白血球 除去 に よる保存 心再 灌流 障害の
軽減 効果 につ いて
岡 山 大 学 医 学 部 第 二 外 科 学 教 室(指 導:寺 本 滋 教 授) 寺 岡 広 道 (平 成4年12月24日 受 稿) Key words:再 灌 流 障 害,好 中球 集 積,酸 素 フ リー ラ ジ カ ル 緒 言 不 足 す る移 植 臓 器 の 確 保 と移 植 手 術 の 安 全 性 を 高 め る と い う2つ の 目的 の た め に,生 体 外 で の 臓 器 保 存 法 の 確 立 は 重 要 課 題 の1つ で あ る. 臓 器 保 存 法 の 改 良 の 試 み は 現 在 な お 続 い て お り, 全 臓 器 保 存 法1)や 低 温 灌 流 保 存2,3),低 温 浸 漬 保 存4,5)など そ れ ぞ れ す ぐれ た 成 績 が 期 待 され る一 方 で そ の 安 全 限 界 も しだ い に 明 ら か に な っ て き て い る.他 方,近 年,保 存 臓 器 のviabilityの 低 下 の 一 部 は,reperfusion injuryに 起 因 す る と 考 え られ る よ う に な り6),す ぐれ た 保 存 条 件 と再 灌 流 障 害 の 予 防 の 両 面 を考 慮 す るべ き で あ る と 考 え られ る よ う に な っ て い る. 虚 血-再 灌 流 障 害 の メ カ ニ ズ ム は,初 期 再 灌 流 圧7),温 度 な ど の 物 理 的 な 因 子 と 多 くの 化 学 的 因 子8-15)に よ る と考 え ら れ る(図1).特 に,活 性 酸 素 に よ る 障 害 に つ い て は,心 臓 だ け で な く, 腸 管16-18),脳19)な ど他 の 臓 器 に お い て も膨 大 な 証 拠 が 集 積 され て い る.そ の 発 生 源 と して は, 多数 の 系 が提 唱 され て い るが11),生 体 内 で 量 的 に 重 要 な もの と しで は,xanthine oxydase系 と と も に,白 血 球 のNADPH oxydase系 と考 え ら れ る.白 血 球 の 役 割 に つ い て は,Romsonら20) やEnglerら21)が 心 臓 に お い て,Grishamら17) が 腸 管 に お い て 指 摘 して き た.こ れ ら の 報 告 は, 虚 血 後 の 再 灌 流 中 に 組 織 中 に 好 中 球 の 集 積 (neutrophil accumulation)が 生 じ,組 織 障 害 の 原 因 と な る と い う も の で あ る.し か しな が ら, これ らの 報 告 は 温 阻 血 モデ ル で あ り,cold protec tionを ほ ど こ し た 保 存 臓 器 の 再 灌 流 中 に は 異 っ た 状 況 で あ る可 能 性 が あ る.以 上 の よ う な 観 点 か ら,本 実 験 で は 保 存 臓 器 再 灌 流 中 の 白血 球 の 役 割 り を明 らか に す る た め に,ま ず 再 灌 流 に と も な うneutrophil accumulationに つ い て検 討 し,次 い で 白血 球 除 去 再 灌 流 液 と の 比 較 に よ っ て,白 血 球 が 血 管 抵 抗 を増 大 させ,内 皮 細 胞 を 傷 害 す るの か,さ ら に,心 筋 細 胞 に も障 害 を お よ ぼ して い るか ど うか を検 討 した. 材 料 と 方 法 雑 種 成 犬(体 重12.5kg-20.5kg)を 用 い た. 1. 保 存 前 心 機 能 の 測 定 ketamine hydrochloride (50mg/kg)筋 注, pentobarbital (5-8mg/kg)静 注 後,気 管 内 挿 管 し,1回 換 気 量20cc/kg, 12回/minの 調 節 呼 吸 を行 な っ た.両 側 開 胸 下 に 心 尖 部 よ り左 心 室 (LV)に,左 肺 静 脈 よ り左 心 房(LA)に5Fカ テ ー テ ル を 挿 入 し,左 房 圧(LAP)左 室 圧(LVP) お よ び そ の 一 次 微 分 値(LV dp/dt)を 測 定 記 録 し た. 2. 心 臓 摘 出 お よ び そ の 保 存 奇 静 脈 を 結 紮 切 離 し た.無 名 動 脈 を結 紮 し そ の 中 枢 側 よ り大 動 脈 基 部 に 向 け,心 停 止 液 注 入 用 カ テ ー テ ル を挿 入 固 定 し た.ヘ パ リ ン300IU/ kgを 静 注 後,左 鎖 骨 下 動 脈 を 結 紮 し た.上 下 大 静 脈 を結 紮 し で左 心 室 がempty beatingと な っ た 後,左 鎖 骨 下 動 脈 末 梢 で 大 動 脈 を遮 断 した . 4℃ 生 食 に よ る局 所 冷 却 を行 な い つ つmodified St Thomas液(表1, cardioplegic solution) に て 心 停 止 を得 た.摘 出 した 心 は,4℃modified Collins液(表1, immersed solution)に 浸 漬282 寺 岡 広 道
し,同 時 に心 停 止 液 注 入 用 カ テ ー テ ル か ら,同 液 を200ml注 入 し,6時 間 保 存 し た.胸 腔 内動 静 脈 を切 開 し,再 灌 流 用 に 血 液 を採 取 した.
AOS: active oxygen species HEP: high energy phosphate
図1 Possible mechanism of ischemic-reperfusion injury
3. 初 期 再 灌 流 液 の 作 成 a) 白 血 球 除 去 血 液 Donor犬 よ り採 取 した 血 液 をTERUMO社 製 白血 球 除 去 フ ィ ル ター に て2回 濾 過 し,白 血 球 を 除 去 した.こ の 白血 球 除 去 血 液 を リン ゲ ル 液 に て希 釈 しヘ マ ト ク リ ッ ト値 を25∼30%と し た. 表1 心 筋 保 護 液,浸 漬 液 の組 成 b) 白 血 球,血 漿 蛋 白 除 去 血 液 aと 同 様 に しで 白 血 球 除 去 血 液 を作 成 した. こ の 血 液 を3,000rpm 10分 間 遠 沈 分 離 し 血 漿 と 血 球 に分 離 し た.血 漿 に1 N HCl 1ml/100mlを 加 え 蛋 白成 分 を凝 固 させ た.再 度3000rpm 10分 間 遠 沈 し,血 漿 成 分 を分 離 しこ れ を1 N NaOH お よ び,8.4% Na2CO4に てPH=7.4に 滴 定 し
た.同 液 と リン ゲ ル 液 に て 血 球 成 分 を希 釈 し,
ヘ マ トク リ ッ ト値 を25%∼30%と した .さ ら に
Ca濃 度 を1mmol/lと な る よ うCaCl2を 加 え
た.
図2 Perfusion circuit for functional assessment
4. 再 灌 流 図2に 示 し た 回 路 を用 い再 灌 流 を行 な い 以 後 1時 間non-working beatingを 維 持 した.摘 出 心 は,6時 間 保 存 後,4℃ St Thomas液 を冠 動 脈 に 注 入 し,浸 漬 液 を 洗 い 流 し た.次 い で20℃ 生 食 内 に40分 浸 漬 し た 後(Simulation of im plantation)回 路 に接 続 し,冠 灌 流 を 再 開 し た. 灌 流 液 は95% airと5% CO2で 酸 素 化 した.再 灌 流 開 始 時 の 液 温 は28℃ と し,初 期 灌 流 圧 は20 mmHgに 設 定 し た.1分 ご と に 灌 流 圧 を20 mmHgづ つ 上 昇 させ,3分 後 に は80mmHgと し以 後 一 定 圧 で灌 流 し た.液 温 は 灌 流 圧 を一 定 と し た 後 上 昇 させ37℃ に 維 持 した. 5. 実 験 群 初 期 再 灌 流 液 お よ び全 血 へ の 置 換 時 期 に よ り, 以 下 の 諸 群 に 分 け た. group Ⅰ (n=7): control群 で 全 血 に よ る 再 灌 流 を 行 な っ た. group Ⅱa (n=7):白 血 球 除 去 血 液 に よ る 15分 間 の 初 期 灌 流 を行 な っ た 後,回 路 内 を全 血 に 置 換 し,さ らに45分 間 の 灌 流 を行 な っ た. group Ⅱb (n=7):白 血 球 除 去 血 液 に よ る 30分 間 の 初 期 灌 流 後,全 血 に よ る灌 流 を 開 始 し た. group Ⅲ (n=7):白 血 球,蛋 白除 去 血 液 に よ る30分 間 の 初 期 灌 流 後,全 血 に よ る灌 流 を 開 始 した. 6. 測 定 a) 左 心 室 機 能 回 復 率 心 尖 部 よ り挿 入 した 左 室 バ ル ー ン に生 理 食 塩 水 を 注 入 し,左 室 拡 張 末 期 圧 を保 存 前 測 定 値 と 同 一 値 に 設 定 して,LVP, LV dp/dtを 測 定 記 録 し た. b) 白 血 球 全 血 に よ る灌 流 開 始 直 前,開 始 直 後,開 始 後 5分,15分,30分 の 各 時 点 で 回 路 内 血 液 を採 取 し,白 血 球 数 お よ び 分 画 を測 定 した. c) 冠 血 流 量 肺 動 脈 か ら の 流 出 血 液 を1分 間 採 取 し,そ の 実 測 値 を冠 血 流 量 と し た.
284 寺 岡 広 道 d) 心 筋 浮 腫 再 灌 流 直 前 の 心 筋 重 量 を 測 定 し,こ れ をcon trol値 と し,60分 灌 流 後 の 心 筋 重 量 と 比 較 し% controlと し て 算 出 し た. e) ミ ト コ ン ド リ ア 呼 吸 能 灌 流 終 了 後 の 心 は,modified St Thomas液 で 心 停 止 を 得,ice slush内 で 冷 却 し た.こ の 心 筋 か らSohdarlら22)の 方 法 で 採 取 し た ミ ト コ ン ド リ ア 浮 遊 液 を 作 成 し,Chanceら23)の 白 金 電 極 法 を 用 い てrespiratory control index (RCI) を 測 定 し た.な お 保 存 前 値 と保 存 中 のRCIを 測 定 す る た め5頭 か ら の 摘 出 心 を 実 験 心 と 同 様 に 保 存 し,保 存 前,保 存3時 間 後,6時 間 後 の 心 筋 の ミ ト コ ン ド リ ア に つ い てRCIを 測 定 し た. 7. Data表 示 お よ び 分 析 Dataは,mean±SDで 表 示 し た.白 血 球 数 に つ い て はWilcoxon testに よ っ て,他 のData はStudent t testに て 有 意 差 検 定 を 行 な い,p< 0.05を 有 意 差 あ り と 判 定 し た. 結 果 1. 白 血 球 Donorよ り 採 取 し た 血 液 の 白 血 球 数 は, 2600∼12700/mm3で あ っ た.白 血 球 除 去 フ ィ ル タ ー に よ る 濾 過 を 行 な う と,白 血 球 数 は 測 定 不 能 域 に 低 下 し た.全 血 に よ る 心 筋 灌 流 を5分 間 行 な う と,group Ⅰ とgroup Ⅱaで は,回 路 内 血 液 の 白 血 球 数 は 有 意 に 減 少 し た.(p<0.01)し か しgroup Ⅱb, group Ⅲ で は 有 意 の 減 少 は 認 め な か っ た(Wilcoxon T test).次 い で 回 路 全 体 か ら の 白 血 球 減 少 数 を 心 組 織 へ のaccumula tionと す る と,group Ⅰ (mean=4.7±2.1× 108/100g wet wt) group Ⅱa (3.6×108/100g wet wt)でgroup間 に 有 意 差 を 認 め た(p<0.025 Wilcoxon U test).ま た,白 血 球 分 画 に 着 目 す る と,好 中 球 分 画 の 減 少 は,Ⅰ 群94.4±2.6% Ⅱ a群87.7±3.6%で 各 群 の 灌 流 液 中 の Ⅰ 群72.6± 4.3% Ⅱa群74.2±3.8%と 比 較 し て 好 中 球 分 画 が 有 意 に 捕 捉 さ れ た. 表 2
values are mean•}SD
LVDP: % control max LV dp/dt: % control
CF: coronary flow (ml/min/100g wet wt.) a: p<0.05 vs group ‡T b: p<0.05 vs group ‡Ua c: p<0.05 vs group ‡Ub 2. 左 室 機 能(表2) Ⅰ∼ Ⅱ 群 と も,LVDP, max LV dp/dt値 は 保 存 前 値 と 比 較 し で有 意 に 低 値 で あ っ た.Ⅰ 群 と比 較 しでLVDP値 は,Ⅲ 群 の み 有 意 に す ぐ れ た 回 復 を示 し,max LV dp/dt値 は,Ⅱb群, Ⅲ 群 が そ れ ぞ れ 有 意 に す ぐれ て い た.Ⅱa群 と比 較 した 場 合,Ⅱb群 で は 改 善 され な か っ た が Ⅲ 群 は 有 意 に す ぐれ て い た.ま た Ⅲ 群 は Ⅱb群 と比 較 し て も有 意 に す ぐれ て い た. 3. 冠 血 流 量(表2) Ⅰ群 と比 較 し て Ⅱa, Ⅱb, Ⅲ 群 は そ れ ぞ れ 有 意 に 大 きな 値 を示 し た.し か し な が ら Ⅱa, Ｈb, Ⅲ 群 間 に は 有 意 差 は な か っ た. 4. 心 筋 浮 腫(図3) 再 灌 流 前 心 筋 重 量 と 比 較 し て,各 群 と も有 意 に 心 筋 重 量 は 増 大 した.Ⅰ 群 と比 較 す る とⅡb群, Ⅲ 群 が そ れ ぞれ の 重 量 増 加 が 抑 制 さ れ た.Ⅱa群 と比 較 した 場 合,Ⅲ 群 の み 有 意 に 重 量 増 加 が 抑 制 され た. 5. ミ ト コ ン ド リア 呼 吸 能(図4) 保 存 中 は,ミ トコ ン ド リア 呼 吸 能 は 時 間 経 過 と と もに 低 下 し た が 再 灌 流 に よ り各 群 と も有 意 に 回 復 した(p<0.001).し か しな が ら保 存 前 値 と比 較 す る と,各 群 と も低 値 で あ っ た.Ⅰ 群 と 比 較 し た 場 合,Ⅱa, Ⅱb群 と もに 有 意 に 回 復 は よ か っ た.ま た Ⅱa群 と比 較 し た 場 合,Ⅱb群, Ⅲ 群 は 有 意 に す ぐれ て い た.Ⅱb群 と Ⅲ群 の 間 に は 有 意 差 は な か っ た. 考 察 心 筋 の 虚 血 再 灌 流 障 害 に 対 す る 白 血 球 の 役 割 りに つ い て の 知 見 は,Romsonら20)に よ っ て も た ら さ れ た.彼 らは,90分 間 の冠 動 脈 結 紮 後 の 再 灌 流 中 に 流 血 中 よ り 白血 球 除 去 を行 な い,梗 塞 巣 の 縮 少 に 成 功 し た.Englerら21)は 虚 血 再 灌
流 後5分 で す で に 心 内 に 多 数 のneutrophil accu mulationが 生 じ,循 環 抵 抗 の 増 大 や 組 織 浮 腫 を
も た ら す こ と を 示 し た.一 方Shlafer24) Casale ら25)は,血 液 成 分 を 含 ま な い 灌 流 液 中 に 投 与 し た superoxide dismutase (SOD)とcatalaseが
再 灌 流 障 害 を 軽 減 す る こ と を 示 し,ま たGrisham ら17)は,腸 管 虚 血 モ デ ル でxanthine oxidase inhibitorで あ るallopurinolも し く はSODに
よ り,ischemia-reperfusionに と も な うneutro phil accumulationが 減 少 す る こ と を 観 察 し た. こ の 事 実 は,再 灌 流 に と も な うneutrophil accu mulationが 再 灌 流 障 害 の 原 因 に な っ て い る の か, 単 に 他 の 原 因 に よ る 組 織 障 害 に 対 し て 反 応 性 に 生 じ る現 象 で あ るの か 改 め て 不 明 な もの と し た が,Hernandezら18)は 同 一 の 系 で 好 中球 の 血 管 内 皮 へ の 粘 着 を抑 制 す るmonoclonal抗 体 を投 与 す る こ と で,血 管 透 過 性 の 増 大 を抑 制 した と 述 べ て お り,血 管 内 皮 の 障 害 に は,好 中 球 由 来 の 活 性 酸 素 種 が 重 要 な 役 割 り を持 つ こ とが 示 さ れ た.好 中 球 は,種 々 の 因 子 でrespiratory burst と 呼 ば れ る 活 性 状 態 と な り,NADPH oxidase 活 性 が 上 昇 し,酸 素 消 費 量 は50∼100倍 と な り, そ の 大 部 分 はsuperoxide anion (O2-)に 変 換 さ れ る.も し こ の 周 辺 にFeイ オ ン が 存 在 す れ ばhydroxy radical (HO・)が 発 生 し(Haber-Weiss reaction)種 々 のradical反 応 が 進 行 す る.し か し そ の 反 応 速 度 が 大 きい た め,生 体 内 で は 周 辺 の 生 体 成 分 と容 易 に 反 応 す る た め,発 生 部 位 か ら到 達 可 能 な 距 離 は 最 大 で も45nm程 度 と考 え られ る26).この た め 血 管 内 に 集 積 した好 中球 由 来 のsuperoxideと トラ ン ス フ ェ リ ン な どの 担 鉄 蛋 白 由 来 のFeと の 反 応 で 生 じたHO・ は 容 易 に 血 管 内 皮 を傷 害 す るが,心 筋 細 胞 に は 到 達 し な い.し か し 内 皮 の 透 過 性 が 上 昇 す れ ば 血 管 内 で 発 生 し た 活 性 酸 素 種 も血 管 外 に 到 達 で き る と考 え ら れ る.Burtonら15)はsuperoxide 発 生 系 と トラ ン ス フ ェ リン を含 む 灌 流 液 で 心 筋 灌 流 を行 な い 内 皮 細 胞 だ け で な く心 筋 細 胞 の 各 小 器 官 も傷 害 さ れ る こ と を形 態 的 に示 しで お り, 本 実 験 で も,ミ トコ ン ド リア 機 能 面 か ら,好 中 球 由 来 の 活 性 酸 素 種 に よ る心 筋 細 胞 の 傷 害 が 示 唆 さ れ た. 図3 心 筋浮 腫 図4 ミ ト コ ン ド リ ア 呼 吸 機 能 好 中 球 は ま た 多 くのlipoxygenase代 謝 産 物 を産 生 分 泌 す る こ とが知 ら れ て お り27),これ ら一 連 の 物 質 に よ り血 管 透 過 性 の 亢 進,細 小 静 脈 の 収 縮,血 小 板 との 相 互 作 用28-30)に よ り微 小 循 環 系 を 閉 塞 す る な ど し て,冠 血 管 抵 抗 を 高 め た り, 極 端 な 場 合no reflow phenomenonの 原 因 と も
な る. 再 灌 流 後 の 心 筋 浮 腫 の 発 生 は,Compliance低 下 の 原 因 と な り,同 一 前 負 荷 に 対 す る拡 張 末 期 容 積 を減 少 させ る.本 実 験 に お け る Ⅱb群 と Ⅲ 群 間 で の 心 機 能 の 相 違 は,主 に こ の 因 子 に よ る と考 え られ る.長 時 間保 存 心 再 灌 流 時 に は,細 胞 性 浮 腫 と間 質 性 浮 腫 が 混 在 して 出 現 す る と考
286 寺 岡 広 道
え られ る が,も しcolloid成 分 の 漏 出 が 生 じ る 程 度 の傷 害 が 血 管 内 皮 面 に 発 生 して い な け れ ば 再 灌 流 液 のcolloid oncotic pressureが 高 い ほ ど 組 織 浮 腫 は 軽 減 す る は ず で あ る.Folletteら31) は,secondary blood cardioplegiaに 関 す る一 連 の 実 験 の 中 で,初 期 再 灌 流 液 中 にmannitolを 加 え た 場 合,心 筋 水 分 含 量 の 増 加 を抑 制 し な か っ た だ け で な く,か え っ てrebound現 象 を認 め た と述 べ て い る.ま たHernandezら18)は 上 述 し た よ う に,好 中 球 の 粘 着 を 抑 制 す る こ とで, 血 管 透 過 性 の 増 大 を 抑 制 し た が こ れ を 完 全 に 予 防 で きな か っ た と述 べ てい る.本 実 験 で もcolloid 成 分 を含 ま な い Ⅲ 群 に 比 べ,こ れ を 含 む Ⅰ∼ Ⅱ b群 が 再 灌 流 に と もな う心 筋 重 量 の 増 大 が 有 意 に 大 き い こ とか ら,白 血 球 除去 血 液 に よ る再 灌 流 に よ っ て も,内 皮 傷 害 は 完 全 に 防 止 す る こ とは で き な い と考 え ら れ た.し か しな が ら,冠 血 流 量 の 改 善,ミ トコ ン ド リア機 能 の 改 善,心 機 能 回復 率 の 改 善 か ら み て,白 血 球,特 に 好 中 球 が 再 灌 流 傷 害 の 原 因 の1つ で あ り,こ れ を 初 期 再 灌 流 液 か ら除 去 す る こ と で,保 存 心 再 灌 流 に と も な う微 小 循 環 系 お よ び 心 筋 へ の 傷 害 を 軽 減 し う る と考 え られ た. 初 期 再 灌 流 液 を 全 血 以 外 の もの に し た場 合, い つ 全 血 で の 灌 流 を再 開 す る か は 重 要 な 問 題 で あ る.Bredaら32)は 保 存 肺 の 再 灌 流 モ デ ル に お い て,初 期 再 灌 流 液 か ら好 中 球 を 除 去 した が, 1時 間 以 内 に 灌 流 液 中 に 好 中球 を再 添 加 す る と, 肺 の 組 織 傷 害 が 再 開 した と述 べ て い る.虚 血 再 灌 流 組 織 へ のneutrophil accumulationの メ カ ニ ズ ム が 明 確 で な い た め,全 血 で の 灌 流 再 開 時 間 の 設 定 を理 論 的 に 行 な う こ とは で き な い が, 実 験 的 に は,30分 後 に 全 血 に よ る 灌 流 を再 開 し て も有 意 のneutrophil accumulationは 生 じな か っ た. 初 期 再 灌 流 液 を全 血 以 外 で行 な う とい う試 み は,体 外 循 環 回 路 か らfilterに よ り白 血 球 除 去 を 行 な う 方 法33)や,secondary cardioplegia (secondary perfusion)な ど が あ る.後 者 の 有 効 性 と して,Ca2+イ オ ンの 制 限31,34)アミ ノ酸35,36) プ リン37)など基 質 の補 給 に よ る代 謝 改 善 な ど を示 唆 す る証 拠 は 多 い が,本 実 験 で 示 さ れ た よ うに, 長 時 間 保 存 心 に 対 して は 冠 血 流 の 改 善,浮 腫 軽 減 な ど も認 め られ る.し か しneutrophil accumu lation を 防 止 す る とい う点 か ら は30分 以 上 の perfusionを 必 要 とす るな ど実 用 上 の 問 題 が あ り な お 検 討 の 余 地 が 残 さ れ て い る. 結 語 保 存 心 再 灌 流 中 に,白 血 球 が 心 内 に 集 積 し微 小 循 環 系,心 筋 細 胞 の 傷 害 に 関 与 す る こ とが 示 唆 さ れ た.白 血球 除 去 血 液 に よ る再 灌 流 は 保 存 心 再 灌 流 に と も な う傷 害 を軽 減 し た. 稿 を終 え るに あ た り,懇 切 な る御 指 導 をい た だ き ま した寺本 滋教 授 に深 甚 な る謝 意 を表 します.ま た御 校 閲 を賜 りま した妹 尾 嘉 昌助 教 授 に 深 謝 いた し ます.ま た御 助 力 い ただ い た 多胡 護 講 師,並 び に 第二 外科 諸 学 兄 に 感謝 の 意 を表 します. 文 献
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Leukocyte
depletion
reduced
reperfusion
injury
in hearts
preserved
hypothermically
for 6 hours
Hiromichi
TERAOKA
Second Department of Surgery,
Okayama University Medical School,
Okayama 700, Japan
(Director:
Prof. S. Teramoto)
Recent studies suggest that circulating leukocytes trapped in the post ischemic-reperfused organ release active oxygen species and leukotrienes, and cause tissue damage.
Canine hearts statically preserved for six hours, were reperfused with whole blood (group ‡T, n=7), with leukocyte depleted blood (group ‡U, n=14), and with leukocyte and protein depleted blood (group ‡V, n=7). After initial perfusion, whole blood perfusion was started at 15 minutes of post reperfusion (group ‡Ua, n=7) and at 30 minutes of post reperfusion (group ‡Ub, n=7; group ‡V, n=7). Significant leukocytes sequestration was demonstrated only in group ‡T and group ‡Ua. Left ventricular function recovery, coronary flow and mitochondrial phospholyra
tion activity were significantly better preserved in the groups reperfused with leukocyte depleted blood, especially group ‡V. These data suggest that leukocyte depletion ameliorates reperfusion injury of preserved hearts.
