Adenosine Triphosphate Adenosine Monophosphate min Fig.2 Chromatograms of Nucleotides min Peak

0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 min 0.0 0.5 1.0 ( x100,000 ) M a s troTM _C18 S /N : 685 Typical C18 S /N : 492 Typical C18 S /N : 492 Typical C18 S /N : 2.8 Typical C18 S /N : 2.8 M a s troTM _C18 S /N : 24 1 µg /mL 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 min 2.5 3.0 3.5 ( x1,000 ) Analytical Conditions

Instrument : Shimadzu NexeraXR+ LCMS2020 Column : MastroTM

C18（100 mmL.×2.1 mmI.D., 3 µm）            Typical C18（100 mmL.×2.1 mmI.D., 3 µm) Flow Rate : 0.2 mL/min

Detection : MS (SIM mode)

Mobile Phase : A: 0.1% Formic Acid in Water   B: 0.1% Formic Acid in MeCN

0.01 min ポンプ B.Conc 10％ 5.00 min ポンプ B.Conc 80% 5.01 min ポンプ B.Conc 10% 6.50 min ポンプ B.Conc 10% Column Temp. : 40 ℃ Injection Vol. : 2 µL P e a k

Fig.1 Chromatograms of Hydrocortisone Sodium Phosphate

H y d r o c o r t i s o n e S o d i u m P h o s p h a t e

Hydrocor tisone Sodium Phosphate

25 ng/mL

M a s t r o ™ C 1 8 カラム のご 紹 介

ー M a s t r o ™ ボ デ ー の 有 用 性 に つ い て ー

リン酸基含有化合物を用いて、ステンレススチールボデーカラムと Mastro™ボデーカラムの比較を行った結果、 Mastro™ボデーカラムではピーク形状や S/N が大幅に改善されその有用性が確認できました 。 P e a k 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 min 1 2 MastroTM_C18カラム Typical C18カラム 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 min 2 1

Fig.2 Chromatograms of Nucleotides

Adenosine Triphosphate Adenosine Monophosphate

Instrument 　　 : Shimadzu Nexera

Column　 : MastroTM　C18（100 mmL.×2.1 mmI.D., 3 µm） 　　　　　　 Typical C18 （100 mmL.×2.1 mmI.D., 3 µm） Mobile Phase : 10 mM　Ammonium Formate

　　　　　　 　 in　Water : MeCN=99:1 Flow Rate : 0.2 mL/min

Column Temp. : 40 ℃ Detection : SPD-M20A at (254 nm) Injection Vol. : 1 µL Analytical Conditions Peak Asymmetry Peak 1 Peak 2 1.39 1.14 5.10 1.49 MastroTM C18 Typical C18 1 . A d e n o s i n e T r i p h o s p h a t e 2 . A d e n o s i n e M o n o p h o s p h a t e

セグメン ト#1 min 21,873 79,876 210,366 151,006 164,146 170,327 40,854 97,411 69,439 26,920 151,905 26,289 67,224 82,196 57,987 129,243 63,354 193,379 373,078 23,121 24,843 58,584 86,086 47,954 61,741 63,139 173,838 18,372 11,988 28,845 24,690 51,203 31,425 15,237 36,660 6,604 780 10,059 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 25.0 343.90>150.10(-)@18 (1) 180. 1 0>79. 15(-)@1 (1) 194. 1 0>80. 15(-)@2 (1) 259. 0 0>97. 10(-)@3 (1) 229. 0 0>97. 10(-)@4 (1) 289. 0 0>97. 10(-)@5 (1) 259. 0 0>97. 10(-)@6 (1) 170. 9 0>79. 10(-)@7 (1) 258. 9 0>79. 10(-)@8 (1) 169. 0 0>97. 10(-)@9 (1) 198. 9 0>97. 10(-)@10 (1 ) 229. 0 0>97. 10(-)@11 (1 ) 322. 0 0>79. 10(-)@12 (1 ) 169. 0 0>97. 10(-)@13 (1 ) 322. 9 0>79. 10(-)@14 (1 ) 361. 9 0>79. 10(-)@15 (1 ) 320. 9 0>195. 05(- )@16 (1) 346. 0 0>79. 10(-)@17 (1 ) 327. 9 0>134. 20(- )@19 (1) 402. 0 0>158. 90(- )@20 (1) 441. 9 0>159. 05(- )@21 (1) 403. 0 0>159. 05(- )@22 (1) 185. 1 0>97. 10(-)@23 (1 ) 339. 1 0>97. 10(-)@24 (1 ) 425. 9 0>159. 00(- )@25 (1) 401. 0 0>159. 00(- )@26 (1) 167. 1 0>79. 10(-)@27 (1 ) 481. 9 0>159. 00(- )@28 (1) 521. 9 0>159. 00(- )@29 (1) 482. 9 0>159. 00(- )@30 (1) 505. 9 0>159. 05(- )@31 (1) 481. 1 0>159. 00(- )@32 (1) 662. 0 0>539. 95(- )@33 (1) 742. 2 0>619. 90(- )@34 (1) 664. 0 0>408. 00(- )@35 (1) 744. 2 0>408. 15(- )@36 (1) 866. 0 0>408. 00(- )@37 (1) 808. 0 0>408. 00(- )@38 (1) Methionine sulfone 2-Morpholinoethansulfonic acid Glucose 6-phosphate Ribose 5phosphate Sedoheptulose 7-phosphate Fructose 6-phosphate Glycerol 3-phosphate Glucose 1-phosphate Glyceroaldehyde 3-phosphate Erythrose 4-phosphate Ribulose 5-phosphate CMP Dihydroxyacetonephosphate UMP GMP TMP AMP cGMP cAMP CDP GDP UDP 3-Phosphoglycerate/2-Phosphoglycerate Fructose 1,6-bisphosphate ADP TDP Phosphoenolpyruvate CTP GTP UTP ATP TTP NAD NADP NADH NADPH Succinyl coenzyme A Acetyl coenzyme A Analytical Conditions

Instruments : Shimadzu Nexera/LCMS-8050 Column : Mastro™ SP

(2.1 mmI.D X 100 mmL.,5 μm) Mobile phase A : 10 mM Ammonium acetate/MeCN=90/10 B : 50 mM Ammonium acetate/MeCN=80/20 Gradient B conc. : 0% B (0-4.0 min)⇒60% B (9.0 min) ⇒100%B (11.0-20.0 min) ⇒0%B (20.1-25.0 min) Oven Temp. : 40 ℃ Injection vol. : 3 µL Sample : 2.5 µM STD Mix T.Flow : 0.5 mL/min Nebulizing gas : 3.0 L/min Drying gas : 12 L/min DL Temp. : 250 ℃ BH Temp. : 400 ℃ Injection vol. : 3 µL Fig.4 Chromatograms of Sugar Phospahates and Nucleotides

Fig.5 Chromatograms of Sugar Phospahates and Nucleotides Chromatogram

M a s t r o ™ S P カラム によるイオン ペ ア 剤 を 用 い な い

糖リン 酸 及 びヌクレ オ チド 等 の L C / M S / M S 分 析 例

Instruments : Shimadzu Nexera/LCMS-8050 Column : Mastro™ SP

(2.1 mmI.D.X 100 mmL. ,5 µm) Mobile phase A : 10 mM NH4HCO3/ MeCN=90/10 B : 20 mM NH4HCO3/ MeCN=70/30

Gradient B conc. : 0% (0-3 min)

⇒ 100% (13.0-20.0 min) ⇒ 0% (20.1-25.0 min) Oven Temp. : 40 ℃

Injection vol. : 2 µL

Sample : 2.5 µM STD Mix Nebulizer Gas : 2.0 L/min Drying Gas　　 　: 10 L/min Heating Gas　 　 : 10 L/min Interface Temp. : 300 ℃ DL Temp.　　　 　 　 : 250 ℃ HB Temp.　　　　 　 : 400 ℃ Dwell Time　　　 　 : 10 ms Pause Time　　　 　: 1 ms Ionization mode : ESI/negative

Analytical Conditions

注 ） ア ル カ リ 条 件 下 で の 参 考 ア プ リ ケ ー シ ョ ン で す 。 同 条 件 で の 使 ⽤ は 、 カ ラ ム の 許 容 p H 範 囲 を 超 え る 為 寿 命 が 短 く な り ま す の で 、 予 め ご 留 意 く だ さ い 。

Mastro™ボデーカラムに比較的保持の強いPFP充填剤を充填したカラムです。 一般的にPFPカラムはC18カラムでは保持・分離が困難な化合物群、例えば位置異性体やハロゲン系化合物などの保持・分 離に対して有効と言われています。  ここでは、カビ毒の分析例によりMastro™PFPカラムのご紹介を致します。   3 - A D O N、1 5 - A D O N のような 位 置 異 性 体 化 合 物 は、C 1 8 充 填カラムによる分 離 は 困 難で P F P ( ペンタフルオロフェニ ル ) 充 填カラム が 有 効で す1 )_{。また 、フモ ニシンB 類 のような 金 属 キレ ート性 化 合 物 は、カラムを含 め た 分 析システムに 吸 着しテーリング や キャリーオ} ー バ ー の 原 因となります2 )_{。M a s t r o ™シリーズカラムは、カラムボデ ー 接 液 部 がイナート素 材であるた め ( F i g . 6 )、一 般 的 なステンレス} スチール製ボデーカラムに比べ金属キレート性化合物吸着の影響を大幅に削減できます2)_。 【参考文献】

[1]Masayoshi Tamura, Naoki Mochizuki, Yasushi Nagatomi, Koichi Harayama,Akira Toriba and Kazuichi Hayakawa, Toxins 2015, 7, 1664-1682; doi:10.3390/toxins7051664

[2]Mochizuki, N.CHROMATOGRAPHY, Vol.33 No.3 (2012)

M a s t r o ™ P F P ( P e n t a F l u o r o P h e n y l ) カラム に つ い て

Mastro™ C18

Mastro™ C18

A社PFPカラム

A社PFPカラム

Mastro™ PFP

Mastro™ PFP

Fig.6 Chromatograms of 3-ADON/15-ADON,FB1 and FB2/FB3 using Mastro™ PFP,C18 and Typical PFP columns

M a s t r o ™ P F P カラム による

マイコトキ シン 1 7 成 分 の L C / M S / M S 分 析 例

NIV

DON

FUX

NEO

DAS

HT-2

FB1

-ZAL

α-ZAL

β

T-2

FB3

_FB2

β-ZEL

α-ZEL

ZEN

15-ADON

3-ADON

Analytical Conditions Instruments : Nexera/LCMS-8060 Column : Mastro™ PFP (2.1 mmI.D.X 100 mmL., 3 µm) Mobile phase A: 10 mM Ammonium acetate in Water B: 2% Acetic acid in MeOH

Time　program: B20%（0min)-40%（1-1.5min）-50%（1.51-5.5min） -65%(5.51min)-70%(9.5min)-95%(9.51-12min)　 Flow : 0.3 mL/min

Sample : 50 ng/mL STD Mix Fig.7 Chromatograms of 17 Mycotoxins

MastroTM _{Body Image} ステンレススチール製ボデー ポリマーフリット ポリマーコーティング 充填剤

配 管 影 響 に つ い て

M a s t r o ™ ボ デ ー に つ い て

ス テン レス ス チ ー ル の カ ラム ボ デ ー 内 面 を ポ リ マーで コ ー ティン グ し 、フリット は 高 耐 圧 性 の ポ リ マー 素 材 を 採 用 す る ことで 不 活 性 と 高 耐 圧 を 両 立 し まし た 。 配 管 の ピ ー ク 形 状 に 及 ぼ す 影 響 は 、カ ラ ム ボ デ ー に 比 べ 小 さ い 事 が 分 か り ま し た 。 本 誌 の ア プ リ ケ ー シ ョ ン デ ー タ は 全 て S U S 配 管（ 島 津 純 正 装 置 ）※_{を 用 い て 分 析 し た も の で す 。} ※SUS 配 管の種 類により内面の 研磨 度合 い 等が異なるため、同じ SUS 配 管でもピーク形 状 が異なる場 合 があります。 S h i m a d z u N e xe r a 用 SI L O U T 配 管（SUS , P/ N: 2 28 -5318 4 - 91, サイズ : 6 0 0 m m L .×0.1 m m I . D.）は吸 着が 少なく有用です。