実 経時的推移 関す 験的研究 小腸移植 後 移植片対 宿 病 球分画 主 け

4 2 0

金 沢 大学 十 全 医 学 会 雑 誌 第

^{1 0 5}

巻 第

³

号

^{4 2 0}

‑

^{4 26}

(

1 9 9 6

)

ラ

ッ

ト小 腸 移植

後

^の移 植 片対

宿

主

病

^{に お} ける リ ^{ン パ} 球 分 画^の 経 時 的推 移^に 関す^る

実

験 的研 究

金沢 大 学 医 学 部 医 学 科外 科 学 第^二講 座 (

主

任^: 宮 崎 速 夫教 授)

井 ^上 哲 也

小腸 移 植後早 期^に起^こ

る

移 植片 対 宿

主

病 (gr a

f

trv e r s u s‑

^h

^{o st}

^di

^{s e a s e,}

^{G V H D}

^{) の際の}

^リ

^{ン パ球 動 態の経 時 的変 化}

^を

^明

^{ら か}

にす

る

こ

と を 目

的^に, ラッ

t

^一方 向性 移 植 実 験 群

を

用^い

て

, 移 植 直 後,

3

,

7

,

1 0

,

1 4 日

目^の移 植 片 中^の腸 間膜

リ

ン パ節, 宿 主^の腸 間膜

^リ

^{ン パ}節, 脾 臓 内^の

^リ

^ンパ球 分 画^の変 化,

イ

ンタ ^{ー ロ}

イ キ

ン

2

(

ⁱ

^{nte r}

^l

^{e u}

^ki

ⁿ

²

,

I L

‑

²

) 受 容 体^の発 現^の変 化

を

検 討

し た

^.

そ

の結 果,

3 日 目

に

は

脾 臓^への

リ

^ンパ球の浸 潤

が

認

め ら れ

, 移 植 片 中の腸 間 膜

リ

^{ン パ}節, 宿 主の腸 間 膜

リ

^{ン パ}節, 脾 臓 内

の いず

れ

に

お

^{い て}も

Ⅰし 2

受 容 体 陽 性 細 胞

ほ 3 日

目 以 降 増 加

し た

. 宿

主

^の腸 間 膜

リ

ン パ 節

と

脾 臓 内で

は 3 日 目

に

O K T

4/

O K T 8

比

^が

^一

^旦

有 意^に

^上

昇

^し

,

7 日 目 に

低 下

^{し た}

^. 移 植 片 中^の腸 間膜

^リ

^ンパ節

で ほ 3 日 目

に

O K T 4

細胞

^は

^一過 性^に減 少

し

,

O K T 4

/

^{O K T 8}

比

は 3 日 目

に有 意^に低 下

し た

^. 以

上 よ り

,

G V H D

発症^に先

立 ち

, 宿

主

内^に

お

い

て は 3 日 冒

^に

は

移植 片

か ら

移 行

し た リ

ン パ球の宿 主 抗 原^の認識

^が

優 位^に

^{な り}

,

3 日 目

以 降^に, 宿 主 抗 原^の認識

^が

優 位^であ

^る

誘 導相

^{か ら}

宿

^主

臓 器^に対す

^る

攻 撃

^が

優 位 セ あ

る

効 果 相^への移 行

^が

起^こって い

る

も^の

と

考

え ら れ た

^.

ま た

,

3 日

目^に

は

^{ヘルパ ー}

T

細胞

が

選 択 的

に

移植 片

か ら

宿 主 内

へ遁 走

し て

い

る

も^の

と

考

え ら れ た

^.

Ke

y

^{w o r}ds

g

^{r a}f

t

^‑V e r S u S^‑ho s

t

dis e a s e_,1

_y

m

p

hoc

y t

^{e s u}bs e

t

, S m all bo w el

t

rans

p

lan

t

a

t

ion

小腸 移 植^{l) に}

お

い て

ほ

, 移 植 片 中^の

リ

^{ン パ}組 織^に含

ま れ る

移 植 片 由来^の

^リ

^{ン パ}球

^が

宿 主^の皮膚

^や

肝 臓等

^を

標 的 臓 紫

^{と し て}

障 害 す

る

移 植 片 対宿 主 病 (gr a

f

t‑V e r S u S^‑

h

o st

d i

s e a s e,

G V H D

)

が

発 症 す

る 可

能 性

が

あ

る

^2)a). 急 性

G V H D で は

移 植 片 由 来^{の ヘ ル}

パ ^ー

T

細 胞

^が

宿 主^の主 要 組 織 適 合 遺 伝 子 複 合 体 (^{m a}j^{o r}

hi

stc or npat

ib ili

_{t y c o mp}

l

e x,

M H C

) ^{ク ラ ス}

Ⅱ

抗 原

を

認 識

し

,

さ ら

に細胞 障害 性

丁

細 胞

が

活 性 化

さ れ

, 標 的 細胞

を

攻 撃 す

る

^こ

と

に

よ

っ

て

臓 器 障 害

^が

起^こ

る と

考

え ら れ て

^い

る

.

G V H D は

^一

旦

発 症す

る と

致 命 的

と な る た め

,

そ

^の予防^の

た め

に免 疫 抑 制 剤

や

抗

リ

ン パ球 抗 体^の投 与

^が

試

^{み ら れ}

^{て い}

^る

^{4 )}

^が

, 抗

^リ

^{ン パ}球 抗 体

の効果 的

な

投 与 時 期^の決定

を 可

能にす

る た め

に

は

移 植 片

を

含

め た

宿

主

内^の免 疫学 的

な

変 化

を 正

確^に把 握 す

る 必

要

が

あ

る

^.

M

a s uta n

i ら

^{5 )}

ほ

, ラ ッ り^､腸 移 植 後^の

^{G V H D}

発 症 後^の肝 臓

に浸潤

し た

リン パ球^の分画

を

明

ら か

^に

し た が

,

G V H D

発 症 前 後^の宿 主

お よ び

移 植 片の免 疫 阻織に

お

け

る リ

ン パ球 分 画^の経 時 的 推移

^ほ

未

だ

明

ら か で は な

^い.

そ

^こ

で

, 移植 腸 管

か ら

宿

主

の

リ

ン パ系 組 織^への

リ

ン パ球^の移 行

と

, 宿

主 と

移植 片^の

リ

ンパ系 組 織^に

^お

け

る リ

ン パ球 分 画^の変 化

^を

明

ら か

^にす

^る

^こ

と を 目

的

^に

,

ラッ

ト

の小 腸 移植 後^の

^{G V H D}

^の際^の宿

主

の膵 臓

と

腸 間 膜

リ

^ン

パ節,

な ら び

^に移植 片^の腸 間 膜

リ

ン パ節 内^の

リ

ン パ球 分 画^の推 移

^を

検 討

^{L た}

^.

材 料 お よ び方 法

Ⅰ

. 実 験 動 物

の

作 成

体重

2 5 0

^〜

3 0 0

g の雄 性^ル

イ

^ス系ラッ

ト を

臓 器 提 供ラッ

ト と

し

, 同条 件^{の ル}

イ

^{ス ×}

ブ

ラ

ウ

^{ン ･} ノ ル

ウ

^{ェ ー} 第

1

世代 雑 種

を

被 移 植^ラッ

^ト

( 宿

^主

)

^{と し}

^て

^用

^い

^た

^. 臓 器 提 供^ラッ

ト と

宿

^主

^ラッ ト

は 24

時 間^の絶 食^の後^に, ベ ン ト パ ル

ビ

タ^ー ル

4 0

mg/

^k

g の腹 腔 内 注射

に よ る

全 身 麻 酔 下^に開腹

し

, 移 植 手術

ほ

手 術

用

顕 微鏡 下

に実施

^した

^.

1

^. 臓

器

提 供^{ラ ッ}

ト

手 術

上

腸 間膜 動 脈 根 部^の

^上

下の大動 脈 ( 腹 腔 動 脈

^{か ら}

左 腎 動 脈

^ま で

)

を

動 脈 茎, 肝 門 部

ま で

^の門脈

を

静 脈 茎

と し

て ∴空 腸 起 始 部

か ら 回

腸 末 端

ま で

^の小 腸

を

移 植 片

と して

切 離

^{し た}

^. 移 植 片

は

腹 部 大 動脈 内^に刺

入 し た

注 射針

よ り 1 0

m

l

の ^ヘ パリ ン加 冷 生

理

食 塩 水

を

緩 徐^に注

入 し て

濯 流

し た

後 摘 出

し た

^. 移植 片摘 出 後^に臓

器

授供^{ラ ッ}

^{ト は}

麻 酔 薬^の過 量 投与^に

よ り

犠牲

死 さ せ た

^.

2

^. 宿

主

^ラ ッ ト手 術

M

o n c

h ik

^‑

R

u s s e

l

法^7)に準

じた

異 所 性

全

小腸 移 植

を

施 行

した

^. す

^{な わ ち}

, 移 植 片^の大 動 脈

^は

中 枢 側

^を

結 致

^し

, 末 梢 側

^を

宿

^主

ラッ ト の腹 部 大 動 脈 ( 左 腎 動脈^の末 梢)^に端 側^に吻 合

し

, 門脈

は

下 大 静脈 ( 左 腎 静 脈の末 梢) ^に端 側

^に

吻合

^した

^. 移 植 腸 管^{の 口}側 端

^は

結 染 閉鎖

^し

, 肛 門 側 端

は

右腹 壁^に縫 合

し て

腸 痩

^{と し た}

^. 閉 腹 後, 術 直 後^の水 分 補 給^の

目

的^で背 部 皮 下^に生 理 食 塩 水

2 0

m

l を

注

^{入 し た}

^.

^{ま た}

, 手 術^に伴 う感 染 症^の予 防^の

目

的^に術 直後^に

セ フ _ォ

キ

シ テ ^ソ

1 2

^.

5

m g

を

筋 注

し た

^.

3

^. 術 後 管 理

移植 後

2 4

時 間

^ほ

水 分^の

み を

経^口投 与

し

,

そ れ

以 降

^は

術 前

^と

同 様^の固形 飼 料

を

与

え

, 移 植手 術 終 了 直 後,

3 日 目

,

7 日

目,

10

日

目,

Ⅰ4 日 日

に犠 牲 死

^{さ せ た}

^.

平 成8 年³ 月^{8 日}受 付, 平 成8 年⁴月^{2 2 日}受 理

A b br e via

t

io n s : G V H D,

g

^raf

t

^‑V e r SuS^‑ho s

t

dis eas e

;

H P F, hi

_g

h

p

^{o w e r} field

;

Ⅰし2,in

t

e rle ukin 2

_;

M H C, m aj^{o r} his

t

c o m

p

^a

t

ibili

_{t y}

co m

p

lex

Ⅱ

^. 評 価項

目 1

. 組 織標 本^の作 成

大動脆

^か

ら^の採

血

^に

よ り

脱

血

死

さ せ た

後, 直

ち

^に宿

主

の腸 間 膜

^リ

^{ン パ}節

と

脾 胤

^{お よ び}

移 植 片^の腸 間膜

^リ

^{ン パ}節

を

摘 出

し

,

リ

ンパ節

ほ

単 離

し

, 脾 臓

は

約

3

m m の厚

さ

に ス ラ

イ

^ス

し

て

0 ℃

の アセトンに

て

す

み や か

^に固 定

し た

. 約

^{1 2}

時 間^の固 定^の後,

A M E X

液^{8)に て}処

理 し

, 免疫組 織 染 色

お よ び H E

染 色

に

供

し た

^.

2

^. 組 織標 本^の染色

ラッ

ト

の

リ

^{ン パ}球表 面 抗 原に対 す

る

モ ノ ク ^{ロ ー} ナ ル抗 体

で

あ

る W 3

/

^{2 5 と 0 Ⅹ8}

⁽

^S

^{e r ote c,}

^O

^x

^f

^{o r}

^d

^,

^E

ⁿg

l

a n

d

)^{g )}

^{な ら び}

^に抗

^イ

^ン

タ^{〜 ロ}

イ キ

^ン

2

(

ⁱ

^{nte r}

^l

^{e u}

^ki

ⁿ

²

,

I L

^‑

2

) 受 容 体 抗 体 (

^{P h}

^{a r}

^{m i}

ⁿg^{e n,}

S

a n

D i

eg^o,

U

^.

S

^.

A

)^.

を

用^い

て

, 酵素 抗 体 法^{8 )に}

よ り

免 疫 覿織 染 色

を

行っ

た

.

3

^. 脾 臓 内

リ

^ンパ球 分 画

脾臓組 織

^は

眼 科用 尖

刀 に て

細 切

した

後,

5

恥^{m の ステ ン レ ス}

メッシ ュ

を

通

^し

^て細 胞

を

単 離

^し

,

リ

ソ酸 緩 衝 食 塩 水

で

十 分に洗 浄

し

^て試 料

と し た

^. 肺 臓 内^の全

リ

^{ン パ}球

に

対 す

る W 3

/

^{1 3}

,

W 3

/

25 と 0 Ⅹ8

陽性 細 胞^の比 率

^を

, フ ロ ^ー サ

イ ト

メ

ト リ

^ー

F A C S

c a n(

B

e cto n

D i

c

ki

n s o n,

S

a nJo s e,

U

^.

S

^,

A

^,) ^{に て}測定

した

^.

4

^. 脾 重量^の評価

以下^の式

^{に し た が}

^っ

^て

相 対脾重 量^川)

を

算 出

した

.

相 対 脾 重量 ⁼(脾 重量/体 重) ^×

1 0 0

5

. 脾 臓^の阻 織 学 的変 化

以 下^の評価 基 準^に従^い脾 臓^の組 織 学 的 変 化

^を

評 価

^{し た}

( 図

目

E⁼

0

, 変 化

な し ; 1 十

, 赤 脾髄^に

リ

ン パ球浸 潤

を

認

め る

も

リ

ン パ濾 胞^の構 造

は

保

た れ

て い

る : 2 +

,

1 +

と

3 +

の中 間

; 3 +

, リン パ濾 胞

^ほ

破 壊

さ れ

,

そ

^の構 造

^を

認

め な

い.

6

^. 組織 標 本^の

リ

ン パ球 比 率^の測 定

光 学 顕 微鏡

^を

用い て, 脾 臓^の赤 脾 髄, 腸 間膜

^リ

^{ン パ}節の傍 皮 質 領 域^に

お

け

る

抗

^{W 3}

/

^{25 と}

抗

0 Ⅹ8

,

な ら び

^に抗

Ⅰし 2

受 容 体 染 色 陽 性細 胞 数

を 4 0 0

倍拡 大 時^{の 一}視 野 あ

^{た り}

^で計 測

^し

,

さ ら

に抗

^{0 Ⅹ8}

染 色 陽 性 細 胞数

^に

対す

る

抗

W 3

/

^{2 5}

染 色 陽性 細 胞 数^の 比 率

^を

計 算

し た

^.

Ⅲ

∴統計 学 的 検 討

牌 臓^の艇 織 学 的 評 価^に関

し て は

中 央 値

で

表

し

,

M

a n n‑

W hi

tn ey の

U

検 定

を

用い て比 較

^した

^.

^{そ れ}

以外

^ほ

す^{べ て}平 均 値

^±

標 準偏 差

^で

表

^し

, 測 定値^の比 較

ほ S

^tu

d

_{e nt の i}検 定

を

用^い

た

^.

成 績

Ⅰ

^. 肉眼 的 変 化

G V H D は

移 植 後

⁷

^〜

9 日 目

に皮 膚^の発 赤

と し

て発 症

し た

^. 体 重

は1 0 日 目 よ り

減 少

し

,

1 4 日

目

に は

術 前^の

8 1

%

と な

っ

た

.

‡

. 皮膚

の

顕 微鏡 所 見

移植 後

7 日 目 に 上

皮 層^への

リ

^{ン パ}球 浸 潤

を

認

め

,

1 0 日 冒

^に

ほ

Fi

_g･

1

^･

H i

sto

l

og

i

c a

l

c

h

a nge s o

f

sp

l

e e n e x a

m i

n e

d

u s

i

ng t

h

e

f

o

1l

o

w i

ng gr a

d i n

g syste m^･ (

A

)

G

r a

d

e

O

^.

N

o c

h

a nge s^. (

^B

)

^G

^{r a}

^d

^e

^l

^十.

R

e

d

pu

l

p

i

s

i n fil

tr ate

d b

y

l

ymp

h

o cy te s,

b

ut

l

ym p

h f

o

lli

c u

l

e s a r e

i

nta ct･ (

^C

)

G

r a

d

e

2

^+･

I

nte r m e

di

ate

b

etw e e n

l

^･ a n

d 3

^十. (

^D

)

G

r a

d

e

3

^+･

L

ymp

h f

o

lli

c u

l

e s a r e

di

s ap p^{e r e}

d

^.

H E

sta

i

n x

4 0

.

4 2 2

著 明

と

なっ

た

( 固

2

)^.

Ⅲ

. 脾重 量

^の

変 化

相 対脾 重量

ほ

移 植 直 後

か ら1 0 日 目 ま で

経 時 的^に有 意^に増 加

し た

( 図

3

).

Ⅳ

^. 牌 臓

の

組 織 学 的 変 化

3 日 冒

^で

ほ

赤 脾 髄^への

リ

^{ン パ}球 浸 潤

が 主 な

所 見

で

あ

り

,

7 日 日 に は

リン パ濾 胞^の破 壊

^が

明

ら か と な

っ

た

( 図

⁴

)^.

Ⅴ

^. 牌 臓 組 織 内

リ ン パ

球 分画

脾 臓組 織 内^に

お

け

る T リ

ン パ球^の全

リ

ン パ球^に対 す

る

比 率

ほ 7 日 目

に

ほ

移 植 終 了 直 後

お よ び 3 日 目

に比

^{し て}

有 意

に 上

昇

し

,

そ れ

以 降

ほ

高値

が

持 続

し た

^. 各

リ

^{ン パ}球 分 画

で

埠^,

^{0 Ⅹ8}

^陽 性

リ

ン パ球^の比 率

^{ほ 3 日}

冒^に有 意

^に

減 少

^した

後,

7 日

目^に

^{ほ 3} 日

目

^に

比

して

有 意

に 上

昇

し た

^.

W 3

/

^{2 5}

^{陽 性}

^リ

^ンパ球の比 率

^は 1 4 日

目

に は

移 植 直 後

に

比

し

^て有 意

に 上

昇

し た

.

W 3

/

^{2 5}

^{陽 性}

^リ

ン パ球^の

^{0 Ⅹ8}

陽 性

^リ

^{ン パ}球^に対 す

^る

比率

ほ 3 日 日 に は

^一

旦

有 意

に 上

昇

し

,

7 日 冒 に ほ

再

び

低 下

した

(蓑

1

)^.

Ⅵ

. 宿 主

の

腸 間 膜

リ ン パ

節

^{の リ ン パ}

球分 画

宿

主

^の腸 間 膜

^リ

^ンパ節^の傍皮 質 領 域^の強 拡 大 ^一視 野 あ

た り

の

W 3

/

^{2 5}

陽 性 細 胞 数

は 3 日

目

で

有 意^に増 加

し

, 以後

^は

^{高 値}

^が

持 続

^{し た}

^{. 一} 方,

0 Ⅹ8

陽 性細 胞数

^は

移 植 直後^に比

し て 3 日

目^で有 意^に増 加

し

,

7 日

冒^に

は さ ら

に

3 日

目^に比

し

て有 意

な

増 加

を 示 した

.

W 3

/

^{2 5}

^{陽性 細 胞 数の}

^{0 Ⅹ8}

^{陽 性細 胞 数に}対 す

^る

比 率

^は

移 植 直 後^に比

して 3 日

目

^に

^一

旦

有 意^に

上

昇

した

後,

7 日

目に

は

移 植 直 後

お よ び 3 日

目

に

比

し

有意

に

低 下

し た

( 衰

2

).

F i

g^･

2

･

M i

c r o s c op

i

c v

i

e w o

f

t

h

e s

k i

n. (

^A

)

^I

^{m m e}

^di

^ate

^l

y

(

^d

^ay

O

) ^a

^f

^{te r s m a}

^{ll b}

^{o w e}

^l

^{tr a n s}p

l

a ntat

i

o n (

^{H E}

^sta

ⁱ

^{n X}

^{l O O}

)^. (

^B

)

O

n t

h

e

l O

t

h d

ay^. a

f

te r s m

a l 1 b

o we

l

tr a n sp

l

a ntat

i

o n.

L

ym p

h

o cy te

i

n

fi

tr at

i

o n to t

h

e ep

i

t

h

e

li a l 1

aye r

i

s s e e n (

^{H E}

Sta

i

n x

l O O

)^.

上

Ⅶ

^. 移 植 片

の

腸 間 膜

リ ン パ

節

の リ ン パ

球 分画

移 植 片^の腸 間膜^{リン パ}節の傍 皮質 領 域^の強拡 大^一 視 野 あ

た り

の

W 3

/

^{2 5}

陽 性細 胞 数

は 3 日 目

^に有 意^に減 少

^{し た}

後,

7 日 目

に

は

移 植 直 後

お よ び 3 日 目

に比

^{し て}

有 意^に増 加

し た

^.

0 Ⅹ8

陽性 細 胞 数

は

移 植 直 後

と 3 日 目

^に

は

差

を

認

め な か

っ

た が

,

7 日 冒

に

有 意

に

増 加

し た

･

Ⅵ巧

/

^{2 5}

陽 性細 胞 数^の

^{0 Ⅹ8}

陽 性細 胞 数に対す

る

比 率

^ほ

移 植 直 後^に比

し て 3 日 冒

に

は

^一

旦

有 意^に低 下

し

,

7 日 目

^に

は 3 日 冒

^に比

し

有意^に増 加

した (

表

3

)^.

Ⅶ

･ 牌 胤 腸 間膜

リ ン パ

節

に

お

け る Ⅰ し

² 受 容 体 陽性 細胞数

の

推 移

脾 臓^の赤 肝髄^の強 拡 大^一視 野 あ

^{た り}

^の

^{I L}

‑

²

受 容 体 陽性 細胞 数

ほ 7 日

目

ま で

有意 な増 加

を

続 け

た

^. 宿

主

の腸 間膜

^リ

^{ン パ}節の

傍 皮 質 領 域^の強 拡大 ^一視 野 あ

た り

^の

Ⅰし 2

受 容 体 陽性 細 胞数

ほ

,

3 日 日

に

は

移 植 直後^に比

し て

増 加 傾 向

を

認

^め

,

7 日 冒

に

は

移植 直 後

お よ び 3 日

目に比

し

有 意^に増 加

し

,

1 0 日 目 ま で

増 加傾向

^を

l

鳥

.

石

き

U

￠

￠

l

d

s

空

電

叩

一

む

∝

0

凸 0

6 1

0

0

4

2 0

0

0 3 7 1 0 1 4

P

o s

t

op^{e r a}

^ti

^{v e}

^d

^ay

F i

_g^･･

3

^･

C h

a ng^{e s}

i

n r e

l

at

i

v e w e

i

g

h

t o

f

sp

l

e e n^.

R

e

l

at

i

v e O rga n W e

i

_g

h

t_,(o rga n w e

i

g

h

t/

^b

^o

^d

y w e

i

g

h

t) ^×

^{1 0 0}

^.

E

^{a c}

h b

a r r epr e s e nts

支 士S D i

n e a c

h

po stope r at

i

v e

d

ay^{, *},

p

< 0

^.

0 5

, * *

,p <

0

^.

01 S

tu

d

e nt^'_s t te st.

ひ

ぎ 空〇

一

票

あ

0

ちl S

三

‑

0

聖

8

S

0 3 7 1 0 1 4

P o st op ^{e r a}tiv e d ay

F i

g^･

4

･

C h

a nge s o

f

t

h

e m e

di

a n s c o r e s o

f h i

sto

l

og

i

c a

l

c

h

a nge

i

n t

h

e sp

l

e e n･

E

a c

h b

a r r epr e s e nts m e

di

a n s c o r e^･ * *,

p

< 0

^･

01 M

a n n^‑

W hi

tn ey

U

te st^.

T

a

bl

e

･

¹

^･

^S

^u

^b

^{s et o}

^{f l}

^ymp

^h

^{o cy te s}

ⁱ

^{n t}

^h

^{e sp}

^l

^{e e n o}

^f

^t

^h

^{e r e c}

ⁱ

^p

ⁱ

^{e nt}

P

o st_ope^rat

i

v e

d

ay

R

at

i

o(

^%

) ^o

^f

t

h

^e c e

11

s

i

n a

l1 1

ymp

h

o cy t^{e s}

W 3

/

^{1 3}

^‑pO S

i

t

i

v e

W 3

/

^{2 5}

‑^pOS

ⁱ

^t

ⁱ

^{v e}

^{O X 8}

^‑PO Si t

i

v e

W 3

/

^{2 5}

/

○Ⅹ8

r at

i

o

0 3 7 1 0 1 4

6 4

^･

3 ± 6

^･

5 49

･

5 ±1 3

･

1 2 8

^.

8 士6

^.

0 1

^.

8 3 士0

^.

7 9 6 3

.

1 ± 9

.

8 5 4

^.

4 士9

^.

6 1 1

.

5 ±2

.

1

^…

即

^.

0 士5

^.

2

^*柵

5 6

.

0 士1 3

.

5 3 5

^.

3 士7

^.

6

^廿

8 4

.

9 ± 9

.

5 5 4

.

5 ±1 0

^.

1 3 9

^.

5 ±1 4

^.

6 9 2

^.

9 士3

^.

6 7 2

^.

2 ±6

^.

0 2 4

.

9 士3

.

5

5

.

01 士2

^.

0 6

^*

1

^.

71 土0

^.

7 5 1

.

5 7 士0

.

7 8 2

^.

98 士0

^.

6 9

Va

l

u e s ar e exp^re s s ed

真

土

S D f

r om

fi

v e r ats o n e a c

h

po stoperat

i

ve day^.

*p <

0

･

0

5 v s･

d

ay

O

･

* *

p <

0

･

0 1

v s^･

d

ay

O

･ +

p <

0

^･

0 5

v s^･ day

3

】

甘p <

0

･

01

vs･

d

ay

3

.

T

a

bl

e

2

^･

S

u

b

s et o

f l

_ymp

h

o cy te s

i

n

fil

trate

d i

n pa r a c o rte x o

f

t

h

e m e s e nter

i

_c

l

_ymp

h

_{n o}

d

e o

f

t

h

e r e c IP

i

e nt

P

o stop^{e r a}t

i

v e

d

ay

N

u mber of t he cel ls p^{e r} H P

F

^l)

W 3

/

^{2 5}

^‑PO S

i

t

i

v e

O X 8

^‑PO S

i

t

i

v e

W 3

/

25

/

○Ⅹ8

r at

i

o

0 3 7 1 0 1 4

8 7

.

2 士 26

.

9 9 0

^.

2 士 20

^.

3 2 8 2

^.

0 ±3 8

^.

3

⁼

1 7 2

.

8 土 21

.

4

⁼

1 7 7

.

6 士3 8

.

6

^{* +}

2 9 5

^.

4 土 48

^.

6

^叫+

2 4 9

^.

6

^±

6 8

^.

6 2 9 1

^.

0 土 45

.

1

^≠

1 78

^.

4

^±

2 0

^.

3

^十

1 8 6

.

4 士1 3

^.

6

0

^‑

9 7 ±0

.

2 2 1

.

6 7 士0

.

4 0

^*

0

^.

6 1 士0

^.

1 2

^{* +}

0

.

8 5 士0

.

1 5

⁺

0

^.

9 6 士0

^.

1 4 V

a

l

ues a re e xpr e s s e

d 真

土

S D f

r o m

fi

v e r ats o n e a c

h

po stope r at

i

v e

d

ay^.

t〉

H i

_g

h

_{po w e r}

fi

e

ld

(^×

4 0 0

)^.

*

p <

0

^‑

0 5

v s･

d

ay

O

･

* *p

< 0

^･

01

v s^･

d

ay

O

･ +

p

< 0

^･

0 5

v s^･

d

ay

3

,

≠p

< 0

･

01

v s.

d

ay

3

.

T

a

bl

e

3

･

S

u

b

s et o

f l

_ym p

h

o cy t^{e s}

i

n

fil

tr ate

d i

n pa r a c o rte x o

f

t

h

e m e s e nte r

i

c

l

y^mp

h

n o

d

e o

f

t

h

e g^ra

f

t

P

o stope r at

i

v e

d

ay

N

u m

b

er o

f

t

h

e c e

11

s pe r

H P F

^&】

W 3

/

^{2 5}

^‑PO S

i

t

i

v e

O X 8

‑P^{O S}

i

t

i

v e

W 3

/

^{2 5}

/

^{O X 8}

rat

i

o

0 3 7 1 0 1 4

8 7

^.

2 士2 6

^.

9 9 0

^.

2

±

2 0

^.

3 5 6

^.

4 ±1 3

.

9

^*

9 7

.

8 ±1 5

.

2 1 9 9

.

8 ±6 3

.

9

^{* *≠}

1 4 5

^.

2 土3 8

^.

8

^{* +}

1 9 7

^.

6 ±8 6

^.

3

⁺

1 4 4

.

4 士2 0

.

8

⁺

1 30

.

2 士6 4

.

3

⁺

1 6 9

.

6

±

1 9

^.

4

^≠

0

.

9 7

±

0

.

2 2 0

.

5 9 ±0

^.

1 6

⁼

1

^.

4 5

土

0

^.

5 9

⁺

1

‑

3 4 ±0

.

4 4

^廿

0

^.

98

士

0

^.

1 6

^≠

V a l

u e s a r e e xpr e s s e

d 豆

士

S D f

ro m

fi

v e r ats o n eac

h

po stop^{e r a}t

i

v e

d

_ay.

‑)

H i

g

h

po we r

fi

e

ld

(^×

^{4 0 0}

)^.

*

p

< 0

^･

0 5

v s^･

d

ay

O

･

* *

p

< 0

^･

01

v s^･

d

ay

O

,

+

p <

0

･

0 5

v s･

d

ay

3

,

≠

p

< 0

.

01

v s.

d

ay

3

^,

T

a

bl

e

4

^･

N

u m

b

e r o

f I L

^‑

2

r e c ep to r p^{o s}

i

t

i

v e c e

ll

s

P

o stope r at

i

v e

d

ay

N

u m

b

e r o

f

t

h

e c e

ll

s pe r

H P F

^■)

S

_p

l

_{e e n}

N

at

i

v e

M L N

^b)

G

r a

f

t

M L N

0 3 7 1 0 1 4

2 6

^.

8 士5

^.

5 6 6

^.

3 士2 6

^.

8 8 8

^.

0 ±28

^.

2

^{* *}

1 3 6

.

0 土3 4

.

8

^*

1 5 8

.

8 ±2 7

.

4

^榊≠

1 9 4

^.

0 土3 5

^.

5

^*柵

1 7 8

^.

3 士25

^.

9 1 6 8

^.

0 ±3 0

^.

2 1 5 9

.

0 士1 6

.

3 1 3 2

.

0 ±2 0

.

5

66

^.

3 士2 6

^.

8 1 33

.

0 士7 8

.

0

^{* *}

2 64

^.

0 士2 9

^.

9

^{* *州}

31 6

^.

0 士65

^.

4 2 65

.

0 ± 3 4

.

8 V a l

u e s a r e e xpr e s s e

d 真 土S D f

r o m s

i

x r ats o n e a c

h

po stope r at

i

v e

d

ay^.

可

H i

g

h

po w e r

fi

e

l d

(^×

^{4 00}

),

b)

M

e s e nte r

i

c

l

ymp

h

n o

d

e.

*

p

< 0

^.

0 5

v s^.

d

ay

O

.

* *

p

< 0

^.

01

v s^.

d

ay

O

, 十

p <

0

^.

0 5

v s^.

d

ay

3

,

≠p

< 0

^.

01

v s^,

d

ay

3

^.