Posted at the Institutional Resources for Unique Collection and Academic Archives at Tokyo Dental College, Available from http://ir.tdc.ac.jp/
Title
№１４：フルバスタチン局所投与の担体：アテロコラー
ゲン／ゼラチン複合体の物性
Author(s)
喜田, 晃一; 田邉, 耕士; 三浦, 直; 佐々木, 穂高; 笠
原, 正貴; 吉成, 正雄; 矢島, 安朝
Journal
歯科学報, 115(5): 477-477
URL
http://hdl.handle.net/10130/3893
Right
目的：口蓋の発生の中で特に二次口蓋の発生には， 口蓋突起の成長，上昇，そして正中での癒合という 複雑な過程が不可欠である。これまで我々は，口蓋 帆張筋は幼弱な咀嚼筋群から分化し，口蓋の癒合と ともに正中に向けて移動していくことを報告してき た。また口蓋腱膜が，口蓋癒合後すぐに発生するこ とも示してきた。しかしながら，胎生初期に発生し た口蓋帆張筋と口蓋腱膜は，それぞれ独立して発生 するのにもかかわらず，成長とともに結合する機序 については不明な点が残されている。そこで我々 は，口蓋帆張筋と口蓋腱膜の癒合過程を経時的に観 察し，そのメカニズムについて検索を行った。 方法：試料として，胎生１４．５∼１７．５日の ICR 系 マ ウスを用いた。４％パラホルムリン酸緩衝液にて固 定後，通法に従いパラフィン包埋を行い，５∼１０ μm にて連続切片を作製した。形態学的観察を行う た め に ア ザ ン 染 色 を，筋 腱 接 合 部 に 集 積 す る desmin の観察による接合メカニズムの分析を行う ために，抗 desmin 抗体を用いて免疫組織化学的染 色を行った。 結果：将来の口蓋帆張筋の筋腱接合部には，すでに 胎生１４．５日において desmin の集積を認め，その後 胎生１７．５日までこの傾向は変わらず認められた。胎 生１５．５日になると口蓋は癒合し，初めて口蓋腱膜が 口蓋の正中に認められた。しかしながら，この時点 では口蓋帆張筋と口蓋腱膜との結合は認められな かった。胎生１６．５日において，口蓋腱膜が口蓋帆張 筋に向けて伸長し結合していた。胎生１７．５日には， 口蓋腱膜が更に口蓋帆張筋の中に向けて進入した様 子が観察された。 考察：今回の研究結果から，それぞれ独立して発生 した口蓋腱膜と口蓋帆張筋は互いに向けて伸長し， 胎生１６．５日において結合することが明らかとなっ た。さらに口蓋腱膜は，口蓋帆張筋の中に向けて進 入することが分かった。したがって，口蓋腱膜の口 蓋帆張筋への進入が双方の結合を強化することで， 軟口蓋が常に緊張できる機能を獲得するのではない かと考えられた。 目的：高脂血症治療薬として用いられているスタチ ン系薬剤は，コレステロール低下作用に加え神経 系，免疫系，心臓血管系および骨格系において多面 的に効果を発揮することが報告されている。特に近 年，破骨細胞活性を低下させ，骨芽細胞分化を刺激 し骨形成を促進させることが注目を集めている。そ のためスタチンの骨形成促進作用を利用した，局所 投与法が研究され始めている。局所投与の輸送体と して使用される担体にはポリ乳酸やアルギン酸塩， コラーゲンなどが応用されている。 これまでに我々は，フルバスタチンナトリウムを ゼラチンへ静電的相互作用により担持し応用した が，ゼラチンは水溶性であり液体中で速やかに溶解 し分解されるため，分解速度の調節が困難であっ た。そこで本研究では抗原性の低いアテロコラーゲ ンを形態保持材料として利用し，担体を安定化する ことを目的としてアテロコラーゲン／ゼラチン複合 体の性状，および複合体に担持したフルバスタチン の徐放性を検討した。 方法：０．９％アテロコラーゲン（高研，東京）リン 酸 溶 液 と８７０μM フルバス タ チ ン ナ ト リ ウ ム（和 光，大阪）を添加した０．９％ゼラチン（新田ゼラチ ン，大阪）リン酸溶液を作製し，アテロコラーゲン の混合比を４０か ら０％ま で５段 階 に 設 定 し 混 合 し た。内径１６ mm 高さ１７ mm の筒状の容器に混合溶 液 を 注 入 し，２０℃で 凍 結 後，FREEZONEⓇ ２．５ （LABCONCO, MO）を用いて-５０℃真空下で２４時間 凍結乾燥をし，スポンジを作製した。その後１２５℃， ３０分熱架橋した。フルバスタチン徐放量は，各スポ ンジを PBS に浸漬し，経時的に一定量サンプリン グを行い，紫外可視近赤外分光光度計 V-６６０（日本 分光，東京）にて吸光度を測定して評価した。 結果および考察：ゼラチン１００％のスポンジに比較 してアテロコラーゲン／ゼラチン複合体スポンジ は，フルバスタチンの徐放速度が遅かった。ゼラチ ン１００％のスポンジでは，溶出開始後６時間で完全 に溶解し，溶液の吸光度が上限に達したのに対し， アテロコラーゲン混合比４０％のスポンジでは，溶出 開始後７日目でも構造物の残留が確認され，吸光度 は原液の２０％以下であった。またアテロコラーゲン 混合比が減少していくにつれ吸光度は上昇し，徐放 速度も上昇した。従って，アテロコラーゲン／ゼラ チン複合体はフルバスタチンの徐放性を制御する可 能性が示唆された。
