目 次
はじめに
. . . . .独立行政法人国立病院機構 北海道がんセンター臨床検査科病理主任 平 紀代美
Ⅰ ...Liquid-based.cytology（LBC）とは
. . . . .1
Ⅱ ...体腔液検体処理方法
. . . . .1
Ⅲ ...固定液の違いによる標本の違い
（BD.サイトリッチ ™.レッド保存液 or.BD.サイトリッチ ™.ブルー保存液）. . . . .2
Ⅳ ...BD.サイトリッチ ™.レッド保存液による thin-layer 標本の細胞所見の特徴
. . . . .4
Ⅴ ...LBC 標本と conventional 標本による細胞診判定結果の差異
. . . . .5
Ⅵ ...LBC 法採用の留意点
. . . . .5
Plate 1 NORMAL/BENIGN . . . 6Plate 2 NORMAL/BENIGN - Washing - . . . 7
Plate 3 LUNG CANCER adenocarcinoma . . . 8
Plate 4 LUNG CANCER adenocarcinoma . . . 9
Plate 5 LUNG CANCER squamous cell carcinoma . . . . 10
Plate 6 LUNG CAMCER small cell carcinoma . . . 11
Plate 7 LUNG CANCER pleomorphic carcinoma . . . . 12
Plate 8 BREAST CANCER invasive ductal carcinoma . . . . 13
Plate 9 BREAST CANCER invasive ductal carcinoma . . . . 14
Plate 10 BREAST CANCER invasive lobular carcinoma . . . . 15
Plate 11 BREAST CANCER mucinous carcinoma . . . . 16
Plate 12 ESOPHAGEAL CANCER squamous cell carcinoma . . . . 17
Plate 13 ESOPHAGEAL CANCER squamous cell carcinoma . . . . 18
Plate 14 THYROID CANCER papillary carcinoma . . . . 19
Plate 15 THYMIC CANCER squamous cell carcinoma . . . . 20
Plate 16 MALIGNANT MESOTHELIOMA . . . . 21
Plate 17 GASTRIC CANCER adenocarcinoma . . . . 22
Plate 18 GASTRIC CANCER signet ring cell carcinoma . . . . 23
Plate 19 GASTRIC CANCER poorly differentiated adenocarcinoma . . . . 24
Plate 20 COLON CANCER adenocarcinoma . . . . 25
Plate 21 COLON CANCER adenocarcinoma (mucinous) . . . . 26
Plate 22 PANCREATIC CANCER adenocarcinoma . . . . 27
Plate 23 PANCREATIC CANCER adenocarcinoma . . . . 28
Plate 24 PANCREATIC CANCER adenocarcinoma . . . . 29
Plate 25 GALL BLADDER CANCER adenocarcinoma . . . . 30
Plate 26 UTERINE CERVICAL CANCER squamous cell carcinoma . . . . 31
Plate 27 UTERINE CERVICAL CANCER serous adenocarcinoma . . . . 32
Plate 28 UTERINE CORPUS CANCER endometrioid adenocarcinoma . . . . 33
Plate 29 UTERINE CORPUS CANCER clear cell adenocarcinoma . . . . 34
Plate 30 OVARIAN CANCER clear cell adenocarcinoma . . . . 35
Plate 31 FALLOPIAN TUBE CANCER serous adenocarcinoma . . . . 36
Plate 32 CARCINOMA OF THE PERITONEUM serous adenocarcinoma . . . . 37
Plate 33 URINARY BLADDER CANCER urothelial carcinoma . . . . 38
Plate 34 URINARY BLADDER CANCER urothelial carcinoma (micropapillary variant) . . . . 39
Plate 35 CARCINOMA OF THE KIDNY renal cell carcinoma . . . . 40
Plate 36 NON-EPITHELIAL TUMOR neuroblastoma . . . . 41
Plate 37 NON-EPITHELIAL TUMOR Ewing sarcoma . . . . 42
Plate 38 NON-EPITHELIAL TUMOR malignant rhabdoid tumor . . . . 43
Plate 39 NON-EPITHELIAL TUMOR rhabdomyosarcoma . . . . 44
Plate 40 NON-EPITHELIAL TUMOR malignant melanoma . . . . 45
Plate 41 TUMOR OF HEMATOLYMPHOID SYSTEM acute myeloid leukemia . . . . 46
Plate 42 TUMOR OF HEMATOLYMPHOID SYSTEM diffuse large B-cell lymphoma . . . . 47
1
Ⅰ. Liquid-based cytology（LBC）とは
conventional 標本 引きガラス塗抹法の引き止まり位置の 4 か所に腫瘍細胞集塊がみられる LBC 標本 直径 13mm の塗抹範囲に多数の腫瘍細胞がみられる（腫瘍細胞集塊のみにポイン トされており、散在性の腫瘍細胞はさらに多くみられている） 写真 1：腹水（PLATE.24 症例）Ⅱ.
体腔液検体処理方法
ることがわかる。 しかし、BD サイトリッチ ™ レッド保存液により固定さ れた細胞は Giemsa 染色には適しておらず、lymphoma な どの血液系疾患の腫瘍細胞の出現が予想される場合では、 conventional 法による Giemsa 染色標本と併用して診断する ことが必要となる。 Liquid-based cytology（LBC）とは、採取した細胞を一度、 液体（固定・保存液）中に浮遊させて均一化した状態からス ライドガラスに塗抹する方法を総称している。LBC は効率よ く細胞を収集することのできる方法であり、婦人科検体をは じめ多くの検体に利用することが可能である。また、固定液 や塗抹原理などの違いにより幾つかの方法が開発されており、 米国の FDA の承認を得て広く使用されているものから本邦で 開発された方法などがあり、それぞれの特徴がみられる。 BD 社には非婦人科検体用の方法として、婦人科検体を対 象とした BD シュアパス ™ 法と塗抹原理は同一であるが、異 なった固定液である BD サイトリッチ ™ 保存液を使用し thin-layer 標本を作製する方法が用意されており、尿、腫瘍穿刺針 洗浄液、擦過ブラシ洗浄液、その他の液状検体に LBC 標本を 作製することができるようになっている。塗抹の原理は、細 胞とスライドガラスの荷電によるとされており、詳細は BD 社 の説明書を参照されたい。 体腔液細胞診は古くから行われており、体腔穿刺液の他 に最近では術中採取の洗浄液としても多く提出されるように なってきている。体腔液は蛋白濃度が高いため、尿検体と比 較するとアルコールによる湿性固定時の細胞脱落が少ないも のの、出血性の検体が多いために多数の赤血球が腫瘍細胞 の収集の妨げとなることがしばしば経験される。この体腔液 に、優れた溶血能を有する BD サイトリッチ ™ レッド保存液 を用いて thin-layer 標本を作製することにより、効率が良く かつ精度の高い診断が可能となる。写真 1 は同一検体の LBC 標本と引きガラス法により塗抹された conventional 標本の Papanicolaou 染色標本であり、それぞれに腫瘍細胞にマーク されているが、LBC 標本では多くの腫瘍細胞が塗抹されてい LBC 法は効率よく細胞を収集することのできる方法ではあ るが、検体処理の方法に、その効力を発揮できるか否かがか かっている。特に出血性の検体が多い体腔液ではその処理方 法により収集される細胞数が極端に異なり、処理方法を誤る と conventional 標本より少ない細胞しか塗抹されないという 事態も起こり得る。基本的にはBD 社のマニュアルに準じるが、 ここでは、特に高度の出血性検体の処理法を紹介する。 ○高度出血性検体の処理方法 = 二重溶血法 = 高度の出血性の検体は、沈渣に BD サイトリッチ ™ レッド 保存液を加えそのまま放置するとゲル化してしまうため、そ の後に遠心操作をしても細胞は収集できない。これを避ける ためには、１次の溶血操作をした後に直ちに遠心し、上清を 捨てて再び BD サイトリッチ ™ レッド保存液を加えて２次溶血 を行うことを我々は推奨する。この二重溶血法によりきれい に溶血が完了し、多数の細胞が収集できる。その手順を図 1 に示す。 また高度出血性検体に限らず、体腔液検体は腫瘍細 胞の由来（原発巣）などの解析のために免疫染色などが必要 となることがあるため、《手順》6 . の残り検体の保存は後の検 索に有用である。conventional
LBC
1b.
核小体有する活動性中皮細胞集塊とその周囲にリンパ球、上部に macrophage を 2 個認める。 （Pap . × 40）
1e.
活動性中皮細胞（1b と同一検体）。細胞がやや収縮ぎみになるため、胞体が厚ぼったくなり集塊の細胞間隙が開いてみえる。 （Pap . × 40）
1a.
中皮細胞と macrophage 上 , 下（左）： 2 個の中皮細胞の間にいわゆる “mesothelial window” がみられる（矢印）。 （Pap . × 40） 下（右）： 中皮細胞の胞体が強い好塩基性に染まっている。 （MGG × 40）1d.
中皮細胞と macrophage（1a と同一検体） 上： LBC 標本では胞体にやや重厚感がみられ、中央 3 個 の中皮細胞の辺縁に “bleb” がみられる。 下： 2 個の中皮細胞の間に “mesothelial window” がみら れる（矢印）。 （Pap . × 40）Plate 1 NORMAL/BENIGN
16
conventional
LBC
11a.
多染性（orange/brown 〜 green）に染まる多量の粘液 の背景に集塊状と散在性の腫瘍細胞が観察される。 （Pap . × 10）11d.
LBC では上皮性の粘液は Light green に染色されること が多いが、本症例では強い Orange G 好性を示している。 厚い粘液内に取り込まれている細胞は染色性が悪く観察 しづらい。 （Pap . × 10）11b.
多染性の粘液に絡まるように、胞体内に粘液を有してい る腫瘍細胞がみられる。 （Pap . × 40）11e.
LBC ではエタノール主体の固定液で固定されてから塗抹 されるため、粘液も収縮気味となり厚ぼったくみられる。 （Pap . × 40）11f.
乳頭状の集塊も少数だがみられる。 （Pap . × 40）11c.
背景と胞体内に PAS 染色で強い陽性を示す粘液がみら れる。 （PAS × 40）conventional
LBC
26a.
上： spindle な 細 胞 が み ら れ る。体 腔 液 中 の 細 胞 は adenocarcinoma との鑑別が難しい場合が多く、本 例のように spindle な細胞が出現することは少ない （Plate12,13 参照）。下： 濃染核（indian ink 状）を有する spindle cell。
（Pap . × 40）
