136 （35） 氏名（生年月日） 本 籍
学位の種類
学位授与の番号 学位授与の日付 学位授与の要件学位論文題目
論文審査委員
オオ バ ヨシ ト大庭義人（昭和2
医学博士 乙第961号 昭和63年10月21日 学位規則第5条第2項該当（博士の学位論文提出者） ラット骨芽細胞（ROS 17／2）におけるインスリン様成長因子（IGF・1）の意義 （主査）教授 鎮目 和夫 （副査）教授 平田 幸正，教授 笠島 武論 文 内 容 の 要 旨
目的 インスリン様成長因子（IGF－1）が骨端軟骨に対して ばかりでなく，骨芽細胞の機能にも影響を及ぼし得る ことは以前より示唆されてきた．しかし，その作用機 序については不明の点が多く，骨芽細胞自体にIGF・1 受容体が存在するか否かについても確証は得られてい ない，そこで，成熟骨芽細胞のモデルとして知られる ラット骨芽細胞株（ROS 17／2）を用いてIGF－1の骨芽 細胞に対する直接作用につき，以下の検討を行った． また，最近IGF－1が肝臓以外の臓器でも産生され，そ の局所において作用することが明らかにされつつある が，骨芽細胞においても同様の現象が認め得るかにつ いても検討を加えた． 方法 〔1251〕IGF－1を用いた結合実験にてROS 17／2にお けるIGF－1の特異的結合を確認したのち，標識IGF－1 とクロスリンクした受容体を電気泳動し，そのオート ラジオグラフィーにより，この細胞に存在するIGF・1 受容体の分子量を決定した．ついでIGRIのROS 17／ 2の増殖及び分化機能に対する影響を検討した．IGF・1 の作用の指標としては細胞増殖とサイミジンのDNA への取り込み，また非代謝性の合成アミノ酸であるα アミノイソブチル酸（AIB）の取り込み，及びアルカリ ホスファターゼ活性の誘導を用いた．また，ROS 17／ 2自身の産生するIGF－1様因子を検出する為に， IGF－1 に対するラジオイムノアッセイ（RIA），ラジオレセプ ターアッセイ（RRA），及びヒト線維芽細胞のDNA合 成を指標としたバイオアッセイを用いた．この内因性 IGF－1の物理化学的性状を明らかにするためゲル濾過 と等電点電気泳動をおこない，その分子量と等電点を 求めた．またこの物質の分泌制御機構を明らかにする 為，種々の生理活性物質をROS 17／2に投与し，培養上 清中のIGF－1様免疫活性を測定した． 結果及び考案 ROS 17／2にはIGF－1に特異的な受容体が存在した． その受容体の分子量は130Kであった．その存在に対 応して，IGF・1はこの細胞の増殖とDNA合成を促進 し，また〔3H〕AIBの取り込みを促進した．しかし， 骨芽細胞の分化度の指標のひとつであるアルカリホス ファターゼ活性はIGF－1により誘導されなかった．ま たROS 17／2はそれ自身IGF－1様因子を分泌してお り，RIF， RRA，バイオアッセイのいずれの測定法を もちいても検出可能であった．この内因性IGF－1の分 子量は30，000前後であり，等電点は6。7であった．この 物質の分泌は成長ホルモンやPTHにより影響されな いが，活性型ビタミンDである1，25（OH）2D3により容 量依存性に促進された．以上より，内因性のIGF－1様 因子がROS 17／2の増殖及び分化に関与しており，こ の物質が1，25（OH）2D3の作用のメディエイターのひと つであることが示唆された． 結語 ROS 17／2は内因性のIGF－1様因子により，自身の増 殖と分化を制御している可能性がある．またこの因子 の産生は活性型ビタミンDにより促進される． 一1026一137
論 文 審 査 の 要 旨
本論文は，ラット骨芽細胞株を用いて，骨芽細胞はIGFIに対する受容体を有し，また骨芽細胞自身が内因 性のIGF－1様因子を産生し，自身の増殖と分化を制御している可能性を示し，更にIGF－1様因子の産生は，活 性型ビタミンDにより促進されることを示したもので，医学上価値あるものと認める． 主論文公表誌 ラット骨芽細胞（ROS 17／2）におけるインスリン様 成長因子（IGF－1）の意義 東京女子医科大学雑誌 第58巻 第7号 637～649頁（昭和63年7月25日発行） 副論文公表誌1） Identi丘cation and initial characterization of transforming growth factor－like mitogen （s）in human anterior pituitary（ヒト下垂
体前葉における形質転換成長因子様活性の存
在とその性質）
Biochem Biophys Res Commun 133（3）
951～957 （1985）
2）Trilodothyronine binding immunoglobulin in aeuthyroid man without apparent thyrold disease； its properties and effects on triiodothyronine metabolism（甲状腺機能正
常者におけるT3結合免疫グロブリンの性質
とそのT3代謝への影響）
Acta Endocrinol 108（3）498～503（1985）
3）Thyroid－stimulating antibody bioassay using porcine thyroid ceUs cultured in follicles（ブ
タ甲状腺濾胞を用いた甲状腺刺激抗体のバイ
オアッセイ）
JCIin Endocrinol Metab 61（6）1105～1111 （1985）
4）Biological activities of human growth hor－ mone and its derivatives estimated by
measuring DNA synthesis in Nb2 rat lymphoma cells（Nb2ラットリンパ腫細胞の DNA合成を指標に測定したヒト成長ホルモ
ンとその誘導体の生物活性）
Acta Endocrinol 114 283～291（1987）
5）Interaction of insulin－like growth factor I with porcine thyroid cells cultured in
monolayer（ブタ甲状腺細胞の単層培養系に
対するインスリン様成長因子の効果）
Endocrinology 121（2）749～756（1987）
