4
〜
5 62頁参照
○1注
○2委
3121 HIV-1 RNA定量
《TaqManPCR法》
血液 8.0 EDTA血漿3.5
遠心 135
冷
凍結 不可
ロシュ/リア
ルタイムRT-PCR法
定量結果: 4.0X101未満
(定量下限)
増幅反応シグナル:検出せず
520 微生
4
〜 8
必ず専用容器をご使用下さ い。62頁参照
○2委
821 HIV-1抗体 《確認試験》
66冷 ウエスタンブロット法 陰性 (−)
280 免疫
4
〜
7 62頁参照
○1注
○2委
コピー/ml
826
HTLV-Ⅰ抗体
《スクリーニング》
(ATLA抗体)
血液 2.0 血清 0.5
遠心
01
02
冷 CLEIA 陰性 (−)
190 免疫
4
〜 7
陽性の場合は「確認試験」の 実施をお勧め致します。
○2委
1 ヶ 月
1390
HTLV-Ⅰ抗体
《スクリーニング》
(ATLA抗体)
血液 1.5 血清 0.3
遠心 01
凍 PA 16倍 未満
85 免疫
4
〜10
○8委
1743 HTLV-Ⅰ抗体 《確認試験》
(ATLA抗体WB法)
血液 2.0 血清 0.6
遠心
01
02
冷 ウエスタンブロット法 陰性 (−)
450 免疫
4
〜10
○2委
1 ヶ月
レ ト ロ ウ イ ル ス
89 (定性) アデノウイルス抗原 (小指大) 糞便 1g
32凍 イムノクロマト法 (−)
60 免疫
2
〜 3
ロタウイルス抗原とアデノウ イルス抗原を同時に検査した 場合は、ロタウイルス抗原一 方のみの算定となります。
○2注
単純ヘルペスウイルス特異抗原 FAT 1型 陰性(−)
2型 陰性(−)
180 免疫
4
〜7 検体の採取については63頁 参照。
手
○2委
2199
(サイトメガロウイルス抗原)CMV-PP65 EDTA加血液 5.0
15冷
凍結 不可
間接酵素抗体法
(アンチジェネミア法)
陰性 (−)
410 免疫
4〜 5
受付曜日:月〜金曜日。採血後、
速やかに検体をご提出下さい。
(原則として採血後24時間以内 の検体を用います) 委
○2
○3注
2699 インフルエンザA・B 迅速試験
鼻腔ぬぐい液 咽頭ぬぐい液 鼻腔吸引液
30
冷 EIA A型 陰性(−) B型 陰性(−)
150 免疫
1〜 2
鼻腔および咽頭ぬぐい液は検体を採 取した面部をスピッツに入れ生理食 塩水を一滴加えて提出して下さい。
2603 (SRSV)-RNA同定 ノロウイルス
糞便 1g
(小指大)
30凍
-20℃
以下
RT-PCR法 検出せず ―
5〜 7吐物(2ml)でも検査可
必ず遺伝子検査の専用検体としてご提出 下さい。(同一検体で遺伝子検査以外の項 目との重複依頼は避けて下さい。) ○2委
88 ロタウイルス抗原 (小指大) 糞便 1g
32凍 イムノクロマト法 (−)
65 免疫
2〜 3
ロタウイルス抗原とアデノウ イルス抗原を同時に検査した 場合は、ロタウイルス抗原一 方のみの算定となります。
ウ イ ル ス 抗 原 の 検 出
ウ イ ル ス 核 酸 の 検 出
3118 ノロウイルス抗原 糞便 (小指大) 1g
32冷 イムノクロマト法 (−) ―
2〜 3他検査と併用は出来ません
1386 ウイルス分離 63頁参照 ―
14〜54
○2委
1387 ウイルス同定 63頁参照 ―
14〜54
○2委
HIV抗原・抗体検査の留意点
【検体の取り扱い、および依頼方法】
RIBA- 判定基準 「HCVサブタイプ解析」HCV分離株の分類
判 定 抗原バンドの反応パターン
陰 性 4種類のHCV抗原バンドが全て<+
SODバンドのみが反応
判定保留 4種類のHCV抗原バンドのうち、1種類のみが≧+
1種類以上のHCV抗原バンドが≧+かつ、SODバンドが≧+
陽 性 4種類のHCV抗原バンドのうち、2種類以上が≧+
統一呼称
小原らの分類 岡本らの分類 Simmonds P.らの分類 タイプ サブタイプ
Type1 subtype 1 a
グループ 1 Type Type 1 a subtype 1 b Type Type 1 b Type2 subtype 2 a
グループ 2 Type Type 2 a subtype 2 b Type Type 2 b
血清を用いた遺伝子増幅(PCR等)検査の留意点
【検体の取り扱い、および依頼方法】
1)遺伝子増幅検査の検体採取・保存に際しては、核酸分解酵素の影響および検体相互のcross contaminationを防ぐため、以下の点にご注意下さい。
①専用の真空採血管(分離剤入り、容器番号66、134、135)を使用し、採血・ご提出下さい。
②同一検体で遺伝子検査以外の項目との重複依頼は避けて下さい。(遺伝子検査専用検体)
③上記指定容器に採取後、4〜5回静かに転倒混和し、室温にて30〜60分放置して下さい。凝固完了を確認後遠心分離し、そのまま凍結してご提出 下さい。なお、凍結融解をしないで下さい。 ※未分離凍結検体、溶血検体では抽出効率の低下、遺伝子増幅阻害等によるデータへの影響が考えら れます。HIV-1RNA定量は遠心分離(1200g±400gで20分間)し、冷蔵にてご提出下さい。
2)遺伝子増幅につきましては、ヘパリンによる増幅反応の阻害があるため、透析患者等では検出されないことが考えられますので、ご注意下さい。
3)「HIV-1RNA」検査のご依頼に際し、患者名にはイニシャルまたはID番号をご使用下さい。
1)必ず指定容器(容器番号 66、3ml容量)で約2ml採血後、遠心機にかけ、そのまま冷蔵保存でご提 出下さい。
2)同一検体で他項目との重複依頼は避けて下さい(単独検体)。
3)患者名にはイニシャルまたはID番号をご使用下さい。
4)スクリーニング検査(CLIA法)で「陽性」を呈した場合は、原則としてウエスタンブロット法による 抗体確認検査を実施致します。
HCV群別 報告結果 グループ1
グループ2
判定保留(抗体価同等のため)
判定不能(抗体価陰性のため)
TaqManPCR法による遺伝子増幅検査の結果の考え方
結 果 定量結果
(Log IU/mL)
HCV増幅 反応シグナル
結果の考え方
測定結果が測定範囲上限を超えた場合 7.8以上
1.2〜7.7 1.2未満
1.2未満
検出 検出 検出 検出せず
HCVを検出した HCVを検出した HCVを検出した
HCVを検出しなかった 測定範囲内で測定結果を得た場合
増幅反応シグナルは検出したが測定結果が 測定範囲下限未満であった場合
増幅反応シグナルを検出しなかった場合
【HCV-RNA定量】
結 果 定量結果
(コピー/mL)
HIV増幅 反応シグナル
結果の考え方 測定結果が測定範囲上限を超えた場合 1.0×107以上
4.0×101〜0.9×107 4.0×101未満
4.0×101未満
検出 検出 検出 検出せず
HIVを検出した HIVを検出した HIVを検出した
HIVを検出しなかった 測定範囲内で測定結果を得た場合
増幅反応シグナルは検出したが測定結果が 測定範囲下限未満であった場合
増幅反応シグナルを検出しなかった場合
【HIV-1 RNA定量】
結 果 定量結果
(Log コピー/mL)
HBV増幅 反応シグナル
結果の考え方
測定結果が測定範囲上限を超えた場合 9.0以上
2.1〜9.0
検出 検出
HBVを検出した HBVを検出した 測定範囲内で測定結果を得た場合
【HBV-DNA定量】
ウ
イ
ル
ス
学
単純ヘルペス特異抗 原検査の留意点
【検体の採取方法】
水疱の場合:小水疱、膿疱、痂皮
1)針を挿入し、上部の皮あるいは痂皮を剥がして下さい。(図1)
2)ピンセットで、剥がした皮を除去して下さい。(図2)
3)ポリエステル綿棒を生理食塩水や精製水で軽く湿らせ、病巣基底部前 面を綿棒で強くぬぐって下さい。(図3)
水疱でない場合:基底部細胞の採取
ポリエステル綿棒を生理食塩水や精製水で軽く湿らせ、病巣基底部前面を 綿棒で強くぬぐって下さい。(図3)
≪注意≫
[ご注意]
早朝の水疱病巣が検体として最適です。
水疱内容液は検体として不適です。
ウイルス感染細胞は病巣基底部にありますので、患者が痛いというくら い強くぬぐい、基底部の細胞を採取します。
膿が出ている場合は、病巣基底部をかき乱さないように注意し、綿棒で まず膿をぬぐい去り、別の綿棒で検体を採取して下さい。
1)スライドグラスの2つのウェルに内側から円を描くように、こすらず、
軽く叩くように塗抹して下さい。
その際、綿棒に付着している検体全てが塗抹されるよう、綿棒を少し ずつ回転させ、ウェルからはみださないように塗抹して下さい。
2) 風乾
操作中検体が剥がれ落ちる原因となりますので、完全に乾燥させて下 さい。
ドライヤーの冷風で乾燥させることも可能です。
3) アセトン固定
検体の塗布してあ る ウ ェ ル に ア セ ト ン を 滴 下 し て 固 定 し、 蒸 発 さ せ ま す。
図 1
ウイルス分離・同定
図 2 図 3
【検体の塗抹方法】
分離可能ウイルス 主要検体 保存
条件 同定可能な型 実施料 判断料 所要
日数 備 考
サイトメガロ (CMV) 咽頭ぬぐい液 尿 冷 凍結 不可
― 1 4 〜 5 4
主要検体の内訳
■ :主として用いられる検体
■ :必要に応じて用いられる検体 検査方法
組織培養
・ HeLa(ヒト子宮頚癌細胞)
・ Hep-2 (ヒト喉頭癌細胞)
・ HEL(ヒト胎児肺細胞)
・ MDCK(イヌ腎細胞)
・ Vero(ミドリザル腎細胞)
・ RD1 8 S(ヒト横紋筋腫細胞)
・ B9 5 a(マ ー モ セ ッ ト リ ンパ球由来細胞)
・ A5 4 9 (ヒト肺癌細胞)
同定方法
蛍光抗体法、中和試験等。アデノウイル ス に つ い て は、PCR法 に よ り 同 定 を 行 います。エンテロウイルスについては、
中和試験による同定が困難な場合、 PCR 法にて「エンテロウイルス」と同定致し ます。
水疱液の採取に際しては、予め滅菌生理 食塩水にて皮膚を洗浄して下さい(アル コール消毒は不可) 。
ウイルスが分離された場合のみ同定検査 を実施致します。ウイルス「分離」およ び「同定」は個別に検査料金を申し受け ます。
水痘 ・ 帯状ヘルペス 水疱
単純ヘルペス 咽頭ぬぐい液 水疱 陰部ぬぐい液
凍
− 7 0 ℃ 以下
1 , 2 型
アデノ 咽頭ぬぐい液 糞便 尿 結膜ぬぐい液 1 , 2 , 3 , 4 , 5 , 6 , 7 , 8 , 1 1 , 1 9 , 3 7 型 インフルエンザ 咽頭ぬぐい液 A/H1 , A/H3 , B型 パラインフルエンザ 咽頭ぬぐい液 喀痰 1 , 2 , 3 , 4 型 ムンプス 髄液 咽頭ぬぐい液
ポリオ 髄液 咽頭ぬぐい液 糞便 1 , 2 , 3 型 コクサッキーA群 髄液 咽頭ぬぐい液 糞便 結膜ぬぐい液 7 , 9 , 1 6 , 2 4 型 コクサッキーB群 髄液 咽頭ぬぐい液 糞便 1 , 2 , 3 , 4 , 5 , 6 型
エコー 髄液 咽頭ぬぐい液 糞便 1 , 3 , 4 , 5 , 6 , 7 , 9 , 1 1 , 1 2 , 1 3 , 1 4 , 1 6 , 1 7 , 1 8 , 1 9 , 2 2 , 2 4 , 2 5 , 3 0 型
エンテロ 髄液 咽頭ぬぐい液 糞便 7 1 型
麻疹*3 咽頭ぬぐい液
検体は、発病後速やかに(一般的に4日以内)無菌的に採取・保存して下さい。細菌繁殖などにより培養細胞が汚染さ れ、検査不能になる場合 もありますので、ご注意下さい。
各種ぬぐい液および水泡:滅菌済みのプラスチック製綿棒にて採取。ウイルス保存液入りバイアルびんに綿棒をいれてよ く攪拌後、綿棒を容 器上部で折り、密栓して下さい。
木製綿棒の使用は避けて下さい。
木製綿棒を使用した場合は、綿棒を抜いて密栓して下さい。
糞便:小指頭大の半分( 0 . 5 g)をウイルス保存液入りバイアルびんに入れて密栓して下さい。
*1
*2