以降，社会的に注目されるようになった．その後，

序 文

腸管出血性大腸菌感染症は，1982 年にアメリカ 合衆国で発生したハンバーガー食中毒事件

から 見つけ出された新興感染症のひとつであり，わが 国では，1990 年，埼玉県浦和市の幼稚園で発生し た腸管出血性大腸菌 O157 による集団発生事例

以降，社会的に注目されるようになった．その後，

1996 年の 9,000 人を超える O157 による全国規模 の患者発生

を契機に，同年 8 月，腸管出血性大腸 菌感染症は指定伝染病となり，患者および保菌者 の届け出が義務付けられた．中・四国地区におい ても，1996 年以降，O157 を始めとする多種類の血 清型菌による腸管出血性大腸菌感染症が続発し，

その感染源対策が公衆衛生上，重要な課題となっ ている．一方，近年の分子遺伝学的手法の進展に 伴い，細菌のゲノム情報を解析することで疫学的

中・四国地区における腸管出血性大腸菌感染症の 疫学的解析と分離菌株の細菌学的検討

愛媛県立衛生環境研究所^1），鳥取県衛生研究所^2），島根県保健環境科学研究所^3），山口県環境保健研究センター^4）， 岡山県環境保健センター^5），広島県保健環境センター^6），広島市衛生研究所^7），徳島県保健環境センター^8），

香川県衛生研究所^9），高知県衛生研究所^10），国立感染症研究所^11）

田中 博

谷尾 進司

保科 健

冨田 正章

中嶋 洋

榊 美代子

河本 秀一

清水 俊夫

砂原千寿子

安岡 富久

井上 博雄

渡辺 治雄

（平成 14 年 1 月 11 日受付）

（平成 14 年 4 月 3 日受理）

1996 年から 1999 年までの 4 年間に，中・四国地区の地方衛生研究所が把握した腸管出血性大腸菌感 染症の発生状況と，それらの症例から分離された腸管出血性大腸菌（EHEC）の菌学的特性を調べること により，同地区における腸管出血性大腸菌感染症の疫学的解析を行うことができた．

22 事例の施設内集団発生事例では，保育園や老人ホームなどの若・高年齢層の集団に発生する傾向を 示し，その血清型は O157 のほか O26，O111 等によるものであった．これらの施設内発生事例のうち 4 事 例では，日本そば，サラダ，砂場，山羊の糞から EHEC を分離することができ，感染源が特定された．

家族内発生例も含めた 898 例の散発例では 24 種類の血清型が認められ，パルスフィールドゲル電気泳動

（PFGE）による O157：H7 の遺伝子型（PFGE 型）も多岐にわたっていた．また，無症状保菌者が家族 内発生例の成人層に多く見られたことから，感染源として健康保菌者の存在が重視された．EHEC の薬 剤感受性試験では，供試菌 924 株の 24％ に耐性菌が認められた．

〔感染症誌 76：439〜449，2002〕

要 旨

別刷請求先：（〒790―0003）松山市三番町 8 丁目 234

愛媛県立衛生環境研究所 田中 博

Key words： enterohemorrhagic

Escherichia coli, Escherichia coli

Table 1 Outbreaks of EHEC infection in facilities, 19961999, Chugoku- Shikoku area

Source of infection  PFGE

Type Toxin

Sero Type Type No. of

EHEC isolation persons Place of infection

Prefecture Date of

outbreak Case

School-provided lunch

（suspected）

T5 VT1，2 O157：H7

112 Primary school

Okayama 1996．5．24

1

School-provided lunch

（suspected）

T4 VT1，2 O157：H7

276 Primary school

Okayama 1996．6．11

2

School-provided lunch

（suspected）

T1 VT1，2 O157：H7

47 Primary school

Hiroshima 1996．6．11

3

Unknown Others

VT2 O157：H7

2 Nursery

Kohchi 1996．7．17 4

Unknown Not

examined VT1，2

O157：H7 4

Nursery Tokushima 1996．9．13

5

Unknown VT2

O114：H19 2

Nursery Tottori

1997．5．17 6

Buckwheat noodles（isolated）

T1 VT1，2 O157：H7

85 Hospital

Okayama 1997．6．18

7

Unknown VT1

O26：H11 6

Nursery Tottori

1997．9．9 8

Unknown VT2

O121：H19 4

Nursery Kohchi

1998．4．14 9

VT2 O121：HUT

Unknown T1

VT1，2 O157：H7

2 Home for the aged Shimane

1998．7．23 10

Unknown VT1

O26：H11 10

Nursery Kagawa

1998．8．7 11

Wading pool（estimated）

VT1 O26：H11

13 Nursery

Okayama 1998．8．10

12

Wading pool（estimated）

VT1，2 O111：H⁻

6 Nursery

Hiroshima 1998．9．5

13

Unknown VT1

O111：HUT 2

Nursery Tottori

1998．10．8 14

Sand box（isolated）

VT1 O111：H⁻ 40

Nursery Hiroshima

1998．11．9 15

Mixed salad（isolated）

T63 VT2

O157：H7 27

Home for the aged Yamaguchi

1998．11．14 16

Person to person（estimated）

T8a VT2

O157：H7 32

Nursery Okayama

1999．1．20 17

T26a

Unknown T84a

VT2 O157：H7

5 Business office

Shimane 1999．5．23

18

Feces of goat，Sand box

（isolated）

VT1 O26：H11

106 Nursery

Hiroshima 1999．6．5

19

Unknown VT1，2

O26：H11 13

Kindergarten Hiroshima

1999．7．12 20

Unknown T32

VT1，2 O157：H7

8 Nursery

Hiroshima 1999．8．21

21

Unknown VT1

O26：H11 16

Nursery Hiroshima

1999．11．9 22

解 析 に 役 立 て よ う と す る PFGE に よ る 染 色 体 DNA 解析法が O157 の集団発生事例や散発的集 団発生事例（diffuse outbreak）の疫学調査に応用 され，その有効性が示されている

．

我々は，腸管出血性大腸菌感染症の実態把握と 予防対策に寄与することを目的に，中・四国地区 で発生した本菌感染症の発生状況を調査するとと もに，その分離株について，従来から疫学調査の 解析に用いられている血清型別や毒素型別などの 表現型解析に加え，PFGE による遺伝子型別を実 施した．

材料と方法

1．発生状況に関する調査

1995 年 5 月から 1999 年 12 月までの期間，中・

四国地区 9 県と 1 政令指定都市に存在する 10 カ

所の地方衛生研究所が把握した腸管出血性大腸菌 感染症の発生状況について調査した． 調査項目は，

発生地域，発生施設，発生時期，臨床症状，感染 源である．

2．菌学的特性に関する調査

上記の発生症例から分離された EHEC の血清 型別，ベロ毒素型別，薬剤耐性パターンを各衛生 研究所で調査した．なお，O157：H7 の PFGE 型別 は国立感染症研究所（感染研）で実施した．

血清型別

市販の型別血清（デンカ生研）を用いて実施し た．型別できない菌株は感染研が保有する型別血 清で型別を試みた．

ベロ毒素型別

市販の抗ベロ毒素抗体（デンカ生研）を用いた

440

感染症学雑誌 第76巻 第 6 号

Table  2 No. of sporadic cases and familial infection  cases in EHEC infection

Number of cases

Total 1999 1998 1997 1996 Year

489 149 160 102 77 Sporadic cases

409（167）

129（55）

110（42）

101（41）

69（29）

Familial infection cases（Families）

Table  3 Serotypes and VTtypes of EHEC isolates  during 19961999 in the Chugoku-Shikoku area

Total VT1．2 VT2

VT1 Serotype

643 459

176 8

O157：H7

26 19

7 O157：H⁻

128 5

123 O26：H11

34 2

32 O26：H⁻

1 1

O26：HUT

31 8

23 O111：H⁻

1 1

O111：H49

4 3

1 O111：HUT

1 1

O6：H49

1 1

O18：H7

1 1

O91：H14

2 2

O103：H2

2 1

1 O103：HUT

4 4

O114：H19

1 1

O119：H⁻

2 2

O119：HUT

1 1

O121：H19

4 2

2 O128：H2

1 1

O146：H21

1 1

O165：H21

1 1

O165：H⁻

1 1

OUT：H2

4 1

3 OUT：H7

3 1

2 OUT：H⁻

898

ラッテクス凝集反応，または PCR による毒素産生 遺伝子の確認試験により菌株のベロ毒素型を決定 した．

薬剤感受性試験

センシ・ディスク（BBL）とミューラーヒント ン II 寒天培地（BBL 生培地）を用いて KB 法で 行った．供試薬剤は，アンピシリン（ABPC），ク ロラムフェニコール（CP） ，ストレプトマイシン

（SM） ，トリメトプリム ! スルファメトキサゾール

（ST），テトラサイクリン（TC），トリメトプリム

（TMP） ，シプロフロキサシン （CPFX） ，ゲンタマ イシン（GM），カナマイシン（KM），ナリジクス 酸（NA），セファタキシム（CTX），ホスホマイシ ン（FOM）の 12 剤である．薬剤感受性の判定基準 は米国臨床検査標準委員会（NCCLS）の抗菌薬 ディスク感受性試験実施標準

に従った．

PFGE 型別

O157：H7 の PFGE 型別は，Izumiya ら

が実施 した方法で行い，制限酵素 XbaI で処理した染色 体 DNA の断片泳動像を感染研が設定した基準パ ターンにより PFGE 型を決定した．

結 果

1．施設内集団発生事例の解析

調査期間中，保育園や老人ホームなど特定の施 設内で集団的に発生した事例は 22 事例であった．

その発生状況と分離株の特性を Table 1 に示し た．発生施設は保育園での発生が最も多く見られ ているが，高年齢者入居施設である老人ホームで も発生する傾向が認められた．

分離された菌株の血清型は O157：H7 が全事 例の半数を占めたが，1997 年以降，O26 や O111 など O157 以外の血清型菌による事例が増加の傾 向を示した．また，2 種類の血清型（O121：H9 と O121：HUT）や PFGE 型（T8a と T26a）によ る混合感染と思われる事例（事例 9 と事例 17）も 見られた．

施設内発生事例の感染源は不明もしくは推定に よるものが多く，食品等から菌が分離された事例 は 4 事例（事例 7， 15， 16， 19）のみであった．この うち O157：H7 の分離された日本そばとサラダ は病院と老人ホーム（事例 7， 16）の給食であり，

血清型，毒素型，PFGE 型が患者由来株と一致した ため，原因食品とされた．また，O26：H11 による 事例（事例 19）では砂場の砂，飼育されているヤ ギからも同一血清型菌が分離され，O111：H

に よる事例（事例 15）でも同一血清型菌が砂場の砂 から分離された．

2．散発例の解析

調査期間中に中・四国地区の各衛生研究所が把

握した同地区の家族内発生例も含めた散発例は

Table 2 に示すとおり 898 例であり，このうち，家

Table  4 Distribution of EHEC strains by prefecture during 1996―1999

1999 1998

1997 1996

Year

Total J I H G F E D C B A Total J I H G F E D C B A Total J I H G F E D C B A Total J I H G F E D C B A Pref.

196 23 9 13 6 15 9 73 25 9 14 189 12 8 21 16 8 10 51 39 9 15 133 21 5 12 10 13 5 28 14 2 23 125 5 8 7 16 38 26 10 15 O157：H7

7 1

2 4 6

5 1

10 1 1 1 5 2 3 1

1 1 O157：H⁻

48 2 1 6 7 12 13 4 3 38 6 1 5 1 14 3 3 5 30 2 1 2 13 8 1 2 1 12 3 2 1 1 1 1 3 O26：H11

8 2 3 1 2

12 3

1 1 1 6 12 1

10 1 2

1 1

O26：H⁻

1 1

O26：HUT

7 4 3

13 2 1 7 1 2 9 1 2 1 2 2 1 2 1

1 O111：H⁻

1 1

O111：H49

3 3

1 1

O111：HUT

1 1

O6：H49

1 1

O18：H7

1 1

O91：H14

2 2

O103：H2

2 1

1 O103：HUT

1 1

3 3

O114：H19

1 1 O119：H⁻

2 2

O119：HUT

1 1

O121：H19

4 2

2 O128：H2

1 1

O146：H21

1 1

O165：H21

1 1

O165：H⁻

1 1

OUT：H2

2 2

2 2

OUT：H7

2 2

1 1

OUT：H⁻

278 29 13 13 18 24 10 88 45 19 19 270 20 14 23 27 8 12 81 44 13 28 204 25 5 15 11 21 34 39 22 6 26 146 5 11 11

＊

＊ 17 40 27 16 19 Total

A : Hiroshima pref. B : Hiroshima city C : Yamaguchi pref. D : Okayama pref. E : Shimane pref. F : Tottori pref. G : Kagawa pref. H : Tokushima pref. I : Kochi pref.

J : Ehime pref.

＊ Case reports of Tottori and Kagawa pref. in 1996 is unknown

田中博他442

感染症学雑誌第76巻第6号

族 内 発 生 例 は 409 例（167 家 族） ，単 発 例 は 489 例であった．この単発例の中には給食従事者等を 対象とした保菌検査で検出された保菌者も含まれ ている．散発例の発生状況と分離株の特性は次の とおりであった．

1）分離株の血清型と毒素型

検出された EHEC の血清型と産生するベロ毒 素の毒素型を Table 3 に，県別検出状況と年次別 検出状況を Table 4 に示した．

4 年間に検出された菌株（898 株）の血清型は 24 種類で O157 の占める割合は 74％（669 例），次で O26（163 例 18％），O111（36 例 4％）であった．

この状況は各県とも同様であったが，岡山県では 他県に比べ比較的多くの血清型が認められた．

2）月別検出状況

調査期間中に検出された EHEC の月別検出状 況を Fig. 1 に示した．

EHEC は年間を通じて検出されているが，毎年 6 月から 9 月までの夏期をピークにほぼ正規分布 状に検出された．

3）年齢分布と臨床症状

O157 検 出 例 と O157 以 外 の 血 清 型 菌（nonO 157） 検出例の年齢分布と臨床症状および家族内発 生の頻度について Table 5 に示した．

O157 検出例 669 例のうち単発例は 380 例（57

％） ， 家族内発生例は 115 家族 289 例 （43％） であっ た．nonO157 検 出 例 で も 229 例 中 単 発 例 は 109 例（48％），家族内発生例は 52 家族 120 例（52％）

であった．

O157 検出例 669 例の年齢分布は，10 歳以下の 年齢層が全体の 44％ を占め，nonO157 検出例で は 69％ であった．無症状保菌者は，O157 検出例，

nonO157 検出例とも家族内発生例の成人年齢層 に多く認められ（20 歳以上の無症状保菌者の割合 は O157 の家族内発生例では 30％，nonO157 の家 族内発生例では 23％） ，有症者の頻度は低年齢層 に高い傾向を示した．HUS （軽度，疑いも含め） は，

O157 が検出された 6 例の患者に認められた．

4）O157：H7 の PFGE 型別

散発例（家族内発生例を含む）から検出された O157：H7 643 株のうち，PFGE 型別を実施した 554 株の PFGE 型の年次別分布を Table 6 に，県 別分布を Table 7 に示した．

PFGE 型は 112 種類に型別された（表中に oth- ers と記載された菌株は，感染研が設定した基準 では型別できず，菌株のパターンも全て異なる） ． このうち 5 カ所以上の広い範囲に分布し，比較的 多く検出された PFGE 型は 8 種類（T1， T8， T10，

Fig. 1 Monthly incidence of EHEC isolation, May 1996―Dec. 1999, Chugoku-Shikoku area

Table  5 Clinical symptoms of cases by age group

B．EHEC Non-O157（other serotypes）

A．EHEC O157

Age in years Age in years

≧ 61 21―60 11―20 6―10

≦ 5

≧ 61 21―60 11―20 6―10

≦ 5

229 5 48 18 32 126 Total

669 44 232 100 96 197 Total

No. of sporadic No. of sporadic

109 2 17 13 15 62 cases

380 23 130 78 50 99 cases

   18 8

1 9

No symptom 37

3 28 3 3

No symptom

19    1

2 5 11 Fever

81 6 19 16 9 31 Fever

38 1 6 7 14 10 Abdominal pain 230

15 75 63 40 37 Abdominal pain

7    1

2 1 3 Vomiting

35 2 10 7 5 11 Vomiting

3    1

  1

1 Flabby stool

15 4

6 1 4 Flabby stool

82 2 8 11 15 46 Diarrhea

294 17 85 62 44 86 Diarrhea

31 2

2 6 21 Bloody diarrhea 186

14 54 35 27 56 Bloody diarrhea

HUS 4 2

2 HUS

No. of familial No. of familial

120 3 31 5 17 64 infection cases 289

21 102 22 46 98 infection cases

64 28

2 11 23 No symptom

140 9 79 11 15 26 No symptom

14 1

  1

12 Fever

40 3 6 3 8 20 Fever

26 1 3 3 3 16 Abdominal pain 83

8 15 9 25 26 Abdominal pain

2 1    

1 Vomiting

10 1 1 4

4 Vomiting

3 1 1 1

Flabby stool 7

2 5

Flabby stool

49 3

2 4 40 Diarrhea

132 9 22 10 30 61 Diarrhea

22 1 1 2 2 16 Bloody diarrhea 64

7 7 4 14 32 Bloody diarrhea

HUS 2 2

HUS

T17， T20， T24， T27， T101）であった．代表的流行 株の PFGE パターンの泳動像を Fig. 2 に示した．

なお，1998 年まで中・四国の広範囲で最も多く検 出されていた T1 は 1999 年にはまったく検出さ れなかった．

3．EHEC の薬剤感受性試験

施設内発生事例および散発例から分離された EHEC 924 株（O157：H7 625 株，O157：H

25 株，O26：H11 157 株，O26：H

34 株，O26：HUT 1 株，O111：H

41 株，O111：H49 1 株，O111：

HUT 5 株，O6：H49 1 株，O91：H14 1 株，

O103：H2 2 株，O103：HUT 2 株，O114：H19 6 株，O119：H

1 株，O119：HUT 2 株，O121：

H19 4 株，O121：HUT 1 株，O128：H2 4 株，

O146：H21 1 株，O165：H21 1 株，O165：H

1 株，OUT：H2 1 株，OUT：H7 4 株，OUT：H

3 株） について薬剤感受性試験を実施した．その結 果，O157，O26，O111，O119，O121，O128，OUT の 血清型菌 220 株 （24％） に耐性菌が認められ，その

耐性パターンは Table 8 に示したとおりであった．

O157：H7 では 151 株（24％）に耐性菌が認めら れた．耐性パターンは 13 種類で，SM,TC の 2 剤耐 性パターンが最も多く検出された．O26：H11 で は 34 株 （22％） に耐性菌が認められた． 耐性パター ンは 9 種類で，ABPC，SM，TC，KM，CP，ST，

TMP の 7 剤 に 耐 性 を 示 す 菌 株 や FOM 耐 性 株

（6.4％）が検出された．O111：H

では 12 株（29

％）に耐性菌が認められ，耐性パターンは 7 種類 であった．

考 察

今回の調査期間中， 中・四国地区では 22 事例の EHEC による施設内発生事例が保育園，小学校を 中心に認められた．また，家族内発生例を含めた 散発例は 6 月から 9 月の夏期に多発し，その分離 株の 血 清 型 は O157（74％） ，O26（18％） ，O111

（4％）の 3 種類が大多数（96％）であった．しか し， これら 3 種類の血清型以外にも 16 種類の血清 型菌が検出され，その血清型は多岐にわたってい

444

感染症学雑誌 第76巻 第 6 号

Table  6 PFGEtypes of O157：H7 isolates by year 1999

1998 1997 1996 Type 

12 7 20 T1

1 T2

1 T3

1 T4

3 2 T5

1 T6

1 T7

6 14 1 T8

1 T9

10 3 13 17 T10 

2 T11

1 1

1 T12

4 T13

3 1 2

T14 1 T15

4 T16

14 2 2

T17

2 8 3

T18

5 T19

13 13 T20

1 1 T21

1 T22

5 T23

4 3 8 3 T24

1 T25

15 T26

2 6 2 T27

1 1 2 T28

3 1 3

T29

1 T30

4 T31

1 T32

3 T33

1 T34

1 T35

3 T36

1 T37

1 T38

1 T39

1 T40

1 T41

1 T42

11 T43

1 T44

2 T45

1 2

T46

1 T47

3 T48

1 T49

4 T50

4 T51

1 T52

1 T53

2 T54

1 T55

3 3 1 T56

1 T57

4 2

T58

Deg.: Degradation NE: Not examined 1999 1998 1997 1996 Type 

1 T59

1 T60

1 T61

1 T62

2 1 T63

1 T64

5 2 2

T65

8 2 4

T66

1 T67

4 T68

2 T69

1 1 T70

4 8 T71

2 2

3 T72

1 T73

1 T74

1 T75

1 T76

1 T77

1 1

T78

1 T79

2 T80

4 T81

1 1 T82

1 T83

1 T84

2 T85

2 T86

1 T87

1 T88

1 T89

1 T90

1 T91

1 3 T92

1 T93

2 T94

1 T95

1 1 2

T96

1 T97

2 T98

1 T99

5 1 1 T100

2 4

2 T101

2 T102

6 T103

2 T104

2 T105

1 4 4 2 T106

1 T107

3 1

T108

1 T109

6 2 1 1 T110

2 T111

1 T112

22 12 13 9 Others

1 4 6

Deg.

14 46 10 19 NE

た． これらの発生状況は全国の発生状況

と同様な 傾向であった．一方，施設内発生事例 22 事例のう ち，O157 による事例は 11 事例，他の事例は O26

（6 事例），O111（3 事例），O114（1 事例），O121

（1 事例）によるものであり，O157 以外の EHEC

による集団発生事例の増加傾向が認められた．特

に広島県における O26 の事例（事例 19）と O111

の事例 （事例 15） では菌分離者数が，それぞれ 106

Table  7 PFGEtypes of O157：H7 isolates by prefecture J

I H G F E D C B A Type

1 2 2

30 4 T1

1 T2

1 T3

1 T4

1 4 T5

1 T6

1 T7

1 4

9 2 1 2 2 T8

1 T9

13 5 1 1

4 9 5 5

T10

1 1

T11

1 1 1

T12

4 T13

1 2

1 2 T14

1 T15

4 T16

10 2

1 3 1 1

T17

7 1

3 2

T18

5 T19

1 2 12

8 1 2 T20

1 1

T21

1 T22

5 T23

2 2 2 4 2 1

5 T24

1 T25

11 2 1 1

T26

2 1

2 1 4 T27

1 3 T28

5 1 1

T29

1 T30

4 T31

1 T32

3 T33

1 T34

1 T35

3 T36

1 T37

1 T38

1 T39

1 T40

1 T41

1 T42

1 9

1 T43

1 T44

2 T45

3 T46

1 T47

3 T48

1 T49

2 2 T50

4 T51

1 T52

1 T53

2 T54

1 T55

3 2

1 1 T56

1 T57

2 1

2 1 T58

A: Hiroshima pref. B: Hiroshima city C: Yamaguchi pref. D: Okayama pref. E: Shimane pref. F: Tottori pref. G: Kagawa  pref. H: Tokushima pref. I: Kochi pref. J: Ehime pref.

Deg. : Degradation NE: Not examined

J I H G F E D C B A Type

T59 1

1 T60

1 T61

1 T62

2 1 T63

1 T64

2 4

3 T65

2 9

1 2 T66

1 T67

4 T68

2 T69

1 1

T70

2 1

1 8 T71

1 4

2 T72

1 T73

1 T74

1 T75

1 T76

1 T77

1 1 T78

1 T79

2 T80

3 1

T81

1 1

T82

1 T83

1 T84

2 T85

2 T86

1 T87

1 T88

1 T89

1 T90

1 T91

2 2

T92

1 T93

1 1

T94

1 T95

1 1

2 T96

1 T97

2 T98

1 T99

1 1

5 T100

1 4 1

1 1 T101

2 T102

6 T103

1 1

T104

1 1

T105

3 4

3 1 T106

1 T107

4 T108

1 T109

1 5

2 2

T110

2 T111

1 T112

4 4 4 3

3 18 11 4 5 Others

1 2 2

2 4

Deg.

3 7 4 1 5 17 17 2 33 NE

名，40 名と比較的規模も大きく，また，事例 19 の感染源は山羊を含めた広範囲な環境汚染による ものと推察された．現在，O157 以外の O26 や O

111 等では効率の良い分離法や PFGE 型別による 疫学的解析法が今だ十分に確立されていないた め，今後，これらの血清型菌に対する検査法や疫

446

感染症学雑誌 第76巻 第 6 号

M 1 2 3 4 5 6 7 M

（kb）

485 388 194

97

48.5

PFGE type Lane 1：

2：

3：

4：

5：

6：

7：

T1 T8 T10 T20 T24 T27 T101 M：Lambda ladder

Table  8 Drug-resistance patterns of EHEC strains isolated during 19961999 in the Chugoku- Shikoku area OUT：

H⁻ OUT：

H7 O128：

H2 O121：

HUT O119：

HUT O119：

H⁻ O111：

HUT O111：

H⁻ O26：

H⁻ O26：

H11 O157：

H⁻ O157：

H7

2 ABPC，SM，TC，

KM，CP，ST，TMP

2 2

ABPC，SM，TC，KM，

CP

3 ABPC，SM，TC，

KM，NA

4 ABPC，SM，TC，ST，

TMP

1 SM，KM，CP，ST，

TMP

2 2 1 1 ABPC，SM，TC，KM

1 ABPC，SM，TC，NA

5 ABPC，SM，ST，TMP

2 1 43

ABPC，SM，TC

1 ABPC，SM，FOM

1 1 1

SM，TC，KM

2 SM，TC，CP

1 1

SM，TC，FOM

2 SM，KM，NA

1 TC，ST，TMP

1 13

ABPC，SM

2 1

7 3 56 SM，TC

1 KM，GM

1 4

4 ABPC

2 3

6 SM

7 1 13 TC

1 KM

2 CP

9 FOM

1 2 1 1 1 1 2 12 7 34 7 151 Total

Fig. 2 Main types of PFGE pattern ofXbaI-digested genomic DNA from O157：H7 isolates in Chugoku-Shikoku area

学的解析法の開発が必要と考える．

EHEC の発生動向の疫学的解析手段として，従 来から分離株の血清型別，毒素型別，生物型別な どが用いられている．最近，これらの試験法に加 え，PFGE 型別を疫学マーカーとする分子疫学的 解析が広く実施され，集団発生事例での原因究明 調査に用いられている

．今回の調査でも， 施設内 発生事例において，患者由来株と食品等由来株の PFGE 型が一致し，原因食品等が特定された事例 が 4 事例あった．また，家族内発生例においては，

PFGE 型別により家族間の感染状況を詳細に知る ことができ，その有用性が認識された．一方，全 国規模での PFGE 型別による疫学解析により共 通の食品を介した全国レベルでの diffuse out- break の発生も確認されている

．今回の調査で も 散 発 例 か ら 分 離 さ れ た O157：H7 に つ い て PFGE 型 別 を 実 施 し，diffuse outbreak の 感 染 源，感染経路の究明を試みた．その結果，T1 のよ うに中・四国地区の比較的広範囲から分離される PFGE 型が数種類認められたが，特定の感染源を 推察することはできなかった．しかし，散発例の 中には，患者の行動が牛舎と近接していた例（O 26：H11 検出例）や生肉をよく食べる親子の家族 内発生例（O157：H7 が父と子供から同時に検出 され， 子供は半年前に O26：H11 に感染している）

など，患者の喫食状況や行動が詳しく調べられて いた事例があった．このような詳細な疫学情報を 伴った事例において，PFGE 型別は感染源，感染経 路を究明するための有効な手段となると思われ た．したがって，PFGE 型別を活用するには，詳細 な疫学調査が必要であり，詳細な疫学調査が広い 範囲での diffuse outbreak を見つけ出す手がか りになると考える．今後，疫学情報を念頭に置き，

食材や環境由来株の PFGE 型を全国規模で監視 することが必要と思われる．

薬剤感受性試験の結果， 分離菌株の 24％ に耐性 菌が認められた．耐性パターンは，1〜3 剤に対し 耐性を示す菌株が主であったが，7 剤耐性菌も見 られた．また，ヒトの治療薬として使用されてい る FOM に対する耐性菌（1.2％）も認められた．

今回の薬剤感受性試験は，統一した薬剤，検査法

により各衛生研究所で一斉に実施された初めての ケースであり，今後，同様な方法による継続的な 調査を行い，EHEC の耐性パターンの動向を MIC 値からもより詳しく観察する必要があると考え る．

謝辞：本研究を実施するにあたり，疫学情報や菌株の収 集などにご協力を頂いた衛生主管部局，保健所，医療機関，

臨床検査所等の関係各位に深謝いたします．なお，本研究 は厚生科学研究費を受け，新興・再興感染症事業「O157 感染症の菌学的特性に基づく動向調査に関する研究」（主 任研究者：国立感染症研究所細菌部長 渡辺治雄）として 1997 年度から 1999 年度までの期間実施し，概要は第 70 回日本感染症学会西日本地方会総会（2000 年 12 月宮崎市）

において発表した．

文 献

1）Riley LW, Remis RS, Helgerson SD, McGee HB, Wells JG, Davis BR,et al.：Hemorrhagic colitis as- sociated with a rareEscherichia coli serotype. N Engl J Med 1983；308：681―5.

2）埼玉県衛生部：「腸管出血性大腸菌による幼稚園 集団下痢症」―しらさぎ幼稚園集団下痢症発生事 件―報告書．1991 年 10 月．

3）感染症情報センター：＜特集＞Vero 毒素産生性 大腸菌（腸管出血性大腸菌）感染症 1996〜1997.

6．病原微生物検出情報 1997；18：153―4.

4）感染症情報センター：＜情報＞1996 年に分離さ れ た 腸 管 出 血 性 大 腸 菌 O157：H7 の パ ル ス フィールドゲル電気泳動による解析．病原微生物 検出情報 1997；18：155―7.

5）浅井良夫，村瀬敏之，大澤 朗，沖津忠行，鈴木 理恵子，佐多 辰，他：イクラからの志賀毒素産 生性大腸菌 O157：H7 の分離と分離株のパルス フィールドゲル電気泳動パターン．感染症誌 1999；73：20―4.

6）National Committee for Clinical Laboratory Stan- dards：Performance Standard for Antimicrobial Disk Susceptibility Tests, 5th ed : Approved Stan- dard. M2-A5. Villanova. Pennsylvania : NCCLS , 1993.

7）Izuniya H, Terajima J, Wada A, Inagaki Y, Itoh K, Tamura K,et al. ： Molecular typing of Entero- hemorrhagicEscherichia coliO157：H7 isolates in Japan by using pulsed-field gel electrophoresis. J Clin Microbiol 1997；35；1675―80.

8）感染症情報センター：＜情報＞腸管出血性大腸 菌（Vero 毒素産生性大腸菌）感染症 1996〜1998.

4．病原微生物検出情報 1998；19：122―3.

田中 博 他 448

感染症学雑誌 第76巻 第 6 号

Epidemiological and Bacteriological Investigation of Enterohemorrhagic Escherichia coli Infection in the Chugoku-Shikoku Area

Hiroshi TANAKA

, Sinzi TANIO

, Takesi HOSHINA

, Masaaki TOMITA

, Hiroshi NAKAJIMA

, Miyoko SAKAKI

, Syuichi KAWAMOTO

,

Toshio SIMIZU

, Chizuko SUNAHARA

, Tomihisa YASUOKA

, Hiroo INOUYE

& Haruo WATANABE

Ehime Prefectural Institute of Public Health and Environmental Science^1）, Tottori Prefectural Public Health Laboratory^2）, The Shimane Prefectural Institute of Public Health and Environmental

Science^3）, Yamaguchi Prefectural Research Institute of Public Health^4）, Okayama Prefectural Institute of Environmental Science and Public Health^5）, Hiroshima Prefectural Institute of Public Health and Environment^6）, Hiroshima City Institute of Public Health^7）, The Tokushima Prefectural Institute of Public Health and Environmental

Science^8）, Kagawa Prefectural Institute of Public Health^9）, Public Health Institute of Kochi Prefecture^10）, National Institute of Infectious Diseases^11）

We investigated the occurring tendency of enterohemorrhagic Escherichia coli（EHEC）infection in the prefectural and municipal public health institutes in the Chugoku-Shikoku area from 1996 to 1999, and the bacteriological characteristics of EHEC isolated from these cases. Consequently, epide- miological analysis of the EHEC infection in this district was performed.

22 outbreaks in the various facilities showed the tendency occurred in infants and aged groups, and the serotypes of EHEC isolated from these outbreaks were O26, O111 etc. as well as O157. In 4 cases, EHEC were isolated from specimens of buckwheat noodles, salad, sand box, and goat feces, and these were determined as the source of infection.

In 898 sporadic cases, including familial infection, the EHEC isolates were classified into 24 sero- types, and the genotypes of EHEC O157：H7 isolates by pulsed-field gel electrophoresis（PFGE）also varied. Moreover, since many asymptomatic carriers were detected in the adult group with familial infection, the existence of healthy carriers is as important as the source of infection.

The drug-resistance test of EHEC isolates showed that 24％ of the 924 isolates were resistant to

drugs.