試験法
2016
度
光照射 密着法
適用範囲
本試験法 光 当 抗菌力 生 光触媒抗菌加工製品 以 光触媒製品 い
う 及び光触媒 抗菌性金属 ッ 抗菌加工製品 以 ッ 製
品 いう 抗菌力試験 適用 本試験法 試験試料 接種 菌液
偏 い う 滑 表面 持 被覆 密着性 良
い板 ッ 抗菌力試験 適 方法 あ
本試験法 適用 試験試料 材 材質 ッ チ
ッ 塗料 親水性 撥水性 問わ い 吸水性 無い 望 い
本試験法 内 光照射条件 区 及び ッ 製品 扱い 関
参考試験法
試験菌
2.1 試験菌株
(1) Staphylococcus aureus NBRC 12732 (ATCC 6538P)
(2) Escherichia coli NBRC 3972 (ATCC 8739)
2.2 試験菌 保
菌株保 機関 入手 保 菌株 普通寒天 地 斜面 地 移植 温度37み1℃
48 時間 養 5 10℃ 冷蔵保 保 効期間 間 以内
継代 養 継代回数 10回
試験 準備
試験 用い 薬品 器具等 特 指定 い 日本工業規格 規定 び
日本薬局方 規定 用い
3.1 器具 機器 び材料
(1) ッ 牛乳 ッ び10ml以 注可能 ッ
(2) 恒温器 み1℃以内 精度 遀転可能 機種
(3) 滅菌 内径80㎜ 100㎜ 高 15㎜ 25㎜
(4) 被覆 滅菌処理 密度 エチ ン 厚 30 50μｍ 無
銀等無機抗菌 使用 製品 光照射 抗菌力 向 抗菌加工製品
ッ 製品 酸化亜鉛 単一 物質 光触媒機能 暗所 抗菌機能
併 持 抗菌 使用 製品 本試験法 ッ 製品
本試験法 試験 接種 菌液 被覆 乗 いう簡単 操作 撥水性
材質 試験 菌液 均一 確実 接触 材質 適用
応用範囲 広い試験方法 あ 試験 表面 大 い 被覆
密着 い場合 適用 い
試験成立条件 場合 被 い 試験 行 い
試験成立条件 場合 吸水性 試験試料 適用可
陰性菌 大腸菌 陽性菌 黄色 ウ球菌 選択
養 用い 地 乾燥度合い 菌 薬 感 性 影響 地 調製
直 使用 い場合 5 10℃ 温度 保 調整 1ヶ 以 過 地 用い
い
本試験法 用い 被覆 紫外線透過率 び酸素透過係数 大 い あ
望 い 例え 被覆 チュ 旭化成製LDPE γ線照射 チ
菌的 40み2㎜角 大 作
(5) 敷 微生物検査用 市販 い ッ 400 型用 袋
180㎜×300 ㎜×0.09 ㎜ 無菌的 50mm 角以 大
作
(6) 光照射装置 条件 応 白色蛍光灯 ッ 蛍光 ン 使用
光照射条件 照度あ い 紫外線強度 規定 光源 力 本数 規
定 い
(7) 紫外線強度計 測定波長域310 400nm
(8) 照度計 JIS C-1609
-1993
規定
3.2 地等
(1)普通 ン 地 NB 地
肉エ 3.0ｇ ン 10.0ｇ 塩化 ウ 5.0ｇ 精製水 1,000ml pH 7.0 7.2
(2)普通寒天 地 NA 地
NB 地(1) 肉エ 2.0g 寒天 1.5%添加
(3)標準寒天 地 SA 地
酵母エ 2.5ｇ ン 5.0ｇ コ 1.0ｇ 寒天 15.0ｇ 精製水 1,000ml pH 7.1み0.1
(4) SCDLP 地
ン製 ン 17.0ｇ 大豆製 ン 3.0ｇ 塩化 ウ 5.0ｇ ン酸一水素 ウ 2.5ｇ コ 2.5ｇ チン 1.0ｇ 80 7.0ｇ 精製水 1,000 ml pH 6.8 7.2
(5)エタ 純度99％以
(6) ン酸緩衝生理食塩水
KH2PO4 34g 精製水500ml 溶解 1N NaOH pH7.2 調整 精製水 加え
1,000ml 液1.25ml 生理食塩水 0.85％NaCl 800倍 希釈 1,000ml
JIS C-7601-1989
光源色 白色 規定 蛍光灯
定期的 校正 紫外線強度計 用い 一般的 紫外線強度計 測定
波長域 び感度 微妙 違う 測定値 一致 い 多い 特 状
試験試料
抗菌力試験 対象 試験試料 原則 製品 製品 形
状 違 い 同 加工方法 作 抗菌力 同等 結果 判断
試験試料 い
試験方法
5.1 試験菌 養
(1)試験菌 NA 地 移植 温度37み1℃ 16 24時間 養 前々 養
(2) (1) 前々 養 試験菌 NA 地 白金耳移植 温度37み1℃ 16 20時間
養 前 養
5.2 接種用菌液 調製
NB 地 滅菌精製水 500倍 希釈 pH 7.0み0.2 調製 1 500 NB 地
前 養 菌 均一 散 一定 菌数 調製 接種用菌液
5.3 試験 調製
標準 50み2㎜角 厚 10㎜以内 試験試料 用意 必要 応 試験
試料 全面 エタ 染 込 局方 脱脂綿 軽 2 3回拭い 乾燥
ッ 蛍光 ン 12時間以 紫外線照射 行い 室温 冷
前 養 液体 養 行 う 接種用菌液 液体 地成 混入 試験結果 影響 及
可能性 あ 前 養 NA 地
養 用い 地 乾燥度合 菌 薬 感 性 影響 原則 地
調製 24時間以内 使用
前 養 使用 菌 限 前々 養 5 10℃ 冷蔵保 3日以内 使用
い
前々 養 び前 養 斜面 地 行う
pH調整 滅菌 pH 変動 範囲 外 場合 ン酸緩衝液 KH2PO4 34g 精
製水500ml 溶解 1N NaOH pH7.2 調整 精製水 加え 1,000ml 液1.25ml 精製水 800倍 希釈 1,000ml 用い 希釈 い
塩酸 水酸化 ウ pH 7.0み0.2 調製 滅菌 使用
密着法 同 菌 散液 1 500 NB 地 用い 菌 散液 1 500 NB 地 希釈倍率 小 い 用い 良い 場合 試験結果 希釈倍
率 記載 菌数 試験成立条件 う 調製
乾熱滅菌 高 蒸気滅菌 滅菌滅菌 滅菌処理 行 試験 変質 抗
菌力 影響 い 判断 場合 試験 エタ 清拭 油 汚
除去 滅菌処理 行 紫外線照射 い 陶磁器 う 多孔質
材料 コン ッ や ン う 多孔質材料 い Bacillus属 胞子
生残 い あ 試験 エタ 清拭 油 汚 除去
乾熱滅菌 160 180℃ 120 以 行う 行う 陶磁器 ウ ウ
ッ 金属 ン い 同様 処理 行う 望 い
試験 厚 支 入 厚 10㎜以内
試験 大 面積 同 あ 長方形 差 支え い 標準 試験
面積 1 4 小 い 製品 標準 試験 面積 い場
合 試験 大 試験結果 記載 対照 敷 面積 試
験 面積 あわ
紫外線照射 試験 表面 付着 い 機物等 汚 解 試験 表面 状態 再現
性あ 安定 状態 行う ッ 蛍光 ン 20ﾜｯﾄ形 FL20S･BLB
各2 個 N=2 ×2菌種×2条件 暗条件 明条件 計8個用意
光触媒抗菌試験
ッ 製品 評価 場合 無加工試験 光触媒 抗菌性金属 使
用 い い試料 各2個 N=2 ×2菌種×1条件 暗条件 計4個用意
5.4 試験操作
(1) 暗条件対照区
滅菌 4個 2個×2菌種 用意 置い 敷
接種用菌液 0.4ml 接種 被覆 被 遮光 20
25℃ 保 暗条件
(2) 明条件対照区
滅菌 4個 2個×2菌種 用意 置い 敷
接種用菌液 0.4ml 接種 被覆 被 表 参考
光照射 20 25℃ 保 明条件
射 必要 い 考え 試験 い 本操作 省略 い
保 容器自身 滅菌可 場合 保 中 滅菌 蓋 使用 良い
試験 大 標準 い場合 接種菌液量 被覆 面積比 案
試験 当 接種 菌数 面積 小 接種菌液量 少
標準 試験 場合 同様 1.0 5.0×10
5
う 規定 菌液量
接種 親水性 非常 高い試料 わ 傾斜 被覆 移動 被
覆 端 菌液 漏 い 故 起 や う 問題点 解決
接種菌液 量 規定量 限度 減 良い
温恒温器 使用 室温 20 25℃ う 試験室 空調 行う 試験時 室
温 度 測定 試験結果 記載 製品 使用条件 保 温度 試験 行
良い 場合 試験温度 試験結果 記載
光 照射 以外 明条件 可能 限 同条件 保
蛍光 ン 種類 型式 試験 距離 試験 置 照度 紫外線強度 ッ
蛍光 ン 白色蛍光灯 光源 用い 照度 紫外線強度 両方 記載
用い 照度計 び紫外線強度計 い 試験結果 記載 紫外線
強度 照度 測定 光源 サン 間 あ 材 照度計あ い 紫外線強度計 光部
載 測定
明条件 蛍光 ン 熱 菌液 乾燥 菌 死滅 あ
紫外線透過性 良い 石英あ い パ ッ や硬質 ウ珪
酸 面 覆わ 飽和 ン酸 水素 ン ウ 水溶液 内容量 5％以 入
保 容器 保 面 光照射 行う 保 容器 曇 光量 あ
変化 い 確認 い べ 曇 い う工夫 明
条件対照区 菌数 減少 保 容器中 光源 入 試験 行 良い
光源 防 対策 漏電等 故 起 い う 相対 度90%以
条件 前 確認 方法 保 容器 用い い 保 容器
様 い 試験結果 記載 使用用途 応 サン 光源 間 材 入
光量 光 波長 変更 良い 但 場合 試験結果 旨記載
光源 サン 間 被覆 含 べ 材 紫外線強度計 光
部 載 紫外線 透過率 測定 70%以 あ
紫外光 透過率(%)
材 紫外線光量計 光部 載 時 測定値
×100
(3) 暗条件試験区
光触媒抗菌試験 4個 2個×2菌種 滅菌 入 試
験面 接種用菌液 0.4ml 1.0 5.0×105 菌 含 接種 被覆
被 遮光 20 25℃ 保 暗条件
(4) 明条件試験区
光触媒抗菌試験 4個 2個×2菌種 滅菌 入 試
験面 接種用菌液 0.4ml 接種 被覆 被 光照射 20
25℃ 保 明条件
ッ 抗菌加工製品 評価 場合 記 試験 行う 参考試験
(5) 暗条件無加工試験区
無加工試験 4個 2個×2菌種 滅菌 入 試験面
接種用菌液 0.4ml 1.0 5.0×105 菌 含 接種 被覆 被
遮光 20 25℃ 保 暗条件
5.5 試験規定条件 区
光照射条件 規定条件 次
表 光照射条件
区 光源 光量 例
積極的 紫外線 照射
あ い 屋外 使
用 場合
ッ 20μＷ cm2以
空気清浄機 エ コ
ン等
生活空間 光 利用
場合 比較的光量 多
い場合
含 可視光応答光触媒
白色蛍光灯 4,000 6,000lx
光 源 近 あ い
窓 使 用
製品 ン
テン 電気 タ
ン 笠等
参考試験
生活空間 光 利用
場合 通常 光量
使用 場合
含 可視光応答光触媒
白色蛍光灯 1,000 2,000lx
通 常 室 内 使 用
製品
5.6生菌数 測定
(1) 2個×2菌種 滅菌 用意 置い 敷 各試
験 接種 同量 接種用菌液 入 被覆 被 直
付着 い 菌 SCDLP 地 10ml) 用い 中 十 洗い
試験 大 標準 い場合 被覆 大 外周 2.5 5.0mm
控え 大
光源 点灯 30 以 経 光量 測定
ッ 型 光部 持 紫外線強度計 場合 型 光部 持 場合 60μＷ cm2
以 紫外線強度 限 規定 い い 6.(2) 試験成立条件 紫外線強
度 限 試験菌 種類 照射 紫外線強度 変わ 良い 但
試験結果 照射 紫外線強度及び試験成立条件 必 記載
試験 び被覆 付着 い 菌 洗い 次 う 行 う 滅菌
洗い 液 ml 中 生菌数 SA 地 使用 寒天 板 養法 温度35み ℃
40 48時間 養 測定 2個 生菌数 均値 求 10倍
値 接種直 対照区 生菌数測定時 希釈 滅菌 ン酸緩
衝生理食塩水 用い 行 う
(2) 所定時間経過 暗条件対照区用滅菌 2個 い 前項 滅
菌 同様 測定 2個 生菌数 均値 求 10倍 値
0 暗条件対照区
(3) 所定時間経過 明条件対照区用滅菌 2 個 い 前項 滅
菌 同様 測定 個 生菌数 均値 求 10倍 値
明条件対照区
(4) 所定時間経過 暗条件光触媒抗菌試験 2 個 い 前項 滅菌
同様 測定 2 個 生菌数 均値 求 10 倍 値 0
暗条件試験区
(5) 所定時間経過 明条件光触媒抗菌試験 2 個 い 前項 滅菌
同様 測定 2 個 生菌数 均値 求 10 倍 値 1
明条件試験区
(6) 所定時間経過 暗条件無加工試験 2 個 い 前項 滅菌
同様 測定 2個 生菌数 均値 求 10倍 値 0 暗
条件無加工試験区
試験成立条件
記 項目 試験成立条件 べ 試験 効 見
(1) 接種直 対照区 び 暗条件対照区 各 2 個 生菌数 い 次式
計算 行 い 計算値 0.2以 あ
最高対数値 最 対数値 対数 均値 ≦ 0.2
使用 洗い 液 SCDLP 地10ml 次 溜 液
滅菌 ッ 吸い 再び掛 操作 回繰 返 洗い 液 十
混合 速や 生菌数測定 供
生菌数測定時 希釈 ン酸緩衝生理食塩水 用い
生菌数測定 食品 添加物等 規格 準 昭和34 12 28日厚生省告示第 370号
記載 細菌数 生菌数 測定方法 参考 行 う
個 生菌数 均値 効数 3桁目 四捨五入 各測定値 算術 均 3桁目 四
捨五入 桁 表示
生菌数 10未 場合 表示 10 均値 計算 10 計算
全 測定値 10 均値 10 表示
標準条件 24時間保管 製品 使用条件 あ い 銀等無機 光触媒
ッ 製品 評価 保 時間 24時間 短 良い 場合 保
時間 試験結果 記載
本文 試験条件以外 記条件 望 い 条件 明
条件対照区 生菌数 減少 い わ 光 熱 菌数 減少 い実験条件
設定 必要 あ
0 暗条件 対照区 所定時間経過 生菌数 及び 1 明条件 対照区 所定時間
経過 生菌数 次式 成立
(2) 接種直 対照区 均値 対 0 暗条件対照区 均値 及び
B1 明条件対照区 均値 減少率 90％以 あ
｛ 0 × 100≦ 90 ｛ 1 × 100≦ 90
(3) 接種直 対照区 2個 生菌数 い 均値 1.0 5.0×10 枚 範囲
あ
(4) 通常 光触媒製品 評価 場合 暗条件試験区 各2個 生菌数 べ 1.0
×103 枚以 あ
ッ 製品 評価 場合 暗条件無加工試験区 各2個 生菌数 べ
1.0×103 枚以 あ
試験結果 表示
次式 抗菌活性値 計算 小数点以 桁目 捨 小数点以 桁目 丸
表示 試験結果 試験条件 記載
7.1抗菌活性値
(1)光触媒製品
抗菌活性値
｛ log 0 log 1 ｛ log 0 1
暗条件無加工試験区 1.0×103 枚以 い場合 製品自体 抗菌力 あ
場合 次 う 試験 前処理 行 再試験 行う い結
果 得 あ
接種用菌液 栄養 多 抗菌力 ン 方法
抗菌力 塗料や合成樹脂 由来 比較的抗菌力 弱い場合 接種用菌液 栄
養 標準 1 500NB 多 例え 1 100NB 1 50NB 1 10NB
無加工試料 抗菌力 ン あ 場合 試
験結果 接種用菌液 栄養 記載
試料 含 抗菌物質 乾燥 揮散 方法
ン樹脂 FRP樹脂 系塗料 ン系塗料 う 逿離
ン 含 強い抗菌力 示 多い 場合 試料 乾燥
ン 揮散 抗菌力 最適 乾燥温度 時間
試料 材質 異 実 乾燥温度 時間 変え 前処理 行 試料
抗菌力試験結果 判断 場合 試験結果 前処理条件 記載
吸水性 試料 ン酸緩衝生理食塩水 含 乾燥 菌 死滅 防 方法
ン 塗装 う 菌液 吸収 や い試料 乾燥 菌 死滅
多い う 場合 ン酸緩衝生理食塩水 入 滅菌 試
験 入 約12時間放置 試料表面 水 拭 試験 供 良い
ン 塗装 場合 材 あ 合板 接着 逿離 ン 含
前 う ン対策 行わ い 良い結果 得 い 多い
場合 試験結果 前処理条件 記載
0 暗条件試験区 均値 1 明条件試験区 均値 及び 0 暗条件無
(2) ッ 製品 参考試験
抗菌活性値 2a
｛ log 0 log 0 ｛ log 0 0
(a) 抗菌活性値(2a) 求 同 試験条件 0 暗条件試験区 1.0×102 枚以
場合 抗菌活性値 2b1
｛ log 0 log 1 ｛ log 0 1
(b) 抗菌活性値(2a) 求 同 試験条件 0 暗条件試験区 1.0×102 枚以
場合 脚注 参考 試料 保 時間 接種菌液 地濃度 変え 再度試験
行い 抗菌活性値 2b2 計算
抗菌活性値 2b2
｛ log 0’ ’ log 1’ ’ ｛ log 0’ 1’
7.2 試験条件
光源 種類 形式 本数
被覆 無 種類
試料 サ
試料 前処理 方法
紫外線強度及び照度計 機種 光部 形状
接種菌液 作製方法 滅菌水 ン酸緩衝液 調整
接種菌液量
接種菌液 NB濃度
試料 保 温度
試料 保 時間
試験成立条件
保 容器 様
光源 サン 間 材 種類
以
本書 一部あ い 全部 無断 複写複製 法 認 場合 除 著作
権 侵害
抗菌製品技術協議会
0 暗条件試験区 1.0×102 枚以 1 明条件試験区 差 確認
来 い場合 次 う 試験条件 変更 0 暗条件試験区 C1 明条件試験区
差 見 良い
保 時間 短 方法
接種菌液 地濃度 1/500NB 固定 保 時間 24時間 短
0 暗条件試験区 1.0×102 枚以
接種用菌液 栄養 多 方法
保 時間 24時間 固定 接種用菌液 栄養 標準 1 500NB 多 例え
1 250NB 1 100NB 1 50NB 0 暗条件試験区 1.0×102 枚以
記 組 合わ
