グ ル コ ー ス 代 謝 に 於 け る 二 菌 の 相 互 作 用
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(2) 3730. 辻. 乳 酸 の定 量:. 秀. Pヒ ドロ キ シヂ フ ェニ ルを 用 い る. 比 色 法20)に よ つ た. 酷 酸 の定 量:試. 量 溶 液 を硫 酸酸 性 と して 水蒸 気 以 て 滴定 した.. 対 す るHem,. の組 合 せ で はや は りAer単. に乳 酸. 独 の場 合 よ り. は発 育 は不 良 で あ り,グ ル コー ス 消 失量 は大 とな つ. AuとAerの. 二 種 の 菌 を 同時 に接 種 した 場 合 はAlに. Aerと. た.焦 性 ブ ドー酸 蓄 積 はAer単 Ⅲ. 実 験 成 績. Au又. ス消 失 量 は増 大 し,且 つ 分 解産 物 の蓄 積,特 蓄 積 量 の増 大 は著 し くな つ た.. 蒸 溜 し,溜 出液 をn/100NaOHを. 1.. 樹. 独で は 全 くな く,. 組 合せ に 於 て 全 く認 め られ ず, Aer. の焦 性 ブ ドー 酸 酸 化能 が大 で あ るた め 蓄 積 され る焦. P, aer, Mの. 各組. 性 ブ ド‑酸 はAerに. よ り消 費 され る もの と考 え ら. 合 せ の二 種 の 菌を,グ ル コー スを 含 む 液体 培 地 に 同. れ る.又 乳酸 蓄 積 量 もAuの. 時 に接 種 した 場 合 の,発 育 中 の グル コー ス分 解 に於. つ た が,酷 酸 蓄 積 は増 大 され た.. け る相 互 作 用 を検 討 す るた め,実 験 方 法 の 項 に 記 し. AuとMと. 場 合 よ りはや や小 で あ. の組 合せ で は,発. 育 はや や 低 下 しグ. し. た 通 りの 組 成 の培 地 に各 菌 単 独 で,並 び に二 種 の 菌. ル コー ス 消失 量 もや や 減 少 した が焦 性 ブ ド‑酸 蓄 積. を 同 時 に接 種 し,好 気 的,及. は わ ず か に,酷 酸 蓄 積 は か な り増 大 した.然. び 嫌 気 的 に37゜C, 24. 時 間静 置 して 培養 し,濁 度 を 光 電比 濁計 で測 定 した. 蓄 積 はAu単. 後,蓮 沈 上 清 に つ きpHの. で2.4と な つ て や や 低 下 した.. 移 動,グ. ル コー ス 消失. 費,焦 性 ブ ドー 酸,乳 酸,酷 酸 蓄 積 量を 測 定 した. a.. し乳 酸. 独 の場 合 の3.2に 対 し, Mと の組 合せ. Alと 他 菌の組 合 せ に つ い て は 第2表 に示 す如 く,. 好気 的培 養. 好 気 的 培 養 に 於 け るAuと は 第1表. の 組 合せ について. に 示 す 如 くで あ り, Au単. 第1表. 第2表. 発 育 中 の培 地 グル コー ス の 分解(2) 好 気 的 培 養. 独 で は発 育度. 発 育 中 の培 地 グ ル コー ス の分 解(1) 始 気 的 培 養. A1単. 独 で はAuよ. りも多 少 発 育 は不 良 で あ り,グ. ル コー ス消 失,焦 性 ブ ドー酸,乳 酸,酷 酸 蓄 積 は夫 は(++)程. 度 で あ り,グ. 焦 性 ブ ド‑酸. 蓄 積0.7μM/ml,乳. 酷 酸 蓄 積1.2μM/ml, で は 発 育 は(±),グ 乳 酸,酷. ル コ ー ス 消 失 量5.7μM/m1 酸 蓄 積3.2μM/ml,. pHは5.1と. な つ た. Hem. ル コ ー ス消 失,焦. 酸 蓄 積 は 夫 々4.3,. 0.2,. 2.1,. 性 ブ ドー 酸, 2.4,. て 他 菌 と同 時 に接 種 す る と, Auの. 場 合 と同 様 発 育. Hemを. 同 時 に 接 種 した 場 合 は, Au. ル コ ー ス 消 失 量 は や や 大 と な り,分. 解産 物蓄 積 もや. し. は 多少 抑 制 され る傾 向が 認 め られ るが,グ ル コー ス 消 費 は,各 菌単 独 の 場 合 と大 差 ない か,或 い は む し の組 合せ で は著 明 に増 大 し. た.又 分解 産 物 と して の焦 性 ブ ド‑酸,乳. 単 独 の 場 合 よ り は 発 育 濁 度 は や や 不 良 で あ る が,グ. の蓄 積 も大 とな りpHの. 酸,酷 酸. 低 下 も各菌単独の場 合よ. りは著 しか つ た. Aerと. の 組 合せ で はAの. 場 合 と同 様焦 性 ブ ドー. 酸 の 蓄 積 は 減 少 し皆 無 と なつ た.. や 増 大 した. AuとPlと. な つ た.而. ろ大 とな り,特 にP1と. pHは. 6.2と な つ た. 而 し てAu,. 々4.1, 0.5, 1.1, 1.0, pHは6.2と. の 組 合 せ に 於 て も 同 様 で, Au単. の 場 合 に 比 し発 育 は 不 良 に な る に 拘 らず,グ. 独. ル コー. b.. 嫌気的培養. 嫌 気 培 養 に つ い て見 る とAuと. の組 合 せ で は第3.
(3) グル コー ス代 謝 に於 け る二 菌 の相 互作 用 表 に, Alと. の 組 合 せ で は 第4表. 育 は 好 気 的 培 養 に 比 しP1は. に 示 した 如 く,発. 第3表. 3731. 発 育 中の 培 地 グル コー ス の分 解(3) 嫌 気 的 培 養. む しろ嫌気 的 の方 が 多. 少 良 好 で あ つ た. 而 して二 種 菌を 接 種 す る と各菌 単 独接 種 の場 合 に 比 し一 般 に 発 育 は 不 良 と な るが,グ は 大 差 な い か,む の 蓄 積 はAu,. ル コー ス 消失 量. し ろ 大 と な る傾 向 で あ つ た.乳. A1とHem又. はP1の. 酸. 組 合 せ に於. い て は 各 単 独 接 種 に 比 し 大 と な り,特. にAlとHem. と を 同 時 に 接 種 した 場 合 に は 著 し か つ た. Aerと. の 組 合 せ で は 焦 性 ブ ドー 酸 の 蓄 積 が 減 少 す. る傾 向 で あ る こ と は 好 気 的 培 養 に 於 け る と 同 様 で あ つ た. 2.. 一方 の 菌 の培 養 上 清 を 添加 した培 地 に 他方 の. 菌 を 接 種 し た 場 合. a.. 好気 的培 養. 前 記 同 様 グ ル コ‑ス. を 含 む 液 体 培 地 にAu,. 接 種 し37゜Cに24時. 間 培 養 し,遠. 修 正 後 加 熱 滅 菌 し,そ 培 地5m1に. Alを. の1.0mlつ. 酸,酷. Pl,. Aer,M ル コ. 酸 を 測 定 し た .対. と して はAu,. Alの. 培 養 上 清 を 加 え な い 培 地6m1. にHem,. Aer,. Mを. Pl,. 嫌 気 的 培 養. つ を 新 しい 同一. 加 え た 培 地 を 作 り, Hem,. 性 ブ ド‑酸,乳. 発 育 中 の培 地 グ ル コ ー スの 分解(4). 沈 上 清 をpHを. を 夫 々 接 種 し24時 間 後 遠 沈 上 清 に つ きPH,グ ー ス,焦. 第4表. 照. 各 々 培 養 した もの につ い. て も 同 様 測 定 を 行 つ た. Auの. 培 養 上 清 の 場 合 は 第5表. に 示 す 如 く上 清 を. 加 え た 培 地 は 菌 接 種 前 グ ル コ ー ス, 8.6μM/ml, 焦 性 ブ ド ー 酸0.1μ/m1,乳 0.3μM/m1を. 含 み,対. 酸0.3μN/m1,醇. 照 培 地 は10μM/mlの. 酸 グル. コ ー ス を 含 ん で い る.. 第5表. auの 培 養 上 清 を 添 加 した培 地に 他 菌 を 接種 した 場合 の グル コ‑ス の 分解 好 気 的 培 養.
(4) 3732. 辻. 第6表. 秀. 樹. alの 培 養 上 清 を 添 加 した 培 地 に他 菌 を 接 種 した 場合 の グ ル コ ー スの分 解 好 気 的 培 養. この 各 培 地 に 他 方 の 菌Hem,. Pl, Aer, Mを. 夫. 々接 種 す る と培 養 上 清 を加 え た方 は対 照 に比 し発 育 は各 菌共 一 般 に 不良 とな るが,グ ル コー ス 消 失量 は 両 培 地 間 に 著差 は見 られ ず,焦 性 ブ ド‑酸,乳 積 量 は上 清 加 培 地 の 方 が 大 とな りpHの. 酸蓄. 低 下 も著. く,上. 上 清 を 加 え た 培 地 の 場 合 は 第6表. に示 す 如. 清 加 培 地 は 菌 接 種 前 グ ル コ ー ス8.9μM/ml,. 焦 性 ブ ドー 酸0.1uM/ml,乳. 酸0.1μM,/ml,醋. 0.2μM/mlを. し て 上 清 加 培 地及 び. 含 ん で い る.而. 対 照 培 地 を 他 方 の 菌 を 接 種 す る と,上 一 般 に 発 育 は 不 良 と な り ,グ. 第7表. 酸. 清加培地では. ル コー ス 消失 量 は大 差. 酸 蓄 積 量 は 大 差 な い か,或. 培 地 に 於 け る よ り は,大 次 にHem, 5mlに. はむ し ろ対照. とな る場 合 が 多 か つ た。. Pl, Aer,. Mの. 加 え た も の にAu又. 培 養 上 清1m1を はAlを. 培地. 培 養 した 結. 果 に つ い て 見 た. Auの. しか つ た. A1の. な い が,乳. 場 合 は 第7表. の 如 くで あ り 他 菌 の 培 養 上 清. 無 添 加 の 対 照 で は グ ル コ‑ス ブ ド‑酸,乳. 酸,醋. 1.1μM/mlで. あ つ た.. 酸 蓄 積 量 は 夫 々0.8, Hemの. は 菌 接 種 前 グ ル コ ー ス,焦 含 有 量8.7, Auを. 他 菌 の 培 養 上 清 を 添加 した 培 地 にauを 好 気 的 培 養. 0,. 0.3,. 消 失6.9μM/ml,焦. 性 3.8,. 上 清 を 加 え た培 地 で. 性 ブ ドー 酸,乳. 0.5μM/ml,で. 酸,醋. 酸. あ り これに. 接 種 す る と対 照 培 地 に 於 け る所 見 を 大 差 な く,. 接 種 した 場 合 の グ ル コー スの 分 解.
(5) グル コ ー ス代 謝 に於 け る二 菌 の相 互 作 用 第8表. 他 菌 の培 養 上 清 を 添加 した 培 地 にalを. 3733. 接 種 した場 合 の グ ル コー ス の分 解. 好 気 的 培 養. ただAerの. 培 養 上 清加 培 地 で は 発 育 は やや お と る. よ うで あつ た. A1の. Auの. 培 養 上 清 を 加 え た 培 地 で は 第9表. る通 りで あ る.上. 場 合 に つ い て も第8表 に 見 ら れ る如 くAu. に於 け ると同 様 の 傾 向 が見 られ, Hem,. Plの 培 養. 上 清 を 添加 した 培 地 で は,発 育 グル コー スの 分解 が 対 照培 地 に於 け ると大 差 は見 られず, Aer, Mの. 上. 清 を加 え た培 地 で は発 育 はや や お と るが,グ ル コ‑. 清 加 培 地 は グ ル コ ー ス8.9μM/ml,. 焦 性 ブ ド ー 酸0.1μM/ml,乳 0.4μM/mlを. 酸0.3μm/m1醋. を 含 む. 而 し て こ れ ら 培 地 にHem, 培 養 す る とAer,. Mで. Pl,. は 見 ら れ な い が, Hem, 発 育 は や や 不 良 と な り,グ. や 大 とな る傾 向 が 見 られ た.. 両 培 地 間 に 著 差 は 見 ら れ な い が,乳. 第9表. Plで. に 上 清 加 培 地 の 方 が 大 で,. 上 と同 様 の 実験 を嫌 気 的 培 養 につ い て 以 下行 つ た. auの. 特 に この 傾 向 はPlで. Aer,. 各 々. は上 清 加 培 地 の 方 が. ル コー ス消 失 量 は 各共 々. pH低. 酸蓄積量は一般. 下 もや や 大 で あ り. 著 明 で あ つ た.. 培 養 上 清 を 添加 した培 地 に他 菌 を 接種 した場 合 の グル コー スの 分 解 嫌 気 的 培 養. Mを. は 両 培 地間 に発 育度 に大 差. と大差 な く,発 育度 の割 合 に グル コー ス の消 失 が や. 嫌気 的培 養. 酸. 含 み,対 照 培 地 は グ ル コ ー ス10μM/ml. ス の 消 失量,分 解 産 物 の蓄 積 量 は対 照培 地 に於 け る. b.. に見 られ.
(6) 3734. 辻. 第10表. 第11表. 第12表. 秀. 樹. alの 培 養 上 清 を 添 加 した培 地 に 他 菌 を接 種 した 場 合 の グル コー ス分 解 嫌 気 的 培 養. 他 菌 の培 養上 清 を 添 加 した培 地にavを 接 種 した場 合 の グ ル コ ー スの 分解 嫌 気 的 培 養. 他 菌 の 培 養 上 清 を添 加 した培 地 にalを 嫌 気 的 培 養. 接種 した 場合 の グ ル コ ー ス の分 解.
(7) グル コー ス代 謝 に於 け る二 菌 の相 互 作 用 Alの 培 養 上 清 を 加 え た培 地 に つ い て は第10表 に. 3735. 次 に 一方 の菌 を 培 養 し た後遠 沈,減 菌 した上 清 を. 示 す如 く,上 清 加培 地で は グ ル コー ス11.1μM/ml,. 加 え た培 地 に他 方 の 菌を 培 養 した 場 合 と培 養 上 清 を. 焦 性 ブ ド‑酸0.1μM/ml,乳. 酸. 加 え な い培 地 に 培 養 した場 合(対 照)と 比 較 す る と,. M. Hem,. 0.2μM/mlを. 酸0.1μM/ml,醋. 含 む こ の培 地 にHem,. Pl, Aer,. Pl或 は嫌 気 的 培 養 に於 け るAlの. 如 く比 較. の各 菌 を培 養 した 場 合 の発 育 度,グ ル コー ス分 解 は. 的 発 育 の悪 い菌 の 培 養 上清 を加 え た培 地 に発 育 の良. 対 照培 地 に於 け ると 大差 は見 られ な かつ た.こ れ は. 好 な 菌 を接 種 し た場 合 に は培 養 上 清 添加 の影 響 は現. お そ ら くAlが. わ れ に くいが 他 の 場 合 に は一 般 に発 育度 は対 照 よ り. 嫌 気 的 培 養 に於 て は発 育 が 不 良 で あ. り,そ の 培 養 上 清 の 作 用がAuの. 場 合 に比 し少 い. た め と考 え られ た.. り従 つ てpHの. IV. 総 括 及 び 考 案 Au又. はA1に. 対 す るHem,. も お と り,又 グル コー ス の 消 失量 に は有 意 の差 異 は 認 め られ な いが,分 解産 物 の蓄 積 は明 らか に 大 で あ 低 下 も対 照 よ りは大 とな る傾 向 が 見. られ る. P1, Aer, Mの. 各. この 様 に二 種 の菌 を 同時 に培 養 した場 合,或 は 一. 組 合せ の二 種 の 菌の グル コー ス代 謝 に 於 け る相 互 作. 方 の菌 の培 養 上 清 を 加 え た培 地 に他 菌を 培 養 した 場. 用 の検 討の 一 端 と して,本 篇 で は,グ ル コー スを 含. 合 グル コー ス の分 解 に 於 け る焦 性 ブ ドー 酸 の完 全 酸. む 液体 培 地 に 発 育 中 の グル コー ス の 分解,並 び に 分. 化 が 抑 制 され るの は,何 か その よ うな抑 制作 用 を持. 解 産 物 の蓄 積 の 状 態 を比 較 した.. つ 物質 を 菌が 産 生 す るの で は ない か と考 え られ るが. 各供 試 菌 を単 独 で 接 種 した 場 合及 び二 種 の 菌 を 同. そ の詳 細 は 不 明 で あ る.. 時 に接 種 した場 合の24時 間 後 の 菌の 発 育 培 地組 成 の V.. 変化 を 見 る と,好 気 的 培 養,嫌 気 的培 養 共 に 菌 濁度 は二 菌 を 同時 に接 種 し た場 合 に は,こ の 両 菌 を単 独. Au,. A1に. 結. 対 す るHem,. 言 P1, Aer,. Mの. 各組 合. で発 育 せ しめ た場 合 の濁 度 の 和 とは な らず,む し ろ,. せ の二 種 の 菌を グル コー スを 含む 液 体 培 地 に接 種 し. や や低 下す る傾 向が 見 られ る.而 して,何 れ の 菌 の. た 場 合 の発 育 及 び培 地 グル コー ス の分 解 に 於 け る相. 発 育が よ り抑 制 され るか は 混 濁 度 の み か ら は不 明 で. 互 作 用 を検 討 し次 の結 果 を得 た.. あ るが 両 菌 共 に 発 育 が不 良 と な る こ とは確 かで あ り,. 1.. 二 菌を 同 時 に培 養 す る と各 菌 単 独 の 場 合 に比. 生 体 内 で は共 棲 的 に働 く菌 も人 工培 地 中で は両 菌間. し発 育 は む しろ抑 制 され る傾 向 が 見 られ る.又 一 方. に拮 抗 現 象 が起 る もの と考 え られ る.. の 菌 の 培養 上清 を加 え た培 地 に他 菌 を 培 養 した場 合. 培 地pHの. 移動 を見 る と 二 菌 を 同 時 に接 種 し た. 場 合の 方 が,両 菌単 独 の 場 合 に比 しむ しろpHが よ り低 下す る 場 合が 多 く,特 にAuとPl,. Alと. に も,対 照培 地(一 方 の 菌 の培 養 上 清 を 加 え な い) に比 し発 育 はお と る. 2.. 而 るに培 地 グル コー ス消 費 量 は二 菌 を同 時 に. P1の 組 合せ で 著 し く,又 一 般 に 嫌 気 的 培 養 の方 が. 培 養 した場 合 は,各 菌 単 独 に 比 し大 で あ り,且 つ 分. この傾 向 は著 しい様 で あ る.こ れ は勿 論 グル コ‑ス. 解 産 物 焦 性 ブ ドー酸,乳 酸,醋 酸 の 蓄 積 も大 とな る.. の分 解 産 物 と して の 酸 の 蓄積 が 大 とな る こ とに よ る が,特 に乳 酸 の蓄 積 量 は どの組 合せ に 於 て も著 し く, pHの. 低 下の 度 合 と乳 酸 蓄積 量 とは 大 む ね平 行的 関. 係 に あ る. 培 地 グル コー スの 消 失 量 を比 較 す る と,一 般 に二 種 の菌 を 同時 に培 養 した 場 合 は,各 菌単 独 の 場 合 に 比 し発 育度 は劣 るに も拘 らず,グ ル コー ス 消 失量 は 大 で あ り,又 前 述 の 如 く乳 酸,そ の他 の 分解 産 物 蓄 積 も増 大 し,且 つ グル コー ス 消 失 量に 対 す る分解 産 物蓄 積 量の 割 合 は大 となつ て い る. 従 つ て二 菌 を 同時 に培 養 し た場 合 に は グル コー ス の分 解 は 盛 ん と な るが,完 全 酸化 は不 活 溌 とな り, 焦 性 ブ ドー 酸 で 止 ま るか,又 乳 酸 な どに至 るか す る 割 合が 増 大 す る もの と考 え られ る.. この 傾 向 は一 方 の 菌 の培 養 上清 を加 え た培 地 に他 菌 を培 養 した場 合 に も認 め られ る. 3.. 従 つ て グル コー スの 分解 に於 て グル コー ス→. 焦 性 ブ ドー 酸 迄 は二 菌が 協力 的 に 働 くが,焦 性 ブ ド ー酸 以 下 の 完 全酸 化 の段 階 で は相 互 に拮 抗 的 に 働 く もの と考 え られ る, (文 献 は第2篇. の末 尾 に 記 載).
(8) 3736. 辻. The. Interaction. 秀. between Glucose Part. I.. Two. 樹. Bacterial. Strains. on. Metabolism On. growing. cells. By Hideki Department. TSUZI. of Microbiology, Okayama University Medical School (Director: Prof. Sakae MURAKAMI). Staph. aureus, Staph. albus, Strep. hemolyticus, D. pneumoniae, A. aerogenes, M. luteus, all taken from the depaqtmental stock, were used throughout this work as tested bacteria. The author divided these organisms in two groups, one contained Staph. aureus an Staph. albus, the other Strep. hemolyticus, D. pneumoniae, M. luteus; made any possible combinations of 2 strains between both groups; and observed the interaction between 2 strains on the growth and the oxydative degradation of glucose when cultured in the liquid media containing glucose. The following results were obtained. 1) The bacterial growth of combined inoculation tended to be inferior than the pure culture of either strain. Comparing with control, the growth was also inferior in the case of pure culture into which media added the cell fue supernatant separated from the culture of other strain. 2) However, it was observed much consumption of glucose by the eombined culture of bacteria than by the pure culture. And the same was said concerning with the accumulation of glucose metabolite; pyruvate, lactate and acetate. This tendency was also demonstrated in the culture into which media the supernatant of others was added. 3) Hence, it was postulated that two strains in the combined culture interacted tively in degradation of glucose so far as resulting in pyruvate; but, contrasted competitively in further degradation of pyruvate.. coopera to that,.
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