異なる LC 間での分析法移管のポイント : HPLC UPLC 間のシームレスな分析法移管日本ウォーターズ株式会社ケミストリーソリューションセンター分析展 2010/ 科学機器展 2010 新技術説明会 9 月 2 日 13:45~14: Nihon Waters K.K. 分

(1)

異なる

LC間での分析法移管のポイント：

HPLC⇔UPLC

®

_{間のシームレスな分析法移管}

日本ウォーターズ株式会社

ケミストリーソリューションセンター

ケミストリソリュションセンタ

分析展2010/科学機器展2010 新技術説明会 9月2日 13：45～14：35

分析法移管の種類



LC装置間での移管

—既存分析法を同じまたは“同等の”カラムを用いて異なる装置間で移管既存分析法を同じまたは同等のカラムを用いて異なる装置間で移管



分析法の調整



分析法の変更

—分析法の大幅な変更で、フルバリデーションが必要

(2)

良好な分析法移管

分析法移管プロセス

::

成功の鍵



移管後の分析法では重要なパラメータが担保されなければならない

—全ての関連する分析種の分離度全ての関連する分析種の分離度 —ピークの均一性／純度 —ピーク同定の確実性 —定量の真度と精度 —装置やカラムの種類によらず、定性的にも定量的にも同じ分析結果を実現



必要条件

(3)

変更のための提案

分析法移管プロセス

::

成功へのステップ



既存分析法および結果に関しての情報を収集



既存分析法の保持力および選択性を担保する

LCカラムを選択



LC装置を比較してデュエルボリュームの違いを補正



選択性が維持されるようにカラムボリュームに比例して既存分析法から目的の

分析法にスケリング

分析法にスケーリング



移管後の分析結果の評価



必要に応じて最適化

(4)

必要な情報

既存分析法、結果、

既存分析法、結果、基準

基準



カラム

—カラムケミストリ官能基粒径ブド



クロマトグラム

—分析種（ピーク）の数必要とされる保持 (官能基、粒子径、ブランド) —カラムサイズ



LC分析条件

—移動相 —流速 —グラジエント組成（再平衡化含む） —カラム温度 —必要とされる保持 —必要とされる分離度



定量



サンプル

—希釈溶媒 —濃度 —注入量 —分子量 —精度

分析法移管プロセス

::

成功へのステップ



既存分析法および結果に関しての情報を収集



既存分析法の保持力および選択性を担保する

LCカラムを選択



LC装置を比較してデュエルボリュームの違いを補正



選択性が維持されるようにカラムボリュームに比例して既存分析法から目的の

分析法にスケリング

分析法にスケーリング



移管後の分析結果の評価



必要に応じて最適化

(5)

カラム同等性

::

選択性の維持

テクノロジープラットフォーム間でのスケーリング性能

::

UPLC

®®

_⇔

_HPLC

(6)

多様な

UPLC

®®

_{カラムラインアップ}

BEH C18 BEH C8 BEH Phenyl  5種類のパーティクル基材 ・130Å, 200Å, 300Å BEH [エチレン架橋型ハイブリッド], HSS ・[High Strength Silica], CSHTM _{[Charged Surface Hybrid]}

・全てHPLCおよびUPLC®_{粒子径で販売} _{BEH Phenyl}

BEH Shield RP18 BEH HILIC BEH Amide HSS T3 HSS C18  種類豊富でさらに増え続けるカラムケミストリ・15 種の固定相

・BEH 130Å C18, C8, Shield RP18, Phenyl, HILIC, Amide

・BEH 300Å C18and C4 ・BEH 200Å SEC ・HSS C18, T3, C18SB ・CSHTM_C 18, Fluoro-Phenyl, Phenyl-Hexyl  専用試験を行ったアプリケーションベースのソリューション ©2010 Nihon Waters K.K. 11 CSHTM_C 18 CSHTM_{Fluoro-Phenyl} HSS C18SB

・AAA, OST, PST, PrST and Glycan

 HPLC⇔UPLC®_{間での分析法移管性}

・XBridgeTM_{HPLC ⇔ACQUITY UPLC}®_{BEH カラム}

・HSS HPLC ⇔ ACQUITY UPLC® _{HSS カラム} ・XSelectTM_{HPLC ⇔ ACQUITY}®_CSHTM_カラム  専用ガードカラム：VanGuardTM  eCordTM_{テクノロジー} CSHTM _Phenyl-Hexyl Si O O O Si F F F F F O O O Si O O O

Charged Surface Hybrid (CSH™)

テクノロジー



CSH™ テクノロジー

—

C

harged

S

urface

H

ybrid

(7)

CSH

TMTM

_{テクノロジー概要}



CSH

TM

_{テクノロジーは酸性低イオン強度の移動相使用に起因する問題を克服}



ACQUITY

®

_CSH

TM

_および

_XSelect

®

_{カラムは、ウォーターズが今までに発売}

したカラムの中で最も選択性の幅の広いカラムファミリー



CSH

TM

_{テクノロジーは、お客様のご意見を伺った結果として開発されたテクノロ}

ジーで、現在LCおよびLC/MSを使用されているお客様が抱える問題を解決

する実用的なソリューション

する実用的なソリュション

9/3（金） 12:30～12:55 N-1会場にて「困難な分離を解決する新規UPLC®_{&HPLCカラムファミリー」} 0 06 0.08 0.10 ACQUITY®_CSHTM _C₁₈ ramin e 2.0 %

CSH

TMTM

_{テクノロジーの利点例}

塩基性化合物のローディングキャパシティ

AU 0.00 0.02 0.04 0.06 Minutes 0.00 0.20 0.40 0.60 0.80 1.00 1.20 1.40 1.60 1.80 2.00 0.10 Imi p 1.0 % 0.5 % 0.1 % Amitriptyline このピークはどこにいったの？ C カムブ ドK Imipramine 濃度は 0.5 mg/mLで一定 0.1% ギ酸移動相 ©2010 Nihon Waters K.K. 14 AU 0.00 0.02 0.04 0.06 0.08 Minutes 0.00 0.20 0.40 0.60 0.80 1.00 1.20 1.40 1.60 1.80 2.00 Imi p rami n e 2.0 % 1.0 % 0.5 % 0.1 % Amitriptyline C18カラムブランドK

(8)

UV クロマトグラフィー性能 添加剤としてギ酸使用 MS シグナル応答 最大ピークキャパシティ(Pc) 時

CSH

TMTM

_{テクノロジー利点例}

低濃度のギ酸添加でサプレッションなしにＴＦＡ相当の性能実現

0.00 0.05 0.10 ACQUITY®_CSHTM_C₁₈ 0.05 % ギ酸 Pc= 47 1 2 3 4 5 6 0.0 0 1.00 2.00 3.00 4.00 0.10 ACQUITY®_CSHTM_C 18 0.05 % ギ酸 Pc= 47 (TFA使用時と同じ Pc) 1 2 3 4 5₆ 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 In te n si ty 5.0x107 1.0x108 1.5x108 0.00 1.5x108 深刻なMS シグナル サプレッション!! ©2010 Nihon Waters K.K. 15 0.00 0.05 C18カラムブランドK 0.05 % ギ酸 Pc= 18 1 2 3 4₅ 6 0.0 0 1.00 2.00 3.00 4.00 Minutes CSHTM_Technology: 2.6X peak capacity (Pc) 2.4X peak height In te n si ty 5.0x107 1.0x108 0.00 C18カラムブランドK 0.05 % TFA Pc= 36 Minutes 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 1 2 34 5 6 CSHTM_Technology: 1.3X peak capacity (Pc) 4.8X peak height Compounds 1. Doxepin 2. Desipramine 3. Imipramine 4. Nortriptyline 5. Amitriptyline 6. Trimipramine

同じ選択性をもつ

UPLC

®®

_＆

_HPLC

_{HPLC カラム}

_カラム

UPLC

® 1.7/ 1.8 µm

HPLC

ACQUITY UPLC®_{BEH C}

=

_XBridgeTM_C ACQUITY UPLC®_{BEH C}

18 XBridgeTMC18 ACQUITY UPLC®_{BEH C}

8 XBridgeTMC8

ACQUITY UPLC®_{BEH Shield RP18} _XBridgeTM_{Shield RP18} ACQUITY UPLC®_{BEH Phenyl} _XBridgeTM_Phenyl ACQUITY UPLC®_{BEH HILIC} _XBridgeTM_HILIC ACQUITY UPLC®_{BEH Amide} _XBridgeTM_Amide ACQUITY UPLC®_{BEH300 C}

18 XBridgeTMBEH300 C18 ACQUITY UPLC®_{BEH300 C} _XBridgeTM_{BEH300 C}

=

ACQUITY UPLC®_{BEH300 C}₄ _XBridgeTM_{BEH300 C}₄ ACQUITY UPLC®_{HSS C} 18 HSS C18 ACQUITY UPLC®_{HSS C} 18SB HSS C18SB ACQUITY UPLC®_{HSS T3} _{HSS T3}

=

ACQUITY UPLC®_CSHTM_C 18 XSelectTMC18

ACQUITY UPLC®_CSHTM_Phenyl-Hexyl _XSelectTM_Phenyl-Hexyl ACQUITY UPLC®_CSHTM_Fluoro-Penyl _XSelectTM_{Fluoro-Phenyl}

=

(9)

一般的なHPLCカラム 4.6 x 150 mm, 5 µm カラム長さ(L) = 150 mm = 150,000 µm d 5

粒子径に対するカラム長さの比

::

分離効率の維持

分離インデックスアプリケーション例理論段 (N) L/dp 容易含量均一性 5,000 15,000 dp= 5 µm L = 150,000 = 30,000 dp 5 ©2010 Nihon Waters K.K. 17 多少困難類縁物質分析 12,000 30,000 困難不純物プロファイリング 20,000 50,000 非常に困難代謝物同定 35,000 85,000 15 0 mm 90000 100000 非常に困難

粒子径に対するカラム長さの比

::

分離効率の維持

m m m 50 mm mm 75 mm 75 mm mm 10 0 mm 100 mm 10 0 mm 15 0 mm 150 mm 150 mm 250 mm 250 mm 30000 40000 50000 60000 70000 80000 L/ d p Ra ti o 多少困難非常に困難困難 ©2010 Nihon Waters K.K. 18 30 mm 30 mm 30 mm 30 m m 50 mm 50 mm 50 m 75 mm 75 10 0 0 10000 20000 0.005 0.0035 0.0025 0.0017 particle size (µm) 1.7 2.5 3.5 5.0 容易

(10)

HPLC 5 µm – 150 mm L/dp= 30,000 AU 0 05 0.10 0.15 0.20 G limepiride

粒子径に対するカラム長さの比

::

分離効率の維持

3.5 µm – 100 mm L/dp= 28,571 AU 0.00 0.05 0.10 0.15 0.20 Glimepiride 0.00 0.05 G 0.00 10.00 20.00 30.00 ©2010 Nihon Waters K.K. 19 UPLC® 1.8 µm – 50 mm L/dp= 27,778 AU 0.00 0.05 0.10 0.15 0.20 Glimepiride 0.00 5.00 9.00 14.00 0.00 1.00 2.50 _3.50

分析法移管



分析法移管キット

—HPLCとUPLC®_{の粒子径の違いを考慮したうえで、選択性が同等なカラムをキット化}



内容:

—あらゆるプラットホーム間での分析法移管が可能なACQUITY UPLC®_カラムカリキュレータ(双方向) oHPLC⇔UPLC®⇔HPLC —同じ選択性をもつUPLC® _{カラムとHPLC カラム}

分析法移管キト

分析法移管キット:

 1.7/1.8 µm to 5 µm 分析法移管キット — 2.1 x 50 mm, 1.7/1.8 µm と 4.6 x 150 mm 5 µm  1.7/1.8 µm to 3.5 µm分析法移管キット — 2.1 x 50 mm, 1.7/1.8 µm と 4.6 x 100 mm 3.5 µm  1.7/1.8 µm to 3.5 µm 高分離分析法移管キット — 2.1 x 100 mm, 1.7/1.8 µm と 4.6 x 150 mm 3.5 µm

(11)

分析法移管プロセス

::

成功へのステップ



既存分析法および結果に関しての情報を収集



既存分析法の保持力および選択性を担保するLCカラムを選択



LC装置を比較してデュエルボリュームの違いを補正



選択性が維持されるようにカラムボリュームに比例して既存分析法から目的の

分析法にスケリング

分析法にスケーリング



移管後の分析結果の評価



必要に応じて最適化

異なる

LC

LCシステム間での

システム間での

HPLC

HPLC分析法の移管

分析法の移管

移管元のLCシステムにおける分析法の保持力と選択性の維持を確保するために

システムの違いを補正する必要がある・・・



デュエルボリューム（Dwell volume）の違い

—グラジエント分析の場合はカラムボリュームとデュエルボリュームの比を一定にするために初期条件でのホールド時間を入れて調整 o 移管先のHPLCシステムのデュエルボリュームの方が小さい場合には初期条件でのホールド時間をグラジエントテーブルに追加 o 移管先のHPLCシステムのデュエルボリュームの方が大きい場合には注入のタイミングを遅らせる必要 ©2010 Nihon Waters K.K. 22 遅らせる必要 o 再平衡化時間についても調整する必要



カラム加温機構の違い

—カラムの加温機構は様々であり、その影響は無視できない。この違いによって保持時間や選択性に違いが生じる可能性がある

(12)

低圧混合システム



低圧混合、シングルポンプ

—移動相形成のためのAuto·Blend マルチポンプ（高圧混合）よりシステムボリムが大きい —マルチポンプ（高圧混合）よりシステムボリュームが大きい —溶媒はポンプを通過する前に混合より大きいシステムボリューム= より大きいデュエルボリューム

シングルポンプ

Detector

Injector

ABC D

Pump

Column

より大きいシステムボリュムより大きいデュエルボリュム

高圧混合システム

より小さいシステムボリューム= より小さいデュエルボリューム

マルチポンプ

Detector

Injector

ColumnColumn

Pump A

Pump B



高圧混合、マルチポンプ

—プレミックス溶媒のみ —より小さいシステムボリューム/デュエルボリューム —拡散が最小限

(13)

システムボリュームの違い

::

低圧

vs.

vs. 高圧混合

高圧混合

より小さいシステムボリューム= より小さいデュエルボリューム

マルチポンプ（

2液混合）

Detector Injector ColumnColumn

Pump A Pump A Pump B Pump B Mixer

シングルポンプ（

4液混合）

デュエルボリューム

オフセット

ミキサーでの溶媒組成移管元システムでの実際の移動相組成はカラム入り口で測定カラムヘッドでの溶媒組成カラム入り口で測定

0

{

}

0 Injection

x デュエルボリュームにより、溶媒組成の変化がカラム入り口に到達する前にオフセットが生成される（つまり、グラジエント開始毎の初期条件でのホールド：グラジエントのかかり）

t

g

Time

(14)

異なるデュエルボリューム

分離への影響

移管元の装置デュエルボリューム0.9 mL 元より大きいデュエルボリュームデュエルボリューム1.4 mL 元より小さいデュエルボリュームデュエルボリューム0.35 mL ©2010 Nihon Waters K.K. 27 移管先のデュエルボリュームが小さい (初期条件でのホールド時間が短い： グラジエントのかかりがはやい) 移管先のデュエルボリュームが大きい (初期条件でのホールド時間が長い： グラジエントのかかりが遅い)

デュエルボリュームの補正



デュエルボリュームを比較

—最適な比較を行うには使用するカラムボリュームに対してデュエルボリュームを最適な比較を行うには、使用するカラムボリュムに対してデュエルボリュムを換算して比較する



移管先のシステムでグラジエントのかかりが

はやい

なら



移管先のシステムでグラジエントのかかりが

遅い

なら

—注入のタイミングを遅らせる（ACQUITY UPLC®_{カリキュレータで補正可能）}

(15)

分析法移管プロセス

::

成功へのステップ



既存分析法および結果に関しての情報を収集



既存分析法の保持力および選択性を担保するLCカラムを選択



LC装置を比較してデュエルボリュームの違いを補正



選択性が維持されるようにカラムボリュームに比例して既存分析法から

目的の分析法にケリング

目的の分析法にスケーリング



移管後の分析結果の評価



必要に応じて最適化

移管先の

LC

LC条件

条件

移動相および注入サンプル



移管元と全く同じ移動相を用いる

—移管後に評価を行い、最適化が必要な場合のみ変更する



移管元と全く同じサンプルを用いる

(16)

移管先の

LC

LC条件

条件

注入量に関しての考慮事項



注入量はカラムボリュームに比例してスケーリング

—ACQUITY UPLC®_{カラムカリキュレータで計算} —キャパシティはカラム内の充てん剤表面積と溶媒量に比例



装置への推奨最小注入量は0.5 – 1 µL

注入量のスケーリング

ガイドライン: 注入量はカラム容積の5%以下。 1%を目標としてクロマトグラフィ条件によってより多くしたい場合には実験を行って決定する

4.6 x 150 mm

2.1 x 50 mm

20 µL 注入/0.17 mL = 12% 0.17 mL

注入量が多すぎると、過負荷によりピーク形状が悪化する可能性がある

(17)

移管先の

LC

LC条件

条件

温度



温度は全てのクロマトグラフィメカニズムに直接影響する



分析法移管に際し、温度は一定に保たなければならない



プレヒーティングが不可欠

移管先の

LC

LC条件

条件

流速



移管に際して

—まず、一定の線速度に対するカラム内径の二乗に比例して流速を調整する（カラムボリュームに比例したスケーリング） —次に、移管先のカラムで各グラジエントステップで流れる溶媒量をカラムボリュームに換算した値が移管元と同じになるようにグラジエントテーブルを調整する —最後に、小さい粒子径に合わせて流速（線速度）を調整する ©2010 Nihon Waters K.K. 34 最後に、小さい粒子径に合わせて流速（線速度）を調整する o 分析種の分子量を考慮する必要がある

ACQUITY UPLC

®

_{カラムカリキュレータではこれら全ての計算が行えます}

(18)

分析法移管プロセス

::

成功へのステップ



既存分析法および結果に関しての情報を収集



既存分析法の保持力および選択性を担保するLCカラムを選択



LC装置を比較してデュエルボリュームの違いを補正



選択性が維持されるようにカラムボリュームに比例して既存分析法から目的の

分析法にスケリング

分析法にスケーリング



移管後の分析結果の評価



必要に応じて最適化

シナリオ

1 :

1 : LC

LC 装置間の移管

装置間の移管

ｰ

異なるシステム間での

HPLC

HPLC分析法の移管

分析法の移管

(19)

シナリオ

1:

LC

LC 装置間の移管

装置間の移管

移管元の装置デュエルボリューム0.9 mL 移管先のデュエルボリュームが小さい元よりデュエルボリュームの小さい装置デュエルボリューム0.35 mL ©2010 Nihon Waters K.K. 37 移管先のデュエルボリュムが小さい (初期条件でのホールド時間が短い： グラジエントのかかりがはやい) 分離を維持するためにグラジエントテーブルにイニシャルホールドを追加してホールド時間が同じになるように設定する

シナリオ

1:

LC

LC 装置間の移管

装置間の移管

(20)

シナリオ

1:

LC

LC装置間の移管

装置間の移管

シナリオ

1

1 結果

結果

: LC

: LC装置間の移管

装置間の移管

お客様のラボの将来の保証 HPLC分析法をACQUITY UPLC®_{H-Classで実施} HPLC、UPLC®_両方の分析法を実施できる柔軟性 ® ©2010 Nihon Waters K.K. 40 Relative RT to Clozapine Peak H-Class HPLC Impurity D 0.867 0.865 Impurity C 0.898 0.895 Impurity A 0.951 0.950 Clozapine 1.000 1.000 Impurity B 1.507 1.513 TM

(21)

シナリオ

2:

分析法の調整

Alliance®_{HPLCシステムでのHPLC分離} XBridgeTM_C18 4 6 100 3 5 m in e 0.00 5.00 10.00 15.00 20.00 25.00 30.00 35.00 40.00 45.00 50.00 55.00 4.6 x 100 mm, 3.5 µm Tailing = 1.60 Rs = 7.61 Gal ant am 1 2 4 5 ©2010 Nihon Waters K.K. 41 分析時間削減のために分析法の調整

2 µm以下のパーティクルテクノロジーの利点を活かしACQUITY UPLC®_{H-Class に移管}

基準

USP Tailing < 2.0, Rs (galantamine/impurity 4) > 4.5

シナリオ

2:

分析法の調整

パーティクルの利点を発揮することで分析法を改善分析法移管キットを用いて異なる粒子径間で選択性を維持

(22)

シナリオ

2:

分析法の調整

シナリオ

2:

分析法の調整

(23)

シナリオ

2 2、

、結果

結果

::

分析法の調整

Alliance®_{HPLCシステムでのHPLC分離} XBridgeTM _C₁₈ la n ta m in e 分析法の調整分離の一貫性を保持して分析時間を1/4.3に削減グ 0.00 5.00 10.00 15.00 20.00 25.00 30.00 35.00 40.00 45.00 50.00 55.00 18 4.6 x 100 mm, 3.5 µm Tailing = 1.60 Rs = 7.6 Ga 1 2 4 5

ACQUITY UPLC®_{H-ClassでのUPLC}®_分離

18 2.1 x 50 mm, 1.7 µm Tailing = 1.43 Rs = 7.2 Gal ant ami n 1 2 4 5

シナリオ

3:

資産の最大限の活用

(24)

シナリオ

3:

資産の最大限の活用

シナリオ

3:

資産の最大限の活用

(25)

シナリオ

3:

資産の最大限の活用

シナリオ

3

3 結果

結果

:: 資産の最大限の活用

資産の最大限の活用

資産の最大限の活用 HPLC⇔UPLC®_間での分析法移管 ® 分析法移管粒子径間での選択性を維持 ©2010 Nihon Waters K.K. 50 Relative RT to Clozapine Peak H-Class HPLC Impurity D 0.867 0.865 Impurity C 0.890 0.895 Impurity A 0.939 0.950 Clozapine 1.000 1.000 Impurity B 1.500 1.513

(26)

まとめ

 HPLC装置とACQUITY UPLC®_{H-Class間で従来からのHPLC分析法を容易に移管可能}

—ACQUITY UPLC®_{H-Classの4液・低圧混合とフロースルーニードルにより容易に分析法を移管}

 HPLC分析法から2 µm以下のUPLC®_{テクノロジーの利点を活かした分析法に移管可能}

—デュエルボリュームの違いを補正

—分析法移管キットの活用により異なる粒子径間で選択性を維持

 既存の資産を最大限に活用するためにUPLC®_{分析法をHPLCに移管}

—ACQUITY UPLC®_{H-Classの4液・低圧混合とフロースルーニードルにより容易に分析法を移管}

Appendix1



デュエルボリュームの計算

(27)

デュエルボリュームの計算

::

カラムは流路からはずす

100% 漸近値 % 90 00 100.00 立ちあがり 50% 理論値実測値 30.00 40.00 50.00 60.00 70.00 80.00 90.00

青のラインが実際の溶媒組成–

拡散の影響が見られる

異なる3つの箇所（濃度）で測定すると、結果として3つの異なるデュエルボリュームが計算値として得られてしまうキーポイント: 移管元と移管先で同様の方法で測定する

デュエルボリューム

測定のための推奨方法

1. カラムをはずす

2. 移動相Aにアセトニトリル、移動相Bにアセトニトリル with 0.05 mg/mL uracil を

使加剤外合おび粘度を排除すた使用(添加剤以外の混合および粘度の問題を排除するため) 3. 254 nmでモニター 4. 移管元の分析法での流速および移管先で使用予定の流速を使用 5. 100%移動相Aでベースラインを5分間記録 6. 5.00分の時点で100％移動相Bに変更するようにプログラムし、さらに5分間記録 7. 100％移動相Aと100％移動相Bの吸収の差を測定 8. 吸収の差が50％になる時間を測定 ©2010 Nihon Waters K.K. 54 9. 移動相変更のステップ開始から50％になるまでの時間を計算 10. 50％になるまでの移動相流量（9で得られた時間×流速）をデュエルボリュームとする

(28)

0.65 0.70 50% Absorbance = 0.3582 AU

中間点（

50%

50%）での吸収を測定

）での吸収を測定

AU 0.20 0.25 0.30 0.35 0.40 0.45 0.50 0.55 0.60 Total absorbance = 0.7164 AU ©2010 Nihon Waters K.K. 55 0.00 0.05 0.10 0.15 Minutes 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 50%の値が化合物が溶出する移動相組成として最も近い値 – ミキサー容量の違い（長い／細い vs. 短い/太い）を大きく表す

デュエルボリュームの測定

0.70

Programmed time = 5.00 minutes

5.69 min. - 5.00 min. 0.69 minutes 50% Time = 5.69 minutes AU 0.25 0.30 0.35 0.40 0.45 0.50 0.55 0.60 0.65 ©2010 Nihon Waters K.K. 56 0.00 0.05 0.10 0.15 0.20 Minutes 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 デュエルボリューム: 0.69 min x 1.5 mL/min = 1.04 mL

(29)



分析法のバリデーション

Appendix2

分析法は頑健か？

ウォーターズ品質システム

リスクを最小限にして信頼性の高いカラム性能を得るために



ウォーターズはシリカおよびハイブリッドカラムを

パーティクルから製造するメーカー



全ての最新クロマトグラフィー充てん剤は開始

モノマーから最終製品まで製造プロセスを一

貫して管理



プロセスの変動に影響を与えるパラメータを

より正確に把握するためにあえて1～2kgと

いう少量のバッチで充てん剤を製造



製造施設はcGMP、 ISO9001、

ISO13485 認定

(30)

 ウォーターズはバッチ間再現性の業界基準を確立

品質システム

リスクを最小限にして信頼性の高いカラム性能を得るために

 主要なパラメータを厳密に監視することで、何年先でも繰り返し再現性良く今日と同じデータを実現可能な製品を提供  クロマトグラフィー媒体のバッチ間やカラム間でのばらつきのために起こる ©2010 Nihon Waters K.K. 59 カラム間でのばらつきのために起こる差異による分析法変動のリスクを最小限に  ACQUITY UPLC®_{メソッドバリ} デーションキットは、分析法の品質、信頼性、一貫性を判定するために

品質システム

リスクを最小限にして信頼性の高いカラム性能を得るために

異なる LC 間での分析法移管のポイント : HPLC UPLC 間のシームレスな分析法移管 日本ウォーターズ株式会社 ケミストリーソリューションセンター 分析展 2010/ 科学機器展 2010 新技術説明会 9 月 2 日 13:45~14: Nihon Waters K.K. 分

異なる

LC間での分析法移管のポイント：

HPLC⇔UPLC

間のシームレスな分析法移管

日本ウォーターズ株式会社

ケミストリーソリューションセンター

ケミストリ ソリュ ションセンタ

分析法移管の種類

分析法移管の種類



LC装置間での移管



分析法の調整



分析法の変更

良好な分析法移管

良好な分析法移管

分析法移管プロセス

分析法移管プロセス

::

成功の鍵

成功の鍵



移管後の分析法では重要なパラメータが担保されなければならない



必要条件

変更のための提案

変更のための提案

分析法移管プロセス

分析法移管プロセス

::

成功へのステップ

成功へのステップ



既存分析法および結果に関しての情報を収集



既存分析法の保持力および選択性を担保する

LCカラムを選択



LC装置を比較してデュエルボリュームの違いを補正



選択性が維持されるようにカラムボリュームに比例して既存分析法から目的の

分析法にスケ リング

分析法にスケーリング



移管後の分析結果の評価



必要に応じて最適化

必要な情報

必要な情報

既存分析法、結果、

既存分析法、結果、 基準

基準



カラム



クロマトグラム



LC分析条件



定量



サンプル

分析法移管プロセス

分析法移管プロセス

::

成功へのステップ

成功へのステップ



既存分析法および結果に関しての情報を収集



既存分析法の保持力および選択性を担保する

LCカラムを選択



LC装置を比較してデュエルボリュームの違いを補正



選択性が維持されるようにカラムボリュームに比例して既存分析法から目的の

分析法にスケ リング

分析法にスケーリング

異なる LC 間での分析法移管のポイント : HPLC UPLC 間のシームレスな分析法移管日本ウォーターズ株式会社ケミストリーソリューションセンター分析展 2010/ 科学機器展 2010 新技術説明会 9 月 2 日 13:45~14: Nihon Waters K.K. 分

_{間のシームレスな分析法移管}

ケミストリソリュションセンタ

分析法にスケリング

既存分析法、結果、基準

分析法にスケリング

_⇔

_⇔

_HPLC

_HPLC

_{カラムラインアップ}

_{カラムラインアップ}

_{テクノロジー概要}

_{テクノロジー概要}

_{テクノロジーは酸性低イオン強度の移動相使用に起因する問題を克服}

_CSH

_および

_XSelect

_{カラムは、ウォーターズが今までに発売}

_{テクノロジーは、お客様のご意見を伺った結果として開発されたテクノロ}

する実用的なソリュション

_{テクノロジーの利点例}

_{テクノロジーの利点例}

_{テクノロジー利点例}

_{テクノロジー利点例}