Posted at the Institutional Resources for Unique Collection and Academic Archives at Tokyo Dental College, Available from http://ir.tdc.ac.jp/
Title
№１０：８型アデノ随伴ウイルスベクターによるALP 遺
伝子の高発現は低ホスファターゼ症モデルマウスの歯の
形態不整を改善する
Author(s)
棚瀬, 稔貴; 高橋, 有希; 新谷, 誠康; 笠原, 正貴
Journal
歯科学報, 119(5): 452-452
URL
http://hdl.handle.net/10130/5001
Right
Description
目的：喉頭は咽頭と気管をつなぎ，頸部正中で第４ から第６頸椎の前方に位置している。骨格は主に甲 状軟骨，輪状軟骨，披裂軟骨で構成され，内喉頭筋 が付着することにより声帯の位置や緊張を変化させ ると言われている。我々は高齢者献体を研究対象と し，喉頭関節に焦点をあて組織学的検索を行ってい る。これまで輪状甲状関節および輪状披裂関節につ いて，軟骨の変性や摩耗，滑膜組織の変性について は報告したが，そこに存在するマクロファージの数 については不明な点があった。そこで今回我々は， 高齢者献体の輪状甲状関節および輪状披裂関節を組 織学的に観察し，マクロファージの数に関する検索 結果と比べ，加齢による機能変化について考察を試 みた。 方法：試料として，東京歯科大学所蔵の実習用遺体 １８体（男性１５体，女性３体；平均年齢８５歳）を用い た。各献体の輪状甲状関節および輪状披裂関節を， 滑膜組織を含めて摘出し，通法に従いパラフィン包 埋を行い，連続切片を作成した。各献体から得られ た連続切片を用い，Hematoxylin and Eosin（HE） および Elastic Masson にて染色し，それ以外の切 片については，Elastin および CD６８に対する免疫組 織化学的染色を施し観察を行った。 結果および考察：両関節における関節包は非常に薄 く，ほとんど弾性線維を含んでいなかった。また， 関節包の炎症所見も認められなかった。これら関節 包では，長く厚みのある滑膜ヒダを認めることがで きた。また滑膜組織には CD６８陽性マクロファージ が豊富に存在している部位が散見された。今回の観 察結果から，豊富なエラスチン線維や滑膜ヒダの存 在により，高齢者が高い発声を行う時にそれらの組 織が関節表面間の適合不足を補うことで，関節の前 方滑走や回転運動を維持していることが考えられ た。関節軟骨表面においては粗いもしくは薄いと いった退行性の変化がしばしば存在したが，炎症性 兆候が観察されないことや関節軟骨の断裂が存在し ないことから，加齢や関節への荷重などで生じる一 般的な骨関節炎とは異なり，骨関節炎様の特殊で無 症状な状態を維持していることが，高齢者の喉頭関 節であることが明らかとなり，その恒常性の維持に マクロファージが何らかの影響を与えていることが 示唆された。 目的：低 ホ ス フ ァ タ ー ゼ 症（hypophosphatasia； HPP）は組織非特異的アルカリホスファターゼ遺 伝子（TNALP）の変異により生じる先天性疾患で， 骨形成不全や乳歯の早期脱落を主徴とする。我々は 長期に TNALP を発現できるよう構築した８型ア デ ノ 随 伴 ウ イ ル ス（adeno-associated virus８； AAV８）ベクターを用いた遺伝子治療により，延 命効果が得られることを既に報告している。しか し，治療マウスの顎骨や歯に関して，形態不整，セ メント質欠如および石灰化不全などの治癒不全が確 認された。そこで本研究の目的は，投与する AAV ８ベクター量を増やすことで，歯の形態不整および 早期脱落の改善が可能かどうか検証することとし た。 方 法：出 生 直 後 の HPP マ ウ ス に 治 療 用 AAV ８ベ ク タ ー１．５×１０１１ vector genome/body（v.g．／ body）（１．５-Treated）または４．５×１０１２ v.g．／body（４５-Treated）を筋肉注射し，９０日後に下顎骨の放射線 画像解析であるエックス線画像解析およびマイクロ CT 画像解析を行った。エックス線解析では下顎骨 長径と下顎骨高径を測定し，マイクロ CT 画像解析 では下顎第一臼歯全長，歯根長，およびセメントエ ナメル境−歯槽骨頂間距離を測定した。また組織学 的解析として，H&E 染色を行った（n＝５）。コン トロールとして，同日齢の C５７BL６野生型マウス （WT）を用いた（n＝５）。 結果：下顎骨のエックス線画像解析では，下顎骨高 径において４５-Treated は１．５-Treated に比べて有意 に長かった（４５-Treated versus １．５-Treated；３．２４ ±０．３０mm vs２．８３±０．１６mm，p＜０．０５）。下 顎 骨 のマイクロ CT 解析では，第一臼歯全長と第一臼歯 歯根長において，４５-Treated は１．５-Treated に比べ て 有 意 に 長 か っ た（４５-Treated vs１．５-Treated； １．３０±０．０７ mm vs ０．１０±０．００７ mm，p＜０．００１）。 また組織学的解析では，４５-Treated はセメント質 の形成が認められたものの，１．５-Treated ではセメ ント質の形成は認められなかった。 考 察：以 上 の 結 果 か ら１．５-Treated と 比 べ４５-Treated では顎骨および歯の形態不正の改善が確認 された。このことから，治療開始時期が生後であっ ても充分量の ALP 発現を行うことで乳歯の早期脱 落の改善を行うことができる可能性が示唆され，重 症乳児型 HPP 患者の QOL の向上が期待できると 考える。
