氏 名 ・ （ 本 籍 ） 安
あ
達
だち
裕
ひろ
行
ゆき
（北海道）
専 攻 分 野 の 名 称 博士（医学）
学 位 記 番 号 医博甲第 845 号 学 位 授 与 の 日 付 平成 25 年 9 月 25 日
学 位 授 与 の 要 件 学位規則第 4 条第 1 項該当 研 究 科 ・ 専 攻 医学系研究科医学専攻
学 位 論 文 題 名 Identification of novel genetic mutations in Japanese patients with severe congenital hypothyroidism.
（日本人重症先天性甲状腺機能低下症患者における新規遺伝子異変の同定）
論 文 審 査 委 員 （主査） 教授 山 田 祐一郎
（副査） 教授 寺 田 幸 弘 教授 南 谷 佳 弘
Akita University
学 位 論 文 内 容 要 旨
Identification of novel genetic mutations in Japanese patients with severe congenital hypothyroidism
（ 日 本 人 重 症 先 天 性 甲 状 腺 機 能 低 下 症 患 者 に お け る 新 規 遺 伝 子 変 異 の 同 定 ） 申 請 者 氏 名 安 達 裕 行
研 究 目 的
先 天 性 甲 状 腺 機 能 低 下 症（
CH）は 様 々 な 病 型 の 集 合 体 で あ る ．永 続 性・原 発 性 CHの
7585%を 占 め る 甲 状 腺 形 成 異 常 （
TD） は 遺 伝 性 が ほ と ん ど な く ，1520%を 占 め る 甲 状 腺 ホ ル モ ン合 成 障 害（
DH）は 遺 伝 性 が 高 い こ と が 知 ら れ て い る ．そ れ ぞ れ に い く つ か の 原 因 遺 伝 子 が 同定 さ れ て い る が ， 実 際 に 永 続 性 ・ 原 発 性
CHに お い て ど の 程 度 の 割 合 を 単 一 遺 伝 子 変 異 が 占 め て い る の か は 不 明 で あ る ．遺 伝 子 変 異 の 頻 度 は 従 来
510%程 度 と 推 測 さ れ て い た が ，最 近の 日 本 の 研 究 で 永 続 性 ・ 原 発 性
CHの
20%以 上 で 遺 伝 子 変 異 を 有 す る と 報 告 さ れ た ．本 研 究 の 目 的 は 秋 田 県 の 一 地 域 に お い て ， 重 症 永 続 性 ・ 原 発 性
CH患 者 に お け る 遺 伝 子 変 異 の 頻 度 を 求 め る こ と で あ る ． そ こ で 重 症 の 永 続 性 ・ 原 発 性
CH患 者 を 抽 出 し ， 頻 度 の 高 い
5つ の 既 知 遺 伝 子 に つ い て 遺 伝 子 解 析 を 行 っ た ．
研 究 方 法
19992011
年 の 秋 田 県 新 生 児 マ ス ス ク リ ー ニ ン グ 全 対 象 者
114,733名 か ら 秋 田 大 学 医 学 部 附 属 病 院 小 児 科 に 紹 介 さ れ た 永 続 性・原 発 性
CH患 者
27名 の う ち ，マ ス ス ク リ ー ニ ン グ 初 回
TSH値 が
20mU/l以 上 を 示 し た 重 症
10例 を 抽 出 し た ．
10例 を 甲 状 腺 形 成 異 常 ，甲 状 腺 ホ ル モ ン 合 成 障 害 ， 正 常 形 態 の
3つ の 病 型 に 分 類 し ，
CHの 原 因 と し て 頻 度 の 高 い
5つ の 遺 伝 子
（
DUOX2，TSHR，TG，PAX8，TPO） か ら 病 型 に 応 じ て 候 補 遺 伝 子 を 選 択 し た ． 遺 伝 子 解 析は ，患 者
DNAを 抽 出 し て 候 補 遺 伝 子 の エ ク ソ ン お よ び エ ク ソ ンイ ン ト ロ ン 境 界 領 域 を
PCR法 で 増 幅 し ， 直 接 シ ー ク エ ン ス 法 に て 行 っ た ． 同 定 し た 新 規 遺 伝 子 変 異 に つ い て は コ ン ピ ュ ー タ （
PolyPhen-2） に よ る 機 能 解 析 を 行 っ た ．研 究 成 績
重 症 永 続 性・原 発 性
CH患 者
10例 の 病 型 の 内 訳 は ，甲 状 腺 形 成 異 常
6例 ，甲 状 腺 ホ ル モ ン 合 成 障 害
1例 ， 正 常 形 態
3例 で あ り ， 軽 症 ～ 中 等 症 に 比 べ 甲 状 腺 形 成 異 常 の 割 合 が 高 い 傾 向 が あ っ た ．
1
例 を 除 く
9例 で 遺 伝 子 解 析 を 行 い ，
3例 に 遺 伝 子 変 異 を 認 め た ． 甲 状 腺 形 成 異 常 の
1例 に 認 め た
PAX8の ミ ス セ ン ス 変 異 （
heterozygous p.I34K） は 新 規 遺 伝 子 変 異 と 考 え ら れ ，
PolyPhen-2に よ る 機 能 解 析 で も タ ン パ ク 質 の 機 能 低 下 を 引 き 起 こ す こ と が 予 測 さ れ た ． 甲 状 腺 ホ ル モ ン 合 成 障 害 の
1例 は
TPOの ナ ン セ ン ス 変 異（
p.R540X）と ミ ス セ ン ス 変 異（p.W732L）の 複 合 ヘ テ ロ 接 合 体 で あ り ， 後 者 は 新 規 遺 伝 子 変 異 と 考 え ら れ た ．
PolyPhen-2に よ る 機 能 解 析 で も タ ン パ ク 質 の 機 能 低 下 を 引 き 起 こ す こ と が 予 測 さ れ た ．正 常 形 態 の
1例 に 認 め た
TSHRの ミ ス セ ン ス 変 異 （
homozygous p.R450H） は 日 本 人 で 報 告 例 の 多 い 既 知 の 変 異 で あ っ た ．結 論
重 症 永 続 性 ・ 原 発 性
CH患 者
9例 中
3例 に 遺 伝 子 変 異 を 認 め ， そ の う ち
2例 で 新 規 遺 伝 子 変 異 を 同 定 し た ． 重 症 例 で は 遺 伝 性 の 低 い 甲 状 腺 形 成 異 常 が 半 数 以 上 を 占 め て い た が ， 遺 伝 子 変 異 の 頻 度 は 従 来 の 推 測 よ り も 高 率 で あ っ た ．
5つ の 遺 伝 子（
DUOX2，TSHR，TG，PAX8，TPO） を 含 め た 遺 伝 子 解 析 は CH
