SCFによる精原細胞の増殖促進活性に対するＴＢ処理の 影 響

ヒト組み換えＳＣＦ(rhSCF)をイモリ精巣器官培養に投与すると、基本培地に

比べて精原細胞の増殖活性が促進される（Abeeta1.,2002)。ＳＣＦは器官培養で

は体細胞に働いて精原細胞の増殖を促進すると考えられているが、体細胞のう ちセルトリ細胞に働くのか、ペリシスティック細胞に働くのか、不明である。

そこで、ＴＢ処理によってペリシスティック細胞を殺した場合のＳＣＦの影響を 調べた。

Fig.３に示されるように精原細胞の増殖活性は、Controlにおいて、ＴＢ５時間

と９時間処理は無処理に比べて精原細胞の増殖活性を若干低下させた。ＴＢ処 理後ＦＳＨ存在下で培養した場合は、ＴＢ５時間と９時間処理は無処理に比べ、

精原細胞の増殖活性はわずかに減少させたものの、有意差は見られなかった。

FSHはセルトリ細胞を介して精原細胞の増殖を促進することから、ペリシステ ィック細胞死を引き起こしても、精原細胞の増殖活性に影響はないと考えられ る。一方、ＴＢ処理後ＳＣＦ存在下で培養した場合、精原細胞の増殖活性はＴＢ 処理５時間、９時間いずれの場合も顕著に減少し、ContIOlとほぼ同じ値になっ

た。この結果から、ＳＣＦはペリシスティック細胞を介して精原細胞の増殖を促 進することが示唆された。

３３

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Fig.３pFSH，rhSCFによる精原細胞の増殖促進活性に対するＴＢ処理の

影 響

３４

ＴＢＯ時間、５時間、及び９時間処理後、基本培地、ｐFSH、rhSCF添加培地に

おいて１週間器官培養後、ＢｒｄＵを取り込ませ、増殖活性を調べた。３回の結果 の平均値（カラム）と標準誤差（バー）を示す。＊Ｐ＜0.05,＊＊＊Ｐ＜0.001

３．３１GF－１とnNRG1による精原細胞の増殖促進活性に対する

、 処 理 の 影 響

IGF-I（Nakayamaeta1.,1999）やnNRG1(OIaleta1.,2008)も器官培養で精原細

胞の増殖を促進することが報告されているが、どの体細胞を介して精原細胞の 増殖を促進するのか不明である。そこで、ＩＧＦI又はnNRG1で刺激された精原 細胞の増殖活性に対するＴＢ処理の影響について調べた。その結果､ＴＢ処理は

IGFI又はnNRG1で刺激された精原細胞の増殖活性に殆ど影響しなかった(Fig.

4)。これらの結果から、ＩＧＦIとnNRG1はぺリシステイック細胞ではなく、セ ルトリ細胞を介して精原細胞の増殖を促進すると考えられた。

３．４１GF－１とＦＳＨによる精原細胞の分化促進活性に対するＴＢ

精巣断片の器官培養を行った場合、ＦＳＨ（Jieta1.,1992）とIGFＩ（Nakayama

eta1.,1999)は精原細胞から精母細胞への分化を誘導することから､ＴＢ処理（５

時間）がＦＳＨとIGF-Iによる精母細胞への分化促進能力にどのような影響を与 えるかについて調べた。その結果、ＴＢ処理（Fig.５，，Ｆ）した場合も処理しな

い場合（Fig.５Ｃ,Ｅ）と同様に、２週間培養後、ＦＳＨとIGF-I両方とも精母細胞

が多数出現した。ＴＢ処理した場合は処理しない場合と比べて多少分化率が低

下したが、有意差はなかった（Fig.６)。Control培地においては精母細胞への分

化はみられなかった（Fig.５．Ａ,Ｂ,Fig.６)。

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pFSH ^{rhlGF~Ｉ ｎＮＲＧ１}

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