新規格経管栄養器具（ISO 80369-3）における細菌汚染の経時的変化の検証

原　　　　著

新規格経管栄養器具（ISO 80369-3）における

細菌汚染の経時的変化の検証

Time course changes in bacterial contamination with the new standard enteral feeding connecter(ISO 80369-3)

古屋宏章

1）

_石野敬子

2）

_熊木良太

1）

_岸本桂子

1）

_{倉田なおみ}

1）

Hiroaki Koya1)_{, Keiko Ishino}2)_{, Ryota Kumaki}1)_{, Keiko Kishimoto}1) _{and Naomi Kurata}1) 昭和大学薬学部　社会健康薬学講座　社会薬学部門1）_{，同　臨床薬学講座　感染制御薬学部門}2）

Division of Social Pharmacy, Department of Healthcare and Regulatory Sciences1)_,

Division of Infection Control Sciences, Department of Clinical Pharmacy2)_{, Showa University School of Pharmacy}

要旨：【目的】経腸栄養分野の相互接続防止コネクタが ISO80369-3（以下，ISO 規格と略）に変更される．栄養 剤投与を模した装置を作成し，細菌汚染について国内規格と比較し，さらに変換コネクタをつけて実験的に検証し た．【方法】装置に栄養剤を 1 日 2 回 14 日間注入し，フラッシュした精製水を試料として培養後，細菌数の測定 および菌種同定を行なった．変換コネクタは連日使用，毎日洗浄，毎日交換の 3 群で比較した．【結果】細菌数が 104 _{CFU/mL を超えたのは両規格とも 9 日目で，変換コネクタ使用時は 7 日目であった．下痢や敗血症に関連す} る細菌が同定された．変換コネクタの 3 群間に違いはなかった．【考察】両規格とも 9 日以降で細菌性有害事象の 可能性が高まるが，ISO 規格への変更は細菌汚染に影響しないと考えられる．日常臨床とは異なる実験モデルであ るが，変換コネクタを用いる場合は細菌汚染に注意する必要性が示唆された．移行時期には極力 ISO 規格と国内規 格を混在させないことが望ましい． 索引用語：ISO80369-3，細菌汚染，経腸栄養 受付日：2019 年 11 月 22 日   採用決定日：2019 年 12 月 23 日    Ⅰ．目的  経口摂取ができず腸管機能が保たれている場 合，経管栄養は重要な栄養管理方法であり，静脈 栄養より経腸栄養が推奨されている1）_{．経腸栄養} の有害事象として，悪心嘔吐，下痢などが報告さ れ，下痢の原因として栄養剤の投与速度や濃度が 関係するといわれているが，細菌性の下痢が生じ ることもある1）_{．経腸栄養剤は，開封後 8 時間で} 細菌数が指数関数的に増加するため2）_{，8 時間以} 内の投与終了が推奨されている1）3）_．  経鼻胃管は一定期間患者に留置するが，注入器， 栄養セット，栄養ボトルなどの器具は原則単回使 用とされながら，再使用されている4）～9）_．また洗 浄・乾燥が不十分な器具では細菌が増殖する7）_． 洗浄は様々な方法が検討されてきたが，中性洗剤 等で洗浄後，次亜塩素酸ナトリウムによる浸漬消 毒が有効とされている4）～6）_．  一方，厚生労働省の通知 によると，相互接続 防止コネクタに係る経腸栄養分野の国際規格 （ISO80369-3；以下，ISO 規格と略）が，2019 年 12 月より本邦に順次導入され，2021 年 11 月末日 に既存の国内規格製品（以下，国内規格と略）は 流通を終了する10）_{．ISO 規格の接続部は国内規} 格とオスコネクタとメスコネクタが逆になる11） （図 1）．また，ISO 規格への移行期間には，ISO 規格と国内規格が混在するため両者を接続する新 旧変換コネクタ（以下，変換コネクタと略）が上 市される11）_．  新規 ISO 規格の接続部は栄養剤が残留しやす い構造であり，下痢などの細菌性有害事象を増加 させる可能性が懸念される．ISO 規格への切り替

え後に細菌性有害事象が急激に増加することは回 避すべきである．よって今回は患者の消化管に進 入する細菌数の経時的変化を明らかにすることを 目的とした．すなわち本研究はコネクタの細菌汚 染の研究ではなく，各コネクタを組み込んだ経腸 栄養投与ルート（以下，ルートと略）の細菌汚染 の検討である．日常臨床とは異なる使用条件では あるが，ISO 規格または国内規格を使用したルー トを用いて経腸栄養剤を注入した際のルート内の 残存細菌数の経時的変化を実験的に測定して比較 した．さらに，移行時には両規格が混在するため， 変換コネクタを組み込んだルート内の残存細菌数 の経時的変化も実験的に測定した． 図 1  国内規格と ISO 規格の比較および変換コネクタ（文献 11 より一部改変して転載） 国内規格 （医薬発第

888

号）

ISO

規格 （

ISO80369-3

） 国内規格を

ISO

規格に変換 （本研究で使用）

ISO

規格を国 内規格に変換 図 2  経腸栄養投与モデル装置の模式図 栄養ボトルから廃液入れは直線となるように配置した． 廃液入れは 1 日 1 回滅菌し，経鼻胃管 1 本につき 1 つ用意した．

注入器接続部

変換コネクタ取り付け部

廃液入れ

天井

アルミホイルなどの蓋

台

栄養セット

（

ISO

規格・

国内規格）

栄養ボトル

経鼻胃管（

ISO

規格・国内規格）

注入器

Ⅱ．対象および方法 1．経腸栄養投与モデルの構築  ①国内規格，② ISO 規格，③変換コネクタを 使用した経腸栄養投与モデル装置を図 2 のように 構築し，細菌汚染を測定した．  使用器具は表 1 に示した．栄養剤は，ラコー ル®_{NF 配合経腸用液 200kcal/ パウチ（大塚）を} 使用した．  ①国内規格を用いたモデルを図 3a に示した． 栄養剤の注入前に，注入器で 20mL の滅菌精製水 をフラッシュし，試料Ⅰとした．その後栄養剤を 栄養ボトルに移し，約 1.5 時間かけて注入し，注 入器で 20mL の滅菌精製水をフラッシュした．  ② ISO 規格を用いたモデルを図 3b に示した． 臨床に近付けるため国内規格の実験方法12）_を改 変し，栄養剤を 1 日 2 回注入した．1 回目の栄養 剤注入前のフラッシュ液を試料Ⅰとし，2 回目の 栄養剤注入後のフラッシュ水を試料Ⅱとした（図 3b）．  ③変換コネクタを用いたモデルを図 3c に示し た．変換コネクタを連日使用群，毎日洗浄群，毎 日交換群の 3 群に分け，ISO 規格と同様のモデル で検討した（図 3c，図 4）．  実験期間は 14 日間8）_{とし，実験開始から 1，3，} 5，7，9，11，13，14 日後に試料を回収した． 2．投与器具の洗浄・消毒  投与器具の洗浄・消毒は栄養剤の注入後に毎回 実施した．投与器具，変換コネクタの洗浄には洗 剤，流水，スポンジを使用した．洗剤は一般的な 食器用中性洗剤を使用し，消毒液は，テキサン ト®_{（次亜塩素酸ナトリウム）消毒液 6％（ヨシ} ダ製薬）を用い，水道水で 125ppm に希釈して使 用した．  国内規格，ISO 規格では洗剤を使用する群（洗 剤あり群）と使用しない群（洗剤なし群）に分類 し，各群はそれぞれ独立した3つのサンプル（n=3） で検討した． ⅰ 栄養ボトル  洗剤あり群の場合，スポンジに洗剤を付け，栄 養ボトルを洗浄した．栄養ボトルの栄養セットと の接続部外部は洗剤を付けたスポンジで洗浄し た．接続部内部は洗剤液を通した後，水ですすい だ．洗剤なし群では洗剤を用いず，洗剤あり群と 同様に洗浄した．栄養ボトル表面が完全に消毒液 と接するように消毒液に 1 時間浸漬した．その後 室温で自然乾燥させた． ⅱ 栄養セット  洗剤あり群の場合，洗剤を付けたスポンジで外 部を洗浄した．内部は注入器で洗剤液をフラッシ ュした後，水をフラッシュしてすすいだ．洗剤な し群では洗剤を用いず，洗剤あり群と同様に洗浄 した．洗浄後，注入器を用いて消毒液を内腔に充 填し，消毒液に 1 時間浸漬した．その後室温で自 然乾燥させた． ⅲ 注入器  洗剤あり群の場合，洗剤を付けたスポンジで外 部を洗浄した．内部の洗浄では泡立てた洗剤を入 表 1 各実験で使用した器具の一覧 国内規格 ISO 規格 変換コネクタ 器具 ネ オ フ ィ ー ド®栄 養 ボ ト ル （TOP） ジェイフィード®_{栄養ボトル} （JMS） ジェイフィード®_{栄養ボトル} （JMS） ネオフィード®栄養セットナチュール （TOP） ネオフィード®栄養セットナチュール （TOP） ネオフィード®栄養セットナチュール （TOP） （ISO 規格） ジェイフィード®_{注入器（JMS） ネオフィード®シリンジ（TOP）}ネオフィード®シリンジ （TOP） （ISO 規格） ニプロ栄養カテーテル 80cm 8Fr. （ニプロ） トップ栄養カテーテル 120cm 8Fr. （TOP） トップ栄養カテーテル 120cm 8Fr. （TOP） （国内規格） トップ新旧接続コネクタ（TOP） 国内規格の細菌汚染の測定では全て国内規格の器具を使用し，ISO 規格の細菌汚染の測定では全て ISO 規 格の器具を使用した． 変換コネクタ使用時の汚染測定で使用した器具は経鼻胃管のみ国内規格であり，栄養セットおよび注入器は ISO 規格を使用した．

れ，水ですすいだ．洗剤なし群では洗剤を用いず， 洗剤あり群と同様に洗浄した．洗浄後，表面が完 全に消毒液と接するように消毒液に 1 時間浸漬し た．その後室温で自然乾燥させた． ⅳ 経鼻胃管  国内規格のメス型コネクタ部および ISO 規格 の経鼻胃管におけるオス型コネクタ部は洗浄しな かった．さらに人の体内環境を再現するため，ラ 図 3b  ISO 規格の検討法 1 日 2 回栄養剤を緩徐に注入した．奇数日および 14 日目の初回フラッシュ液を試料Ⅰとし， 当該実施日の最終フラッシュ液を試料Ⅱとして回収した．次回注入時に器具が濡れている 場合はそのまま使用した． 24時間以内に実施 ラコール®_注入 200mL/1.5h 20mL滅菌精製水 フラッシュ 試料Ⅰ採取 洗浄・ 消毒 保管 ラコール®_注入 200mL/1.5h 20mL滅菌精製水 フラッシュ 洗浄・ 消毒 試料Ⅱ採取 図 3c  変換コネクタの検討法 1 日 2 回栄養剤を緩徐に注入した．奇数日および 14 日目の初回フラッシュ液を試料Ⅰとし， 当該実施日の最終フラッシュ液を試料Ⅱとして回収した．次回注入時に器具が濡れている 場合はそのまま使用した． 24時間以内に実施 ラコール®_注入 200mL/1.5h 20mL滅菌精製水 フラッシュ 試料Ⅰ採取 洗浄・ 消毒 保管 ラコール®_注入 200mL/1.5h 20mL滅菌精製水 フラッシュ 洗浄・ 消毒 変換コネクタ接続 変換コネク タ取り外し 変換コネクタ接続 試料Ⅱ採取 変換コネクタ取り外し 図 3a  国内規格の検討法 1 日 1 回栄養剤を緩徐に注入した．奇数日および 14 日目の初回フラッ シュ液を試料Ⅰとして回収した．次回注入時に器具が濡れている場合は そのまま使用した．

24

時間以内に実施 ラコール®_注入

200mL/1.5h

20mL

滅菌精製水 フラッシュ 試料Ⅰ採取 洗浄・消毒 保管

ップで包み 37℃の孵卵器で保管した． 3．残存細菌数の測定  寒天希釈平板法で測定した．各試料（各 n=3） を BHI 寒天培地（Difco）2 枚に塗抹し，37℃で 7 日間培養した後，コロニー数を計測し，2 枚の 平均値から 1mL あたりのコロニー形成単位（colo-ny-forming unit；以下，CFU/mL と略）を算出 した．3 つの独立したサンプル（n=3）のそれぞ れの平均値から中央値を算出した．104 _CFU/mL を基準として，細菌汚染を判定した． 4．菌種の同定  菌種の同定は第十七改正日本薬局方の遺伝子解 析による微生物の迅速同定法に基づいて実施し た．性状の異なるコロニーを分離培養し，シカジ ーニアス®_{DNA 抽出試薬（関東化学）で DNA} を 抽 出 し た． こ れ を テ ン プ レ ー ト と し，16S rRNA 遺伝子検出プライマー（日本薬局方 10F および 800R），酵素として KOD+（東洋紡）を 用い，PCR 法を実施した13）_{．PCR 増幅サンプル}

を QIAquick® _{PCR Purification Kit（QIAGEN）}

で精製した後，遺伝子配列を決定した（株式会社 ファスマック）．得られた遺伝子配列を BLASTn （NCBI）検索し，相同性 90％以上かつ上位を同 一菌種または近縁菌種と推定した13）_． Ⅲ．結果 1．残存細菌数の経時的変化  国内規格の残存細菌数の中央値は，9 日目に 104 _{CFU/mL に達した（図 5）．7 日目の洗剤あり} 群で，3 つの独立したサンプルのうち 1 つが 104 CFU/mL を超えた（図 5）．一方，ISO 規格の残 存細菌数の中央値は，9 日目の洗剤なし群の試料 Ⅰおよび試料Ⅱ，および洗剤あり群の試料Ⅱで 104 _{CFU/mL に達した（図 6）．7 日目の洗剤あり} 群の試料Ⅰ，試料Ⅱ，および洗剤なし群の試料Ⅱ のぞれぞれで，3 つの独立したサンプルのうち 1 つが 104 _{CFU/mL を超えた（図 6）．変換コネク} タの残存細菌数は，洗浄せず継続使用した場合（連 日使用群），毎日洗浄した場合（毎日洗浄群），変 換コネクタを毎日交換した場合（毎日交換群）の いずれも 7 日目の試料Ⅰで中央値が 104 _CFU/mL に達した（図 7）．5 日目の試料Ⅱで 3 つの独立し たサンプルのうち 1 つが 104 _{CFU/mL に達した} （図 7）．  国内規格および ISO 規格において，洗剤使用 の有無では残存細菌数の中央値が 104 _CFU/mL に達するまでの期間に差はなかった．  いずれの実験においても栄養剤注入前の試料Ⅰ および栄養剤注入後の試料Ⅱの残存細菌数には差 はなかった．  14 日目の試料Ⅰで残存細菌数の中央値は，3 つ の実験の中で変換コネクタ使用時が最も多かっ 図 4  変換コネクタの検討群

1.

連日使用群

2.

毎日洗浄群

3.

毎日交換群 栄養剤注入 実施 実施 実施 洗浄 洗剤あり 洗剤あり 洗剤あり 消毒 充填あり 充填あり 充填あり 変換コネクタ 洗浄なし（※

1

） 洗浄あり（※

2

） 毎日交換・_{洗浄あり（※}

₃

_） ※1 変換コネクタは経鼻胃管と接続後，取り外さず14日間継続使用した． ※2 洗剤，スポンジ，流水で毎注入後に取り外して洗浄し，14日間継続使用した． ※3 1回目と2回目の注入の間は取り外して洗浄・消毒し，翌注入日のはじめに変 換コネクタを新品と交換した．

図 6  ISO 規格の残存細菌数の経時的変化 縦軸は細菌数（CFU/mL），横軸は実験開始からの経過日数（日）である．横軸のⅠは試料Ⅰを示しており， Ⅱは試料Ⅱを示している．横軸に水平の破線は下痢の頻度が有意に増加する細菌数である．グラフは中央値 を示しており，エラーバーは n=3 のばらつきを示している．

ⅠⅡ

1

ⅠⅡ

3

ⅠⅡ

7

ⅠⅡ

9

ⅠⅡ

11

ⅠⅡ

13

ⅠⅡ

14

ⅠⅡ

5

CFU/mL 経過日数 細 菌 数

10

6

10

5

10

4

10

3

10

2

10

0

洗剤なし群・試料Ⅱ：中央値（n＝3） 洗剤なし群・試料Ⅰ：中央値（n＝3） 洗剤あり群・試料Ⅱ：中央値（n＝3） 洗剤あり群・試料Ⅰ：中央値（n＝3）

10

8

10

7 図 5  国内規格の残存細菌数の経時的変化 縦軸は細菌数（CFU/mL），横軸は実験開始からの経過日数（日）である．横軸に水平の破線は下 痢の頻度が有意に増加する細菌数である．グラフは中央値を示しており，エラーバーは n=3 のば らつきを示している． CFU/mL 細 菌 数

10

6

10

5

10

4

10

3

10

2

10

0

1

3

5

7

9

11

13

14

経過日数

10

7

10

8 _{洗剤あり群：中央値(n＝3)} 洗剤なし群：中央値(n＝3)

た．国内規格および ISO 規格では 9 日目には残 存細菌数の中央値が 104 _{CFU/mL を超えたが，} 変換コネクタを使用した場合は，7 日目に残存細 菌数の中央値が 104 _{CFU/mL を超え，国内規格} または ISO 規格単独よりも短期間で残存細菌数 が増加した． 2．検出菌  本実験で検出された細菌は，Pseudomonas 属菌 や，Stenotrophomonas maltophilia 等の環境菌およ び，Micrococcus 属 や Staphylococcus 属 な ど ヒ ト の常在菌であった（表 2）． Ⅳ．考察  まず，ISO 規格と国内規格を比較すると，いず れも継続使用により残存細菌数は増加することが 明らかとなった（図 5，6）．栄養剤が 104 _CFU/ mL 以上の細菌で汚染されると，下痢の有害事象 の頻度は統計学的に有意に上昇する14）_．105 _CFU/ mL 以上で敗血症が生じたとの報告15）_{がある一方} 図 7  変換コネクタの残存細菌数の経時的変化 縦軸は細菌数（CFU/mL），横軸は実験開始からの経過日数（日）である．横軸のⅠは試料Ⅰを示しており，Ⅱは試 料Ⅱを示している．横軸に水平の破線は下痢の頻度が有意に増加する細菌数である．グラフは中央値を示しており， エラーバーは n=3 のばらつきを示している．

ⅠⅡ

1

ⅠⅡ

3

ⅠⅡ

7

ⅠⅡ

9

ⅠⅡ

11

ⅠⅡ

13

ⅠⅡ

14

ⅠⅡ

5

CFU/mL 経過日数 細 菌 数

10

6

10

5

10

4

10

3

10

2

10

0

10

7

10

8 毎日洗浄群・試料Ⅰ：中央値（n＝3） 毎日洗浄群・試料Ⅱ：中央値（n＝3） 毎日交換群・試料Ⅰ：中央値（n＝3） 毎日交換群・試料Ⅱ：中央値（n＝3） 連日使用群・試料Ⅰ：中央値（n＝3） 連日使用群・試料Ⅱ：中央値（n＝3） 表 2 検出菌の一覧

国内規格 Stenotrophomonas maltophilia Pseudomonas putida Micrococcus yunnanensis

ISO 規格

Enterobacter cloacae Klebsiella aerogenes Enterobacter hormaechei Pseudomonas oryzihabitans Micrococcus luteus Pseudomonas psychrotolerans Dermacoccus nishinomiyaensis Kytococcus sedentarius Roseomonas mucosa Phyllobacterium myrsinacearum

変換コネクタ

Stenotrophomonas maltophilia Acinetobacter lwoffii Pseudomonas psychrotolerans Staphylococcus epidermidis Moraxella osloensis Staphylococcus hominis Dermacoccus nishinomiyaensis Micrococcus luteus Staphylococcus pasteuri Phyllobacterium myrsinacearum

で，細菌性有害事象は 103 _{CFU/mL 以上の細菌} 汚染で生じるともいわれる9）15）16）_{．本研究では培} 養 試 料 と し て フ ラ ッ シ ュ 液 を 使 用 し て お り， Okuma らの報告14）_{では栄養剤を培養試料として} いる．培養試料が異なるため，細菌数が 104 _CFU/ mL 以上で下痢を有意に生じるという基準は，厳 密には本研究に適応できない．しかし，本研究で は患者の体内に入る細菌数を測定することを目的 としているが，実際に体内に進入した細菌量と有 害事象との関連を示した報告は見当たらない．し たがって本研究では 104 _{CFU/mL を細菌汚染の} 判定基準として用いた．ISO 規格と国内規格の接 続部の構造の差異や，洗浄・消毒方法に関わらず 細菌汚染は進行し，7 日目の試料Ⅰおよび試料Ⅱ で 3 つの独立したサンプルの内 1 つの残存細菌数 が 104 _{CFU/mL を超えるため，投与器具の継続} 使用は下痢等の細菌性有害事象の原因となる可能 性が考えられた．今回，国内規格は 1 日 1 回栄養 剤を注入したが，ISO 規格は 1 日 2 回栄養剤を注 入しており，方法が異なるため厳密な比較はでき ないが，継続使用に伴う残存細菌数の経時的変化 は ISO 規格と国内規格で同等であり，細菌汚染 に関しては切り替えによる影響はないと考えられ た．本研究で用いた実験系は実臨床での使用状況 とは異なり，最も汚染しやすい状況を想定して実 験したため，ISO 規格のオス型コネクタ（経鼻胃 管）は洗浄しなかった．海外では ISO オス型コ ネクタ洗浄用のブラシである EnClean®_が上市さ れているが，ISO 規格のオス型コネクタの洗浄の 効果を検討した報告は見当たらない．固い器具で の洗浄によりオス型コネクタに傷が生じ，凹凸面 の増加による細菌の定着や，傷内部の洗浄の困難 さによる汚染の進行も危惧される．しかし，ISO オス型コネクタの洗浄による効果は明らかでな く，今後の検討課題である．変換コネクタにおい て，経鼻胃管に取り付けたまま使用継続した場合 （連日使用群）も，毎日洗浄した場合（毎日洗浄群） も，毎日変換コネクタを交換した場合（毎日交換 群）も，国内規格，ISO 規格と比較して早期に汚 染が進行した．3 群の変換コネクタ間で残存細菌 数に差はみられなかったが，変換コネクタをつけ ない国内規格，ISO 規格と比較して 14 日目の細 菌数の中央値は多かった（図 5，6，7）．変換コ ネクタと ISO 規格は同じ洗浄・消毒方法であり， 図 6，7 の差分が変換コネクタによる汚染と推察 され，変換コネクタの使用により汚染が増大する 可能性が考えられた．この理由として，経鼻胃管 のメス型コネクタと変換コネクタを接続した際， 変換コネクタ先端とメス型コネクタ底部に空間が 発生し，この空間に栄養剤が貯留したことで細菌 汚染が進行したことが考えられる．国内規格同士 の接続でも空間は発生するが，メス型コネクタ底 部と変換コネクタ先端との空間の方が広かった． これにより栄養剤が残留しやすくなり，細菌増殖 が促進された可能性も考えられた．また，メス型 コネクタ底部から，国内規格の注入器および栄養 セットの先端までの距離と変換コネクタの先端ま での距離との差はおよそ 1.0cm であり，変換コネ クタの先端の方が底部から遠かった．ただし，メ ス型コネクタ底部での栄養剤の残留は測定してい ない．変換コネクタは再使用禁止だが，その禁止 理由は汚染の進行が原因というわけでもなく，明 確ではない17）_{．ISO 規格，国内規格ともに変換} コネクタを使用せずに投与する場合は，少なくと も 8 日以内に投与器具を交換することが望ましい と考えられる（図 5，6）．国内規格の経鼻胃管に ISO 規格の投与器具を取り付ける場合，変換コネ クタの取り扱い方法に拠らず 6 日以内に投与器具 を交換することが望ましいと考えられた（図 7）．  本研究の細菌は主に環境菌およびヒトの常在菌 であった．表 2 の Micrococcus yunnanensis など， ヒトへの感染報告がない細菌も同定された．本実 験と実臨床とは環境が異なり，同一菌種が臨床で 同定されない可能性や，臨床より多くの細菌が同 定される可能性もある．鈴木らは 2014 年に，患 者が使用した栄養剤の容器中の細菌数を 7 日間調 査したが，結果は陰性であった5）_{．1995 年に重} 松らは，口腔外科臨床における患者が使用した経 管栄養チューブの細菌・真菌を調査した18）_．今

回同定された Klebsiella aerogenes, Staphylococcus epidermidis, Enterobacter cloacae 等は重松らの報 告でも同定されていた．ゆえに今回同定された細 菌の一部は臨床でも検出される可能性がある．K. aerogenes や E. cloacae はヒト腸管の常在菌である が，下痢や日和見感染症の原因ともなる19）20）_．

感染管理上も重要である21）22）_{．Pseudomonas} puti-da は土壌，水圏の環境菌であり，多剤耐性を示 すこともある日和見感染菌である23）24）_{．今回は消} 化管に直接進入するフラッシュ水を試料としてお り，臨床でも 104 _{CFU/mL 以上の細菌や病原細} 菌が消化管に進入する可能性が考えられた．  洗浄・消毒は一般的な方法で実施したが，全国 的に統一された方法はない．ただし洗剤使用の有 無で残存細菌数に差がなかった結果より，洗浄方 法の違いは細菌汚染に影響しないと考えられる．  本研究の限界として，今回，国内規格の経鼻胃 管を ISO 規格に変換するコネクタを用いて測定 しており，ISO 規格の経鼻胃管を国内規格に変換 するコネクタを用いた測定は実施していない．ま た，本実験系では，栄養ボトル，栄養セット，注 入器，経鼻胃管のいずれが汚染されていたかは明 確ではない．いずれかの投与器具を毎日交換する 等，条件を変更して検討し，合わせて ISO 規格 導入後に，患者が使用した経鼻胃管等を回収し， 内部の細菌数や細菌種を調査する予定である． Ⅴ．結論  日常臨床とは異なる実験モデルではあるが， ISO 規格および国内規格とも 9 日以上の使用で， 細菌性有害事象の頻度が高まる可能性が考えられ た．ISO 規格および国内規格間の細菌数や細菌種 に差はなく，国内規格から ISO 規格への切り替 えによっても細菌性有害事象の頻度は変化しない と考えられる．変換コネクタ使用時の残存細菌数 の中央値が 7 日間の継続使用で 104 _{CFU/mL に} 達し，使用しない場合より短期間であったことか ら，変換コネクタを使用する場合は細菌汚染に十 分注意する必要性が示唆された．また，移行期間 においては可能な限り ISO 規格と国内規格を混 在させないことが望ましいと考えられた．  本論文に関する著者の利益相反なし 謝　辞  本研究に関して，上市されていない ISO80369-3 の製品サンプルおよび変換コネクタの製品サンプ ルをご提供下さいました株式会社トップに深謝致 します． 引用文献 1）日本静脈経腸栄養学会．栄養療法の種類と選択，経 腸栄養アクセスの管理．静脈経腸栄養ガイドライン． 第 3 版．照林社，東京，2014，p14-15，p59-60. 2）疋田茂樹，溝手博義，平川信子ほか．経腸栄養剤の 細菌増殖の予防対策．JJPEN 20：73-76，1998. 3）佐和章弘，山嵜紘道，尾家重治ほか．経腸栄養剤の 微生物汚染とその対策．日環感 12：99-102，1997. 4）根城しずか，杉山美妃子，出町知美ほか．在宅にお ける経管栄養に使用するシリンジの洗浄・管理方法． 保健科学研究 4：11-16，2014. 5）鈴木美栄，神谷洋子，石川 操．経腸栄養に用いる 容器の交換時期と汚染状況―細菌繁殖の視点から ―．看護総合 44：282-285，2014. 6）櫻田美城，大塚志穂，小田有紀ほか．経腸栄養点滴 チューブの効果的洗浄方法の検討．日看会論集：地 域看 29：166-168，1999. 7）尾家重治，神谷 晃．経腸栄養剤の微生物汚染とそ の対策．医科器械学 71：516-517，2001. 8）三善郁代，篠田かおる，高橋知子ほか．東海 3 県に おける経管栄養に関連したノンクリティカル器材の 衛生管理についての実態調査．愛知医大看紀 15： 27-37，2016. 9）尾家重治，神谷 晃．経腸栄養剤の細菌汚染例．日 化療会誌 40：743-746，1992. 10）厚生労働省医政局総務課医療安全推進室長．経腸栄 養分野の小口径コネクタ製品の切替えについて．医 政安発 0316 第 1 号．2018． 11）厚生労働省医薬・生活衛生局．相互接続防止コネク タに係る ISO 規格（ISO（IEC）80369 シリーズ） の導入について−経腸栄養分野の小口径コネクタ製 品の切替えについて−．医薬品・医療機器等安全性 情報 No.366．2019. 12）古屋宏章，熊木良太，赤川圭子ほか．経管栄養で併 発する下痢の原因探索 チューブの汚染について． 昭和学士会雑誌 79：234，2019. 13）遺伝子解析による微生物の迅速同定法．日本公定書 協会編．第十七改正日本薬局方．2016，p2407-2408. 14）Okuma T, Nakamura M, Totake H, et al. Microbial

contamination of enteral feeding formulas and diar-rhea. Nutrition 16 : 719-722, 2000.

15）Casewell MW, Cooper JE, Webster M. Enteral feeds contaminated with Enterobacter cloacae as a cause of septicemia. Br Med J (Clin Res Ed) 282 : 973, 1981.

16）Thurn J, Crossley K, Gerdts A, et al. Enteral hy-peralimentation as a source of nosocomial infection. J Hosp Infect 15 : 203-217, 1990. 17）森井大一．シングルユース製品（SUD）を取り巻く 諸問題 “再使用禁止”の通知をどう読むか．日環 境感染会抄集 33：58，2018. 18）重松可明，藤田訓也，大須賀敏ほか．口腔外科臨床 における経管栄養チューブに関する臨床細菌学的研 究．日口腔外会誌 41：406-410，1995.

19）Kiselev BS, Dustukhamedov NS, Golubeva IV, et al. Isolation of bacteria of the Klebsiella genus in diar-rhea in polar researchers. Zh Mikrobiol Epidemiol Immunobiol 12 : 49-52, 1978.

20）Bondarenko VM, Barkus MM, Bondarenko VM. Enterotoxigenic capacity of strains of Klebsiella and Enterobacter genera isolated in acute intestinal diseases in children. Zh Mikrobiol Epidemiol

Immu-nobiol 7: 28-32, 1986.

21）大城健哉．【感染症クイックリファレンス】原因微 生物 グラム陰性桿菌 Stenotrophomonas malto-philia．検と技 46：240-241，2018.

22）Apisarnthanarak A, Fraser VJ, Dunne WM, et al. Stenotrophomonas maltophilia intestinal coloniza-tion in hospitalized oncology patients with diarrhea. Clin Infect Dis 37 : 1131-1135, 2003.

23）四方田幸恵，高橋綾子，大久保豊司ほか．カルバペ ネム系薬耐性 Pseudomonas putida の分離状況とそ の遺伝子学的背景．日化療会誌 51：8-12，2003. 24）Nikel PI, de Lorenzo V. Pseudomonas putida as a

functional chassis for industrial biocatalysis : From native biochemistry to trans-metabolism. Metab Eng. 50 : 142-155, 2018.

Time course changes in bacterial contamination

with the new standard enteral feeding connecter (ISO 80369-3)

Hiroaki Koya1)_{, Keiko Ishino}2)_{, Ryota Kumaki}1)_{, Keiko Kishimoto}1) _{and Naomi Kurata}1)

Division of Social Pharmacy, Department of Healthcare and Regulatory Sciences1)_,

Division of Infection Control Sciences, Department of Clinical Pharmacy2)_{, Showa University School of Pharmacy}

Objective: The enteral feeding connecter that meets the Japanese standard has started being replaced with a

connecter that meets the international standard ISO80369-3 from December 2019 in Japan. We prepared a feeding apparatus using the Japanese standard connecter or ISO standard connecter, with and without use of an adapter, to compare microbial contamination under experimental conditions.

Methods: An enteral formula was injected into the feeding apparatus twice a day for 14 days. Purified

wa-ter used for flushing was recovered and cultured. The number of bacwa-terial colonies was counted and bacwa-teri- bacteri-al strains were identified. Also, three conditions (no flushing, flushing with water, and replacing the con-necter) were evaluated when the two different connecters were used with an adapter.

Results: Bacterial counts exceeded 104 _{CFU/mL on day 9 regardless of whether the Japanese or ISO}

stan-dard connecter was used, as well as on day 7 if the two connectors were both used with an adapter. Bacteria identified were those associated with diarrhea or sepsis. The bacteria identified after using the adapter were similar to those identified from the feeding tube. There were no differences between the three maintenance conditions when using the adapter.

Discussion: The risk of adverse events caused by microbes is likely to increase on day 9 and beyond

regard-less of the standard connecter used, suggesting microbial contamination will not be altered by replacing the Japanese standard connecter with the ISO one. It is necessary to pay sufficient attention to bacterial contam-ination when an adapter is used, and mixed use of the different standard connecters should be avoided as much as possible.