ゲル染色剤
バイオ・ラッドでは、ゲル中のタンパク質を検出する染色剤を数多く取り扱っています。感度、操作性、再現性、定量性、電気泳動 後のアプリケーションへの影響など、サンプルと目的に応じて最適な染色剤は異なります。染色剤を選択する際に、下記の染色剤セ レクションガイドをご参照ください。 染色剤セレクションガイド 製品名 用途 プロセス数 所要時間目安 最高感度 事前調製 特徴 CBB染色 Bio-Safe CBB G-250ステイン タンパク質、ペプチド 3ステップ 1〜2.5hour 8〜28ng なし ◦淡青色◦ 水だけで染色可能 (低分子の場合は固定が必要) CBB R-250ステイン& デステインキット タンパク質 2ステップ 2.5hour〜 36〜47ng なし ◦濃青色◦一般的なCBB染色剤 銀染色 Dodecaシルバー ステインキット タンパク質 8ステップ 2hour 0.25〜0.5ng 増感試薬固定液 銀試薬 発色試薬 停止液 ◦高感度、低バックグラウンド ◦粉末からの調製不要 ◦ 質量分析、プロテインシーク エンサーに使用可能 シルバーステイン プラスキット タンパク質、DNA 4ステップ 1.5hour 0.6〜1.2ng 固定液 染色液 停止液 ◦4ステップで簡単 ◦低バックグラウンド ◦糖タンパク質は染まりません シルバーステイン キット タンパク質、DNA 7ステップ 2hour 0.6〜1.2ng 酸化試薬固定液 銀試薬 発色試薬 停止液 ◦広く使用されている銀染色 ◦ IEFゲル、糖、糖タンパク質も 染色可能 蛍光染色 Oriole™ 蛍光ゲルステイン タンパク質 1ステップ 1.5hour 0.5〜1ng なし (5Lキット希釈)◦脱色いらずで簡単染色◦質量分析に使用可能 ◦UV励起可能 Flamingoゲル ステイン タンパク質 2ステップ 5hour 0.25〜0.5ng 固定液希釈 ◦高感度◦簡単 ◦高い定量性 RUBY GELステイン タンパク質 3ステップ 4.5hour 1〜10ng 固定液脱色液 ◦高感度◦簡単 ◦高い定量性 ネガティブ染色 Zincステイン &デステインキット タンパク質、ペプチド 3ステップ 15min 6〜12ng 希釈 ◦バンドは染まりません◦バックグラウンドが白色 カッパーステイン &デステインキット タンパク質、ペプチド 3ステップ 10min 6〜12ng 希釈 ◦バンドは染まりません◦バックグラウンドが青色 核酸染色 エチジウムブロマイド溶液 核酸 2ステップ 1hour 50ng なし ◦一般的なDNA染色
タンパク質染色剤
タンパク質染色は、電気泳動後にタンパク質を可視化するための最も簡単で迅速な方法です。バイオ・ラッドは感度・定量性・質量 分析計対応に合わせた可視染色・蛍光染色剤を取り扱っています。CBB染色
クマシーブリリアントブルー染色は、SDS-PAGEを行ったゲル中 のタンパク質を染色するための最も一般的な染色方法です。バ イオ・ラッドでは、用途に合わせて2種類のCBB染色剤を取り扱っ ています。Bio-Safe CBB G-250ステイン
クマシーブリリアントブルーG-250を用いたPAGEゲル中タンパ ク質の染色キットです。染色から脱色まで酢酸やメタノールを 使用しませんので、CBB染色特有の臭いもなく、またゲルが収 縮する心配もありません。Ready-To-Useで事前調製の必要がな く、そのままお使いいただけます。特長
●Ready-To-Use、すぐお使いいただけます ●CBB染色が約1時間45分で行えます ●簡単な3ステップ ●精製水以外の試薬は必要ありません ●ゲルが収縮しません ●染色液中は毒性成分を含みません ●検出感度は1バンドあたり最高8〜28ng ●固定操作を加えることでペプチドゲルにもご使用いただけますミニゲル1枚のプロトコール
200ml×5分×3回 事前調製不要 50ml×1時間〜×1回 200ml×30分〜×1回CBB R-250ステイン&デステインキット
最も広く使用されているCBB R-250を用いたキットです。染色 液も脱色液もすぐにお使いいただける溶液となっており、試薬 調製の手間がかかりません。特長
●Ready-To-Use、すぐお使いいただけます ●溶液ですから調製の手間がいりません ●脱色液もセットになっています ●検出感度は1バンドあたり最高36〜47ng組成
●CBB R-250染色溶液:0.1% CBB R-250, 40% メタノール, 10% 酢酸 ●CBB R-250脱色溶液:40% メタノール, 10%酢酸ミニゲル1枚のプロトコール
事前調製不要 30〜60分×1回 事前調製不要 数十分〜数時間×数回 SDS-PAGE 染色 精製水による洗浄 精製水による脱色 SDS-PAGE 脱色 染色 1 2 3 4 5 6 7 8 Bio-Safe G-250ステインによる染色 レーン1, 8:SDS-PAGEスタンダード(Low) レーン2, 3:ヒトトランスフェリン レーン4, 5:魚肉タンパク質抽出液 レーン6, 7:大腸菌タンパク質抽出液 See Also ゲル作成試薬: P.191 EXQuestスポット カッター: P.319 画像解析: P.306シルバーステイン
Dodecaシルバーステインキット
DodecaシルバーステインキットはSinhaら(2001)により開発され た方法に基づいた銀染色用キットです。本製品はDodecaステイ ナー(P.225参照)と併用することで非常に高い再現性で、複数枚 のゲル上のタンパク質を高感度に同時検出することができます。特長
●低バックグラウンドで高感度検出が可能です(BSA : 0.25-0.5ng) ●全て溶液状態で販売されており、試薬の調製が簡単です ●グルタルアルデヒドによるタンパク質の修飾を行わずに染色 するため、質量分析用サンプルに使用することができます ●Dodecaステイナーと併用することで高い再現性で、複数枚の ゲルを同時染色することも可能ですラージゲル12枚のプロトコール
(Dodecaステイナー使用時)
40%エタノール、10%酢酸溶液、 10L中で1時間〜オーバーナイト 10%SC、1%BRC、30%エタノール溶液 10L中で30分 10L精製水にて10分×3回 2%SRC溶液10L中で30分 10L精製水にて1分×1回 10%DBC、0.02%IDC、0.005%BRC溶液 10L中で10-30分 5%酢酸溶液 10L中で10分 10L精製水にて10分シルバーステインプラスキット
シルバーステインプラスキットはGottleib & Chavkoらの開発し た方法に改良を加え、アクリルアミドゲルだけでなくアガロー スゲルでもお使いただけます。簡単な操作でタンパク質・DNA の高感度検出が可能です。
特長
●3ステップ、1時間の簡単操作 ●ngのタンパク質やDNAが検出可能 ●アクリルアミドだけでなく、アガロースゲルでも使用可能 ●検出感度は1バンドあたり最高0.6〜1.2ng ●1キットでミニゲル40枚、ラージゲル13枚の染色が可能です ●糖や糖タンパク質、IEFゲルには使用できません ●質量分析用サンプルに使用可能ミニゲル1枚のプロトコール
メタノール/酢酸と固定濃縮試薬を混合 200ml×20分×1回 200ml×10分×2回 シルバー懸濁試薬等を用時調製にて混合 100ml×20分×1回 5%酢酸 200ml×15分×1回 SDS-PAGE 増感 洗浄 染色 リンス 発色 停止 洗浄 固定 SDS-PAGE 精製水による洗浄 染色 停止 固定Ordering Information
カタログ番号 品名 価格 保存 Bio-Safe CBB G-250 ステイン 161-0786 Bio-Safe CBB G-250 ステイン 1L ¥16,000 室温 161-0786B02 Bio-Safe CBB G-250 ステイン 1L×2 ¥30,000 室温 161-0787 Bio-Safe CBB G-250 ステイン 5Lキューブ ¥55,000 室温 CBB R-250ステイン&デステインキット 161-0435JA CBB R-250染色溶液キット ¥15,000 室温 構成内容:CBB R-250染色溶液 1L、CBB R-250脱色溶液 1L×2本 161-0436 CBB R-250染色溶液 1L ¥10,000 室温 161-0436B04 CBB R-250染色溶液 1L×4本 ¥32,000 室温 161-0438 CBB R-250脱色溶液 1L ¥7,500 室温 161-0438B04 CBB R-250脱色溶液 1L×4本 ¥24,000 室温 CBB粉末 161-0400 クマシーブルーR-250, 10g ¥9,500 室温 161-0406 クマシーブルーG-250, 10g ¥9,500 室温 Dodecaシルバー ステインによる染色 マウス肝臓抽出液を 2次元電気泳動によ り展開し染色。シルバーステインキット
シルバーステインキットは広く使用されているMerrilらの開発 した方法に基づいた銀染色キットです。シルバーステインキッ トでは染色の難しいIEFゲルや糖、糖タンパク質も染色可能です。 アガロースゲルには使用できません。特長
●広く使用されている銀染色キットです ●糖や糖タンパク質、IEFゲルも染色できます ●検出感度は1バンドあたり最高0.6〜1.2ng ●アガロースゲルには使用できません ●1キットでミニゲル48枚、ラージゲル24枚の染色が可能ですミニゲル1枚のプロトコール
1. 40%メタノール/10%酢酸 200ml×30分×1回 2. 10%エタノール/5%酢酸 200ml×15分×2回 事前に精製水で10倍希釈 100ml×5分×1回 200ml×5分×2回 事前に精製水で10倍希釈 100ml×20分×1回 100ml×1分×1回 粉末を事前に精製水に溶解 100ml×30秒×1回 100ml×5分×2回 5%酢酸仕様
キット 時間 染色可能なゲルの枚数 保存期間 保存温度 検出限界 Dodecaシルバーステイン 3時間 ラージゲル12枚 1年 室温 0.25〜0.5ng シルバーステインプラス 1.5時間 ミニゲル40枚 1年 室温 0.6〜1.2ng シルバーステイン 2時間 ミニゲル48枚 6ヶ月 4℃ 0.6〜1.2ng SDS-PAGE 酸化 精製水による洗浄 銀試薬 精製水による洗浄 発色 停止 固定Ordering Information
カタログ番号 品名 価格 保存 Dodecaシルバーステインキット 161-0480 Dodecaシルバーステインキットラージ ¥65,000 室温 (Dodecaステイナーラージで12枚同時に染色する容量) 161-0481 Dodecaシルバーステインキットスモール ¥53,000 室温 (Dodecaステイナースモールで12枚同時に染色する容量) 161-0472 Dodecaシルバーステインイメージディベロップ試薬 2.5ml ¥6,000 室温 161-0473 Dodecaシルバーステイン増感試薬 700ml ¥17,000 室温 161-0474 Dodecaシルバーステイン増感試薬 1L ¥24,000 室温 161-0475 Dodecaシルバーステインバックグランドリデューサー試薬 75ml ¥7,000 室温 161-0476 Dodecaシルバーステインバックグランドリデューサー試薬 125ml ¥10,000 室温 161-0477 Dodecaシルバーステイン銀濃縮試薬 140ml ¥14,000 室温 161-0478 Dodecaシルバーステイン銀濃縮試薬 200ml ¥17,000 室温 161-0479 Dodecaシルバーステインディベロップメントバッファー試薬 700ml ¥17,000 室温 161-0482 Dodecaシルバーステインディベロップメントバッファー試薬 1L ¥21,000 室温 シルバーステインプラスキット 161-0449 シルバーステインプラスキット ¥34,000 室温 構成内容:定着促進濃縮試薬、固定濃縮試薬、シルバー懸濁試薬、 リダクション調製試薬、イメージデベロップ試薬 161-0448 シルバーステインプラス定着促進濃縮試薬 50g ¥8,000 室温 161-0461 シルバーステインプラス固定濃縮試薬 1000ml ¥13,000 室温 161-0462 シルバーステインプラス懸濁試薬 100ml ¥8,000 室温 161-0463 シルバーステインプラスリダクション調製試薬 100ml ¥8,000 室温 161-0464 シルバーステインプラスイメージディベロップ試薬 100ml ¥12,000 室温 シルバーステインキット* 161-0443 シルバーステインキット ¥38,000 4℃ 構成内容:オキシダイザーコンセントレート、シルバーリージェントコンセントレート、 ディベロッパー 161-0444 オキシダイザーコンセントレート 480ml ¥18,000 4℃ 161-0445 シルバーリージェントコンセントレート 480ml ¥15,000 4℃ 161-0450 シルバーステインディベロッパー 115g×1本 ¥10,000 4℃ 161-0450B04 シルバーステインディベロッパー 115g×4本 ¥33,000 4℃ * シルバーステインキットの保存可能期間は6ヶ月です蛍光染色
Oriole蛍光ゲルステイン
Oriole蛍光ゲルステインはUV励起が可能な、SDS-PAGE後のゲル を簡単に高感度に染色ができる蛍光染色剤です。プロトコールは 90分間の染色ステップのみで、固定や洗浄、脱色の操作が不要 です。特長
●染色時間は90分。固定・洗浄・脱色操作不要 ●MSコンパチブル ●ナノグラムレベルの感度と低バックグランド ●幅広いダイナミックレンジ(3オーダー) ●UV励起が可能なイメージ解析装置、トランスイルミネーター で検出が可能です。(レーザー励起イメージ解析装置では検出 できません)ミニゲル1枚のプロトコール
50ml×90分(最大)Flamingoゲルステイン
Flaimingoゲルステインはゲル中のタンパク質検出用の蛍光染 色剤です。高い検出感度と定量性、操作性を持ち、発現量の 低いタンパク質の検出・同定、定量的データの解析を可能に します。特長
●検出感度は最高0.25〜0.5ng ●蛍光レーザースキャナーでの検出に最適 ●2ステップのプロトコールで、簡単に染色することができます ●長時間染色しても、過染色されません ●3オーダーの幅広いダイナミックレンジで、高い定量性が得ら れます ●染色後、質量分析のアプリケーションに使用可能 ●ランニングコストを抑えることができますミニゲル1枚のプロトコール
40%エタノール、10%酢酸 2時間×1回 精製水で10倍希釈 50ml×3時間〜×1回 レーザースキャナーまたはUV付CCDカメラで検出 Ex. peak=271/512nm Em. peak=535nm * 染色後0.1%(w/v) Tween20 200mlで10分間脱色することで、バックグラウンド を抑えることができます。 SDS-PAGE 染色 SDS-PAGE 固定 染色* 検出 RUBYゲルステインE. coli protein sample (10μg).
Flamingoゲルステイン
E. coli protein sample (10μg).
Oriole蛍光ゲルステインによる2Dゲルの染色 大腸菌抽出タンパク質(40μg)を11cm ReadyStripゲル(pH5-8)で分離後、 8-16%グラジェントゲルで2次元目の展開を行った。 See Also 画像解析: P.306 ゲル作成試薬: P.191
RUBYゲルステイン
RUBYゲルステインはゲル中のタンパク質検出用の蛍光染色試薬 です。高い操作性と高い定量性と併せ持っており、最高検出感 度は銀染色と同等の1〜10ngです。特長
●検出感度は最高1〜10ng ●Ready-To-Use、そのままお使いいだだけます ●長時間染色しても、過染色されません ●3オーダーの幅広いダイナミックレンジで、高い定量性が得ら れます ●染色後、質量分析のアプリケーションに使用可能 ●糖タンパク質、リポタンパク質なども検出可能 ●DNA、RNAとは反応しませんミニゲル1枚のプロトコール
10%メタノール、7%酢酸 30分×1回 事前調製不要 50ml×3時間〜×1回 10%メタノール、7%酢酸 30-60分×1回 各種画像解析装置で検出可能 Ex. peak=300/480nm Em. peak=618nm SDS-PAGE 固定 染色 洗浄 停止Ordering Information
カタログ番号 品名 容量 価格 保存 Oriole蛍光ゲルステイン 161-0495 Oriole蛍光ゲルステイン 200ml(1×) 200ml ¥5,000 室温 161-0496 Oriole蛍光ゲルステイン 1L(1×) 1L ¥20,000 室温 161-0497 Oriole蛍光ゲルステイン 5Lキット 5L ¥80,000 室温 Flamingoゲルステイン 161-0490 10×Flamingoゲルステイン 20ml 200ml ¥7,000 4℃ 161-0491 10×Flamingoゲルステイン 100ml 1L ¥23,000 4℃ 161-0492 10×Flamingoゲルステイン 500ml 5L ¥99,000 4℃ RUBY GELステイン 170-3126 RUBY GELステイン 200ml 200ml ¥19,000 室温 170-3125 RUBY GELステイン 1L 1L ¥59,000 室温 170-3138 RUBY GELステイン 5Lキューブ 5L ¥240,000 室温カッパーステイン&デステインキット
カッパーステイン&デステインキットはLeeらの方法に基づいた SDS-PAGE用のネガティブ染色キットです。バックグラウンドは 青銅色に染まりますが、バンド部分は染まらずに透明のまま残 ります。簡単に脱色可能ですので、ブロッティング前のバンド の確認やシークエンス等のためにバンドの切り出しを行う場合 にお勧めします。 (ミニプロティアンTGX、Criterion TGX/XTゲルには対応していません)特長
●バンドは染まらずバックが透明感のある青銅色に染まります ●染色は1ステップ、5分でバンドが確認できます ●検出感度は1バンドあたり最高6〜12ng ●ゲル切り出しに最適 ●15分の脱色後、ブロッティングや溶出が可能 ●CBB染色より高感度 ●1キットでミニゲル25枚の染色が可能ですミニゲル1枚のプロトコール
100〜200ml×15秒〜5分×1回 事前に精製水にて10倍希釈 50ml×5分×1回 100〜200ml×3分×2回 事前に精製水にて10倍希釈 100ml×5分×2〜3回 SDS-PAGE 染色 精製水による洗浄 脱色 精製水による洗浄ネガティブ染色
Zincステイン&デステインキット
Zincステイン&デステインキットはFernandez-Patonらの方法に 基づいたSDS-PAGE用のネガティブ染色キットです。バックグラ ウンドは白色に染まりますが、バンド部分は染まりません。短 時間でCBB染色以上の検出が可能です。脱色も簡単で、ブロッ ティングやシークエンスを行う場合にお勧めします。特長
●バンドは染まらずバックが白色に染まります ●染色は2ステップ、10分でバンドが確認できます ●検出感度は1バンドあたり最高6〜12ng ●ゲル切り出しに最適 ●15分の脱色後、ブロッティングや溶出が可能 ●CBB染色より高感度 ●1キットでミニゲル25枚の染色が可能ですミニゲル1枚のプロトコール
事前に精製水にて10倍希釈 50ml×10分×1回 事前に精製水にて10倍希釈 50ml×30〜60秒×1回 100〜200ml×3分×2回 事前に精製水にて10倍希釈 5分×2〜3回 SDS-PAGE 染色 精製水による洗浄 脱色 イミダゾール処理Ordering Information
カタログ番号 品名 価格 保存 Zincステイン&デステインキット 161-0440 Zincステイン&デステインキット ¥22,000 室温 構成内容:10×Zincステイン溶液A 125ml、10×Zinc ステイン溶液B 125ml、 10×Zincデステイン溶液125ml 161-0441 10×Zincステイン溶液A 125ml ¥8,500 室温 161-0442 10×Zincステイン溶液B 125ml ¥10,000 室温 161-0734 プレミックスバッファー10×トリス / グリシン 1L(10×Zincデステイン溶液として使用) ¥7,500 室温 カッパーステイン&デステインキット 161-0470 カッパーステイン&デステインキット ¥23,000 室温 構成内容:10×カッパーステイン溶液125ml、10×カッパーデステイン溶液125ml 161-0471 10×カッパーステイン溶液 125ml ¥18,000 室温 161-0734 プレミックスバッファー10×トリス / グリシン 1L(10×カッパーデステイン溶液として使用) ¥7,500 室温 カッパーステインによる染色 (黒い紙の上で撮影してい ます) Zincステインによる染色 (黒い紙の上で撮影してい ます)核酸染色剤
エチジウムブロマイド溶液
DNAやRNAの検出に広く使用されているエチジウムブロマイド の染色剤です。すぐにお使いいただける溶液タイプです。特長
●濃度10mg/mlの溶液10ml入りOrdering Information
カタログ番号 品名 価格 保存 161-0433 エチジウムブロマイド溶液 10mg/ml, 10ml ¥8,000 室温DNA stained with ethidium bromide.