学
論 文 内 容
要
博士 専攻 称 博士 医 学 氏 高 博信
学 論 文 題
EphA4をタ ッ し 膵癌新規予後予測 イ び
新規治療法 開発 関 研究
Studies on development of new biomarker and therapeutics for pancreatic cancer targeting EphA4
背景 目的 膵癌 最 予後 良 癌 うち 一 あ 外科的 除 膵癌 唯一
根治的 治療法 あ 期診断 困難さ 根治 除可能 膵癌患者 少数 あ
手術療法 他 学療法 放射線療法を含 様々 治療法 膵癌 対し 行わ
満足 結果 得 い い 膵癌患者 予後改善を目的 し 新 治 療戦略 開発 求 い 中 遺伝子研究 K-ras 遺伝子やp53遺伝子
を始 し 遺伝子 機能解析や治療 向 研究開発 行わ い 道大学大学
院消 器外科Ⅱ 東京大学 共 研究 膵癌 特異的 発現し い いく
遺伝子を 定し 中 EphA4 いう遺伝子 膵癌 高発現し 増殖 関 し い
を証明し 2008年 Noberini EphA4 EphA2を選択的 阻害
子 合物 compound 1 定さ 本研究 EphA4 膵癌 予後予測
イ 得 びcompound 1 膵癌 新規治療薬 得 を検証
を目的 し
材料 方法
EphA4 発現 膵癌患者 予後 相関
道大学病院消 器外科Ⅱ 手術を施行し 膵癌患者組織 片を用い 免疫組織 学
染色 EphA4 発現 無を確認し 患者予後 び患者背景 病理学的因子 相関を解
析 方法 行 材料 1995年1 2005年12 11年間 道大学病院消
器外科Ⅱ 除さ 膵癌患者症例 作成さ 99 症例 組織 イ ア イを用
い
Compound 1 膵癌細胞株 対 増殖抑制効果 び機序 判定 in vitro
膵癌細胞株を用い EphA4 発現 無を検索し 膵癌細胞株5種類 び正常線維芽
細胞株1種類を用い 定 的PCR び スタン ッ 法 EphA4 発現 無を
確認し 内 EphA4陽性 膵癌細胞株2種 EphA4陰性膵癌細胞株1種 正常線維芽
細胞株を用い compound 1 細胞 害効果 判定実験をWST assay 行
作用機序 判定 癌細胞 増殖 い 活性 さ い さ 2 シ ン
経路 Erk/Akt 経路 着目し スタン ッ 法 解析 し 細
胞 ア シス 無を検出 目的 蛍光免疫染色法 び サイ 法
を行
膵癌 所移植 ス Compound 1 膵癌細胞増殖抑制効果 び副作用 判
定 in vivo
6 齢 ス ヌ スを用い 麻酔 開腹し シ ゼを導入し EphA4
陽性膵癌細胞株 MIAPaCa-2 を膵被膜 注入し 所移植 スを作成し 細胞
開始し 治療 compound 1群 compound 1 50mg/kg を 5回腹腔内投 し ン
群 compound 1 溶媒 あ 1% DMSOを 5回腹腔内投 し 各群6匹 評価
し 治療効果 判定 治療開始1,2,3,4 間後 IVISを用い 腫瘍 発光強
度 び広 を評価し 4 間 治療後 ス 安楽死さ 腫瘍を摘出し 測定
を行
副作用評価 し 安楽死処 各群 ス 主要臓器 脳 肺 心 肝 腎 脾
時 摘出し 免疫組織 学染色を行う 時 ス 治療前後 体 推移 評価
行 結果
EphA4 発現 膵癌患者 予後 相関
EphA4 99症例中46例 陽性 EphA4 陽性 患者 全生存期間 い 意差を
予後 良 あ P=0.029 EphA4 発現 他 患者背景 び病理学的因
子 相関を認 予後因子 検討 単変 解析 い EphA4 発現
無 ン 節転移 無 静脈 襲 無 意差を 予後 影響し を用い
多変 解析 EphA4 発現 無 ン 節転移 無 独立し 予後規定因子 し
抽出さ
Compound 1 膵癌細胞株 対 増殖抑制効果 び機序 判定 in vitro
EphA4発現検索 判明し EphA4陽性 膵癌細胞株2種 MIAPaCa-2,PK59 EphA4陰性
膵癌細胞株1種 PCI-43P5 正常線維芽細胞株 HS-K を用い compound 1 細胞 害
効果 判定実験を行 結果 compound 1 終濃度300μM以 濃度 EphA4陽性
細胞株 対し 濃度 時間依存的 細胞増殖抑制効果を示し EphA4 陰性細胞株 対し
効果を示さ
Compound 1投 い EphA4陽性細胞株 MIAPaCa-2 EphA4 ン酸
びAkt ン酸 抑制 確認 compound 1投 い EphA4陽性細胞株
ア シス 誘導 確認さ
膵癌 所移植 ス Compound 1 膵癌細胞増殖抑制効果 び副作用 判
定 in vivo
所移植 ス 腫瘍 増大 compound 1群 意 抑制さ P<0.01 摘出し
腫瘍 い 両群 意差を認 P<0.01 摘出し 主要臓器 両群 い
明 組織学的異常を認 両群 治療前後 ス体 推移 差を
認
考察
本研究 EphA4 発現 無 膵癌 除後患者 予後 相関を認 多変 解析
EphA4 発現 無 独立し 膵癌患者 予後規定因子 し あ 時 ン 節転
移 無 既存 報告 様 予後 最 強い相関を示し 本研究 結果 妥当性を
支持 考え
治療実験 in vitro,in vivo共 compound 1 EphA4陽性膵癌細胞 対し 効
結果を示し ち い Akt 経路 抑制 ア シスを誘導し い
確認さ Akt経路 ア シス 関 いう報告 多く 今回 結
果 矛盾し い あ
副作用 観点 ス腹腔内投 明 害事象 認 compound
1 今後 膵癌治療 対し 安全 臨床応用 可能性 高い 考え
結論
EphA4 膵癌 用 予後予測 イ 得 びEphA4阻害作用
あ compound 1 膵癌細胞株 増殖抑制効果を示し 膵癌 新規治療薬 し 可能性
