炎症性サイトカインによるインターロイキン‑6遺伝 子の活性化機構: プロテインキナーゼAあるいはCを 介さないシグナル伝達系の関与
著者 見供 克之
著者別名 Mitomo, Katsuyuki
雑誌名 博士学位論文要旨 論文内容の要旨および論文審査
結果の要旨／金沢大学大学院医学研究科
巻 平成3年7月
ページ 22
発行年 1991‑07‑01
URL http://hdl.handle.net/2297/14866
医博甲第978号 平成３年３月25曰 見供克之
炎症性サイトカインによるインターロイキン６遺伝子の活性化機構：プロテイ ンキナーゼＡあるいはＣを介さないシグナル伝達の関与
学位授与番号 学位授与年月日 氏名 学位論文題目
山本 右田 松島
健俊綱教授
教授 教授 論文審査委員主査
副査 介治
内容の要旨および審査の結果の要旨
Interleukin-1（ＩＬ－１）とtumornecrosisfactor（ＴＮＦ）は互いに異なったレセプター を介して細胞に作用するにもかかわらず，その多様な生物活性は類似している。著者は，その作 用を分子レベルで解明することを目的として，ＩＬ－１／ＴＮＦによるＩＬ－６遺伝子の転写活性化に おける細胞内シグナル伝達経路について解析した。ＩＬ－６遺伝子の転写活性化は，プロモーター 内のinflammatorylymphokineresponsiveelement（ＩＬＲＥ）と呼ばれるＤＮＡ配列に転写因 子のnuclearfactor-KB（ＮＦ－ＫＢ）が結合して起こる。この過程に，プロテインキナーゼＡ
（ＰＫＡ），あるいはプロテインキナーゼＣ（ＰＫＣ）が関与しているかどうかを，chloramphenicol acetyltransferasｅ（ＣＡＴ）アッセイ及びRNasemappingによるＩＬ－６遺伝子転写活性化，ゲ ル移動度シフトアッセイによるＮＦ－ＫＢ活性化を指標として検討し，以下の結果を得た。
1．マウス線維芽細胞において，ＩＬ－１／ＴＮＦの刺激は，ＩＬＲＥを介してＣＡＴ活性の上昇を示 した。このＩＬ－１／ＴＮＦのシグナルは，ＰＫＣやＰＫＡの活性化物質であるＴＰＡやフォルスコリ ンの刺激に置き換えることはできなかった。ＣＡＴアッセイの結果は，RNasemappingによっ て正常な転写開始点より合成されたＩＬ－６ｍＲＮＡの量を反映していることが確められた。
２１Ｌ－１／ＴＮＦによって活性化されて核内に誘導されるＮＦ－ＫＢをＬ細胞やＨｅＬａ細胞の核粗 抽出液を用いて調べたところ，ＮＦ－ＫＢはＴＰＡやフォルスコリンの刺激には反応しなかった。
用いた細胞でＰＫＣの経路が正常に働いていることは，ＴＰＡの刺激によって，転写因子ＡＰ－１ の誘導で確認した。
３．非リンパ系の細胞において，ＮＦ－ＫＢの誘導にＰＫＡやＰＫＣが，どの程度関与しているかを 検討するためにプロテインキナーゼ阻害剤の影響を調べた。これらの阻害剤によってＩＬ－１のシ グナルは約30％阻害されたが，ＴＮＦのシグナルは阻害剤の影響をほとんど受けなかった。
以上，本研究は，線維芽細胞においてＩＬ－１／ＴＮＦのシグナルはＰＫＡやＰＫＣ以外の経路を介 してＮＦ－ＫＢに伝達され，ＩＬ－６遺伝子を活性化していることを示したもので，ＩＬ－１やＴＮＦ の多様な生物活性の遺伝子レベルの解明に重要な知見を与えるものと評価された。
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