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Disease model cell lines 2 Technical Support CompoZr Disease model cell lines Zinc Finger Nuclease 標的特異的ノックアウト ノックイン 塩基

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全文

(1)

CompoZr® Disease model cell lines

・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・

2

抗体

・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・

3

MISSION®

  

siRNA

   

siRNA nano scale

・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・

3

   

siRNA Library

・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・

4

   

esiRNA Whole Genome Library

・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・

5

  

shRNA

   

shRNA Gene Family Set

・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・

6

   

LentiPlex® Pooled Whole Genome Library

・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・

7

   

LentiExpress

TM

Human Kinases

・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・

7

  

microRNA

   

microRNA Mimics

・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・

8

  

Long Non-Coding RNA

   

esiRNA for Long Non-Coding RNA Library

・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・

9

低分子生理活性化合物ライブラリー

  薬理活性化合物

LOPAC®

1280

・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・

10

  高純度化合物

MyriaScreen

・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・

11

  プチスクリーニング

・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・

12

14

  

Pfizer® Drug

・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・

15

スクリーニング製品特集

2012

キャンペーン期間

2012

10

1

12

21

(2)

CAT. NO. Host cell gene Gene ID キャンペーン価格(¥)

CompoZr Knockout Disease Model Cell Lines

CLLS1014-1SET A549 HIF1A (⊖/⊖/⊖) 3091 380,000 CLLS1013-1SET A549 SMAD4 (⊖/⊖) 4089 380,000 CLLS1132-1SET DLD1 AKT1 (⊖/⊖) 207 380,000 CLLS1133-1SET DLD1 AKT2 (⊖/⊖) 208 380,000 CLLS1001-1SET DLD1 BAX (⊖/⊖) 581 380,000 CLLS1005-1SET DLD1 BAK (⊖/⊖) BAX (⊖/⊖) 578 581 380,000 CLLS1002-1SET DLD1 HIF1A (⊖/⊖) 3091 380,000 CLLS1003-1SET DLD1 PIK3CA (+/⊖) 5290 380,000 CLLS1004-1SET DLD1 PTEN (⊖/⊖) 5728 380,000 CLLS1096-1SET DLD1 SMAD4 (⊖/⊖) 4089 380,000 CLLS1127-1SET DLD1 TP53 (⊖/⊖) 7157 380,000 CLLS1006-1SET SW48 BAX (⊖/⊖) 581 380,000 CLLS1011-1SET SW48 BAK (⊖/⊖) BAX (⊖/⊖) 578 581 380,000 CLLS1098-1SET SW48 HIF1A (⊖/⊖/⊖) 3091 380,000 CLLS1009-1SET SW48 PTEN (⊖/⊖) 5728 380,000 CLLS1010-1SET SW48 SMAD4 (⊖/⊖) 4089 380,000 CLLS1007-1SET SW48 TP53 (⊖/⊖) 7157 380,000 CLLS1063-1SET MCF10A AKT2 (⊖/⊖) 208 380,000 CLLS1069-1SET MCF10A APC (⊖/⊖) 10297 380,000 CLLS1059-1SET MCF10A BCR (⊖/⊖) 613 380,000 CLLS1060-1SET MCF10A CDC25B (⊖/⊖) 994 380,000 CLLS1042-1SET MCF10A CDH1 (⊖/⊖) 999 380,000 CLLS1051-1SET MCF10A EEF2K (⊖/⊖) 29904 380,000 CLLS1075-1SET MCF10A ESR2 (⊖/⊖) 2100 380,000 CLLS1044-1SET MCF10A GSK3B (⊖/⊖) 2932 380,000 CLLS1061-1SET MCF10A H2AFX (⊖/⊖) 3014 380,000 CLLS1045-1SET MCF10A HER2 (⊖/⊖/⊖) 2064 380,000 CLLS1066-1SET MCF10A PARP2 (⊖/⊖) 10038 380,000 CLLS1046-1SET MCF10A PTEN (⊖/⊖) 5728 380,000 CLLS1053-1SET MCF10A RICTOR (⊖/⊖) 253260 380,000 CLLS1048-1SET MCF10A SYK (⊖/⊖) 6850 380,000 CLLS1049-1SET MCF10A TP53 (⊖/⊖) 7157 380,000 CLLS1056-1SET MCF10A 4EBP1 (⊖/⊖) 1978 coming soon CLLS1057-1SET MCF10A AKT1 (⊖/⊖) 207 coming soon CLLS1064-1SET MCF10A IGF1R (⊖/⊖) 3480 coming soon CLLS1085-1SET MCF10A VEGFR2 (⊖/⊖) 3791 coming soon Human A549 EGFR Biosensor Cell Line

CLL1097-1VL A549 EGFR Biosensor ** 350,000

CAT. NO. Host cell gene Gene ID キャンペーン価格(¥)

CompoZr Reporter Cell Lines

CLL1141-1VL A549 GFP-EGFR 1956 380,000 CLL1167-1VL A549 GFP-SMAD4 4089 380,000 CLL1158-1VL A549 GFP-STAT1 6772 380,000 CLL1140-1VL A549 RFP-STAT3 6774 380,000 CLL1039-1VL MCF10A RFP-TUBA1B 10376 380,000 CLL1135-1VL SKOV3 GFP-HER2 2064 380,000 CLL1143-1VL SKOV3 GFP-HER2 RFP-EGFR 2064 1956 380,000 CLL1139-1VL SKOV3 GFP-STAT3 6774 380,000 CLL1032-1VL U2OS GFP-ACTB 60 380,000 CLL1035-1VL U2OS RFP-ACTB 60 380,000 CLL1033-1VL U2OS GFP-LMNB1 3912 380,000 CLL1031-1VL U2OS GFP-TUBA1B 10376 380,000 CLL1034-1VL U2OS RFP-TUBA1B 10376 380,000 CLL1038-1VL U2OS BFP-LMNB1 RFP-ACTB 3912 60 380,000 CLL1037-1VL U2OS GFP-ACTB RFP-TUBA1B 60 10376 380,000 CLL1036-1VL U2OS GFP-HMGA1 3159 380,000 CLL1136-1VL U2OS GFP-NUP98 4928 380,000 CLL1149-1VL A549 GFP-CTNNB1 RFP-LMNB1 1499 3912 coming soon CLL1218-1VL U2OS BFP-LMNB1 GFP-TUBA1B RFP-ACTB 4001 10376 60 coming soon

CAT. NO. Host cell gene Gene ID gene alteration

CompoZr Knockin Disease Model Cell Lines     Coming SOON !!

CLLS1104-1SET MCF10A AKT1 207 E17K CLLS1105-1SET MCF10A CTNNB1 1499 T41A CLLS1213-1SET MCF10A BRAF 673 KO CLLS1107-1SET MCF10A BRAF 673 V600E CLLS1111-1SET MCF10A CAV1 857 P132L CLLS1103-1SET MCF10A EGFR 1956 del E746-A750 CLLS1216-1SET MCF10A EGFR 1956 KO CLLS1113-1SET MCF10A FGFR4 2264 G388R CLLS1207-1SET MCF10A FOXM1 2305 KO CLLS1214-1SET MCF10A HER2 2064 KO (EXON2) CLLS1201-1SET MCF10A MALAT1 378938 KO CLLS1208-1SET MCF10A MAP3K4 4216 KO CLLS1118-1SET MCF10A MAP3K8 1326 P461L CLLS1217-1SET MCF10A MUC1 4582 KO CLLS1199-1SET MCF10A PTEN

PIK3CA 5728 5290 (⊖/⊖) H1047R CLLS1211-1SET MCF10A PVRL4 81607 KO CLLS1202-1SET MCF10A SLPI 6590 Stop Codon CLLS1110-1SET MCF10A SMO 6608 W535L CLLS1121-1SET MCF10A WWTR1 97064 F299V CLLS1215-1SET MCF10A WWTR1 97064 KO

専用注文用紙はこちら

▶▶▶

sigma.com/zfnjapan

sigma.com/biocells

CompoZr

Disease model cell lines

疾患研究 ・ 創薬スクリーニングに最適!!

Zinc Finger Nuclease

テクノロジーにより樹立された遺伝子改変ヒト細胞株

・標的特異的ノックアウト・ノックイン・塩基置換など種々の細胞をご用意しております

・遺伝的バックグラウンドが完全に同一のコントロール細胞を添付(

Reporter cell line

Biosensor

を除く)

キャンペーン期間

2012

10

1

12

21

D

is

ea

se

m

od

el

c

(3)

遺伝子機能 抗体数 バリデート情報 交差種  通常価格(¥) キャンペーン価格(¥)

Ion channel 13

Immunohistochemistry Data: supportive

Human 58,000/本 52,200/本

Tyrosine kinase 29 Human 58,000/本 49,300/本

GPCR 32 Human 58,000/本 46,400/本

Ser/Thr kinase 119 Human 58,000/本

お問い合わせください Transporter 131 Human 58,000/本 カスタム パッケージ 10以上 - Human 58,000/本 対象抗体数は実際異なる場合がございます。最新の情報、納期は事前にお問い合わせください。 各製品リストは右記 URL よりご取得ください。 ご興味のある抗体でボリュームディスカウントも可能です。詳細はお問い合わせください。 製品名 CAT. NO.(Xは数字) 容量 価格(¥)

Human Kinase Nano Scale SIHKXXXX 0.25 nmol 5,000

もしくは、

sigma.com/antibody-jp

sigma.com/prestige-jp

Antibodies

MISSION

®

siRNA Nano scale for Kinase

信頼性の高い

Prestige

抗体のボリュームディスカウントキャンペーンです。

遺伝子機能別に免疫染色データの信頼性が高い抗体を集めました。

MISSION siRNA

の小容量パッケージ製品です。小容量のためコスト効率が高く、数回程度の実験をされる方

に最適です。

human kinase panel

CAT.NO. SI02100,

2,900 duplex

)に含まれている

siRNA

をご注文

いただくことが可能です。

製品特徴

MISSION siRNA human kinase panel (CAT.NO. SI02100)

 に含まれる

MISSION siRNA

0.25 nmol

Prestige

抗体

抗体検索サイト

また、弊社では

5

万点以上の抗体関連製品を取り扱っています。

Prestige

抗体以外のボリュームディスカウントも対応可能です。この機会に是非ご検討ください。

対象遺伝子に関する製品の検索は弊社

HP

(右下の

URL

)をご利用ください。

キャンペーン期間

2012

10

1

12

21

シグマ 抗体

sigma.com/yfgjapan

si

RN

A

(4)

MISSION

siRNA Library panel

MISSION siRNA

ライブラリパネルは、大手製薬企業からの情報提供により

創薬に有用な遺伝子群を含んでいる

siRNA

ライブラリーです。

ハイスループットスクリーニング用途に、非常に魅力的な

siRNA

コレクションです。

MISSION siRNA

ライブラリの特徴:

siRNA

は、遺伝子ノックダウン効率とターゲット特異性を高めるため、強力な

Rosetta siRNA

デザインアルゴリズムを 

 用いて設計

•遺伝子ごとに

siRNA

3duplex

含まれており、

siRNA

をプールして使用することも可能

•複数回のスクリーニングが可能な十分量の

siRNA

を提供

•大手製薬企業と共同で遺伝子を選抜

MISSION siRNA Ordering Information

2012

10

1

12

21

製品仕様

21mer のsiRNA duplex;3’ dTdT Overhang を持つターゲット配列19 bp 1 ターゲット遺伝子につき、siRNA duplex 3 本

全siRNA duplexは96ウェルマイクロプレートにプレーティング、1 プレートにつき80duplex

全てのプレートにPositive Control siRNA が入っています

生物種 CAT. NO. 製品名 ターゲット遺伝子 容量 キャンペーン価格(¥)

Human

SI00100 Druggable Genome Library 6,655 1 nmol お問い合わせください

SI01100 Ligase Panel 949 1 nmol 1,237,000

SI02100 Kinase Panel 719 0.25 nmol 780,000

SI03100 Phosphatase Panel 293 1 nmol 535,000

SI04100 Growth Factors/Receptors Panel 375 1 nmol 611,000 SI05100 Cell Adhesion and Cytoskeleton Panel 496 1 nmol 809,000 SI06100 Ion Channel and Transporters Panel 639 1 nmol 1,041,000

SI07100 Assorted Function Panel 228 1 nmol 416,000

SI08100 GPCR Panel 304 1 nmol 496,000

SI09100 Hydrolase Panel 204 1 nmol 373,000

SI10100 Metabolism and Cell Traffic Panel 217 1 nmol 396,000

SI11100 Nucleic Acid Binding Panel 310 1 nmol 506,000

SI12100 Oxidoreductase Panel 338 1 nmol 551,000

SI13100 Protease Panel 379 1 nmol 618,000

SI14100 Cell Surface & Nuclear Receptors Panel 722 1 nmol 941,000

SI15100 Cell Regulation Panel 227 1 nmol 415,000

SI16100 Transfer and Carrier Proteins Panel 71 1 nmol 130,000

SI17100 Transferase Panel 184 1 nmol 336,000

Rat

SI20100 Druggable Genome Library 6,025 1 nmol お問い合わせください

SI21100 Ligase Panel 816 1 nmol 1,174,000

SI22100 Kinase Panel 669 1 nmol 963,000

SI23100 Phosphatase Panel 266 1 nmol 536,000

SI24100 Growth Factors/Receptors Panel 342 1 nmol 615,000 SI25100 Cell Adhesion and Cytoskeleton Panel 433 1 nmol 779,000 SI26100 Ion Channel and Transporters Panel 594 1 nmol 1,069,000

SI27100 Assorted Function Panel 210 1 nmol 423,000

SI28100 GPCR Panel 275 1 nmol 495,000

SI29100 Hydrolase Panel 188 1 nmol 379,000

SI30100 Metabolism and Cell Traffic Panel 201 1 nmol 405,000

SI31100 Nucleic Acid Binding Panel 287 1 nmol 517,000

SI32100 Oxidoreductase Panel 302 1 nmol 544,000

SI33100 Protease Panel 341 1 nmol 614,000

SI34100 Cell Surface & Nuclear Receptors Panel 647 1 nmol 931,000

SI35100 Cell Regulation Panel 214 1 nmol 431,000

SI36100 Transfer and Carrier Proteins Panel 66 1 nmol 133,000

SI37100 Transferase Panel 174 1 nmol 351,000

Mouse SI42050 Kinase Panel 616 0.5 nmol 910,000

si

RN

(5)

Overview of MISSION esiRNA Production.

MISSION

®

esiRNA

     

Whole Genome Libraries

MISSION esiRNA

endoribonucleaseprepared siRNA

)は

RNAi

スクリーニングにおいて、シンプル、経済

的で確実な方法です。

Human 16,000

以上、

Mouse14,000

以上の遺伝子を対象とした製品です。全ゲノム

ライブラリー、カスタムライブラリー、個別遺伝子に対するクローンをご提供いたします。

特徴: •低いオフターゲット効果:同一の

mRNA

に対する

siRNA

が複 数含まれています。複数の

siRNA

が同時に作用するため、個々 の

siRNA

のオフターゲット効果が分散し、オフターゲット効果 が低減されます。 •経済的:1つの遺伝子について1つの

esiRNA

で済むため、コ スト効果的な

RNAi

スクリーニングツールです。 仕様:

Human: 16,432 targets with 16,744 esiRNAs

Mouse: 14,061 targets with 14,068 esiRNAs

50 ng/

µ

l RNA in nuclease free TE buffer (10 mM

Tris-HCl, pH 8.0, 1 mM EDTA) in 384well plates,

all wells occupied, control are not included.

Controls

キャンペーン期間

2012

10

1

12

21

CAT. NO. 生物種 キャンペーン価格(¥) esiRNA whole genome library

ESIL-1UG Human or Mouse 8,450,000 ESIL-2.5UG お問い合わせください ESIL-5.0UG お問い合わせください ご注文の際は生物種をご指定ください。 ターゲット遺伝子(MAPK14)に対するesiRNAを導入後、マイクロアレイによって遺伝 子発現解析を行った結果。赤色は発現情報、緑色は発現現象した遺伝子を示す(p<0.01)。 混合するsiRNA数を増していくとオフターゲット効果が低減した。しかし、最もオフター ゲット効果が低かったのはesiRNAであった。

Off-target analysis of esiRNAs in comparison to

single

and pooled siRNAs

•ネガティブコントロール:

RLUC

FLUC

eGFP

をターゲットとした

esiRNA

をご利用いただけけます。

•ポジティブコントロール:

eg5

KIF11

)をターゲットとした

esiRNA

をご利用いただけけます。

コントロール及び個別クローン価格

製品名 CAT. NO. Size 価格(¥)

個別esiRNA        (Xは数字)

Human 16,000種以上 EHUXXXXXX 20µg ¥28,000

50µg ¥50,000 Mouse 14,000種以上 EMUXXXXXX 20µg ¥28,000

50µg ¥50,000

CAT. NO.    Product Quantities

Negative Controls

EHUEGFP esiRNA targeting EGFP 20µg,50µg EHUFLUC esiRNA targeting FLUC 20µg,50µg EHURLUC esiRNA targeting RLUC 20µg,50µg Positive Control

EHU019931 esiRNA targeting human KIF11 20µg,50µg EMU017691 esiRNA targeting mouse KIF11 20µg,50µg

sigma.com/esirna

si

RN

(6)

MISSION

shRNA Gene Family Sets

shRNA Gene Family Set

はターゲットとなる遺伝子群を

NCBI, Gene Ontology

Protein Lounge, Ingenuity Systems, YFG

より抽出しています。各セットは主に

TRC1/1.5

で構成されています。個別クローンと同様に3種類のフォーマット(大腸菌グリセロールストック、

プラスミドDNA,レンチウイルスパーティクル)でご提供可能です。また、カスタムライブラリーの作製も

可能です。

仕様:

•大腸菌グリセロールストック

50

µ

l aliquot of bacterial glycerol stocks (terrific broth, carbenicillin at 100

µ

g/ml and 15% glycerol).

QC: Sequencing verification.

•プラスミド

DNA

An average of 2

µ

g per clone (range of 0.4 - 4

µ

g) is provided, and is aliquoted at 40

µ

l per well.

   

QC: Sequencing verification, DNA quantitation.

•レンチウイルスパーティクル

(representational, plate titer)

4 x 50

µ

l aliquots of VSV-G pseudotyped lentivirus, 10% representational plate titer(1 x 10

6

TU/ml).

QC: Sequencing Verification, p24 ELISA Titer.

MISSION shRNA Ordering Information

2012

10

1

12

21

生物種 遺伝子セット CAT. NO. 製品情報 キャンペーン価格(¥)

Glycerol Plasmid Lentivirus 遺伝子数 クローン数 Glycerol Plasmid Lentivirus

Human

Apoptosis Pathway SH1911 SH1921 SH1931 443 3512 319.6万 593.6万 お問い合わせください B-Cell Activation SH2911 SH2921 SH2931 99 661 60.2万 154.7万 249.2万 Cell Adhesion Genes SH2211 SH2221 SH2231 368 2396 218.1万 405.0万 お問い合わせください Cytokine and Chemokine SH0811 SH0821 SH0831 106 538 49.0万 125.9万 202.9万 Cytokine and Chemokine Receptors SH1311 SH1321 SH1331 93 584 53.2万 136.7万 220.2万 Cytoskeleton Genes SH2311 SH2321 SH2331 275 1991 181.2万 388.3万 543.6万 Epigenetic Regulators SH3011 SH3021 SH3031 10 59 8.5万 23.8万 33.0万 DNA Repair Pathway SH1811 SH1821 SH1831 117 837 76.2万 195.9万 315.6万 Ubiquitin Hydrolases (DUBS) SH0711 SH0721 SH0731 127 830 75.6万 194.3万 313.0万 Extracellular Matrix Genes SH2511 SH2521 SH2531 331 1968 179.1万 383.8万 537.3万 G-Protein Coupled Receptors SH0211 SH0221 SH0231 541 2864 260.7万 484.1万 お問い合わせください Helicase SH2611 SH2621 SH2631 136 909 82.8万 212.8万 342.7万 Ion Channel SH1011 SH1021 SH1031 277 1479 134.6万 288.5万 403.8万 JAK-STAT Pathway SH2711 SH2721 SH2731 190 1358 123.6万 264.9万 370.8万 Kinases, complete SH0111 SH0121 SH0131 678 7607 593.4万 お問い合わせください お問い合わせください Nuclear Hormone Receptors SH1111 SH1121 SH1131 218 1448 131.8万 282.4万 395.4万 p53 Pathway SH2411 SH2421 SH2431 242 1865 169.8万 363.7万 509.2万 Phosphatases SH0411 SH0421 SH0431 320 2099 191.1万 354.8万 545.8万 T-Cell Activation SH2811 SH2821 SH2831 242 1469 133.7万 286.5万 401.1万 Tumor Supressors SH0511 SH0521 SH0531 73 575 52.4万 134.6万 216.8万 Tyrosine Kinases お問い合わせください 133 1728 157.3万 337.0万 471.8万 Ubiquitin Ligases (E1, E2, E3) SH2111 SH2121 SH2131 349 2151 195.8万 363.6万 559.3万 Mouse Kinases, complete SM0111 SM0121 SM0131 618 3916 356.4万 お問い合わせください お問い合わせください Phosphatase SM0411 SM0421 SM0431 290 1734 157.8万 338.2万 473.4万 Tyrosine Kinase SM2011 SM2021 SM2031 133 850 77.4万 198.9万 320.5万 Human or Mouse カスタム ライブラリー お問い合わせください お問い合わせください

クローン数、ターゲット数が実際の納品物と異なる場合がございます。最新の情報につきましては、お問い合わせください。

カスタムライブラリーの作製も可能です。詳細につきましてはお問い合わせください。

sigma.com/shrnascreen

sh

RN

A

(7)

LentiExpress viral particle Cells added to viral particles Transduced cells Step 1 Step 2 Step 3 (optional) Step 4 培養液に懸濁した細胞を LentiExpressの各 ウェルに分注 オーバーナイト培養の後、 新鮮な培養液に交換 Puromycinにより導入細 胞をセレクションし、コロ ニーを増殖させる(5-7日) 表現系あるいは細胞応答 性によるファンクショナ ルアッセイ Phenotypic read-out 10チューブに 分かれた LentiPlex Pooled Library ウイルスを 予め決められた MOIで細胞集団に 感染させる インキュベーション2-4日 ピューロマイシンで選択 表現系により目的の細胞を選択 シークエンスした配列と データベースを照会し、 目的のshRNAを同定 細胞からゲノムDNAを 抽出し増幅プライマー でPCRをかける

LentiExpress Method

MISSION LentiPlex Pooled System Work Flow

MISSION

®

LentiPlex

®

Pooled Whole Genome Libraries

MISSION LentiExpress ™ Human Kinases

8

千クローンのレンチウイルスを

1

サブプールとして、

10

種類のサブプール(

tube

)に約

8

万クローンが

含まれています。

Human

Mouse

でそれぞれ約

1

6

千遺伝子を網羅しています。

1

サブプールは

p24

アッ

セイにおいて

5

×

10

8

TU/mL

となります。

•ロボットや分注機が不要。全てベンチトップで実験可能 •

FACS

等、多くの蛍光を用いたアッセイに適応 •最低

5x10

8

TU/mL

の高濃度

仕様:

Subpools No.1-10 25

µ

L x 2

LentiPlex Amplification Primer

No.1-2 20

µ

M 750

µ

L

MISSION shRNA Human Positive

Control Vector 500 ng/

µ

L 20

µ

L

LentiPlex Sequencing

Primer 5

µ

M 750

µ

L

LentiExpress

には、

500

以上

のヒトキナーゼ関連遺伝子に対する

3,000

以上

shRNA

が含まれています。予めウイルス粒子がプ

レートに分注されているため、細胞を加えるだけで即実験を開始

できます。

ネガティブコントロールも既にプレート両側に配置されています。

•ヒトキナーゼ関連遺伝子(~

501

)に対する

shRNA

•~

3,200

のレンチウイルス

shRNA

クローン •ウイルス粒子を約

5,000/well

でプレーティング済み、またコントロールもプレー ティング済みなので即実験が可能 •

Optimization Plate

にて最適化が容易に

キャンペーン期間

2012

10

1

12

21

CAT. NO. 生物種 通常価格(¥) キャンペーン価格(¥) MISSION LentiPlex Pooled shRNA Library

SHPH01-1SET Human 2,600,000 2,000,000 SHPM01-1SET Mouse 2,600,000 2,000,000

LentiPlex Content.

Total Validated Human Clones 82,017 24,550 Mouse Clones 77,819 20,564 Total Clones 159,836 45,114 Human Genes 16,019 7,405 Mouse Genes 15,960 6,506 Total Genes 31,979 13,911

CAT. NO. 製品名 format 通常価格(¥) キャンペーン価格(¥) SHX001-1EA

LentiExpress Human Kinases 1x 990,000 693,000

SHX001-3EA 3x 1,990,000 1,393,000

SHXC01-1EA

LentiExpress Optimization Plate 1x 99,000 69,300

SHXC01-3EA 3x 199,000 139,300 あらかじめ決定しておいたMOIでウイルスプールを感染させた後、薬剤選択を行う。その 後、FACS等を用い目的の表現型を示した細胞群を分取する。ゲノムに組み込まれたshRNA はPCR、シーケンサーを用いて確認し、各々のshRNA がターゲットとする遺伝子を同定後、 それらの生物学的役割を検証する。

sh

RN

A

(8)

MISSION miRNA mimic design and modification

MISSION

microRNA Mimics

Human miRNA Mimic miRBase Version 17 Library

MISSION microRNA(miRNA) Mimics

は成熟

miRNA

として機能するようにデザインされており、

miRNA

機能解析に適したツールです。特殊な修飾とデザインにより、オフターゲット効果を低減しています。

特徴

1,900

以上の

miRNA (miRBase ver.17)

特殊な修飾とデザインによるオフターゲット効果の

 減少

他の生物種や異なる

miRBase ver.

に対するカスタム

 デザインも対応可能

2012

10

1

12

21

特徴的なデザインと装飾により、センス鎖によるオフターゲット効果を低減するよう設計さ れている。

HeLa細胞へ任意のmiRNA MimicsとmiRNAのターゲット配列を含んだpsi-CHECK2 Dual Luciferase Reporter(Promega)を導入した。それぞれのコンストラクトには、miRNAのター

ゲット配列と100%相補的な配列を含む、3 UTRの全長が組み込まれている。ネガティブコ

ントロールは、ヒトのゲノム/転写産物に対応していないmiRNAを使用した。

hsa-mir-206に対応するmiRNA Mimicsを用い、パッセンジャー鎖のオフターゲット効果を 検証した。従来のsiRNAデザイン(siDesign)で設計した配列に対し、修飾(siDesign+) と非修飾(siDesign−)を行い、またMISSION miRNA Mimicsデザイン(MISSION)で設計 した配列についても、修飾(MISSION+)と非修飾(MISSION−)を行い、それぞれのオフター

ゲット効果を検証した。レポーターはパッセンジャー鎖に95%相同的な配列を含んでいる。

MISSION miRNA Mimicsで使用されているデザインと修飾が、オフターゲットの低減に効果 的であった。

References

Schultz, N. et al. 2001. Off-target effects dominate a large-scale RNAi screen for modulators of the TGF-β pathway and reveal microRNA regulation of TGFBR2. Silence 2:3

Collino F., Deregibus M., Bruno S., Sterpone L., Aghemo G., et al. 2010. Microvesicles Derived from Adult Human Bone Marrow and Tissue Specific Mesenchymal Stem Cells Shuttle Selected Pattern of miRNAs. PLoS One 5:e11803.

0 20 40 60 80 100 120

siDesign (+) siDesign (-) MISSION (+) MISSION (-)

% R ep or te r A ct iv ity Negative Control ~95 0 20 40 60 80 100 120

1 101 206 15a 29a 10a 221 155 20a 21 27a 130a

% R ep or te r E xp re ss io n Negative Control miR-X

3’-

d Td TACCUUUAC AUUCCUUC AC AC ACC

- N H

2

-5’

5’-

UGG - A AUGUA AGGA AGUGUGUGG

- 3’

Extra base creates bulge

3’

5’

Amine

Sense strand

Anti-sense strand

sigma.com/mimics

sigma.com/yfgjapan

製品名 CAT. NO. 通常価格(¥) キャンペーン価格(¥)

MISSION microRNA Mimics Human Library

各0.25nmol. 1920 miRNA MI00200-1SET 1,500,000 1,050,000

製品名 CAT. NO. 通常価格(¥)

Negative Control

Control1, 5 nmol HMC0002 - 5NMOL 39,800 Control2, 5 nmol HMC0003 - 5NMOL 39,800 Individual clones

1920種類, 5 nmol HMI0001 - HMI1920-5NMOL 39,800

※納期は在庫状況により異なります。ご発注時にご確認ください。

MISSION miRNA mimics significantly reduce known gene

target expression

Reduction of passenger strand off-target effects

対象

microRNA

に関する製品の検索は弊社

HP

(下記の

URL

)をご利用ください。

m

ic

ro

iR

N

A

(9)

MISSION

®

esiRNA

for Long Non-Coding RNA Libraries

MISSION esiRNA

はオフターゲット効果を低減し、経済的に

RNAi

スクリーニングを行うことが可能な

RNAi

スクリーニングツールです。

MISSION esiRNA

は複数の

siRNA

がプールされているため、オフターゲット

を低減し、高いノックダウン効果を得ることができます(

5

ページ参照)。

MISSION esiRNA Long

Non-Coding RNA

Long Non-Coding RNA

をターゲットとした

MISSION esiRNA

ライブラリーです。

特徴

マウスは

643

クローン、ヒトは

1,245

クローンの

esiRNA

を含んでいます

ライブラリーは

96well

プレートに各

esiRNA

クローンを

1

µ

g, 2.5

µ

g,

または

5

µ

g

ずつ分注

esiRNA

のデザインには

DEQOR

デザインアルゴリズムを使用

仕様:

Human: 1,245 esiRNAs

   

Mouse: 643 esiRNAs

   

50 ng/ul RNA in nuclease free TE buffer (10 mM

   

Tris-HCl, pH 8.0, 1 mM EDTA) in 96 well plates,

   

all wells occupied, control are not included.

キャンペーン期間

2012

10

1

12

21

マウスlncRNAに対するFISHの結果。マウスの細胞にネガティ ブコントロール(top)、lncRNA(bottom)に対するesiRNAを導 入した。パネルの右側はDAPIによる染色。 mouse lncRNA DAPI + lncRNA1 RLUC esiRNA (mock) esiRNA lncRNA1

DAPI + mouse IncRNA

lncRNA1

ヒトlncRNAに対するFISHの結果。Hela細胞にネガティブコ ントロール(top)、lncRNA(bottom)に対するesiRNAを導入し

た。パネルの左側はDAPIによる染色。

Reference : Chakraborty,D., et al. 2011. Combined RNAi and localization for functionally

dissecting long non-coding RNAs. Nat. Methods 9(4), 360-2 (2012).

sigma.com/ncesirna

Controls

•ネガティブコントロール:

RLUC

FLUC

eGFP

をターゲットとした

esiRNA

をご利用いただけけます。

•ポジティブコントロール:

eg5

KIF11

)をターゲットとした

esiRNA

をご利用いただけけます。

コントロール・クローン価格

製品名 CAT. NO. Size 価格(¥)

個別esiRNA        (Xは数字) Human 16,000種以上 EHUXXXXXX 20µg ¥28,000 50µg ¥50,000 Mouse 14,000種以上 EMUXXXXXX 20µg ¥28,000 50µg ¥50,000 CAT. NO. キャンペーン価格(¥)

Mouse Long Non-Coding esiRNA Library

ESILMNC-1UG 945,000

ESILMNC-2.5UG 1,462,500

ESILMNC-5.0UG お問い合わせください

Human Long Non-Coding esiRNA Library

ESILHNC-1UG 1,890,000

ESILHNC-2.5UG 2,925,000

ESILHNC-5.0UG お問い合わせください

CAT. NO.    Product Quantities

Negative Controls

EHUEGFP esiRNA targeting EGFP 20µg,50µg EHUFLUC esiRNA targeting FLUC 20µg,50µg EHURLUC esiRNA targeting RLUC 20µg,50µg Positive Control

EHU019931 esiRNA targeting human KIF11 20µg,50µg EMU017691 esiRNA targeting mouse KIF11 20µg,50µg

ln

cR

N

(10)

LOPAC

1280

薬理活性化合物ライブラリー

創薬や特性の探索に最適なハイスループットスクリーニング用ライブラリー

LOPAC

® 1280

MyriaScreen II

プチスクリーニング

Pfizer

®

Drug

1,280

種類の薬理活性化合物

 インヒビター、リガンド、承認薬など生理活性低分子化合物を収集

Easy-to-use

DMSO

に溶解済みのため準備の手間が不要(濃度

10 mM

最新の広範囲な化合物

 細胞シグナリング、神経科学の広域な分野に対応

SD

ファイル添付

 化合物の構造、薬理活性、化合物名、別名を掲載

ご注文について

分注量の異なる

2

製品をご用意しています

LOPAC

1280

通常版

 各

250

µ

L

10 mM DMSO

溶液)

  

CAT. NO. LO3300

  価格

3,900,000

LOPAC

1280

スモールスケール版

 各

25

µ

L

10 mM DMSO

溶液)

  

CAT. NO. LO4200

  価格 

970,000

 

Technical Support 03-5796-7330 [email protected]

96 well

形式のラックに

80

化合物を分注

 (

80 x 16

ラック

= 1,280

化合物)

(11)

MW Distribution 0 500 1000 1500 2000 2500 100 150 200 250 325 375 425 475 525 575 625 675 MW Range N um be r o f C om po un ds cLogP 0 200 400 600 800 1000 1200 -5 -4 -3 -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 N um be r o f C om po un ds Lipinski Number 2 3 4 H-Bond Donors 0 500 1000 1500 2000 2500 3000 3500 4000 4500 0 1 2 3 4 5 6 7 8 N um be r o f C om po un ds H-Bond Acceptors 0 500 1000 1500 2000 2500 3000 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 N um be r o f C om po un ds MW Distribution 0 500 1000 1500 2000 2500 100 150 200 250 325 375 425 475 525 575 625 675 MW Range N um be r o f C om po un ds cLogP 0 200 400 600 800 1000 1200 -5 -4 -3 -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 N um be r o f C om po un ds Lipinski Number 2 3 4 H-Bond Donors 0 500 1000 1500 2000 2500 3000 3500 4000 4500 0 1 2 3 4 5 6 7 8 N um be r o f C om po un ds H-Bond Acceptors 0 500 1000 1500 2000 2500 3000 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 N um be r o f C om po un ds MW Distribution 0 500 1000 1500 2000 2500 100 150 200 250 325 375 425 475 525 575 625 675 MW Range N um be r o f C om po un ds cLogP 0 200 400 600 800 1000 1200 -5 -4 -3 -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 N um be r o f C om po un ds Lipinski Number 2 3 4 H-Bond Donors 0 500 1000 1500 2000 2500 3000 3500 4000 4500 0 1 2 3 4 5 6 7 8 N um be r o f C om po un ds H-Bond Acceptors 0 500 1000 1500 2000 2500 3000 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 N um be r o f C om po un ds

MyriaScreen II Diversity Collection

10,000

品目の高純度化合物ライブラリー

リード化合物の探索・ケミカルゲノミクス研究に最適

ご注文について

溶液の濃度と分注量をお選びいただけます(すべて

DMSO

溶液)

多様な構造と薬物様特性

 リピンスキーの法則に基づき、

TimTec

Sigma-Aldrich

が保有する

300,000

以上の化合物から多様な

10,000

化合物を選定(

MW 120

500

96

ウェルスクリーニングプレートでご提供いたします。

384

ウェル、ラックに入ったミニチューブへの対応も可能です。

構造式、

cLogP

など各種パラメーターのデータ、プレートマップの提供が可能です。

表に無い容量へのカスタマイズが可能な場合もあります。お気軽にご相談ください。

2mg/mL 溶液 化合物 分注量 0.50 mg 250 µL 0.25 mg 125 µL 0.10 mg 50 µL 0.05 mg(最小容量) 25 µL 1mg/mL 溶液 化合物 分注量 0.50 mg 500 µL 0.25 mg 250 µL 0.10 mg 100 µL 0.05 mg(最小容量) 50 µL 10 mM 溶液 化合物 分注量 2.5µmol 250 µL 1.0µmol 125 µL 0.5µmol 50 µL 0.25µmol 25 µL

MyriaScreen II

CAT. NO. T990000

  価格 

1

セット

240

万円∼

(最小容量のご参考価格)

  ※容量によらず、

10,000

化合物でのセット販売となります。

納期目安 約

1

2

ヶ月

カスタマイズのお問い合わせ先

:

[email protected]

MyriaScreen was produced in collaboration with www.timtec.net

(12)

プチスクリーニング

お手軽にスクリーニングを始めてみませんか!?

1

プレートからご購入可能!

ターゲット別にライブラリーをご用意しています

ご注文について

 近年、高血圧、高脂血症治療薬の開発が著しく、

2011

年には世界で

299

品目の新薬候補が開発中、

5,701

件の臨床治験(オープンスタディのみ)が実施されました。

 本ライブラリーでは世界のメガファーマ

Pfizer, GSK, Merck, AstraZeneca

他の協力のもと、

80

種の降圧剤

関連の既承認医薬品および新薬候補物質を選出しています。

ACE

阻害薬、

ARB

(アンジオテンシンⅡ受容体拮抗薬)、βブロッカー、αブロッカー、

Ca

拮抗薬、利尿薬、

サイアザイド系利尿薬、抗アルドステロン薬、ループ利尿薬、脂質異常症(高脂血症)治療薬、コレス

テロール合成阻害薬

HMG-CoA

還元酵素阻害薬)、ペルオキシソーム増殖剤活性化受容体αアクチベー

ター、

ACAT

阻害剤、抗凝固薬(肺動脈高血圧治療)

血管新生および葉酸代謝インヒビター、がん細胞代謝に関るインヒビターおよびアクチベーターを含む

化合物ライブラリー。すでに抗がん剤として認可を受けてる化合物が一部含まれます。

ポリフェノール

、フラボノイド、タンニン、イソフラボン、アントシアニン、アンシアニジン、フェノール、

テルペン、テルぺノイド

、カルチノイド、サポニン、グルコシド、アルカロイド

ライブラリー CAT. NO. 化合物数 プレート数  価格(¥) 高血圧治療薬、治療薬候補ライブラリー BMHCP01MARUN 80 1枚 198,000 ガン関連化合物ライブラリー BMCAN01MARUN 80 1枚 198,000 天然生理活性物質ライブラリーⅠ BMNAT01MARUN 80 1枚 198,000 天然生理活性物質ライブラリーⅡ BMNAT02MARUN 40 1枚 99,000 各25 µL(10 mM DMSO溶液)

10mM DMSO

溶液

 各

25

µ

L

  

96 well

プレート

1

  (

40

80

化合物)

高血圧治療薬、治療薬候補ライブラリー

降圧剤関連の既承認医薬品および新薬候補物質

80

ガン関連化合物ライブラリー

血管新生およびがん細胞代謝に関る化合物

80

天然生理活性物質ライブラリーⅠ

天然生理活性物質ライブラリーⅡ

天然物由来の化合物で生理活性が確認されている物質ライブラリー

化合物リストはウェブサイトでご覧いただけます。

sigma.com/putilibrary-jp

納期目安 約

2

ヶ月

ご注文を受けてからの生産になります。

2

月末までの

納品をご希望の場合は、

12

月までにご注文下さい。

化合物の種類はロットにより変更する可能性があります。

40

80

化合物

198,000

円!

(13)

プチスクリーニング

ご注文について

PI3K

VEGFR/RTK

パスウェイ、

HDAC

aurora kinase

CDK

cell cycle regulator

Integrase/Proteosome

などを標的としたインヒビターのライブラリー

一部

FDA

認可を受けた化合物が含まれます。

PI3K

VEGFR/RTK

パスウェイ、

HDAC

aurora kinase

CDK

cell cycle regulator

Integrase/Proteosome

などを標的としたキナーゼインヒビターのライブラリー。

一部

FDA

認可を受けた化合物が含まれます。

EGFR

VEGFR

SRC

c-Met

JAK

などのチロシンキナーゼを標的としたインヒビターのライブラリー。

一部

FDA

認可を受けた化合物が含まれます。

ライブラリー CAT. NO. 化合物数 プレート数  価格(¥) インヒビターライブラリーⅠ BMINH01MARUN 80 1枚 198,000 インヒビターライブラリーⅡ BMINH02MARUN 80 1枚 198,000 インヒビターライブラリーⅢ BMINH03MARUN 80 1枚 198,000 キナーゼインヒビターライブラリーⅠ BMKIN01MARUN 80 1枚 198,000 キナーゼインヒビターライブラリーⅡ BMKIN02MARUN 40 1枚 99,000 チロシンキナーゼインヒビターライブラリー BMTYR01MARUN 40 1枚 99,000 各25 µL(10 mM DMSO溶液)

インヒビターライブラリーⅠ

インヒビターライブラリーⅡ

インヒビターライブラリーⅢ

キナーゼインヒビターライブラリーⅠ

キナーゼインヒビターライブラリーⅡ

チロシンキナーゼインヒビターライブラリー

化合物リストはウェブサイトでご覧いただけます。

sigma.com/putilibrary-jp

納期目安 約

2

ヶ月

ご注文を受けてからの生産になります。

2

月末までの

納品をご希望の場合は、

12

月までにご注文下さい。

1

プレート

40

80

化合物

198,000

99,000

円!

円!

10mM DMSO

溶液

 各

25

µ

L

  

96 well

プレート

1

  (

40

80

化合物)

(14)

プチスクリーニング

アラキドン酸カスケードに関連する酵素のインヒビターや

プロスタグランジンなどの低分子化合物ライブラリー。

アラキドン酸カスケード

40

80

化合物

198,000

円!

神経伝達物質のアゴニスト、アンタゴニストのライブラリー。

アドレナリン作動性化合物ライブラリー

コリン作動性化合物ライブラリー

セロトニン作動性化合物ライブラリー

ドーパミン作動性化合物ライブラリー

GABA 作動性化合物ライブラリー

ご注文について

ライブラリー CAT. NO. 化合物数 プレート数  価格(¥) アラキドン酸カスケード BMARA01MARUN 80 1枚 198,000 アドレナリン作動性化合物ライブラリー BMADR01MARUN 80 1枚 198,000 コリン作動性化合物ライブラリー BMCHO01MARUN 80 1枚 198,000 セロトニン作動性化合物ライブラリー BMSER01MARUN 80 1枚 198,000 ドーパミン作動性化合物ライブラリー BMDOR01MARUN 80 1枚 198,000 GABA作動性化合物ライブラリー BMGAB01MARUN 40 1枚 99,000 各25 µL(10 mM DMSO溶液)

化合物リストはウェブサイトでご覧いただけます。

sigma.com/putilibrary-jp

納期目安 約

2

ヶ月

ご注文を受けてからの生産になります。

2

月末までの

納品をご希望の場合は、

12

月までにご注文下さい。

化合物の種類はロットにより変更する可能性があります。

10mM DMSO

溶液

 各

25

µ

L

  

96 well

プレート

1

  (

40

80

化合物)

(15)

Pfizer

®

Drug

ライブラリー

世界的に有名な製薬メーカーの

Pfizer

で開発された多数の

有名な化合物をライブラリーでお届けします。

ご注文について

ライブラリー CAT. NO. 化合物数 プレート数  価格(¥) ファイザードラッグライブラリー BMPFD01MARUN 80 1枚 298,000 各25 µL(10 mM DMSO溶液)

納期目安 約

2

ヶ月

ご注文を受けてからの生産になります。

2

月末までの

納品をご希望の場合は、

12

月までにご注文下さい。

化合物の種類はロットにより変更する可能性があります。

カスタムライブラリー

ご紹介

自社製品から他社製品まで

800

万種類の化合物から調達します!

希望の化合物をセット化(

20

本以上から)

ご希望の容量で購入(

1 mg

25 g

バイアル、包装形態を選択可能

DMSO

溶液化も可能

Ready-to-use

作業時間の短縮

廃棄の削減

カスタムライブラリーお問い合わせ先 :

[email protected]

リピトール

、シーエルセントリ

、バイアグラ

、チャンピックス

セレコックス

などを含む低分子生理活性物質、全

80

化合物の

ライブラリー。

ご希望の化合物を

ご希望の容量でライブラリー化

10mM DMSO

溶液

 各

25

µ

L

  

96 well

プレート

1

(16)

http://www.sigma-aldrich.com/japan

SAJ1477 2012.10 本記載の製品および情報は2012年10月1日現在の情報であり、収載の品目、製品情報、価格等は予告なく変更される場合がございます。 最新の情報は、弊社Webサイト(sigma-aldrich.com/japan)をご覧ください。 掲載価格は希望納入価格(税別)です。詳細は販売代理店様へご確認ください。 弊社の試薬は試験研究用のみを目的として販売しております。医薬品原料並びに工業用原料等としてご購入の際は、弊社ファインケミカル事業部までお問合せ願います。 お問合せは下記代理店へ

シグマ アルドリッチ ジャパン

©2012 Sigma-Aldrich Co. LLC. All rights reserved. SIGMA, SAFC, SIGMA-ALDRICH, ALDRICH, and SUPELCO are trademarks of Sigma-Aldrich Co. LLC, registered in the US and other countries. FLUKA is a trademark of Sigma-Aldrich GmbH, registered in the US and other countries. SAFC brand products are sold through Sigma-Aldrich, Inc. Purchaser must determine the suitability of the product(s) for their particular use. Additional terms and conditions may apply. Please see product information on the Sigma-Aldrich website at sigma-aldrich.com. Pfizer is a registered trademark of Pfizer Inc.. シーエルセントリ、セレコックス、チャンピックス、バイアグラ、リピトールはファイザー株式会社の登録商標です。CompoZr, LentiPlex, LOPAC, MISSION and Prestige Antibodies are registered trademarks of Sigma-Aldrich Biotechnology LP and Sigma-Aldrich Co. LentiExpress and Where Bio Begins are trademarks of Sigma-Aldrich Biotechnology LP and Sigma-Aldrich Co.

140-0002

 東京都品川区東品川

2-2-24

天王洲セントラルタワー

4

階 製品に関するお問い合わせは、弊社テクニカルサポートへ

TEL

03-5796-7330

FAX

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E-mail : [email protected]

在庫照会・ご注文方法に関するお問い合わせは、弊社カスタマーサービスへ

TEL

03-5796-7320

FAX

03-5796-7325

E-mail : [email protected]

Gene Editing

製品名 価格(¥) 備考

Plasmid

mRNA

Plasmid

のみ

CompoZr

ノックアウト

ZFN kit

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CompoZr® Zinc Finger Nuclease

キャンペーン期間

2012

10

1

12

21

日時・場所

2012

12

13

福岡国際会議場

演  題

ZFN

を用いたヒト

iPS

細胞における

TAP

遺伝子の標的破壊

   

̶ 遺伝子改変による組織不適合性問題へのアプローチ ̶ 演  者

     

(熊本大学 免疫識別学分野 准教授)

千住

第 35 回 日本分子生物学会年会ランチョンセミナー

参照

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