子豚の血清遊離アミノ酸の動態に及ぼす
自然
H
甫育と人工晴育の比較
岩 津 季 之 ・ 楢 崎 昇 ・ 花
j畢 修
酪 農 学 園 大 学 , 江 別 市 069 (1994.1.18 受理) キーワード:血清遊離アミノ酸,血清蛋白量, 自然晴育子豚,人工H甫育子豚要
事句 自然日甫乳および初乳を全く給与せずに人工晴乳し た子豚を用い,血清遊離アミノ酸の動態を比較検討 した.その結果,アミノ酸総量,必須,非必須およ び非蛋白構成の各アミノ酸総量は,出生後12,24時 間で人工哨乳区が自然晴乳区より有意に低かったが, 72時間になると人工哨乳区が自然晴乳区の値に近づ き,それ以降は両区近似した値で推移した.しかし, 個々のアミノ酸についてみると,人工晴乳区は, 72 時間以降も Arg,ProおよびGlnなどが長期にわた り低く推移し,一方,自然晴乳区はTauやHy-Pro が時間の経過と共に著しく増加するなど,区によっ て特異的な変化がみられた. 緒 昌 初生子豚における血清蛋白質の動態については数 多くの報告がみられる(古郡ら;1973,木村ら;1989, 斎藤;1978).この時期の蛋白質代謝は,摂取蛋白質 の量や質,初期成長や更には免疫獲得などと深く関 連するが,血清遊離アミノ酸の動態についての報告 は殆ど見当たらない.血清中の遊離アミノ酸は摂取 蛋白質の影響を受けるだけでなく,様々な代謝経路 と密接なつながりがある.従って,血清遊離アミノ 酸を指標とした子豚の栄養生理の把握は重要な意義 を有するものと考えられる. そこで,本実験では自然晴乳と人工哨乳の子豚に ついて血清遊離アミノ酸の動態を比較検討した.実 験 方 法
供試豚は, 2腹24頭の一代雑種LDを生後直ちに 二分して, 自然哨乳区と人工H甫乳区に配置して飼育 し,それらから無作為に抽出した各区6
頭,合計12 頭を用いた.自然晴乳区は3週齢で離乳した.人工 晴乳区は次のように晴育した.出生 1日目は,免疫 抗体供給源として豚血清γ-glb粉末1.2gと育児用 粉乳6.3gに温湯を加えて25mlとし,2時間間隔で 12回晴乳した.2日目は, γ-glb粉末1.8gと育児用 粉乳10.2gに温湯を加えて40mlとし, 3時間間隔 で8回哨乳した.3日目は,育児用粉乳7.5gと市販 の子豚用代用乳7.5gに温湯を加えて50mlとし, 4 時間間隔で6回晴乳した.4日目は,子豚代用乳20 gに温湯を加えて80mlとし,6時間間隔で4回晴乳 した.5日目は,子豚用代用乳18gに温湯を加えて 75 mlとし, 4時間間隔で4回目甫乳した.6日目以降 は代用乳を粉状のまま自由採食させ, 10日齢で完全 離乳した.供試豚は,本実験と並行して初乳無給与 の人工晴育子豚に対して豚血清由来のγ-glbを経口 投与し,免疫抗体獲得に及ぼす効果の検討に用いら れた(楢崎;1990).このことから,供試した市販の 代用乳にはγ-glbが添加されていたので,その影響 を避けるためパイノサイトーシスが作用する生後2日 間は市販の代用乳を用いず,.γ-glb粉末と育児用粉乳 で,代用乳を調製した.代用乳の調製割合および給 与量は丹羽ら (1951)の初乳固形分率および吸乳量 を参考に決定した.血液サンプルは出生後12,24,Comparison between naturally nursing and artificially nursing on the changes of serum free amino acids in piglets: Toshiyuki IWASAWA
,
Noboru NARASAKI and Tadashi HANASAWA (Rakuno Gakuen University Ebetsu 069)岩i畢 季 之 ・ 楢 崎 昇 ・ 花 津 修
(
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l/dl) 人 工 帆 区 図TAA図TEAA日TNEAA旧
TNPAA自然帆区日 TAA 図 TEAA~TNEAA 目 TNPAA
7
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12時間後 24時間後 72時間後 1週齢 図1.血清中における各アミノ酸総量の経時的変化 3週齢 72時間および1,2,'3, 5, 9週齢に前大静脈から採 取し,分離血清を前処理して,高速液体クロマトグ ラフィーにより血清遊離アミノ酸を定量分析した(島 津製作所;1990).結 果
子豚血清のアミノ酸総量(TAA),必須アミノ酸総 量(TEAA),非必須アミノ酸総量 (TNEAA)およ び非蛋白構成アミノ酸総量 (TNPAA)の経時的変 化は図1のとおりである.アミノ酸濃度はすべてμmol/ dlで示した. 出生後12時間では,人工哨乳区:自然哨乳区の順 に, TAA 321.09 : 905.39, TEAA 117.37 : 270.01, TNEAA 174.44 : 569.90, TNPAA 29.29 : 65.49 で,人工晴乳区の各アミノ酸総量はいずれも自然晴 乳区よりも有意に低い値を示した(P<0.001).24時 間では人工晴乳区は12時間の値と殆ど変わらなかっ た.自然哨乳区は12時間に比べて減少したが,TEAA を除いて人工晴乳区との聞に有意差がみられた(P< 0.01, P<0.05). 72時間になると人工晴乳区の各ア ミノ酸総量は24時間の値から大きく増加し,自然哨 乳区の値に近づき,有意差はみられなくなった.そ の後,両区は, TAA 700-600, TEAA 180-150, TNEAA 450 -350の範囲で近似して推移し, 9週齢 に至るまで有意差がみられなかった.TNPAAはl 週齢と 2週齢で区間に有意差がみられた (P<O.Ol, P<0.05). 2週齢 5週齢 9週齢 血清中の必須アミノ酸 (EAA)の経時的変化は図 2のとおりである. 12時間において,Ileを除く EAAは人工晴乳区が 有意に低い値で (P<O.001, P<O.Ol, P<0.05), なかでも Lysは自然晴乳区の 1/3弱の21.1,Argは 約1/4の6.20と低く,更にMetは検出できず,両区 に大きな聞きがみられた.24時間では自然晴乳区の EAAは減少傾向を示したが,両区の差はあまり狭ま らず, Leu, Lys, Arg, HisおよびMetに有意差が みられた (P<O.Ol,P<0.05). 72時間になると, 自然晴乳区のVal,Leu, Lys, Arg, His, Met, Pheは24時間の値から更に減少して人工晴乳区の値に近 づいたため,区間に有意差はみられなくなった.し か し な が ら , 人 工 哨 乳 区 のArgは3週 齢 ま で 5.66-9.83と自然哨乳区の1/4-3/5と低<,更に5 週齢に至るまで自然晴乳区を下回り, 1, 2週齢でも 有意差がみられた(P<O.Ol,P<0..05).一方,人工 H甫乳区のMetは24時間まで微量で検出できなかった が, 72時間以降は著しく増加し, 1週齢から3週齢 にかけて,13.35-16.84の範囲で推移したのに対し, 自然晴乳区は3.65-8.33と低く推移し, 2,3週齢で 有意差がみられた (P<0.05,P<O. 01). 各非必須アミノ酸は24時間まで大部分が人工暗乳 区で、有意に低いが(P<0.001,P< 0.01, P<O. 05), 72時間以降では両区近似した値で推移した.しかし, Glnは, 12時間で自然哨乳区の1/8の4.84,24時間 でも 1/7の6.97に過ぎず,両区の値が近づいたのは 円 H u q t u
子豚の血清遊離アミノ酸の動態 (μ即l/dl) (μIllOl/dl) (μ即l/dl) 50 ,.(リン 40 ロイシン 20 イソロイシン 40 30 15 30 20 10 20 10 ....・ 5 60 スレオニン リヲン アルギニンC 60 25 45 30
J
、
》
グ
15 10 15 5 13 20 18 ヒスチジン フェニルアラニン 10 15 10く~八
4 12 24 72h 1 2 3 5 917
2h 1 2 3 5 91 9 12 247
2h 1 2 3 5 91 自 然 晴 乳 区 一 一 一 人工晴乳区... 図2.
血清中における必須アミノ酸の経時的変化 l週齢以降であった.また, Proは1週齢に至るまで 人工晴乳区は20.57-44.01の範囲で推移し,自然晴 乳区の1/8-2/5に過ぎず, 72時間, 1週齢でも有意 差がみられた(P<O.OOl,P< 0.05). 非蛋白構成ア ミノ酸のTauとHy-Proは,24時間まで両区近似し て推移し, 72時間になるといずれの区も著しく増加 した.しかし, 72時間以降も,自然晴乳区は増加し 続けたのに対し,人工晴乳区は減少した.このため, Tauは3週齢, Hy-Proは5週齢まで自然晴乳区が 上回り,いずれも 1,2週齢で有意差がみられた(P< 0.001, P < 0.01).人工晴乳区の CitとOrnは, 12時 間で自然晴乳区に比べて有意に低く (P<O.OOl),Cit は1/4,Ornは 1/3の値であった.その後も 2週齢ま で人工哨乳区が下回り, Citは 24時間および 2週齢 (P<0.05)で,Ornは 24時間および 1週齢 (Pく0.01) でそれぞれ有意差がみられた.その間,人工晴乳区 のCitとOrnは徐々に増加する傾向を示し, 3週齢で 自然晴乳区の値に近づいた. 血清蛋白量は人工晴乳区が3週齢まで 3.42-3.95 g/dlと低い範囲で推移した.特に12時間および 24時 間では,それぞれ自然晴乳区の5/8と有意に低い値 であった(P<O.OOl).72時間になると自然晴乳区は 減少し,一方,人工晴乳区は増加し,その後3週齢 まで72時間とほぼ同様の値で推移した.この間, 3 週齢まで各時期とも区間に有意差がみられた (P< 0.001).4週齢以降になると両区の値は近似して推移 し,有意差はみられなくなった.考
察
自然哨乳区は血清遊離アミノ酸総量,必須,非必 須および非蛋白構成の各アミノ酸総量が出生後12時 間で最も高<, 72時間まで急速に低下し,その後ほ ぽ安定した推移を示した.それに比べて人工晴乳区 の血清蛋白量およびアミノ酸総量は12時間で著しく 低 <,更に24時間でも殆ど変化がなく, 72時間にな って増加がみられた.人工哨乳区は出生後2日間は 市販の子豚用代用乳を用いず,育児用粉乳と免疫抗 体供給源として豚血清γ-glb粉末を温湯に溶かして 給与した.一方, 自然H甫乳区は同腹子豚の半分を人 工晴乳区のために1・り除いたので,乳頭の競合もな く初乳を十分取りjL_. l'ことができた.豚初乳には蛋 白質が16-20%含まれ,時間の経過とともに著しく -39-岩i畢季之・楢崎昇・花津修 減少して3日目には 5-6%となり,その後ほぽ安定 するといわれており,また免疫の賦与のみならず, 新生子豚の栄養に不可欠なアミノ酸やペプタイドな どを多く含んでいるといわれている(古郡;1980), このことから,摂取乳汁の量並びに蛋白質の質的な 違いが血清遊離アミノ酸濃度に反映したと推察され る.個々のアミノ酸レベルで、比較すると人工晴乳区 においてはArgや Proが 12時間以降,長期にわた って低い値で推移した.この時期の子豚は尿素合成 と体の蛋白質合成の両方を維持するのに十分な速度 でArgを合成することができず (EASTERet al. ; 1974) ,また尿素回路の中間体である OrnやCitも 2 週齢まで低い値で推移したことから,尿素合成能力 が低いことによるArgの合成量の低下か,もしくは 飼料性のArg摂取量が低かったためと思われる.ま た,Proは豚乳蛋白質中に多く含まれているといわれ ており (ELLIOTet al. ; 1971),ここでも代用乳の摂 取不足が反映しているのかもしれない.それに対し て自然晴乳区は尿素回路の中間代謝物である Ornや Cit,更には分娩以降,時間の経過とともに豚乳中の 濃度が増加するといわれる
Tau
や(倉津ら;1986), コラーゲンに特異的に含まれている Hy-Proなどが, 24時間以降 2週齢まで著しく増加することが観察き れ,血清蛋白量の推移も併せて考えると,代謝が充 進して順調に発育したと推察される. 以上のことから,出生後7
2
時間までの体蛋白合成 が盛んな初生期からその後の晴乳期間における子豚 の栄養生理状態を把握するうえで,血清遊離アミノ 酸の動態は有効な指標となることが示唆され,豚乳 および代用乳の成分組成や,これら乳汁の摂取量の 相違による血清遊離アミノ酸濃度への影響など,今 後更に検討が必要で、あると思われる. 文 献EASTER, R.A., R. S.KATZ and D.H. BAKER, (1974) Arginine: A dispens-able amino acid for pos -tpubertal. growth and pregnancy of swine.
J
.
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