分 泌 臓 器 と して の 胎 盤 か らス テ ロ イ ドホ
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(2) 102. 大. 可 能. と な つ た.. 更 に 結 合 型 ス テ ロ イ. と し て2. stepsで. し 遊 離 型,結. 盤 を1つ. 加 水 分 解 を. の 測 定 単. し 抽 出,分. 離,定. な お,本. 一 Pregn‑4‑ene,. 11β,. 17α, 21α‑triol,. 5β‑Pregnane,. 3α, 17α, 21α‑triol,. 5β‑Pregnane,. 3α,. 5β‑Pregnane,. 3α, 11, 8, 17α, 21α‑tetrol,. : Comp.. 量. 合 型 の 比 率 を 求 め る 等 の 興 味 あ る 知 見. を 得 た の で 報 告 す. 憲. ドに つ い て も 遊 離 型 ス テ ロ イ. ド と の 関 連 性 を 検 討 す る た め3胎 位. 塚. : 17α,. :. 論 文 に 使 用. し た ス テ ロ イ. ド名 は 次 の 様 に. 省 略 し た. Estra‑1,. F 20‑one. THS. 1α‑triol,. る.. 3, 20‑dione. 11, 20‑dione. THE 20‑one. : THF 3, 5 (10)‑triene,. 5β‑Pregnane,. 3β‑ol, 17‑one :. Estrone,. Estra‑1,. 3, 5 (10)‑triene,. 3β, 17β‑diol. Estra‑1,. 3, 5 (10)‑triene,. 3β, 16β, 17β‑triol. Estra‑1.. 3, 5 (10)‑triene,. :. Estradiol,. :. 3β, 17α‑diol,. :. 編. 実験材料 並びに試薬及 び器具. 方 法 に基 づ き胎 盤 組 織 を1cm立. 方 角 に細 切 し濾 紙 上 を こ ろ が して 脱 血 し,更 に こ れ. Et Prog.. Pregnenolone,. P. nolone. ら細 片 を ミン チ と し重 量 測 定 した 後 抽 出 用 に 使 用 し. 試 薬 は す べ て 特 級 の もの を 用 い有 機 溶 媒 は更 に 精 製 し た もの を 用 い た.又. 20‑one. :. 17‑OH‑P.. ガ ラス 器 具 は 共 通 摺 合 わ せ. の もの を 使 用 した.. nolone. 20‑dione. 第2節. :. 1). 17‑OH‑Prog.. 抽出法. 遊 離 型 ス テ ロ イ ドの 抽 出. 胎 盤 組 織 か らの ス テ ロ イ ドホ ル モ ン 抽 出 はBerli. 20‑dione. nerの 方 法 に ほ ぼ 従 つ た(表1).. :△4‑A‑dione Androst‑5‑ene,. 基. た.. Pregn‑5‑ene,. Androst‑4‑ene‑3,. 礎. 去 し て, Kumarの. 20‑one. 3,. 第1章. Pd. 得 た もの で胎 盤 娩 出 後30分 以 内 に臍 帯 及 び 卵 膜 を 除. Progesterone,. 3β‑ol,. 17α‑ol,. Pregnanediol,. 本 定 量法 に 使 用 した胎 盤 は す べ て 正 常 満 期 産 か ら. 17β‑triol. Estriol,. 20‑dione:. Pregn‑5‑ene,. Pregn‑4‑ene,. 第1節. Ed. 16‑epi‑Et. 3β, 16α,. : Pregn‑4‑ene‑3,. 3α, 2α‑diol:. Eo. 3β‑ol,. 17‑one. 表1 : DHA. Method 5α‑Androstane,. 3a‑ol,. 5β‑Androstane,. 3a‑ol,. determination. of. free. steroids. in placenta. 17‑one :. Androsterone,. Andr.. 17‑one :. 5β‑Androstane,. for. 3α‑ol,. Etio. 11,. 17‑dione : 11‑keto‑Etio.. 5β‑Androstane,. 3α,. 11β‑diol, :. Pregn‑4‑ene,. 21α‑ol,. Pregn‑4‑ene,. 21α. 3,. 20‑dione :. ol,. 3,. DOC. 11, :. Pregn‑4‑ene,11β,. 21α‑diol, :. Pregn‑4‑ene,. 17α,. 21α‑diol, :. Pregn‑4‑ene,. 17α,. 17‑one 11‑OH‑Etio.. 21α‑diol, :. 20‑trione Comp.. A. 3,. 20‑dione. Comp.. B. 3,. 20‑dione. Comp. 3, Comp.. まず1個. S 11,. 20‑trione E. の胎 盤 を す りつ ぶ して ア セ トン450mlを. 加 え,振 盪 後50℃. 30分 浸 出 した 後 に 遠 沈 分 離(2,000. r. p. m., 15分)し. 沈渣 となつた胎盤組織 は再 びデセ.
(3) 正常胎盤組織 中遊離型 並に結合型 ステ ロイ ドホル モンの含有量 に関 す る研究 トン450mlで. 同 様 に して 抽 出す る.. とに よ り有 機 層 を 中性 化 す るた め の水 洗 操 作 で 中性. ア セ トン に よ り2回 抽 出後 の 胎 盤 組 織 に 更 に50% エ ー テ ル/エ タ ノー ル100mlを. 103. 加 え,攪 拌 後,減 圧. ス テ ロ イ ドの 損 失 を 減 少 せ しめ る方 法 を考 案 し た が, こ の方 法 に 従 つ て 液 々分 配 に よ る エ ス トロゲ ン及 び. 濾過 を 行 な い 抽 出 す る. 表2. ア セ トン層 と エ ー テル/エ. タ ノー ル 層 を 合 わ せ Recovery. 60℃. で 減 圧 濃 縮 を 行 な い,約100mlま. 抽 出す る.ク. エチ ル 層 は合 わ せ て60℃ 次 い で80%メ 75mlを. of. steroids. in. liquid‑liquid. partition. で 濃 縮 し,. その 後 濃 縮 液 を ク ロ ロ ホ ルム50mlで3回,酢 チル33mlで3回. rate. 酸エ. ロ ロホ ル ム 層 と酢 酸. で 減 圧 蒸 溜 乾 固 す る.. タ ノー ル75mlで. 溶 か しn‑ヘ キ サ ン. 加 え て ゆ る や か に 振 盪 して 脂 肪 をn‑ヘ キ サ. ン層 に 分 配 す る.こ の 操 作 は2回 行 な うが,分 離 し. 中 性 ス テ ロ イ ドの移 行率 は 表2に. た ヘ キ サ ン層 は80%メ. Pregnanediol,に. てn‑ヘ. タ ノー ル10mlで. 逆抽 出 し. キ サ ン層 に 移 行 した ス テ ロ イ ドの 損 失 を 防. ぐよ う にす る.こ の よ うに して 得 ら れ た メ タ ノー ル 層 は60℃. で ロー タ リー エ バ ポ レ ー ター で 減 圧 し,. 示 す がEstriol,. 若 干 の 問 題 が あ る が,ほ ぼ 満 足 す. べ き結 果 で あ つ た.従 つ て 遊 離 型 ス テ ロイ ドの 抽 出 は 表1に 示 し た方 法 に 基 づ い て 行 な つ た. 2). 結 合 型 ス テ ロ イ ドの 抽 出. メ タ ノー ル 臭 が な くな る まで 濃 縮 す る.. 表3. な お,分 配 操 作 に お い て し ば しば メ タ ノ ー ル と ヘ キ サ ン との 間 に上 下 の 転 位 が お こる の で 注 意 を 要 す. Method. for determination of conjtgated steroids. in placenta. る. 濃 縮 され た メ タ ノー ル 層 は ク ロ ロ ホ ル ム85mlで 3回 抽 出,更 に 酢 酸 エ チ ル30mlで2回. 抽 出 し,ク. ロ ロ ホ ル ム 層 に 酢 酸 エ チ ル 層 を 合 わ せ60℃ 溜 しgolden. 減圧蒸. yellow residueと な つ た ス テ ロ イ ド濃. 縮物 を 得 る. 次 に この ス テ ロ イ ド濃 縮 物 を 中 性 ス テ ロイ ドと エ ス トロゲ ン に 分 離 す る方 法 と して 表1に 示 す よ うに Brown一. 志 田 氏 法 に若 干 の 改良 を 加 え て行 な つ た .. 即 ち無 水 石 油 エ ー テ ル ・ベ ンゼ ン(1:1) で ス テ ロ イ ド濃 縮 物 を 溶 解 して, 1.6%苛 25mlで2回. 抽 出 を 行 な い,こ. 80ml 性 ソー ダ. の ア ル カ リ層 は 酸 性. ステ ロ イ ド分 画 と して 次 項 の 操 作 を 行 な う.中 性 ス テ ロイ ド分 画 で あ る無 水 石 油 エ ー テ ル ・ベ ン ゼ ン層. 以 上 の べ た 遊 離型 ステ ロ イ ドの他 に胎 盤 組 織 中 に は結 合 型 ス テ ロ イ ドも含 有 され て い る こ とは, 1954 年Mitchell等. が エ ス トロゲ ンに つ い て7胎. 盤を 使. 用 し遊 離 型,結 合 型 及 び 蛋 白結 合 型 ス テ ロイ ドを 抽 出,分 離,定 量 して い る こ とか ら も う か が わ れ る. 加 水 分 解 を 行 な う につ い て は表3に. 示 す よ うに遊. へ は 水 洗 に よ る損 失 を 防 ぐた あ に 酢 酸 エ チ ル20ml. 離 型 ス テ ロイ ド抽 出過 程 に お け るエ ー テル ・エ タ ノ. を 加 え 水 洗 を 行 な つ た 後 脱 水,乾. ー ル抽 出後 の胎 盤 組 織 と酢 酸 エ チ ル 抽 出後 の 水 層 を. 固 して 中 性 ス テ ロ. イ ド抽 出 物 を 得 る.. 合 わ せ て 結 合 型 ステ ロ イ ドの分 画 と した.こ. ア ル カ リ層(50ml)に 酸1.0mlを. 加 え37℃,. は硼 酸0.9g,ヂ. メ チ ル硫. 30分 攪 拌 し,一 夜 放 置 して エ. 型 ス テ ロ イ ドの 分 画 に 純 水: 0.2M 300:4の. 比 率 で400ml加. ス トロゲ ンを メ チ ル エ ー テ ル 化 とす る.次 い で20%. (150F‑u/ml). 苛 性 ソ ー ダ1Cml,. 17℃,. 30%過. た 後 ベ ン ゼ ン50mlで2回 水 洗,脱 水,乾. 酸 化水 素 水2‑5mlを. 追加し. 抽 出 す る.ベ ンゼ ン層 は. 9ml,ペ. え,更. の結 合. acetate bufferを に β‑Glucuronidase. ニ シ リンGを 耳 掻 に3杯 加 え. 48時 間加 水 分 解 を行 な つ た .. 水 解 後1/3容. の酢 酸 エ チ ル で3回 抽 出 を行 な い 酢. 固 し エ ス トロゲ ン ・メ チ ル エ ー テ ル. 酸 エ チ ル層 は 蒸 溜 乾 固 した 後 グル ク ロ ン酸 結 合 型 ス. 抽 出 物 を 得 る.こ の よ う に エ ス トロゲ ンを ア ル カ リ. テ ロ イ ド分 画 と して,無 水 石 油 工 ー テ ル ・ベ ンゼ ン. 層 へ 移 行 させ た後 の 無 水 石 油 エ ー テ ル ・ベ ンゼ ン層 へ 極 性 の 高 い 有 機 溶 媒 で あ る酢 酸 エ チ ル を加 え る こ. (1:1). 80mlに. 溶 解 し以 下 遊 離 型 ス テ ロイ ド抽. 出 と同 様 に して 分 離,精 製 を 行 な つ た.β‑Glucuro‑.
(4) 104. 大. nidase水 解 後Glucuronide抽. 塚. 出 した 後 の粘 稠 な 水 層. (約300g)はSolvolysisに. よ る硫 酸 結 合 型 の 加 水. 分 解 を 行 な つ た.. 次 い で 半 量(150ml)の. 尿 中 ス テ ロ イ ド の 分 離 に 使 用 し て い るFlorisil mn. chromatographyを. び5倍. 酢 酸 エ チ ル450mlを. mesh). 純 水 を 加 え ミキ サ ー にて 攪. 拌 後 吸 引濾 過 す る.濾 液 は食 塩(135g)で. 盪)を. 一. 内 径10mmで. 即 ち 上 記 粘 稠 な 水 層 に等 量 の 純 水(300ml)を,. %硫 酸45ml及. 憲. ホ ル マ リン9mlを. 飽和 し50 加 え た上 で. 重 ね 室 温4日 水 解(1日2回. 振. 行 な つ た 後 酢 酸 エ チ ル層 を と る.こ の 酢 酸 エ. チ ル 層 は苛 性 ソー ダ (1/10N. NaOH,. 65ml)に. より. ク ロ ロ ホ ル ム の 液 面 がFlorisil面. ル ム2ml宛4回 す.試. る. 鹸 化 後 酢酸 エ チ ル20mlで3回. 抽 出を 行 な い 水 洗. ン(1:1). 80mlに. 溶 解 し,そ れ 以 下 の 抽 出 操 作. 行 な つ て 夾 雑 物 の 除 去 を 行 な う.次. 画 を,更. 以 上 述 べ た 如 く正 常胎 盤 組 織 中 の ス テ ロイ ド抽 出. 一 方TLCは. ス テ ロ イ ド の 分 離 にFlorisil. tographyと. は抽 出,精 製,分. chroma. し,室. 使 用 に 当 つ て は20×20cmの G. (Merk)を0.3mmの. 温 で 風 乾 の 後120℃,. そ の 極 性 の 強 弱 の み な らず 中性 及 び 酸 性 を も問 わ ず. %硫. 全 て を 同 時 に抽 出,分 離 出来 る点 に あ る.. し て 分 離 用 に 供 し た.ス. 酸 入 りDesicaterに. ガ ラ. 30分. 厚 さ に展 開 間 活 性 化,更. に80. 一 夜 入 れ て 吸 着性 を 一 定 に テロ イ. ド のspottingに. つ て は0.05mlのmicropippetteを. 前 節 で 述 べ た抽 出法 に よ り胎 盤 組 織 中 に 含 ま れ て. column. 組 合 わ せ て 使 用 し た.. 実 際 のTLCの. い る ス テ ロイ ドは エ ス トロゲ ンと 中 性 ス テ ロイ ドに. 画を 分離す. と い つ た 点 か ら も操 作 が 比 較 的 簡 便 な 方 法 な の で. ス 板 にSilicagel. ス テ ロイ ドの 分 離. タ ノ ー ル ・ク ロ ロ. 含 む 第2分. 極 め て 強 い 分 離 能 を 持 つ と共 に 定 量. と異 な る新 し い抽 出 法 を 確 立 し た.こ の 方 法 の 特 徴 離 に よ り測 定 可 能 な ス テ ロイ ドを. ス テ ロ イ. る.. 法 に 関 して 現 在 ま で種 々報 告 さ れて い る 諸 家 の 方 法. 第3節. に10%メ. いで. 溶 媒 と して. ス テ ロ イ ド とAndrostane系. ドを 含 む 第1分. TLCを. は遊 離 型 ス テ ロ イ ドと 同 様 に し た.. 定量 的 に 移. タ ノ ー ル ・ ク ロ ロ ホ ル ム90mlを. ホ ル ム60mlでCorticoidを. 乾 固 す る.こ の 抽 出物 は 無水 石 油 工 ー テ ル ・ベ ンゼ. 料 は ク ロ ロホ. で 溶 解 さ せColumnに. 料 の 吸 着 が 終 わ れ ば ク ロ ロ ホ ル ム8mlで. Prewashを. Pregnane系. 40%苛 性 ソー ダ. よ り 約1cmの. 高 さ に 来 た と き 試 料 を 吸 着 さ せ る.試. を エ タ ノー ル0.5ml.純. 水10ml,. (100〜200. ク ロ ロホ ル ム に よ り 湿 性. に 充 填 す る.. 0.5%メ. 15分 鹸 化 し10倍 塩 酸 水 で 中和 す. さ7cm)を. colu. 用 し たColumn. こ れ に 精 製 し たFlorisil. 3g(高. 中 和 し た後 水 洗 を 行 な つ て 蒸 溜 乾 固 し,こ の 抽 出 物. 0.25mlで37℃,. 応 用 し た.使. 当. 用 い6回spotting. を と つ た. 中 性 ス テ ロ イ ドFlorisil. column. chromatography. 分 離 され た が,こ の 内 の 中性 ス テ ロ イ ド分 画 に は. の 第1分. Pregnane系,. ロ イ ドを 含 む た め ス テ ロ イ ド相 互 の 分 離 が 困 難 で あ. Androstane系. 及 びCorticoid系. の ス. 画 はAndrostane系. テ ロ イ ドが 含 ま れ て い る た め更 に これ ら ス テ ロ イ ド. る が 種 々 のsolvent. の 分 離 が 必 要 とな る.. み た.そ. 及 びPregnane系. systemに. の 結 果 は 表4に. ステ. つ い て検 討 を 加 え て. 示 す が これ 等 の う ち, solv.. 図1 Florisil. column. 表4 chromatogamm The. Rf. fraction. 5及 た2次. 第1のstepと. して 図1に. 示 す 如 く教 室 に お い て. びsolv.. values. of. from. c. c.. 6の2種. neutal. steroids. 類 のsolvent. 元 展 開 法 に よ るTLCで1枚. of. first. systemを のplate上. 使 用 し に各. 々 の 中 性 ス テ ロ イ ドを 略 々 満 足 す べ き 程 度 に 分 離 す.
(5) 105. 正 常胎 盤組織 中遊離型並 に結 合型 ステ ロイ ドホルモ ンの含有 量に関す る研究. 発 色 後 の 特 有 な 色 調 の確 認 及 び特 有 の 呈 色 反 応 等 に. る こ とが で き た.. よ り 行 な い,更. 図2 Two. demensional. TLC. of. first. fraction. from. column. り 同 定 し た.. Firstdemension CHCl3:(CH3)2 CO:C2H5OH=90:7:3 Second demenion benzen:. System:. 抽 出 して そ れ ぞ れ 特 有 の. 発 色 を させ連 続 吸 収 曲線 を 純 品 と比 較 す る こ と に よ. chromatography. Solvent. にspotを. 1). エ ス トロ ゲ ン. 10%ア. ethylacetate=1:1. セ トン/ク. し た15cm展 Rf値. ロ ロ ホ ル ム をsolvent. 開 法 に よ るTLCに. 即 ち0.72,. 0.50,. メ チ ル エ ー テ ル, チ ル エ ー テ ル,. 0.20,. Edメ. Etメ. 示 し 各 々 がEo 16‑epi‑Etメ. チ ル エ ー テ ル と 同 定 し た.. 色)を. 又plate上. よ り純 品 と等 しい 0.09を. チ ル エ ー テ ル,. 更 にHydroquinone‑Kober発 同 一 色 調(桃. systemと. 色 に お い て も純 品 と. 呈 し た.. の 純 品 相 当 部 分 に つ い てKober反. を 行 な つ た が,最. 応. 大 吸 収 波 長 は 純 品 と 同 じ515mμ. に あ つ た. 以 上 に よ り 各 々 の 純 品 相 当 部 分 はEo, こ の 方 法 で 分 離 す る と ス テ ロ イ ド は 図2に う にplateの. 両 端 を 結 ぶ 対 角 線 上 に 分 離 す る.次. 中 性 ス テ ロ イ ド のFlorisil. column. 画 はCHCl3:CH3OH:H2O=90:10:1を. solvent. systemと THE,. Comp.. A,. more. polar. す る15cm展. Comp. DOC,の. F,. E. Ed,. 16‑. 相 当 す る も の と 同 定 し た.. 中 性 ステ ロ イ ド. 第1分. 行な い. THS,. 他 にRf=0.13,. subst., less polar. 2). びEtに. 画 図3. 開 法TLCを. Comp.. に. chromatography. 第2分. THF,. 示 すよ. epi‑Et,及. Comp.. 0.89の. subst.を. Absorption. spectrum. of. pergnanes. B,. それ ぞ れ. 分 離 し た.エ. ス トロゲ ン は遊 離 型 の ま ま よ り もメ チ ル エ ー テル 化 す る こ と に よ り ス テ ロ イ ド相 互 間 の 分 離 が よ り 明 確 に な るた めヂ メ チ ル 硫 酸 に よ りメ チ ル エ ー テ ル 化 し て10%ア. セ ト ン/ク. す る15cm展. ロ ロ ホ ル ム をsolvent. 開 法 に よ るTLCを. 第4節. systemと. 行 な つ た.. 比色. エ ス ト ロ ゲ ン に つ い て はHydroquinone‑Kober試 薬 に よ り 行 な つ た. Androstane系 よ り行 な い,. ス テ ロ イ ド はZimmermann発 Pregnane系. 色に. ス テ ロ イ ドに 相 当 す る 部. ‑‑‑‑‑‑:. Pure steroid. 50μg―. : Plocontor tissue. 350g. 分 に つ い て は特 異 的 な 比 色 法 を 種 々 検 討 し た 結 果 P.. noloneはOertel法. Prog.相. に よ り 行 な い,. 当 部 分 は 最 大 吸 収 波 長240mμ. Prog. 17‑OH‑. 既 述 のsolvent. での紫外部. 測 定 を 行 な つ た. 中 性 ス テ ロ イ ドのFlorisil. column. 第2分. 画 に つ い て はMineralocorticoidで. 氏 法,. Glucocorticoidで. で 硫 酸 発 色 を 行 な い,各. 元展開法 に 々の 純 品. と 同 様 のRf値. 及 び 発 色 色 調 を 有 す るspotを. た,又Plate上. の各 純 品 相 当 部 分 につ い て連 続 吸 収. 認め. はMattox. はPorter‑Silber発. 色 によ り. 曲線 を 求 め い ず れ も純 品 と一 致 し た最 大 吸 収 波 長 を 認 め た.. 同. 以 上 に よ りAndrostane系5分. 定. 検 体 及 び 純 品 相 互 に お い てsolvent え たTLCに. plate上. 使 用 し た2次. chromatography. 行 な つ た. 第5節. よ るTLC. systemを. よ るRfの. 一 致,. TLC,. systemを plate上. 変. で硫酸. DHA+Andr.,. Etio.,. 画 は 各 々 △4‑A‑dione. 11‑keto‑Etio.,. 相 当 す る も の と 考 え ら れ る.. 11‑OH‑Etio.に.
(6) 106. 大. 又Pregnane系4分 OH‑P.. 画 に つ い て はP.. nolone,. Prog.,. 17‑OH‑Prog. ,に. 塚. nolone,. 17‑. 相 当 す る もの. と 考 え ら れ る. 3). 憲. 一. した. 本 法 に よ り行 な つ た 回 収 率 もほ ぼ 満 足 す べ き結 果 で あ り,定 量 法 と しで 優 れ た 方 法 で あ る と考 え る.. 中 性 ス テ ロイ ド. 第2分. 第2章. 画. 既 述 のsolvent alkali‑blue. systemを. Tetrazolium試. 使 用 し てTLCを. 行ない. 薬 で 発 色 さ せ て 得 たRf値. 認 め た.. Gomp.. E,. 画 はTHF,. Comp. . B,. 当 す る も の と 考 え ら れ,又 subst.及. 味 あ る結 果 を 得 た. 又,結. びless. polar. Comp.. THE, A,. こ れ 等 の 他 にmore. subst.の. THS,. DOC.に. 相. 第1節. 遊 離 型 ス テ ロイ ド. polar. 表6. 未 同 定 のCorticoid. を 認 め た.. 第6節. 合 型 ス テ ロイ ドに 関 して は3個 の 胎 盤 を1. 分 離,定 量 し両 者 を対 比 して 若 干 の 知 見 を 得 た.. Mean 2種. れぞれ その組織 中に含ま. つ の 測定 単 位 と して遊 離 型 ス テ ロ イ ドと同 時 に 抽 出,. 以 上 よ りGorticoid系8分 F.. 編. れ て い る遊 離 型 ス テ ロ イ ドを 抽 出,分 離,定 量 し興. の 各 純 品 相 当 部 分 につ い て連 続 吸 収 曲. 線 を 求 め た 所 純 品 の そ れ と一 致 し た 最 大 吸 収 波 長 を. Comp.. 床. 基 礎 編 で 述 べ た 定 量 法 に 従 つて 正 常 満 期 産 か ら得 た16個 の 胎 盤 に つ い て,そ. 及 び 発 色 色 調 は 純 品 と 同 じで あ つ た . 又plate上. 臨. steroids. values in. and 16. standard. deviation. of. free. placenta. ス テ ロ イ ド添 加 に よ る 本 測 定 法 の 全 回 収. 率 表5 Total. recovery. rate. through. 回 収率 の 検 討 に あ た つ て2個 用 した.即. all procedure. の胎 盤 を 合 わせ て 使. ち2個 の 胎 盤 組 織 の重 量 測 定 を し た後,. ア セ トン及 び50%エ. ー テル/エ. タ ノー ル に よ り抽 出. し,こ の 濾 液 を 正 確 に2等 分 し一 方 に は ス テ ロ イ ド の 極 性を 考 え て エ ス トロゲ ンはEo, 系 はProg.. 17‑OH‑P. nolone,をCorticoidはTHF. を, Androstane系. は △4‑A‑dioneを. 代 表 と し て各50. 他 の 濾 液 は そ の ま ま 対 照 と して 同 様 の 定 量 法 に 従 離,測 定 した.こ の 結 果 は表5に. 示 す が本 定 量 法 は 回収 率 の 点 か ら み て も満 足 す べ き 方 法 で あ る と考 え る. 第7節. 小. 括. 従 来1個. の 胎 盤 よ り3種 以 上 の ス テ ロイ ドの 分 離. され た 報 告 は な く,又 多 量 の 複 数 胎 盤 で も8種 以 上 の ス テ ロイ ドを 分 離,定 量 した. 報 告 は な か つ た が,著 者 はBerliner, 田 氏 法 を 組 合 わ せ 改 良 を 加 え,更 chromatography,. TLCを. Brown一. 志. にFlorisil column. 組 合わす ことに よ り正 常. 満 期 産 か ら 得 られ た 胎 盤1個. エ ス トロ ゲ ン 図4 Free. μg添 加 し以 上 の 方 法 に基 い て 回 収 率 を 検 討 した.. い抽 出,精 製,分. 1). Etを, Pregnane. を 測 定 単位 と して, 21. 種 の ス テ ロ イ ドを 分 離,定 量 す る新 しい 方 法 を 開 発. estrogens. in. placental (〓:. tissue. Mean±CL). type.
(7) 正常胎 盤組織 中遊 離型並 に結 合型 ステ ロイ ドホルモ ンの含有量 に関す る研究 Eo,. Ed,. 16‑epi‑Et及. 平 均 含 有 量 はEo 16‑epi‑Et. びEtの. 胎 盤1個. 33.0±6.9μg,. 17.9±2.6μg,. Ed. あたりの. 図6. 37.6±11.7μg. Et 57.6±10. .3μgで. 107. Free. and. rogens. in. placental (〓:. あ り,.. tissue Meen±CL). これ は 妊 娠 末 期 の エ ス トロゲ ン尿 中 排 泄 値 に関 す る 教 室 木 本 の 報 告 に よ るEo 10845μgに. 比 しEtが. 233μg,. Ed. 318μg,. Et. さほ ど高 値 を 示 し て な い こ. と が 注 目 さ れ る.こ. の こ とは 尿 中排 泄植 と胎 盤 組 織. 内 含 有 量 と が 必 ず し も 一 致 しな い こ と を 示 し て い る.. 又 エ ス トロゲ ンは 他 の ス テ ロ イ ドに 比 し表 示 の如. く比較 的多量 に胎盤 中に存在 して い ちことが認 め ら れ た. 2). Pregnane系. ス テ ロイ ド が 手 許 に 純 品 が な い た め そ の 点 に 関 して は 確 認 で き. 図5 Free. gestagens. in. placental. tissue. な か つ た.. (〓: Meen±CL). 11‑ketoの. い て はTLC. 活 性 型 で あ るAdrenost.に. つ. plate上 の 相 当 部 分 に 胎 盤 抽 出 物 で はspot. を 見 出 し え な か つ た. 4). Corticoid系. ス テ ロ イ. ド. 図7 Free. corticoids. in. placental. tissue (〓:. 胎 盤1個. の 組 織 中 の 平 均 含 有 量 はP.. ±10.3μg,. 17‑OH‑P.. nolone. nolone. 43.8. 50.2‑13.3μg,. Prog.. 図7に 36.1±10.6μg,. 17‑OH‑Prog.. 予 想 通 り 多 量 に 含 ま noloneが. 16.9±5.9μgで. れ て. い た.中. で. あ り. も17‑OH‑P.. 最 も 多 量 に 含 ま れ て い る こ と が 注. THF. 示 す よ う に 胎 盤1個. 35.0±5.8μg,. 2.8μg,. Comp.. μg Comp.. B. 9.8±18.5μg Androstane系. ス テ ロ イ. あ た り の平 均 含 有 量 は 13.9±4.6μg. 13.0±4.2μg,. 1.1±1.1μg, more. polar. Comp.. あ つ た.そ. ドも 予 想 以 上 に 存 在. subst. 10.2±1.6μgで. の 他5位. の 飽 和. Andr,. 11‑OH‑Andr.が. less. あ つ た.. さ れ た ス テ ロ. A,. Comp.. B,. DOCに. ついては微量 の. の た め 平 均 値 が 低 くな. Etio.は14.6±. つ て い る.. あ つ た.. な お11‑keto‑Etio.及. DOC. し11‑keto‑Etio.は7.9±2.5. 11‑OH‑Etio.は14.6±3.2μg,. 4.6μgで. 13.0±5.8μg,. 少 量 な が ら存 在 は確 認 さ. た め 測 定 不 能 の 例 も あ り,そ μg,. 3.1±. 17.9±2.8. 多 量 に 存 在 し て お り23.0. れ た がComp. イ. THS E. A3.7±2.3μg,. subst.. 即 ちMineralocorticoidは ±4.0μgで. Comp.. ド. polar 活 性 型 の △4‑A‑dioneが. F. THE. 目 さ れ. た. 3). Meen±CL). び11‑OH‑Etio.に. 又Glucuronideは. は11‑keto‑. 含 ま れ て い る 可 能 性. も あ. る. 般 に 多 く,特. にTHFが. 予 想 に 反 し て5位. の飽 和 型 が 一. 多 量 に 含 ま れ て い る こ とが.
(8) 大. 108. 塚. ateと. 結合 型 ステロイ ド. 1) エ ス トロゲ ン. 3). and. conjugated. steroids. extracted. from. し て は4分. 画 と も に 存 在 せ ずSelf. し て △5‑3β‑ol‑Steridで. P. noloneが 表7. Free. 一 Glucuronideと. 注 目 され た. 第2節. 憲. あ るP.. nolone,. 17‑OH‑. 認 め ら れ た.. Androstane系. ステロイ ド. three 図10. Androgens. in. three. placentas. placentas. DHA+Andr.分 図8. Estrogens. in. three. placentas. Etio.分. 画,. 11‑keto‑Etio.分. 画 はSulfateと. 画 及 び11‑OH‑. し て 存 在 し て い た.. 特 にDHA+Andr.分. 画 及 び11‑keto‑Etio,分. 遊 離 型 よ りSulfateと しGlucuronideと. 面 は. し て 多 く存 在 して い た.し. か. して は いず れ の 分 画 も存 在 して い. な か つ た. 4). Corticoid系. ス テロイ ド 図11. Corticoids. 表7,図8に 1/10が. 少 量 な が ら16‑epi‑Et.,. Pregnane系 図9. three. placentas. 遊 離 型 の 約. 胎 盤 中 に 存 在 し て い る こ と が 認 め ら れ,. uronideは 2). 示 す よ う にSulfateは. in. Et.に. Glu. 認 め ら れ た.. ス テ ロイ ド Gestagens. in. three. placentas. Corticoid系 dro.. で はTHF,. THE,. Gomp.にGlucuronideが. もTHEは 第3節. THS等. のTetrahy. 認 め ら れ た が,中. で. 遊 離 型 よ り多 く存 在 し て い た. 小. 括. 中 性 遊 離 型 ス テ ロ イ ドで は 活 性 型 以 外 に5位. の飽. 和 さ れ た 不 活 性 型 が 多 く存 在 し て お り △4‑typeと 5位. の 飽 和 型 の 比 は1:1.7で. あ つ た.. 結 合 型 ス テ ロ イ ドに つ い て は エ ス ト ロ ゲ ン は 少 量 な が らGlucuronide,. Sulfateと. し て 共 に 存 在 して い.
(9) 正常胎 盤組織 中遊 離型並 に結合 型ステ ロイ ドホルモ ンの 含有 量に関す る研究 た が,. P. nolone,. はSulfateが. 17‑OH‑P.. nolone,. DHA+Andr.に. 報 告 し て い る.. 認 め ら れ 中 で もDHA+Andr.は. 型 以 上 に 認 め ら れ た が,こ. 遊 離. れ はDHA. sulfateが. 多. い か ら で あ ろ う. Tetrahydro.. 鈴 木 はPaper. が 認 め ら れTHEは. chromatographyを. 個 あ た り のComp. 32.2μg,. Gomp.のGorticoidに. 109. はGlucuronide. Comp.. E. 60μg,. B‑A. 応 用 し て 胎 盤1. Comp.. 17.5μgで. F. 8.7μg,. こ れ らの 測 定 値 を 本論 文 の エ ス トロゲ ン値 と比 較. 遊 離 型 よ り多 量 に 存 在 し て い. た.. し て み る とEtが. 最 も 多 い 点 で は 一 致 し て い る が,. そ の 量 は 本 論 文 中 の 値 が 優 位 に 高 く,更 を も 分 離,定 第3章. 考. 察. 胎 盤 組 織 内 で の ス テ ロ イ ドホ ル モ ン の 生 合 成 及 び. の 胎 盤 に お け るmetabolitesを. 1個. 測 定 し胎 盤 組 織 内 に. 盤 に. を 含 め て10種. ス テ ロ イ ド4種,. か るに 従 来 の 報告 で は単 一 の ス テ ロ. Pearlman. (1952)11)を. は じめ多 数 の 研 究 者 に よつ て. Prog.量. につ い て な さ れ て い る.. て み る と 何 れ も 本 定 量 法 に よ つ て 得 たProg.値. 分 離 能 の 高 いTLCを ステ ロ イ. nolone,. 17‑OH‑Prog.等. さ れ たProg.の. よ. の原 因 は本 定 量 法 が. 応 用 し て い る た め,他. gnane系. ドで あ るP.. nolone,. のPre. 過 去 の 方 法 を 並 行 して 比 較 して い な い た め決 定 的 な. 本 定 量 法 に よ つ てProg.以. 17‑OH‑Prog.を. も 抽 出,分. 17‑OH‑P.. nolone,. 離 した こ と は意 義 あ る も. 盤 中 か ら 分 離,定. 量 し た ス テ ロ イ ドの 数. の ス テ ロ イ ドを,中. ス テ ロ イ ドを,鈴. H. W.. (1961). 山(1964)9)が3種. 木(1958)18)が4種. の. の ス テ ロイ ド. こ の 中 でSchmidt‑Elmendorff. 中 山 はGas 約1μg/100g,. Et. H. W.16)は15個. 40.8±15.1μ9/kg, 180.4±16.0μg/kgで. Liquid. chromatographyを. Ed約2μg/100g,. 約10. よ り1種,. et al.. Woolever. C. A.. の ス テ ロ イ ドが 測 定. 980μg,. い でPaper. 行 な つ て 胎 盤1kgあ. THE E. 特 に詳 細 な検 討 を 行 な い. 6μg,. 90μg,. Comp.. 20, 21‑diol.. テ ロ イ ド2種. F. Aldosterone. 4μg,. Subst.. U. 20μg,. 3μg,. Comp.. A. 45μg,. 3, 11‑dione. を 抽 出 し 分 離,定. 沢 崎 はFlorisil. column. 16μg,未. chromatography酸. 385.0μg/kg,. DHA. OH‑Andr.. μg/kg, ne. E. Etio.. 10.9μg/kgと. F 11‑. 報 告 しNeherはPaper. Comp.. F. B<0.2μg/kg.. Aldosterone<0.2μg/kg,. 35.0μg/kg,. Mitchell. 2.7μg/kg, DOC<0.2. 16α‑OH‑Pestoetero. 3, 11‑diketo‑17α,. trihydroxy‑△4‑Pregnene し て い る.. E+Comp. 35.4μg/kg,. 応 用 し てComp.. 20.7μg/kg,. 化 アル. 29.7μg/kg,Ed. Comp.. 24.5μg/kg,. chromatographyを. 同定 ス. 量 して い る.. ミナ カ ラ ム ク ロ マ トを 応 用 し てEo Et. chro. た り のProg.. 20β and. 15.0μg/kgで et al.はPaper. 20α,. 21. ある と報 告 chromatography. を 応 用 し て エ ス ト ロ ゲ ン に つ い て 報 告 し て い る.同. を 測 定 し て い る に す ぎ な い.. 胎 盤 に つ い てEo. (1956)5)が Diczfalusy. よ る 吸 着 ク ロ マ ト,次. matographyを. Comp.. に つ い て の 報 告 はSchmidt‑Elmendorff. 16.0μg/kg.. Silica‑gelに. 5μg/kg,. 外 の 未 報 告 のPregnane nolone,. et al. (1954)8). et al.. よ り1種. (1961). さ れ て い る.. 85.7μg/kg,. の と 考 え る.. 16)が3種. 胎 盤6個. みを 測 定 して い る と考 え ら れ る が. 結 論 を 下 す こ と は で き な い.. 次 に1胎. 胎 盤100個. (1961)20)が. 崎. R. G.. り そ れ ぞ れ3種,. (1959)4)が. Pregn4‑ene,. り精 製. り8種,沢. Neher. , Mitchell. よ り, Diczfalusy. 盤30個)よ. Comp.. 17‑OH‑P.. と 完 全 に 分 離 し,よ. 系 ス テ ロ イ ドで あ るP.. り7種. こ の う ち でBerlinerは. そ れ 等 の 測 定 値 と本 論 文 で の べ た 測 定 値 を 比 較 し. りや や 高 い 値 を 示 し て い る.こ. よ り7種,. 10が 明台盤30kgよ. 離,定. 離 についての報告 は. 胎 盤9kgよ. 胎 盤19個. kg(胎. 量 を し て い る に す ぎ な か つ た. 単 一 の ス テ ロ イ ドの 抽 出,分. (1956)2)が. (1957)が. が 胎 盤7個. 大 量 複 数 胎 盤 を 使 つ て ス テ ロ イ ドの 抽 出,分. Androstane. 大 量 複 数 胎 盤 を 使 つ て の ス テ ロ イ ド測 定 の 報 告 で. るい は. イ ドの み を 目 的 と し て 定 量 を 行 な つ た り,あ. を 測 定 し て い る.. も 同 一 胎 盤 よ り分 離 定 量 し て い る.. はBerliner. お け る 個 体 差 及 び そ の 特 徴 を 知 る上 に 極 め て 重 要 な こ と で あ る.し. に 対 して本 定. 又 そ の 他Pregnane系. 存 在 す る ス テ ロ イ ドス ペ ク トル ム と も 言 う ぺ き 多 数 の ス テ ロ イ ドの 含 有 量 を 同 時 に 知 る こ と は,胎. つ い て も 鈴 木 の4種. 量 法 で は 未 同 定 の2種. 系5種. に16‑eip‑Et. 量 し て い る 点 に 相 違 が み ら れ る.. 又Corticoidに. そ の 代 謝 経 路 が 次 第 に 解 明 さ れ つ つ あ る 現 在,. THE. あ る と 報 告 し て い る.. Ed. の. 100.7±. あ る と 報 告 し, 応 用 し てEo. Et約14μg/100gと. じ エ ス ト ロ ゲ ン に つ い てDiczfalusy 反 応 に よ つ てEo. 30.8μg/kg,. 227.8μg/kgを. Ed. et al.はKober 128.5μg/kg,. Et. 測 定 し て い る.. 以 上 の よ うな 大 量 複 数胎 盤 を 使 用 し た 測定 値 と本 論 文 で の べ た1個. の 胎 盤 か ら 同 時 抽 出 し精 製,分. 離.
(10) 大. 110. 塚. 憲. 一. した ス テ ロ イ ドの 測 定 値 と比 較 す る と エ ス トロゲ ン, Pregnane系,. Androstane系. 及 びCorticoid系. 第4章. ス テ. ロイ ドの 数 及 び量 に お い て す べ て 収定 量法 が 優 位 に 多 い こ とを 示 して い る.. れ,し. 正 常 満 期 産 胎 盤1個 を 単 位 と し,そ の組 織 中. ス トロゲ ン,. べ て 測 定 で き る新 定 量 法 を 確 立 し た.. いず れ か に 測 定 の 焦 点 が お か. 本 法 の 特 徴 は液 々分 配 に よ りエ ス トロゲ ン と 中 性. か も複 数 胎 盤 を 用 い て い る た め1個 の 胎 盤 内. ス テ ロイ ドに 分 離 し,中 性 ス テ ロ イ ド分 画 はFlorisil. の ス テ ロイ ド代 謝shiftの. 追 求 は で きな い.. column. この よ うな 観 点 か ら も本 定 量 法 は 満 足 す べ き も の で あ る.. chromatpgraphyに. 僅 か にMitchell EtをFree,. et al.が胎 盤7個. Conjugate,. を 使 用 してEo, Ed,. Protein boundと. 含 む 第2分 画 と に 分 け,更. 2). 本 定 量 法 の 回 収 率 は満 足 す べ き結 果 を 得 た.. 3). 本 定 量 法 を 用 い て 正 常 満 期 産 胎 盤16個 に つ い. て各 々21種 の 遊 離 型 ス テ ロイ ドの 含 有 量 を 測 定 した. 4). Sulfate,を 同 時 に抽 出 し分 離 す. 結 合 型 ス テ ロ イ ドに つ い て は3胎 盤 を1つ. 測 定 単 位 と,して,独 ろ こ とが 可 能 で あ り,そ の測 定 値 も満 足 す べ き もの で あ つ た. この よ う に抽 出,精. びTLCを. 応 用 した 本 定. 量 法 に よ り,従 来 の 方 法 で は み られ な か つ た1胎 盤. 自の 方 法 で 抽 出,分 離,定. の. 量し. 遊 離 型 ス テ ロ イ ドと対 比 した.. 製 を 厳 重 に 行 な いFlorisil. chromatography及. にTLC. る.. 分 離 して い る に す ぎな い.. Free, Glucuronide,. ステ ロ. ス テ ロ イ ドを 含 む 第1分 画. を 応 用 して これ ら分 画 を 一 層 詳 細 に 分 離 す る点 に あ. し て 抽 出,. 著 者 の 方 法 は3胎 盤 を1測 定 単 位 と し て い る が. 串 りPregnane系. イ ド及 びAndrostane系 とCorticoidを. 次 に結 合 型 ス テ ロイ ドに つ いて の 報告 を み て も,. c olumn. 論. に含 有 され て い る測 定 可 能 な遊 離 型 ス テ ロ イ ドを す. この よ うに 従 来 の 定 量 法 がProg.,エ あ るい わCorticoidの. 1). 結. 稿 を 終 る に 臨 み,御 指 導,御. 高 閲 を 賜わ つ た 恩 師. 橋 本 清 教授 に 深 甚 な 謝 意 を 表 す る と共 に,終 始 御 指 導を い た だ い た 故 吉 田 俊 彦 講 師 に 深 謝 し ま す.. に お け る ス テ ロイ ド分 布 の個 体 差及 び そ の特 徴 を 知. な お,本 論 文 の 要 旨 は 第38回 日本 内 分 泌 学 会 総 会,. る こ とが で き,今 後 の 胎 盤 内 ス テ ロイ ド研 究 に 寄 与. 第13回 日本 内 分 泌 学 会 西 日 本 地 方 部 会 総会 及 び第2. す る所 が 大 きい もの と確 信 す る.. 回 胎 盤 研究 会 に お い て発 表 した.. 参. 考. 1) Browne, J. S. L., cited by Collip, J. B.:. Calif.. 文. 11) Pearlman,. Acad. Med., 1, 38, 1931. 2) Berliner, H. A.:. D. L., E.:. and Salhanick,. Acta Endocr. (Kbh),. Suppl.. 12, 1953.. 4) Diczfalusy,. E., and Munstermann, A. M.: Acta. Endocr. (Kbh)., 5) Diczfalusy,. E., and Lindkrist,. 木 本 範 子:日. 産 婦 誌,. 7) Kumar, D. et al.:. P.:. Acta End. 782,. Amer. J. Obstet. Gynec.,. 10) Neher, R. G.: (Ger.). 新 医 学,. ル モ ン と 臨 床,. 6,. 373,. 1958.. 志 田 圭 三 他:ホ. ル モ ン ト臨 床,. 8,. 267,. 1960.. 15). 志 田 圭 三 他:ホ. ル モ ン と 臨 床,. 8,. 483,. 1960.. 16) Schmidt-Elmendorff, 17) Short,. 12,. 5,. H. W.:. 1957.. Acta Endocr., (K. 38, 527, 1961. (Ger.) R. V.:. 鈴 木 基 一:日. J. Endocr., 16, 415, 1958. 産 婦 誌,. W. W.,. 10,. 1679.,. 1958.. Mac Corquodale,. Sidney, A. Thayer and Doisy, E. D.:. D. W., J. biol.. Chem., 126, 195, 1938.. F. L.,. 中 山 徹 也:日. 志 田 圭 三 他:ホ. 14). 19) Westerfeld,. 1962.. and Davis,. R. E.:. Biochem.. 本 内 分 泌 学 会 雑 誌,. Experimentia,. 20) Woolever, C. A., Goldfien, A., and Page, E. W.:. J. 56, 690 1954. 9). 13). bh),. 57, 126, 1963. 8) Mitchell,. J. biol.. 沢 崎 千 秋:最. 18) 14,. and Cerceo, E.:. 12). 32, 195, 1959.. ocr., 22, 203, 1956. 6). W. H.,. Chem., 198, 79, 1952.. J. E.,. J. biol. Chem., 223, 1043, 1956.. 3) Diczfalusy, X11,. Jones,. 献. 39, 919,. 17, 510,. 1964.. 1961.. Amer.. J.. Obstet.. Gynec.,. 81,. 1137,. 1961. 21) Zander, J., and Dorfman, R. I.: Academic Press (New York), 2, 91, 1961..
(11) 正常胎 盤組織 中遊 離型 並に結合型 ステ ロイ ドホルモ ンの含有量 に関す る研究. 111. 22) Zander, I., and Munstermann, A. M.: Klin. Wschr., 34, 944, 1956.. Study on the Free and Cojugated. Steroids. in Normal. Placenta. By Kenichi. OTUKA. Department of Obstetrics and Gynecology, Okayama University Medical School, Okayama, Japan. (Directer; Prof. Kiyoshi Hashimoto) In. this. Twenty. study,. one. following 1). the. approach. steroids. in. was. placenta. tried. were. 2. steps. hydrolysis. Estrogen. 17.9±2.6,. (hydrolysis. (μg/one. Estriol:. with. Gestagens. C). Androgens (μg/placenta). Prog.:. (μg/one. 36.1±10.6,. 7.9±2.5,. Corticoids. II.. placenta.. B). new. Cojugated. There. Gestagens. Estrone:. of. method,. P.. steroids. in. placenta.. which. was. consisted. buffer. and. solvolysis). of. steroids. were. a. polar. little. 16‑epi‑Estriol: high. as. was. considered.. nolone:. 50.2±13.3,. DHA+Andr.:. 8.6±3.8,. Etio.:. 14.6±4.6. subst.: E:. 13.9±4.6,. (μg/placenta). not. 17‑OH‑P.. 23.0±4.0,. Comp.. in. was. 43.3±10.3,. 11‑OH‑Etio.;. Less. (μg/placenta). placenta. 16.9±5.9. B:1.1±1.1, THE:. acetate. Estradiol: 37.6±11.7,. in. nolone:. 14.6±3.2,. (μg/placenta). in. 33.0±:6.9, content. ⊿4‑A‑dione:. 3.1±2.8,. Estrogen. β‑glucuronidase. Estriol. 17‑OH‑Prog.:. Comp. THS:. A). determination by. were as followings.. placenta). 11‑keto‑Etio.:. 3.7±2.3, :(一),. placenta). 57.6±10.3,. B). D). the. procedure.. 2) Florisil column chromatography 3) Thin layer chromatography The results of this determination I. Free steroid in placenta A). with. determined. 10.2±1.6,. 17.9±2.8,. DOC: Comp.. THF:. 35.0±5.8,. sulfate. were. 6.8±3.5,. F: More. Comp.. 13.2±4.2, polar. Comp.. subst.:. A: S. 13.0±5.8. placenta Estrogen content. P.. as of. 16‑epi‑Estriol. nolone. and. present and. 17‑OH‑P.. Estriol. nolone. one. tenth. of. free. type. in. glucuronide.. that. were. ⊿5‑3β‑ol. type. steroidswere estimatedas sulfate. C) Androgens DHA+Andr. fractionas sulfatewas estimatedhigher content than free type.. All androgens glucuronide were not meassurable in placentar tissue. D) Corticoids Tetrahydro. comp. that were THF, THE, THS etc, as glucuronide were estimated considerably high. Above all, THE glucuronide was estimated higher content than free type of THE..
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