抗ＰＣＮＡ抗体を用いた免疫組織化学的検索による脳腫瘍の増殖能についての研究

208 （88） 氏名（生年月日） 本　　　　．籍

学位の種類

学位授与の番号 学位授与の日付 学位授与の要件

学位論文題目

論文審査委員

タ　　　　ジカ　　　　　ヤス　　　ピコ

田鹿安彦（昭和2

博士（医学） 乙鳥1434号

平成6年2月18日

学位規則第4条第2項該当（博士の学位論文提出者）

抗PCNA抗体を用いた免疫組織化学的検索による脳腫瘍の増殖能についての

　研究 （主査）教授　高倉　公朋 （副査）教授　丸山　勝一，内山　竹彦

論　文　内　容　の　要　旨

　目的 　脳腫瘍の治療，予後を考える上でその増殖能を知る ことは重要であるが，手術材料でそれを簡便に知る良 い方法は十分に開発されていない．DNA合成に関与 するDNA　polymerase　deltaの補助因子である36KD 非ピストン核蛋白の増殖細胞核抗原proliferating　cell nuclear　antigen（PCNA）は，増殖細胞の核に認めら

れ，抗PCNA抗体を用いることでホルマリン固定パ

ラフィン包埋切片でも免疫染色が可能であると報告さ れている．本研究は脳腫瘍の手術標本を対象とし，抗 PCNA抗体（PC10）を用いた免疫染色で脳腫瘍の増殖 能，各腫瘍組織での差異，組織学的悪性度等について 検討し，臨床的に脳腫瘍の増殖能や悪性度を簡便に測 定する方法を開発することを目的とした． 　対象および方法 　脳腫瘍の手術による摘出標本80例を対象とした．腫 瘍の内訳は神経上皮由来腫瘍43例，非神経上皮由来腫 瘍33例，転移性脳腫瘍4例であった．摘出標本は20％ ホルマリンに固定しパラフィン包埋切片を作製した．

固定期間は大部分は2日間以内であった．抗PCNA

抗体（PC10）．を1：100に希釈し，室温にて1時間反応 させavidin　biotin　peroxidase　complex法で免疫染色 を行った．腫瘍細胞を1，000～2，000個数え陽性率 PCNA　indexを算出した．47例は凍結切片でKi－67染 色を行い比較した． 　結果および考察

　PCNAは腫瘍細胞の核に染まっていた．各腫瘍の

PCNA　indexは悪性の腫瘍ほど高値で，　glioblastoma 33．6％，anaplastic　astrocytoma　16．1％，medulloblas－ toma　38．3％，　hemangiopericytoma　42％，　germinoma 54．5％，malignant　lymphoma　46％，　metastatic　brain tumor　68．8％であり，10w　grade　astrocytoma，　epen－ dymoma，　schwannoma，　meningiomaなどでは低値で あった．gliomaにおいてはPCNA　indexはgradeに 相関し，PCNA　index　12％以上の群は12％未満の群よ り有意に生命予後は不良であった．このことから PCNA　indexは臨床病理学的悪性度を考える上で非 常に有用であると思われた．Ki－67染色との比較では相 関がみられたが，PCNA　indexの方が高値となる傾向 がみられた．PCNAの性状や代謝の変化も考えられる が，G1期からS期，　G2期，　M期にもPCNAの発現の 可能性が考えられた． 　結論 　抗PCNA抗体（PC10）は，ホルマリン固定パラフィ ン包埋切片でも染色性にすぐれ通常の手術材料を広く 利用でき，またHE染色と連続切片上で各種の部位を 検索でき，組織多様性をみるうえで非常に有用である． 　PCNAの染色性は腫瘍の悪性度に比例して強まり，

特にgliomaではPCNA　indexが12％以上のものは

予後不良であった． 　Ki－67染色と比較するとPCNA染色の方が陽性率が

高い傾向であった．PCNAはG1期からS期以外にも

発現している可能性が考えられた． 　これらより本検査法が脳腫瘍の増殖能や悪性度を調 一814一

209 べるうえで，一臨床応用できる簡便な信頼度の高い検査 法であることを明らかにした．

論　文　審　査　の　要　旨

　脳腫瘍の悪性度または増殖能を調べることはその治療法の選択に重要な意義を持っている．そのために，従 来は，手術時に得られた組織を培養し分裂細胞の比率（mitotic　index）を測定する等の方法が一般的に用いら れていた．本研究はこのような複雑な検査法を簡単かつ正確にするため，通常のホルマリン固定パラフィン包 埋切片で増殖細胞核抗原proliferating　cell　nuclear　antigen（PCNA）抗体を用い，各種の脳腫瘍を分析し， その増殖能と予後の関係を詳細に分析し，この検査法の一般臨床への応用価値を明らかにした．学術上並びに 臨床上価値ある研究と認める． 主論文公表誌 抗PCNA抗体を用いた免疫組織化学的検索による 　脳腫瘍の増殖能についての研究

　　東京女子医科大学雑誌第63巻第11号

　　1324－1334頁（平成5年11月25日発行）田鹿安彦 副論文公表誌 1）Rathke’s　cleft　cystを含む5例の下垂体部嚢腫 　　の臨床病理像．脳外　10（10）：1055－1064（1982） 　　田鹿安彦，久保長生，神谷増三，氷室　博，別 　　府俊男，沖野光彦，喜多村孝一 2）小児頭蓋内Germ　cell　tumorのびまん性発育お

　　よび転移例の臨床病理像．脳外12（2）：

　　16H68（1984）田鹿安彦，久保長生，氷室　博， 　　井上憲夫，神谷増三，本阿弥妙子，遠山　隆， 　　吉田伸子，喜多村孝一 3）Epe且dymomaの免疫組織化学的検討．脳腫瘍 　　病理　5（1）：13－18（1988）田鹿安彦，久保長 　　生，氷室　博，井上憲夫，田鹿妙子，遠山　隆， 　　坂入光彦，喜多村孝一 4）Intrasellar　gangliocytomaとpituitary　adenoma 　　の合併例．脳外　17（12）：1181－1186（1989） 　　田鹿安彦，久保長生，竹下幹彦，田鹿妙子，清

　　水干，喜多村孝一

5）Metastatic　adenocarcinoma　in　cerebral 　　astrocytoma：clinicopathological　and　im一 　munohistochernical　study　with　review　of　the 　literature（大脳星細胞腫内にみられた転移性腺 　癌一臨床病理学的および免疫組織化学的研究と 　文献的考察）．Acta　Neurochir（Wien）105： 　50－55（1990）Tajika　Y，　Reifenberger　G，　Kiwit 　JCW，　Wechsler　W 6）Ultrastructural　study　of　the　fourth　ventricle

　ependymoma　with　a　subependymomatous

　component　ln　childhood（上皮下潮を伴った小 　児第4脳室上皮腫の電子顕微鏡的検索）．JCIin 　Electron　Microsc　25（5－6）：604－605（1992） 　Talika　Y，　Kubo　O，　Kawarnura　H，　Ara　T

7）悪性神経膠腫におけるGFAP染色性とその臨

　床病態．脳外　14（7）：831－835（1986）田鹿妙 　子，久保長生，田鹿安彦，遠山　隆，氷室　博， 　井上憲夫，坂入光彦，喜多村孝一 8）徐放性制癌剤複合体による悪性脳腫瘍の治療に 　関する研究．脳外　14（10）：1189－1195（1986） 　久保長生，氷室　博，井上憲夫，田鹿安彦，田 　鹿妙子，遠山　隆，坂入光彦，喜多村孝一，吉 　田　勝，嘉悦　勲 9）Oligodendrogliomaの免疫組織化学的検索と

　臨床像について．脳外　16（9）：

　1029－1035（1988）久保長生，田鹿安彦，遠山　隆， 　田鹿妙子，坂入光彦，片平真佐子，喜多村孝一 一815一