難治性喘 息の発症 に関す る研究
第2編
フ ロ ー サ イ トメ ト リー に よ る 喘 息 患 者 末 梢 血 の
リ ン パ 球 サ ブ セ ッ ト ・表 面 抗 原 の 検 討
岡山大学 医学部第二 内科学教室 (指導:木 村郁郎教授)
高
田
穣
(平成4年5月25日
受 稿)
Key words:
intractable
asthma,
lymphocyte
subpopulation,
flow cytometry
緒 言 気 管 支 喘 息 に お い て リ ン パ 球 は,ア レ ル ゲ ン 特 異 的 抗 体 の 産 生 調 節 に 中 心 的 役 割 を は た して い る と考 え ら れ る が,近 年,さ ら に,剥 離 性 好 酸 球 性 気 管 支 炎 と さ れ る気 道 病 態 の 形 成 に も深 く関 わ っ て い る と考 え られ る よ うに な って き た1). す な わ ち,抗 原 を 認 識 し て 活 性 化 さ れ た リン パ 球 が, IL-3, IL-5, IL-8, GM-CSF等,様 々 な イ ン ター ロ イ キ ン を 遊 離 し,そ の 細 胞 遊 走 活 性 に よ っ て 局 所 に 炎 症 細 胞 を集 積 させ,複 雑 な 気 道 病 変 の 形 成 の 一 端 を 担 っ て い る と考 え られ る. 一 方 ,近 年 の 目覚 ま し い モ ノ ク ロ ナ ー ル 抗 体 の 開 発 やFlow cytometry (FCM)の 発 達 に よ り,活 性 化 リ ン パ 球 のmarkerや リ ン パ 球 の サ ブ セ ッ トが 詳 細 に 解 明 さ れ て い る2).こ の よ う な 末 梢 血 や 肺 局 所 リ ン パ 球 の 特 性 を 明 ら か に す る こ と に よ り,喘 息 の 免 疫 学 的 病 態 が 漸 次 解 明 さ れ て ゆ く も の と考 え ら れ る.か か る観 点 か ら, 喘 息 患 者 の 末 梢 血 リ ン パ 球 サ ブ セ ッ トに つ い て は,現 在 ま で に 様 々 な 報 告 が な さ れ て き た が, 多 くの 報 告 は 軽 症 を 対 象 と し て お り,重 症 例 に お け る特 徴 は 充 分 に 解 明 さ れ て い な い.ま た, FCMを 応 用 した 詳 細 な 検 討 は さ らに 限 られ て い る よ う に 思 わ れ,成 人 の 重 症 喘 息 病 態 に お け る 各 種 リン パ 球 の 役 割 分 担 は,い ま だ 不 明 な 点 が 多 い.そ こ で 我 々 は,種 々 の モ ノ ク ロ ー ナ ル 抗 体 を 用 い てtwo-color FCMに よ り末 梢 血 リン
Table 1 Characteristics of the patients.
* RAST and intradermal test Steroid dependency HD: house dust Asp: Aspergillus Dand: Candida albicans Pc: Penicllium JC: Japanese Cedar SVG; Sweet Vernal Grass
パ 球 の サ ブ セ ッ トを解 析 し,ま た発 作 時 との比 較 や 難 治 例 の 特 徴 に つ い て も検 討 し た の で 報 告 す る. 対 象 と 方 法 1. 対 象 対 象 に は 岡 山 大 学 医 学 部 第2内 科 外 来 を受 診 中 あ る い は 入 院 中 の 喘 息 患 者32例 (20∼69歳, 平 均46.8歳,男 性15例,女 性17例)を 選 び,健 常 人 対 照 と し て ア トピ ー 歴 が 無 く,特 に 疾 患 を 有 さ な い24例 (24∼58歳,平 均39.7歳,男 性22 例,女 性2例)を 用 い,午 前11時 ∼ 午 後2時 に 末 梢 静 派 血 を採 取 し た.な お,各 喘 息 症 例 の 特 徴 はTable 1に 示 す 如 くで,ア ト ピー 性 皮 膚 炎 を合 併 し た 症 例 は 含 ま れ て い な い. 病 型 別 検 討 は,非 難 治 群 を,吸 入 性 抗 原8種 の うち い ず れ か のIgE-RASTな い し即 時 型 皮 内 反 応 が 陽 性(14例)と 陰 性(10例)に 分 け て 検 討 し た. RAST scoreは2以 上 を 陽 性 と した. 陽 性 例 の 年 齢 は 平 均38.9歳(20∼53歳),陰 性 例 は53.2歳(31∼69歳)で あ っ た. 喘 息 の 重 症 度 別 検 討 は,病 型 判 定 以 前 に ブ レ ドニ ソ ロ ン 換 算1日5mg以 上,1年 間 以 上 ス テ ロ イ ド剤 を 全 身 投 与 して い る症 例 を ス テ ロ イ ド 依 存 性 難 治 群(4例)と し,そ れ 以 外 の 症 例 を 非 難 治 群(24例)と した.難 治 群 の 年 齢 は 平 均 50.8歳(36∼65歳)で,非 難 治 群 は 平 均44.9歳 (20∼69歳)で あ っ た.非 難 治 群 と健 常 人 の 年 齢 は ほ ぼ 一 致 し て お り,総 計 学 的 有 意 差 は 認 め ら れ な か っ た. さ ら に 発 作 時 の 検 討 は,ス テ ロ イ ド投 与 を 受 け て い な い4例 に つ い て,発 作 中 に 採 血(発 作 群)(小 発 作1例,中 発 作3例)を お こ な っ た. 発 作 群 の 年 齢 は 平 均54.0歳(47∼61歳)で あ っ た. 2. 方 法 リンパ 球 表 面 抗 原 の 解 析3)は 以 下 の 如 く行 った. 喘 息 患 者 お び 健 常 人 の 末 梢 血1.5mlをEDTA加 で 採 血 し,溶 血 誠 薬(ナ カ ラ イ 化 学 特 注)約45 mlを 加 え 穏 や か に 混 和 して5分 程 度 室 温 放 置 し, 溶 血 さ せ た.遠 沈 後(1200rpm, 5分),ぺ レ ッ
トを0.1% BSA (bovine serum albumin)と0.1 % ア ザ イ ドを加 え たPBS (PBS-BSA-ア ザ イ ド) で2回 遠 沈 洗 浄 し, 1mlのPBS-BSA-ア ザ イ ド に 浮 遊 さ せ た.こ れ を 小 試 験 管 に 分 注 し,さ ら に モ ノ ク ロ ー ナ ル 抗 体 を加 え,氷 上 暗 所 で30分 反 応 させ た.モ ノ ク ロー ナ ル 抗 体 は い ず れ もLeu シ リー ズ(Beckton-Dickinson)の もの で,蛍 光 色 素 標 識(FITCとPE)さ れ た もの を小 試 験 管 1本 に つ き各20μlず つ 使 用 した.使 用 し た 抗 体 名 と蛍 光 色 素 標 識,認 識 す る 抗 原 に つ い て は Table 2に 示 し た.な お,2種 類 の 抗 体 が そ れ ぞ れFITCとPE標 識 さ れ た も の の 混 合 を用 い た 場 合(Simultest)に は,小 誠 験 管1本 に つ き 各20μlず つ 用 い た.反 応 後,さ ら に2回 浄 して, 250μlのPBS-BSA-ア ザ イ ドに 浮 遊 さ せ,検 体 作 成 後 は 氷 上 暗 所 に 保 存 し,2時 間 以 内 にFCM 解 析 を お こ な っ た.
Flow cytometerは FACScan (Beckton-Dickinson)を 用 い,リ ン パ 球 の 分 画 に ゲ ー トを か け て 解 析 し た.コ ン ピ ュ ー タ ー の ソ フ トウ ェ ア は, IL-2 Rの 解 析 に つ い て はConsort 30を 用 い た が,他 の 表 面 抗 原 の 解 析 で は, Simulset programを 使 用 し た. な お, Anti-leucocyteとAnti-Leu-M 3抗 体 は 各 白 血 球 分 画 の 同 定 用 の 抗 体 で あ り,リ ン パ 球 の ゲ ー ト内 で 顆 粒 球 ・単 球 の 割 合 を 算 定 す る の に 用 い た.そ の 結 果 ゲ ー ト内 の リ ン パ 球 の 割 合 が95%に 満 た な い 検 体 は 対 象 か ら 除 外 し た. ま た,陰 性 対 照 と して,人 体 に 存 在 しな いkeyhole Table 2 Monoconal antibodies used in this
study.
* These mAbs were purchased as mixture of two antibodies for two-color analysis (Simultest).
limpet hemocyaninに 対 す る マ ウ ス モ ノ ク ロ ー ナ ル 抗 体 で, isotypeがIgG 1, IgG 2 aの2種 類 に そ れ ぞ れFITC・PEが 標 識 さ れ た も の を 用 い た.
FACScan flow cytometerのcalibrationと compensationに はCalibright beads (Beckton-Dickinson)とAutocomp softwareを 用 い, manualに て 多 少 の 補 正 を加 え た 上 で使 用 し た. 結 果 は す べ て ゲ ー ト内 細 胞 に お け る陽 性 率 と し て 表 した. 総 計 学 的 有 意 差 検 定 に はStudent's T testsを 用 い, p<0.05を 有 意 差 あ り と し た.
Table 3 Percentages of Iympocytes
subpopula-tions in non-intractable and intractable
asthmatic patients compared to normal
individuals.
Fig. 1 Percentages of CD2+, CD16+ and CD2+ CD16+ lymphocytes in asthmatics and normal individuals.
N; Normals
NON; Non-intractable asthmatics INT; Intractable asthmatics
結 果 ま ず,ス テ ロ イ ド非 投 与 で 発 作 の 影 響 が な い 状 態 の 非 難 治 性 喘 息 患 者 と,健 常 人 の リン パ 球 サ ブ セ ッ トとを 比 較 検 討 す る と,非 難 治 群 でCD19 が 有 意 に 低 値 で あ り(p<0.05), B細 胞 が 減 少 して い る こ と が 示 唆 さ れ た(Table 3).さ ら に, CD2・CD16の 解 析 で も,非 難 治 群 で CD2+・ CD16+・CD2+CD16+が す べ て 有 意 に 高 値 で あ っ た(p<0.05) (Figure 1). 次 に,喘 息 の 病 型 に よ る リ ン パ 球 サ ブ セ ッ ト の 違 い を 明 ら か に す る た め に,非 難 治 群 をIgE-RASTな い し 皮 内 反 応 の 陽 性 ・陰 性 群 間 で 比 較 し た と こ ろ,両 群 間 のIgE-RAST値 は 有 意 な 差 を認 め た が (p<0.01),リ ン パ 球 の 表 面 抗 原 陽 性 率 に つ い て は 全 項 目 で 有 意 差 は 認 め ら れ な か っ た.
Fig. 2 Percentages
of CD4+ CD25 (IL-2 R)+
lymphocytes
in asthmatics
and normal
individuals.
N; Normals
NON;
Non-intractable
asthmatics
INT;
Intractable
asthmatics
続 い て,ス テ ロ イ ド投 与 が 必 要 な 症 例 の 特 徴 を 明 ら か に す る た め,ス テ ロ イ ド依 存 性 難 治 群 を,非 難 治 群,及 び 健 常 人 と比 較 検 討 し た.そ の 結 果, Table 3に 示 す 如 く,ほ と ん どの 項 目 は 有 意 な差 を 認 め な か っ た が, CD2陽 性 率 は 非 難 治 群 同 様,健 常 人 に 比 し て 増 加 し て い た (p< 0.05) (Figure 1).ま た,難 治 群 で は,健 常 人 に 比 しCD4+CD25 (IL-2R)+細 胞 が 有 意 に 高 値 で あ り (p<0.01),非 難 治 群 に 比 べ て も有 意 差 は な か っ た が,高 値 の 傾 向 を 示 し た(Figure 2). 次 に,発 作 時 の リン パ 球 の 関 与 を 検 討 す る た め,ス テ ロ イ ド剤 の 全 身 投 与 を受 け て い な い 症 例 の 発 作 中 に 採 血 し た 発 作 群 と,非 難 治 群 と を 比 較 し た.そ の 結 果,発 作 群 でCD4+CD25 (IL-2 R)+細 胞 が 有 意 に 高 値 で あ っ た (p<0.05) (Figure 2). 考 察 喘 息 の 発 症 機 序 は, IgE− 肥 満 細 胞 − ヒス タ ミ ン の 反 応 系 の み な ら ず,リ ン パ 球 を は じめ と す る 多 彩 な 炎 症 細 胞 の 集 大 成 で 成 り立 つ こ と が 近 年 次 第 に 明 ら か に さ れ つ つ あ る.そ こ で 我 々 は, リ ン パ 球 が 発 症 病 態 の 中 心 的 役 割 を な し て い る と 考 え られ つ つ あ る 成 人 喘 息 患 者 に お け る リ ン パ 球 の サ ブ セ ッ トの 特 徴 を 明 らか に す る 目的 で, 各 病 型 別 ・重 症 度 別 ・発 作 の 有 無 な ど に つ き, 健 常 人 を 対 照 と し てFCMを 用 い て 解 析 を 加 え た.そ の 結 果,喘 息 患 者 に お け るB細 胞 の 減 少, Tγ 細 胞 (CD2+CD16+)の 増 加,難 治 症 例 や 発 作 時 に お け るCD4+CD25 (IL-2 R)+細 胞 の 増 加 な どが 判 明 し た. ま ず,喘 息 患 者 と健 常 人 と を比 較 す る上 で, 今 回 は ス テ ロ イ ド全 身 投 与 さ れ て い な い 症 例 を 選 び,非 発 作 時 に 採 血 し,健 常 人 対 照 と年 齢 を ほ ぼ 一 致 さ せ,で き る だ け サ ブ セ ッ トに 影 響 を 与 え る 因 子 を 除 去 して 解 析 し た.そ の 結 果, CD4/ CD8比 な ど,一 般 の リン パ 球 サ プ セ ッ トに 有 意 な 相 違 を 見 い だ し得 な か っ た が, B細 胞 の 有 意 な 減 少 が 検 出 さ れ た. 気 管 支 喘 息 の ま ず 第 一 の 免 疫 学 的 特 徴 は, IgE 抗 体 に 代 表 さ れ る ア レ ル ゲ ン 特 異 的 抗 体 の 産 生 で あ ろ う.そ れ に 従 っ て,ア ト ピ ー 性 あ る い は 外 因 性 喘 息 と い わ れ る 病 型 分 類 が な さ れ て い る が,他 方,非 ア ト ピ− 性 あ る い は 内 因 性 と い わ れ る病 型 の 存 在 も広 く認 め ら れ て い る4) 5).同 じ 喘 息 で も, IgEの 産 生 調 節 に お い て 両 病 型 は 何 らか の 相 違 が あ る と考 え られ,気 道 に お け る 反 応 病 態 に も両 者 の 違 いが 指 摘 され て い る6) 7) 8) 9). 以 前 の 報 告 で,喘 息 患 者 で は サ プ レ ッサ ー 機 能 を 担 う と さ れ て い るCD8陽 性 細 胞 が 減 少 し,特 異 的IgE体 産 生 亢 進 機 序 を 示 唆 す る と した もの が あ る が10),変 化 を 認 め な い と す る 報 告 も あ る11) 12).ま た,病 型 間 で 比 較 し て 内 因 型 でCD8 が 減 少 し て い た とす る 報 告 や13) 14),な ん ら変 化 は な か っ た とす る 報 告 もあ り15),一定 の 見 解 が な い の が 現 状 で あ ろ う. 今 回 の 検 討 で は,他 の 報 告 で み ら れ た よ う な CD8陽 性 細 胞 の 変 化 は,喘 息 と健 常 人 との 比 較 で も,病 態 の 違 い に よ る 比 較 で も認 め ら れ な か っ た.こ れ は, IgE産 生 調 節 の 違 い は 今 回 測 定 し た サ ブ セ ッ トに は 反 映 さ れ て い な い た め か,あ る い は,末 梢 血 の リ ン パ 球 はIgE産 生 調 節 に は あ ま り関 与 し て い な い 可 能 性 が 考 え ら れ る.ま た,外 因 型 と内 因 型 の 比 較 の さ い に,両 群 間 に は 多 くの 場 合 年 齢 の 違 い が 存 在 す る た め,病 態 の 違 い か,年 齢 の 違 い に よ る 差 異 を 見 て い る の か,解 釈 の う え で 注 意 が 必 要 と思 わ れ る.特 に, CD4/8比 は 加 齢 と と も に 上 昇 す る と 言 わ れ て お り16),い くつ か の 報 告 に お け る 内 因 型 喘 息 で の CD8の 減 少 は,年 齢 の 影 響 に よ る可 能 性 も あ り, い ま だ 確 立 し た 所 見 とは 言 い 難 い と考 え られ る. 次 に, CD16陽 性 で あ る こ とか らNK細 胞 を 主 体 と す る と 考 え ら れ る17)Tγ 細 胞(CD2+ CD16+)の 解 析 も お こ な っ た と こ ろ,健 常 人 に 比 べ て 喘 息 患 者 に お い てCD2+・CD16+・CD2+ CD16+の い ず れ も 増 加 して い る こ とが 窺 わ れ た. CD2はT細 胞 とNK細 胞 上 に 発 現 して お り, T細 胞 ・NK細 胞 ・B細 胞 の 三 者 で リ ン パ 球 の ほ と ん ど を 占め て い る こ と,ま た, CD3に つ い て は 増 減 が み ら れ な か っ た こ と を 考 え あ わ せ る と,こ れ らの 結 果 は 喘 息 患 者 に お け るNK細 胞 の 増 加, B細 胞 の 減 少 とい う一 連 の 変 化 を 示 す も の と考 え ら れ,我 々 のFCMに よ る 算 定 が 正 確 に 行 わ れ て い る事 の 証 左 で も あ ろ う.な お,喘 息 患 者 で はNK活 性 が 亢 進 して い る との 報 告 もあ り18),
我 々 の 結 果 はNK細 胞 数(率)の 算 定 で は あ る が,一 致 し た 所 見 と考 え ら れ る,ま た, B細 胞 の 減 少 に つ い て は,そ の 意 義 は 不 明 で あ るが, あ る い はNK細 胞 の 増 加 に よ る二 次 的 な 減 少 と も考 え ら れ る. 一 方,重 症 の ア ト ピー 性 疾 患 で はTγ 細 胞 は 減 少 し て お り,減 感 作 療 法 に て 正 常 に 回 復 す る と の 報 告 が 見 られ る19) 20).今 回,我 々 が 用 い た 対 象 は ア トピ ー 性 皮 膚 炎 の な い 症 例 で あ り,む し ろ ア トピ ー 素 因 の 弱 い 症 例 が 多 く,ま た,減 感 作 療 法 を 受 け て い た 患 者 は3例 しか 含 ま れ て お ら ず,結 果 の 不 一 致 は 対 象 の 違 い に よ る もの と 考 え て 良 い と思 わ れ る.さ ら に,吸 入 誘 発 試 験 の 即 時 ・遅 発 相 で 末 梢 血 のNK活 性 が 上 昇 す る とい う報 告 が あ り21) 22),近 年NK細 胞 か らの 様 々 なサ イ トカ イ ン の 遊 離 が 示 さ れ て い る23) 24)ことな ど も併 せ て 考 え れ ば, NK細 胞 の 気 道 反 応 に お け る役 割 が 示 唆 さ れ よ う.た だ し,気 管 支 肺 胞 洗 浄 液 の リ ンパ 球 の 表 面 抗 原 解 析 に よ れ ば,気 道 に は ほ とん どNK細 胞 は 存 在 しな い との 報 告 もあ り25),喘 息 に お け るNK細 胞 の 関 与 に つ い て は,さ ら に 明 らか に さ れ るべ き点 が 多 く残 さ れ て い る. 次 に,重 症 度 に よ る リン パ 球 サ ブ セ ッ トの 特 徴 を検 討 す る 目 的 で,ス テ ロ イ ド依 存 性 難 治 群 を 非 難 治 群,健 常 人 と 比 較 した.そ の 結 果,難 治 群 で は 健 常 人 に 比 べ, CD2の 陽 性 率 が 高 か っ た が,こ れ は 非 依 存 症 例 と共 通 し た 所 見 で あ っ た. ま た,難 治 症 例 で は 健 常 人 よ りIL-2レ セ プ タ ー 陽 性 率 が 上 昇 し,さ ら に 非 依 存 症 例 に 比 べ て も IL-2R陽 性 率 が 増 加 す る傾 向 に あ っ た.こ れ は, 難 治 症 例 で は リン パ 球 の 活 性 化 が お こ っ て お り, 従 っ て リ ン パ 球 の 関 与 が よ り大 き い こ と を示 す も の と考 え ら れ た. 最 後 に,発 作 時 と非 発 作 時 で の 比 較 を 行 っ た と こ ろ,発 作 に よ りIL-2レ セ プ タ ー 陽 性 細 胞 の 増 加 が 認 め ら れ,リ ンパ 球 が 活 性 化 さ れ て い る 所 見 と考 え ら れ た. Kayら は 喘 息 重 積 状 態 の 患 者 の リ ン パ 球 表 面 抗 原 解 析 を お こ な い, IL-2R・ HLA-DR・VLAな ど の 活 性 化 抗 原 が 強 く発 現 し て い た と報 告 して お り26),今 回 の 結 果 とほ ぼ 一 致 して い た,し か し,我 々 の 解 析 で はHLA-DR の 変 化 は 認 め ら れ な か っ た が,こ れ は 今 回 の 対
象 症例 の発 作 が,小 な い し中発 作 ま で であ った
ため か も しれ ない.ま た,健 常 人 に くらべ 喘 息
患 者 は,非 発 作 時 に採 血 して もIL-2レ セ ブ タ−
陽 性 細 胞 が増加 して い る との報 告 もあ るが14),
我 々 の検 討 では 非発 作 時 の 喘 息患 者 と健 常 人 の
IL-2R陽 性 率 に は差 は認 め られ なか った.こ の
違 い の理 由 は不 明 で あ るが,い ず れ にせ よ 喘息
の 病 態 に おけ る活性 化 リンパ球 の関 与 は 疑 い の
ない 所 見 と言 え よ う.
一 方
,発 作 症 例 のCD4/CD8比
は 非発 作 に 比べ
て特 に差 は認 め られ ず,他 の グルー プ の報 告 で
も同様 の結 果 で あ る26).吸 入 誘 発後 の末 梢 血 で
CD4+細 胞 の 減 少 を認 め た報告 や27),即時 型 気道
反 応 後の気 道 でCD8+細
胞の 増加 を認め た報 告28)
な ど, CD4+な い しCD8+細
胞 が気 道 反 応 を 惹起
あ るい は調 節 して い る事 が考 え られ るが,今 回
検 討 した発作 では有 意 なCD4/CD8比
の変化 は検
出で きず,こ れ は各 症 例 の発 作 が 様 々 な 気道 反
応 の 混在 状 態 で あ るこ とを示 して い るの か も し
れ ない.
以 上,喘 息 患 者 リンパ 球 サ ブ セ ッ トの解 析 を
通 じて,そ の 免 疫学 的特 徴 の い くつ か を明 らか
にす るこ とが で きた.今 後 は肺 局 所 の リン パ球
の表 面抗 原や,発 現 して い るT細 胞 レセ プ ター
の特 徴 を明 らか に す るこ とな どの検 討 が 必要 と
考 え られ る.
結
論
リンパ球 が成 人 喘 息 の発 症病 態 の 中心 的役 割
を成 す こ とが 想 定 され て い るため,そ の リンパ
球 の サ ブ セ ッ トの特 徴 を明 らか にす る 目的 で,
喘息 患 者 を対 象 に,各 病 型 別 ・重 症 度 別 ・発作
の有 無 な どにつ き,健 常 人 を対照 と して 解析 し
た.
1. ステ ロイ ドに依 存 しな い非 難 治群 では,健
常 人 に比 して, B細 胞 の減 少 と, NK細
胞 を主
体 としたTγ 細 胞 の増 加 が 見 られ た.か か るNK
細胞 の 喘 息病 態 への 関与 の 可能 性 が想 定 された.
2. IgE-RAST値
な い し皮 膚 反 応 陽性 ・陰 性 群
間 で は, IgE産 生 能 は 明 らか に異 な るに もか か
わ らず,サ ブセ ッ トの違 いは 認 め られ なか った .
3. 発 作 群,難 治 群 に お い てはIL-2R+細
胞 が高
値 で あ っ た。 喘 息の 難 治 化 とか発 作 の病 態 に活
性 化 リンパ 球 の 関与 が示 唆 され た.
稿 を終 えるにあた り,御 指導な らびに御校 閲 を賜
った岡山大学 医学部 第二内科学教室木村郁 郎教 授に
深甚 の謝 意 を表 し ます.ま た,直 接 御 指 導 い た だ い た高 橋 清 講 師 に 深 謝 い た します. な お,本 論 文 の 要 旨 は,第30回 日本 胸 部 疾 患 学会 総 会(1990年,東 京)に て 発 表 した.文
献
1) Rochester CL, Rankin JA: Editorials:
Is Asthma T-cell Mediated?
Am Rev Resp Dis (1991) 144,
1005-1007.
2) Leucocyte
Typing IV.
White Cell Differentiation
antigens.
Knapp,
Dorken,
Gilks,
Rieber,
Schmidt,
Stein and von dem Borne eds, Oxford University
Press, Oxford (1989)
3) Monoclonal
Antibody Source Book.
Beckton Dickinson Immunocytometry
Systems.
4) Rackeman
FM: A working classification
of asthma.
Am J Med (1947) 3, 60.
5) Swineford O
Jr: Asthma:
Classification
of Causes.
J Allergy (1954) 25, 151-167.
6) 木 村 郁 郎:喘 息 の 病 型 とその 本 質 論 − 中 高 年 発 症 型 難 治 性 喘 息 の独 立性.日 胸 疾 会 誌 (1983) 21, 181-182.
7) Kimura I, Tanizaki Y, Saito S and Takahashi
K: Differences in response to anti-Ig
E and to anti-I
g G in basophils from patients with bronchial asthma.
Clin allergy (1981) 11, 31-36.
8) 木 村 郁 郎:遅 発 ア レ ル ギ ー の 発 症 機 序 − 細 胞 反 応 を 中 心 に −:第3回 免 疫 薬 理 シ ン ポ ジ ウ ム 記 録 集,富 岡 玖 夫 編,デ ー ・エ ム ベ ー ・ジ ャ パ ン,東 京 (1985) pp 23-40.
9) Kimura I, Takahashi K, Tada S, Takeda M, Eda R, Miyagawa H, Ogurusu K, Kanehiro A, Kimura G: Studies on the mechanisms of steroid dependent intractable asthma. -With reference to type III and type IV allergy-; in advances in Asthmology, Kobayashi and Bellanti eds, Elsevier Science Publishers B. V., Amsterdam (1991) pp 431-436.
10) Kus J, Tse KS, Vedal S, Chan-Yeung M: Lymphocyte sub-populations in patients with allergic and non-allergic asthma. Clin allergy (1985) 15, 523-529.
11) Schuyler M, Gerblich A, Urda G: Atopic asthma: T lymphocyte subpopulations. Clin allergy (1985) 15, 131-138.
12) Matsumoto T, Takahashi H, Miike T: Increase of T cells bearing FcƒÃ R-associated antigen in patients with atopic asthma. Ann Allergy (1987) 58, 261-264.
13) Bruijinzeel PL, Hamelink ML, Prins K, Remmert G, Meyling FHJG: Blood lymphocyte subpopula-tions in extrinsic and intrinsic asthma. Ann allergy (1987) 58, 179-182.
14) Walker C, Virchow JC Jr, Bruijinzeel P LB, Blaser K: T cell subsets and their soluble products regulate eosinophilia in allergic and nonallergic asthma. J Immunol (1991) 146, 1829-1835.
15) Kochman S, Bernard J, Cazabat A, Lavaud F, Lorton C, Liehn J C: Double pheno-typing of immuno-regulatory T cell subsets in patients with allergic asthma. Clin Allergy (1987) 17, 579-588. 16) Moody CE, Innes JB, Staiao-Coico L, Incefy GS, Thaler HT, Weksler ME: Lymphocyte
transformation induced by autologous cells. XI. The effect of age on the autologous mixed lymphocyte reaction.
Immunology (1981) 44, 431-437.
17) Perussia B, Acuto O, Terhorst C, Faust J, Lazarus R, Fanning V, Trinchieri G: Human natural killer cells analyzed by B 73.1, a monoclonal antibody blocking Fc receptor functions. J Immunol (1983) 130, 2142-2148.
85-90.
19) Canonica GW, Mingari MC, Melioli G, Colombatti M, Moretta L: Imbalances of T cell subpopula-tions in patients with atopic disease and effect of specific immunotherapy. J Immunol (1976) 123, 2669-2672.
20) Thompson LF, Mellon MH, Zeiger RS, Spiegelberg HL: Characterization with monoclonal antibodies of T lymphocytes bearing Fc receptors for I g E (TƒÃ cells) and I g G (TƒÁ cells) in atopic patients. J Immunol (1983) 131, 2772-2776.
21) Vesterinen E, Timonen T: Natural killer cell activity in specific and non-specific bronchial chal-lenge. Ann Allergy (1988) 60, 247-249.
22) Jira M, Antosova E, Vondra V, Strejcek J, Mazakova H, Prazakova J: Natural killer and interleukin-2 induced cytotoxicity in asthmatics. Allergy (1988) 43, 294-298.
23) Anegon I, Cuturi MC, Trinchieri G, Perussia B: Interaction of Fc receptor (CD 16) ligands induces tracscription of interleukin 2 receptor (CD 25) and lymphokine genes and expression of their products in human natural killer cells.
J Exp Med (1988) 67, 452-472.
24) Cuturi MC, Anegon I, Sherman F, Loudon R, Clark SC, Perussia B, Trinchieri G: Production of hematopoietic colonystimulating factors by human natural killer cells. J Exp Med (1989) 69, 569
-583 .
25) 田 村 尚 亮,篠 原 直 樹,山 田 充 宏:気 管 支 肺 胞 洗 浄 液(BALF)中 リ ン パ 球 のtwo color分 析. Med Immunol (1985) 10, 531-536.
