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0 1 2 Added NaCl (M)
Fig. 5. Effects of NaCl on Growth of Zygosaccharomyces回 虫ii and
s .
accharomyee̲ s
cerevisiae Cells.A， time courses of growth of
Z .
ro旦主iicells in YM medium containing OMr v3M NaCl. B， Ratio of growth ofZ .
ro旦玉i
よand ̲S. ̲cerevisiae cells.10
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と 略 ) で 培 養 し た と こ ろ 、
Z .
rouxi i細 胞 の ダ プ リ ン グ タ イ ム は そ れ ぞ れ3時間、 3時間、 3 . 5時間、 6時 間 で あ っ た 。Z .
rouxi i細胞は、1M食 塩 培 地 で は 対 照 の OM食 塩 培 地 と ほ ぼ 同 じ 生 育 が 、 2M食 塩 培 地 で は 対 照 に 比 べ の 培 養 初 期 に ラ グ 期 が 生 じ た が 定 常 期 に 至 り 対 照 と 同 様の生育が、 3M食 塩 培 地 で は 著 し い 生 育 の 遅 れ が 認 め ら れ た 。 これ らのことは、
z .
rouxi i細 胞 の 生 育 が 培 地 の 食 塩 濃 度 の 増 加 に よ っ て 阻 害 さ れ る こ と を 示 し て い る 。 . s .c ̲
erevisia e に お け る 生 育 タ イ ム コ ー ス は 省 略 し た 。図5‑Bに、
Z .
rouxi iと.s.c ̲
erevisia e細 胞 の 生 育 に 及 ぼ す 食 塩 の効果を、 定 常 期 の 細 胞 に つ い て 対 照 の OM食 塩 培 地 か ら 得 た 細 胞 数 に 対 す る 生 育 度 の 相 対 値 と し て 表 示 し た 。 最 終 的 に 定 常 期 で 得 ら れ たZ .
rouxi i細 胞 量 は OM食 塩 培 地 に 比 べ て 1Mと 2M食 塩 培 地 で は そ れ ぞ れ 1.5倍、 1 .3倍 多 か っ た 。 こ の 食 塩 添 加 に よ る 細 胞 収 量 の 増 加 は 静 置 培 養 条 件 で は 認 め ら れ な か っ た の で ( デ ー タ 示 し て い な い ) 、 振 と う 培 養 の 効 果 、 即 ち 、 培 養 液 の 溶 存 酸 素 量 に 依 存 し て い る と 推 察された。Z .
rouxi i細胞と異なり、.s.c ̲
erevisiae細 胞 の 生 育 は 培 地 の 食 塩 濃 度 に よ り 著 し く 抑 制 さ れ た 。 この結果は'l̲. rouxi iが 耐塩性であり、.s.c ̲
erevisiaeが 食 塩 感 受 性 で あ る こ と を 良 く 示 している。特に、.s.
c ̲
erevisiae細 胞 は 1M食 塩 培 地 で は ほ と ん ど 生 育 し な か っ た の で 、 以 降 で は 削 除 し た 。1・3 ・2
Z .
rouxi i細 胞 の 形 態 に 及 ぼ す 食 塩 の 影 響OMか ら 3M食 塩 を 含 む YM培 地 で 培 養 し た
f .
rouxi i細 胞 の 形 態 を 顕 微 鏡 下 で 観 察 し 、 写 真 を 図 6に示した。 また、 細 胞 の 最 大 直 径 に 対 す る 最 小 直 径 の 比 を 各 細 胞 の 顕 微 鏡 写 真 か ら 計 測 し た と こ ろ 、 そ のA B
c
DFig. 6. Micrographs of Zygosaccharomyces rouxii Cells. A， in OM NaCI‑YM medium B， oin 1M NaCI‑YM medium C， in 2M NaCI‑YM medium D， in 3M NaCI‑YM medium The scale bar represents 10μm.
23
値 は OM、 1M、 2M、 3M食 塩 培 地 で 培 養 し た 細 胞 で そ れ ぞ れ 0.90、 0.67、
o
.65、 0.50であった。 こ の 結 果 は 培 地 の 食 塩 濃 度 の 増 加 と と も に 、培 養 細 胞 の 形 が 球 形 か ら 卵 形 に 変 化 し た こ と を 示 し て い る 。 酵 母 細 胞 の 細 胞 の 形 は 細 胞 壁 、 細 胞 内 骨 格 な ど に よ り 決 定 さ れ て い る と 考 え ら れ る が 、 本 実 験 で は こ れ 以 上 追 究 し な か っ た 。
1 . 3
・3 Z . r o u x i i
細 胞 の 脂 質 組 成 に 及 ぼ す 食 塩 の 影 響図 7に 脂 質 含 量 に 対 す る 培 地 食 塩 濃 度 の 影 響 を 示 し た 。 各 脂 質 成 分 は 凍 結 乾 燥
z . r o u x
i i 細 胞 重 量( m g )
当 り の 含 量(μg)
と し て 表 示 した。 1Mと 2M食 塩 培 地 で 培 養 し た 細 胞 で は 、 OM食 塩 培 地 で 培 養 し た 細 胞 と 比 べ た 時 、 ス テ ロ ー ル エ ス テ ル 量 が 著 し く 増 加 し 、 ト リ ア シ ル グ リ セ ロ ー ル 量 は 減 少 し た 。 3M食 塩 培 地 で 培 養 し た 細 胞 で は 、 そ れ ぞ れ は OM食 塩 培 地 で 培 養 し た 細 胞 の レ ベ ル に 戻 っ た 。 さらに、 ス テ ロ ー ル と 遊 離 脂 肪 酸 量 は 培 地 の 食 塩 濃 度 の 増 加 と と も に 増 加 し た 。 一 般 的 に 遊 離 型 の 脂 肪 酸 は 細 胞 毒 性 を 持 っ て い る と 言 わ れ て い る の で 、 高 濃 度 の 食 塩 が 培 地 に 存 在 す る と き 、 遊 離 脂 肪 酸 が 細 胞 に 蓄 積 す る こ と は 、 耐 塩 性 酵 母 で あ っ て も 脂 質 代 謝 が 局 部 的 に 異 常 を き た し て い る と 推 測 さ れ る 。 燐 脂 質 は 3M食 塩 培 地 で そ の 含 量 が 若 干 低 い 以 外 は ほ ぼ 一 定 レ ベ ル に 維 持 さ れ て い た 。 ここで、 燐 脂 質 に 対 す る ス テ ロ ー ル の 比 ( ス テ ロ ー ル / 燐 脂 質 ，μg/μg)
を 計 算 す る と 、 OM、1M、 2M、 3M食 塩 を 含 む 培 地 で 培 養 し た 細 胞 で そ の 比 は そ れ ぞ れ 0.06、
o .
13、o .
14、o .
18であった。 こ の 結 果 は 培 地 食 塩 濃 度 の 増 加 と と もに 燐 脂 質 当 り の ス テ ロ ー ル 量 が 増 加 し て い る こ と を 示 し て い る 。 図 8に 中 性 脂 質 組 成 ( 完 ) 、 燐 脂 質 組 成 (% ) 、 脂 肪 酸 組 成 ( %) に 及 ぼ す 培 地 食 塩 濃 度 の 影 響 を 示 し た 。 培 地 に 食 塩 が 存 在 す る こ と に よ り ホ
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