)安井立彌〔昭和32年9月10日受稿〕
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(2) 2486. 安. II.実. ど か らSt.. aureus及. す る と考 え られ る 菌 各4株,対. 色 法,顕. 微鏡 的. びalbusに. 属. 照 と して教 室. イ ヨ ン又 は 普 通 寒 天 に 適 当. 7.2)で2回. と考 え ら れ る の で,溶. す)の. せ し め,そ. 腔 内 に 注 射 し,. 加 え1時. 方溶 血 毒. 菌量. の0.5mlづ. つ を マ ウ ス3匹. 1〜2日. の腹. で 死 亡 した もの の心. 血 を 血 液 加 普 通 寒 天 に 塗 沫 し て 培 養 し,発. 育. せ る 集 落 の うち 溶 血 能 の 比 較 的 大 な る も の を. の 夫 々1ml. 間37℃. 教 」 と略. な る 様 に滅 菌 生理 食塩 水 に 浮 游. 稀 釈 に な る様 浮 游. 稀 釈 列 を 作 り,そ. 血 性 増 強 の 目的 で動 物. 教 室 保 存 株(「. 普 通 寒 天 培 養 菌 体 を 集 菌 し,湿. 洗 滌 し た も の を,. せ しめ た も の を 血 球 浮 游 液 と し,一. に保ち. 間 氷 室 に 放 置 し て か ら溶 血 度 を 判 定 し. た.. 更 に 普 通 寒 天 に 継 代, 18時 間 培 養 後 集 菌,次 の マ ウ ス に 注 射 す る 事 を く り返 し た.毒. 性の. 増 大 す る に 従 い 注 射 菌 量 を 減 じ 常 に1〜2日. 生 菌 浮 游 液 の 調 製:培 燐 酸 緩 衝 液(0.85% つ て2回. 等 の 菌 は 普通 寒 天培 地 に 長 期継 代 を. 15mg/mlと. 酸 緩 衝 液(0.85%. 同 一 組 成 の 緩 衝 液 に100倍. 後1時. の 対 照 と し て, St. aureus. 教 室 保 存標 準 株 を用 い る事 と し. 通 過 を 行 つ た.各. の 脱 繊 維 した 血 液 を 遠 沈 し. に 血 球 液0.5mlを. 験 を 行 うに 当 り,そ. 重 ね て い るた め溶 血毒 産 生能 が 低 下 して い る. て 赤 血 球 を 集 めM/50燐. 試 料 溶 液 の2倍. 室 保 存 株 の 動物 通 過. 口 腔 内 病 巣 よ りの 分 離 株 に つ い て 以 下 の 実. 液 は 兎歯 液 を 採 血 後脱. 濃 度 に な る 様 に 加 え た.. pH. 育菌 の溶 血 毒 産 生. た が,此. 血 液 培 地 の 調 製:血. 溶 血 毒 定 量:兎. (1)教. 績. 動 物 通 過 株 各1株,計. 12株 を 供 試 菌 と し た.. 繊 維 し て 用 い.ブ. 1.発. 験 成. 及 びalbusの. 保 存 標 準 株 各1株,同. NaCl加,. 弥. III.実. 腔 内 病 巣 よ り分 離 し た 菌 の う. 落 の 形 態 及 び 色 調,染. 所 見,な. 立. 験材 料 及び 実 験 方 法. 供 試 細 菌:口 ち,集. 井. で 死 亡 す る様 調 節 し た. aureusで. 地 よ り 集 菌 後, M/50. NaCl加,. pH. 7.2)に. よ. 洗 滌 し再 び 同一 組 成 の緩 衝液 に 浮 游. せ し め た も の を 生 菌 浮 游 液 と し た.菌 は 光 電 比 濁 計 に よ り,あ. 量決定. らか じめ作 つ て置 い. れ も 市 販 品 を 緩 衝 液 に 溶 解 し,必. 要 に よ りNaOH,. HClを. 以 つ てpHを. 修正. し て 使 用 し た. 阻 害 剤,抗. の 菌 の2%血 養)に. は20代. 生 物 質:何. れ も市 販 品 を蒸 溜 水. に 示 す 如 くで あ つ た.同. 表 に於. 7〜8mmの. 明 瞭 な る 溶 血 環 の 認 め られ る も の,. ± は 僅 か に 見 られ る も の,他. aureusで. は5〜6代. は夫 々 それ らの. 表 に 見 られ る 如 く,. 動 物 通 過 に よ り著 明 な る. 溶 血 能 の 増 強 が 認 め ら れ た が, albusで. 金 属 イ オ ン: Fe++はFeSO4・7H2O,. Mg++. 代. 間培. 血 能 〓 で 表 わ した も の は 集 落 周 辺 に. 中 間 の も の を 示 し た.同. に 溶 解 し て 使 用 し た.. ま で 継 続 し,各. 液 加 普 通 寒 天 培 地(24時. 於 け る溶 血 能 を 肉眼 的 に判 定 した結 果. は,第1表 て,溶. た 標 準 曲 線 と 対 比 し て 決 定 し た. 基 質:何. 10代 ま で, albusで. は 動 物通 過. め て 徐 々 に 増 大 す る の み で,. は極. 20代 に 至 る も+. はMgSO4・7H2O,. Mn++はMnCl・4H2O,. Co++. を 以 て 示 す 程 度 に す ぎ な か つ た. albus,教. はCoCl2・6H2O,. Cu++はCuSO4・5H2O,. Zn++. 保 存 株 は も と も と溶 血 能(そ. はZnSO4・7H2Oを. 夫 々 蒸溜 水 に 溶 解 して使 用. し た.. が 弱 い た め に,動. の 他 の 病 原 性 も). 物 通 過 に よ つ て も,著. 変 化 を 示 さ な い も の と考 え20代. 第1表. 動 物 通 過 に よ る 溶 血 性 の 増 大. 室. しい. まで で動 物 通.
(3) 口腔 内病 巣 よ り分 離 した ブ ドー球 菌 の 性 状 に つ い て. 遠 沈 上 清 中 の溶 血 毒 を定 量 した.即 ち 上 清 の. 過 を 中 止 し た. (2)各. 2倍 稀 釈 列 を作 り,そ の各 々0.5mlに. 菌 の 血 液 加 培 地 に 於 け る溶 血 能. 口腔 内 病 巣 よ りの 分 離 株St. No.. 2, No.. No. 3,. 3, No.. No. 4及. 存 株,同. 2487. aureus. 4, albus No.. びaureus,. 動 物 通 過 株(「. 々 を 血 液 加 固 形 培 地,液. albusの. No. 1,. 1, No.. 2,. 各 教 室保. 教 動 」 と略 す)の. 夫. 体 培 地 に 接 種 後24時. 血 球 浮 游 液0.5mlを. 兎赤. 加 え て, 30分 間, 37℃. に 保 ち溶 血 度 を 判定 した と ころ第3表 の 示 す 通 り各 菌 の溶 血 毒 産 生能 は一 般 に血 液 加 培 地 に於 け る溶 血 能 と平行 関係 に あつ た. 第3表. ブ イ ヨ ン培 養 菌 の溶 血 毒 産 生. 間, 48時 間, 72時 間 目 に 於 け る溶 血 の程 度 を 肉眼 釣 に 判 定 し て 第2表 第2表. 固 形 培 地,. に 示 し た.. 血 液 加 培 地 に 於 け る溶 血. 2%兎. 溶 血 能 は, aureusで. 加普 通 寒 天平 板 培 地 で の は 「教 動 」, No. 2, No. 4,. No. 3, No. 1「教 」の 順, albusで. はaureusに. 比 し一 般 に 溶 血 能 は 小 で あ り, No. 3「 教 動 」, No. 4, No. 1, No. 2「 教 」 の 順 で あ つ た.液 体 培 地, 0.5%兎. 血加 ブ イヨ ン培 地 に於 け る溶. 血 度 を 比 較 し た の で あ る が,液. 体 培 地 に於 い. ては培 養 中赤 血球 が 試 験管 の底 部 に沈 澱 す る. 2.静. た め 溶 血 毒 と の接 触 が 不 均 一 と な り溶 血 能 の. 以 上 発 育 時 に於 け る各 菌 の 溶 血 毒 産 生 に つ. に. 判 定 に 誤 差 が 生 じ易 い が,各. 菌 の溶 血能 の順. き2,. 止 菌 の溶 血 毒 産 生. 3の 実 験 を行 つ た ので あ るが 次 に 静 止. 位 は 大 体 固 形 培 地 に 於 け る と大 差 な か つ た .. 菌 の1〜3時. (3)ブ. 産 生 に就 て種 々検 討 を加 え た.. イ ヨ ン培 地 発 育 中 の 溶 血 毒 産 生. ブ イ ヨ ン30ccを 菌 を 接 種 後24.48hr目. 滅 菌 コ ル ベ ン に 取 り,各 に そ の 一 部 づ ゝを 取 り. 間程 度 の短 時間 に於 け る溶 血 毒. (1)各 菌 の溶 血 毒 産 生能 各 静 止 菌浮 游 液 湿菌 量30mg. 2.0ccに. ペ.
(4) 2488. 安. プ トン 水0.25ccを. 添 加 し,更. え て 全 量3.0ccと. し て37℃. 井. に 緩 衝 液 を加 2hr振. 盪 後,. 遠 沈 上 清 中 の 溶 血 毒 を 定 量 し た と ころ,第4 表 に 示 す 如 く, aureusで No. 2「教 動 」, No. 4, で あ り. albusで. は 溶 血 毒 産 生能 は. No. 3, No. 1「 教 」 の 順. は,「 教 」, No. 3,が. 比較的. 立. 弥. り で あ つ た. 同表 に於 い て は溶 血毒 量 の表 現 は溶 血 度 ± に 相 当 す る 稀 釈 倍 数 を 以 つ て す る 事 と し た. 同 図 に 見 ら れ る 如 くalbus「 菌 で は,溶. 教 」 株 以外 の 各. 血 毒 産 生 量 は 振 盪 時 間 と共 に 大 と. な る の に 対 し, albus「 教 」 株 で は 振 盪30分. 大 で あ る の み で 他 は 極 め て 微 弱 で あ つ た.而. の 上 清 が 溶 血 毒 量 最 大 で あ り以 後 時 間 と 共 に. し てalbusで. 低 下 す る の が 認 め ら れ た.. は 「教 動 」 は 「教 」 よ り む し ろ. 以 上 の 実 験 に よ り静 止 菌 溶 血 毒 産 生 能 の大. 溶 血 毒 産 生 能 は 小 で あ つ た. (2)振. な る こ と を 認 め ら れ たaureus「. 盪 時 間 との関 係 第4表. 教 動 」, No. 2. albus No. 3及 び 溶 血 毒 産 生 に 及 ぼ す 振 盪 時 間. 静 止菌 の溶 血 毒 産 生. の 影 響 が 他 菌 と 異 な るalbus「. 教 」 の4株. を. 選 び 以 下 の 実 験 に 供 す る 事 と し た. (3) pHの. 影響. 溶 血 毒 産 生 に 於 け る 至 適pHを Neisser,. Wechsferg1)等. り と 唱 え,. BiggerはpH. 玉 置15) pH. 6.0,吉. はpH. は 「ア ル カ リ性 」 な 7.2,百. 岡3) pH. 7.0〜7.8と. 見 るに既 に. 瀬pH. 70,清. 至 適pHに. 7.8,. 水(19.20). は 夫 々相 異 な. る 報 告 が 有 る の で 私 も又 溶 血 毒 産 生 に 就 き 比 較 研 究 を 試 み た.至. 適pHを. 見 る た め,菌. 游 液 に ペ プ ト ン を 添 加 しpHを6.0, 7.5,. 8.0と. し て2時. は30分)振. 6.5, 7.0 教」株 のみ. 盪 後 上清 中 の溶 血 毒 を 定 量 した. と こ ろ,第2図 7.0〜7.5附. 間(albus「. 浮. に 見 ら れ る 如 く各 菌 共pH 近 に 至 適pHの. 「教 」 株 で はpHに. 存 在 し, albus. よ る 影 響 は 他 菌 に比 し 比. 較 的 少 な か つ た.. 上 の 実験 と同 様各 菌浮 游 液 に ペ プ トンを加 え,振 盪 時 間を 夫 々0.5,. 1, 3時. 間 として. 上 清 中 の溶 血 毒 を定 量 した成 績 は第1図. の通. (4). C源 及 びN源. の影響. 次 に 溶 血 毒 産 生 に 及 ぼ すC源. 及 びN源. 先 ずamino酸. 第1図. 添加. の 影 響 を 検 討 した.. 溶 血 毒 産 生 と振 盪 時間 との 関係. 添 加 の. 影 響 を見 た ので あ るが添 加amino酸 cystene, lalanineは M/500,他. は 難 溶性 の tyosin,. pheny‑. 夫 々終 濃 度 はM/30と. し. 2種 以 上 のamino酸. 添. 加 の 場 合 は 各amino酸 濃 度 を 低 く し て 総N量. が. 大 体 同 一 とな る 様 に し, 菌 浮 游 液1.0mlにamino.
(5) 口腔 内病 巣 よ り分離 した ブ ドー 球 菌 の性 状 につ いて. 第2図. 酸 を 加 え 全 量 を3.0mlと し て2時. 2489. 溶 血 毒 産 生 に於 け る至 適pH. 間 振 盪 し(albus. 「教 」 株 の み は30分. 間),. 遠沈 上清 中 の溶 血 毒 を定 量 し た. 結 果 は 第5表. の 如 くで. あ り,溶 血 毒 素 は 〓, +,. 〓,. ±, ‑等 の 符 号 で 表. わ し た.即. ち遠 沈 上清 を. 2倍 稀 釈 し て 稀 釈 列 を 作 り夫 々 血 球 浮 游 液 を 加 え. て溶血 を 見 た場 合 の溶 血 度 ±に 相 当 す る稀 釈. 倍 の も の を+,. 倍 数が8倍 の もの を〓,. る 事 と し た.同. 第5表. 4倍 の もの を〓, 添 加Amino酸. 2. と溶 血 毒 産 生(aureus「. 1倍 の も の を ± と し て 表 示 す 表 を 要 約 す る とA:各amino 教 動 」 株).
(6) 2490. 安. 井. 酸 単 独 で は 殆 ん ど 溶 血 毒 産 生 が 認 め ら れ ず, B:. glutamate,. aspartateの glutamate,. glycine. の 添 加 で は 更 に 増 大. 4種. glutamate, tidine,. aspartate,. aspartate,. leucine,. alanin,. valine,. phycine,. arginine,. tyrosineの. alanine し,. cysteine,. 大 す る.. D:而. amino酸. の 添 加 に よ つ て は ほ ぼpepton添. his. SuccinateはN源. pHが. 低 下 す る た め で は な い か と 考 え,糖. の. 添 加 に 於 け るpHの 菌 液 にpeptonの. 上. を 添 加 しpH. 移 動 を 測 定 した,即. 7.2と. し て2hr振. はaureus「. 教 動 」 株 につ い ての 成績 であ るが. aureus. 2,. 表 の 如 くpeptonの. 教 」No.. 3に. つ い て も. pHの. 同 様 の 傾 向 が 見 ら れ た. 次 にglucose, 6炭. 糖,. mannose,. ribose,. xylose,. 炭 糖 及 びPyruvate,. galactoseな arabinoseな. Succinateな. 加 の 影 響 を 見 る と,こ 添 加 し た 場 合,並. どの ど の5. ど のC源. ち,. 盪 し(albus. 測 定 し た と ころ 第7 み の添 加 の場 合 は 殆 ん ど. 移 動 は な い がglucose,. に はalbus「. 類. み 及 びglucoseとpepton. 「教 」 株 は30´)終pHを. albus「. 類では. む し ろ 抑 制 的 に 働 く の が 認 め られ た.. 加. 下19種. の 場 合 に 近 い 溶 血 毒 が 産 生 さ れ て い る.以. No.. は. と同時 に 添 加 す る こ と に よ. この糖 類 の抑 制 作 用 は それ らの分 解 に よ り. 添 加 で 更 に増. し てglutamate以. 「教 」 株 以 外 の 供 試 菌 で はPyruvate,或. り溶 血 毒 産 生 を 助 長 す る の に 対 し,糖. C:. methionine,. praline,. 弥. に 添 加 し た 場 合 溶 血 毒 産 生 を 助 長 し,又albus. 添 加 で 若 干 の. 産 生 を 見,. 立. pepton添. 加 の際. 教 」 株 以 外 の 菌 で は 著 明 なpH. 低 下 が 見 ら れ た. 第7表. 添. 添 加 基 質 とpHの. 変化. れ ら は い ず れ も単 独 で. び に2種. 以 上 のC源. を同 時. に添 加 した場 合 共 に溶 血 毒 産 生 を来 さなか つ た.而. し てalbus「. 教 」 株 で は 此 等C源. れ も ペ プ ト ン 或 は ア ミ ノ 酸 類 等 のN源 第6表. 添 加C源. は 何 と岡 時. と溶 血 毒 産 生. (5)溶. 血 毒 産 生 に於 け る促 進 及 び 阻 害物 質. 溶 血 毒 産 生 に 対 す るVitamine類,金 オ ン,抗. 生 物 質,阻. 属 イ. 害 剤 の影 響 を 検討 す るた. め 菌 浮 游 液 に1.0ml. peptonを. 加 え,更. れ ら添 加 物 質 を 加 え て 全 量3.0mlと 時 間(albus「. に こ. 教 」 株 の み は30分. し て2 間)振. 盪 し,. 遠 沈 上 清 中 の溶 血 毒 の定 量 を行 つ た と ころ以 下 の 成 績 が 得 ら れ た. (a). Vitamine類. の影 響. 溶 血 毒 産 生 に 対 す るVB1, nicotinamide,. panthathie. 影 響 を 見 る と第8表 は こ れ 等Vitamine類. VB2, acid,. VB6,. Vc,. folic acidの. の 如 くalbus「. 教」株で. は 全 く影 響 を 及 ぼ さず,. 他 の 菌, aureus,「 教 動 」, No. 2, albus, No. 3 の 各 菌 で はVB6の. み が 溶 血 毒 産 生 を促 進 す. る こ と を 認 め た. (b)金. 属 イオ ン. 次 にFe++,. Mg++,. Mn++,. Co++,. Cu++,.
(7) 口腔 内 病巣 よ り分 離 した ブ ドー球 菌 の性状 に つ い て. 第8表. 溶 血 毒 産 生 に 対 す るVitamine類 の影響. 2491. 金 属 イ オ ン 共 溶 血 毒 産 生 抑 制 作 用 を 示 し,特 にCo++が Cu++で. 最 も抑 制 作 用 が 大 で あ り,次. いで. あ つ た.. albus「 教 株 」 で は これ 等 金 属 イ オ ン の 影 響 は 殆 ん ど 認 め ら れ な か つ た. 以 上 の 実 験 で は 溶 血 毒 産 生 に 対 す る金 属 イ オ ン の 影 響 を 見 た の で あ る が,次 赤 血 球 に 及 ぼ す 作 用(溶. に溶 血 毒 の. 血 反 応)に. 対 す る金. 属 イ オ ン の 影 響 を 見 た と こ ろ 第10表 Mg++,. Fe++,. Zn++な. を 促 進 しMn++は. の 如 く,. どの 金 属 は 溶 血 反 応. や や 阻 害, Co,. Cuは. 無影. 響 で あ る 事 が 認 め ら れ た. 第10表. 溶 血 反 応 に 於 け る金属 イオ ン の 作用. 第9表. 溶 血 毒 産生 に対 す る金 属 イオ ン の影 響. (c)抗. 生 物 質,阻. 害 剤 の影 影. 次 に 溶 血 毒 産 生 に 及 ぼ すsulfathiazol, penicilline, streptomycine等 び にNaN3, trophenol(D. と,抗. NaF,. の 抗 生 物 質,並. monoiodoacetate,. N. P)等. 24‑dini. の 阻 害 剤 の影 響 を見 る. 生 物 質 で は 第11表. に 見 られ る 如 く. albus「 教 」 株 は オ ー レ オ マ イ シ ン0. .5γ/cc. に よ り溶 血 毒 産 生 が 抑 制 され る の み で 他 の 抗 生 物 質 に よ つ て は 影 響 を 受 け ず,他 一 様 にsulfathiazolに. の菌では. よつ て促 進 され. cillineで は 阻 害 さ れ に く く1000γ/ccの Zn++の. 各 イ オ ン 添 加 の 影 響 は 第9表. aureusの2株. 及 びalbus. No . 3に. の如 く. 於 て は,各. , peni 濃度. に 於 て も阻 害 が 認 め られ る に す ぎ な い .次 で ス ト レ プ トマ イ シ ン,ク. い. ロ ロマ イ セ チ ンで.
(8) 2492. 第11表. 安. 井. 溶 血 毒 産 生 に対 す る抗生 物 質 の. 立. 弥. 第12表. 影響. 溶 血 毒 産 生 に 対す る阻 害 剤 の 影響. NaN3で. は全 く影 響 され ず, D. N. Pで は む し. ろ促 進 され る.こ れ に対 して沃 度 醋 酸 は抑 制 的 に働 き10‑4M以 上 の 濃度 で溶 血 毒 産 生 を阻 共 に10γ/cc附. 近 の 濃 度 よ り阻 害 が 現 わ れ る.. 害 す る こ とを 認 め た.. オ ー レ オ マ イ シ ン は 最 も 阻 害 が 顕 著 で あ り.. 3.溶. 0.05γ/cc程. 各 供試 菌 の静 止 菌 及 び発 育菌 の産 生 す る溶. 度 の濃度 で阻 害 が 明 らか に認 め. 血 毒 の加 熱 に よる不 活 化. 血 毒 の加 熱に よ る失活 につ い て検 討 した.. ら れ た. 阻 害 剤 の 影 響 は 第12表. に 示 す 如 く, NaF,. ブ イヨ ン培 地 に24時 間培 養 後,遠 沈 した 上. 第13表. 溶 血 毒 の加 熱に よ る失 活 静止 菌 の 産 生 す る溶 血 毒. 第14表. 溶 血 毒 の 加 熱 に よる 失活 発 育 菌 の産 生 す る溶 血 毒.
(9) 2493. 口腔 内 病 巣 よ り分 離 した ブ ドー 球 菌 の性 状 につ いて. 清 及 び普通 寒 天培 養 菌 の静 止 菌体 浮 游 液 に ペ プ トンを 加 え て2時. 間(albus「. 教」株のみは. 30´)振 盪 後 遠 沈 した 上 清 の 夫 々 を, 60℃,. 70℃,. 80℃,. 分 間 加 熱 し た 後,溶. 90℃,. No.. に30. は 「教 動 」No.. 2,. 1が. 3, No. 4, はNo.. 3,. わ づ か に 溶 血 能 を有 す. 13表 に 示 す 如 く,各 菌 共 発 育 中 産 生 さ れ る 溶. る こ と を 認 め る が 他 の 菌No.. 血毒は60℃ 30´の加熱により著明に, 70℃ 30´の加熱によ り完全に不活化 し静止菌 の産. は 殆 ん ど溶 血 性 を 示 さ な い.而. 生 す る溶 血 毒 もalbus「. だalbus「. 教 」 株 以 外 で は同 様. り. 別 に見 る と. No.. 1「 教 」 の 順 で あ り, albusで. 「教 動 」 若 干No.. 血 度 を 測 定 した 結 果,第. 属 す る 菌 は, albusよ. も 溶 血 能 が 著 し く大 で あ り,菌 aureusで. 50℃,. 100℃. 共 に 一 般 にaureusに. 2, No.. 4「 教 」. して静 止 菌 の. 溶 血 毒 産 生 能 も大 む ね 同 じ順 序 で あ る が,た 教 」 株 は 菌 浮 游 液 にpeptonを. 加. に 熱 に 対 し不 安 定 で あ る が, albus「 教 」株 で. え て 短 時 間 振 盪 す る こ と に よ りか な り の 程 度. は90℃. に 溶 血 性 物 質 を 産 生 す る の が 認 め ら れ る.. 30´ 加 熱 に よつ て も 溶 血 作 用 を 殆 ん. 上 述 の 如 く,ブ. ど 失 わ な か つ た.. ドー 球 菌 で は 溶 血 性 を 有 す. る菌 は 静 止 菌 の 浮 游 液 にpeptonを IV.総. 括 及 び考 案. 3時 間 振 盪 す る の み で 溶 血 毒 を 産 生 す る.而. 口腔 病 巣 よ り ブ ドー 球 菌 に 属 す る も の を 分 離 し, aureus及 各4株. ず つ,並. びalbusと. 加 え1〜. 見 做 され る も の. び に対 照 と して教 室 保 存標 準. 株 を 供 試 菌 と して 溶 血 毒 に つ い て の 検 討 を 上 述 の 如 く加 え た.. し て こ の 静 止 菌 の 溶 血 毒 産 生 に 対 す る種 々 条 件 の 影 響 を 検 討 す る こ と は,発. な お 静 止 菌 に ペ プ ト ン そ の 他 を 加 え る と発 育 し うる 状 態 で あ り,厳. 中 村30),清 水(19.20)はブ ドー 球 菌 は 累 代 培 養. 育 中の 菌 に つ. い て よ り も 要 素 が 複 雑 で な い の で 便 利 で あ る.. は 言 い 難 い が,こ. 密 な意 味 で の静 止 菌 と. こでは 静 止 菌 と称 す る こ と. に よ り溶 血 毒 産 生 能 力 著 し く減 退 す る と云 い,. と して 以下 その 溶 血 毒 産 生 に つ い て 検 討 す. 又 吉 岡3)は 同 菌 を 動 物 通 過 に よ り溶 血 作 用 を. る.. 増 強 せ しめ た と報 告 し て い る.原. 田14)は 死 亡. した る マ ウ ス を 解 剖 し た 所 血 液,内 に も溶 血 現 象 が 証 明 さ れ た.私. 臓 の一 部. も又 教 室株 は. い つ れ も長 期 間 人 工 培 地 に 継 代 し て い るた め, 溶 血 毒 産 生 が 低 下 し て お る もの と考 え,こ. れ. を高 め るため に 動物 通 過 した ものを も併せ 使 用 し た の で あ る が, aureus教 通 過 す る こ と5代. 室株 は マ ウス を. です で に か な りの溶 血性 の. 上 昇 を 認 め た の に 対 し, albusは20代. の継 代. 先 ず 溶 血 毒 産 生 に 対 す るN源, を 見 る と, amino酸. C源 の 影 響. 類(第5表)は. 各単独 で. 添 加 し て も 殆 ん ど溶 血 毒 の 産 生 は 認 め ら れ な い が,. glutamate,. aspartate両. 者 の添 加 で わ. つ か な が ら 産 生 が 見 ら れ,更 glycineを. 上 昇 す る 傾 向 が あ る が,特 amino酸 cysteine,. にalanine,. 順 次 追 加 す る と漸 次 溶 血 毒 産 生 が. 即 ちhistidine, wethisnine,. に 発 育 に 必 要 な valine,. proline,. arginine,. leucine,. tyro. に よ つ て もわ ず か の 上 昇 を 認 め る に す ぎ な い.. sineな ど は 有 効 と考 え ら れ る.然 しglutamate,. これ は 恐 ら くalbus教. aspartate,. 室 株 が 溶血 毒産 生 機構. alanine,. glycineの. みでかな りの. を も と も と 殆 ん ど 欠 い で い る た め と考 え ら れ. 産 生 を 認 め る こ とか ら して 必 ず し も 発 育 と は. る.私. 関 係 は な い 様 で あ る.. も死 亡 せ る マ ウ ス を 解 剖 し た 所,体. 腔. に 潴 溜 して い る 血 液 及 び 心 臓 を 穿 刺 し て 得 ら れ た 血 液 に は 高 度 に 溶 血 現 象 が 見 られ た. 米 沢8)等 の 実 験 に よ れ ば,歯 よ り分 離 し た るSt. aureus,. 槽膿 漏 症 患 者. albus共 全 て 溶 血. 能 を 有 す る と 報 告 し て い る が,私. は これ ら 各. 糖 類 そ の 他 のC源. は,そ. れ らの み の 添 加. に よ つ て は 溶 血 毒 産 生 は 認 め ら れ な い が, pyrurate,. succinateはN源. と共 に添 加す る と. 産 生 を 増 大 せ しめ る傾 向 が 認 め られ,こ はamino酸. れ ら. 代 謝 を 促 進 す る こ とに よ り,そ. の. 供 試 菌 の 血 液 加 培 地 発 育 中 の 溶 血 能 を 見 る に,. 産 生 を 助 長 す る も の と考 え ら れ る.た. 兎 血 加 普 通 寒 天 平 板,兎. は む し ろ 溶 血 毒 産 生 を 減 少 せ しめ る 傾 向 が あ. 血 加 ブ イ ヨ ン両 培 地. だ糖類.
(10) 2494. 安. る が,こ. れ は 糖 類 の 分 解 に よ り生 成 され る 酸. の た めpHの pH. 井. 低 下 を 来 し,溶. 7.0〜7.5(第2図)を. 血 毒 産 生 の至 適. は ず れ る た め と考. 立. 弥. の とは 異 る こ と は 勿 論 で あ り,恐. ら くは 菌 体. 成 分 の 一 部 が 溶 出 す る の で は な い か と想 像 さ れ る が 確 認 に は 至 ら な か つ た.. え ら れ る. 溶 血 毒 産 生 に 対 し て はVitamine類 VB6の. み が 促 進 作 用 を も ち,又. はFe++,. Mg++,. て10‑4M前. Mn++,. 金 属 イ オ ンで. Co++,. Zn++は. 後 に 於 て 阻 害 的 に 働 き,こ. 特 にCo++,. Cu++は. 害 剤 で はNaN3, で あ るか,又 monoiodo. う ちSt. aurers及. の うち. れ る も の 各4株,並 標 準 株 各1株. D. N. Pは 全 て 無 影 響. は む し ろ 促 進 的 に 働 くの に 対 し. acetateは10‑4M以. 作 用 を もつ.抗. 上 の濃度 で抑 制. 生 物 質 に つ い て 見 る と,ス. ル. 言. 口 腔 内 病 巣 よ り種 々 の 細 菌 を 分 離 し,そ. 全. 阻 害 作 用 が 大 で あ り,阻. NaF,. V.結. では. びalbusに. び に 対 照 と して教 室 保 存. を 供 試 菌 と し て そ の 発 育 菌,及. び 静 止 菌 の 溶 血 毒 産 生 能 を 比 較 し,且. を 得 た. (1)教. 室 株 の 動 物 通 過 に よ りaureusは. 血 性 が 著 し く増 大 す る が,. き, penicillineは. る.. も ち,次. い でstreptomycine,. chloromycetine. (2). の 順 に 阻 害 作 用 が 大 と な り, aureomycineは 極 め て 微 量 で 抑 制 作 用 を 示 す.こ よ りamino酸. aureusは. albusは. 一 般 にalbusよ. あ り 特 に 「教 動 」No. 2が. れ らの こ と. 代 謝 乃 至 はplypeplide,蛋. 白. あ り以 下No. albusで. 3, No. 4,. はNo.. 3教. 血 性 が な い.. 代謝 が関 与 す る こ とが 更 に 確. ブ ドー 球 菌 の溶 血 素 の 熱 抵 抗 性 に 就 い て 従 来Neisser 米 沢8),市. u.. Wchsferg1),清. 之 川8)等 は56℃. て 大 体 不 活 化 す る と い い,山 般 に65℃30´ を100℃3分. 本,吉. で はglutamate,. aspartate,. 岡3)は 一. て も 溶 血 毒 は 産 生 さ れ な い がN源. 有 効 で あ る が,不. 可欠 の. の み を添 加 し と共 に 添 加. す る と 産 生 を 増 大 す る 傾 向 が あ る.但 は そ の 分 解 に よ りpHが. し糖 類. 低 下 す る 結 果,産. 生. を 抑 制 す る 傾 向 が あ る. 止 菌 の 産 生 す る溶 血 毒. の 静 止 菌 の 産 生 す る も の を 除 い て,い 以 上 の 加 熱 で 不 活 化 し,大. づれ も 体類 似 の. 性 質 を 持 つ て い る と見 て よ い 様 で あ る.而 教 」 株 静 止 菌 で はpeptonそ. を 加 え て0.5〜1時. し. の 他. 間程 度 の短 時 間 振 盪 す る こ. と に よ り加 熱 に 対 し て 安 定 な 溶 血 性 物 質 を 生 に 長 時 間(2〜3時. 間)振. 溶 血 性 物 質 は 漸 次 消 失 す る(第1図).又. 盪す ると この. 溶 血 性 物 質 の 生 成 は 阻 害 剤 そ の他 添 加 物 質 の 影 響 或 はpHの. あ り, amino酸. の 間 に於. の 加 熱 に よ り不 活 化 し 更 に 之. の添 加. も効 果 的 な も の はpeptonで. は 存 在 し な い.又C源. に 対 す る 加 熱 の 影 響 を 見 る と, albus「 教 」 株. 成 し,更. 止 菌 の 溶 血 毒 産 生 に はN源. を 必 要 と し,最. glycineが. 間 に て も破 壊 せ ざ る 一 部 あ り. 私 の 場 合 発 育 菌,静. てalbus「. No. 4は 殆 ん ど溶. amino酸. 波5),. と 述 べ て い る.. 60℃30´. 順 で あ る.. alanine,. 水19),筑 〜60℃. (3)静. り溶 血 性 大 で. No. 1の. を 阻 害 す る 傾 向 が 見 受 け ら れ,溶. 認 され る.. 僅かであ. 動 が 若 干 溶 血 性 を 有 し,. No. 1は 僅 か で あ り, No. 2,. 構 にamino酸. 溶. 溶 血 性 が 最 大で. 合 成 に 対 し て 阻 害 的 に 働 く物 質 が 溶 血 毒 産 生 血 毒産 生 機. つそ れ. に対 す る種 々 条 件 の影 響 を 検 討 して 次 の結果. フ ァ ミ ン剤 は 無 効 で あ るか む し ろ 促 進 的 に 働 高濃 度 で 僅 か に 阻 害作 用 を. の. 属 す る と推 定 さ. 影 響 を 受 け 難 く,他. の菌 の も. (4)溶. 血 毒 産 生 は, Fe++,. Co++Cu++な. Mg++,. Mn++,. ど の 金 属 イ オ ン に よ り抑 制 さ れ,. 又monoidoacetete,. aureomycine,. cetine, streptomycineに. chloromy. よ つ て も抑 制 され. る. (5). albus「 教 」 株 の 静 止 菌 の 産 生 す る 溶 血. 毒 以 外 は す べ て 加 熱 に 対 し不 安 定 で あ る. 終 りに 臨 み,御 指導 と御 校 閲 を賜 つ た 微 生物学 教 室,村 上 栄 教 授 及 び 歯科 学 教 室,現 渡 辺 義 男教授. 前 今 川 与曹 教 授 及御 助 力を いた だ い た松 浦 博士 に深 甚 な る謝 意 を 表 しま す..
(11) 口腔 内病 巣 よ り分離 した ブ ドー 球菌 の性 状 に つ い て. The. Characteristics. of Staphylococci Human. from. Lesions. in. Mouth. Part Production. Isolated. 2495. 1.. of Hemolysins By. Ritsuya. Yasui. Department of Microbiology Okayama University Medical School (Director: Prof. Sakae Murakami) Department of Dental Surgery. Director:. Prof.. Y. Prof Y. Imagawa) Watanabe. Using 4 strains considered to belong to Staphylococcus aureus and albus, selected from various bacteria isolated from the human mouth as test bacteria and one strain each of the standard-strain bacteria kept in our laboratory as the control, the author made comparative studies of the productivity of hemolysins of both growing bacteria and resting cells as well as investigated effects of various conditions on the production of hemolysins. The results are presented in the following. 1. By passage through the animal the productivity of hemolysin increases markedly in the case of standard strain of aureus while with albus the increase is only slight. 2. On the whole the productivity of hemolysin of the bacteria belonging to aureus strain is greater than those belonging to the albus, and No. 2 and standard strain of aureus presents the hemolyzat the highest degree. 3. Nitrogen source is required in the production of hemolysins by resting cells, and the most effective one is pepton; while among amino acids, glutamate, aspartate, alanine and glycine are effective, but there is no amino acid known to be indispensable to the hemolysin production. Though hemolysin production does not occur when carbon source alone is added, when C-source is added in combination with N-source, the hemolysin production is enhanced. How ever, in the case of sugars, pH is lowered during the oxidation so there is a tendency to inhibit the hemolysin production. 4. Hemolysin production is inhibited by such metal ions as Fe++, Mg++, Cc++ and Cu++, and it is likewise inhibited by monoiodoacetate, aureomycine, and chloromycetine. 5. Hemolysin produced by the resting cells are all unstable against heat with exception of standar strain of albus..
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「学びの改革 基本構想」 （平成 29 年３月）の中で、入学者選抜制度の改革については、
