化学応用部門

(1)

化学応用部門 Department

o f N a t u r a l P r o d u c t s C h e m i s t r y

教授門田重利 Professor

S h i g e t o s h i K a d o t a ( P h . D . )

助教授手塚康弘 Associate

P r o f e s s o r Y a s u h i r o Tezuka ( P h . D . )

助手

A.H. Banskota A s s i s t a n t P r o f e s s o r A . H . B a n s k o t a ( P h . D . )

技官幸田恭治 Res倒的 Assistant

K y o j i Kouda ( P h . D . )

く〉研究目的

Aims of t h e r e s e a r c h p r o j e c t s

本部門は，化学的手法を応用する和漢薬の基礎研究として，天然薬物を中心とする生理活性分子の医薬化学的及び生物有機化学的研究を行っている。この目的で，天然薬物の成分単離，構造解析，

合成等の，和漢薬成分に関する化学的研究を行う。さらに，その過程で構造が明らかとなる天然、薬物成分につき，その構造・活性相関，構造・機能相関の化学的解明に取り組んでいる O

本年度の主な研究課題は下記の通りである。

く〉研究概要

Research p r o j e c t s

I. 天然、薬物成分の科学的研究

東南アジア（インドネシア，ネパール，ベトナム，タイ，ミャンマ一等）の薬用植物

II. 和漢薬成分の医薬化学

1. 羅布麻，プロポリスから単離した生理活性成分の合成 2. 肝臓病や骨組懸症に有効な天然、薬物成分の開発研究

3. マトリックスメタロプロテアーゼ産生阻害を有する天然、薬物成分の研究 4. 紅豆杉の活性成分の研究

III. 漢方製剤の品質評価法

1. 通関丸，桃核承気湯，当帰飲子など 2. 基源植物， fll治生薬のLC

IV. 和漢薬成分の生物有機化学的研究

ベルベリン，ベトナム人参， CAPE類縁体，キナ酸誘導体，カリクシン類，花椴成分など

v. 天然薬物調査

ベトナム，ミャンマー，ブラジルなど

上記の研究課題によって得られた本年度の成果（原著及び学会報告）は下記の通りである。

(2)

く〉著書 Books

1 ）「和漢薬の辞典」（分担），富山医科薬科大学和漢薬研究所（編集），難波恒雄（監修），朝倉書店，東京，

2002年 6 月（門田，手塚）．

く〉原著論文

O r i g i n a l p a p e r s

1) Yuan Z . , Tezuka Y . , Fan W., Kadota S . , and L i X . : Constituents of t h e Underground Parts of G l e h n i a l i t t o r a l i s . Chem. Pharm. B u l l . , 5 0 , 7 3 ‑77 ( 2 0 0 2 ) .

A b s t r a c t : From t h e u n d e r g r o u n d p a r t s o f G l e h n i a l i t t o r a l i s F R . ScHMIDT e x MIQUEL ( U m b e l l i f e r a e ) , t w e n t y ‑ s i x comｭ p o u n d s , i n c l u d i n g two new l i g n a n g l y c o s i d e s [ g l e h l i n o s i d e s A ( 1 ) a n d B ( 2 ) ] , a new n e o l i g n a n g l y c o s i d e [ g l e h l i n o s i d e C ( 3 ) ] , a new p h e n y l p r o p a n o i d g l y c o s i d e

[4・［βーo-apiofuranosy

1 ‑ (

1 →6）－ β－o-glucopyranosyloxy

] ‑ 3 ‑ m e t h o x y p r o p i o p h e n o n e ( 4 ) ] , w e r e o b t a i n e d a n d t h e i r s t r u c t u r e s w e r e d e t e r m i n e d by a n a l y s i s o f t h e i r s p e c t r a l d a t a . The DPPH r a d i c a l s c a v e n g i n g a s s a y d i s c l o s e d q u e r c e t i n ( 8 ) , i s o q u e r c e t i n ( 9 ) , r u t i n ( 1 0 ) , c h l o r o g e n i c a c i d ( 1 1 ) , a n d c a f f e i c a c i d ( 2 4 ) a s t h e m a j o r a n t i o x i d a t i v e c o n s t i t u e n t s i n t h i s c r u d e d r u g .

2) Awale S . , Tezuka Y . , Shimoji S . , Taira K . , and Kadota S . : Secoorthosiphols A‑C; Three Highly Oxygenated

Secoisopimarane・type

Diterpenes From O r t h o s i p h o n s t a m i n e u s . T e t r a h ! ! d r o n L e t t . , 4 3 , 1473・ 1475 ( 2 0 0 2 ) .

A b s t r a c t : T h r e e new h i g h l y o x y g e n a t e d 2 , 3 ‑ s e c o i s o p i m a r a n e ‑ t y p e d i t e r p e n e s , named s e c o o r t h o s i p h o l s A ( 1 ) , B ( 2 ) a n d C ( 3 ) , h a v e b e e n i s o l a t e d a s e x t r e m e l y m i n o r c o n s t i t u e n t s f r o m t h e a e r i a l p a r t s o f t h e O r t h o s i p h o n s t a m i n e u s f r o m O k i n a w a . A u n i q u e u n p r e c e d e n t e d s t r u c t u r a l f e a t u r e o f s u c h a r i n g A o p e n e d s y s t e m i n n e w l y i s o l a t e d comｭ p o u n d s was e n c o u n t e r e d f o r t h e f i r s t t i m e i n i s o p i m a r a n e ‑ t y p e d i t e r p e n e s . S e c o o r t h o s i p h o l C ( 3 ) r e p r e s e n t s t h e f i r s t e x a m p l e o f a b i o g e n e t i c a l l y u n i q u e a n d u n c o n v e n t i o n a l s e c o i s o p i m a r a n e ‑ t y p e d i t e r p e n e h a v i n g a c y a n o g r o u p .

3) Banskota A. H . , Nagaoka T . , Sumioka L . Y . , Tezuka Y . , Awale S . , Midorikawa K . , Matsushige K . , and Kadota S . : A n t i ‑ p r o l i f e r a t i v e a c t i v i t y of t h e Netherlands p r o p o l i s and i t s a c t i v e p r i n c i p l e s i n cancer c e l l l i n e s . J . E t h n o p h a r m a c o l . , 8 0 , 6 7 ‑73 ( 2 0 0 2 ) .

A b s t r a c t : The MeOH e x t r a c t o f t h e N e t h e r l a n d s p r o p o l i s showed p r o m i s i n g a n t i p r o l i f e r a t i v e a c t i v i t y t o w a r d h i g h l y m e t a s t a t i c l i v e r m u r i n e c o l o n 2 6 ‑ L 5 c a r c i n o m a w i t h a n E C s o v a l u e o f 3 . 5 ｵ g l m L . F u r t h e r , a n t i p r o l i f e r a t i v e a c t i v i t y ｭ g u i d e d p u r i f i c a t i o n o f t h e MeOH e x t r a c t l e d u s t o i s o l a t e f o u r f l a v o n o i d s ( 1 ‑ 4 ) , s e v e n c i n n a m i c a c i d d e r i v a t i v e s ( 5 ‑ 1 1 ) a n d two new g l y c e r o l d e r i v a t i v e s ( 1 2 , 1 3 ) , whose s t r u c t u r e s w e r e e l u c i d a t e d on t h e b a s i s o f s p e c t r a l a n a l y s i s . The i s o l a t e d compounds w e r e t e s t e d f o r t h e i r a n t i p r o l i f e r a t i v e a c t i v i t y a g a i n s t m u r i n e c o l o n 2 6 ‑ L 5 , m u r i n e B 16‑BL6 m e l a n o m a , human HT‑1080 f i b r o s a r c o m a a n d human l u n g A549 a d e n o c a r c i n o m a c e l l l i n e s . The b e n z y l ( 9 ) , p h e n e t h y l ( 1 0 ) a n d c i n n a m y l c a f f e a t e s ( 1 1 ) p o s s e s s e d p o t e n t a n t i p r o l i f e r a t i v e a c t i v i t i e s w i t h E C s o v a l u e s o f 0 . 2 8 8 , 1 . 7 6 a n d O . l 14ｵM, r e s p e c t i v e l y , t o w a r d c o l o n 2 6 ‑ L 5 c a r c i n o m a . T h e s e c a f f e a t e s w e r e c o n s i d e r e d t o b e a c t i v e c o n ｭ s t i t u e n t s o f t h e N e t h e r l a n d s p r o p o l i s i n t h e i r a n t i p r o l i f e r a t i v e a c t i v i t y . The a n t i o x i d a t i v e a c t i v i t y o f t h e s e c a f f e a t e s may p l a y a n i m p o r t a n t r o l e i n t h e i r a n t i p r o l i f e r a t i v e a c t i v i t i e s .

4) A wale S . , Tezuka Y . , Banskota A. H . , Kouda K . , Tun K. M., and Kadota S . : Four Highly Oxygenated Isopimarane‑Type Diterpenes of O r t h o s i p h o n s t a m i n e u s from Myanmar. P l a n t a Med., 6 8 , 286・288 ( 2 0 0 2 ) .

A b s t r a c t : F o u r h i g h l y o x y g e n a t e d i s o p i m a r a n e ‑ t y p e d i t e r p e n e s , named o r t h o s i p h o l s 0, P a n d Q a n d n o r o r t h o s i p h o ｭ

n o l i d e A , h a v e b e e n i s o l a t e d f r o m t h e a e r i a l p a r t s o f O r t h o s i p h o n s t a m i n e u s f r o m Myanmar, t o g e t h e r w i t h t h r e e

known d i t e r p e n e s , o r t h o s i p h o l s D a n d E a n d o r t h o s i p h o n o n e A . T h e i r s t r u c t u r e s w e r e d e t e r m i n e d on t h e b a s i s o f e x ｭ

t e n s i v e s p e c t r a l a n a l y s i s . A l l t h e i s o l a t e d compounds d i s p l a y e d m i l d a n t i p r o l i f e r a t i v e a c t i v i t i e s a g a i n s t h i g h l y l i v e r

m e t a s t a t i c c o l o n 2 6 ‑ L 5 c a r c i n o m a a n d human HT‑1080 f i b r o s a r c o m a c e l l l i n e s

(3)

5) Akihisa T . , Wijeratne E. M. K . , Tokuda H . , Enjo F . , Toriumi M., Kimura Y . , Koike K . , Nikaido T . , Tezuka Y . , and Nishino H . :

Eupha・7,9(11),24・trien・3β ・ol

(” Antiquol C ”) and Other Triterpenes from E u p h o r b i a a n t i q u o r u m Latex and Their I n h i b i t o r y E f f e c t s on Epstein‑Barr Virus A c t i v a t i o n . J .

Naι Prod.,

6 5 , 158‑162 ( 2 0 0 2 ) .

A b s t r a c t : The s t r u c t u r e s o f t h r e e t r i t e r p e n e a l c o h o l s i s o l a t e d from t h e l a t e x o f Euphorbia a n t i q u o r u m w e r e e s t a b ｭ l i s h e d t o be e u p h a ‑ 7 , 9 ( 1 1 ) , 2 4 ‑ t r i e n ‑ 3 , 8 ‑ o l ( 2 ; a n t i q u o l C ) , 19(10 → 9)abeo-8α，9,8,10α制eupha-5,24-dien-3,8-ol ( 3 ; a n t i q u o l B ) , a n d 24-methyleupha・8,24(241 ）ーdien-3β－ol ( 4 ; e u p h o r b o l ) on t h e b a s i s o f s p e c t r o s c o p i c m e t h o d s . Componds 3 a n d 4 h a v e p r e v i o u s l y b e e n a s s i g n e d t h e

e汀oneous

s t r u c t u r e s o f

10α－cucurbita-5,24-dien-3a-ol

a n d 2 4 ‑ me t h y leupha-8,24(241 ）ーdien-3,8-ol, r e s p e c t i v e l y . Compounds 2 ‑ 4 a n d f o u r o t h e r known compounds i s o l a t e d from t h e l a t e x , e u p h o l ( 1 ) , lemmaphylla-7,21-dien-3βーol ( 5 ) , i s o h e l i a n o l ( 6 ) , a n d c a m e l l i o l C ( 7 ) , showed p o t e n t i n h i b i t o r y e f ｭ f e c t s on E p s t e i n ‑ B a r r v i r u s e a r l y a n t i g e n (EBY‑EA) a c t i v a t i o n i n d u c e d by t h e t u m o r p r o m o t e r 12

^”

0- t e t r a d e c a n o y l p h o r b o l ‑ 1 3 ‑ a c e t a t e (TP A ) .

6) Awale S . , Tezuka Y . , Wang S . , and Kadota S . : F a c i l e and R e g i o s e l e c t i v e Synthesis of Phenylpropanoid‑Substituted

Flavan・3・ols.

O r g . L e t t . , 4 ,

1707・1709

( 2 0 0 2 ) .

A b s t r a c t : A . h i g h l y e f f i c i e n t , f a c i l e , o n e ‑ p o t r e g i o s e l e c t i v e s y n t h e s i s o f a s e r i e s o f

phenylpropanoid~substituted flavan-3・ols

i s d e s c r i b e d . The mechanism i n v o l v e s d i e n o n e ‑ p h e n o l r e a r r a n g e m e n t f o l l o w e d by a M i c h a e l ‑ t y p e r e a c ｭ t i o n .

7) Usia T . , Banskota A. H . , Tezuka Y . , Midorikawa K . , Matsushige K . , and Kadota S . : Constituents of Chinese Propolis and Their Antipr叫iferative A c t i v i t i e s . J . N a t . P r o d . , 6 5 , 673・

676 ( 2 0 0 2 ) .

A b s t r a c t : Two new f l a v o n o i d s , 3 ‑ 0 ‑ [ ( S ) ‑ 2 ‑ m e t h y l b u t y r o y l ] p i n o b a n k s i n ( 1 ) a n d 6 ‑ c i n n a m y l ‑ c h r y s i n ( 2 ) , w e r e i s o ｭ l a t e d from t h e E t O A c ‑ s o l u b l e f r a c t i o n o f t h e MeOH e x t r a c t o f C h i n e s e p r o p o l i s , a l o n g w i t h 1 2 known compounds ( 3 ‑ 1 4 ) . The s t r u c t u r e s o f t h e i s o l a t e d compounds w e r e e l u c i d a t e d on t h e b a s i s o f s p e c t r o s c o p i c a n d c h e m i c a l a n a l y ｭ s e s . The i s o l a t e d compounds w e r e t e s t e d f o r t h e i r a n t i p r o l i f e r a t i v e a c t i v i t y t o w a r d f i v e d i f f e r e n t c a n c e r c e l l l i n e s . B e n z y l c a f f e a t e ( 1 3 ) a n d p h e n e t h y l c a f f e a t e ( 1 4 ) showed p o t e n t a n t i p r o l i f e r a t i v e a c t i v i t y t o w a r d t e s t e d c e l l l i n e s w i t h a s e l e c t i v e a c t i v i t y t o w a r d c o l o n 2 6 ‑ L 5 c a r c i n o m a c e l l l i n e ( E C s o v a l u e s : 1 3 , 1 . 0 1 ; 1 4 , 0 . 3 0 ｵM).

8) Ueda J . , Tezuka Y . , Banskota A. H . , Tran Q. L . , Tran Q. K . , Harimaya Y . , S a i k i I . , and Kadota S . : Anti

pr叫iferative

A c t i v i t y of Vietnamese Medicinal P l a n t s . B i o l . Pharm. B u l l . , 2 5 ,

753・760 ( 2 0 0 2 ) .

A b s t r a c t : M e t h a n o l , m e t h a n o l ‑ w a t e r ( 1 : 1 ) a n d w a t e r e x t r a c t s w e r e p r e p a r e d f r o m s e v e n t y ‑ s e v e n V i e t n a m e s e m e d i c i ｭ

n a l p l a n t s a n d ‑ t e s t e d f o r t h e i r a n t i p r o l i f e r a t i v e a c t i v i t i e s a g a i n s t human HT‑1080 f i b r o s a r c o m a c e l l s . Among t h e m ,

f i f t e e n e x t r a c t s i n c l u d i n g s e v e n m e t h a n o l e x t r a c t s o f

Caesαlpinia

s a p p a n , C a t h a r a n t h u s r o s e u s , C o s c i n i u m

f e n e s t r a t u m ,

Euηcoma

l o n g i f o l i a , Hydnophytumformicarum a n d S t r e p t o c a u l o n j u v e n t a s ( c o l l e c t e d a t two a r e a s ) , s i x

m e t h a n o l ‑ w a t e r ( 1 : 1 ) e x t r a c t s o f C a e . s a p p a n , C a t . r o s e u s , C o . f e n e s t r a t u m , H. formicarum a n d S . j u v e n t a s ( a t two

a r e a s ) , a n d two w a t e r e x t r a c t s o f C a e . sappan a n d S . j u v e n t a s e x h i b i t e d a n t i p r o l i f e r a t i v e a c t i v i t i e s i n a c o n c e n t r a t i o n ｭ

d e p e n d e n t m a n n e r . T h e i r a n t i p r o l i f e r a t i v e a c t i v i t i e s a g a i n s t human c e r v i x HeLa a d e n o c a r c i n o m a , human l u n g A549

a d e n o c a r c i n o m a , m u r i n e c o l o n 2 6 ‑ L 5 c a r c i n o m a , m u r i n e L e w i s l u n g c a r c i n o m a (LLC) a n d m u r i n e B 16‑BL6 m e l a ｭ

noma c e l l s w e r e t h e n e x a m i n e d . C o . f e n e s t r a t u m showed s e l e c t i v e a c t i v i t y a g a i n s t l u n g c a r c i n o m a a n d / o r l u n g

m e t a s t a t i c c e l l l i n e s , A549, LLC a n d B16‑BL6, w h i l e H. formicarum a n d S . j u v e n t a s showed s e l e c t i v e a c t i v i t y

a g a i n s t human t u m o r c e l l l i n e s , HeLa a n d A 5 4 9 . C h a r a c t e r i s t i c m o r p h o l o g i c a l c h a n g e a n d DNA f r a g m e n t a t i o n i n d i ｭ

c a t e d t h e a n t i p r o l i f e r a t i v e a c t i v i t y t o b e due t o t h e i n d u c t i o n o f a p o p t o s i s .

(4)

9) Tran Q. L . , Adnyana I K . , Tezuka Y . , Harimaya Y . , S a i k i I . , Tran Q. K . , and Kadota S . : Hepatoprotective E f f e c t o f Majonoside R2, The Major Saponin from Vietnamese Ginseng (Panax v i e t n a m e n s i s ) . Planta Med., 6 8 , 402‑406 ( 2 0 0 2 ) .

A b s t r a c t : The h e p a t o p r o t e c t i v e e f f e c t o f

m勾onoside

R z ( M R 2 ) , t h e m a j o r s a p o n i n c o n s t i t u e n t f r o m V i e t n a m e s e g i n ｭ s e n g ( P a n a x v i e t n a m e n s i s , A r a l i a c e a e ) , was e v a l u a t e d i n νivo on D ‑ g a l a c t o s a m i n e ( n ‑ G a l N ) / l i p o p o l y s a c c h a r i d e ( L P S ) ‑ i n d u c e d h e p a t i c a p o p t o s i s a n d s u b s e q u e n t l i v e r f a i l u r e i n m i c e . P r e t r e a t m e n t o f m i c e w i t h MR2 ( 5 0 o r 1 0 m g / k g , i n t r a p e r i t o n e a l ) a t 1 2 a n d 1 h b e f o r e n‑GalN/LPS

i吋ection

s i g n i f i c a n t l y i n h i b i t e d a p o p t o s i s a n d s u p p r e s s e d f o l l o w i n g h e p a t i c n e c r o s i s . I m p o r t a n t l y , t h e e l e v a t i o n o f s e r u m t u m o r n e c r o s i s f a c t o r ‑ a l p h a

(TNF－ α ）

l e v e l , a n i m ｭ p o r t a n t m e d i a t o r f o r a p o p t o s i s i n t h i s m o d e l , was s i g n i f i c a n t l y i n h i b i t e d by MR2 a t a d o s e o f 50 m g / k g . On t h e o t h e r h a n d , MR2 was f o u n d t o p r o t e c t

prim訂y

c u l t u r e d mouse h e p a t o c y t e s f r o m c e l l d e a t h by i n h i b i t i n g a p o p t o s i s i n d u c e d by

n-GalNffNF－ α in νitro,

a s e v i d e n c e d by DNA f r a g m e n t a t i o n a n a l y s i s . T h e s e f i n d i n g s s u g g e s t e d t h a t MR2 may h a v e p r o t e c t e d t h e h e p a t o c y t e s f r o m a p o p t o s i s v i a a n i n h i b i t i o n o f TNF－ αproduction by a c t i v a t e d m a c r o p h a g e s a n d a d i r e c t i n h i b i t i o n o f a p o p t o s i s i n d u c e d by

TNF－ α ．

1 0 ) Awale S . , Tezuka Y . , Banskota A.H., Shimoji S . , Taira K . , and Kadota S . : Norstaminane‑and Isopimarane‑type Diterpenes of O r t h o s i p h o n s t a m i n e u s from Okinawa. T e t r a h e d r o n , 5 8 ,

5503・

5512 ( 2 0 0 2 ) .

A b s t r a c t : N i n e n o v e l h i g h l y ‑ o x y g e n a t e d a n d s t r u c t u r a l l y d i v e r s e d i t e r p e n e s , named n o r s t a m i n o l a c t o n e A ( 1 ) , n o r s t a m i n o l s B a n d C ( 2 a n d 3 ) , s e c o o r t h o s i p h o l s A‑C ( 4 ‑ 6 ) a n d o r t h o s i p h o l s R‑T ( 7 ‑ 9 ) h a v e b e e n i s o l a t e d f r o m t h e a e r i a l p a r t o f O r t h o s i p h o n s t a m i n e u s c u l t i v a t e d i n Okinawa P r e f e c t u r e , J a p a n . N o r s t a m i n o l a c t o n e A ( 1 ) i s t h e f i r s t r e p r e s e n t a t i v e o f a b i o g e n e t i c a l l y u n u s u a l n o r s t a m i n a n e ‑ t y p e d i t e r p e n e b e a r i n g a n i t r o g e n a t o m . N o r s t a m i n o l C ( 3 ) p o s s e s s e d a f r a m e w o r k p r e s u m e d t o b e b i o s y n t h e s i z e d f r o m t h e s t a m i n a n e ‑ t y p e d i t e r p e n e . S e c o o r t h o s i p h o l s A‑C ( 4 ‑ 6 ) p o s s e s s e d a n u n p r e c e d e n t e d s t r u c t u r a l f e a t u r e o f t h e o p e n e d r i n g A s y s t e m , e n c o u n t e r e d f o r t h e f i r s t t i m e i n i s o p i m a r a n e ‑ t y p e d i t e r p e n e s . S e c o o r o t h o s i p h o l C ( 6 ) a l s o r e p r e s e n t s t h e f i r s t e x a m p l e o f b i o g e n e t i c a l l y u n i q u e a n d u n c o n v e n t i o n a l s e c o i s o p i m a r a n e ‑ t y p e d i t e r p e n e b e a r i n g a c y a n o g r o u p . N o r s t a m i n o l a c t o n e A ( 1 ) showed a p o t e n t a n t i p r o l i f e r a t i v e a c t i v i t y w i t h a n I C s o v a l u e o f 2 . 1 6

µgin止 against

h i g h l y l i v e r m e t a s t a t i c c o l o n 2 6 ‑ L 5 c a r c i n o m a c e l l l i n e .

1 1 ) Hasegawa H . , Suzuki R . , Nagaoka T . , Tezuka Y . , Kadota S . , and S a i k i I . : Prevention of Growth and Metastasis of Murine Melanoma through Enhanced N a t u r a l ‑ K i l l e r C y t o t o x i c i t y by Fatty Acid‑Conjugate of P r o t o p a n a x a t r i o l . B i o l . Pharm. B u l l . , 2 5 , 861・866 ( 2 0 0 2 ) .

1 2 ) Mook‑Jung I . , Kim H . , Fan W., Tezuka Y . , Kadota S . ,

Nish泊o

H . , and Jung M. W.:

N e u r o p r o t e c t i v e e f f e c t s o f c o n s t i t u e n t s o f O r i e n t a l crude d r u g s , R h o d i o l a s a c r a , R . s a c h a l i n e n s i s and T o k a k u ‑ j o k i ‑ t o , a g a i n s t beta‑amyloid t o x i c i t y , o x i d a t i v e s t r e s s and a p o p t o s i s . B i o l . Pharm. B u l l . , 2 5 , 1101・ 1104 ( 2 0 0 2 ) .

A b s t r a c t : We t e s t e d t h e c o n s t i t u e n t s o f two R h o d i o l a p l a n t s , R h o d i o l a s a c r a S . H . Fu a n d R . s a c h a l i n e n s i s A . B o r , a n d a n O r i e n t a l c r u d e d r u g , T o k a k u ‑ j o k i ‑ t o , f o r t h e i r n e u r o p r o t e c t i v e e f f e c t s . Of t h e 5 8 compounds t e s t e d , s i x h a d c o n s i d e r a b l e p r o t e c t i v e e f f e c t s a g a i n s t b e t a ‑ a m y l o i d ‑ i n d u c e d c e l l d e a t h , a n d two o f t h e s i x compounds p r o t e c t e d n e u ｭ r o n s f r o m H 2 0 2 ‑ i n d u c e d c e l l d e a t h . T h e s e r e s u l t s s u g g e s t t h a t some o f t h e t e s t e d compounds p r o t e c t n e u r o n s f r o m b e t a ‑ a m y l o i d t o x i c i t y b a s e d o n a n t i a p o p t o t i c a n d a n t i o x i d a t i v e a c t i v i t y .

1 3 ) Nagaoka T . , Banskota A. H . , Tezuka Y . , S a i k i I . , Kadota S . : S e l e c t i v e A n t i p r o l i f e r a t i v e A c t i v i t y of C a f f e i c Acid Phenethyl Ester Analogues on Highly L i v e r ‑ M e t a s t a t i c Murine Colon

26・L5 Carcinoma C e l l L i n e . B i o o r g . Med. Chem., 1 0 , 3351・3359 ( 2 0 0 2 ) .

(5)

A b s t r a c t : C a f f e i c a c i d p h e n e t h y l e s t e r (CAPE, 2 ) a n d i t s t w e n t y a n a l o g u e s ( l , 3 ‑ 2 1 ) w e r e p r e p a r e d . T h e s e e s t e r s were t e s t e d by MTT a s s a y on g r o w t h o f m u r i n e c o l o n

26・L5

c a r c i n o m a , m u r i n e B16‑BL6 malonoma, m u r i n e L e w i s l u n g c a r c i n o m a , human HT・ 1080 f i b r o s a r c o m a , human l u n g A549 a d e n o c a r c i n o m a , a n d human c e r v i x HeLa a d e n o c a r c i n o m a c e l l l i n e s . I t was f o u n d t h a t CAPE a n a l o g u e s p o s s e s s e d s e l e c t i v e a n t i p r o l i f e r a t i v e a c t i v i t y t o w a r d h i g h l y l i v e r ‑ m e t a s t a t i c m u r i n e c o l o n 2 6 ‑ L 5 c a r c i n o m a c e l l l i n e . Among t h e m , 4 ‑ p h e n y l b u t y l c a f f e a t e ( 4 ) , ( Z ) ‑ 8 ‑ p h e n y l ‑ 7 ‑ o c t e n y l ( l O a ) a n d

(E)ふphenyl-7-octenyl

( l O b ) c a f f e a t e showed t h e m o s t p o t e n t a n t i p r o l i f e r a t i v e a c t i v i t y ( E C s o v a l u e , 0 . 0 2 ｵ M ) . I n a d d i t i o n , CAPE ( 2 ) i n d u c e d DNA f r a g m e n t a t i o n a t c o n c e n t r a t i o n s o f 1 t o 1 0 ｵ g / m l t o ｭ w a r d s m u r i n e c o l o n 2 6 ‑ L 5 c a r c i n o m a c e l l s .

1 4 ) Tominaga K . , Higuchi K . , Hamasaki N . , Hamaguchi M . , Takashima T . , Tanigawa T . ,

1再ratanabe T . , Fujiwara Y . , Tezuka Y . , Nagaoka T . , Kadota S . , I s h i i E . , Kobayashi K . , and Arakawa T~ ： In v i v o a c t i v a t i o n of novel a l k y l methyl quinolone a l k a l o i d s a g a i n s t H e l i c o b a c t e r p y r o l i . J . A n t i m i c r o b . C h e m o t h e r . , 5 0 , 547・552 ( 2 0 0 2 ) .

A b s t r a c t : P r e v i o u s l y p u r i f i e d a n d i s o l a t e d compounds o f n o v e l a l k y l m e t h y l q u i n o l o n e a l k a l o i d s (AM q u i n o l o n e s ) from Gosyuyu ( W u ‑ C h u ‑ Y u ) , a C h i n e s e h e r b a l m e d i c i n e , h a v e a s t r o n g a n d h i g h l y s e l e c t i v e a n t i b a c t e r i a l a c t i v i t y a g a i n s t H e l i c o b a c t e r p y l o r i i n v i t r o . To c l a r i f y t h e a n t i b a c t e r i a l m e c h a n i s m ( s ) o f A M q u i n o l o n e s , we examined t h e e f f e c t s o f A M q u i n o l o n e s on r e s p i r a t i o n o f H. P y l o r i i n v i t r o . One week a f t e r t r e a t m e n t w i t h A M q u i n o l o n e s a l o n e ( 2 , 1 0 o r 20 m g / k g / d a y , o r a l l y ) o r c o m b i n a t i o n s o f A M q u i n o l o n e s a n d o m e p r a z o l e ( 3 0 m g / k g / d a y ) f o r H . P y l o r i ( l x 1 0 8 cfu）ーinfected M o n g o l i a n g e r b i l s , we c h e c k e d v i a b l e H . p y l o r i a n d m y e l o p e r o x i d a s e (MPO) a c t i v i t y i n t h e g a s ｭ t r i c t i s s u e s . A M q u i n o l o n e s d e c r e a s e d t h e number o f H . p y l o r i a n d i n h i b i t e d H . p y l o r i r e s p i r a t i o n i n a d o s e ｭ d e p e n d e n t m a n n e r . A M q u i n o l o n e s d e c r e a s e d t h e number o f v i a b l e H. p y l o r i (AM q u i n o l o n e s a l o n e : 46.0ｱ22.6x 1 0 4 , 1 7 . 3 ｱ 4 . 9 x l 0 4 a n d 8 . 1 ｱ 6 . 6 x l 0 4 c f u / s t o m a c h , r e s p e c t i v e l y ; a n d c o m b i n a t i o n s o f A M q u i n o l o n e s a n d o m e p r a z o l e : 8 . 0 ｱ 5 . 6 x l 0 4 ,

4.2 士 2.5xl04,

a n d 5 . 5 ｱ2.7xl04 c f u / s t o m a c h ) compared w i t h t h e v e h i c l e ‑ t r e a t e d g r o u p ( c o n t r o l : 3 5 9 . 9 ｱ 1 8 0 . 3 x l 0 4 c f u / s t o m a c h ) . A M q u i n o l o n e s s i g n i f i c a n t l y d e c r e a s e d MPO a c t i v i t y o f H . p y l o r i ｭ i n o c u l a t e d g a s t r i c t i s s u e s . T h e s e f i n d i n g s s u g g e s t t h a t A M q u i n o l o n e s h a v e a p o t e n t a n t i b a c t e r i a l e f f e c t a g a i n s t H . p y l o r i t h r o u g h r e s p i r a t o r y i n h i b i t i o n , a n d r e d u c e d b a c t e r i a l g r o w t h i n v i v o . A M q u i n o l o n e s m i g h t b e n o b e l t h e r a p e u ｭ t i c a g e n t s f o r H . p y l o r i e r a d i c a t i o n .

1 5 ) Banskota A.H., Usia T . , Tezuka Y . , Kouda K . , Nguyen N. T . , and Kadota S . : Three New

_C・14

Oxygenated Taxanes from t h e Wood of T a x u ̲ s yunnanensis. J . N a t . P r o d . , 6 5 , 1700・ 1702

( 2 0 0 2 ) .

A b s t r a c t : T h r e e new C‑14 o x y g e n a t e d t a x a n e ‑ t y p e d i t e r p e n e s , h o n g d o u s h a n s A‑C ( 1 ‑ 3 ) , w e r e i s o l a t e d f r o m t h e wood o f Taxus y u n n a n e n s i s t o g e t h e r w i t h f o u r known d i t e r p e n e s a n d two l i g n a n s . The a b s o l u t e s t e r e o c h e m i s t r y o f t h e 2 ‑ m e t h y l b u t y r y l o x y g r o u p a t t a c h e d a t C‑14 o f t h e t a x a n e s k e l e t o n was d e t e r m i n e d t o b e S by GC a n a l y s i s o f m e t h y l e s t e r o f 2 ‑ m e t h y l b u t y r i c a c i d o b t a i n e d a f t e r a l k a l i n e h y d r o l y s i s o f 1 a n d 4 f o l l o w e d by t r e a t m e n t w i t h

CH2N2・ The

c o m p l e t e s t e r e o s t r u c t u r e o f t h e known compound

2α5α， 10,8-triacetoxy-14β－［

( S ) ‑ 2 ‑ m e t h y l b u t y r y l o x y ] ‑

4(20),11 ・taxadiene

( 4 ) was e s t a b l i s h e d f o r t h e f i r s t t i m e . The i s o l a t e s o b t a i n e d w e r e e v a l u a t e d f o r t h e i r a n t i p r o l i f e r a t i v e a c t i v i t y t o w a r d s m u r i n e c o l o n 2 6 ‑ L 5 c a r c i n o m a a n d human HT‑1080 f i b r o s a r c o m a c e l l l i n e s .

16）金辰彦，門田重利， Banskota

A.

H.，山村重雄，百瀬弥寿徳、，佐治大介，石井権二：モルモット摘出回腸標本におけるステヒア発酵エキスの抗 histamine 作用．応用薬理， 62, 105・109

( 2 0 0 2 ) .

A b s t r a c t :

Steνia

r e b a u d i a n a B e r t o n i i s a s h r u b g r o w i n g o r i g i n a l l y i n P a r a g u a y . The l e a v e s o f t h i s p l a n t c o n t a i n

s t e v i n o s i d e , a s w e e t c o n s t i t u e n t which i s 300 t i m e s a s s w e e t a s s u c r o s e . R e c e n t l y , t h i s e x t r a c t s i s c l i n i c a l l y u s e f u l

f o r I g E r e l a t e d d i s e a s e , a t o p i c d e r m a t i t i s o r a l l e r g i c d e r m a t i t i s . T h e r e f o r e , we s t u d i e d t h e e f f e c t s o f s t e v i a f e r m e n t i n g

(6)

e x t r a c t s ( S t e v i a r e b a u d i a n a B e r t o n e ) on h i s t a m i n e ‑ i n d u c e d c o n t r a c t i o n s i n i s o l a t e d i l e u m f r o m g u i n e a p i g . Two s t e v i a e x t r a c t s (A a n d C ) i n h i b i t e d t h e h i s t a m i n e ‑ i n d u c e c o n t r a c t i o n s . H o w e v e r , s t e v i a e x t r a c t s B , D a n d E d i d n o t a f f e c t on t h e h i s t a m i n e ‑ i n d u c e d c o n t r a c t i o n . Our r e s u l t s show s t e v i a f e r m e n t i n g e x t r a c t s h a v i n g a n t i h i s t a m i n i c e f f e c t (H

1

r e c e p t o r ) .

1 7 ) Nishiyama T . , Ogura K . , Nakano H . , Kaku T . , Takahashi E . , Ohkubo Y . , Sekine K . , Hiratsuka A . , Kadota S . , Watabe T . : S u l f a t i o n of Environmental Estrogens by C y t o s o l i c Human S u l f o t r a n s r e r a s e s . Drug M e t a b o l . P h a r m a c o k i n . , 1 7 , 221 ・228 ( 2 0 0 2 ) .

A b s t r a c t : I t i s known t h a t i n humans t a k i n g s o y f o o d , t h e p h y t o e s t r o g e n s , d a i d z e i n (DZ) a n d g e n i s t e i n ( G S ) , e x i s t a s s u l f a t e s a n d g l u c u r o n i d e s i n t h e p l a s m a a n d a r e e x c r e t e d a s c o n j u g a t e s i n u r i n e . To i n v e s t i g a t e w h i c h human s u l f o t r a n s f e r a s e (SULT) i s o f o r m s p a r t i c i p a t e i n t h e s u l f a t i o n o f t h e s e p h y t o s e t r o g e n s , t h e f o u r

m勾or

c y t o s o l i c SULTs, SULTlAl, SULT1A3, SULTlEl, a n d SULT2Al, o c c u r r i n g i n t h e human l i v e r w e r e b a c t e r i a l l y e x p r e s s e d a s

His司tagged

p r o t e i n s a n d c h r o m a t o g r a p h i c a l l y p u r i f i e d t o h o m o g e n e i t y i n t h e p r e s e n c e o f Tween 20 a n d g l y c e r o l a s h i g h l y e f f i c i e n t a g e n t s f o r s t a b i l i z i n g t h e r e c o m b i n a n t e n z y m e s . A l l t h e SULTs showed s u l f a t i n g a c t i v e t y t o w a r d b o t h DZ a n d GS. H o w e v e r , k c a t l K m v a l u e s o f 0 . 3 a n d 0 . 7 ｵ M f o r GS a n d 1 . 9 a n d 3 . 4 ｵ M f o r DZ, r e s p e c t i v e l y . DZ a n d GS s t r o n g l y i n h i b i t e d t h e s u l f a t i o n o f t h e e n d o g e n o u s substrate， β －estradiol, b y SULTlEl i n a non噌competitive

manner w i t h K i v a l u e s o f 1 4 a n d 7 ｵM, r e s p e c t i v e l y , s u g g e s t i n g t h a t t h e s e p h y t o e s t r o g e n s m i g h t a f f e c t t i s s u e l e v e l s o f β －estradiol i n t h e h u m a n . The p h e n o l i c e n d o c r i n e ‑ d i s r u p t i n g c h e m i c a l s , b i s p h e n o l A ( B P A ) , 4 ‑ n ‑ n o n y l p h e n o l ( N P ) , a n d 4 ‑ t ‑ o c t y l p h e n o l ( t ‑ O P ) , w e r e u s e d a s s u b s t r a t e s t o i n v e s t i g a t e t h e p o s s i b l e p a r t i c i p a t i o n o f human SULTs i n t h e i r m e t a b o l i s m f o r e x c r e t i o n . High k c a t ! K m v a l u e s w e r e o b s e r v e d f o r t h e s u l f a t i o n o f BPA by SULTlAl, NP by SULTlAl a n d SULTlEl, a n d t ‑ O P by SULTlEl a n d SULT2Al.

く〉総説 Review

p a p e r s

1 ）手塚康弘：東南アジア産薬用植物の生物活性成分に関する研究 .Nαtural

M e d i c i n e s , 5 6 , 7 8 ‑ 8 3 ( 2 0 0 2 ) .

く〉学会報告

S c i e n t i f i c p r e s e n t a t i o n

1) Arjun H. Banskota, Tepy

Usia ，手塚康弘，幸田恭治，門田重利： Chemical

Cons t i t u en t s and I s o l a t i o n o f Two New Taxanes from t h e Wood o f Tαxus yunnαnensis. 日本薬学会第 122 年会，

2 0 0 2 ,

3/26-28 ，千葉．

2 ）幸田恭治，手塚康弘， Arjun

H.

Banskota，門田重利：新規 diarylheptanoid 類の MS/MS スペクトル．日本薬学会第122年会， 2002, 3/26-28，千葉．

3 ）王淑敏，手塚康弘， Suresh

Awale, Arjun H. Banskota, Tran Le

Quan ，門田重利：氾茶の成分研究．日本薬学会北陸支部第 106回例会， 2002, 6/15，富山．

4 ）李建平， Arjun

H.

Banskota，手塚康弘， Mohan

B .

Gewali ，門田重利： Hematoxylon cαmpechiαnum および Artemisiα vulgaris の血糖降下作用．日本薬学会北陸支部第 106 回例会， 2002, 6/15，富山．

5) Jun Y i n , Y asuhiro Tezuka, Kyoji Kouda, Quan Le Tran, Tatsuro Miyahara, Yasutaro Mikami, Y i n g j i e Chen, S h i g e t o s h i Kadota : s o l a t i o n o f s i x new saponins from a n t i o s t e o p o r o t i c f r a c t i o n o f

Dioscoreα spongiosα．第19 回和漢医薬学会大会， 2002, 8/31-9/1 ，千葉．

6 ）岩田宏， Tepy Usia，手塚康弘，門田重利，平塚明，渡部烈：生薬エキス 83種類によるヒト肝シトクロム P450

(CYP3A4,

CYP2D6）の阻害．第19回和漢医薬学会大会， 2002, 8/31-9/1，千葉．

7) Arjun H. Banskota, Jianping L i , Nhan Trung Nguyen, Yasuhiro Tezuka, Quan Le Tran,

S h i g e t o s h i Kadota: S e c o i s o l a r i c i r e s i n o l , a Potent Hypoglycemic Agent from t h e Wood o f

Tαxus yunnαnensis. 第 19 田和漢医薬学会大会， 2002, 8/31-9/1 ，千葉．

(7)

8 ) Myint Myint Than, Arjun H . B a n s k o t a , Yasuhiro T e z u k a , Quan Le T r a n , K i y o s h i Midorikawa, Katsumichi M a t s u s h i g e , S h i g e t o s h i Kadota: C o n s t i t u e n t s o f Water E x t r a c t o f B r a z i l i a n P r o p o l i s , T h e i r B i o l o g i c a l P r o p e r t i e s and B o t a n i c a l

Origin. 第19田和漢医薬学会大会，

2 0 0 2 ,

8/31-9/1，千葉．

9 ）長岡武罵， Arjun

H .

Banskota，手塚康弘，松繁克道，小泉桂一，播磨谷優子，済木育夫，門田重利：

プロポリス成分 CAPE 及びその類縁体による癌転移の抑制．第19回和漢医薬学会大会， 2002,

8 / 3 1 ‑

9/1，千葉．

10）長谷川秀夫，長岡武馬，手塚康弘，門田重利，済木育夫：人参トリオール系サポニン代謝物の脂肪酸抱合物による抗腫蕩効果の発現．第 19回和漢医薬学会大会， 2002, 8/31-9/1，千葉．

11 ）上回純也，手塚康弘， Arjun

H . B a n s k o t a , Quan Le T r a n , Qui Kim

Tran ，播磨谷優子，済木育夫，

門田重利：ベトナム産薬用植物 Strep toeαulon juuentαs の成分研究．日本生薬学会第49 回年会， 2002, 9/5-6，福岡．

1 2 ) S u r e s h A

wale，手塚康弘，下地清吉，平良一彦，門田重利： Highly

Oxygenated N o v e l D i t e r p e n e s o f O r t h o s i p h o n stamineus from

Indonesia. 第46 回香料・テルペンおよび精油化学に関する討論会

( 4 6 t h

TEAC）・国際精油シンポジウム (ISEO）合同大会， 2002, 10/18-21, 徳島．

13）殿軍，幸田恭治，手塚康弘， Quan

Le

Tran ，陳英傑，門田重利： The

s t u d y o f a n t i ‑ o s t e o p o r o t i c c o n s t i t u e n t s from Dioscoreα hypoglαUCα. 2 0 0 2 I n t e r n a t i o n a l O s t e o p o r o t i c C o n f e r e n c e , 2 0 0 2 ,

10/20-22，上海．

14）岩田宏， Tepy Usia，手塚康弘，門田重利，平塚明，鎌滝哲也渡部烈：漢方薬を構成する生薬によるヒトシトクロム P450 の阻害．第17回日本薬物動態学会年会， 2002, 11/20-22，東京．

15）緑川淑， Banskota

^A ^.

H.，手塚康弘，松繁克道，門田重利：プロポリスの基源植物．第54回北陸質

量分析談話会， 2002, 12/7，金沢．

く〉その他

O t h e r s

1 ）門田重利：拠点大学交流事業に参加，講演（Chulabhorn

R e s e a r c h I n s t i t u t e ; P r i n c e o f Songkla U n i v e r s i t y ) . 2 0 0 2 ,

12/22-28，タイ．

2 ）手塚康弘：和漢薬の化学的研究と質量分析．日本電子第24回 MS ユーザーズミーティング（東京），

2 0 0 2 ,

11/26-27，東京．

3 ）手塚康弘：和漢薬の化学的研究と質量分析．日本電子第24回 MS ユーザーズミーティング（大阪），

2 0 0 2 ,

12/2，大阪．

く〉海外調査

F i e l d work

1 ）門田重利：国際協力事業団（JICA）に係るミャンマー「伝統医療協力プロジェクト」事前調査， 2002,

4/21-5/5 ，ミャンマー．

2 ）門田重利， Tran

Le

Quan ：第 2 回国際肉ジュヨウ討論会に出席，発表， 2002, 5/19-5/25 ，中国．

3 ）門田重利：大連理工大学化工学院での講演ならびに共同研究打ち合わせ， 2002, 9/11-9/14 ，中国 4 ）門田重利， Tran

Le Quan, Nhan Nguyen

Trung ：ベトナム・ラムドン省及びミャンマー・シャン州

における天然薬物資源の調査研究， 2002, 11/21-12/11 ，ベトナム，ミャンマー．

く〉共同研究

C o ‑ o p e r a t i v e r e s e a r c h e s

1 ) D e j a i r M e s s a g e , A l f r e d o A . G .

Huertas ：ブラジル，ヴィソーサ大学，「フ。ロポリスの品質評価に関する研究J,

1 9 9 6 , 10 ~

2 ）宮原龍郎：富山医科薬科大学薬学部，「骨組懸症に有効な漢方方剤の開発研究」， 1998,

4 ~

3 ）中村薫：京都大学化学研究所，「生体触媒を使ったキナ酸誘導体の合成研究」， 1998,

4~

4 ）挑新生：中国・諸陽薬科大学，「和漢薬‘人参’の化学的研究J,

1 9 9 8 , 4~

(8)

5 ）陳英ホ：中国・濯陽薬科大学，「抗骨粗緊症に有効な薬物の開発研究J,

1 9 9 9 , 10 ~

6 ）平良一彦：琉球大学，「Orthosipohn stαmineus に関する研究」， 2002,

2 ~

く〉研究費取得状況

A c q u i s i t i o n o f r e s e a r c h f u n d s

1) 文部科学省科学研究費，基盤研究 (B)

( 2 )

（代表：門田重利）「ベトナム・ラムドン省及びミャンマー・

シャン州における天然薬物資源の調査研究」， 240万

く〉研究室在籍者

R e s e a r c h members

大学院前期 1 年： Thein

Zaw Linn ( 2 0 0 2 , 4 ~)

大学院前期 2 年： Myint

Myint Than

（富山医薬大で初めての JICA 長期研修員として）

大学院後期 1 年： Tepy

U s i a ( 2 0 0 2 ,

4～），岩田宏（2002,

4 ~) , Mai Thanh Thi Nguy e n ( 2 0 0 2 , 10 ~)

大学院後期 2 年：段軍， Nhan

Nguy en

Trung，王淑敏（2002, 4/10，一身上の都合により退学），

李建平（2002, 5/10 ，一身上の都合により退学）

大学院後期 3 年： Suresh

A

wale，長岡武馬，上田純也受託研究員：緑川淑

外国人客員研究員：張鉄軍（2001,

1 2 / 1 ‑ 2 0 0 2 , 3 / 3 1 ) , F a i s a l Attamimi ( 2 0 0 2 , 1 / 1 ‑ 3 / 3 1 ) , S a n i t Thongnest ( 2 0 0 2 , 1 0 / 1 5 ‑ 1 2 / 5 )

非常勤研究員： Tran

Le Quan

短期訪問研究者： Thein

Swe, Myat Myat Ohn Khin, Aung Myst

Kyaw ，ミャンマ一保健省伝統医療局総局長他（2002,

8 / 5 ‑ 8 / 1 0 )

く〉学位（修士・博士）取得者

Academic d e g r e e s and t h e s e s

課程博士（2002年 3 月）：

T r a n Le

Quan ：「Biologically

A c t i v e S a p o n i n C o n s t i t u e n t s f r o m V i e t n a m e s e G i n s e n g

_Plants」

課程修士（2002年 3 月）：

Tepy

Usia ：「Chemical