嫌気性菌籏二關スル研究（第二醐告）

47

金澤馨科大學細菌學教室

    （主任谷教授）

嫌気性菌籏二關スル研究（第二醐告）

嫌気性細菌ノ襲育要約二開スル研究      並硫化曹達培養基二就テ

       佐 々 木茂雄

         （呵召末口6年9月121ミI≡肇閉『）

       日

第 編 嫌氣性細菌ノ好気的襲育皇厘ボス臓     器ノ影響二關スル研究

第一革緒  言 第二章 實験材料亜方法

第三章 「カタラーゼ」チ以デスル好窺的培養     試験

 實験第一 非加熱性並加熱性臓器チ以テス       ル培養試験

 實験第二 肝臓「カタラーゼ．粉末チ以テス       ル培養試験

 實験第三 脂肪「カタラーゼ」波チ貝ナスル・

      培養試験

 實験第四 Cystein附加「カタラーゼ」液チ       以デスル培養試験

 實験第五 嫌気性細菌ノ襲青二及ボス過酸       化水素ノ影響

    総  括

第四章肝麟反騰水浸液テ以ナスル好氣的培     養試験

 實験第一 非加熱性肝臓水澄液チ以ナスル       培養試験

 實験第二 カロ熱性肝臓水浸液チ以ナスル塔       養試験

 實験第三 Amold民法二引レ肝臓Cystein       波テ以ナスル培養試験1

 實験第四 非加熱性騰水浸液液ヂ以ナスル       培養試験

 實験第五 加熱性臓水浸液チ以ナスル培養       試験

 ＝薗1墨壷第六  Arno1d．民法二目ルj磯Cy昌一ei口尋夜

      テ以ナスル培養試験        【47

次

    鈍  播 第五章 綜括及考察

第二編嫌気性細菌ノ好氣的蟹青二及ボス各     種ノ化學的物質ノ影響二關ス1レ研究 第一章二緒  言

第二章 種々ナル化學的物質チ以ナスル好嵐     的培養試験

 實験第一 Lecith言協並。Cho1oミterinチ以テ       スル培養試験

 賞験第二 膿汁ヂ以ナスル培養試験  賀験第三 葡萄糖及「グリコゲ y」ラー以テ       スル培養試験

 實験第四 燐酸顧類チ以ナスル培養試験  實験第五乾酪素チ砂ナスル培養試験  實験第六 黄燐チ以テス1レ培養試験  實験第七 硫黄ヂ以テλル培養試験  實験第八 rベブトン」チ以ナスル培養試験  實験第九Cystinチ以ナスル培養試験  實験第十Vitami口過チ以ナスル培養試験  實験第十一 嫌氣性細菌ノ好薫的培養二關        スルーニノ要約賢駿

  一・試験管内二於ケル培養基容量ト空間     容積トノ關係

  二．綿栓及密栓トノ關係

第三章 嫌氣性細菌ノ硫化曹達培養試験  貨験第一 硫化曹達ノ還元作川並増地水素       「イナン」濃度トノ開係

 實験第二 硫化曹達並硫化水素ノ嫌無性納       歯ノ蟹青二及ボス影響

 實験第三 鎌無性細菌ノ硫化水素鍍坐現象  實験第四 硫化曹達「ブイヨン」培養試験

】

48

 實験第五 硫化曹達寒天培養試験 貿験第六硫化加異ノ膳用 第四章 綜括及考察

佐  々  ホ

第五章 全編総括及緒論    1丈  蹴

第一編 蟻気性細菌ノ好氣的襲青二及ボス臓器ノ影響二關スル研究 第・革緒   言

 嬢氣性細菌ノ生活並護育ガ酸素トー定ノ欄係テ有スルコトハ跣二1861年Paste町㈹二擦 リテ護見セラレテ以來劃然好氣性菌族ヨリ腫別セラレ更二幾多ノ研究者ニョリテ酸素二勤ス ル環境ノ愛化並酸素張カノ最大隈度等ノ要約二ヨリ更二偏性ト遍性トニ分類セラレシガ現今 吾人ガ偏性嬢熱性菌稜㈱ト穣スルハ酸素トー定ノ開係ラ育シ普通大氣中二於テ褒育セスシ テ酸素ノ皆無着クハ通常大氣ノ霜歴ヨリモ遥二低キ酸素分歴ノ下二於テ護育シ得ル細菌ナ

リ，從テ吾人ガ曇二嬢氣性細菌ト構スル物モ亦偏性敏氣健細菌テ指示スルモノナリ，去レハ 嫌氣性細菌ノ培養二當リ之ガ襲育スル各種ノ性状ト現象テ鷹司シテ好適ノ護育條件テ作リ之

ヲ促進セシメントテ各種ノ培養方法行ハレタリ，卯チ眞空法，置換法，減睡法，還元法，臓 器法，㈹伽並比等ノ改良法等幾多ノ考案アリテ各自共特徴二於テ慣位無二アラズト離モ完 全至便ノ物モ稀ニテ共好気的培養法二至リテ八千板塀養ハ固ヨリ液鰹培養法ト離モ進ダ蓼々 タルノ観テ星ス，之レ蛛菌ノ褒育要約二対スル究1リ1ノ滝キニョルモT・・oz・i卿丁片カ蜥「ブ

イヨン」，HibIer氏脳粥ノ如キ著明ナル培養法ト雄モ共獲青二及ボス要約二至リテハ今日愉 種々ノ方面ヨリ付度セラルルノミニシテ米ダ嗣明セラレザル如シー883年B・・m・㎜mハ Cystin並Cystein二醐スル性能テ閥明セシ以來He趾。r（161，Mathewl＆Wa1keピ33㌧

Amo1dU〕ω，Abderbald㎝＆Wertheimeピ3兀舳等ニョリテ生活細胞二於ケル自己酸化機 鱒ガSH1基（SuefhydrylgrupPe）合有物質並Cystcin二依テ螢マレ臓器ノ還元作用ハ主トシ テCysteinノ合荷スルSH基申ノHガ酸素二靭スル親和カニョリテ護揮セラノりレモノナル コトテ明ニセリ，．次デWie坤d氏（3洲舳（68〕ノ生理化學的考察ニコル酸化機簿ノ偉大ナル 硫究ト相侯テ出現セルバH・pkinsノ細胞ノ自己酸化機樽ノ學詑ナリ。

 1921年Hopkins U島エバ酵母ヨリ生騒細胞ノ酸化還元機鱒二重大ナル意義テ有スル所謂自己 酸fヒ物質テ分離シテ之テGIut・tio・ト命名シ化物ハ「グルタ｛ン」酸並．Cyst・三nヨリ成立セ ル毛ノニシテ殆ド総チノ動物組織中二含有セラレ生餓二於テ之ガ酸化並還元ノ作用テ司ル所       S−R

以ハ賢二Cysteinガ布スルSH基ニョルモノニシテ2R−SH＋O＝L÷1 ＋H202ナル方式       S−R

二從テCy・t・in及Cy・tin間二意趣スル化學的劉ビニ基クモノニシテ同氏ノ所謂蟹現自在

（・i㏄・e・・a）ノ機鱒二機ルモノトシ乱此glut乱t1㎝ハdo R・y−Pai1・d・ 1ユ氏ノPhi16thi㎝二 一致セル特性テ布ストセリ，…火デ細谷（1925）｛23ニハ嫌気性細菌ガ酸素二対スル敏感ナル理由 二基イチ共培地中ノ酸素ラ除去ゼンガ馬Hopkins民ノ學統二基キ強大ナル親和カテ育スル Cyste三nテ鷹司シテ好気的培養二成功シ愛二嫌気性細菌ノ培養史上二一大光彩テ齋ラセリ，

而テTarozz1氏肝片加肝「ブイヨン」ノ臓器片ノ効果モ亦此等ノ作用ニョルモノナラント権        【48】

嫌気性菌族二關スル研究 49 考セリ，次デQuaste1＆Stephens㎝㈹〕，Va11eジ62〕，Frei＆Riedm舳er（1930）（12〕モ亦 正；・c．Sporo9㎝esテ初メ各種ノ嫌気性細菌二付テCyste1n塀養ノ優秀ナル効果テ認メタリ．

 翻テ1921年M L㏄d＆1Govenlocktヨ1㈹ハ細菌ノ護育ガ停止シテ憲二死滅二至ル原因ハ 培地中二細菌ノ護育ヲ阻害スル化學的物質ノ生成ニコルコトヲ認メ化物質ハH星02ノ如キ過 酸化物ニシテ且嫌気性細菌ハ之テ分解スル能カテ有セチルコトラ知レリ，次デM Lood＆

Gordon㈹㈹ハ嫌気性細菌ガ「カタラーゼ」テ形成スル能カテ有セナルトH202C二勤シテ敏 感ナル性状ヨリシテ同菌ノ死滅ハ酸素二対スル開係ヨリモ寧口過酸化物ニョリテ結果セラル ルコトデ實験シ此理由ノ下二「カタラ｝ぜ」培養基テ以テ好氣的場養テ試ミ以テ細菌ノ生活方 面二一般生麗ノ酸化機簿ノ理論ノ廠用テ開拓セントセリ，同氏ノ學諭ハ更二Ca11owω），細 谷等ニョリテ試ミラレ賛否決セスト難モM Leod民ノ研究タルヤ興味アルモノト云7ベシ

 T。・…i・・h Lebe・一Leb・・1Boui1I㎝（57）並Hibl…ch Himb・ei（15〕ガ嫌菌ノ護育ラ好棄的 ナラシムル所以ハ共培地ガ加熱セラルル眼リバ「カタラーゼ」ノ如キ酵素ノ機能テ借ラザルコ

トバ肯定シ得ルモ然ラバ共要約ガ那蓬二律スルモノナルヤハ亦興味アルコトニ麗ス，既二 1907年WrE0sek舳4〕ハ植物組織片ラ以テTaro・・i氏ノ肝片加肝「ブイヨン」ノ臓器二代へ 嫌菌ノ好気的護育テ可能ナラシムルモノハ耐熱性ノ物質ニシテ「メチーレンブラウ」テ還元シ 得ルー列ノ物質ニョルコトテ認メタリ，Ju㎎・＆Dist・so（舳モ亦Tam・zi氏断片加肝「ブ

イヨン」ノ組織片ノ贋値二付キ研究セシガ詳細テ得ルコトナクシテ終レリ，余八本問題二關 シテ亦興味テ有スルモノニシテ抑カ検スル所アリ記シテ参考二賓セントス，最近（193L May）二至リFrei＆Riedm高11er㈹ハHopkins／g1utation並Cystein二代キ酸化還元 ノ機轄テ考察シSH基含有物質テ皿テ嫌菌ノ好氣培養チ試ミタル業績テ護表セリ．

第；章 費験材料並方法

 實験二供セル嫌蔵性菌株＾余ガ前回二報告（55〕セル性状二一致シ縄動的二普通「ブイヨン」チ以テシテハ 襲育セサルモノニシテ珂所懐痘菌2株（W1＝遠藤，W2＝5號株）腐敗菌1株（W概＝P岨t）。被傷風蘭1株（■），

Novy氏薗1株（N㎝y），副氣種痘菌1株（RR株＝P舳），氣腫疸菌2株（O株，R17橡巳R〕ノ7菌橡8株ナサ・

 培養供試材料ハ英製法並滅菌法ハ廣汎ニテー牢羊ザルテ以テ其賀験ノ該項二於テ記載スルコト・セリ．

基礎培地ハ主トシテph．73／2％葡萄糖rプイヨソ」（時ニハ牛肉嚢汁「ブイヨン」ヂ使用セルモ主トシテ リービッヒ牛肉エキス」チ使用セリ）テ貝テセリ．菌橡ハ純粋ニシテ他ノ細菌テ混入セザルコト勿論ナレド モ實験ノ都度「プイヨソ」亜寒天斜面チ以テ培養ヲ 試ミ金ク好氣的蟹育テ爲ザルコトテ確實ニセリ．且移植 菌橡ハ英都度肝片加肝「ブイヨン」48時間培養ノ物チ供試培地5・O㏄二勤シテー滴（α05−O・07）ヂ滴入セリ・

賢験成績ノ判定ハー定時二於ケル瓦斯形成皮濁濁皮菌沈澱旗ヂ以テ標準トシ時ニハ晴視野装置叉ハ染色法 テ以テ補足シ更二寒天斜面叉「ブイヨン」テ以テ聰培チ試ミ値ノ好気性細菌ノ混入ニョラザル目トチ確實ニ セリ．筒培養法ハ何等生鼠チ遮断ス〃コトナク37皮囎卵器内：置キ襲育観察ノ限度チ5日月歪7日間ラ』以 テ終レリ．

【49】

50 佐  々  未

第三章 K・t・1… ヲ払ナスル好気的培養試験

       賓験第1．非加撚性臓羅並加熱性臓器テ皿ナスル塙養試験  臓器ノ過酸化水素分解作用及還元作用

 1．家兎ノ生肝臓（非加熱性）組織ノー片（3瓦）テ紬挫シテ過酷叱水素水ノー定量（L0999名 ノ過酸化水素水20．c．c）申二投ズルニ旺盛ナル瓦斯テ襲生シテ過酸化水素ノ分解スルヲ見ル，

之テ定量スルニ過酸化水素ハ完全二分解セラレタル1チ知ル，之レ臓騒組織片中二過酸化水素 テ分解スル酵素KataIaseノ含有サルルニョル，然レドモ煮沸（100度30分）セル肝臓組織二 於テハ化現象テ見ルコトナシ，臓組織二於デモ亦同ジ．

 2．生肝臓並煮沸肝臓ノー片（3．瓦）ヲ細挫シ各5．Oc．cノ弱「アルカリ性（Ph7．7）ノ蒸溜水申 二投ジ1．％「メチーレン，ブラウ」水溶液ノ1滝テ以テ著名シ之テ室温（25度）二置テ共還元作 用ラ観ルニ漸次下暦ヨリ奇藍色ノ腕色セラノりレテ見ル，而テ前者二於テハユ6時間後，後者ニ

アリテハ13時間後二於テ還元作用ノ丹槻チ見ル，印チ生臓番二於テハ過酷陀水素ノ分解能カ ラ認ムルモ加熱性二於テハ最早之チ讃明スルコけ得ズ，然レドモ共還元挫二至リテハ組織 ノ加熱ノ有無二關ラズ之チ証明スルモノニシテ非加熱性臓器ハ加熱性二比シテ還元作用ノ出 現却テ遅延セラルルノ観テ星ス、

 踊養成績

 1．家兎肝臓テ無菌的二摘．リ｛シ共藪片（約3．瓦）テ基礎増地二投ジ直二菌株テ移植シ培養ス ルチ48時間以後二於テ瓦斯壌疽菌，衡蚊菌，破傷風菌，No・y氏菌，副氣腫疵菌ハ枢皮ノ瓦 斯形成及混濁テ以テ護育ス，氣腫疸菌（0株）二於テハ陰性ナリキ・

 2．家兎肝臓片テ含有セル同一ノ堀地テ1OO皮30分間宛3日間ノ滅菌カロ熱ヲ施シ前記同様 ノ菌株チ以テ培養セルニ24時間以内二於テ全部ノ菌株二於テ瓦斯形成混濁チ以テ護育ス・

BatteIIi＆Stem（帥二擦1ノバ家兎二於クノレ「カタラーゼ」合有量ハ肝370，腎390，血液460，

脾146，筋肉16，脚Oニシテ人間二於デバ肝700，腎240，血液g20，筋肉55，艦25ノ割合ナ リト云7，非熱性肝片培地ハ「カタラーゼ」並諸種ノ還元性物質テ含有シ加熱憧肝片増地ハ還 元性物質テ含有スルモ「カタラーゼ」ノ作用テ有セズ，而テ前者ハ48時間以上ノ培養時間ヲ要

シ後者ハ24時間ニシテ護育テ球サシム，敬二嫌氣性細菌ハ共培地中二還元性能ガアル臓器ノ 存在セル時ハ「カタラーゼ」ノ有無二開セズ好気的護育テ爲シ得，而テ「カタラーゼ」テ含有ス ル非加熱性ノ培地ガ去Pテ共擾育ノ遅延セルバ之レ非加熱雌ノ臓暑澤片ガU舳還元作用ノ拙現 二多少ノ時間的経過テ要スル馬ナルベシ．

         賢験第2．肝臓K・t・Ia・e粉末テ皿ナスル培養試験  皿干麟…「カタラーゼ」粉末ノ製法

 肝臓「カタラーゼ」粉末ハBatte11i＆Stem㈱）ノ方法二從ヒテ1呼製シ可及的純樺ノ物テ得 タリ，師チ牛肝テ粗切シ充分水洗シテ血液等テ去リ納挫粥状トナシ之二1倍半畳ノ蒸溜水テ 加へ振猛器二装置スルコト5時間更二氷室内二長州スルコト48時間ノ後漉過遠心シテ澄明ナ       【50】

嫌嵐性菌籏二關スル研究 51

ル上滴テ分離シ之二2倍量ノ96％「アルコール」デ加へ一夜氷室内二沈澱テ生ぜシメ此沈潜テ 濾紙間二歴シテ水分テ去リ更二直二3倍ノ蒸溜水二溶解セシメ振塗スルコト5時間不溶解性 分ラ去リ此濾液二2倍量ノ「アルコ｝ル」テ加ベテ再沈澱ヲ生ぜシム，此沈溢テ脱水シテ腹二 硫酸乾燥暑納ニテ乾燥セシム，化物ハ水二不溶解惟ニシテ無品形褐色ノ粉末ナリ．

 肝臓「カタラーゼ」粉末ノ化學的所見 1．「ビウレット」反確…

1．ミロン氏反騰 ユ、纏硫黄量

L「メチロレンプラウ」還元作用 1．過酸化水素分解能力

「カタラーゼ」ノ測定法

弱陽憧

痕跡

0．42％

陰 性

陽性0．5／129．6

 大騒二於テS㎝ter並Eu1er｛舳9）氏ノ過「マンガン酸カロ里法二準擦セリ，師チ三井會杜 護責ノ過酸化水素液（3．2999物）テ蒸溜水ヲ皿テ3倍二稀耀シ1．0999老ノ遮酸化水素水テ求メ 化水溶液20．0c．c二「カタラーゼ」含有液一0．Oc．c（或ハ「カタラ｝ぜ」粉末ノー定量ラ蒸溜水ユ0，0 c・c二混和シ）テ加へ室温暗所二2時間放置後10κ硫酸10・O…ヲ加へNμ0過「マンガン酸 加里液（舳テ以テ滴定セリ，共所要量＝チ皿テ「カタラーゼ」分解能カノ度ヲ示シ対照ト比較セ

リ，而テL099泌過酸化水素20，0c．cヲ分解スルNμ0Km・04ノ所要量ハ129．6c．cナリ．

 「カタラーゼ」粉末ノ滅菌法

 「カタラ ぜ」ハ共乾燥状態ニアル時ハ温熱二対スル抵抗此較的彊シト離モ潔温二於テハ甚 ダ弱シTacobs㎝，Loew（冒）二擦レハ撮氏71一ク5度二於テ作用テ漁夫スト素フ，余ハrカタ ラーゼ」粉末ノ0．05瓦ヲ蒸溜水2．5c．c二混ジ之ラ水槽テ以テ63度15分宛3日間ノ滅菌テ施シ 共通酸化水素分解カラ稔セルニ減退テ認メス之二2倍濃度ノ基礎培地2．5・．cヲ附加シテ培養 二供セリ，「エチールアルコール」，「アオルマリン」｛8ユモ亦「カタラーゼ」ノ作用テ損減スル トナシト云フ，余モ亦之チ消毒二使用シテ共作用ノ減退ヲ認メチリヰ，殊二1％「フォルマ リン，加アルコール」ハ短時間ニシテ完全ナル滅菌デ得タリ．

 培養成績

 63度カロ熱滅菌及「アオルマリン」消毒テ施セル「カタラーゼ」粉末培地ハ其好気的増養二於テ

：瓦斯壌疸菌，腐敗菌，破傷風菌，副氣腫疸菌，N・・y民菌，気腫疽菌二付テ7日間ノ観察二 於テ護育テ認メザリキ，而テ同一塀養二流動「パラヒン」ヲ重暦セル対照二社リテハ48時間以 後二於テ軽度ナル護育テ認メ得タリ．

 卵チ嫌氣性細菌ハ張カナル過酸化水素分解能カテ有スル「カタラ｝ぜ」テ以テスルモ好氣的 護育テ可能ナラシムルヲ得ズ，而テ対照二於ケル褒育八本培地ガ細菌ノ褒育ヲ障碍セサルコ

トテ証明スルモノナリ．

         貿験第3．脂肪K邊talase液テ以ナスル培養試験  脂肪「カタラーゼ」液ノ製法

      【51】

52 佐  々  米

 脂肪「カタラーゼ」波ノ製法ハ犬髄二於テEule・Uo〕ノ方法二準擦シ宮永㈹氏ノ法テ採用 セリ，日ロチ筋肉片デ混ぜザル豚ノ脹肋テ肉硬器テ以テ細挫シ更二金剛砂テ皿テ混摺シ之二同 量ノ蒸溜水テ州へ撹絆シ更二6時間振盤器二装置シテ浸出シ之ヲ3破榊1聯二3時間饒放置 シテ3暦二別1ノタル中暦並下暦ヲ注意シテ分離シ濾過遠心シテ淡白澄明ナル溶液テ得，愛二 得タル「カタラーゼ」液ハ彊カナルH202分解カ1チ布スルモ倫弱陽性ノ「ビウレット」反鷹並

「一メチーレンプラウ」還元作用1チ星スルチ以テ更二純粋二近キrカタラーゼ」波テ得ントテ動物 膜ラ以テ透析法舳舳〕ヲ行ヘリ，70饒時間ノ透析ニョリテrビウレット」反騰及rメ」還元カ ハ殆ド陰性トナリ過酸化水素分解能カニ於テ金ク蟹化テ認メザリキ．

脂肪「カタラロぜ」液ノ化學的所見（透析セルモノ）

1．「ビウレット」反騰

1．「ニトロプロシッド」Na反癬 1．硫黄反騰

1．「メチーレンプラウ」還元作用 1、過酸fヒ水素分解能力

塀養成糠

殆ド陰性・

陰  性 陰  性 殆ド陰性

陽性3．0／129．7

 上記透析テ行ヘル「カタラーゼ」液チ1Berkefeld氏濾過器テ以テ反復濾過シテ完全ナル無 菌液テ得之ラ豫メ滅菌セ）レ2倍濃度ノ基礎増地2．5c．・二同量宛附加シ直二菌株テ移植シ塀養 ヲ行フニ瓦斯壊疽薗，腐敗菌，破傷風菌，No・y氏菌，副氣腫疸薩，気腫疽菌二付テク日間 ノ鰯察二於テ蟹育ヲ認メザリヰ，流動パラヒン」重暦ノ劉照増養二・於テハ48時閥鹸ニテ護育 テ認メ得，両テ此対照二於ケル護育ハ「カタラーゼ」液ガ嫌菌ノ護育二部シテ有害ナラサルコ トヲ示スモノニシテ期ク純樺二近キ脂肪「カタラーゼ」バテ以テシテハ嫌氣性細菌ハ全然好 氣的襲育チ爲シ得ザルコけ認メタリ．

      實験第4．Cys舵in附加脂肪「カタラーゼ」波テ皿ナスル培養試験

 腕umam工7〕並奥田㈹氏ノ方法二從テCystin盤酸堕テ10．％盤酸二溶解シテ1．01％ノ Cystin蟻酸液テ作リ之二亜鉛泣テ作用セシメ更二此溶液二硫化水素瓦斯ラ通ジテCy・tein 駿酸液テ得タリ，此溶液テ苛性瞥達液テ以テ易易「アルカリ性トナシBerkefeM濾過器テ皿テ 濾過シ此無菌液ノ0．5c．cテ基礎靖地2．Oと．c（培養液5．0c．c申二約O．005瓦ノCystin帥チO．1％

二合ム）二加へ更二脂肪「カタラーゼ」液2．5c。・ヲ附加シ直二菌株テ移植シ増嚢テナス二次ノ 如シ．（第一表参照）

 自PチCystei日葡萄糖「ブイヨン」二於テハ24時間二於テ漸ク蟹育テ星スル二反シテrカタラ ーゼ」Cystein葡萄糖「ブイヨン」二於テハ16時間ニシテ旺盛ナル瓦斯形成並混濁チ以テ護育

シ無数ノ成長型ノ細菌ヲ認メ得．

 之レ「カタラーゼ」自身ハ嫌菌テ好氣向勺二護育セシムルノ性能ヲ有セザルモCy・teinノ如 手還元作用チ星スル物質二魔件セラルル時ハ細菌ガ形成スル週酸化物ヲ破壊スルコトニョリ テ顯著ナル護育テ促進セシムル作用テ育スルモノナルニヨルベシ，M Leod＆Gord㎝一37二㈹

      【52】

嫌氣性菌籏呈關スル研究 53

第一表Cystei・一K・t・1…培養表

＼時

カ 法 ^{萄ぺ 8 16 24 48 72 120}

一一一 ■一 一 ■■■I

… Lへ ^{■ 1I…L一 ⊥LI■一■ 川}

W・11 十 什 料 什 什 什

Put 6 ^{什 什 丹 壮 什}

Cy昌teinKat・1欄 T 一 十 什 朴 丹． ^什

g1ucoselBou川。n Novy _一 十 丹 什 丹 什

I ora

一 十 什 什 什 朴

T，  1r、

Rau．R

       We11  −        Put    −

Cystein T＿

g1・・。ミ・B。・i11。・ N。Ψy −

       Para    ■        Rau．R  l一

± 十

十 十 十 十 士

・j・

十 十 十 十 十 土

十 十   十 十   十 十   十 十    十 十    十 土 一  ±

       W・I1  −        Put    − KataIaso     T     ＿ 9！・・。日・B・・111・・  ・y −

       Pa岨    一        R蜘．R  ＿        We11  −        lPut    −        T     −

gl㏄o肥皿。ui11㎝

       Novy  −        P町a   ＿        Rau．R   一

モ亦glutati㎝ノ存在二於ケル「カタラロぜ」ハ細菌ガ嚢生スル過酸化水素テ分解スルコトニ ヨ、リテ護育テ促進セシムルコトラ認メタリ，狗斯ノ如クCyste1nヲ以ナスル培養基二「カタ ラーゼ」ノ附カロセラレタル際細菌ヨリ生シタル過酸化水素並Cy・teinノ自己酸化機韓二件ヒ テ護士セル過酸化水素ノー都ハ亦分解シテ酸素ヲ遊離シ嬢気的環境ノ成立二矛盾セル要約テ 呈スルガ如キモ余ノ實駿二於テハ此理論二基タガ如キ護育障碍テ認ムルラ待ザリヰ．

       實験第5．嫌気性細菌ノ護育二及ボス適酸化水素ノ影響

 M Leod＆Go・d㎝㈹，C・11ow t9ユニ擦レハ「カタラーゼ」ノ形戒能カナギ嫌菌ハ過酸化水 素二野シテ蓬ダ弱キ撞航テ有スト云7、余八三井會耐護貿ノ過酸化水素液（3．2999％）ヲ漉過 無菌トナシタル物ラ以テ逓減的稀緯テナシ所定ノ濃度増養基（全量5．Occ）ラ作リ之二菌株テ 移植シ硝子槽内城墜培養テ地シ共護育テ観察セシニ瓦斯壊疽菌，（W1），副氣腫疽菌（P・m），

破傷風菌（T）二於テハ0．0033名，氣腫疽菌（R）二於テハO．00165％二於テ護育テ阻止セリ，

之テM Leod＆Gord㎝並CalIow民ノ成績二比較スル二大差テ認メス．

      総  括       【53】

54 佐  々  木

 M L・od＆Gord㎝ハ嫌氣性細菌ガ好気的護育ノ不可能テルハ直接遊離酸素ニョリテ阻 害セラノりレニアラスシテ菌髄ノ酸素二接鰯スノレヤ適酸化水素テ形成シ而モ嬢菌ハ之テ分解ス ベキ「カタラーゼ」ラ生産シ得ザルニヨルモノトナシ此理｛ノ下二「カタラーゼ」培養テ熱ミシ ガ健二瓦斯壊疽菌二於デノミ護育シテ他ノ嫌菌ニハ陰性ナリキ，Callow㈹モ亦嬢菌二付キ ナ過酸化水素ノ形成並「カタラーゼ」培養子試ミシガ護育二關スル適確ナル實讃ヲL禍チリキ，

細谷㈹モ亦白金黒テ皿テ嫌菌ノ好氣培養テ試｛蓬二M L・oaノ學読ラ否定スルニ至レリ・

 以上余ノ實験二於テ臓器ハ共「カタラーゼ」ノ有無二關ラズ嫌氣性細菌ノ護育テ可能ナラシ ムルモノニシテ必シモ「カタラーゼ」ノ存在：チ必要トスルモノニアラザリキ，而テ倫彊カナル

「カタラーゼ」含有ノ肝臓「カタ；一七」粉末及脂肪「カタラーゼ 」波テ皿テスルモ嫌菌ノ好気的 護育ヲ可能ナラシムルナ得ザリキ，叉「カタラーゼ」ハ酸素二割シテ直接親和カテ有スルコ

トナク且其レ自身ハ嬢菌ノ好気的培養二部シテ何等要約ラ奥7ル能力無シ｝難モCysteinノ 如キ還元性テ有スル物質等ノー定條件二附随セラルル時ハ其護育テ顯著二補足スル作用テ 有ス，0・w・Id，A・町＆M・・g・・（君3〕ハ球菌ノ襲育ハ亦植物性組織中二含有セラルル酸化 還元性物質ニョリテモ促進セラ1ノ共理由ヲ細菌ノ形成スル過酸化物ノ破壊ニコルモノトシ M Leod＆Gordon㈹137〕ハ培養基ガHoPkins／91utation・二宮メル時ハ培地中ノ「カタラ ーゼ」ハ共護育テ著シク促進スルモ「カタラーゼ」自身ハ培地中二侵入スル酸素テ阻止スル機 能テ有セチルモノトシ鈴木舳，宮永㈹等モ亦細菌ノ護育ガ「カタラーゼ」ノ補助ニョリテ 著シク促進セラルルラ認メタリ，サレハrカタラーゼ」ガ期ノ如ク第2陣二於テ嫌菌ノ獲育テ 促進セシムル所以ハ培地ノ榮養便ノ向上二アラスシテrカタラ，ゼ」以外ノ條件ニョリテ蟹育

セル細菌ニョリテ形成セラレタル過酸化物ノ分解ラ來サシムルコトニョリテ護現スルニアラ ズヤト思惟セラル．

第四章 肝臓及破水浸液ヲ以ナスル好氣的培養試験

 細胞並臓器組織ハ「カタラ｝ぜ」テ初メ各種ノ酵素ノ他多最ノCy・tein｛2x舳〕テ含有ス，

化物質ハAmo1aω二擦レハNit・・prussid−N・・及「アンモニア」二反騰テ星シ加熱三野シテ 強キ抵扮性テ有ス，既二HeHter06）ハ臓器中二於テ還元性テ有スル物質ノ存牟テ認メ；輿；酸 素二対スル親和カハSH基含有ノ物質ノ作用二麟セリ．

        賢験第1．非加熱性肝臓水浸液テ皿ナスル培養試験  生肝臓水浸液ノ製法

 生肝臓申ノ諸成分デ可及的愛化セシメスシテ水浸セントテBatte11i＆Stem｛君工並Amold

｛1，ノ方法テ加味シテ生肝臓テ水洗紬挫シ之二1倍半量ノ蒸溜水ラ投ジ鐙絆シテ48時間氷室内 二放置シ数回錦紗テ皿テ濾過シ遠心シテ沈溢テ去リ淡紅色澄明ナル水溶液テ得タリ，此溶液 ハ次ノ化撃的所見ニョリテCystein並「カタラーゼ」ノ如キ物質ヲ含有スルモノナルコトヲ 窺知シ得．

 生肝臓水浸液ノ化撃的所見       【54】

1，「ビウレット」反漉1 1．ミロン氏反騰 1．硫黄反磨

1．「ニトロプロシッド」Na反騰 1．「メチーレンブラウ」還元作用 1．過酸化水素分解能力

1．纏硫黄量

生肝臓水浸液増餐威綾

嫌気性菌族二關スル研究 陽  性 陽  性 陽  性 陽  性 陽  性

陽性15／ユ29．7 0．04％

55

 上記水浸液チ苛性曹達テ以テ弱「アルカリ性トナシ共無菌濾過液ノ2．5・．cテ2悟濃度基礎 増地同量二加へ直二菌株テ移植シ培養テ施スニ瓦斯壊疽菌，衡敗菌，破傷鼠菌，Novy氏 菌，副氣腫疸菌，気腫疽菌ノ全部二於テ12時間以内二於テ瓦斯形成及顯著ナル混濁テ皿テ褒

育ス．

 上記ノ水浸原液ハ「カタラーゼ」テ初メ蛋白質其他ノ複雑ナル物質ヲ含有スルチ以テ此等ノ 中何レノ成分ガ護育テ由來セシモノナルヤ特二膠質性物質ト動物膜テ瀬散シ得ル結晶唯物質

㈹トニ分別ゼンガ篇透析法ヲ以テ両替テ分離セリ．

 水浸液ノ透析法

 肝臓水浸液ハ豊富ナル蛋白質テ含有シ腐敗シ易キナ以テ共操作實施二當リ可及的完全ナル 無菌的巖置テ施セリ，先ヅ動物膜テO．1％「フォルマリン」水二暫時浸シ滅菌蒸溜水チ以テ充 分二法権シ次デ水浸液テ春レ之テ豫メ滅菌蒸溜水（水浸液ト等量）テ盤レル有蓋硝子瓶中二入 レ「パラヒン」紙テ以テ被蓋シ之テ1分間90回ノ振縁器二装置シ室温二於テ透析スルコト70時 間麦二黄色澄明ナル透析水溶液テ得タリ，俊二外側液｝穣ス，此溶液ハ次ノ所見ニョリテ Cysteinノ如キ物質テ合有シ「カタラーゼ」テ認メ得ズ．

 透析外側液ノ化學的所見

 1．「ビウレット」反騰   陽樫  1．ミロン氏反騰       弱陽性

 工．「ズル赤サリチル」酸反磨      陰  性

 1．硫黄反騰    陽性

 1．「ニトロブロシッド」N・反確   易易陽性

 1．燐反確    陽性

 1．「メチーレンブラウ」還元作用   弱陽性  1．過酸化水素分解能力        陰性130／129．7  1．纏硫黄量      O．02名

 外側液培養成績一

 透析外倶腋テ苛性曹達テ以テ易易「アルカリ性トナシ其無菌濾過液二2倍濃度基礎培地2．5・．・

宛ヲ附加シ直二菌株テ移植シ好氣的塙養テ施スニ瓦斯壊疽菌，腐敗菌，破傷風菌，No．y兵       【55】

56 佐  々  米

蔵，副氣腫疸菌，気腫疸菌（O）二代キナ24時間テ経テ軽微ナル瓦斯形成並混濁デ以テ護育セ

リ．

 内傾腋培養成績

 上記透析法テ行ヒタル動物膜内ノ残液卵チ内側液ハ適酸化水素分解能．カニ於テ殆ド犬塞

（I8／129・7）ナク，「メチ｝レンブラウ」還元作刀jハ減退セリ，此無菌濾液テ貝テ培養テ施スニ 瓦斯壌疸菌，腐敗菌，破傷風菌，NoW氏菌，副氣腫疸菌，気腫疽菌二付キナ回シク好気的 護育テ認メ得．

第二表非加熱性肝臓水浸液培養表

i

一（I）水浸液一 ^{（II）透新外側液一 （m）透析内側液}

一一 」  一         一

一12 20≡24 48 72． 1220 ^{24481721 12 ・・・…1・・}

」

We11 十 井 什 什 什 十 十 什 什 什 ^十 十 什  ^「什什 We12 十 什 什 什 什

P，t ≡ _{十 什． 什 什 甘．}

□ 十 十 十 十 一 十 十 十 十

T 1一 ^{± 十r 十 十1一 一 一 十 十 ＾ 一 一 十 十}

㎞・ ^P・ 十 十 十 十1一 ^{十 十 十 十 一 士 十 十 十}

P岨乱 1＿  ≡

十 什 料 丹．一 一 ^± 十 斗1 一 一 ^± 十 十

Rau．O 十 十 什 什 什一一 一 土 十 十1^{■土 十 十 十 十} Rau．R _{一 ，} ^{± 土}  i

}1 ^{、一 一 一 ± 土}

 以上ノ實駿二於テ水浸液ニョル塀奏効果ハ「カタラーゼ」並Cystein共他ノ共同作用ニシ テ透析外側液ノ効果ハ動物膜テ瀬散セルCysto1nノ如キ作用ノ物質二蹄囚スルモノナルベ

シ，且共愛育度ハ水浸液二通二劣ルト雌モ透析内側液二比シテ大差ナク而テ又透析内側液ガ 英護育度二於テ水浸液二比シテ遥二劣ルハ細菌ノ護育度ガ「カタラーゼ」ノ量ニコルモノニア

ラスシテ溺散セルCystein量ノ減少二關係スルモノナラン．

         賢験第2．加熱性肝臓水浸液ヲ貝ナスル培養1試験  加熱肝臓水浸液ノ製法

 生肝臓テ粗切水洗シ少量ノ蒸溜水ト共二蒸氣金中ニテ30分間知熟シテ之テ實験第1二於ケ ルト同法テ以テ長州液テ作製セリ，此溶液ハ次ノ所見ニョリテCysteinノ如キ物質テ含有

シ「カタラーゼ」テ書怒メ看暮ズ．

 カロ熟肝臓水浸液ノ化學的所見 1．「ピウ1ノツト」反磨 1．モロン氏反膝 1、硫黄反騰

1．「ニトロプロシッド」Na反騰 1．「メラーレンブラウ」還元作用

弱陽性

陰  性

弱陽性 弱陽性

陽  性

【56】

嫌無性菌籏二關スル研究 ノ、次ノ如クニシテCyste三nヲ含有ス．

 1．「ビウレット」反厘棄  1．ミロン氏反廠

 ユ．「ズルオサリチル」酸反騰  1．硫黄反廠

 I．堕化鐵反廠

 1．「メチーレンプラウ」反確  1．過酸化水素分解能力  1．「ニトロブロシッドNa反魔

痕  跡 陰  性 陰  性 陽  性 易勇陽性 陽  性 陰  性 陽  性

61

 以上ノCy・t・in液テ以テ基礎培地等量テ附加シテ（全量5．Oc．c）好氣的場養ヲ行フニ瓦斯壊 疽菌，腐敗菌，破傷風菌，N㎝y氏菌，副氣腫疽菌二付キナ24時間二於テ瓦斯形成並混濁テ 以テ嚢育ス．

      纏   紙

仰々肝臓ハ蛋白質，脂肪，糖原質，鑛質｛冨。〕ラ初メ「カタラーゼ」並各種ン醗．素類ノ他「ブ リン盤基，尿素，尿酸，rタウリン」Cy・tein並Cystin等ノ物質1テ含有シAmoId（2）二擦レ ハ肝，臓，脾，胸腺筋肉，心臓，睾丸，腎麟，腸，水晶鑓及赤血球二至ルマデ殆ド総チノ臓 器ハ」ニトロプロシッドNa二反廠スベキCysteiロチ含有ス，殊二軒，臓筋肉二於テハ著明

ナリト妻7．

 HoPkins（1呂）ハ酵母I斑二付ヰ0．1−O．15瓦叉馬肉二付テ0．01−0．O15老ノCysteinラ得，

Abderha1d㎝＆Wertheimerモ亦一馬肉1班二付ヰ1OO酷ノCyste1nテ得タリ，H舳erユ161 ハrニトロプロシッドNa反騰テ皿テCysteinヲ絵スルニ當リ荷類似ノ物質ヲ撃ゲタリ，然レ ト モAetbylmerkaptan（CH昌CH2SH），lB㎝zy1merkaptan（C日H5CH2SH），ThiogIykols餉爬

（COOHCH呈SH），卜Thiomi1ch彗邑nre（COOHCH（SH）CH3），Thioph㎝o1（CoH5SH1），等 ノ或ル物質ハ直接遊離酸素ト結合スベキ因子ヲ有セサル爲還元ノ現象テ呈セスシテ培地中二 嫌氣的環境テ成立セシメズ，從テ球菌ノ好氣的培養二通當セズ，濁リCy・te1nガ所謂自己 酸化機韓二墓キナ其因子ハPh7−8．O二於テ迅速二酸素分子ト結合シテ

      SCH2CHNH2C00H・

  2HS CH1CHNH2COOH＋02→H202＋l

      SCH2CHNH2C00H

 ナル形式ノ下二自己酸化ノ機韓テ星シ麦二嫌気的状態ヲ成立セシムルモノナリ．

 本實験二於ケル肝臓並臓ノ水浸液ハ「ニトロプロシッドNa並硫黄反確ニョリテ含硫黄「ア ミノ酸ニシテ且rメチーレンブラウ」テ還元スル状況ヨリシテ酸素ト親和カテ有スルCy・te油 テ含有スルコトテ側ル，而テ非力1熱性ノ服，脳ノ水浸液ハCyst・in或ハHopk1n・民ノ「グ ルタチョン」ノ他「カタラーゼ」ヲ含有スト雌モカロ熱性水浸液並共他ノ透析外倒液ハ全然「カタ ラーゼ」テ合有スルコトナシ，且愉嫌氣性細菌二釣シテ好気的護育テ馬サシムル所以ノ物質 ハ培地ノ酸素テ還元シテ無酸素陶境テ成立セシムルCysteinノ作用二蹄因スルモノナルベ シ．叉Hib1e・氏臓粥ガ室氣ノ遮断ナクシテ嫌菌テ褒育セシムルハ同氏二擦レハ臓中二含有        【61】

62 _{佐  々  木}

セラルル或ル物質（含水炭素，例ヘバIno・it，9alactose或ハKat㏄hol（B・㎝2k・t㏄hin））ノ還 元作用』二蹄シ，狗Mye11n，Lecitbin燐酸竪類等ノ闘係スルモノナリト推定セリ，然レドモ余 ノ下草（第二銅第二軍實験第ユ以下）二於クル賛験二徴スルニ臓含有ノ諸物質殊二L㏄舳n，

Ch．Ie・te・in燐酸盤類，燐脂肪質等テ以テスルモ護育テ得ザリキ，然レドモAmold氏ノ Cy・t由液テ皿チノ襲育結果ヨリ見レハ臓粥二於クル嫌菌ノ好氣的蟹育モ亦該脳中三含有セ

ラルルSH基含有物質タルCysteinノ作用二体ルモノナラント思惟ス．

第五車縄括及考察

 余八本編二於テM Leod＆G・・don氏ノ「カタラーゼ」培養法ガ果シテ嬢氣性細菌ノ好氣 的襲育テ可能ナラシムルヤラ検セントテ肝臓「カ」タラロぜ」或ハ脂肪「カタラ，ゼ」テ以テ培養

テ行ヒ，他方丁・・。・・i氏肝片カロ肝「ブイヨン」及ヒブラー氏脳粥培養基ガ嬢菌ノ好索護育＝チ 可能ナラシム理由ラ稔ゼンガ爲肝臓並臓ノ加熱性及非力臓性水浸液ヲ製作シ且之ヲ透析セル 物質或ハ比等ノCy・t・i・波ラ以テ塀養テ試ミ而テ此等ノ溶液二付キ硫黄反鷹，rニトロブロ

シッドN・反藤及「メデーレンブラウ」還元作用テ以テCysteinノ検定二供シクリ，愛二以上

ノ漢…騒童チ添患｛番ズレ 寸…天ノ女1］シ．

 1．臓器テ含有スル増地ハ加熱ニヨリ其過酸化水素分解能カラ破壊セシムルモ倫嫌氣性細 菌ノ好気的褒育テ可能ナラシメ此褒育促進ハ培地ノ還元作用二基ク．

 2。肝臓「カタラーゼ」粉末テ含有スル培地ハ共強カナル過酸化水素分解能カラ育スルニ闘 ラズ嫌菌ノ褒育テ可能ナラシムルヲ得ズ．

 5．純樺二近平脂肪「カタラーゼ」液ヲ含有スル培地ハ弼カナル適酸化水素分解能カニ開ラ ズ嫌菌ノ褒育テ可能ナラシムルヲ得ズ．

 4．「カタラーゼ」ハ其レ自身嬢菌ノ護育テ可能ナラシムル機能ヲ有セズ｝難モー定條作例 ヘバ還元性物質二附隆スル時ハ共護育ヲ顯著二補足ス．

 5・瓦斯壌疸菌，副氣腫疸菌，破傷風蘭ハ0・0033％，気腫疸菌（R）ハ0．00165％ノ過酸化水 素ニョリテ護育ヲ阻止セラル．

 6．非力徽性肝臓水浸液並其透析外倒液ハCysteinヲ含有シ之テ附カロセル増地ハ嬢菌ノ護 育ヲ可能ナラシム．

 7．加熱性肝臓水浸液並同透析外側液ハCy・teinテ含有シ其附加1現地ハ球菌ノ護育テ可能 ナラシム．

 8一非加熱性脳水浸液並其透析外側液ハCysteinヲ含有シ典附加培地ハ嫌菌ノ護育ラ可能

ナラシム．

 9．加熱性脳水浸液並其透析外側液ハCyst・inテ含有シ共附加培地ハ嫌菌ノ獲育テ可能ナ

フシム．

 10．肝臓及臓ヨリ作製セルCystein波ハ嫌菌ノ褒育ヲ可能ナラシム．

 サレハ臓器塀養基二於クル嫌氣性細菌ノ好氣的護育ノ効果ハ臓器中二含有セラルルCys一       【62】

燦範性菌撲二關スル研究 63 teinノ如キ還元性作用ニョル嫌氣的環境ノ成立ニョルモノニシテ直接「カタラ男ゼ 」ノ作用

ニコルモノニアラザルベシ，然レドモ「カタラーゼ」ハー定ノ還元性物質二附鰭スル時ハ其護 育テ補助スル効果ヲ有スルモノト思惟ス．

第二編 蟻氣性細菌ノ好氣的襲青二及ボス化學的       物質ノ影響二關スル研究

第■章 緒   言

 既二嬢氣性細菌ガ生活酵素二擦ラザルモ護育シ得，殊二生活細胞ノ呼吸現象ヲ司ル含硫黄 結合物殊二SH基並S−S屡結合物タルCystein或ハgIut・ti㎝ノ酸化還元ノ機韓ニョリテ 行ハルル事費ヨリシテ警へ榮養的素質テ有スル「アミノ酸系ノ物質ニアラカレモ護育堀地二 通當ナル還元作用テ星シ細菌テ障碍セサル隈リバ嫌気性細菌ノ援育ヲ可能ナラシムル理ナ

リ，サレハ從來ヨリ此埋二墓キ簡軍ナル化學的物質テ以テ此目的二派ハント企テタル硫究モ 亦枚撃二邊アラス．

 文麟テ渉瀕㈹スルニ硫化鐵（A・1・・i㎎，C・m・・1mt Thoma・），硫化曹達（T・enkmam），

硫竣アンモニウム」（HammerI＆Rivas），硫化鐵アンモニウム」（Liefmam）逓renzkatechin，

Resorcin，hydr㏄hin㎝，Pirogal・1，蟻酸曹窪（K1t・lato＆Wey1），葡萄糖（Livorius，Kit量一 sato＆Wey1，E．F曲kel，Kitt，Hibler，Ficker，Weinber9＆Soqu1n，Si1berstein，

Uchimura），乳糖，庶糖（Hib1er），蟻酸曹達（E．F・邑nke1，Med Researcb Commit），

Indigoschwefe1saur㎝Na．（Kitasato＆Weyl），寒天（Liquiεres，Hitch㎝s），Geladn

（Novy，Kov身。s）㈹，DimethyトP−Ph㎝y1㎝diamin（Kovacs）工㈹，其処鐵，亜鉛，「アル〜

ニゥム」（Wr．o．6k，H．ta），P1．t1・。chwamm（P舳），動物麦，石炭，「コークス」（W竈r−

cke・，Kov身・s），白陶土（著者）テ使用シ叉有機生髄二属スルモノニ於テハ馬鈴薯（G・Hky，

Wrzosek，W固rcker），生鶏卵（HuepPe），血液（T1z包。m1，Cattani＆Baques，L6c1記inche

＆Valki，Kitt），動物臓器並臓器液（T．Smith，K1tt，Schatt㎝froh＆Grassberger，Tar−

ozzi，Hib1er，Conradi＆Bierling，Harr蝸，Heim，Zeiss1er，G㏄honour＆思ungca，

H．Hener），rウイツテ，ペプトン」（Gates＆Olitzky，Kov｛cs）或ハ比等ノ複合坪地ナル

「ペプトン」加人血液（Le B1an㏄，B1㎎o1d，Schulten），臓器附加牛乳増地（RupPert），叉 Kedrowsky㈹ハ最初二好氣挫細菌テ培養セル後ノ濾過無菌トセル「ブイヨン」或ハ葡萄糖

「ブイヨン」テ皿テ嫌菌ノ培養二供シクリ，以上ノ培養基ハ更二葉嫌氣的條件テ袖ハンガ爲

「ワぜリン」重厨，流動「バラヒン」重暦法ニョリテ酸素テ遮断シ護育ヲ補足セント企テタリ，

然レドモ此等ノ方法並物質ハ幾多ノ不便ニョリテ所期ノ目的テ達セザルコト多シ，髪二条ハ 嫌気性細菌ガ還元性物質テ主トシテ含有スル堀地二於テ愛育不ルノ實験ヨリ非榮着物質ナル 硫化曹達（N・2S）ガ加水分解テ爲シテ生ズル硫化水素（H2S）ガ酸素二対シテ強キ親和カテ有 スル 性質二鑑ミ増地テ還元シ此虜二於テ無酸素国境ヲ形成セシムルコトニョリテ嫌気性細菌        【63】

一64 佐  々  木 ノ好氣的護育＝チ得ソト企劃セリ．

第二章 種々ナル化學的物質ヲ以チスル好氣的培養試験         實験第1．Lecithin並Cho1・st・・inヲ以ナスル培養試験

 Locithin（C耳4HgoNPOg）及Cho1esterin（CηH1−S（OH））ハ共二軒並騰ノ組成分ニテ化物ハ 培地ノ酸素二対シテ親和カテ有セズ，此等ノ酒精溶液テ基礎培地二附加シエ．％乃至0．02筋ノ 逓減的培地テ作リ加熱滅菌テ施シ急激冷却後直二菌株テ移植シ好気培養ヲ施スニエ週日ノ観 察二於テ瓦斯壊疽菌，腐敗菌，破傷風菌，N・・y氏菌，醐氣腫疸菌，氣腫疸菌二付キナ全然 陰性二絡レリ，旦流動「パラヒン」重暦ノ斐照試験二於テハ0．2％以上ノ濃度二於テハ其護育 ハ｛岳ダ障碍セラルルテ認ム，

      賢験第2．膿汁テ以ナスル培養試験

 牛膿汁ヲ皿テ5．劣乃至0−05劣二逓減的二附加セル培養地テ作リカロ熱滅菌急冷後瓦斯壌疸 菌，腐敗菌，N・・y氏菌，雇臓腫疸菌，氣腫痕菌二付キナ好気培養テ試ミシガ共二陰性ナリ

ヰ，然レドモ流動「パラヒン」重暦ノ釣照試験二於テハ護育テ阻害スルコトナカリキ．

        貿験第5．葡萄鰭並「グリコグーン」テ以ナスル培養試験

 葡萄糖ガ「アルカリ性二於テ還沈作用並榮養贋テ有スル所以テ以テ從來ヨリ球菌ノ培養二 使用セラレシガ該糖ノミテ含ム「ブイヨン」ハ如何二共濃度テ調節スヶモ好気的襲育テ爲サシ ムルテ得ズ，叉肝申豊富二合有セラルル「グリコケーン」モ真二自家融解作用ニョリテ皿状態二 止マルコト無ク且還元性ナク5・O乃至0，5％遮減合有ノ培地モ亦燥菌ノ護育テ馬サシムルコト

デ得ズ．

       費験第4．燐酸願類テ皿ナスル培養試験

 燐酸盤類モ亦肝反騰二含有セラレ多クハ金属「アルカリ」（N・，K）ト結合シテ第2燐酸髄 ノ形ニテ存ス｛30），英0・5乃至O・05名ノ燐酸曹達（N・1HPO112H1O）テ合有スル培地ハ瓦斯 壊疽菌テ初メ氣腫疸菌等ノ媒菌ノ好氣的護育チ可能ナラシムルナ得ズ．

      貿験第5．乾酪素ヲ以ナスル培養試験

 乾酪素ハ隣並硫黄デ含有シテPhGsphopmteide二屈1ス，牛孚L中ノ「力ぜイン」テ分離シ洗樵 後2．瓦宛基礎培地二混ジ加熱減1憲冷都後衛敗菌，破傷風菌，N・・y氏菌，醐気腫疸菌，索腫 疸菌二付キナ培養テ施セシガ何レモ陰四三ニシテ瓦坦磯疸菌（Wl）ノミニ於テ24時間後二軽微

ナル護育チ認メタリ．

      實験第6．黄燐テ以ナスル揺養試験

 燐モ亦幾多ノ組織申二合有セラル，Hi工ge・m齪m｛2o〕ハ黄燐ノ酸素二靭スル親和カノ強大ナ ルテ旛用シテ黄燐合有ノ腹水培養基ガ酸素チ吸吹シ且鱗並培養基質テ鐘化セシムルコトナキ

ヲ皿テ「ス，パリーグ」ノ塙章二通セルコトテ護表セリ，余ハ基礎培地5．Occ二代キ黄燐ノー 片（O，7）テ投ジ培養テ行ヒシガ儲敗菌，破傷風菌，副氣腫疸菌，氣腫疸菌二於テ陰性ナリシ

ガ瓦斯壌疸菌（W一）二於テ（2憎間以内二瓦斯形成並混濁）陽性ナリキ、

       【64】

鎌蔵腔菌籏二關スル硫究 醐  1一過酸化水素分解能力      ．  陰性（128・4μ29・6）

 1．燐反騰        陽 性

 1．纏硫黄量      0，008％

 加熱肝臓水浸液増養成績

 カロ熱性肝臓水浸液テ弱「アルカリ性トナシ無菌濾液ヲ以テ基礎培養基二附加シ培養テ施ス ニ瓦斯壊疽菌，腐敗菌，破傷風菌，副棄腫疸菌，NoW氏菌，気腫疸菌二代寺テ20時間ヲ皿

テ護育ス．

 外側液培養成績並化學的所見

 上言巳加熱性肝麟水浸液ヲ實験第エノ如ク透析テ行ヒテ得タル透析外側液テ以テ型ノ如ク場 養チ行アニ24乃至48時間テ以テ輕徴ナガラ護育テ認メ得，唯氣腫疸菌R株二於テハ陰性ナ

リキ・叉本透析外側液ハ次ノ如キ化率的所見ニョリCysteinテ含有シ「カタラーゼ」ノ作用 デ認メ得ズ．

工．「ビウレット」反確 1．ミロン氏反騰

1．「スルホサリチル」酸反騰 1．硫黄反膝

1．「ニトロブロシッド」Na反騰 1．「メチーレンブラウ」還元作用 1．週酸化水素分解能力

1．燐反嬢

1．糠硫黄量＝

弱陽性

陰  性 陰  性

弱陽性 弱陽性 弱陽性

陰性（I28．3／129．6）

陽  性 α006％

第三表加熱性肝臓水浸液培養表

㌧、̲毎 _{（I）水浸液} ^{（II）透析外側滋}

菌梼禽 12 20 24 48 72 ¹² 20 24 48 ⁷²

Wo11 _十 甘 ^十十 片 廿 士 ± 十 十 ^十

Put ■ ^± 十 十 十1■一 _■ ± ± 土

T _{一 一} ^{± ± ±} 1−^{T 一 一 一 ■}

Novy _一 ± 十 十 十

Para _一 士 土 十 十1」一 _一 土 十 十

li

Rau．0 _・ ^± 十 十 十1i、 ^{一 土 十 十} Ra皿R 一 一 士 ^± 土」」一 _{・ 一 一} 一

 本實験二於クル水浸液ハ操作ノ初メニ於テ既二加熱セルモノナレバ「カタラーゼ」ノ作用ハ 全然認ムルナ得ズ，敬二水浸原液ノ効果ハ「カタラーゼ」以外ノ耐熱性ノ肝臓ノ組成物質タラ

ザルヘカラズ，叉透析外側液ノ効果ハ更二動物膜デ禰散シ得ル物質二戸ルモノニテ典化學的        【57】

58 佐  々  ホ

所見ヨリシテ含硫黄蛋白髄副チCysteinωU6）｛52〕ノ如．キ物質ノ作用ニコルモノナルベシ．

     貿験第5．Amo咄民法ニョル肝臓Cystein液チ皿ナスル培養試験  肝臓Cystein液ノ製法

 Amold（2〕氏ノ動物臓器ヨリCy・te1nラ製作スル方法二準擦シ牛肝臓ヲ粗切水洗シ少量ノ 蒸溜水ト共二蒸氣釜中二加熱シ蛋白テ凝固セシメ之テ細麟シテ同量ノ蒸溜水テ投ジ摺絆後一 夜氷室内二放置シ澄明ナル上清ヲ分離シ稀硫酸ラ皿テ強酸性トナシ之二乾燥セル硫酸曹達テ 投加シテ飽和セシメ艀卵籍内二放置スルコト10時間，大デ此溶液テ歴搾分離濾過遷心シテ透 明ナル溶夜チ得，此1容液ハ酸性反騰チ星シAmo1d氏ノCy・te丘n波ノ性状テ帯ブ．

 化學的所見

1．「ビウレット」反騰 1．ミロン氏反騰

1．「スルホサリチル」酸反騰 1．硫黄反騰

1．「ニトロブロシッド」Na反鷹 1．題化鐵反騰

1．「メチrレンブラウ」還元作用 1．過酸化水素分解能力

場養成績

痕  跡 陰  性 陰  憧 陽  性 陽  性

弱陽性 彊陽性

陰  性

 上言巳肝臓Cystoin液テ苛性曹達テ以テ中和シ島e・k・fe1d濾過器ヲ以テ無菌濾液テ作リ基 礎靖地等量（2．5c．c宛）ヲ附加シ培養ヲ施スニ瓦斯壊疽菌，腐敗菌，破傷風菌，N・・y氏菌，

副気腫疸菌，氣腫疸菌二於テ18時間乃至24時間テ貝テ瓦斯形成並混濁テ皿テ護育ス．

         實験第4．非加熱性臓水浸液テ以ナスル培養試験

 Hib1er氏脳粥t1引ガ加熱セル脳資質以外二何等人工的榮着物質テ附加スルコトナクシテ 期ノ如ク燦菌ノ護育タシテ可能ナラシムルバ如何ナル機轄ニコルモノナルヤ亦實考二贋ス，

F蜘keい30）二擦レハ脳ノ固形成分八千切23名1チ占メ此3分ノ1ハ蛋白質ニシテ3分ノ2ハ rリポイド」ナリ，此内Cho1esterinハI0。％テ占ム．叉Petrowsky㈹二擦レハ牛臓ノCho−

lest町inハ灰白質二於テ18．6劣白質二51．91房Lecithinハ灰白質二於テ1ク．2物白質二9．9名 テ含有ス，又H・mm・・st・inU了〕ハ肝眠麗及皮質二於ケル各組成分ハ蛋白質32．0−50．O，

K叩haIin並Mye11n34．9−7．4，phr㎝osin並Kerasin45．ト15．5，Lecithin51．9−31．ヰ，

Ch・le・te・i・48．6−7．0，含硫黄物質14．0−1牛5，錨質8．2−8．クナリト云ア．

 生臓水浸液ノ製法

 新鮮ナル牛臓ノ被膜並血管ヲ除去シ水洗シテ實験第1二於クルト同一ノ方法ラ皿テ水浸液 テ作製セリ，此浸出液ハ次ノ所見ニョリテCysto1n並「カタラーゼ」1テ合有スルモノナルテ

知ル．

 生脳水浸液ノ化學的所見並培養成績       【58〕

1．「ビウレット」反塵…

工．ミロン氏反騰1 1．硫黄反騰

1．「ニトロプロシッド」Na反騰 L「メチーレンプラウ」還元作用 1．過酸化水素分解能力

1．燐反騰

1．総硫黄量

嫌氣性菌籏二關スル研究

陽  憧 陽  性

弱陽性 弱陽性

陽  憧

陽性（年3μ29．7）

陽  性 0．Oi％

59

 非加熱性臓水浸液テ苛性曹達ヲ以テ弱「アルカリ性トナシ此無菌濾液ヲ基礎培養基二附加 シ好気的培養テ行アニ瓦斯壊疽菌，腐敗菌，破傷風菌，副氣腫疸菌，N・・y氏菌，索腫疸菌 二付キナ12時間テ以テ畦盛ナル瓦斯及混濁ヲ貝テ褒育セリ．

 透析外側液ノ培養成績並化撃的所見

 上記非加熱性臓水浸液テ更二透析チ行ヒ共禰散セル外側液ヲ以テ培養テ誤ミシニ瓦斯壌疸 菌，腐敗菌，破傷風菌，Novy氏菌，副氣腫疽菌，索腫疸菌二代手テ24乃至48時間テ以テ輕 薇ナル瓦斯形成並混濁ヲ生ジテ護育ス，水溶液八家ノ化撃的所見ニョリテrカタラロぜ」ノ作 用テ認メチルモCyste三nテ含有スルチ側ル．

1．「ビウレット」反確 1．「スルホサリチル」酸反腐 1．硫黄反腔

1．燐反騰

コ．「ニトロプロシッド」Na反騰 工．「メチ｝レンブラウ」還元作用 1．過酸化水素分解能力

工．総硫黄量

痕  跡 陰  性 陽  性 陽  性

弱陽性 弱陽性

陰性（130μ29．6）

0，008％

第四表 非加熱性臓水浸液培養表

（I）水浸滋 ^{（II）透析外側液}

12 20    24    08    72  ． 12 20 24

＼ 4872

¶一．I一 ^{ユー   一}

Wol一 十 甘 丹 什 甘 _一 十 十 十 十

We12 十 十 丹 什 什 _一 ± 十 十 十

P誠 十 十 十 十 斗1

T 一 十 十 十 十1 一 一 ^± ± ±

NOW ^{十 十 十 十 十；} 一 ． ± 十 十

P町a _一 十 十 十 十 一 一 土 十 十

R日u．O _一 十 十 十 十 一 一 十 十 十

【59】