税抜） 67,500（税抜） 播種数 ：1×104cell/mL 、 2mL/35φシャーレ 培地 ：DMEM,FCS10％ 培養日数 ：３日間 実験 ：３日間培養後、 接着細胞カウント [ ヒト肝癌（Hep G2）細胞培養 ] スリットウェルプレートを用いた細胞凝集塊の形成と培地交換のイメージ 【マウス ES 細胞（BRC）細胞培養】 播種数：2.1× 104cells /35 φシャーレ 培養日数：5 日間 （MACS 使用せず）細胞培養用ポリスチレン製シャーレ
細胞は敷石状に接着伸展し増殖PrimeSurface
® 基材への細胞接着はなく、完全に浮遊した状態 で、且つ細胞同士の相互作用により凝集塊を形 成。PrimeSurface
®シャーレ 35mm
細胞同士の相互作用により球状の凝集塊を形成 している他社細胞低吸着シャーレ 35mm
サイズの小さな凝集塊を 1 つだけ形成しているPetri dish 35mm
器材へ細胞が接着し、一部死滅している特長
特長
■基材からの刺激が少ないです。 ①ＥＳ細胞分化研究 ②マクロファージや樹状細胞の刺激応答研究 ③上皮系細胞の三次元培養 （機能維持・細胞形態観察） ④細胞間相互作用の研究 ⑤神経幹細胞分化研究 ■タンパク質・ペプチドの吸収を防止します。 添加物の活性維持 細胞産生物の回収 ■細胞凝集塊の形成時や培養時に、手間がかかる培地交換作業を簡便に行える ようにした９６ウェルプレートです。 ■各ウェルの上部に培地のみが出入りできる隙間（スリット）を設けた新構造です。 ■細胞凝集塊を各ウェルに保持したまま、すべてのウェルの培地を 1 か所から吸引、 分注することが可能です。 ■本製品は国立研究開発法人日本医療研究開発機構（AMED）「再生医療実現拠点 ネットワークプログラム」の支援により開発されました。 35,000 30,000 25,000 20,000 15,000 10,000 5,000 接着細胞数 Hep G2細胞接着性 PrimeSurface®細胞培養用 シャーレ シャーレ浮遊培養用 01
2
3
4
細胞分散液をスリットの位置より 下まで分注します。 培養により、各ウェルに凝集塊が形成されます。 プレートのコーナーから培地を注ぐと すべてのウェルに培地が充填されます。 少し傾けたプレートのコーナーから培地を吸引すると、 すべてのウェルの培地を吸引できます。 プレートのコーナーに ピペットの先端をつけます。 培地をゆっくりと吸引します。 培地を吸引しながら 少しずつプレートを傾けます。 凝集塊にウェル内残したまま 培地が吸引されます。 使用方法が３分でわかる動画をＨＰ上で公開三次元培養関連製品
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ヒト初代肝細胞の CYP3A4 ベース活性および Rifampicin による誘導活性比較
製造元・データ提供： ■１ウェル内に多数（96 ウェルプレートで 800 個 / ウェル、384 ウェルプレートで 250 個 / ウェル）のスフェロイドを形成させることが可能です。 ■ウェル内の多数のスフェロイドにより測定値が平均化されるため、ウェル間のバラつきを低減することが可能です。 ■スフェロイドが底面に接着しているため、蛍光プローブ染色や免疫染色など容易に行うことが可能です。 ■初代肝細胞培養には専用培地（10 ページ）があり、同プレートと組み合わせることで長期間の培養が可能です。■
単層培養では急速に代謝および誘導活性が消失するのに対して、Cell-able
®を用いたスフェロイド培養では
長期間活性を維持することができた。
■
大量の均質なスフェロイドと多重蛍光染色によるハイコンテンツアッセイを組み合わせることにより、
従来より予測精度の高い肝毒性評価が可能です。
Cell-able®6b Hydrox testosterone pmole/10
6cells/min
70
60
50
40
30
20
10
0
単層培養 ヒト初代肝細胞播種5日目 Celi-able®プレートの培養表面 細胞接着領域（円内） 細胞秘非接着領域（円外）day7 day14 day21
各バイオマーカーの蛍光染色イメージング解析
ImageXpress® Micro XL System and MetaXpress® Softwear (Molecular Devices)
専用培地
6b Hydrox testosterone pmole/10
6cells/min
Comparison of four kinds of medium
Successive CYP3A4 basal activity on Cell-able
day7 day14 day21
A社品
B社品
C社品
20.00
18.00
16.00
14.00
12.00
10.00
8.00
6.00
4.00
2.00
0.00
Cell-able
®
保管温度：冷蔵（4℃）特長
プレートの概要
■ Cell-able
®と単層培養の比較
■
細胞接着表面がアレイ状に配置されたマルチウェルプレートです。
■
細胞を播種するだけで簡単に１ウェル内に均一なサイズの多数のスフェロイドを形成させることが可能です。
■
肝細胞での薬物動態研究や毒性研究、心筋細胞での毒性研究、がん細胞での薬効試験に、
三次元培養細胞による種々研究に好適です。
■イメージングによる薬剤性肝障害 (DILI: Drug Induced Liver Injury) 予測試験
100µm細胞 接着領域（円内）
細胞 非接着領域（円外）
Cell-able
®プレートの培養表面
ヒト初代肝細胞播種5日目
キメラマウス由来ヒト新鮮肝細胞（PXB-cells®,) を Cell-able® に播種後 10 日目の電子顕微鏡写真。 3T3 Swiss albino との共培養。■ Cell-able
®上で培養した新鮮ヒト肝細胞スフェロイドの電子顕微鏡写真
B
A
A
B
核
肝微小構造の再構築が観察された。
フィーダー細胞
ディッセ腔様構造
ミトコンドリア
肝細胞
デスモゾーム
デスモゾーム
粗面小胞体
毛細胆管様構造
B
A
A
B
核
フィーダー細胞
ディッセ腔様構造
ミトコンドリア
肝細胞
デスモゾーム
デスモゾーム
粗面小胞体
毛細胆管様構造
旭川医科大学・西川祐司教授監修■
毛細胆管、微小胆管、接着帯構造やフィーダー細胞との間にディッセ腔様構造など
肝細胞に認められる微小構造の再構築が確認された。（肝細胞播種後１０日目）
10 11
三次元培養関連製品
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品番 品名 仕様 個/包・個/ケース包装 参考価格（円） 単価 ケース価格 BS-9000CM RM-101 肝細胞用専用培地（100ml） 1/包・1/ケース 20,000（税抜） 20,000（税抜） BS-9001CM RM-101 肝細胞用専用培地（200ml） 1/包・1/ケース 30,000（税抜） 30,000（税抜） 品番 品名 仕様 包装 個/包・個/ケース 参考価格（円） 単価 ケース価格 BS-9096CK BP-96-R800 96wellプレート（黒クリアボトム） 800circles/well 1/包・1/ケース 28,000（税抜） 28,000（税抜） BS-9384CK BP384-R250 384wellプレート（黒クリアボトム） 250circles/well 1/包・1/ケース 28,000（税抜） 28,000（税抜） BS-9096FK BP-96-H400 96wellプレート（黒クリアボトム ハーフウェルタイプ） 800circles/well 1/包・1/ケース 28,000（税抜） 28,000（税抜） BS-9096C CP-96-R800 96wellプレート 800circles/well 1/包・1/ケース 26,000（税抜） 26,000（税抜） 受注生産 BS-9048C CP-48 48wellプレート 1,600circles/well 1/包・1/ケース 26,000（税抜） 26,000（税抜） BS-9024C CP-24 24wellプレート 4,500circles/well 1/包・1/ケース 26,000（税抜） 26,000（税抜） BS-9012C CP-12 12wellプレート9,000circles/well 1/包・1/ケース 26,000（税抜） 26,000（税抜） 受注生産 BS-9006C CP-6 6wellプレート 23,000circles/well 1/包・1/ケース 26,000（税抜） 26,000（税抜） 受注生産 BS-9096CO CP-96-H400 96wellプレート 400circles/well 1/包・1/ケース 26,000（税抜） 26,000（税抜） 受注生産 BS-9384CO CP-384-R250 384wellプレート 250circles/well 1/包・1/ケース 26,000（税抜） 26,000（税抜） 受注生産 BS-9000CG GP-12 21mm CoverGlass 9,000circles/well 1/包・1/ケース 12,000（税抜） 12,000（税抜） 無菌生産 放射線滅菌済 保管温度：冷蔵（4℃） 保管温度：冷凍（-80℃） 品番 品名 内容 参考価格（円） BS-X5913 細胞積層培養キット CellFeuille® 溶液A（4.4mL）、溶液B（25mL）、溶液C（8mL）、洗浄液（60mL）、 ステムフル®（5本）、プロテオセーブ® SS（5本） 70,000（税抜）三次元培養関連製品
細胞積層培養キット
■
CellFeuille
®CellFeuille
®は細胞積層化技術により構築された生体組織モデルを
作製するツールです。
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特長
■
細胞積層化技術により生体組織モデルが構築できます。
■
プロトコルが簡単であり、基本的な細胞培養操作だけで実施可能です。
■
細胞積層化プロトコルを異なる細胞を使って繰り返すことにより、異種細胞の積層も可能です。( 細胞積層事例（2）)
細胞積層事例
細胞積層化技術の概要
（１）ヒト線維芽細胞（NHDF) ／ 9 層 （２）ヒト線維芽細胞（NHDF) ／ 10 層 ＋ ケラチノサイト（NHEK) ／ 1 層 培養期間：積層後 24 時間 培養期間：NHEK 積層後 7 日 この製品は大阪大学大学院工学研究科 教授 明石先生、助教 松崎先生のご指導の下、開発した製品です。細胞
細胞播種
1 日
積層
交互に
コーティング
A − B 薄膜
形成
：接着成分 A
：接着成分 B
保管温度：冷蔵（4℃） ■初代肝細胞の活性に長期間維持して培養することが可能です。 Cell-able® プレートと組み合わせての使用をお奨め致します。ヒト初代肝細胞（共培養）の CYP3A4 ベース活性比較
Cell-able® 96 well プレート上で，専用培地及び 3 種類の市販培地を用いてヒト初代肝細胞の共培養を行った。 フィーダー細胞播種数は 8,000 cells/well, 肝細胞播種数は 20,000cells/well として 21 日間培養し， CYP3A4 の基礎活性を比較した。専用培地
6b Hydrox testosterone pmole/10
6cells/min
Comparison of four kinds of medium
Successive CYP3A4 basal activity on Cell-able
day7 day14 day21
A社品
B社品
C社品
20.00
18.00
16.00
14.00
12.00
10.00
8.00
6.00
4.00
2.00
0.00
■肝細胞用専用培地（RM-101）と他社培地との比較
高度品質管理製品
http://sumibe.co.jp/sumilon/
http://www.sumibe.co.jp/
高度品質管理製品
スミロンスーパークオリティ
http://www.sumibe.co.jp/
■
SAL10
-6無菌性保証 ISO11137（JIS T0806）に従って確立した滅菌線量を照射しています。
（但し、定期バリデーション実施頻度は年1回に規定）
■
材料安全性
日本薬局方に基づく灰化試験、溶出物試験、細胞毒性試験を実施し選定しています。
■
パイロジェンレベル
ロット毎にエンドトキシンレベル（0.25EU／mL未満）を確認しています。
■
異物管理
全数検査による異物管理を行っています。
■
包装形態
使い易い少量・小分け包装です。CPC等での使用に好適な3重包装です。
■
カスタム包装対応
工程ごとのセットパックについてもご相談下さい。
品番 品名 3重包装形態／入数仕様 ケース入数 参考価格（円） 単価 ケース価格 MS-66020S スミロンスーパークオリティ ピペット2mL 1本包装×10 ／ 10セット 100 190（税抜） 19,000（税抜） MS-66050S スミロンスーパークオリティ ピペット5mL 1本包装×10 ／ 10セット 100 210（税抜） 21,000（税抜） MS-66052S スミロンスーパークオリティ ピペット5mLショートタイプ 1本包装×10 ／ 10セット 100 210（税抜） 21,000（税抜） MS-66100S スミロンスーパークオリティ ピペット10mL 1本包装×10 ／ 10セット 100 240（税抜） 24,000（税抜） MS-66102S スミロンスーパークオリティ ピペット10mLショートタイプ 1本包装×10 ／ 10セット 100 240（税抜） 24,000（税抜） MS-66250S スミロンスーパークオリティ ピペット25mL 1本包装×10 ／ 12セット 120 270（税抜） 32,400（税抜） MS-66252S スミロンスーパークオリティ ピペット25mLショートタイプ 1本包装×10 ／ 12セット 120 270（税抜） 32,400（税抜） MS-66500S スミロンスーパークオリティ ピペット50mL 1本包装×10 ／ 8セット 80 460（税抜） 36,800（税抜） MS-65022S スミロンスーパークオリティ アスピレーションピペット 1本包装×10 ／ 25セット 250 210（税抜） 52,500（税抜） MS-4601WS スミロンスーパークオリティ セラムチューブアウター1mLホワイト自立型 10本包装×5／ 3セット 150 130（税抜） 19,500（税抜） MS-4603WS スミロンスーパークオリティ セラムチューブアウター2mLホワイト自立型 10本包装×5／ 3セット 150 130（税抜） 19,500（税抜） MS-4604WS スミロンスーパークオリティ セラムチューブアウター4mLホワイト自立型 10本包装×5／ 3セット 150 140（税抜） 21,000（税抜） MS-4605WS スミロンスーパークオリティ セラムチューブアウター5mLホワイト自立型 10本包装×5／ 3セット 150 140（税抜） 21,000（税抜） MS-4701WS スミロンスーパークオリティ スリムチューブ0.5mLホワイト自立型 10本包装×5／ 3セット 150 130（税抜） 19,500（税抜） MS-4702WS スミロンスーパークオリティ スリムチューブ1.5mLホワイト自立型 10本包装×5／ 3セット 150 130（税抜） 19,500（税抜） MS-56150S スミロンスーパークオリティ 遠沈管15mL 5本包装×3 ／ 16セット 240 150（税抜） 36,000（税抜） MS-56500S スミロンスーパークオリティ 遠沈管50mL 5本包装×3 ／ 10セット 150 190（税抜） 28,500（税抜） MS-58500S スミロンスーパークオリティ スナップコニカル50mL 5本包装×1 ／ 12セット 60 300（税抜） 18,000（税抜） MS-56225S スミロンスーパークオリティ ボトル225mL 4本包装×1 ／ 12セット 48 750（税抜） 36,000（税抜） MS-80060S スミロンスーパークオリティ 接着細胞培養用プレート6ウェル 1個包装×2 ／ 20セット 40 760（税抜） 30,400（税抜） MS-80120S スミロンスーパークオリティ 接着細胞培養用プレート12ウェル 1個包装×2 ／ 20セット 40 780（税抜） 31,200（税抜） MS-80240S スミロンスーパークオリティ 接着細胞培養用プレート24ウェル 1個包装×2 ／ 20セット 40 800（税抜） 32,000（税抜） MS-80480S スミロンスーパークオリティ 接着細胞培養用プレート48ウェル 1個包装×2 ／ 20セット 40 820（税抜） 32,800（税抜） MS-8096FS スミロンスーパークオリティ 接着細胞培養用プレート96ウェル 1個包装×2 ／ 28セット 56 850（税抜） 47,600（税抜） MS-8006RS スミロンスーパークオリティ 浮遊細胞培養用プレート6ウェル 1個包装×2 ／ 20セット 40 760（税抜） 30,400（税抜） MS-8012RS スミロンスーパークオリティ 浮遊細胞培養用プレート12ウェル 1個包装×2 ／ 20セット 40 780（税抜） 31,200（税抜） MS-8024RS スミロンスーパークオリティ 浮遊細胞培養用プレート24ウェル 1個包装×2 ／ 20セット 40 800（税抜） 32,000（税抜） MS-8048RS スミロンスーパークオリティ 浮遊細胞培養用プレート48ウェル 1個包装×2 ／ 20セット 40 820（税抜） 32,800（税抜） MS-8096RS スミロンスーパークオリティ 浮遊細胞培養用プレート96ウェル 1個包装×2 ／ 28セット 56 850（税抜） 47,600（税抜） MS-10350S スミロンスーパークオリティ 接着細胞培養用シャーレ35mm ツバ付 5個包装×2 ／ 10セット 100 200（税抜） 20,000（税抜） MS-10600S スミロンスーパークオリティ 接着細胞培養用シャーレ60mm 4個包装×1 ／ 15セット 60 280（税抜） 16,800（税抜） MS-13900S スミロンスーパークオリティ 接着細胞培養用シャーレ90mm 1個包装×3 ／ 20セット 60 480（税抜） 28,800（税抜） MS-10150S スミロンスーパークオリティ 接着細胞培養用シャーレ150mm 1個包装×2 ／ 12セット 24 875（税抜） 21,000（税抜） MS-1135RS スミロンスーパークオリティ 浮遊細胞培養用シャーレ35mm 5個包装×2 ／ 10セット 100 200（税抜） 20,000（税抜） MS-1160RS スミロンスーパークオリティ 浮遊細胞培養用シャーレ60mm 4個包装×1 ／ 15セット 60 280（税抜） 16,800（税抜） MS-1390RS スミロンスーパークオリティ 浮遊細胞培養用シャーレ90mm 1個包装×3 ／ 20セット 60 480（税抜） 28,800（税抜） MS-23050S スミロンスーパークオリティ 接着細胞培養用フラスコ25cm2 フィルターキャップ 10個包装×1 ／ 18セット 180 380（税抜） 68,400（税抜） MS-23250S スミロンスーパークオリティ 接着細胞培養用フラスコ75cm2 フィルターキャップ 1個包装×3 ／ 10セット 30 840（税抜） 25,200（税抜） MS-23600S スミロンスーパークオリティ 接着細胞培養用フラスコ150cm2 フィルターキャップ 1個包装×1 ／ 16セット 16 1,690（税抜） 27,040（税抜） MS-23800S スミロンスーパークオリティ 接着細胞培養用フラスコ225cm2 フィルターキャップ 1個包装×1 ／ 12セット 12 1,850（税抜） 22,200（税抜） MS-2305RS スミロンスーパークオリティ 浮遊細胞培養用フラスコ25cm2 フィルターキャップ 10個包装×1／ 18セット 180 380（税抜） 68,400（税抜） MS-2325RS スミロンスーパークオリティ 浮遊細胞培養用フラスコ75cm2 フィルターキャップ 1個包装×3 ／ 10セット 30 840（税抜） 25,200（税抜） MS-2360RS スミロンスーパークオリティ 浮遊細胞培養用フラスコ150cm2 フィルターキャップ 1個包装×1 ／ 16セット 16 1,690（税抜） 27,040（税抜） MS-2380RS スミロンスーパークオリティ 浮遊細胞培養用フラスコ225cm2 フィルターキャップ 1個包装×1 ／ 12セット 12 1,850（税抜） 22,200（税抜） MS-93100S スミロンスーパークオリティ スクレーパーSブレード10mm 1本包装×10 ／ 5セット 50 400（税抜） 20,000（税抜） MS-93101S スミロンスーパークオリティ スクレーパーS先端固定タイプブレード10mm 1本包装×10／ 5セット 50 400（税抜） 20,000（税抜） MS-93170S スミロンスーパークオリティ スクレーパーMブレード17mm 1本包装×10／ 5セット 50 500（税抜） 25,000（税抜） MS-93300S スミロンスーパークオリティ スクレーパーLブレード30mm 1本包装×10／ 5セット 50 600（税抜） 30,000（税抜）スミロンスーパークオリティは、通常の細胞培養関連製品等に規定された品質管理項目
に加え下記の品質基準を満たす高品質なバイオ関連製品です。
カスタム包装についてもご相談下さい。 ※旧仕様のスミロンスーパークオリティ（品番 MC- ○○○○○S）は２０１7 年 9 月をもちまして、販売を終了致します。 保管温度：室温 有効期限：製造後３年 個包装ごとにロットナンバーを印字（一部製品を除く） 少量個包装化とＣＰＣ等への持込みに適した３重包 装をおこなっております。特長
3 重目 2 重目 1 重目14 15
タンパク質低吸着製品
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タンパク質低吸着製品
タンパク質低吸着製品
■
プロテオセーブ
®SS
プロテオセーブ
®SS は、超親水性ポリマーコーティングにより、
タンパク質やペプチドの容器への非特異吸着を抑制します。
特長
■
タンパク質の疎水性相互作用による容器への吸着を抑制する
ことにより、サンプル中のタンパク質の損失、変性、失活を
防ぎます。
■
基材とポリマーは化学的に結合しおり、従来のコーティングし
ただけの製品では困難であった、有機溶媒、界面活性剤、熱
に対しても強い耐性
※があります。ポリマーの溶出の心配もあ
りません。
※対応：材質がポリプロピレンの製品
低分子化合物の分析での使用例
– 容器への低分子化合物の吸着を比較
-プロテオミクスでの使用例
–LCMS における他社低吸着製品とのペプチド同定数比較
-リン酸緩衝液で０．１～０．８μ g/ml に希釈した各種酵素標識抗体 溶液を分注後、３７℃で１時間インキュベートした後にリン酸緩衝液で 洗浄し、容器に残留した酵素標識抗体を基質の発色量で測定。 実験条件 容器： プロテオセーブ®SS 1.5mLマイクロチューブ 他社品 5 種類 試料： 肝がん細胞 Hep3B 由来ペプチド 容量： 300ng機種： nanoLC-Ultra 2D with TripleTOF ® 5600 カラム： 75 μ m ×150mm, ChromXP C18-CL 3 μ m 120 Å 溶離液： A 溶液 0.1% FA and 1% ACN B 溶液 0.1% FA and 99% ACN ペプチド同定ソフトウェア：Mascot Server 実験条件 容器： プロテオセーブ®SS 1.5mLマイクロチューブ ノンコート 1.5mLマイクロチューブ 濃度： 0.1 μ g/mL サンプル： 容器への吸着が多い非イオン性の低分子化合物 1.Digoxin ( 狭心症薬 ) 2.Paclitaxel ( 抗がん剤 ) 測定方法： サンプルをチューブ内で 1hr 放置後、 LC-MS/MS で確認 データ提供 国立研究開発法人 国立がん研究センター研究所 創薬臨床研究分野 紙田正博先生 データ提供 積水メディカル株式会社 創薬支援センター
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プロテオセーブ
®
SS
（耐有機溶媒 耐熱タイプ）
プロテオセーブ
®
SS
容器への吸着量比較
（社内評価データ）
耐薬品性・耐熱耐寒性
（社内評価データ）
品番 品名 材質 仕様 包装 個/包・個/ケース 参考価格（円） 単価 ケース価格 MS-4205M プロテオセーブ®SS マイクロチューブ0.5mL ポリプロピレン 未滅菌 100/包・500/ケース 40（税抜） 20,000（税抜） MS-4255M プロテオセーブ®SS マイクロチューブ0.5mL ポリプロピレン 放射線滅菌済 100/包・500/ケース 45（税抜） 22,500（税抜） MS-4215M プロテオセーブ®SS マイクロチューブ1.5mL ポリプロピレン 未滅菌 100/包・500/ケース 35（税抜） 17,500（税抜） MS-4265M プロテオセーブ®SS マイクロチューブ1.5mL ポリプロピレン 放射線滅菌済 100/包・500/ケース 40（税抜） 20,000（税抜） MS-4220M プロテオセーブ®SS マイクロチューブ2.0mL ポリプロピレン 未滅菌 100/包・500/ケース 45（税抜） 22,500（税抜） MS-4270M プロテオセーブ®SS マイクロチューブ2.0mL ポリプロピレン 放射線滅菌済 100/包・500/ケース 50（税抜） 25,000（税抜） MS-4201X プロテオセーブ®SS スリムチューブ0.5mL（高速遠心可） ポリプロピレン 未滅菌 50/包・500/ケース 110（税抜） 55,000（税抜） MS-4202X プロテオセーブ®SS スリムチューブ1.5mL（高速遠心可） ポリプロピレン 未滅菌 50/包・500/ケース 110（税抜） 55,000（税抜） 品番 品名 材質 仕様 包装 個/包・個/ケース 参考価格（円） 単価 ケース価格 MS-52150※ プロテオセーブ®SS 遠沈管15mL 本体：PET フタ：ポリエチレン 未滅菌 5/包・100/ケース 270（税抜） 27,000（税抜） MS-52550 プロテオセーブ®SS 遠沈管50mL 本体：ポリプロピレン フタ：ポリエチレン 放射線滅菌済 5/包・100/ケース 270（税抜） 27,000（税抜） MS-8384V プロテオセーブ®SS プレート384V ポリプロピレン V底・フタなし、 未滅菌 5/包・ 50/ケース 2,000（税抜） 100,000（税抜） MS-8296F プロテオセーブ®SS プレート96F ポリスチレン フタなし、未滅菌 5/包・ 50/ケース 725（税抜） 36,250（税抜） MS-8296V プロテオセーブ®SS プレート96V ポリプロピレン V底・フタなし、 未滅菌 5/包・ 20/ケース 1,100（税抜） 22,000（税抜） MS-82962 プロテオセーブ®SS ディープウェル96V 2mL ポリプロピレン V底・フタなし、 未滅菌 3/包・ 15/ケース 2,500（税抜） 37,500（税抜） 受注生産 MS-8296K プロテオセーブ®SS プレート96F黒 ポリスチレン フタなし、未滅菌 5/包・ 50/ケース 935（税抜） 46,750（税抜） MS-3296U プロテオセーブ®SS プレート96U ポリスチレン フタなし、未滅菌 5/包・ 50/ケース 725（税抜） 36,250（税抜） 保管温度：室温 ※対応製品：材質がポリプロピレンの製品 保管温度：室温 ※ 使用可能温度：-80〜40℃ 【参考文献】 1.A study protocol for quantitative targeted absolute proteomics (QTAP) by LC-MS/MS: application for inter-strain difference in protein expression levels of transporters, receptors, claudin-5, and marker proteins at the blood–brain barrier in ddY, FVB, and C57BL/6J mice. Yasuo U, Masanori T, Wataru O, Yutaro H, Yusuke T, Sumio O, Tetsuya T., Fluids Barriers CNS.10:21 (2013). 2. Novel bacterial lipoprotein structures conserved in low-GC content gram-positive bacteria are recognized by Toll-like receptor 2. Kurokawa K, Ryu KH, Ichikawa R, Masuda A, Kim MS, Lee H, Chae JH, Shimizu T, Saitoh T, Kuwano K, Akira S, Dohmae N, Nakayama H, Lee BL., J Biol Chem. 2012 Apr 13;287(16):13170-81. 3.Structural evidence of α-aminoacylated lipoproteins of Staphylococcus aureus. Asanuma M, Kurokawa K, Ichikawa R, Ryu KH, Chae JH, Dohmae N, Lee BL, Nakayama H., FEBS Journal (2011) 1850 1800 1750 1700 1650 1600 1550 1500 1450 1400 1350 ペ プ チ ド 同定数 0.90 0.80 0.70 0.60 0.50 0.40 0.30 0.20 0.10 0.00 O.D （A450） プロテオセーブ®SS 他社品A 他社品B 120 100 80 60 40 20 0 反 応 率（％） 反応時間（h） 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 プロテオセーブ®SS 他社品A（ノンコート） 他社品B（ノンコート） 他社品C（シリコンコート） 他社品D（ノンコート) 他社品E（ポリマーコート） POD抗BS-ALB POD抗BS-IgG ALP抗ヒトCRP POD-抗ヒトIgG プロテオセーブ®SS 他社低吸着製品 未処理 1850 1800 1750 1700 1650 1600 1550 1500 1450 1400 1350ペ
プ
チ
ド
同定数
0.90 0.80 0.70 0.60 0.50 0.40 0.30 0.20 0.10 0.00O.D
（A450）
プロテオセーブ®SS 他社品A 他社品B 120 100 80 60 40 20 0 反 応 率（％） 反応時間（h） 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 プロテオセーブ®SS 他社品A（ノンコート） 他社品B（ノンコート） 他社品C（シリコンコート） 他社品D（ノンコート) 他社品E（ポリマーコート） POD抗BS-ALB POD抗BS-IgG ALP抗ヒトCRP POD-抗ヒトIgG プロテオセーブ®SS 他社低吸着製品 未処理 有機溶剤 10％ 5hr メタノール ○ エタノール ○ 2-プロパノール ○ グリセロール ○ アセトニトリル ○ アセトン ○ DMSO ○ 2-メルカプトエタノール ○ 界面活性剤 0.1％ CHAPS ○ Triton X ○ Tween20 ○ SDS ○ 耐熱性 耐寒性 100℃（10分間） -80℃（3ヶ月）プロテオセーブ
®SSはLC-MSにおけるペプチド同定数が一番多かった。
プロテオセーブ
®SSはいずれのタンパク質に対しても吸着を抑えられた。
100 80 60 40 20 0 Adsorption （ ％ ）Digoxin Paclitaxel Digoxin Paclitaxel
ノンコート プロテオセーブ®SS
× 100
Concentration in the 0 and 1h sample
Concentration in the initial sample
Adsorption (%) = 100 −
0h 1h
糖鎖関連製品
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糖鎖関連製品
糖鎖精製ラベル化キット BlotGlyco
®
■
糖鎖精製ラベル化キット BlotGlyco
®http://www.sumibe.co.jp/
糖鎖捕捉用ポリマービーズ MALDI-TOF MS 用高感度ラベル化試薬 (BS-45403 ～ 45406) 反応用チューブ、クリーンアップカラム、溶液回収用チューブ 操作プロトコル生体組織や天然物など夾雑物を多く含むサンプルから糖鎖精製が可能です。
HPLC, LC-MS, MALDI-TOF MS などで正確な糖鎖解析を行うためには、
精製度の高いサンプル調製が重要です。
糖鎖精製ラベル化キット BlotGlyco® はバイオ医薬品の糖鎖修飾解析のみならず、
糖鎖バイオマーカー探索、幹細胞の糖鎖解析などに利用できます。
特長
製品構成
使用例
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生体組織や天然物など夾雑物を多く含むサンプルからの糖鎖精製に威力を発揮します。
■
糖鎖捕捉に化学結合を利用しているため莢雑物の除去効率が高く、精製度の高い糖鎖サンプルが得られます。
■
ビーズ固相上でのメチルエステル化によりシアル酸のカルボキシル基を保護し、MALDI-TOF MS ポジティブイオンモード
測定でのシアル酸残基の脱離を防止、中性糖鎖とシアリル糖鎖の同時プロファイリングが可能です。
■
2AB, 2AP 蛍光ラベル化 * および独自設計の MALDI-TOF MS 高感度ラベル化に対応しています。
■
約 5 時間で精製・ラベル化糖鎖の調製が可能です。（所要時間はプロトコルにより異なります）
■
各種の分析法に対応した詳細な操作プロトコルをご提供します。
■
必要な機器は卓上遠心機とヒートブロックだけです。特別な装置は必要ありません。
■
1 サンプルから 96 サンプルまで、幅広いサンプル数に対応します。
■
初回お買い上げのお客様には、ご要望により標準糖タンパク質を使った操作再現性確認を無料で行います。
* 2AB： 2-aminobenzamide, 2AP（PA）： 2-aminopyridine
■
血清中糖タンパク質糖鎖の解析 ( 糖鎖バイオマーカー探索研究 )
■
SDS-PAGE ゲルバンド中の糖鎖解析 ( タンパク情報と糖鎖情報のリンク )
■
抗体医薬品の糖鎖修飾解析
■
幹細胞の糖鎖解析
■
生体組織や植物組織の糖鎖解析
糖鎖精製・ラベル化の原理
糖鎖捕捉用ポリマービーズ MALDI-TOF MS 用高感度ラベル化試薬Hz
Hz
Hz
Hz
Hz
Hz
糖鎖捕捉用ポリマービーズ
生体由来サンプル
：ラベル化試薬
糖
糖鎖
鎖
1:ビーズによる糖鎖捕捉
2:糖鎖再遊離
3:未反応試薬の除去
1
2
3
MS
HPLC
タンパク質 核酸 NA2! 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 Peak ratio [%] ピーク面積 ピーク面積 Peak # 1st 2nd 3rdR² = 0.9978
2.0E+09 1.6E+09 1.2E+09 8.0E+08 4.0E+08 0.0E+00 1.00E+05 8.00E+04 6.00E+04 4.00E+04 2.00E+04 0.00E+00 単位タンパク量あたりのピーク面積 2.5E+07 2.0E+07 1.5E+07 1.0E+06 5.0E+06 0.0E+00 Peak area Conc. [mM] -K?LGKEM?! 1糖 2糖 3糖 4糖 5糖 6糖 7糖 1糖 2糖 3糖 4糖 5糖 6糖 7糖 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 0 1 2 3 4 5 6 10.00 20.00 30.00 40.00 50.00 60.00 70.00 80.00 分 80.00 90.00 100.00 110.00 分 既存法 BlotGlyco NA2F フコースなし フコースあり 1:1 混合物を BlotGlyco® 処理 G０ G1 G2 NA2! 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 Peak ratio [%] ピーク面積 ピーク面積 Peak # 1st 2nd 3rdR² = 0.9978
2.0E+09 1.6E+09 1.2E+09 8.0E+08 4.0E+08 0.0E+00 1.00E+05 8.00E+04 6.00E+04 4.00E+04 2.00E+04 0.00E+00 単位タンパク量あたりのピーク面積 2.5E+07 2.0E+07 1.5E+07 1.0E+06 5.0E+06 0.0E+00 Peak area Conc. [mM] -K?LGKEM?! 1糖 2糖 3糖 4糖 5糖 6糖 7糖 1糖 2糖 3糖 4糖 5糖 6糖 7糖 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 0 1 2 3 4 5 6 10.00 20.00 30.00 40.00 50.00 60.00 70.00 80.00 分 80.00 90.00 100.00 110.00 分 既存法 BlotGlyco NA2F フコースなし フコースあり 1:1 混合物を BlotGlyco® 処理 G０ G1 G2 NA2! 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 Peak ratio [%] ピーク面積 ピーク面積 Peak # 1st 2nd 3rdR² = 0.9978
2.0E+09 1.6E+09 1.2E+09 8.0E+08 4.0E+08 0.0E+00 1.00E+05 8.00E+04 6.00E+04 4.00E+04 2.00E+04 0.00E+00 単位タンパク量あたりのピーク面積 2.5E+07 2.0E+07 1.5E+07 1.0E+06 5.0E+06 0.0E+00 Peak area Conc. [mM] -K?LGKEM?! 1糖 2糖 3糖 4糖 5糖 6糖 7糖 1糖 2糖 3糖 4糖 5糖 6糖 7糖 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 0 1 2 3 4 5 6 10.00 20.00 30.00 40.00 50.00 60.00 70.00 80.00 分 80.00 90.00 100.00 110.00 分 既存法 BlotGlyco NA2F フコースなし フコースあり 1:1 混合物を BlotGlyco® 処理 G０ G1 G21. 再現性 ： ピークパターンの再現性 ： 3.7% (C.V.)
4. 還元末端フコースの有無： 回収率に影響なし
3. 糖鎖のサイズの影響： 糖鎖のサイズ（単糖ユニット数）の影響を受けず、一定の割合で回収可能
2. 回収率の直線性 ： 糖鎖濃度 0.1 μM〜5 mM
5. 既存法との整合性： 同等のデータを取得可能
BlotGlyco®を用いた N 型糖鎖精製・ラベル化を 3 回実施し、HPLC の各糖 鎖ピーク面積の相対値の再現性を確認した。 ( サンプル：IgG, N=3, 2AB ラベル化 , HPLC 測定 ) フコース含有／非含有糖鎖 (NA2, NA2F) の同一濃度の溶液を調製し、 1:1 で混合後、BlotGlyco®を用いて精製・ラベル化、HPLC 測定を実施した。 ピーク面積よりそれぞれの糖鎖回収率を比較した。 ( サンプル：NA2, NA2F, N=1, 2AB ラベル化 , HPLC 測定 ) 重合度の異なるマルトオリゴ糖 (1 糖～ 7 糖 ) をそれぞれ同一濃度で溶解し、 BlotGlyco®を用いて精製・ラベル化後、HPLC 測定を実施。 ( サンプル：マルトオリゴ糖 , N=1, 2AB ラベル化 , HPLC 測定 ) 1糖は過剰ラベル除去工程で若干失われるが、2糖以上は回収量一定 種々の濃度の糖鎖溶液を調製し、BlotGlyco®による糖鎖精製・ラベル化を実 施。糖鎖濃度と HPLC ピーク面積値 ( ～糖鎖回収量 ) をプロットした。 ( サンプル：Maltoheptaose, N=3, 2AB ラベル化 , HPLC 測定 ) 同ロットのヒト IgG の N 型糖鎖を、① BlotGlyco®を用いて精製・ラベル化、 ②従来のカラムを用いた方法で精製後、ラベル化し、それぞれ HPLC 測定を 行い各糖鎖ピーク面積値 (~ 糖鎖回収量 ) を比較した。 ( サンプル：ヒト IgG, N=1, PA ラベル化 , HPLC 測定 )BlotGlyco
®基礎データ
※徳島大学大学院 (当時 ) 大政健史先生ご提供データ18 19
糖鎖関連製品
http://sumibe.co.jp/sumilon/
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® ヒト IgG トリプシン消化物の N 型糖鎖を BlotGlyco®および他 社製糖鎖精製キット (competitor A, B) を用いて精製、2AB ラ ベル化後、LC-MS 測定を行い、トータルイオンクロマトグラム (TIC) を比較した。 他社製品では夾雑物（ペプチドと推測）由来のピークが優位に観 測された。 BlotGlyco®では夾雑物由来ピークは非常に低く抑えられ、糖鎖 由来ピークを明瞭に観測可能であった。 [min] 75.00 80.00 85.00 90.00 95.00 100.00 105.00 110.00 115.00 120.00 1500 2000 2500 3000 3500 4000 4500 5000 [m/z] 1250 1500 1750 2000 2250 2500 2750 3000 3250 3500 3750 3000 3250 3500 3750 4000 4250 4500 4750 5000 GlcNAc Man Fuc Ga NeuGc * [m/z] [m/z] NeuAc NeuGc ウシIgG ヒトIgG + ウシIgG ヒトIgGN-acetylneuraminic acid (NeuAc) ヒトに普遍的に存在する
N-glycolylneuraminic acid (NeuGc) ヒトに対して抗原性をもつ 2750 2775 2800 2825 2850 2875 2900 2925 2950 2975 [m/z] [min] 75.00 80.00 85.00 90.00 95.00 100.00 105.00 110.00 115.00 120.00 1500 2000 2500 3000 3500 4000 4500 5000 [m/z] 1250 1500 1750 2000 2250 2500 2750 3000 3250 3500 3750 3000 3250 3500 3750 4000 4250 4500 4750 5000 GlcNAc Man Fuc Ga NeuGc * [m/z] [m/z] NeuAc NeuGc ウシIgG ヒトIgG + ウシIgG ヒトIgG
N-acetylneuraminic acid (NeuAc) ヒトに普遍的に存在する
N-glycolylneuraminic acid (NeuGc) ヒトに対して抗原性をもつ 2750 2775 2800 2825 2850 2875 2900 2925 2950 2975 [m/z] [min] 75.00 80.00 85.00 90.00 95.00 100.00 105.00 110.00 115.00 120.00 1500 2000 2500 3000 3500 4000 4500 5000 [m/z] 1250 1500 1750 2000 2250 2500 2750 3000 3250 3500 3750 3000 3250 3500 3750 4000 4250 4500 4750 5000 GlcNAc Man Fuc Ga NeuGc * [m/z] [m/z] NeuAc NeuGc ウシIgG ヒトIgG + ウシIgG ヒトIgG
N-acetylneuraminic acid (NeuAc) ヒトに普遍的に存在する
N-glycolylneuraminic acid (NeuGc) ヒトに対して抗原性をもつ 2750 2775 2800 2825 2850 2875 2900 2925 2950 2975 [m/z] [min] 75.00 80.00 85.00 90.00 95.00 100.00 105.00 110.00 115.00 120.00 1500 2000 2500 3000 3500 4000 4500 5000 [m/z] 1250 1500 1750 2000 2250 2500 2750 3000 3250 3500 3750 3000 3250 3500 3750 4000 4250 4500 4750 5000 GlcNAc Man Fuc Ga NeuGc * [m/z] [m/z] NeuAc NeuGc ウシIgG ヒトIgG + ウシIgG ヒトIgG
N-acetylneuraminic acid (NeuAc) ヒトに普遍的に存在する
N-glycolylneuraminic acid (NeuGc) ヒトに対して抗原性をもつ 2750 2775 2800 2825 2850 2875 2900 2925 2950 2975 [m/z]
糖タンパク質医薬品の糖鎖修飾解析
細胞の糖鎖プロファイリング
ヒト抗原性糖鎖の検出
糖鎖バイオマーカー探索
データ例 1 IgG (bovine) の N 型糖鎖を BlotGlyco®で精製・ラベル化後、LC-MS 測定。 各 LC ピークに含まれる糖鎖構造は質量数電荷比から推定。 （2AB ラベル化 , IgG 10 µg 使用） データ例 3HeLa 細胞に含まれる N 型糖鎖を BlotGlyco® で精製・ラベル化後、MALDI-TOF MS 測定。 糖鎖構造は質量数電荷比から推定。（aoWR ラベル化 , HeLa 細胞 1 x 106 個使用）
データ例 4
ヒト血 清 IgG とウシ血 清 IgG の N 型糖鎖を BlotGlyco で精製・ラベル 化後、MALDI-TOF MS 測定。ビーズ固相上でのメチルエステル 化により MALDI ポジティブイオンモード測定時のシアル酸残基の脱離を防止し、NeuAc と NeuGc の識別が可能。（aoWR ラベル化、IgG 10µg 使用）
データ例 2 ヒト血清の N 型糖鎖を BlotGlyco®で精製・ラベル化後、MALDI-TOF MS 測定を実施。糖鎖構造は質量数電荷比から推定。 （aoWR ラベル化 , 血清 5 μ L 使用）
