影 響 網 膜 す硫 酸

金沢大学 十全 医 学会 雑 誌 第1 01巻 第5 号 8 9 7 ^‑9 3 9 (19 9 2)

網膜^{に お よぼ}す硫酸^{ゲ ンタ マ イ シ ン の}_影響

金 沢 大 学 医 学部 眼 科 学 講 座 ( 主 任^: 河 崎^一 夫 教 授)

望 月 清 文

( 平 成4 年1 0月8 日受 付)

8 9 7

ア ミ ノグ リ^コシ ド系 抗生 剤, 硫 酸ゲン ク^マイシ ソ(g^{e n}ta micin s ulfate, G M) ^の硝 子体 内 注^{入 が}網 膜^にお よ ぼす 急 性お よ び慢 性 的影 響^を, 網 膜 電^図(^{ele ctr o r etin o}gr a m, E R G) ^{の a} 波, b 汲, 律 動 様 小波 (^{o s ci11ato r}y pote ntial.O P) お よ び ^一部^の実験 で はc波, 視 覚誇 発電 位 (^{vis u a11}y ^{e v o}ked pote ntial, V E P) な ら び に組 織 学 的所 見を指 標と して白 色お よ び有 色^{ウサギ で}検 討^し た. ま た電 気 生理学 的お よ び鼠 織 学 的検 討^に基^{づい て}限 内投 与^{し て}も 安 全^と判 断さ れ た量^のG M を硝 子 体 切 除 限^に投 与し た際

の網 膜 毒性^の有 無を電 気 生理学 的お よ び覿 織 学 的検 査 法にて検討した^. 次^に同 量^の G M を硝子 体 内投 与した際^{の G M の}限 内 動態を検 討し, そ^の限 内勤 磨か ら G M ^の再 注入 が望ま し^いと推測さ れ る時 期^に前記^の安 全注入量を硝子体 内^に反 復 投 与し た際

の網 膜^への影 響^{につ いて}も検 討^{し た.} さ ら に硝 子 体 内^への安 全な投 与 量か ら推 定し た濃 度^にG M を添 加し た限 内港 流 液を用^い て ウサギ限^の硝 子 体 切 除を行^い G M 添加 限 内港 流 液^の網 膜^への影 響につい て電 気 生^理学 的^{お よ び}鼠織 学 的 検 査 法^にて検 討^し た. G M を 全身 投 与^{し た}際^の硝 子 体 切 除 眼 あ^るいは水 晶 体^{お よ び}硝 子 体 切 除 限^{へ の}G M ^の眼 内移 行性^{につ い て}も 検討した^. ウ サギ^の正常 限^にお^いて G M 8 0p g 硝子体 内注入 で はa 波, b波お よ び O P な ら び に V E P ^の早 期成 分は ほ と ん ど変 化^{し な かっ} た. ま た組 織 学 的^にも 対照 限^に比し異 常 所 見^ほ認^められ な かっ た. 硝子体 切 除 賑^{への G M 8 0}捕 硝 子 体 内 注入 ほ網 膜^に影 響を お よ ぼ さ な か った. 白 色^ウサギ 正常 眼^{への G M 8 0}FLg の硝 子体 内1 回注入後^の硝 子 体 内 G M 濃 度^の半 減 期は約31時 間であっ

た^. G M 8 0F^Lg の2 回注入 は軽 度^の E R G 変 化を惹 起さ せ る^ので臨 床^上出 来^{る か}ぎ^り避 け^るべき^であ^{る と}思わ れ た^. G M 1 6 0F^Lg 硝 子体 内注入 で は調^{べた ウサギ 5} 匹 中²匹^で注入後2 週目に E R G が消失^{した. G M 2 0 0}p g は注入後1週でb 波お よ び

O P を軽度^に減 弱さ せ, 角膜 側 陰 性^の緩 徐な波 形をもた ら し た^. G M 1 6 0 お よ び 2 0 0_{p g} 硝 子 体 内注^{入によ る E R G} 変 化^の中^に は長 期の観 察 期 間 内^{に 回}復 傾 向^を示 す も^のがあ^{った. G M 2 4 0}鵬 硝子体 内 注入^では注入後 早 期 (2 ^〜 3 時 間) ^{に b}波が減 弱し,

V E P の早 期 成 分ほ有 意にほ変 化^{し な か った が}, 慢 性 的 観察^でほ硝 子 体 内 注入後2週目 ま^{で に} E R G は消 失し, E R G 変化^{は 不} 可逆 的であった^. G M 4 0 0_FLg 硝 子 体 内注^入の急 性 的観 察^{で はb} 汲振 幅^は著 明^に減 少^{した が}, C汲 振 幅^には増 大 ある^いほ減 少と

一定傾 向は な か った. V E P の早 期 成 分は対照 限に比し若 干^の延 長 傾 向を 示 し た が有 意差は な かった^. G M 2 0p g/^{r nl}硝 子体 内港 流で は硝 子 体 切 除 後4週目 ま で^に E R G には対 照 限と比^べほ と ん ど変 化^{ほ み ら れ}ず,鼠 織 学 的^にも異 常^はみ ら れ な か^った. G M 5 0_〃g/^ml硝 子 体 内港 流^でほ硝 子体 切 除 後^{1 〜} 2 週^で軽度^{の b} 扱お よ び O P の減 弱が認め ら れ た^. G M 5 mg/^kg 全 身 投与 後^に

おける硝 子 体 切 除 限^の硝 子 体 内G M 濃 度は測 定 限 界値 以下であ^った^. 水 晶 体お よ び硝 子体 切 除 眼^では術後 翌^{日 を}除^{い て}術 後⁴ 週 目ま で硝 子 体 内に G M の移 行^が認^{め ら れ た.} 電 気生理学 的^{お よ び}組 織 学 的 検査 法を指 標^にする と, 臨床^に用^いる際^の硝 子 体

内注入量と し て, 網 膜 毒 性^の観 点か ら, G M l O OJ^lg を推 奨 する^. ま た硝 子 体 切 除術^の際^に限 内港 流 液^に添 加 する G M 濃 度と し て同様^の観 点か ら 2恥g/^{ml を越え るべきで は ない.}

K ey ^{w or}ds g^{e n}ta micin, intr a vitr eal inj^{e ctio n, ele ctr o r etino}gr a m , Vitr ecto my, Clear ance fr om Vitr e o us c avlt y

細菌 性 眼 内炎^の治療^に際して _, 抗 生 剤^の全 身投 与^や結膜 下注 射ある^いほ点 眼な ど^の局所 投 与で は, 限血液 関 門^{のた め}限 札 特に硝 子体 内^にほ抗生 剤^の十 分な治療 濃度^が得られな^{い1 卜 3)} と さ れ ている^. そこで近 年, 抗 生 剤^の硝 子体 内注入 お よ び硝 子 体 切除術 時^の限 内港 流液^{へ の}抗 生 剤^の添 加^{な ど が}注目 さ れ, 抗 生 剤^の硝 子体 内注入あるいほ眼 内港 流液に薬 剤を添 加し た際^の限 鼠織^に対する毒性^の程 度^を動 物 実験^で検 討^し, 細 菌 性 限 内炎^の 治療^に有効かつ安 全な硝 子 体 内 注^入量 ある^いは濯 流 液 添加 濃 度

が報告さ れて いる^{4 ト 1 4).} これ ま で報 告さ れ て^い る濃 度^の抗 生 剤

を臨床 的^に用いた場 合^の有 効 性を支持 す^る報 告^{1 5 )‑2 2 )は}数多 くみ

A b br e viatio n s : A Gs, ami nogl_yc o side s; C E Z ,

ら れ る が,

一 方で は ^一 部^で推 奨さ れ^{て い}る硝 子 体 内注入量^肘),

例^えば硫 酸^{ゲンタマイシン}(ge ntami cin s ulfate, G M)^{4 0 0}F^Lg を 細 菌 性 限 内 炎の治 療^に使用 した ところ, 網 膜 障 害が生じ た と^い う報 告2 3 ト 2 5 )

もみ ら れ る. 従^{っ てこ の}分 野^の主な研 究 者^であ^る Peym a n, Fo r ste r,Za cha ry^, PaIim e ris お よ び D^'A mi c o ら^の報

告^{4 ト 1 4)}を参 考^にし ても 未だ安 全な薬 剤^の硝 子 体 内 投与 量^{に つ い}

ての定 見が ない のが現 状と^いえ よう^. そこ で, 本 研 究で は 主に

電 気 生理学 的 検査 法を用^い抗 生 剤を硝 子体 内注入 し た際のウ^サ ギ網 膜^{にお よ ぼ}す 影 響^について正 常 限^{お よ び}硝 子 体 切 除眼に お いて検 討^し, その結 果を基^に臨 床 的に抗 生剤^の至適な硝 子 体 内

C efa z olin s odiu m ; C T R X, Cef_tria x o n e s odiu m ; C E R,

C ephalo rid in e; E R G , ele ctr or etin og^{r a m ;} G M , g^{e n}ta micin sul fate; L F L X, lo m eflox a cin h_ydr o chlo ride; M IC,

minim u m inhibi^to ry c o n c e ntr atio n; O P, O S Cillato ry pote ntial; P A E , p^{O S}ta ntibiotic effe ct ; R P E,r etin al_pi_g m e nt

注入量^につい て考 接 する^. ま た安 全な硝 子 体 内 注入量を眼 内^に 投 与^{し た}際^の眼 内動 態^を検 索^し, 薬剤^の硝 子体 内再 注入^の必 要 性お よ び安 全性 なども あわ せ て検 討する^. さ ら^に安 全な硝 子 体 内注^入量か ら硝 子 体 切 除^の際^の安 全な濯 流 液添 加 薬 剤 濃 度を類 推し そ^の濃 度^にお け る薬 剤^の網膜^への影 響 も検 討 す^る. 加^えて 硝 子 体 切 除 限 あるいほ水 晶 体お よ び硝 子 体 切 除 眼に おい て G M を全 身 投 与^{し た}際^の限 内動 態^を検索^し, 手 術が限血液 関 門

にお よぼ す 影響^に関し ても あ^{わせ て}検 討 する^. 本 研 究で は‑ 網 膜 電 図(^ele ctr o r etin ogr a r n,E R G) ^のa 波, b 波, 律 動 様 小 波 (O S Cillato ry pot_{e n}tial,O P) お よ び ^一 部^の実 験^{で ほc} 波, 視 覚 誘 発電 位 (^{vis u all}y ^{e v o}ked pote ntial, V E P) な ら び^に組 織 学 的 検 査 をも 指 標と し て, ア ミ ノグ リ^コ シ ド系 抗 生 剤 (^{a mi n o}glyc o side s,

A Gs) ^のう ち最 も 臨 床 的^に使用 さ れ^{て い}る G M を選 択 し,

G M が ウサギ網膜^{にお よ ぼ}す 影 響^について検 討 す^る.

さて_, 当教 室 大 野 木^{2 6 )}は摘 出眼 杯 E R G を用い G M の ウサギ 網膜^{にお よ}ぼ す 影響^を検討^{し ている が}, 本研 究^での観察 法^と比 較 する と摘 出 限 杯准 流 法で は網 膜^にお よ ぼす薬 物^の作 用が直 接 的^であ^{る が}, 実 際^に臨 床 応 用する場 合には薬 剤の限 内 濃 度^の変 化, 網膜^における薬 剤の蓄 積性^{お よ び 血}流^の影 響などを考 慮 す る 必要^がある. ま た摘 出 眼杯 催流 法^の環 境^{2 8 )}ほ pH , 温 度, 電 解 質 阻 成な ど^の点^{でウサギの}生 理学 的環 境と ほ異な ったも^{の で}あ り, 薬物^の作用 が生体 内^における場 合と異な る^こと が予 想さ れ る^. 従って, 臨 床 的^に限 内投 与を行 う 際^の安 全 投 与 量^の決 定^に 生 体^における観 察は是 非とも 必 要^である^.

材料 およ び 方 法

Ⅰ. 1 回硝 子 体 内^{注 入}法

各実 験^に先立 ち瞳 孔ほ,0 ^.5% ト^{ロピ カ ミ}ド と0^.5% 塩 酸^フユ

ニレ フ リン( ^{ミドリン㊥p} , 参 天 製 薬^, 大 阪) ^の点 眼^によ り十 分

に散 大さ れ た^.

1 . 実験 動 物, 使用薬 剤 なら び^に注入薬 剤 濃 度

実 験 動物^{と し て ほ}予め ^一定 食 餌 (^ウサギ用 固 型 ^{R M}‑^{3, 船 橋} 農 場, 千 葉) ^にて 1 週 間 以上飼 育し た体 重2^〜3 kg の白 色ウサギ 3 5 匹 お よ び有 色^{ウサギ1 6}匹を使 用^{し た.} 本実 験^{で は}硝 子 体 内注 入前^の眼 底 検 査^{に て}網膜^に異 常が認め られた ウサギ お よ び硝 子 体 内在人前^{の E R G} 検 査^にて左 右 差^が明^{ら か な ウサ ギ}(^b 波 振 幅^にて2 0% 以上) を用いな かっ た^.

使 用^{し た G M ほ}研 究^用原 末 ( 力価5 6 7F^Lg/ ^mg, シ ェ リン グ ^･ プラウ, 大 阪) ^であった^{. 一} 部^の慢 性 実 験には実 際^の臨 床^ケこお ける硝 子 体 内 注入 を考 慮し, 商用 G M (ゲソ タ シ ソ㊧

軋 シ ェ

リング ^･ プラウ) を使用 し た^. ゲ ン タシ ソ⑳

注^{の 1 ア ンプル} (1ml) 内^にほ, 主 成 分と し て G M 4 0m g( 力 価), 無 痛 剤と し て^ベ

ン ジル ア ル^{コ ー} ル1 5mg, 安定 剤と し て乾 煉亜硫 酸^{ナト リ ウム} 0^.5m g お よ びピ ^ロ亜硫 酸^{ナ ト}リ ウ^ム1^.5 m g が含 有さ れて い

る.

硝 子体 内注入 に際し, G M 研 究 用 原 末 あるいほ商 用 G M (ゲ

ソタ シ ソ⑳

注, シェ リング ^･ プ ラ ウ) ^を眼 内港 流 液 (^{オ ペ} ガ ^ー ド㊧M A , 千 寿 製 粗 大 阪) ^で溶 解^{し て そ れ}ぞれ 0^.1^ml 変^,た り 8 0, 1 6 0,2 00 ,2 4 0, 40 0 ま た は 8 0恥g の G M を含 む 硝 子 体 内 注

入用 薬剤を作 製^{し た.}

G M の硝 子 体 内 注入量 (〝g) お よ び硝 子 体 内 濃 度 (′唱/

ml) ( 約1^･7^mlの ウ^サギ硝 子 体 内^に均等に拡 散す^{る と}仮 定した場 合) を以 下^の本 文 中^に記 載し た^.

急 性 実 験な ら び^に慢 性 実 験^にお^{い て}そ れぞれ使 用し た G M 硝 子 体 内注入量と各ウサギの数を表1 】 蓑2 な ら びに表^3に示 す^.

2 ^. 硝 子 体 内注入法

薬剤 注^入前^に硝 子 体 内注^{入によ る}眼 圧^上昇^を防 ぐた め に_, ま ずウサギに0^.4% 塩 酸^{オ キシブ プロ カイ ン}(^{ベ ノ}キシ ^ー ル㊥

, 参

天製 薬) ^によ る点 限麻 酔^を行^い球 結 膜^{上 よ り 上}直 筋 付 着 部を固 定 鋸 子で固定し, 角膜 輪 部よ り 1mI 用注 射 器^に接 続し た2 7 ゲ^ー ジの注 射 針を前 房 内^にそ^の切り^口を角 膜 側に向け約4m m 刺入 し, 0.1^ml の前 房水 を排 除し た^. 次に 上直 筋 付 着部を固定 銘子 で固 定し た ま まよ1ml 用 注 射 器^に接 続し た2 7 ゲ ^ー ジの注 射針を 用^{い て}角膜 輪 部^{か ら}後 方 約^{2m m で}硝 子 体 内^ほぼ 中 央^にその切 り口を水 晶 体 側^に向け 刺入 し, 薬 剤を緩 徐に注入 し た( 図1)^.

一 眼^の硝 子 体 内^{にオペ ガ ー ド⑧M A に G M を}溶 解^{し た}注入用薬 剤0^.1mI を, 他 眼 ( 対 照 限) ^には オ^ペ ガ ^ー ド^㊥ M A O^.1 血 のみ を注入 し た.

と^ころ で, 薬物を ^一 眼^の硝 子体 内に注入 し た後に眼 内^{か ら}排 出さ れ た薬 物が 血中を介して他 眼^へ移 行 する 可能 性が考え られ る. 鳥 崎ら^{2 T)}ほ塩 酸^{ロメ フロ キサ シ▼ン} (^{lo meflo x a cin h}ydr o chT

lo ride, L F L X) を オ^ペ ガ ^ー ド^⑧ M A に溶 解 し, そ ^の 0^.2ml (^{2 0}恥g) ^を白 色^{ウサギの 一} 眼^の硝子体 内^に投 与^し, 投 与後^の L F L X 投 与 限お よ び非 投 与 限 ( 他 限) に おける各 限鼠 織 内およ び 血清中^{L F L X} 濃 度^を測 定し た. その結 果, 投 与後^{7 2}時 間^{ま で}

のL F L X 投 与 眼の硝子体 中お よ び網 脈 絡 膜 中の最 高 濃度(両^サ

ンプ^ルとも 投 与 後⁶時 間^の値) ほ そ れぞれ 1 4 .8 7 9_{/ 堰}/^{ml お よ}

び 1 5^.5 0〟g/g であっ た^. ま た他 眼 ( 非投 与 眼)^{に お}け^る硝 子体中 濃 度^の最 高 値は投 与後48時 間で 0^.0 0 5J 唱/ ^{ml であり, 非投 与眼}

の網脈 絡 膜 内^{L F L X} 濃 度^ほ全 経 過 中 (投 与後^{7 2}時 間^{ま で}) 測 限 界 値 以下^であ^った という^. ゆ え に投 与 薬 剤^の違^いはある が^一 眼^の硝 子 体 内^に投 与さ れ た薬物^が他 限^の網 脈 絡 膜^に移 行す^る割 合は, 投 与 眼 網 脈 絡膜 薬物 濃 度^の高^々3/¹,0 0 0 ^レベル と推 測^さ れる. ま た Rubin stein ら^{l )}によ る と臨 床 的^に硝 子 体 手術術 前^に 行^った G M l O Om g 筋 肉 内注 射^では術 中 採 取し た硝子体 液中^に ほ測 定 限 界 値 (^0.2FLg/^{ml) 以上の G M 濃 度は認め ら れ な かった}

と^いう^. 従って対 照 限 嗣 脈 絡 挨 内^{G M} 濃 度^{が G M} 硝 子体内投 与 眼^の網 脈 絡 膜 内濃 度^の3/¹,0 0 0 ^{レ ベ}ルとすれば, 本 研 究^にお ける硝 子体 内 注入量^ほ全 身 投 与 量^に比^し微 量^であ^{ること か ら}も

F ig^.1. D iagr a m of int_{r a v}itr e al inj^{e ctio n･ A 27}T^{ga uge n e edle}

w a s intr odu c ed into the mi dvitr e o u s c a vit y thr o ugh ^the

s cle r a2 m m p^{o s}t_{e r}io rto thelimbu s^.

epitheli^{u m} ; R F P, rifa mpicin; V C M , Van C O my^Cin hydr o chl^oride; V E P ,Vis u a11_y ev oked _pote ntial_; G A 乳

グルタ ^ー ル ア ルデ^ヒ ド液^{‑ 0.0 5 M リソ}酸 緩衝 液

2^.5%