木 の 育 種 に 関 す る 研 究

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(1)九州大学学術情報リポジトリ Kyushu University Institutional Repository. [粕屋演習林]A.林木の育種に関する研究 : 1.バーオ キシダーゼ・アイソザイムの新しい呈色反応法につ いて 宮崎, 安貞 九州大学農学部附属演習林 : 講師. https://doi.org/10.15017/1458313 出版情報:演習林研究経過報告. 昭和45年度, pp.44-45, 1971. 九州大学農学部附属演習林 バージョン: 権利関係:.

(2) 粕 屋 演 習 林. A林. 木 の 育 種 に 関 す る 研 究. パ ー オ キ シ ダ ー ゼ ・ア イ ソ ザ イ ム の 新 し い 呈 色 反 応 法 に つ い て. 宮. 崎. 安. 貞. こ こ 哩o数 年 の 問 に 、 植 物 酵 素 の 観 究 は た い へ ん 進 展 し た が 、 と く に 植 物 酵 素 の 多 型 性 (po1ymorphism)に. 関 す る 研 究 は 遺 伝 。育 種 。樹 病 な ど 多 方 面 に わ た つ て 応 用 的 研 究 の 有 効. な 武 器 の ひ とつ に な つ て き た 。 林 木 に は きわ めて 多 数 の 種類 の酵 素が 含ま れ て い る と考 え られ るが 、 現 在 の とこ ろバ ー オ キ シ ダ ー ゼ 酵 素 は 個 体 の 遺 伝 子 型 を 示 す の に 充 分 な 多 型 性 を 示 す こ と、 安 緬 に で き る こ と な ど か ら 林 木 の ア イ ソ ザ イ ム の 研 究 に 用 い られ る こ と が 多 い 。 パ ー オ キ シ ダ ー ゼ の 呈 色 反 応 で は 、 従 来 は 酢i酸ベ ン ジ ジ ン を使 つ て き たoし. か しベ ン ジ ジ ン は ぼ う こ う癌 の 発 癌 物 質 で あ る 疑 い が き. わ め て 濃 い こ と か ら、 こ れ が 使 用 は で き る だ け 避 け る こ とが 望 ま れ て い る 。 実 際 、 ペ ン ジ ジ ン は す で に ア メijカ な どで は 製 造 禁 止 と なっ て ㎏ るo 筆 者 は 、 以 下 に 述 ぺ る よ う な 新 しい パ ー オ キ シ ダ ー ゼ の 呈 色 法 を 使 つ て 試 薬 の 最 適 濃 度 を 調 べ た。 そ の結 果 は 良好 だつ た の で 報 告 す る登. 実. 験. 方. 法. ス ター チ 。 ゲ ル6本 ,8‑RaplRhcl45御. に 用 い る 呈 色 液 は15Cmiと を 秤 量 し5C8m蓋. す れ ば 、 ま ずG…‑Dianisidine75ngと. ビ ー カ ー に 入 れ るoAceton15mlを. 粉 末 を とか す 。 こ れ ら は す ぐ と け る 。 つ ぎ にa1MTris'・ 15麟. と つ て ビ ー カ ー に 加 え 、 蒸 溜 水 劉a5搬1で. 加 え て前 記 の 両. ・aceticacidbuffer,pb4.0を. こ れ を薄 め る05%のH2砺. ら に 加 え て ス タ ー ラ ー で よ く撹 は ん し て ゲ ル 上 に 注 ぐ。 ト リス 緩 衝 液 と5%H202は 調 製 し て 詮 い た 方 が 便 利 で あ るo実. 験 法 を 要 約 し て 示 せ ぱ?able1.の. Table 1. New peroxidase. staining. 0.111ITris-acetic. method. 2. 3%H202(. acid buffer,. 1% containing. Acetic. 4.0 of p1-1. acid). 液 璽.5mlを. さ. あ らか じめ. と訟 夢で あ る。. Stok solution 1.. 、.

(3) Procedure(. 1 50m1 solution) 1.. o -Dianisidin. 2m1M1..................7 3mq. 2. /2-naphthol ...........................4. 3in$. 3. Acetone .................................1. 5m1. 4.. 5m1. 0.11\1Tris - HAc .....................1. 5. H2O .......................................1 6. Tris-buffer,. 3~H2O2 .................................1.5ml pH4.0. 1.. 1 8.5 ml. •. Tris .......................................6.. 2. CH30O0H ..............................3 3. H2O (added. to) .....................5. 0 59 0 ml 0 0 ml. 11202 solution 1.. 30d%H202 ..............................10m1. 2.. CH3C0OH (1 0 0% )1. 3.. H2O .......................................89ml. ml. なお、 呈 色反 応 は下 記 の ように進 行 す る。. 2鳥. 取 オ キ ノ ヤ マ 天 然 スギ の 外 部 形 質 に お け る変 異 宮. 崎. 安. 貞. オ キノ ヤ マ 天 然 ス ギは古 くか ら地 元 人工林 用 の ア カ ざ しあ る いは ア オ ざ し苗 木 の 給源 と して活 用 され て きたが 、そ れ と と もに 林 木 育 種 の 母 本材 料 と して 脚 光 を浴 び、 例 え ば 関 西林 木 育種 場 で は そ の た め に 約400系. 統 が 確 保 さ れ て い る。 九大 粕 屋 演 習林 林 木 育 種試 験 地 で は、 昭和45年.

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