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厚生労働科学研究費補助金 難治性疾患等政策研究事業（難治性疾患政策研究事業）
プリオン病及び遅発性ウイルス感染症に関する調査研究班 分担研究報告書
国立感染症研究所感染病理部における PML の病理組織検体の解析
研究分担者：鈴木忠樹 国立感染症研究所感染病理部 研究協力者：高橋健太 国立感染症研究所感染病理部 研究協力者：佐藤由子 国立感染症研究所感染病理部 研究協力者：片野晴隆 国立感染症研究所感染病理部 研究協力者：中道一生 国立感染症研究所ウイルス第一部 研究分担者：西條政幸 国立感染症研究所ウイルス第一部 研究協力者：長谷川秀樹 国立感染症研究所感染病理部
研究要旨 進行性多巣性白質脳症(PML)の確定診断(definite PML)のためには、生検脳あるいは剖 検脳からの組織の病理学的検索が必要である。国立感染症研究所感染病理部では、全国の大学およ び医療機関から依頼されるPMLの病理組織検体の検査を行っており、解析ではHE染色と免疫組織 化学による形態学的検索に加え、組織からのJCウイルス(JCV)ゲノムの遺伝子検索を併用して確度 の高い病理組織診断を行い、平成3年から平成28年12月末までに54例のPMLの診断を確定した。
PML 確定時の年齢は平均 56.3 歳で、基礎疾患では後天性免疫不全症候群と血液系悪性腫瘍がそれ ぞれ28%の症例に認められ、続いて自己免疫疾患が19%に見られた。なお、脳の組織学的検索にて PMLと診断確定された症例の中には、脳組織採取前の脳脊髄液からの検索において、JCVゲノムが 検出限界以下であったものも含まれていた。
Ａ.研究目的
進 行 性 多 巣 性 白 質 脳 症 (PML)は 脳 の オ リ ゴ デンドロサイトに JC ウイルス(JCV)が溶解感 染し、その結果、脱髄が起きて発症する疾患で ある。PMLの確定診断(definite PML)のために は、生検脳あるいは剖検脳からの組織の病理学 的検索が必要である。
国立感染症研究所感染病理部では、全国の大 学および医療機関から依頼される PML の病理 組織検体の解析をしており、HE 染色と免疫組 織化学による形態学的検索に加え、組織からの JC ウイルス(JCV)ゲノムの遺伝子検索を併用 して確度の高い病理組織診断を行っている。本 研究では、国立感染症研究所感染病理部におい て PML 症例の病理学的解析を行うとともに、
現在までに診断を確定した PML 症例について レビューを行い、患者背景情報と病理組織診断 を照合することにより、日本における PML の 病 理 の 実 態 を 明 ら か に す る こ と を 目 的 と し 、
「PMLの診断基準・重症度分類策定・改訂のた めの疫学臨床調査」として情報を共有する。
Ｂ.研究方法
材料は、臨床的に PML が疑われ国立感染症 感 染 病 理 部 に 解 析 依 頼 の あ っ た 生 検 脳 あ る い は 剖 検 脳 の ホ ル マ リ ン 固 定 パ ラ フ ィ ン 包 埋 (FFPE) 検体あるいは凍結検体で、平成 3年か ら平成 28年 12月末までの全85例。FFPE検体 の未染標本から HE 染色、特殊染色にて形態学 的解析を行い、免疫組織化学にてJCVタンパク 質の発現を確認した。また FFPE切片あるいは 脳凍結検体より核酸を抽出して、JCVゲノムに ついて組織からのリアルタイム PCR にてコピ ー数の定量を行った。
（倫理面への配慮）
国 立 感 染 症 研 究 所 感 染 病 理 部 の 病 理 組 織 を 用 い た 病 原 体 検 査 は 感 染 研 レ フ ァ レ ン ス 業 務 と し て 国 立 感 染 症 研 究 所 ヒ ト を 対 象 と す る 医 学 研 究 倫 理 審 査 委 員 会 の 判 断 に 則 り 実 施 し て いる。検体受付に際しては、検体を国立感染症 研究所に検査のために送付すること、検査の余 剰 検 体 は 匿 名 検 体 と し て 他 の 研 究 で 使 用 す る
— 184 — ことがあることも含めて、依頼機関において、
国 立 感 染 症 研 究 所 感 染 病 理 部 の 書 類 も し く は 依 頼 機 関 に お け る 同 様 の 文 章 に よ る 説 明 と 同 意を得ている。
Ｃ.研究結果
全85症例中、54例でPMLの診断確定となっ た。全確定例54例のうち生検例は34例(63%)、
剖検例は 20 例(37%)であり、男女比は 7：3、 年齢は平均56.3歳であった。基礎疾患では後天 性 免 疫 不 全 症 候 群 と 血 液 系 悪 性 腫 瘍 が そ れ ぞ れ 15例(28%)、自己免疫疾患 10 例(19%)、先 天性免疫不全3例(6%)が続いた。なお、明らか な基礎疾患を有しない症例も見られた。また、
脳の組織学的検索にて PML と診断確定された 症例の中には、脳組織採取前の脳脊髄液からの リアルタイムPCR検索において、JCVゲノムが 検出限界以下であったものも含まれていた。な お、平成28年度以降は依頼者に PML症例登録 システムへの登録の有無を確認しており、10例 中 9 例が PML 症例登録システムへの登録症例 であった。
Ｄ.考察
国 立 感 染 症 研 究 所 感 染 病 理 部 で 病 理 学 的 に 診断確定された PML 症例のレビューは本邦に おける PML の疫学的背景を反映するもので、
臨 床 調 査 に お い て 重 要 な 情 報 に な る と 考 え ら れた。また組織学的に診断確定された PML 症 例の中には、脳組織採取前の脳脊髄液検索にお いて JCV ゲノムが検出感度以下であった症例 も認められたが、脳脊髄液の採取時期や病変部 位との関係、脳脊髄液検査で陰性とされたため 脳 生 検 に 至 っ た 症 例 が 多 く 含 ま れ る こ と 等 の 要素が関与する可能性が考えられた。
Ｅ.結論
国 立 感 染 症 研 究 所 感 染 病 理 部 で は 形 態 学 的 検索と遺伝子検索を併用し、PML確定診断のた め の 脳 組 織 検 体 か ら の 病 理 学 的 解 析 を 継 続 し ており、現在までに 54 例の診断確定となって いる。今後も確度の高い病理学的解析を継続し、
「PMLの診断基準・重症度分類策定・改訂のた めの疫学臨床調査」として情報を共有していく ことが重要である。
[参考文献]
1) 高 橋 健 太, 鈴 木 忠 樹, 中 島 典 子, 飛 梅 実, 佐藤由子, 片野晴隆, 長谷川秀樹. 脳炎・脳症 の病理. Neuroinfection 19:32-39, 2014.
Ｆ.健康危険情報 なし
Ｇ.研究発表 1.論文発表
1) Takahashi K, Sekizuka T, Fukumoto H, Nakamichi K, Suzuki T, Sato Y, Hasegawa H, Kuroda M, Katano H. Deep-sequence identification and role in virus replication of a JC virus quasispecies in patients with progressive multifocal leukoencephalopathy. J Virol 16;91, 2016.
2) 鈴木忠樹. JC ウイルスのチャネルタンパク
質 ビ ロ ポ リ ン に 関 す る 研 究. ウ イ ル ス 65:
pp135-144, 2015.
2.学会発表
1) 石井淳子, 川本未知, 藤原 悟, 船津尭之, 今井幸弘, 奴久妻聡一, 高橋健太, 中道一生, 幸原伸夫. 全身性エリテマトーデス加療中に 頭部 MRIで散在性点状T2高信号病変を呈し 進行が見られていない進行性多巣性白質脳症 の一例. 第21回日本神経感染症学会総会・学 術大会, 金沢, 10.21-22, 2016.
2) 高 橋 健 太, 鈴 木 忠 樹, 佐 藤 由 子, 片 野 晴 隆, 長谷川秀樹. 進行性多巣性白質脳症の組織検体 に お け る 免 疫 組 織 化 学 と ウ イ ル ス 核 酸 定 量 に よる病勢の検討. 第 20 回日本神経感染症学会 総会・学術大会, 長野, 10.22-23, 2015.
3) 北崎佑樹, 池ヶ谷諭史, 北井隆平, 高橋健太. 脳生検にて確定診断に至った HIV 陽性の進行 性多巣性白質脳症の1例. 第20回日本神経感染 症学会総会・学術大会, 長野, 10.22-23, 2015.
4) 三 浦 義 治, 中 道 一 生, 岸 田 修 二, 西 條 政 幸, 高 橋 健 太, 鈴 木 忠 樹, 三 條 伸 夫, 阿 江 竜 介, 澤 洋 文, 奴 久 妻 聡 一, 原 由 紀 子, 雪 竹 基 弘, 濵口 毅, 水澤英洋, 山田正仁. 本邦発症の進 行 性 多 巣 性 白 質 脳 症 患 者 サ ー ベ イ ラ ン ス の 現 状と課題 – 厚労科研 PML 研究班 PML サーベ イランス報告 –. 第 20 回日本神経感染症学会 総会・学術大会, 長野, 10.22-23, 2015.
— 185 — 5) 池田淳司, 松嶋 聡, 小平 農, 石井 亘, 関島良樹, 高橋健太, 長谷川秀樹, 中道一生, 西條政幸, 池田修一. 髄液 JCV-PCR 陰性で脳 生検で確定診断した進行性多巣性白質脳症 2 症例の検討. 第 56 回日本神経学会学術大会, 新潟, 5.20-23, 2015.
Ｈ.知的財産権の出願・登録状況(予定を含む。)
1.特許取得 なし
2.実用新案登録 なし
3.その他 なし
