硝 子 体 手 術 網膜 影響 関 研 究

35 2 金沢 大 学 十 全 医学 会 雑 誌 第1 0 0巻 第2号 3 52−^{3 7 2} く1 9 9 い

硝^子 体手術 ^の 網 膜 ^{へ の} 影 響 ^に関^{す る}研究

I ^． イヌ網膜電 図く^electr o retin og^{ra m}l ^{の基 礎 的}研 究

一 網 膜機 能評価^{の た め の}新し^い実験^{モ デル ー}

金 沢 大 学 医学 部眼科学 講 座 く主任^こ河崎 ^一 夫教 授う

輪 島 良 ^平

く平 成3年3月2 日受 付う

イ ヌ^において網 膜^の電 気 的応 答を指 標と し て硝子体 切 除 術や眼 内 使用物 質^の網 膜への影 響を調べ

る目 的^で正常な イ ヌ網 膜 電 図 く^{ele ctr o r etin o}g^{r a m} ， E R Gl お よ び眼球 常 存 電 位の薬 物 誘 発 応 答^{に つ い}て 調^べた． ピ^ー グ^ルイ ヌ 2 頭と雑種イ^ヌ3 3頭を用^いた^． E R G お よ び薬物 誘 発 応 答を記 録す る際^に気 管 内 挿 管を施し筋 弛 緩 剤 くミ オ ブ^ロ ック富1 を 用^いて イ^ヌを不動 化す る^ことによ り安 定し た記 録を長期にわ た り反復し て行う^こと が可 能^であ^っ た^． イ ヌに お いて^a 波， b 波， 律 動 棟 小 波 くo s cillato ry pote ntial_． O Pン， 明上昇を記 録す ること が で き た が， イ ヌ E R G ^にはC 波は観 察さ れず， 代わ りに同 様の時 間 経過^で 角 膜側 陰性^の緩 徐な波が記 録さ れ， 著 者は^この角膜 側 陰性の波を緩 徐 陰 性波 くslo w n eg^ativ e p^ote ntial，

S N Pl と命名し た． S N P は本 編の成 績よ り 主^に角 膜 側 陰 性^{の M dlle r} 細 胞 由 来の^{スロ ー} P IIIくSlo w

P 工ID と角膜 側 陽 性^の網 膜 色 素上皮 層 くr etin al pigm e nt epi th eliu m ， R P El 由来の^C 披 くR P E c 掛 よ り 構 成さ れ， 角膜 側 陰性の^{ス ロ ー} P III 振 幅が角膜 側 陽 性の R P E c 波 振 幅を凌 駕して いるので E R G 上で は両 者の和と し て角 膜 側 陰 性の波で あ る S N P が記 録さ れ る^こと が判 明し た^一 ス ロ ^ー P III 振 幅が R P E

c 波 振 幅を凌 駕し て^いる の で S N P 振 幅の変化は R P E ^c 波 振 幅の変 化^に比^べ スロ ^ー P III 振 幅^の変化を よ り大き く反 映す る と考え ら れ， ま た^{スロ ー} P III は M ull^{e r} 細 胞 由来と考え ら れ て^いるの で S N P を M 班e r 細 胞 機 能^の指 標と し て 用^いる^こと が可 能で あ る^■ イ ヌ に お^いて高浸 透 圧 剤 く^{フ ル}ク ト^{マ ニ} ト豆

， を 1 0^mllkgJ1 5min で静 注す る と眼球 常存 電位 く^{sta n}d ing pote ntial_， S Pl が減少し， イ ヌにおいて も高 浸 透 圧 応 答^の存 在が確 認さ れ た^． イ^{ヌ に}おいて アセタゾラ^マイ ド げ^{イ アモ ックス富，2 5m gノkg を静 注}

し た が， S P の ^一定し た変 化は観 察さ れ な かった^■ ま た1^．4％ 炭酸 水 素ナ ト リ ウムを 0 ，5 6mll minlk_g で

静 注し た が， S P は変 化し な か^った． す な わ ち イヌ に お いてダイ ア^モックス応答^およ び炭 酸 水 素ナ ト リ ウ^ム応 答は記 録さ れ な か^っ た^． 本 編^のイヌ実 験^モデ^ルを 用^いることによ り E R G のう ち速^い成 分で あ る

a 軋 b 波， O P のみ な らず 比 較 的 緩徐^な電 気 的応 答で あ る S N P や極め て緩 徐な電 気 的 応 答^である明上 昇お よ び高 浸 透 圧 応 答ま で も長 期^にわ た り反 復し て記 録す ること が可 能と な り， これ ら の電 気 的 応答を 指標と す ることによ り網 膜 機 能を層別^に検 査す る^こと が可 能になっ た^．

Key ^{w o r}ds ele ctr o r etin og^{r a m} ， dog^{， C−W a V e， S}ta ndiⁿ_{g p}^ote ntial， h_{y p}e r o s⁻ m ola rit y ^{r e s}p^{ons e}

重 篤な網 膜 硝子体 疾 患^に対し硝子体 内^に挿入 し た手 トミ ^ー の開 発を契 機^に急 速^に発 展し て き た^{． こ の}手術 術 器 具を用^いて直接^これ を治 療す る手 術 方 法 く硝子体 方 法は現 在で は硝子体混濁， 重 症 糖 尿 病 性網 膜症^{， 重} 手 術 は， M a che m e r ら^1，によ る ク^{ロ ー} ズ ド ビ ト^レ ク 症 網 膜 剥 離， 限外傷， 眼 内炎な どの種^{々 の}網膜硝子体

A b br e viatio n s こE R G， ele ctr o r etin og^{r a} 町 O P ， O S Cillato ry p^ote ntia1₃R P E ，r etin al _pi_gm e nt epitheliu m i S N P ，Slo w n eg^ativ e p^ote ntial_ニS P， Sta ndiⁿ_{g p}^ote ntial_ニ筋 注^， 筋 肉内注 射^こ静 注^， 静 脈 内 注 射

イヌ網 膜 電 図^に関す る研 究 _{35 3}

疾患^{に ぉ いて}応用 さ れ て^いる^． さ らに硝子体 手術^の効 果 を高め る目 的^で眼内^レー ザ ^ー 光 凝 固や 眼内に お いて 短期ま た は長 期^に使用 す る物 質す な わ ち 眼内 充 填用気 体， 眼 内投 与 治療 薬 剤 くた と え ば抗 生 臥 抗ウ イ ^{ル ス} 剤， ステ^ロイ ド な どI，代用硝子体な どの新しい手 術 方 法や眼内使用物 質が現在な お開 発さ れ臨 床 応用 さ れ て き て^いる^． し^かし な が ら硝子体 手 術 方 法^や眼 内 使用物 質の開発と臨 床 応用の進展と は う ら は らに，

これ らの 限組 織^{へ の}安 全 性を裏 付け る基 礎 的 研 究は十 分と は^い え な^い． 硝子体 手術 自 体お よ び限 内 債用物 質が 限組 織 と く^に網膜^へ与え る 影響を検 討す ること は極めて重要 で あ り， 将 来^の硝子体 手術 手 技^およ び硝子体 内 薬 物 療 法く^{intr a vitr e al dr ug the r ap y}J^{2 ，}の改 善およ び発 展^に大 き く寄与す る と期 待さ れ る^．

著者は硝子体 手術お よ び 眼内で使用 さ れ る薬 剤を実 際^の臨床と同様の方 法で実験 動 物^に適用 し， これ らの

手術操作お よ び薬 剤の網膜^への影 響を電 気 生理学 的^に 評価す る^こと を目 的と し て イヌを 用^いた新し^い実 験^モ デルを本 研究^にお^いて まず捏 喝し た^い． 網 膜^への影 響 を評価す る手段と し て電 気 生理学 的 方法を 用^いた 理由 はこの方法が眼^に侵 襲を与え ず長 期にわ た り 反復して

網膜の機 能を追 跡す る方 法と し^て非 常^に優れ て^いる^か ら^である^． 実験 動 物と し て本研 究で イヌを 用 ^いた 理由

を以下に述^べる． まずこ の実験に要 求^{さ れ る}実験 動 物 の条件と し て， い 眼が手 術 可 能な大き さであ る，

2う 従順で扱^いや す^い， 3つ反復の全 身麻 酔^に耐え得 る強靭な動 物である， 4う 反復し て 人 工呼吸 を行う た めに経口気 管 挿管が可 能で あ る， 5う入手が容易^であ る， 61 網 膜^に関す る電 気 生理学 的基礎研 究が豊 富^で あ る^こと が挙げ ら れ る^． 網 膜の電 気 生理学 的 研 究^で頻 用 さ れ る動物と して， ウ サ ギ， ネ^コ ， カ^エルな ど が あ る． し か し ウ サ ギ^では経口気 管 挿 管が困 難で あ り^， ネ

コは実験途 中^で死 亡 す る場 合も あ り や や強 靭さ^に欠け る^． カエル では 眼球が 小 さ く硝子体 手 術^に は適さ な い． イ^ヌは 上記1フ ^ル 5うの条 件を満た す が， 6 1 ^の 網膜に関す る電気 生理学 的基礎 研 究^に乏し^い ． そこで 著者は第I 編に お い てま ず イヌ の網 膜 電 図く^ele ctr o r⁻ etin ogr a m ， E R Gl ^およ び眼球 常 存 電 位の薬 物 誘 発 応 答に関す る研 究^を行^っ た^．

1 91 1年P i_pe r^3，が最 初^にイ^ヌ E R G に つい て記 載し た⁻ イヌ E R G に関す る報 告は その後 散 見さ れ るにす

ぎない^{廿 6 l}． 本 編^では すで に ヒトに お い て広く臨 床 応用

さ れ ている E R G a 波， b 波， 律 動 様^小波 く^{O S Cillat−}

O ry pot_{e n}tial． O Pl を は じ め 主 ^に網 膜 色 素上皮 層 t^{r et}in al pi_gm e nt epitheliu m ， R P El ^に由 来す る ^C

波^乃_{およ び 明 上}昇^醐 に関し て イ^{ヌ に お い}て検 討し， イ

ヌ に おけ るこれ ら の光 誘 発 応 答の正常 波 形を決 定す る．

眼球の前 極と後 極と の間^には角 膜側 陽性^の電 位 差が 存在し， こ の電 位 差は ^一 般^に眼球 常 存 電 位 くsta nding pote ntial_， S Pナと呼ば れ， そ の 主 な発 生 母 体は R P E と さ れ^{て い}る^{1 0 I．} S P は光 刺 激のみ な らずあ る種^の薬 物 負 荷 刺激^によ^っ て も変 化す る^{I l−トl ニー−．} こ の変 化を計 測 す ることによ り R P E ^の機 能を検 査す る^こと が可 能で あ る． S P を変 化さ せ し か も臨床 使用可能な薬 物と し て当 教 室で高浸透圧剤， アセタ ゾ ラ^マイ ド お よ び炭 酸 水 素ナ ト リ ウ^ムを報告し， 各薬 物^{によ る S P} 変 化^{を そ} れ ぞ れ高 浸 透 圧 応 答^{1 0 I}， ダイ ア^モ ック^ス応 答^{11 ン}お よ び 炭 酸 水 素ナ ト リ ウム応 答^{−21 用}と名 付け た^． 本 編で は イ ヌ に お いて高 浸 透圧応 答， ダ イ ア^モックス応 答^およ び 炭 酸 水 素ナ ト リ ウム応 答が存 在す る か否か調^べ ， これ ら^の薬 物誘 発 応 答^{を イヌ に}お け る R P E 機 能 検 査^に応 用 で き る^か否かに つ いて も検 討す る^．

材 料^およ び方 法

ピ^ー グ^ルイヌ2頭 く体重1 0， 9 kgl お よ び雑種イ^ヌ3 3 頭 く体重 5 ^旬 8 kgさを 用^いた． 麻酔^およ び 不動化^の方 法は 以下の通り で あ る^． 塩 酸^ケタ ミン 1 0^句2 0mgノkg

けタ ラ ^ー ル富

， 三共， 東 副 ^およ び硫 酸ア ト^ロビン0^．5

mg く田辺 製 薬， 大阪1^の筋 肉 内 注射く筋 注さ後， 横 側 皮 静脈， 小伏 在 静 脈ま た は 大 腿静 脈よ り静 脈 路を確 保し 臭 化^{パ ン クロ ニ} ウ^ムく^ミオ ブ^ロ ッ ク宜

， Orga n o n ，

Os s_， オ^{ラ ン}ダ1 初回投 与 量0^．04m glk_{g の}静 脈 内 注 射 く静 注1 ^によ り 不動 化し， 直ちに経口気 管 挿 管を行っ

た^． 気 管 挿 管さ れ た イ^ヌは E R G 記 録用固 定 装 置 く著 者 考案さ^に腹臥位^に固 定さ れ， 人 工呼吸 器く6 6 1 型 ，

Ha r v a rd Ap pa r atu s，So uth N atick， M a s s．，米 国_J に

接続さ れ た^． 持 続 輸 液 装 置 け ^{ル フュ ー} ジ^ョ ン輸 液ポ ン プ， S T C⁻5 0 3， テ^ルモ． 東 京1 によ り 2 0mllhr の速 度^で乳 酸加リンゲルく^{ラ ク テ}ッ ク R ， 大塚製 薬， 東 剥 が 上記^の静脈 路を介し て持 続 的^に輸 液さ れ た^． 臭 化^パ

ンク^{ロ ニ} ウム0．0 2m gl kgノ3 Omin の静 注^によ り 不動 化 を維 持し た^． 実験 中^には 心電 図を持 続 的^に監視し． ま た呼 気 中^{の 02 およ び C O2} 濃 度を呼 気^{ガス 分}析器 くI H O 6， 三栄 測器^， 東 京一 によ り計 測し^， そ れ ぞ れ 1 6％， 4 ^へ 5 ％ と な る よ う 人^工呼吸 器の 1 回換 気量を 10 ^句1 5mlノk_g， 呼吸数を毎 分3 0^一−40 回^に調 節し た^． 実 験 終了後^に自 発 呼吸 が 回復し たこと を確 認し て被験 動 物を動 物 舎^へ 戻し， 後日の反復使用に備え た．

工^． 矩形波刺激 光による E R G ^の記 録方法 雑 種イ^ヌ5 頭1 0 眼^およ び ビ^ー グ^ルイヌ 1 頭2 眼 を 用 いた^． 電 極^には 亜鉛^．硫 酸亜鉛不分極 電 極を 用^い， 関