糸球体内皮細胞とcocultureしたメサンギウム細胞における持続性PEG2産生に関する研究

284 （81） 氏名（生年月日） 本　　　　　籍

学位の種類

学位授与の番号 学位授与の日付 学位授与の要件

学位論文題目

論文審査委員

ウチ　　　　ダ　　　　　ケイ　　　　コ

内田啓子（昭和3

博士（医学）． 二股1328号

平成4年12月18日

学位規則第4条第2項該当（博士の学位論文提出者）

Sustained　activation　of　PGE2　synthesis　i準mesangial　cells　cocult肛ed 　with　glomerular　endothelial　cells

　（糸球体内皮細胞とeocultureしたメサンギウム細胞における持続性PGE2

　産生に関する研究） （主査）教授　二瓶　　宏 （副査）教授　高桑　雄一，白坂　龍画

論　文　内　容　の　要　旨

　目的 　糸球体内皮細胞（GEN）は種々の血管作動性物質を 産生し，メサンギウム細胞（GMC）を介して糸球体機 能を調節していると想定される．今回，単離培養方法

が確立されているGENとGMCのcoculture系を用

い，GENが産生する内因性エソドセリン（ET）によ るGMCのプロスタグランディンE2（PGE2）の産生に 対する影響を検討した． 　方法

　GMCはS－Dラット腎より，GENは牛腎より単離培

養した．GENをプラスチック板上に培養し，テフロン

リングを介しあらかじめ培養したGMC上にかぶせ

coculture系とした． 　培養上清中のPGE2をRIAにて測定した． 　ET　receptor　binding　assay（RBA）により1211・ET－ 1のGMC表面への結合率を測定した． 　結果及び考察

　1）GENとcoculture後のGMCのPGE2の産生

は，GMC単独培養と比較し3，5倍に増加し（pく0．01）， その変化は抗ET－1中和抗体により有意に抑制された （pく0．01）．

　2）GENとcoculture後のGMCを，外因性ET・1で

刺激すると，その反応性はGMC単独培養と比較し，著 しく低下していた． 　3）ET　RBAで検討すると，　GENとcoculture後の GMCではKd＝0．22±0．01nM，　receptor　deneity （Ro）二12±2fM／mg　proteinであったのに対し，　GMC 単独培養ではKd＝0．22±0．02nM，　Ro＝144±11fM／ mg　proteinとET　receptorのdown　regulationが認 められた． 　4）ET　receptorのdown　regulationは，24時間後に 60％まで回復し｝抗ET・1抗体によって一部中和され た． 　結語

　1）GENとcoculture後のGMCでは，　PGE2の産生

が充進しているが，外因性のETの刺激に対する

PGE2の産生量は著しく低下していた． 　2）外因性のET－1刺激に対するPGE2産生量の低下 は，ET　receptorのdown　regulationによるものと結 論した．

　3）GENとcoculture後のGMCにおけるこれらの

変化は，GEN由来の内因性ET・1によると考えられ

た． 　4）このcoculture系は腎糸球体細胞間相互作用を 検討する上で，よりin　vivoに近い有用な方法と考え られた． 一9ユ8一

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論　文　審　査　の　要　旨

　腎糸球体において，内皮細胞とメサンギウム細胞とは相互に情報を交換しながら，様々な機能とその調節を 行っている．今回，両細胞のcoculture系を確立し，その詳細を報告すると同時に，内皮細胞の産生するエソ ドセリソがメサンギウム細胞のプρスタグランディン産生を著しく刺激することを明らかにした．この coculture系は，糸球体における情報伝達機構，炎症や硬化機転を解明するための大きな手段のひとつになり， 学術的に極めて価値ある論文である． 主論文公表誌 Sustained　activation　of　PGE2　synthesis　in　mesan－ 　gial　cells　cocultured　with　glomerular　endoth－ 　elial　cellS 　（糸球体内皮細胞とcocultureしたメサンギウム 　細胞における持続性PGE2産生に関する研究） 　　American　Journal　of　Physiology 　　Vol．263（Cell　Physiol　32）C200－C209頁 　　（1992年7月発行） 副論文公表誌 1）培養ウシ糸球体内皮細胞の生物学的特徴．‘医の 　　あゆみ163（2）：151－152（1992）内田啓子，新 　　田孝作，大図弘之，堀田　茂，川嶋　朗，湯村 　　和子，二瓶　宏 2）急速進行性腎炎一病理，免疫学的機序の考察一． 　　腎と透析33（1）：39－45（1992）湯村和子，内田 　　啓子，川嶋　朗，佐中　孜，二瓶　宏 3）The　origin　qf　renal　amyloidosis　in　aged　mice 　（加齢マウスにおける腎アミロイドーシスの成 　因に関する研究）．Aging：ImmunQl　Infect　Dis 　3（3）：117－126（1992）Yumura　W，　Uchida　K， 　Sugino　N，　Nagasawa　R，　Kawashima　A，

　Maruyama　N

4）実験動物における加齢と血管障害．腎と透析 　26（4）：67－72（1992）湯村和子，内田啓子，杉 　野信博，長沢龍司，丸山直記 5）腎炎患者の長期管理上のポイント．Med　Pract 　6（10）：1695－1698（1989）松村　治，内田啓子，

　二瓶　宏

6）ホルマリン固定パラフィン包埋された腎生検組 　織における浸潤細胞の免疫組織学的検討．．臨床 　免　20（10）：979－981（1988）内田啓子，湯村和 　子，堀田　茂，杉野信博 ’ 一919一