LTJ_NEXT_No4_ indd

(1)

INFORMATION

インフォメーション次世代シーケンサSOLiD™システムのビーズ調製を自動化！ SOLiD™ EZ Bead™ システム P7 世界に誇るGIBCO®_{ブランドの細胞培養製品}_P8

PRODUCT REVIEW

プロダクトレビュー活性酸素種（ROS）用プローブ

CellROX™ Deep Red Reagent P2

アポトーシス研究用蛍光プローブ

CellEvent™ Caspase-3/7 green detection P3 IR & UVレーザー搭載レーザー“キャプチャー” マイクロダイセクションシステム

Applied Biosystems ArcturusXT™

Laser Capture Microdissection System P4 BigDye®_{の最新技術！}_PCR_{からシーケンス解析まで} 1チューブで

BigDye®_{Direct Cycle Sequencing Kit} _P5 H＋_{イオンが切り開く}_{新しい未来}_{蛍光を使わない} 半導体シーケンサ

Personal Genome Machine™ （PGM™） P6

次世代シーケンサSOLiD™システムのライブラリ調製を自動化！ AB Library Builder™システム P7 東北地方太平洋沖地震のお見舞いこの度、発生しました東北地方太平洋沖地震に被災された皆様には心よりお見舞い申し上げますと共に、皆様のご無事と被害にあわれた地域の一日も早い復興をお祈り申し上げます。

NEW

新製品情報細胞培養についてのFAQ P10 教えてライフテクノロジーズ

No.4

合併号

2011

4 月

&

5 月

Life Technologies

検出プラットフォーム：蛍光顕微鏡、ハイコンテントスクリーニング（HCS）装置、蛍光プレートリーダー* ＊その他の蛍光マイクロプレートリーダーとフローサイトメトリー装置による検出は確認中です情報冊子BioProbe64号に記事が掲載されています。詳細は http://www.invitrogen.jp/su/bp.htm をご覧下さい。本製品は核酸染色試薬がDEVDペプチドで保護された状態にあります。活性化Caspase-3/7 酵素がDEVDペプチドを切断すると、保護されていた蛍光色素が核酸に結合できるようになり、蛍光が検出されます。 HeLa細胞のCaspase-3/7活性の検出

HeLa細胞の培養液に7.5 µM CellEvent™ Caspase-3/7 Green Detection Reagentを添加後、コントロール溶媒（A）あるいは0.5 µM staurosporine（B）を加えて、4時間インキュベーションさせた後、細胞の画像を取得。コントロール細胞では蛍光が観察されていない一方で、

staurosporine 添加細胞では蛍光が検出され、カスパーゼが活性化されていることがわかる。

ライブセルイメージング観察

HeLa細胞におけるCaspase-3/7の活性とミトコンドリア膜電位の変化。Staurosporineによってミトコンドリアの膜電位が減少し、続いてCaspase活性の増加が観察された。同一ウエルのハイスループット解析 CellEvent™とPrestoBlue（PB）による細胞内のカスパーゼ活性と代謝活性の評価実験。細胞内の代謝活性の減少とCaspase-3/7の活性化がstaurosporine濃度依存的に変化した。

原

理

HeLa

細胞における

Caspase

活性データ

サイズ 100 μl** 製品番号 C10423 製品名

CellEvent™ Caspase-3/7 Green Detection Reagent

価格

￥60,000

**100μ（l200-1000倍希釈で使用、培養液20-100mlに相当）（MicroPlate10枚分相当、96wellは100μl/well、384wellは

25μl/well、濃度1000倍希釈での計算値）保存−20℃ 遮光、受取後3ヶ月以内にご使用ください。

HeLa

細胞におけるライブセルイメージングデータ

-10 -9 -8 -7 -6 -5 -4 -10 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 CellEvent (+ PB) PB (+ CellEvent ) Log [ Staurosporine ] M No r m a li z e d RF U LTJ_NEXT_No4_110408.indd 3 LTJ_NEXT_No4_110408.indd 3 11.4.8 3:41:21 PM11.4.8 3:41:21 PM

(4)

4

NEW

新製品情報

IR & UV

レーザー搭載

レーザー

“キャプチャー”

マイクロダイセクション

システム

Applied Biosystems ArcturusXT

TM

レーザーキャプチャーマイクロダイセクションシステム

特長

• IR

_{• UV}

レーザーにより、シングルセルや少数細胞をマイルドな条件でキャプチャー可能_{レーザーにより高速で組織を切り取ることができ、植物組織や皮膚・骨などの硬組織をキャプチャー可能}

•

熱可塑性フィルムの CapSure®

_{LCM Cap により確実に細胞・組織をキャプチャーでき、キャプチャー後に Cap 上の}

試料をシステムで確認可能

•

豊富な参考文献に裏打ちされた信頼性の高いテクノロジーサイズ 1式 1式 1式 1式製品番号 ARCTURUSXT-B ARCTURUSXT-BF ARCTURUSXT-EB ARCTURUSXT-EBF 製品名 ArcturusXT IR & UVレーザーベーシックシステム ArcturusXT IR & UVレーザー蛍光システム

ArcturusXT IR & Enhanced UVレーザーベーシックシステム

ArcturusXT IR & Enhanced UVレーザー蛍光システム

価格

お問合せお問合せお問合せお問合せ

Applied Biosystems

®

_{ArcturusXT™レーザーキャプチャーマイクロダイセクションシステムは、マイクロダイセクション}

を行なうためのレーザーキャプチャーとレーザーカッティングの強力な組み合わせを持つシステムです。固体赤外（

IR）

レーザーは、ライフテクノロジーズのマイクロダイセクションシステムだけが持つ機能で、生体分子を損なわずにマイルドな条件でキャプチャーすることが可能であり、シングルセルあるいは少数の細胞をキャプチャーするのに最適です。固体紫外線（UV）レーザーは、これまでにないスピードと精度でのキャプチャーを実現でき、組織を大きく切り取る場合や多数の細胞、植物組織、皮膚・骨などの硬組織をキャプチャーするのに適しています。 ViiA™ 7 リアルタイムPCRシステム StepOnePlus™ リアルタイムPCRシステム _{ジェネティックアナライザ}3500/3500xl 5500xl SOLiD™ シーケンサ Applied Biosystems®_{ArcturusXT™}

レーザーキャプチャーマイクロダイセクションシステム

システムだけではなく周辺試薬から下流のシーケンスやリアルタイム

PCR

までをサポート

LTJ_NEXT_No4_110408-2.indd 4

(5)

5

BigDye

®

_{の最新技術}

_{! PCR}

_{からシーケンス解析まで}

₁

_{チューブで}

BigDye

®

Direct Cycle Sequencing Kit

特長

• _•

PCRの精製とシーケンシング反応を1ステップで処理

_{プライマー直後の解析精度を向上}

• PCR からシーケンシング反応まで最適化

サイズ 24反応 100反応 1,000反応製品番号 4458689 4458687 4458688 製品名

BigDye®_{Direct Cycle sequencing kit} BigDye®_{Direct Cycle sequencing kit} BigDye®_{Direct Cycle sequencing kit}

価格￥13,000 ￥44,000 ￥402,000

BigDye

®_{にPCRからシーケンス解析までをサポートする新しいキッ} トが登場しました。

PCRからシーケンシング反応まで最適化したキッ

トは、サンプルの移し替えの手間を省き、解析時間を大きく短縮することが可能です。また、従来品に比べプライマー直後の配列を高精度に解析することが可能です。 BigDye®_{の最新技術が提案するワークフローは、}_PCR_{からシーケンス解析まで、試薬を加えていくだけ。サンプルロスの心配やサンプル分注}

の手間を無くし、1 チューブで反応することができます。また、BigDye XTerminator®_{精製キットを使用すれば、}_{ドライアップの手間や}_Hi-Di™

Formamide による溶解、さらにヒートショック処理の必要もなく、そのままジェネティックアナライザにセットすることができます。

新しい

BigDye

®

が提案するシンプルなワークフロー

BigDye

®

_{Direct Cycle Sequencing Kit}

_{はプライマー直後の配列を高精度に解析します}

BigDye®_{Direct Cycle Sequencing Kit}_{を使用し、}

POP-7™ ポリマーで解析したデータ

BigDye®_{Terminator v3.1 Kit}_{を使用し、}

POP-7™ ポリマーで解析したデータ

＊1：ターゲット領域を増幅するプライマーの5’側にM13の配列を付加した

M13-tailed primerをご用意ください。

M13 forward primer sequence: 5' TGTAAAACGACGGCCAGT 3' M13 reverse primer sequence: 5' CAGGAAACAGCTATGACC 3'

＊2： SAM™溶液とXTerminator® 溶液(BigDye XTerminator®精製キット)

はキットに含まれておりません。

LTJ_NEXT_No4_110408.indd 5

(6)

6

NEW

新製品情報

半導体シーケンサ

Ion Torrent -Personal Genome Machine™

（

PGM™

）

http://www.appliedbiosystems.jp/website/ion.htm

製品の詳細は

価格半導体技術の進化は目まぐるしく、すでにPGM™では産出データ量

の異なるIon 314™Chip, Ion 316™Chip, Ion 318™Chipの3種類のチップをご紹介しております。2010年第4四半期では、10Mbp/ラン（314）だったものが、2011年第2四半期には100Mbp/ラン（316）、そして2011年第4四半期には1Gbp/ラン（318）の高精度*のデータを得ることができます。（*コンセンサスシーケンスで99.99%以上、生データで99.5%以上の精度）また100bpである1リードあたりの解読長も、2011年第4四半期には 200bp,そして2012年には400bpまでのデータとなります。これらの改善により、アンプリコンシーケンシング、ターゲットリシーケンシング、微生物、ウィルスなどのdenovoシーケンシングやミトコンドリアリシーケンシング、RNA-SeqやChIP-Seqなど幅広いアプリケーションに、そしてバーコードサンプル（マルチプレックス）やペアーエンドのシーケンシングが対応できるようになります。今注目をされているアンプリコンシーケンシングでの解読長は200bp が有効とされています。PGM™では、 200bpまでのシーケンスを2時間で完了することができるので、迅速にデータを得ることができます。また1ラン数あたりのリード数が増えればマルチプレックスでの解析も可能になり、研究のスピードだけではなく、その幅も広がっていきます。

シンプルなケミストリー

1 年間で

10Mbp

から

1Gbp

へそしてリシーケンシングから

RNA-Seq

まで

半導体チップでのシーケンシング: Ion Torrentの半導体チップ上には、高密度に敷き詰められた数百万のウェルが各々リアクターの働きをします。各ウェルには、異なったDNAテンプレートビーズが入っており、大規模の並列解析を行います。シーケンシング反応:

Ion Chip 内に、各ヌクレオチドが順番に流れます。そのヌクレオチドがDNA テンプレートに取り込まれると、H+ イオンがウェル内に放出されます。H+ イオンのもつ電荷によって、試薬のpH が変化し、それを独自のイオンセンサーが検出し、シグナルとして検出をします。ヌクレオチドがテンプレートに取り込まれなかった場合は、電荷がしないのでシグナルは検出されません。また、 DNAテンプレートに同じ塩基が2つ取り込まれるとH+ イオンの量は倍になりますので、シグナルは2倍になります。ホモポリマーの場合は、塩基の数に合わせてシグナルが倍増することになります。

htt /

製品詳細は 2011年対応予定アプリケーション・アンプリコンシーケンシング、ターゲットリシーケンシング、・微生物、ウィルスなどのdenovo＆リシーケンス・ミトコンドリアリシーケンシング、・次世代シーケンサ用などのライブラリQC ・バーコードサンプルのシーケンシング・ RNA-Seq-トランスクリプトーム解析・ ChIP-Seq ・ペアーエンドのシーケンシングシーケンスコストは 6万円∼10万円* （概算価格、ライブラリ調整含む）シーケンスデータ量 10MB 100MB 1GB 2010年第4四半期 2011年第2四半期 2011年第4四半期 2012年解読長 100bp 200bp 400bp 海外ユーザの情報、そのほかの情報はWebのプレスリリースなどでお読みになれます。 www.appliedbiosystems.jp/website/ion.htm ＊本ページに記した数値などは開発の状況によって変動することがございますのでご了承ください

Ion Torrent Personal Genome Machine™の技術は、蛍光剤や光学系を使わず、DNA 複製時に放出されるH+イオンを半導体センサーでダイレクトにかつリアルタイム検出でシーケンシングを行うという、業界初のPost Light™ Technologyを採用した半導体DNAシーケンサです。The Chip is the Machine™（チップそのものが機械）という言葉で表わされるように、すべての反応、検出は半導体チップの中で行われます。PGM™は、光学系などを必要としない本体のためシステム導入コストが抑えられ、また極めてシンプルなケミストリーで、ランニングコストも安く抑えることができます。すでに世界では導入が進み、医学系で注目されているアンプリコンリシーケンシングやターゲットリシーケンシング、ミトコンドリアシーケンシング、微生物などのシーケンシングの結果が報告されています。驚くほどシステムそのものの立ち上がりも早く、またシーケンスランも2時間ですので、PGM™ を導入することで研究のスピードはますます加速することでしょう。 LTJ_NEXT_No4_110408.indd 6 LTJ_NEXT_No4_110408.indd 6 11.4.8 3:41:27 PM11.4.8 3:41:27 PM

(7)

PRODUCT REVIEW

プロダクトレビュー

7

次世代シーケンサ

SOLiD™

システムのライブラリ調製を自動化！

AB Library Builder

™

_システム

AB Library Builder™システムは、次世代シーケンサSOLiDシステムのライブラリ調製を1ランで13サンプル、

1日あたり2ラン

で26サンプルまで調製可能な自動化システムです。マニュアル操作と比べ、半分以下のハンズオンタイムでライブラリ調製を完了でき、次世代シーケンサのワークフローを大幅に省力化します。次世代シーケンサSOLiDシステムは、バーコードアダプタを利用してライブラリを作製することで、最大96種類までのマルチプレックスが可能になります。さらに、

5500シリーズSOLiDシステムのSOLiDフローチップでは、独立して6レーンまで利用できるた

め、最大576サンプルまでのマルチプレックスが可能になります。臨床検体など、多数のサンプルからのライブラリ作製をサポートします。

次世代シーケンサ

SOLiD™

システムのビーズ調製を自動化！

SOLiD

™

_{EZ Bead}

™

_システム

SOLiD™ EZ Bead™ システムは、次世代シーケンサSOLiDシステムのビーズ調製を自動化するシステムです。最大96サンプルま

でのバーコードアダプタを利用したライブラリを同時にビーズ上に増幅、精製し、シーケンスに必要なビーズを調製することが可能です。

AB Library Builderシステムと組み合わせて利用することで、次世代シーケンサのサンプル調製を大幅に省力化できます。

特長

• SOLiDシステムのライブラリ調製ハンズオンタイムを50%以上短縮

_{• 5500シリーズSOLiDシステム・}

_{SOLiD4システムの両方のライブラリ}

調製に対応

• フラグメントライブラリ、ペアエンドライブラリの調製に対応

• 1ランあたり13ライブラリの作製が可能

• 1日あたり2ランが可能

AB Library Builder™システム製品番号 4448417 サイズ一式製品名 SOLiD™ EZ Bead™ システム価格￥7,200,000 サイズ製品番号 4463794 一式製品名 AB Library Builder システム価格￥5,800,000

EZ Bead™ Emulsiﬁer EZ Bead™ Ampliﬁer EZ Bead™ Enricher

エマルジョン作製

Step

1 Step2 エマルジョン

PCR

Step3 ビーズ精製

(8)

FBS

の影響を最小限に

血清低減培地

8

PRODUCT REVIEW

プロダクトレビュー

Advanced DMEM/F12 Advanced DMEM/F12 Advanced RPMI Advanced RPMI Advanced DMEM Advanced DMEM Advanced MEM Advanced MEM 製品名 500ml 10X500ml 500ml 10X500ml 500ml 10X500ml 500ml 10X500ml サイズ 12634010 12634028 12633012 12633020 12491015 12491023 12492013 12492021 製品番号 ¥3,200 ¥30,200 ¥3,000 ¥28,000 ¥2,800 ¥26,800 ¥2,800 ¥26,800 価格 Synth-a-Freeze™ 製品名 50ml サイズ A1254201 製品番号 ¥10,700 価格

Recovery™ Cell Culture Freezing Medium

製品名 50ml サイズ 12648010 製品番号 ¥10,300 価格・従来の

DMEM/F12

、

RPMI

と同じように培養できます。・

FBS

の添加量を低減することができるので、

FBS

の影響を最小限にできます。・通常の培養条件より

50%FBS

を少なくする場合、特にアダプテーションの必要はありません。・使用する細胞は、従来のクラシカル培地と同じです。例）

MDBK, Hep-2, COS-7, A549, MDCK, WI-38,

他

・

L-

グルタミン不含。・非必須アミノ酸溶液、ピルビン酸ナトリウム含有（

110mg/L

）。・血清添加量：

1

∼

5%

（細胞により添加量は異なります）。・

cGMP

および

ISO9001

のもと製造。

細胞を大切に保存

細胞凍結保存培地

（リサーチグレード）

Recovery™ Cell Culture Freezing Media

が選ばれる理由

細胞の適切な凍結保存は、細胞培養で正確な結果を迅速に得るために最も重要なポイントの一つです。健全で健康な状態で培養された多くの生細胞があれば、実験をより早く開始でき、信頼できる結果が得られます。・細胞の生存率向上−接着系と浮遊系の両方の細胞株の凍結保存において、細胞生存率が平均

25%

向上。・利便性−手のかかる

DMSO

混合が不要、すぐに使用できます。・抗菌剤、ホルモン、増殖因子、血清、タンパク質を含まない凍結保存用液。・多くの哺乳類細胞の他、ヒト角化細胞、

ES

細胞、神経幹細胞、間葉系肝細胞などにも使用可能。・

cGMP

グレードで厳しい品質管理のもと生産。・

10%DMSO

と

HEPES

緩衝液を含有。

動物由来成分不含、

正常細胞用凍結保存液

（

cGMP

グレード）

世界に誇る

GIBCO

Ⓡ

_{ブランドの細胞培養製品}

FBS

の添加量を

50 ∼

90%

低減することができる培地です。

Recovery™

細胞培養フリージング培地は、哺乳類細胞培養の完全な凍結保存培地です。

図

1. 8

種類の凍結培地と最先端の凍結保存技術を使用した

5

細胞株の回復率：定められた数の細胞を液体窒素で凍結しました。融解後、細胞を一定量の培地で希釈し、12ウェルプレートに播種しました。当初の培養密度は、固着細胞株では2.3 x 104_株_/_{ウェル、固着していない細} 胞株では6.0 x 105_株_/_ウェル。

Recovery™ - Cell Culture Freezing Medium （CCFM）に対してノーマライズされ、エラーバー（n＝4）と共にプロットしました。

Recovery™ CCFM (Cat. no. 12648-010)

C社製品 F社製品 A社製品 D社製品 G社製品 B社製品 E社製品 110 100 80 60 40 90 70 50 30 20 10 0 Cell type MDCK Swiss 3T3 CHO AE-1 HeLa yr e v o c e R % ) m ui d e m ™ yr e v o c e R ot d e zil a mr o n( LTJ_NEXT_No4_110408.indd 8 LTJ_NEXT_No4_110408.indd 8 11.4.8 3:41:51 PM11.4.8 3:41:51 PM

(9)

なぜ

GIBCO

®

ブランドが信頼されているかご存知ですか？

9 SF 900 III SFM SF 900 III SFM SF-900 III SFM

SF9 CELLS ADAPTED IN SF900 III SF21 CELLS ADAPT IN SF900 III

製品名 500ml 1,000ml 6X1,000ml 1.5ml 1.5ml サイズ 12658019 12658027 12658027JP 12659017 12682019 製品番号 ¥4,400 ¥7,800 ¥41,600 ¥26,900 ¥26,900 価格

Grace's Insect Cell Culture Medium Grace's Insect Cell Culture Medium

Grace's Insect Cell Culture Medium（サプリメント不含）

Grace's Insect Cell Culture Medium Grace's Insect Cell Culture Medium

製品名 500ml 100ml 500ml 10X1L 10X500ml サイズ 11605094 11667037 11595030 11300027 11605102 製品番号 ¥3,400 ¥3,700 ¥7,500 ¥12,500 ¥31,700 価格・酵母加水分解物の低減と

GIBCO

®_独自の組成により、ロット間変動を抑制し、さらに安定したタンパク質産生が行えます。・サプリメントを自由に加えられるので、工程を自由に調節できます。・動物由来成分不含有・

L-

グルタミンや界面活性剤を加える必要がありません。・すでに

GIBCO

®

_{Sf-900™ III SFM}

_に馴化した増殖の早い細胞をご利用いただけます。

数多くの実績があります

昆虫細胞用培地もやっぱり

GIBCO

®

・

Sf-9

、

Sf-21

細胞培養用培地。・大量のタンパク質発現をするのに最適。ライフテクノロジーズは、サプライヤーおよび原材料の調達（サプライヤーに対して厳密な資格証明および承認プロセスを要求しています）から社内での製品開発までのリスクを認識しリスクに責任を持つ企業です。品質や規格が安定しない原材料は、試薬に入り込まないよう、設計の段階から工夫しています。ライフテクノロジーズのリスク緩和方針と活動を説明するモデルを以下に示します。ここでは、これらの主要なリスク領域についてそれぞれ詳細に検討します。常に品質を最優先にし、最終的にカスタマーやエンドユーザーの安全性と満足へとつながります。これが、ライフテクノロジーズの技術革新の実績を裏付けています。培地業界をリードするライフテクノロジーズは、よりよい方法の発 見に向けて、日々努力しています。このような例に、新製品の GIBCO®_{ボトルがあります。このボトルは、研究者のことを考え、人} 間工学的な革新技術を利用して、性能と信頼性を向上し研究室で の使い勝手を高めた製品です。新製品のGIBCO®_{ボトルを見ても、} 製造工程でのリスク管理レベルははっきり分からないかもしれませんが、分子レベルの漏れを最小限に抑えることのできるヘリウムリーク試験が採用されています。競合他社の多くはヘリウムリーク試験よりも厳密性の低い微生物侵入浸漬試験（培養器［bug bath］を用いてボトルの密閉性が最低基準を満たすことを確認する方法）を採用しています。ライフテクノロジーズは競合他社のはるか先を進んでいます。 ライフテクノロジーズでは、操作上のあらゆるリスクを認識し、と りのぞく努力をしています。その理由は、どんなに小さなリスクで も、お客様にとって重要な問題 となるからです。このために、ラ イフテクノロジーズはサプライチェーンのあらゆる段階で、操作上のリスクを緩和・制御する手段を開発しました。

リスクを認識し、

リスクに責任を持っています。

是非

NEW GIBCO

®

_{ボトルを体験して下さい。}

DMEM DMEM RPMI1640 DMEM α-MEM 製品名 11995073 11965118 11875119 11885092 12571071 製品番号 10X500ml 10X500ml 10X500ml 10X500ml 10X500ml サイズ ¥15,400 ¥15,400 ¥15,400 ¥15,400 ¥26,500 価格 Day 6 Day 5 Day7 4 y a D l m/ sll e C l m/ sll e C 14 × 106 16 × 10 12 × 106 10 × 106 8 × 106 6 × 106 0 2 × 106 4 × 106 14 × 106 16 × 10 12 × 106 10 × 106 8 × 106 6 × 106 0 2 × 106 4 × 106 Sf-900™ II, lot #1 Sf-900™_II Sf-900™_{II, lot #2} Sf-900™_{III, lot #1} Sf-900™_III Sf-900™ III, lot #2 Sf-900™_{III, lot #3} Lot #1 Lot #2

Lot #1 Lot #2 Lot #3

(10)

10

教えてライフテクノロジーズ

■細胞培養についての

FAQ

教えてライフテクノロジーズ

ライフテクノロジーズの製品について、よくある質問や知っていると便利な情報をご紹介します。

GIBCO

®_は、

₁₉₆₂

_{年に細胞培養用の血清と粉末培地の販売を初めて以来、常に最新の技術を} 導入し、研究の発展に合わせて細胞培養に必要な試薬を世界の研究者に提供してきました。今回は弊社によく寄せられる細胞培養の培地と血清についての質問とその回答をご紹介いたします。培地中に含まれている炭酸水素ナトリウム（重炭酸ナトリウム、

NaHCO3

）の濃度により培養に適した

CO2

濃度が異なります。

MEM

（

Earle

’

s

塩）、

RPMI1640

、

DMEM/F12

などは

5%CO2

雰囲気が適切です。

細胞を培養すると細胞から

CO2

と乳酸が副産物として培地に排出されます。多くの培地ではこの

CO2

と平衡になるようになっています。しかし、細胞がそれほど増殖しない場合は、

pH

と浸透圧の平衡を保つために外から

CO2

を補給しなければなりません。各培地に含まれている平衡になる気相中の

CO2

濃度が異なります。ちなみに

DMEM

は

10%CO2

雰囲気と平衡になる濃度の炭酸水素ナトリウムが含まれています。よく

DMEM

が

5%CO2

雰囲気で用いられることがあるのですが、

1

週間ぐらい

5% CO2

のインキュベーターに置いておくと、

pH

が

8

近くまで上昇するのでフェノールレッドの色が赤紫色へ変化します。

Q

A

DMEM

、

MEM

、

RPMI1640

などの培地は

5%CO

2

雰囲気で培養してもいいですか？

L-Glutamine

はタンパク質を構成するアミノ酸のひとつという以外に重要な細胞のエネルギー源でもあります。細胞が

ATP

を得るときに最もよく使うのはグルコースの酸化です。グルコースは酸化されて乳酸（最終的には二酸化炭素）になります。その次が

L-Glutamine

の酸化です。

L-Glutamine

は酸化されて二酸化炭素とアンモニアに分解されます。

L-Glutamine

のエネルギーは全エネルギーの約

30%

です（細胞によって異なります）。通常培地には

1-4 mM

の

L-Glutamine

が含まれていますが、これは他のアミノ酸の約

10

倍の濃度で、エネルギー源が枯渇しないようにしています。また高濃度を入れる理由のもうひとつは

L-Glutamine

は水溶液中で分解しやすいためです。この問題を克服するのがジペプチドの

GlutaMAX-I

です。

GlutaMAX-I

は培養液中でも分解せず、アンモニアも発生しません。しかし一度細胞内に取り込まれジペプチダーゼで

L-Alanine

と分離されると、

L-Glutamine

として働きます。また

GlutaMAX-I

は室温保存ができます。

Q

A

L-Glutamine

はなぜ必要ですか？

表

1

それぞれの培地における推奨

CO2

濃度図

1 37

℃における

GlutaMAX-I

と

L-Glutamine

との安定性の比較。培地 DMEM MEM, Earle’s塩 MEM, Hanks’塩 RPMI1640 DMEM/F12 炭酸水素ナトリウムの濃度 3.7 g/l 2.2 g/l 0.35 g/l 2.0 g/l 2.438 g/l 推奨する気相中のCO2濃度 10% 5% 大気中（＜1%） 5% 5%

■培地について

L-glutamine GlutaMAX™_-I L-glutamine GlutaMAX™-I Day 0 1 2 3 4 5 6 7 mg/L 1000 900 800 700 600 500 400 300 200 LTJ_NEXT_No4_110408.indd 10 LTJ_NEXT_No4_110408.indd 10 11.4.8 3:41:52 PM11.4.8 3:41:52 PM

(11)

11

■血清について

■番外編

FBS

は

Fetal Bovine Serum

、

FCS

は

Fetal Calf Serum

の略称で、いずれもウシ胎児血清の意味で、同じです。

BS

は

Bovine Serum

の略称で、

CS

は

Calf Serum

の略称です。当社では

2003

年まで“

Calf Serum

”と名づけて、生後

12-36

ヶ月のウシから得られた血清を販売していました。しかし「生後

1

年以内」という国際的な“

Calf

”の定義に合わせて、

2003

年の

4

月に製品名を

Bovine Serum

に変更しました。したがって、

2003

年以前の論文に“

Calf Serum

（

Invitrogen, Life

Technologies,

または

GIBCO

）”と書かれていた場合の血清は、現在の“

Bovine Serum

”のことになります。ちなみに新生仔ウシ血清（

Newborn Calf Serum, NBCS

）は生後

14

日以内の仔牛から採取した血清です。

Q

A

FBS

と

FCS

は何が違いますか？また、

BS

と

CS

は何が違いますか？

GIBCO

の細胞培養用血清には、

FBS

のほかに

BS

、

NBCS

、ウマ血清（

Horse Serum, HS

）などがあります。

主な成分はアルブミンです。いずれの血清でも全タンパク質の約

50%

を占めています。アルブミンは脂質の細胞への運搬や代謝産物を除去などの働きをしています。そのほかに血清には細胞が増殖するのに必要な因子が多数含まれているはずですが、すべてが同定されたわけではありません。細胞を増殖させる能力は一般的に

FBS

＞

NBCS

＞

BS

＞

HS

の順になります。以前

GIBCO

で各血清の

10

数ロットを調べたデータからも、成長因子など

FBS

が最も多く含まれていることがわかります。

Q

A

FBS

やその他の血清の成分を教えてください。

創業当時の会社名

Grand Island Biological Company

を短縮したものです。現在では

Life Technologies Corporation

の細胞培養関連製品のブランドです。

Q

A

GIBCO

®

_{の由来は？}

表

2

各動物種の血清中の成分の比較表

Biochemical and Hormone Proﬁle for Serum

Biochemical Component Total Protein pH Osmolality Glucose Hemoglobin Bilirubin Uric Acid Urea Nitrogen Creatinine Sodium Potassium Calcium (total) Chloride Phosphorus (inorganic) Iron (total) Albumin Globulin (total) Alkaline Phosphatase GG-Transpeptidase SGOT Lactate Dehydrogenase Cholesterol

Low Density Lipoprotein High Density Lipoprotein Triglycerides Growth Hormone Insulin Estradiol Progesterone Testosterone T4 (Thyroxine) T3 Units g/dl units mosm/kg mg/dl mg/dl mg/dl mg/dl mg/dl mg/dl meq/l meq/l mg/dl meq/l mg/dl mg/dl g/dl g/dl U/l U/l U/l U/l mg/dl mg/dl mg/dl mg/dl ng/ml mIU/ml pg/ml ng/ml ng/ml mg/dl ng/ml

Newborn Calf Serum mean 6.4 7.5 292 69 15 0.5 1 13.3 0.9 140 5.9 10.9 109.7 7.9 97 3 3.3 262 378.3 56.3 822 70 18 45 36.7 36 5.4 36.9 0.02 0.49 9.6 2.2 (range) 6.0 - 7.0 7.3 - 7.7 290 - 310 59 - 79 6.5 - 23.5 0.2 - 0.6 1.0 - 1.1 11 - 15 0.6 - 1.1 138 - 144 5.8 - 6.0 10.6 - 11.2 109 -111 7.9 - 8.0 91 -100 2.9 - 3.2 2.8 - 4.1 241 - 293 305 - 435 44 -72 755 - 920 66 - 75 12 - 23 37 - 52 26 - 53 23 - 37 4.2 - 6.8 20.3 - 46.1 0.01 - 0.03 0.19 - 0.90 7.0 - 12.2 1.7 - 2.7 Bovine Serum mean 6.9 7.6 292 105 15.2 0.2 0.9 10.0 1.1 137 5.5 9.9 106.7 7.6 74 3.6 3.3 188 55.3 83.3 1067 78.3 56.7 36.7 16.3 26 3.9 32.9 1.65 1.05 9.2 1.9 (range) 6.1 - 7.5 7.3 - 8.1 273 - 310 90 - 118 10.2 - 23.3 0.1 - 0.4 0.8 - 1.0 0 6 - 13 0.7 - 1.6 134 -142 4.9 - 6.0 9.7 - 10.0 99 - 112 6.8 - 8.4 53 - 93 3.4 - 3.8 2.6 - 3.7 125 - 295 27 - 79 64 -94 975 - 1220 95 - 121 51 - 72 41 - 63 15 - 17 14 - 35 3.4 - 4.5 22.2 - 39.2 0.88 - 2.20 0.79 - 1.19 7.8 - 10.0 1.5 - 2.5

Fetal Bovine Serum mean 4.2 7.3 314 130 14.2 0.2 3.2 14.4 3.1 134 15.1 14.6 104.9 11.2 195 2.6 1.3 262 5 60.4 559 34.2 2.8 6.5 219.5 131 4.3 13.8 0.03 0.4 14.8 1.2 (range) 4.0 - 4.3 6.7 - 7.3 290 - 335 107 - 144 5.8 - 23.0 0.1 - 0.4 2.6 - 3.5 15 - 18 2.8 - 3.3 131 - 137 12.9 - 14.2 14.3 - 15.0 102 - 108 10.0 - 14.0 189 - 204 1.3 - 2.9 1.1- 1.5 2 - 319 0 - 7.0 28 - 161 262 - 1010 19 - 54 0 - 7.0 5.0 - 9.0 73- 1720 126 - 138 2.9 - 5.5 11.2 - 17.5 0.01 - 0.06 0.38 - 0.45 13.9 - 15.8 0.9 - 1.4 mean 7.0 7.8 284 75 8.8 0.2 0.4 19.8 1.1 141 4.5 11.5 108 3.7 159 3.2 3.8 173 13.8 299 418 83.6 22.6 55 18.6 not tested 11.8 32.5 2.68 0.35 1.9 0.6 (range) 6.3 -8.2 7.4 - 8.1 279 - 291 56 - 86 6.3 - 10.9 0.1 - 0.4 0.2 - 0.4 16 - 30 0.8 - 1.5 133 - 165 4.0 - 5.6 11.8 - 14.1 98 - 117 3.1 - 5.2 131 - 178 2.9 - 3.3 3.1 - 4.9 137 - 271 11 - 17 225 - 375 354 - 583 77 - 91 10 - 35 48 - 62 11 - 28 5.8 - 18.5 12.9 - 90.8 1.12 - 4.56 0.28 - 0.46 1.7 - 2.5 0.3 - 0.8 Horse Serum トップページの

Support

プルダウンメニューから

FAQ

（テクニカル）

を選択 http://www.invitrogen.jp インビトロジェンサイトトップページの

サポート

プルダウンメニューから

製品

Q&A

を選択 http://www.appliedbiosystems.jp アプライドバイオシステムズサイト LTJ_NEXT_No4_110408.indd 11 LTJ_NEXT_No4_110408.indd 11 11.4.8 3:41:53 PM11.4.8 3:41:53 PM

(12)

「EPIGENETICS解析を簡便化する新TOOLの開発」と題した企業セミナーでUS本社R&Dより国内未発表の新手法を紹介します。信頼と実績のブランド“GIBCO®_”_{の細胞培養関連製品を中心に展示を行} いますので、ぜひお立ち寄りください。

学会展示会・セミナー

TS

フリーダイヤルのお知らせ

第

5 回

日本エピジェネティクス研究会

会期： 2011年5月19日（木）・20日（金）会場： KKRホテル熊本（熊本） http：//jse2011.umin.jp/

日本組織培養学会

第

84 回大会

会期： 2011年5月27日（金）・28日（土）会場：国立成育医療研究センター講堂（東京） http：//jtca.dokkyomed.ac.jp/JTCA/meet/y2011/ 記載価格は2011年4月現在の価格です。消費税は含まれていません。価格は予告なしに変更する場合がありますのであらかじめご了承ください。＊本文中のオーダリングインフォメーションでマークがついている製品はアプライドバイオシステムズブランド、マークはインビトロジェンブランドでお取り扱いしています。研究用にのみ使用できます。診断目的及びその手続上での使用は出来ません。記載の社名および製品名は弊社または各社の商標または登録商標です。

http://www.lifetechnologies.co.jp LFT004-A1104B 販売店〒108-0023 東京都港区芝浦4-2-8 住友不動産三田ツインビル東館 ライフテクノロジーズジャパン株式会社 http://www.appliedbiosystems.jp http://www.invitrogen.jp ウェブサイト： TEL.03（6832）9300 FAX. 03（6832）9580

ライフテクノロジーズは、2008年に Invitrogen Corporation と Applied Biosystems Inc の統合により誕生しました。馴染みのある両社の社名を

維持し、Invitrogenブランドからは高品質な試薬・消耗品を、 Applied BiosystemsブランドからはPCRやDNAシーケンシングの最新鋭の機器を含む

トータルソリューションを提供するなど、科学者の多彩なニーズにお応えしています。

ライフテクノロジーズについて

弊社テクニカルサポート部へのお問合先が統一され、ひとつの電話番号、メールアドレスで全てのライフテクノロジーズ製品についてお問合わせ頂けるようになりました！今後も迅速かつ、的確な回答に努めてまいりますのでよろしくお願い申し上げます。

セミナー・ワークショップ

ライフテクノロジーズジャパンでは最新技術のご紹介を始め、いろいろなテーマのセミナーや技術講習会を定期的に行っております。セミナー・ワークショップの最新情報・詳細・お申し込みは弊社ウェブサイトをご覧ください。

http://www.invitrogen.jp/info/workshop.shtml

インビトロジェン関連

http://www.appliedbiosystems.jp/website/jp/training/list.jsp

アプライドバイオシステムズ関連以下のクイズに正解した方から抽選で

10

名様に

Life Technologies

特製ネックストラップをプレゼントします。

Q

A

世界に誇る細胞培養製品

GIBCO

®_{ブランド。}

GIBCO

のブランド名は何に由来しているでしょうか？１．創業者の名前

2.

創業当時の会社名

3.

創業当時の本社所在地

http://www.lifetechnologies.co.jp/quiz.htm

からご応募ください。応募締め切り：

2011

年

5

月

20

日（金） ※当選者の発表は賞品の発送をもってかえさせていただきます。

クイズに答えて

Life Technologies

特製ネックストラップを当てよう！

Q U I Z

テクニカルサポートがひとつに！

全てのライフテクノロジーズ製品に関するお問合せはこちらへお客様窓口

_TEL：

0120-477-392

_FAX：

0120-477-120

jptech

＠

lifetech.com

ご案内させていただく選択肢は、ガイダンスの途中でもご選択いただけます。 3月号のクイズの正解は 1．赤色でした。

INFORMATION

http://www.appliedbiosystems.jp/website/jp/event/eventpage.jsp

学会展示会・セミナーの最新情報は LTJ_NEXT_No4_110408.indd Sec1:1 LTJ_NEXT_No4_110408.indd Sec1:1 11.4.8 3:40:58 PM11.4.8 3:40:58 PM

LTJ_NEXT_No4_ indd

CONTENTS

INFORMATION

PRODUCT REVIEW

NEW

No.4

合併号

2011

4

月

&

5

月

Life Technologies

NEXT

NEW

新製品情報

活性酸素種（

ROS

）用プローブ

CellROX™ Deep Red Reagent

特長

• ROSを検出する蛍光プローブです。

•

GFPとの相性も良い。

• これまでの試薬と異なり、ホルムアルデヒド固定後も保持します（膜の透過処理不適合）。

•

•

①試薬添加 ⇒ ②インキュベーション30分 ⇒ ③洗浄 ⇒ ④測定

•

原

理

操作手順

CellROX™

と従来品との比較

アポトーシス研究用蛍光プローブ

CellEvent™caspase-3/7 green detection

特長

• Caspase-3/7活性を検出する新規蛍光プローブ。

• ホルムアルデヒド固定と膜の透過処理後も保持されます。

•

•

①試薬添加 ⇒ ②インキュベーション30分 ⇒ ③測定

•

原

理

HeLa

細胞における

Caspase

活性データ

HeLa

細胞におけるライブセルイメージングデータ

NEW

新製品情報

IR & UV

レーザー搭載

レーザー

“キャプチャー”

マイクロダイセクション

システム

Applied Biosystems ArcturusXT

TM

レーザーキャプチャーマイクロダイセクションシステム

特長

• IR

• UV

•

LCM Cap により確実に細胞・組織をキャプチャーでき、キャプチャー後に Cap 上の

•

Applied Biosystems

ArcturusXT™レーザーキャプチャーマイクロダイセクションシステムは、マイクロダイセクション

IR）

PCR

BigDye

の最新技術

! PCR

からシーケンス解析まで

1

チューブで

BigDye

_•

_{GFPとの相性も良い。}

_{• ホルムアルデヒド固定と膜の透過処理後も保持されます。}

_{• UV}

_{LCM Cap により確実に細胞・組織をキャプチャーでき、キャプチャー後に Cap 上の}

_{ArcturusXT™レーザーキャプチャーマイクロダイセクションシステムは、マイクロダイセクション}

_{の最新技術}

_{! PCR}

_{からシーケンス解析まで}

₁

_{チューブで}

_•

_{Direct Cycle Sequencing Kit}

へそしてリシーケンシングから

_システム

_{EZ Bead}

_システム

_{• 5500シリーズSOLiDシステム・}

_{SOLiD4システムの両方のライブラリ}