• 検索結果がありません。

特 異 的 抗 マ ク ロ フ ァー ジ血 清 に 関 す る研 究

N/A
N/A
Protected

Academic year: 2022

シェア "特 異 的 抗 マ ク ロ フ ァー ジ血 清 に 関 す る研 究"

Copied!
11
0
0

読み込み中.... (全文を見る)

全文

(1)特 異 的 抗 マ ク ロ フ ァー ジ血 清 に 関 す る研 究 第. 二. 編. 抗 ヒ ト単 球 血 清 の 作 製 と 各 種 免 疫 病 の 病 変 局 所 に お け る マ ク ロ フ ァ ー ジの 分 布. 岡 山 大学 医 学 部 第 三 内科 教 室(主 任:大 藤. 三. 宅. 晋. (昭 和54年3月5日. Key words:特. 受 稿). 異 的抗 ヒ ト単 球 血 清 の作 製.多 臓器 吸着 法. J‑111細 胞. 緒. 眞教 授). マ クロ フ ァー ジ の 同定. 各 種 免疫 病.. 言 ヒ ト単 球 性 白 血 病 細 胞 株(J‑111,. 免疫 反 応 の場 に存 在 す る細 胞 の 局 在,分 布 あ る い は動 態 を知 る こ とは,生 体 内 の 免疫 反応 の 直 接 的理. oke,大. 日 本 製 薬K. K.,総. 解 の助 け と な ろ う.筆 者 は,こ の 目的の ため に 第一. を 用 い て 抗J‑111血. 編 で は モル モ ッ ト腹 腔マ クロ フ ァー ジ を用 いて,抗. 個 のJ‑111細. マ クロ フ ァー ジ血 清 を作 製 し,そ の 特 異性 につ いて. 灘 注 後,. 認 した.(1). 1週. これ ら一 連 の 実験 か ら え られ た知 見 を も とに,本. 2)抗. Bro. な わ ち, 1×108 間 間 隔 に て4回. 目 に 全 採 血 を 行 っ た. 56℃,. 30分 間 非 働 化 し, ‑20℃. に保. 血 清 の 吸 着 操 作:. 吸 着 材 料 に は,胎. 従 来 の報 告 は,抗 原 と して 癌 患 者 の腹 水 中 の マ ク. 核 細 胞,多. ロフ ァー ジ を採 取 した り(2),輸 血 用大 量 ヒ ト末梢 血. 児 腎 組 織,ガ. 核 白 血 球,赤. ラ ス非 付 着 末梢 単. 血 球 を用 い た.. ① 吸着材料の作製. か ら単 球 を採 取 す る(3)方法が 用 い られ て きた が,抗. a)胎 児 腎 組 織:ホ. 原 と して十 分 量 の ヒ ト単 球 を採取 す る こ とが こ の種. HB型)で. の 実験 の隆 路 とな っ て い た.. Sに. て3回. 間,. 1回)し,沈. 近年 に な り,マ クロ フ ァー ジ系腫 瘍 細 胞 の 培養 株. b)ガ. が 樹 立 され るに な っ て,そ の 細 胞 の,抗 原 と して の. 33.4%. ト単 球 性 白血病 細 胞株 を用 い て抗 ヒ. ト単 球 血 清 の 作 製 を試 み,そ の特 異性 を検 討 す る と. 400. モ ゲ ナ イ ザ ー(日. 胎 児 腎 を2000rpm, 洗 浄(500g,. Conray. 400(第. 球 層 と 多 核 白 血 球,赤 単 核 球 層 をHanks'. た.(第. 685. た 後,ガ. 30分. O型. に 希 釈 し,. 一 製 薬K. K.)/9%. Fico 1. 作 製 し たConray. に 重 層 し , 1550rpm,. に て 洗 浄(500g, 回)し. 1500g,. パ リ ン加,. (Pharmacia製)=10V/24Vで. 部 に おけ るマ クロ フ ァー ジの 分布 を螢 光 抗体 間接 法. 血清 の 作 製:. 2回,. 生 理 食 塩 水 で2倍. ‑Fico1液. 材 料 お よび 方法. 10分 間,. 渣 を 使 用 し た.. 共 に,こ の 抗 血 清 を用 い,各 種 自己免 疫 疾 患 の病 変. で検 索 した.. 本 精 機 社 製,. 20分 間 破 砕 し た 後, PB‑. ラ ス 非 付 着 末 梢 単 核 細 胞:ヘ. ヒ ト末 梢 血200meを. 利 用 が考 え られ る に至 っ た.. 1)抗. &. 存 し た.. 編 で は抗 ヒ ト単球 血清 の作 製 を試 み た.. 本 編 では,ヒ. 清 を 作 製 し た.す. 胞 を ウ サ ギ 耳 静 脈 に1週. 血 清 分 離 後,. 検 討 し,多 臓 器 吸着 法 で特 異 性 を高 め うる こ と を確. Osgood. 合 研 究 所 組 織 培 養 セ ン タ ー). 20分 間 遠 心 し,単. 核. 血 球 層 に 分 け た. BSS. 20分 間,. (balanced 1回,. salt solution) 500g,. 5分 間2. ラ ス付 着 法 に て非 付 着 細 胞 を採 取 し. 一 編 参 照).

(2) 686. 三. c)多 核 白 血 球:. b)操 作 で え ら れ た 多核 白 血 球,赤. 血 球 層 をPBSで3回 し, 0.83%. BSSに. 10分 間,. 作 製 し た0.6%ア. 3回. O型. 球 お よ び リンパ. 一 メデ ィ ウム に て. ガ ー ロ ー ス プ レ ー トを 用 い 各 ホ モ. ジ ネ ー ト と抗 血 清 と の 間 で24時 間 静 置 さ せ 沈 降 反 応. 渣 を 使 用 し た.. 血 球:. らに 細 か く超 音 波 破 砕 し,単. 球 の ホ モ ジ ネ ー ト を 作 製 し た.同. 量 加 え, 10分 間in. て500g,. 晋. 回,さ. 10分 間, 3回). (W/V)を10倍. Hanks'. 洗 浄 し,沈 b)赤. 洗 浄(500g,. NH4C1. cubete後,. 宅. を 行 っ た.. 末 梢 赤 血 球 をPBSに. て500g,. 3 抗 血 清 に よ る病 変 組 織 の 検 討. 回 洗 浄 し 沈 渣 を 使 用 し た. a)対 象 と し た 病 変 組 織:ツ. ② 吸 着 操 作: 胎 児 腎 組 織,. O型. 赤 血 球 は 抗 血 清 と 同 容,ガ. 非 付 着 末 梢 単 核 細 胞,多. ラス. 核 白 血 球 は 抗 血 清 の1/2. 状 腺,シ. 吸 着 は 以 下 の ご と く行 っ た.す 培 養 器 中 で37℃, せ1500g, ‑20℃. 全 身 性 エ リテ マ トー デ ス(SLE)の 関 節 炎(RA)の. 容 を 吸 着 に 用 い た.. 1時 間,つ. い で4℃,. 30分 間 遠 心 し,上 に 保 存 し た .各. な わ ち,. 滑 膜,慢. 1時 間 反 応 さ. 清 を吸 着 抗 血 清 と して. 臓 器 に よ る 吸 着 は 最 低3回. 以. 上 繰 りか え し て 行 っ た.. 本 病)の. レ ン 病,べ. お,. SLE,橋. 甲. 一 チ ェ. 斑 部 皮 膚 等 を 生 検 し,被. 料 と し て 用 い た.な. 本 病,シ. 検 材 ェー グ. ー チ ェ ッ ト病 各 患 者 は 臨 床 的 に 碓 定 診. 断 の つ い て い る も の で, に て,滑. 腎 臓,リ ュ マ チ 性. 性 甲 状 腺 炎(橋. ェ ー グ レ ン 病 に お け る小 唾 液 腺,べ. ッ ト病 静 脈 炎,紅. 5%CO2. ベ ル ク リ ン.陽性 皮 膚,. RAは. 岡 山大 学 整形 外科. 膜 切 除 術 を 受 け たdefinite以. 上 の もの に 限. 定 し た. 抗 血 清 の 検 定 作 製 さ れ た 抗J‑111血 る 特 異 性 の 検 定 は,ま. え ら れ た 組 織 は,HE染 清 の マ クロ フ ァー ジ に対 す ずJ‑111細. 胞 に対 す る細胞 傷害. 試 験 に て 力 価 を 確 認 し た あ と,ヒ 細 胞 と し て,細. 胞 傷 害 試 験,螢. びOuchterlony法. ト末 梢 単 球 を 標 的. 光 抗 体 間 接 法,お. よ. に て 行 っ た.. に 二 分 し, HE染. 標 本 を抗 血 清 に よ る 検 索 に 供 し た. 検 体 はSLE腎. 臓4例,. こ で は簡 単 に 示. PBSに 37℃,. て 倍数 希 釈 した 抗 血 清 30分 間incubateし,新. 鮮 モ ル モ ッ ト血 清 を加 え,さ 0.25%. Trypan. blueを. ら に30分. PBSを. か ら え た.. 果. cytotoxicity. 胞 に対 す る. titerは128倍. 対 照 と し て 用 い た 正 常 家 兎 血 清(NRS)で. で あ っ た. は 全 く細. 胞 障 害 性 は 示 さ れ な か っ た.. 照 に は正 常 家 兎 血. 用 い た.. b)螢 光 抗 体 間 接 法:標. 的 細 胞 を ス ラ イ ドガ ラ ス 上. にcytocentrifugeし,標 ル 固 定 し た.固 検 抗 血 清,. 本 を 風 乾 後, 95%エ. 定 後,. FITC標. 1時 間 風 乾 し,ヤ. タ ノー. ギ 血 清,被. 識 ヤ ギ 抗 ウ サ ギ γ‑グ ロ プ リ ン. 血 清 と室 温 で 順 次 反 応 さ せ,グ 入 し,螢. 間 反 応 さ せ た.. 本 病 甲状 腺5. ー チ ェ ッ ト病 皮 膚3. ヒ ト単 球 性 白 血 病 培 養 細 胞 株J‑111細 抗 血 清 の50%. 用 いて 染 色 細胞 を算 出 し抗. 血 清 の 細 胞 傷 害 力 価 を 求 め た.対 清,. 膜4例,橋. 結 す に と どめ る. a)細 胞 傷 害 試 験:. PA滑. 例,シ ェー グ レン病 小 唾 液 腺6例,ベ 例,ツ ベ ル ク リ ン 強 陽 性 部 皮 膚2例. 各 操 作 は 第 一 編 に 述 べ た の で,こ. に 標 的 細 胞 を 加 え,. 色 用 と ク リ オ ス タ ッ ト用. 色 標 本 に て 細 胞 浸潤 の確 認 で きる. リセ リン緩衝 液 に封. 光 顕 微 鏡 に て 染 色 性 を観 察 し た.対. 照には. 正 常 家 兎 血 清 を 使 用 し た. c) Ouchterlony法:. Conray‑Ficol比. 重 遠 心 法,. お よ び ガ ラ ス 付 着 法 に よ っ て え ら れ た ヒ ト末 梢 単 球, リ ン パ 球 を そ れ ぞ れ1×108個 3mM. HClに. を 含 む0.25M. てPH7.. sucrose液10meを. ゲ ナ イ ザ ー で1000rpm, nator. (Kubota. に 調 製 し た.こ. 4に 調 製 し た0.1mM. Model. 2分. 加 え,テ. れ に EDTA. フ ロ ンホ モ. 間 細 胞 を 破 砕 し, Inso. 200M)に. て, 200W,. 2分 間2. Fig. 1%. Cytotoxicity of Rabbit Anti J 111Serum (Target Cell: J-111 Cell). ヒ ト末 梢 単 球 に 対 す る 抗J‑111血 xicity titerは128倍. で,. J‑111細. た 場 合 と 同 一 の 力 価 を 示 し た. 赤 血 球,胎. 児 腎 組 織,ガ. 白 血 球 に て そ れ ぞ れ5回. 清 の50%. cytoto. 胞 を標 的 細 胞 と し (Fig.. 2). ラ ス 非 付 着 単 核 球,多. 核. つ つ 吸 着 操 作 を 行 い,作. 製.

(3) 特 異的 抗 マ ク ロフ ァー ジ血 清 に 関 す る研究 し た 多 臓 器 吸 着 抗 血 清 の50% 8倍. と約1/16の. い たNRS,. cytotoxicity. ほ とん ど変 らな い 力価 を保 って い た.各 臓 器 に よる. titerは. 力 価 の 減 弱 を 認 め た.対 照 と し て 用. PBS,お. 687. よ び 補 体 非 添 加 抗 血 清 で は,単. 吸 着 数 と リンパ球 に対 す る細 胞 障 害 性 を検討 す る と, 各3回 の 吸 着 操作 に よ り細 胞 障 害 性 の 消 失 を 認め た. 各5回 の 吸 着 で はマ クロ フ ァー ジに 対 す る細 胞 障害. 球 に 対 し て 細 胞 障 害 性 は 示 さ れ な か っ た.. 性 も1/16に 低 下 した. (Fig. 2)し. たが っ て以 後 吸. 着 抗 血 清 は3回 吸 着 した もの を使 用 した. この 吸 着 抗 血清 を用 い て末 梢 単球 を標 的 と し螢 光 抗 体 間接 法 を行 う と,染 色 性 は,十 分保 た れ てお り, (Fig. 4)し か も,リ ンパ球,顆 粒 球,赤 血 球,肝 臓, 皮 膚,肺 臓,腎 臓 に対 す る染 色 性 も消失 した. Ouchterlony法. に よ る検 定(Fig. 5)で は,吸 着 前. 抗J‑111血 清 は末梢 単球 成 分 と少 な く と も3本 以 上, Control:. ま た リンパ球 成分 と も1本 以 上 の 沈 降線 を作 って い. 1) anti-J-111 serum without complement (not absorbed)2) PBS. 3) absorbed anti-J-111 serum without complement 4) NRSwithout complement 5) NRSwith complement * Target cell=lymphocyte ** absorbed five times each. るが,多 臓 器 吸着 後 の抗 血 清 で は 末梢 単 球 成 分 と1 本 の沈 降 線 を示 す だ け と な り,リ ンパ球 成 分 との 沈 降線 も消 失 した. 以 上 の検 定 か ら,吸 着 抗J‑111血 清 が単 球 に対 し特 異性 の高 い 抗 血 清 で あ る こ とが 証 明 さ れ た.. Fig. 2% Cytotoxicity of Rabbit Anti-J-111 Serum (Target Cell: Human Peripheral Monocyte). 抗 血清 に よ る病 変 組織 の検 討 1) PPD皮 膚 反応:一 般診 断用PPD(武. 田製 薬K. K.). に て ツベ ル ク リ ン皮 内反 応 を行 い, 48時 間後 の 強 陽 性部 を生 検 す る と, HE染 色 標 本 で は,真 皮 層 の 小 血 管 周 囲 を 中心 に 小 型 円形 細 胞 が 中 等 度集 簇 して 認 め られ た. (Fig. 6(a)) こ の小 型 円 形 細 胞集 簇 部 を中 心 に 抗J‑111血 清 にて 検 索 す る と,各 集 簇 中 に1〜2個. (*). (a) b) (c) (d) e) (f) (*). Anti-J-111 serum before absorption.,monocyte.,*)( Anti-J-111 serum before absorption.,lymphocyte. Absorbed anti-J-111 serum., monocyte.(*) Absorbed anti-J-111 serum.,l ymphocyte.(*)( NRS,monocyte.(*) NRS,lymphocyte.(*) Bracket means target cell for dye exclusion test.. の 陽性 細 胞 が 認 め. られ た. (Fig. 6(b)) 2)ベ ー チ ェ ッ ト病 の 結節 性 紅 斑 部,血 栓 性 静 脈 炎 部 生 検標 本 で も, HE染. 色 で は,小 血 管 を中 心 に 小 型. 円 形 細 胞の 浸 潤 を認 め,抗J‑111血. Fig. 3 % Cytotoxicity of Rabbit Anti-J-111 Serum (Target Cell Human Peripheral Monocyte and Lymphocyte). PPD皮. 細 胞 集簇 中 に1‑2個 3)シ. 清 に よる検索 で は,. 膚 反応 所 見 と類 似 して,陽 性 細 胞 が 小 型 円 形 認 め られ た.. ェー グ レ ン病 小唾 液 腺:. (Fig. 7(a))HE染 色で. は,間 質 に小 型 円 形細 胞 の 強 度 な 浸潤 が 認 め られ た. Fig. 3は. リ ン パ 球 に 対 す る 細 胞 障 害 性 を 示 した も. の で あ る.こ. こに 用 い た 吸着 抗 血 清 は 多 臓器 吸 着 法. に て そ れ ぞ れ2回. 清 は リンパ 球 に対 し, 50% cytotoxicity. titerで. の 力 価 を 示 し て い た.吸 着 抗J‑111血. 約8倍. で は 原 血 清 で40%, toxicityを の2回. 4)SLE腎. つ つ 吸 着 操 作 を 行 っ た も の で,吸. 着 前 抗J‑111血. の 臓 器 吸 着 操 作 で も,ま. 清. だ リ ン パ 球 と交 又 性 か し,. 染 色 したが,陽 性 細 胞 は ほ とん ど認 め られ ず,ま た 喰 食 能 を 有す るmesangiutn. の こ とは お の お. を 若 干 有 し て い る こ と を示 し て い る.し. 生検 標 本 で, Fig‑8に 示 され る よ うに 間. 質 に 小 型 円形 細 胞 浸 潤 の 著 明 な もの を抗J‑111血 清で. 2倍 希 釈 抗 血 清 で30%のcyto. 示 す ま で に 減 弱 し た.こ. しか し抗J‑111血 清 陽 性 細 胞 は 少 数 散 在 して認 め ら れ たに す ぎな い. (Fig. 7(b)). 2回. の 吸 着 操作 で は単球 に対 す る細 胞 障 害性 は吸 着 前 と. 5). RA滑 膜: RA滑. cellも 染 色 され な か っ. 膜 で は,そ のsub‑lining. area. に 小 型 円 形細 胞の リンパ 濾胞状 増 殖 を示 す もの が あ っ た.抗J‑111血. 清 に て そ の 滑 膜 標 本 を染 色 す る と,. 陽 性 細 胞 は 濾 胞 中心 部 に 数 個,お よ び 濾胞 辺 縁 部 に.

(4) 688. 三. 集 簇 し て 認 め ら れ た.. (Fig.. 9.. (a), (b))ま. 宅. 晋 臓 器 吸 着 に よ っ て純 化 され,末 梢 単球 に 対 し高 い特. た,濾. 胞 形 成 の 乏 し い も の で も小 血 管 周 囲 に 散 在 又 は 集 簇. 異性 を有 して い る こ とがOuchterlony法,螢. し て 陽 性 細 胞 が 認 め ら れ た.. 法 で 証 明 さ れ た.. 6)橋. (Fig.. 9. (c), (d), (e)). 本 病 甲 状 腺 生 検 標 本 で はHE染. 色 に て 間質 に. 小 型 円 型 細 胞 が 強 く認 め ら れ(Fig.. 10. (a)),ま. た,. 光抗体. 各 種疾 患 の局 所 にお け るマ ク ロフ ァ ー ジの分 布 を, 作 製 され た特 異的 な抗 ヒ ト単球 血 清 に て検 索 した と. 濾 胞 内 に 単 核 大 型 細 胞 の 集 簇 して い る 標 本 も あ る が,. こ ろ, RAの. 抗J‑111で. 浸 潤 を主体 と した変 化 は 認 め られ な か っ た. RAの. は 浸 潤 細 胞 は 染 色 さ れ ず,濾. も 染 色 さ れ な か っ た.. 胞上 皮細 胞. 滑 膜 標 本 を 除 い て,マ. クロ フ ァー ジの. 病 変 は,関 節 腔 に 集 約 され て お り,そ の場 で高 度 の. (Fig. 10, (b)). 炎症 性 免疫 反応 が お こ って い る21)〜25)た め,高 度 の マ 考. 按. マ ク ロ フ ァー ジ は,一 織 単 核 食 細 胞 を さ す.し 群 に も,組. 織 球,肝. ク ロフ ァー ジ の集 積 を観 察 しえ た のか も知 れ な い.. 般 的 に は末 梢 単 球 お よ び組 か し,こ. 臓 のKupffer細. の組 織 単 核 食細 胞 胞,リ. ンパ節 ・. しか し,他 疾 患 で 観 察 され た 少数 の浸 潤 マ ク ロフ ァー ジ も十 分 意 味 を有 す る と推 定 させ るデ ー タが あ る.す な わ ち, PHAに. よ る リンパ 球 幼 若 化 反 応 は,. 骨 髄 マ クロ フ ァ ー ジ,胸 腔 ・腹 腔 マ ク ロ フ ァー ジ,肺 胞. マ ク ロフ ァー ジ依 存 性 で あ るが リンパ 球1000個 に対. マ ク ロ フ ァ ー ジ を は じめ,骨 組 織 のosteoclast.神. し数 個 のマ クロ フ ァー ジ で 十分cell interactionが. 経組. 織 の ミ ク ロ グ リア 細 胞 な ど も含 ま れ 極 め て 多彩 で あ る. こ れ ら の 細 胞 が 何 らか の か た ち で 免 疫 反 応 に 関 与 し て い る の で あ ろ う が,こ も,抗. れ らは お のお の 機能 的 に. 原 性 に 関 し て も差 異 が あ る も の と考 え ら れ て. 成 立 す る28).し た が って こ れ ら少 数 の 陽 性 細 胞 が そ の 部 位 で 免疫 反応 に 関与 して い る可 能 性 は 十 分 考 え られ る. 一 方 ,先 に述 べ た ご と く,マ クロ フ ァー ジは組 織 に よ って機 能 的 に も表 面抗 原 に も差 異 が あ る と考 え. い る4)〜7). マ クロ フ ァー ジが 膜表 面 に特 異 抗 原 を有 して い る. られ て い る.す なわ ち,腹 腔マ クロ フ ァー ジ と肺胞. こ と は 明 らか で6),7),抗血 清 に よ る 各 マ ク ロ フ ァ ー ジ. マ ク ロフ ァ ー ジの 抗 原性 に つ い て差 異 を認 め た報 告. の 抗 原 性 の 分 折8)〜11)も行 な わ れ,近. が あ る8),9).従 っ て,今 回作 製 した 抗J‑111血. マ ク ロ フ ァ ー ジ 系cell. 年 に な りマ ウ ス. lineが 樹 立 さ れ,新. ロ フ ァ ー ジ の 機 能13)〜19)およ び,抗. し くマ ク. 原 性20)両 面 の 検 索. に 応 用 され る に至 った. しか し,ヒ トマ ク ロフ ァ ー ジに 関 して は,未 だ 未. 異 的 に ヒ ト末 梢 単球 と反 応 す る と ともに,病 変 部 に 浸 潤 した細 胞 と も反 応 す る こ とが 確 認 され た が,し か しな が ら,こ れ ら陽性 細 胞が 免 疫 応 答 に 関与 して い るす べ て のマ ク ロ ファ ー ジ を染 め 出 した もの で あ. 解 決 の 分 野 が 多 く残 され て お り,抗 血 清 の研 究 も極. るか とい え ば疑 問 で あ る.事 実,抗J‑111血. め て 少 な い2),3),12).ま た,抗 血 清 の 作 製 に あ た って,. 肝 臓 のKupffer細. ヒ トマ ク ロフ ァー ジ系cell lineを 使 用 した報告 は ま. mesangium. だ な い.. 清では. 胞,肺 胞 マ クロ フ ァー ジ,腎 臓 の. cellな どは 染 色 され てい ない.. この よ うにRAの. これ らcell lineを 抗 原 とした場 合,細 胞 が 培 養 細. 清 は特. 滑 膜 と他 の疾 患 の病 変 部 に お け. る陽 性 細 胞 の数 の 上 で の差 異 は,病 変 の 特 殊性 の み. 胞 で あ り腫瘍 化 した細 胞 で あ るた め,正 常 のマ ク ロ. な らず,浸 潤 マ ク ロ フ ァー ジの抗 原特 異 性 を も示唆. フ ァ‑ジ と抗 原性 を異 に す る可 能 性 が あ る.. す る もの で あ る.. 筆 者 は,ヒ. ト単 球 性 白血病 細 胞 株 を用 い て抗 血 清. す で に マ ウ スに お いて は マ クロ フ ァー ジの 膜 抗 原. を作 製 し,ヒ. ト末 梢 単球 に対 す る共 通抗 原性 を検 討. にお いて,マ ク ロ フ ァー ジ の種 々 の機 能 を分 折 す る. した.. 試 み が な され て い る26),27). 抗J‑111血. 清 が,ヒ ト末梢 単 球 に 対 してJ‑111細. 今 回作 製 さ れ た特 異抗 ヒ ト単 球 血 清 は,ヒ. トの 免. 胞 に対 す る と同 じ力価 の 高 い細 胞 障 害性 を有 して お. 疫 応 答 を務 どるマ ク ロフ ァー ジ の機 能 と,そ の 抗 原. り,そ の 活性 が,組 織 吸 着 に よ り リンパ球 に対 す る. 性 との 関係 の み な らず,病 変局 所 のマ ク ロフ ァー ジ. 障 害 性 を吸 着 除去 して も残 存 した こ とは, J‑111細. を同 定 しえ た こ とよ り,ヒ ト免疫 疾 患 にお け るマ ク. 胞 とヒ ト末 梢単 球 との 共 通抗 原 の 存 在 を強 く示 唆 す. ロ フ ァー ジ と病 態 との 関 係 とい っ た,未 解 決 の 分 野. る もの で あ ろ う.. の研 究 に新 しい展 望 を与 え る と考 え られ る.. この 共 通抗 原 に対 す る特 異抗 体 は,赤 血球,胎 児 腎組織. ガ ラ ス非 付 着単 核 球,多 核 白血球 に よ る 多. 結. 語.

(5) 特 異 的 抗 マ ク ロフ ァ ー ジ血 清 に 関 す る研 究 ト単 球 性 白血 病 細 胞 株J‑111細. 胞 を用 いて抗. 血 清 を作 製 し,胎 児腎 臓,赤 血球,ガ. 1)ヒ. ラ ス非 付 着性. 689. 胞 が 認 め ら れ た. べ ー チ ェ ッ ト皮 膚 紅 斑 部,お. 末梢 単核 球,多 核 白血 球 に よ る 多臓器 吸 着 法 にて,. 膚 で は,小. ヒ ト末 梢 単球 と特 異的 に 反 応 す る抗 ヒ ト単 球 血 清 を. 混 っ て1〜2個. よ びPPD陽. 性 部皮. 血管 を 中心 とす る小 型 円形 細 胞 の 集 簇 に の 陽 性 細 胞 が 認 め ら れ た.. 作 製 し えた. 2)各. 種 免 疫病 の病 変 局 所 を抗 単 球 血 清 に て検 索 し. 稿 を終 るに あ た り,終 始 ご 懇切 な る ご指 導 な らび に ご. た.. 校 閲 を賜 わ り ま した 恩 師 大 藤 真 教 授 に 心 よ り深 謝 申 し上. RA滑. 膜 の濾 胞 状 小 型 円 形細 胞 増 殖部 で は濾 胞 中. げ ます.直. 接 ご指 導,ご. 鞭 撻 い た だ き ま した 山 名 征 三 博. 心 部 お よ び辺 縁 部 に 集 簇 した陽 性 細 胞 の 浸 潤 が 認め. 士 に 心 よ り感 謝 と敬 意 を表 し ます.ま. られ,ま た,小 血 管 周 囲 に も散 在 性 に,ま た は集 簇. を御 供 与 い た だ き ま し た 岡 山 大 学 整 形 外科,井. 性 に 陽性 細 胞が 認 め られ た.. に 心 か ら 深謝 い た し ます.ま. SLE腎. 組 織 に は 陽 性 細 胞 は認 め られ なか っ たが,. 協 力いただ きました. 本 論 文 の要 旨は 第5回,第6回. 日本 臨 床 免疫 学 会,第. 6回 日本 免疫 学 会 に て 発表 した.. 形細 胞 の 高 度 な 浸潤 に 混 って散 在性 に少 数 の 陽性 細. 文. 宅 晋:特. 膜切片 上一博士. 教 室 員 各位 に 深 謝 い た しま す.. シ ェー グ レン病 小 唾 液 腺,橋 本病 甲状 腺 で は 小 型円. 1.三. た,御. た, RA滑. 献. 異 的 抗 マ ク ロ フ ァ ー ジ血 清 に 関 す る 研 究.第. 一 編.特. 清 の 作 製 一 特 異 性 の 検 定 と 組 織 内 マ ク ロ フ ァ ー ジ の 同 定‑岡. 異 的 抗 モ ル モ ッ ト腹 腔 マ ク ロ フ ァ ー ジ 血. 山 医 学 会 雑 誌,. 1979,印. 刷 中.. 2. Greaves, M. F., Falk, J. A. and Falk, R. E.: A surface antigen marker for human monocytes. Scand. J. Immunol. 4, 555-562, 1975. 3.橋. 本 勇,小. 玉 正 智,山. パ 節 内sinusマ. 岸 久 一,田. 中 承 男,藤. ク ロ フ ァ ー ジ の 証 明.医. 田 政 良:. 学 の あ ゆ み,. 4. Panijel, J. and Cayeux, P.: Immunosuppressive. Human‑anti‑macrophage 97,. 858‑860. serum(AMS)に. よ る リン. 1976.. effects of macrophage antiserum. Immunology 14, 769. -780, 1968. 5. Gallily, R.: Two macrophage-affecting -458, 1976. 6.. agents(MER and AMS) Adv. Exp. Med. Biol.. 73,. PT-A 451. Stinnett, J. D., Morahan, P. S. and Kaplan, A. M.: A macrophage cell surface antigen. Adv. Exp.Med. Biol. 73, PT-A 59-68,. 1976.. 7. Stinnett, J. D., Kaplan, A. M. and Morahan, p. S.: Identificatification face antigen. J. Immunol. 116, 273-278, 1976.. of a macrophage-specific. cell sur. 8.. Montfort, I. and Tamayo, R. P.: Two antigenically different types of macrophage. Proc. Soc. Exp. Bi ol. Med. 138, 204-207, 1971.. 9.. Martinez, R. D. and Montfort, I.: A study of the specificity of alveolar macrophage antigens. nology 25, 197-203, 1973.. Immu. 10. Forster, O. and Nitulescu, G.: Demonstration of two distinct macrophage specific antigenic determina nts in rat. Adv. Exp. Med. Biol. 66, 153-158, 1976. 11. Nitulescu, G. and Forster, O.: Antigenic differences between rat alveolar and peritoneal macrophages. Adv. Exp. Med. Biol. 73, PT-A 53-58,. 1976.. 12. Baker, M. A., Falk, R. E., Falk, J. A. and Greaves, M. F.: Detection of monocyte specific antigen on hu man acute leukemia cells. Br, J. Hematol. 32, 13-19,. 1976.. 13. Snyderman, R., Pike, M. C., Fischer, D. G. and Koren, H. S.: Biologic and biochemical activities of con tinuous mocrophage cell lines P 388 Dl and J 774. 1. J. Immunol. 119, 2060-2066, 1977. 14. Muschel, R. J., Rosen, N., Rosen, O. M. and Bloom, B. R.: Modulation of Fc-mediated. phagocytosis. by.

(6) 690. 三. 宅. cyclic AMP and insulin in a macrophage-like. 晋. cell line. J. Immunol.-119,. 15. Mizel, S. B., Oppenheim, J. J. and Rosenstreich, D. L.: Characterization. 1813-1820,. 1977.. of lymphocyte-activating. (LAF) produced by the macrophage cell line, P 388 Dl: I) Enhancement vated T lymphocyte. J. Immunol. 120, 1497-1503, 1978.. factor. of LAF production by acti. 16. Mizel, S. B., Oppenheim, J. J. and Rosenstreich, D. L.: Characterization of lymphocyte-activating fac tor (LAF) produced by the macrophage cell line, P 388 Dl: II) Biochemical characterization of LAF induced by activated T cell and LPS. J. Immunol. 120, 1504-1508,. 1978.. 17. Okada, M., Kishimoto, T., Igarashi, T., Teranishi, T. and Yamamura, Y.: LPS-or8Br-cyclic AMP-ind uced production of T cell activating factor(s)in macrophage tumor cell line J 744. 1. J. Immunol. 120, 1097-1101,. 1978.. 18) Ruco, L. P. and Meltzer, M. S.: Detective tumorocidal. capacity of macrophages from C3H/HeJ. mice.. J. Immunol. 120, 329-334, 1978. 19. Loube, S. R., Mcnabb, T. C. and Dorrington, K.K.: Isolation of a Fcr-binding protein from the cell me mbrane of a macrophage-like cell line (P388 Dl) after detergents solubilization. J. Immunol. 120, 709 -715 , 1978. 20.辻. 芳 之,藤. 原 大 美,高. 析 へ の 応 用.第37回. 津 聖 志,浜. 岡 利 之.:. 日本 癌 学 会 総 会 記 事.. Macrophage特 62,. 面抗 原解. 1978.. 21. Andreis, M., Stantny, P. and Ziff, M.: Experimental layed hypersensitivity.. 異 的 抗 血 清 の 作 成 とMacrophage表. arthritis produced by injection of mediators of de. Arthritis Rheum. 17, 537-551,. 1974.. 22. Cooke, T. D., Hurd, E. R., Jasin, H. E., Bienenstock, J.: and Ziff, M.: Identification of immunoglobulins and complement in rheumatoid articular collagenous tissues. Arthritis Rheum. 18, 541-551, 1975. 23. Ishikawa, H. and Ziff, M.: Electron microscopic observations of immunoreactive toid synovial membrane. Arthritis Rheum. 19, 1-14, 1976,. cells in the rheuma. 24. Runge, I. A.: Search for antigen in rheumatoid synovial macrophage. Ann. Rheum. Dis. 35, 133-137, 1976. 25. Abrahamsen, T. G., Johnson, P. M. and Natvig, J. B.: Membrane characteristice of adherent cells diss ociated from rheumatoid synovial tissue. Clin. Exp. Immunol. 28, 474-483, 1977. 26. Nathan, C. F., Asofsky, R. and Terry, W. D.: Characterization of the non phagocytic adherent cell fr om the peritoneal cavity of normal and BCG treated mice. J. Immunol. 118, 1612-1621, 1977. 27. Cowing, C., Schwartz, B. D. and Dickler, H. B.: Macrophage differ in their expression of Ia antigens. J Immunol.. Ia antigens.. 120, 378-384,. I). Macrophage. populations. 1978.. 28. Rosenstreich, D. L., Farrar, J. J. and Dougherty, S.: Absolute macrophage dependency of T lymphocyte activation by mitogens. J. Immunol. 116, 131-139, 1976..

(7) 特 異 的抗 マ クロ フ ァー ジ血 清 に関 す る研 究. 三 宅. Fig.. 4 多 臓 器 吸 着 抗J‑111血 cytoplasmic. Fig.. 晋 論. 清 に よ る,ヒ. staining.(螢. 5 Mo: Homogenate Ly: Homogenate. 文 附. 図. ト末 梢 単 球 の 強 い. 光 抗 体 間 接 法)(×400). of human of human. peripheral. monocytes.. peripheral. lymphocytes.. 691.

(8) 692. 三. 三 宅. Fig.. 宅. 晋. 晋 論 文. 6(a) PPD皮 内 反 応 強 陽 性 部 の 生 検 標 本.(HE染 色, ×200)真 皮 層 の 小 血 管 周 囲 を 中 心 に 小 型 円 形 細. 附 図. (b) 同 一 標 本 の 螢 光 抗 体 間 接 法.. (×200)小. 細 胞 群 に 混 っ て 陽 性 細 胞 を1〜2個. 型 円 形. 認 め る.. 胞 の 浸 潤 を認 め る.. 7.. (a). (b) Fig.. 7(a) シ ェ ー グ レ ン病 小 唾 腺 生 検 標 本.(HE染. 色, ×200). 間 質 に小 型 円 形 細 胞の強 い 浸 潤 を 認 め る. (b)同 一 標 本 の 螢 光 抗 体 間 法, (×200)間. 質 に 散 在性 に陽. 性 細 胞 を 認 め る.. Fig.. 8. SLR腎. 生 検 標 本.(HE染. ×200)間. 色,. 質 に強 い小 型 円. 形 細 胞 浸 潤 を 認 め る. 注:. 同一 標 本 の 螢 光 抗 体 間. 接 法 で,陽 のmesangium. 性 細 胞 は糸球 体 cellを. て 陰 性 で あ っ た.. 含め.

(9) 特 異 的抗 マ クロ フ ァー ジ血清 に関 す る研 究. 三. Fig.. 9(a) RA滑. 膜 に は,そ. 宅. のsubliningareaに. 晋 論 文 附. 693. 図. 小 型 円 形 細 胞 の 濾 胞 状 増 殖 を 示 す も の が あ る.濾. 胞 中 心 部 お よ び 辺 縁 部 に 陽 性 細 胞 の 集 簇 を 認 め る.(螢. (b)濾腔 中心 部 強拡 大(×400). 光 抗 体 間 接 法.,. ×100).

(10) 694. 三. 三. Fig.. 9(c). RA滑. 宅. 膜 に お け るsublining. れ る も の も あ る.. 宅. 晋 論 文. area. 附 図. に は 小 血 管 周 囲 に散 在性 に 陽 性 細 胞 の 認め ら. (×100). (e)RA滑. (d) 同 大 拡 大(×400). Fig. 10(a)橋 本 病 甲 状 腺 生 検 標 本.(HE染. 晋. 膜 に お け るsublining. areaに. は 小 血 管 周囲 に 集. 籏 し て 陽 性 細 胞 の 認 め ら れ る も の も あ る. (×200). 色, ×200)間. 小 型 円 形 細 胞 の 強 い 浸 潤 を 認 め る.. 偵に. (b)同 一 標 本 の 螢光 抗 体 間接 法. (×200)陽 性 細 胞 は 散 在 在性 で,ま た濾 胞 上 皮 細 胞 は 陰性 で あ っ た..

(11) 特 異 的抗 マ クロ フ ァー ジ血 清 に 関す る研 究. 695. Studies on specific anti-macrophage serum (AMS) II) Distribution of macrophages in the site of pathology Susumu MIYAKE Third Department of Internal Medicine,Okayama UniversityMedical School, Okayama 700, Japan (Director: Prof. T. Ofuji) A cultured human monocytic leukemia cell line, J-III, was used to make heterologous anti serum against human peripheral monocyte surface antigens. To eliminate non-specific anti bodies, this antiserum was extensively absorbed with human erythrocytes, neutrophils, non glass adherent mononuclear cells (mainly lymphocytes) and fetal kidney homogenate. The absorbed serum showed high specificity against human peripheral monocytes, suggesting the presence of similar antigenic determinants on J-III cells and human monocytes. Using this purified serum, an immunofluorescent technique was used to demonstrate macrophages in the site of pathology in various immunological diseases. In synovial tissifes from patients with rheumatoid arthritis, positively stained cells were observed in the center and surrounding area of the germinal center. Small numbers of positive cells had also infiltrated around small vessels. Mesangial cells of renal biopsy specimens from patients with SLE were not stained. In Sjogren's disease, salivary glands showed granulomatous change, in which small numbers of diffusely scattered positive cells were observed. Similar changes were seen in Hashimoto thyroiditis. Patients with Behcet's disease showed only a few positive cells in the site of erythema nodosum. There were a small number of infiltrated positive cells in biopsied skin at the site of a positive tuberculin reaction..

(12)

参照

関連したドキュメント

において好酸球ベルオキシダーゼ(EPO)やミエロペルオキダーゼ(MPO)などのぺルオキシダー

そして,このように別の分野でなされた二つの報告は,かたや死,かたや生とあたかもコインの裏と表

In this report, however, we present a case of HTLV-1 mother-to-child transmission, despite the mother being HTLV- 1 negative on screening in the nationwide mother-to-child

To distinguish macrophage and neutrophil, the adherent cells washed with RPMI to remove non-adherent cells were analyzed histochemically by the staining of two

The chemical structures of the various terpenoids are shown in Fig. To determine the anti- inflammatory properties of these compounds, the study of TNF-a release from

Institute of Developing Economies Japan External Trade Organization... Constitutional Changes and the One-Roof

In this study, we compared the effects of various anti-inflammatory analgesics on mechanical stress-induced inflammation in a synovial sarcoma cell line (SW982

In conclusion, the present study using a human synovial sarcoma cell line (SW982 cells) as a model of MS-induced synovitis demonstrated that acetaminophen suppressed the