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Agilent 1100 HPLC, LC/MS による最新ソリューション ハイスループット分析と食品分析のアプリケーション October/2005 横河アナリティカルシステムズ 食品衛生学会学術講演会 Page 1 なぜ高速分析 高分解能分析なのか? 高分解能分析 Key Issue: 分解能の

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食品衛生学会学術講演会 Page 1

October/2005

横河アナリティカルシステムズ

Agilent 1100 HPLC, LC/MS

Agilent 1100 HPLC, LC/MS

による

による

最新ソリューション

最新ソリューション

ハイスループット分析と食品分析のアプリケーション

ハイスループット分析と食品分析のアプリケーション

なぜ高速分析、高分解能分析なのか?

なぜ高速分析、高分解能分析なのか?

Key Issue:

分解能の向上

最大の分解能

分析時間の短縮

溶媒消費量の削減

高分解能分析

高分解能分析

高速分析

高速分析

最短の分析時間

サンプルの氾濫を防ぐ

ベースライン分離の維持

場合によっては分解能を犠牲にす

ることもある

(e.g. LC/MS)

Key Issue:

大量のサンプル分析

(2)

 October 2005 Page 3

高速高分解能分析の実現

高速高分解能分析の実現

分析時間(

+ 再平衡化時間)の短縮

カラムを短くする

溶媒消費量の削減

+

充てん剤粒径を小さくする

分離度の維持あるいは改善

微小粒径ショートカラムがあれば、高速高分解能分析が実現できる!

逆相

逆相

HPLC

HPLC

充てん剤の変遷

充てん剤の変遷

Yr of acceptance

Particle Size

Nominal Size

Plates / 5cm

1969

100µm

170

1973

57µm (pellicular)

350

1975

10µm

2,000

1985

5µm

4,000

1992

3.5µm

7,500

2003

<2 µm

12,000

(3)

 October 2005 Page 5 -0.0005 0.0000 0.0005 0.0010 0.0015 0.0020 0.0025 0.0030 0.0035 0.0040 0.0045 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 ZORBAX RRHT Eclipse XDB-C18 4.6 x 50mm (30mm) 85:15 ACN:Water 1.0 L Octanophenone 0.05 –5.0 mL/min 20°C 5.0 m 3.5 m 1.8 m 260,740 N/m @ 2mL/min 5.0 mL/min H E T P ( cm /p la te)

Interstitial linear velocity (ue- cm/sec)

Higher speed –Higher resolution –Higher sensitivity

粒径 理論段高さ(Min.) 5μm 9.3μm 3.5μm 6.0μm 1.8μm 3.8μm

粒径

粒径

2

2

m

m

以下の充てん剤の特長

以下の充てん剤の特長

van

van

Deemter

Deemter

curves

curves

機械的強度:

耐アルカリ性

:

不純物金属:

ポア径、粒径の分布:

Xerogel

(sil-type)

高い

一般に悪い

少ない∼多い

広い

非常に高い

良好

少ない

狭い

Rx-SIL ZORABX

(Sol type)

充てん剤の構造・特性

充てん剤の構造・特性

圧損が

小さい

(4)

 October 2005 Page 7

RR

RR

カラム、

カラム、

RRHT

RRHT

カラムによる

カラムによる

分析時間の短縮

分析時間の短縮

4.6 x 250 mm, 5 m 4.6 x 100 mm, 3.5 m 4.6 x 30 mm, 1.8 m 1 mL/min 4.6 x 30 mm, 1.8 m 2 mL/min min 0 5 10 15 20 25 30 0.5 1 1.5 2 2.5 12.71 4.15 1 2 3 4 Rs(1,2) = 4.8 Rs(1,2) = 3.5 Rs(1,2) = 3.3 Rs(1,2) = 3.1

カラム: ZORBAX SB-C18 移動相: 50% 20 mM NaH2PO4, pH 2.8: 50% ACN

流量: 1 mL/min カラム温度: RT

検出: UV 230 nm Sample: 1. Estradiol 2. Ethynylestradiol 3. Dienestrol 4. Norethindrone 29.65 2.09 1 2 3 4 1 2 3 4 1 23 4

1100 UFLC System

1100 UFLC System

1100 UFLCの構成

•1100 バイナリポンプ –高精度で低ディレイボリュームの 高圧混合ポンプ •1100 ウェルプレートサンプラ –低ディレイボリューム、低 キャリーオーバーで高速高精度なオートサンプラ •1100 カラム恒温槽 –室温−10℃から80℃まで高精度 に制御可能なカラム恒温 •1100 DAD SL –80Hzのサンプリングレートにより最高の 分離度を保証 •Zorbax RRHT 1.8um カラム–高線流量下でも高効率を 維持

全世界で

全世界で

50,000

50,000

台以上が使用されている

台以上が使用されている

1100

1100

がベース

がベース

コンベンショナル

コンベンショナル

LC,

LC,

セミミクロ

セミミクロ

LC

LC

としても最適なシステム

としても最適なシステム

(5)

 October 2005 Page 9

1100 UFLC

1100 UFLC

•コンベンショナル LC:Analysis Times = 5–120 min •高速 LC: Analysis Times = 2–5 min

•UFLC: Analysis Times = 0.2–2.0 min

Gradient Time = 0.2–1.5 min Cycle Times = 0.5–2.5 min 50% Peak Width = 0.1–1.0 sec

PW = 0.3 sec min 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0

UFLCの分析時間は?

最適な高速高分解能分離を

最適な高速高分解能分離を

得るためには・・・・・・

得るためには・・・・・・

最適な装置パラメータが必要

データサンプリングレート

フローセルのボリューム

配管:内径と長さ=ボリューム

ミキサーのボリューム

グラジエントディレイボリューム

データサンプリングレート

(6)

 October 2005 Page 11

1100 DAD SL

1100 DAD SL

が切り拓く

が切り拓く

超高速

超高速

LC

LC

分析の世界

分析の世界

Agilent 1100 シリーズ ダイオードアレイ検出器

SL Agilent 1100シリーズ 多波長検出器 SL

高速サンプリングレートと高感度、高信頼性を兼ね備えた

新世代のダイオードアレイ検出器

1100

1100

DAD SL

DAD SL

の機能と特長

の機能と特長

Performance

Compatibility

–Security & Compliance

機能

機能

特長

特長

•最大8チャンネルのシグナルを80Hz 超高速LC分析で 最高の分解能を保証 で採取 •オンラインスペクトル採取も80Hz 微量成分の超高速LC分析においてもピーク純 度の分析やスペクトル分析が可能 •最新のエレクトロニクスを搭載 最小のノイズを実現(典型値 <  6w4AU ASTM) •新しいフローセル 超高速LCの条件下(高流量、温度)でのRI 効果とピーク拡散を最小限に抑え、最高の 感度を実現 •最新の電子温度制御技術を搭載 (ETC) 周囲温度の変動が大きい環境下でもベースラ

インのうねりを最小に抑えることで高感度を

実現

(7)

 October 2005 Page 13

1100

1100

DAD SL

DAD SL

の機能と特長

の機能と特長

Performance

Compatibility

–Security & Compliance

機能

機能

特長

特長

•データリカバリカード (DRC)内蔵 データの脱落“ゼロ” •RFID-tag によるフローセル、ランプの より確実なデータトレーサビリティの確保 管理 •将来の拡張性を保証する オンボードでLAN,USBに対応 エレクトロニクス USB on board Webサーバー機能を内蔵

PCMCIA スロット( WLAN, Bluetooth, Firewire) •新しいファームウェアアーキテクチャ 自動モジュール(将来的にはシステムの) テストによる装置DQが可能

1100

1100

DAD SL

DAD SL

の機能と特長

の機能と特長

25,000台以上の実績の継承

W ランプ 長寿命 D2ランプ ホロミウムオキサイド フィルター フロー セル プログラマブル スリット グレーティング 1024素子 ダイオードアレイ 190 nm 950 nm 可視光領域での ノイズを最小化 自動波長校正 最高の 波長分解能を 実現 

1100 DADは全世界で 25,000台以上が稼動しています。

190-950nmの広範囲な波長範囲で最適な感度が得られま

す。

分解能と感度を 迅速に最適化

(8)

 October 2005 Page 15 min 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0 80Hz PW=0.30sec 40Hz PW=0.33sec 20Hz PW=0.42sec 10Hz PW=0.67sec 5Hz PW=1.24sec • サンプル: フェノン類混合物 • カラム: Zorbax SB-C18, 4.6x30, 1.8um • グラジェント: 50-100% ACN in 0.3min

80Hz

80Hz

サンプリングの威力

サンプリングの威力

20Hzvs. 80Hz ピーク幅は40% 増加 ピークキャパシティは40% 減少 分離度は30% 低下 カラム効率は70% 低下 10Hzvs. 80Hz ピーク幅は120% 増加 ピークキャパシティは120% 減少 分離度は90% 低下 カラム効率は260% 低下 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Ocatanophenone 9 Heptanophenone 8 Hexanophenone 7 Valerophenone 6 Benzophenone 5 Butyrophenone 4 Propiophenone 3 Acetophenone 2 Acetanilide 1 compound peak

超高速

超高速

LC

LC

に求められるパフォーマンス

に求められるパフォーマンス

1100 DAD-SLを使えば超高速LCにおいて最大

限の分離度を得ることができます。

では、超高速

LCで様々な規制で要求されている

性能を、現在使用しているコンベンショナル

LCと

同様に満足できるのでしょうか?

•0.05%レベルの副生成物の定量は? •保持時間再現は< 0.5% ? •ピーク面積値の再現性は< 1% ? •微量成分のピーク純度分析は? •微量成分のスペクトル確認は?

(9)

 October 2005 Page 17

1100 DAD SL

1100 DAD SL

のダイナミックレンジ

のダイナミックレンジ

min 0.5 1 1.5 2 2.5 mAU 0 500 1000 1500 2000 主成分= 2000 mAU 不純物= 1 mAU DMS O 不純物

検出器には主成分と不純物を正確に精度よく

同時分析できるだけのダイナミックレンジが必要です。

1100 DAD SL

1100 DAD SL

のノイズレベル

のノイズレベル

0.05% レベルの不純物分析

ASTM 法によるノイズ:

20 µAU Peak-to-Peak (+/- 10 µAU) 7.4 15 21 30 42 4nm Slit 16nm Slit 8nm Slit 11 16 20 Hz 8.0 11 10 Hz 4.0 5.4 2.5 Hz 16 22 40 Hz 23 31 80 Hz min 5 10 15 20 mAU -0.04 -0.03 -0.02 -0.01 0 min 5 10 15 20 mAU -0.1 -0.08 -0.06 -0.04 -0.02 min 5 10 15 20 mAU -0.06 -0.04 -0.02 0 スリット幅:4nm Noise < +/– 3.7 µAU スリット幅:8nm Noise < +/– 2.7 µAU スリット幅:16nm Noise < +/– 2.0 µAU 1mAU のピークの定量 (0.05% レベル) •必要とされる S/N = 10 –20 → ノイズ= 50 –100 µAU

(10)

 October 2005 Page 19

1100 UFLC

1100 UFLC

の感度と再現性

の感度と再現性

微量成分の分析例 (

1mAU、0.5% レベル)

min 0.2 0.25 0.3 0.35 0.4 0.45 0.5 0.55 mAU 0 1 2 3 4 5 6 10回連続分析時の重ね書き@ 245nm Nifedipin •吸光度; 2.5mAU (0.1% level) •保持時間再現性 = 0.092% RSD

Nifedipin degradation product

•吸光度 0.5mAU (0.03% level) •保持時間再現性 = 0.123% RSD •グラジェント: 50–70% B in 0.85min •カラム: 4.6 x 50, 1.8um •試料: 5ul of 550 µg/ml Nimodipin •流量: 4 ml/min •フローセル: 13ul •サンプリングレート: 80Hz •スリット: 8nm

1100 UFLC

1100 UFLC

の感度

の感度

微量成分のピーク純度検定とスペクトル確認

min 1.6 1.7 1.8 1.9 2 mAU 6 8 10 12 14

80Hzのサンプリングで

ピーク純度検定

スペクトル確認

が可能でしょうか

?

(11)

 October 2005 Page 21

1100 UFLC

1100 UFLC

の感度

の感度

微量成分のピーク純度検定、スペクトル確認

80 Hzのサンプリングレートでも Nifedipin (1.8mAU) の

ピーク純度検定とスペクト確認が可能

min 1.6 1.7 1.8 1.9 2 mAU 6 8 10 12 14

1000 mAUのピークから抽出

したスペクトルとの比較

min 0.2 0.4 0.6 0.8 1 injection 1 injection 4000 Column 2 Column 1 injection 4000 injection 2000 injection 2000 injection 1 min 0.2 0.4 0.6 0.8 1 自動カラム再平衡化機能を持つシステムでの安定性: •システム、カラムとも長期にわたって安定 •24時間 x 7日間以上の自動連続分析に最適 Injection Number 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0 500 1000 1500 2000 2500 3000 3500 4000 Column 1 Column 2 RT/min W1/2 /sec 0 500 1000 1500 2000 2500 3000 3500 4000 RT/min W1/2 /sec P=300bar

1100 UFLC

1100 UFLC

の安定性

の安定性

7 日間( 8000回注入)の連続分析

(12)

 October 2005 Page 23

コンベンショナル

コンベンショナルLC

LC

で分析中の

で分析中の

データを

データを

いか

いか

迅速に高

迅速に高

速化するか

速化するか

 確認

  

RRHT-1100 Modification Kit for Diode Array Detector

1100シリーズに組み込み、そのカラムを用いてデータを取る

 同じ程度の理論段数のカラムを用意する

グラジエントカーブはカラム長さに比例させる

  

Conventional

Conventional

から

から

UFLC

UFLC

分析へのアプローチ

分析へのアプローチ

(

(

内径

内径

4.6mm

4.6mm

カラム

カラム

)

)

O OH O H OH OH OH O OH O H OH OH OH O OH O H OH OH OH O CO O H OH O OH O H OH OH OH O CO O H OH OH 4.C 6.EC 7.EGCg 8.GCg O OH O H OH OH OH OH 3.EGC O OH O H OH OH OH OH 2.GC 9.ECg O OH O H OH OH O CO O H OH OH OH OH O H COOH N N N N O CH3 O CH3 C H3 O OH O H OH OH O CO OH OH O H

1.Gallic acid 5.Caffeine

10.Cg

清涼飲料中に

(13)

 October 2005 Page 25

LC conditions

System: Agilent 1100 Series(Conventional, equipped with 500 µL mixer) Column: ZORBAX SB-C18 (4.6 mm i.d. x 250 mm, 5.0μm)

Mobile phase: A; 0.1 % phosphoric acid in 5% Acetonitrile(MeCN) B; MeCN

Gradient elution:0 min(B 0%)−5min(B 8%)−25min(B 20%)

Flow rate : 1.0 ml/min (100bar) Injection volume : 10 µL

Sample treatment : 4 times dilution of drink tea

UV conditions

Detection : 210nm, scan range ; 190 –400 nm , 20Hz Flow cell : 10mm path length

Tube : 0.17 mm ID

Conventional HPLC

Conventional HPLC

の分析結果 

の分析結果 

SB

SB

-

-

C18 (4.6

C18 (4.6

×250mm, 5

×

250mm, 5

μm)

μ

m)

1 2 3 4 567 8 9 10 min 0 5 10 15 20 LC conditions

System: Agilent 1100 Series (equipped with4.6mm RRTH Fast LC Kit, 80µL mixer) Column: ZORBAX SB-C18 (4.6 mm i.d. x 50 mm, 1.8μm)

Mobile phase: A; 0.1 % phosphoric acid in 5% Acetonitrile(MeCN) B; MeCN

Gradient elution:0 min(B 0%)−1min(B 8%)−5min(B 20%)

Flow rate :1.0 ml/min (116bar)

Injection volume : 10 µL

Sample treatment : 4 times dilution of drink tea

UV conditions

Detection : 210nm, scan range ; 190 –400 nm ,80Hz

Flow cell : 6mm path length (micro cell, 6uL) Tube : 0.17 mm ID

UFLC

UFLC

分析条件

分析条件

SB

SB

-

-

C18 (4.6

C18 (4.6

×

×

50mm, 1.8

50mm, 1.8

μ

μ

m)

m)

min 0 5 1 2 3 4 5 6 8 7 9 10

(14)

 October 2005 Page 27

LC conditions

System: Agilent 1100 Series (equipped with4.6mm RRTH Fast LC Kit, 80µL mixer) Column: ZORBAX SB-C18 (4.6 mm i.d. x 50 mm, 1.8μm)

Mobile phase: A; 0.1 % phosphoric acid in 5% Acetonitrile(MeCN) B; MeCN

Gradient elution:0 min(B 0%)−0.4min(B 8%)−1.7min(B 20%)

Flow rate :3.0 ml/min (390bar)

Injection volume : 10 µL

Sample treatment : 4 times dilution of drink tea

UV conditions

Detection : 210nm, scan range ; 190 –400 nm,80Hz

Flow cell : 6mm path length (micro cell, 6uL) Tube : 0.17 mm ID

UFLC

UFLC

分析条件

分析条件

SB

SB

-

-

C18 (4.6

C18 (4.6

×50mm, 1.8

×

50mm, 1.8

μm)

μ

m)

min 0 1 1.6 1 2 3 4 5 6 8 7 9 10

分析時間

分析時間

1/15

1/15

15

15

倍短縮!

倍短縮!

Conventional

Conventional

から

から

UFLC

UFLC

分析結果

分析結果

(4.6mm

(4.6mm

内径カラム

内径

カラム

)

)

4.6×50mm, 3mL/min, 390bar 4.6×50mm, 1.8μm 1mL/min, 115bar 4.6×150mm , 5μm 1mL/min, 83bar 4.6×75mm , 3.5μm 1mL/min, 60bar 1mL/min, 100bar 4.6×250mm, 5μm 1 2 3 4 5 6 7 9 10 8 min 0 1 1.6

分析時間

分析時間

1/15

1/15

15

15

倍短縮!

倍短縮!

(15)

 October 2005 Page 29

Rapid Resolution HT

Rapid Resolution HT

の分析における

の分析における

クロマトグラムの再現性

クロマトグラムの再現性

(

(

n=6)

n=6)

min 1 2

Flow rate : 3.0 mL/min

ZORBAX SB-C18 (4.6 mm i.d. x 50 mm, 1.8μm)

Detection; 210nm, 80Hz

10

1

2

3

4

5

6

7

8

9

内径

内径

2.1

2.1

mm

mm

カラムを用いた

カラムを用いた

Rapid Resolution HT

Rapid Resolution HT

分析へのアプローチ

分析へのアプローチ

min 1 2 3 4 1 2min 3 4 LC conditions Column: ZORBAX SB-C18 (4.6x 50 mm, 1.8μm) Flow rate :1.0 ml/min

LC conditions

Column: ZORBAX SB-C18 (2.1x 50 mm, 1.8μm) Flow rate :0.21 ml/min

(16)

 October 2005 Page 31

LC conditions

System: Agilent 1100 Series (equipped with2.1mm RRTH Fast LC Kit) Column: ZORBAX SB-C18 (2.1 mm i.d. x 50 mm, 1.8μm)

Mobile phase: A; 0.1 % phosphoric acid in 5% Acetonitrile(MeCN) B; MeCN

Gradient elution:0 min(B 0%)−0.68min(B 8%)−4.68min(B 20%)

Flow rate :0.21 ml/min (96bar)

Injection volume :2 µL, (Delay volume reduction)

Sample treatment : 4 times dilution of drink tea

UV conditions

Detection : 210nm, scan range ; 190 –400 nm ,80Hz

Flow cell : 6mm path length (micro cell, 1.7uL) Tube :0.12 mm ID

Rapid Resolution HT

Rapid Resolution HT

の分析条件

の分析条件

SB

SB

-

-

C18 (2.1

C18 (2.1

×

×

50mm, 1.8

50mm, 1.8

μ

μ

m)

m)

min 1 2 3 4 9 10 7 6 5 4 3 2 1 8 LC conditions

System: Agilent 1100 Series (equipped with2.1mm RRTH Fast LC Kit) Column: ZORBAX SB-C18 (2.1 mm i.d. x 50 mm, 1.8μm)

Mobile phase: A; 0.1 % phosphoric acid in 5% Acetonitrile(MeCN) B; MeCN

Gradient elution:0 min(B 0%)−0.5min(B 8%)−1.5min(B 20%)

Flow rate :0.43 ml/min (384bar)

Injection volume :2 µL( Delay volume reduction)

Sample treatment : 4 times dilution of drink tea

UV conditions

Detection : 210nm, scan range ; 190 –400 nm ,80Hz

Flow cell : 6mm path length (micro cell, 1.7uL) Tube :0.12 mm ID

Rapid Resolution HT

Rapid Resolution HT

の分析条件

の分析条件

SB

SB

-

-

C18 (2.1

C18 (2.1

×

×

50mm, 1.8

50mm, 1.8

μ

μ

m)

m)

9 6 5 4 3 2 1 10 8 7

(17)

 October 2005 Page 33

Well-plate LC system:

Binary pump, WPS, TCC, HT columns and DAD

Mass-selective detector:

Quadruple or Ion Trap

Valves:

Selection, regeneration, Preparation or separation

Integrated controller:

ChemStation software, Analyst or Ion Trap SW

High capacity:

Agilent sample capacity extension

High speed !!

High capacity !!

High performance !!

Agilent

Agilent

Rapid Resolution

Rapid Resolution

HT

HT

/

/

MS

MS

システム

システム

1100 UFLC

1100 UFLC

1100 DAD SL を利用した1100 UFLCは

1. データ品質を維持、向上させながら最大で10倍の生産性向上が得られます。

•超高速LC分析に完全に適合します. •感度と精度を維持しながら最大限の分離度が得られます. •微量分析においても正確かつ精密な定量とスペクトル分析が行えます. •厳しい(規制対応の)性能要求に対応できます. •あらゆる産業、ラボのアプリケーションに対応できます−ハイスループットスクリーニ ングからQA/QC分析まで.

2. 現在のメソッドと完全な互換性があります。

•コンベンショナルLCのメソッドを1100 UFLCで実行できます. •現在の要求だけでなく将来の要求にも対応可能です.

3. データのセキュリティが向上しています。

•新しいレベルのデータのセキュリティ確保、トレーサビリティ、コンプライアンス対応.

(18)

Page 35

LC/MS

LC/MS

Mix

Mix

モードマルチイオン源

モードマルチイオン源

ESI, APCI, 及びESI+APCIミックスモードが単一、同時測定が可能な単一

ネブライザーイオン源

•イオン源交換なしにESI, APCI測定が可能

•ESI単独,APCI単独及びESI+APCIミックスモードでの測定が可能

•高流量(2ml/min)での測定が可能

•全モードで高感度化の実現

•ESIモードでの乾燥ガス消費量の低減

多彩な性能を有する新たなイオン化法:

ESI+APCIミックスモード

•よりユニバーサルな測定モード

•高速分析に対応

•高流量での測定が可能

•低流量での感度低下がない

Agilent

Agilent

マルチイオン源の開発コンセプト

マルチイオン源の開発コンセプト

(19)

 October 2005 Page 37 キャピラリー カラム溶出液 入り口 ネブライザー 乾燥ガス コロナ ニードル ESI 領域 APCI 領域 サーマル コンテナ IR エミッタ(ランプ) チャージング エレクトロード リバーシング エレクトロード ガス温度センサ APCIカウンター 電極 コロナ ニードル チャージング エレクトロード セパレーター カラム溶出液 入り口 ネブライザー リバーシング エレクトロード サーマル コンテナ IRエミッタ (ランプ)

Agilent

Agilent

マルチイオン源

マルチイオン源

APCI コロナ ニードル ネブライザー Field-shaping 電極 IR ランプ 温度センサー ESIケーブル APCI 対向電極

Agilent

Agilent

マルチイオン源

マルチイオン源

(20)

 October 2005 Page 39 Hexanesulfonic Acid S O O OH

ESI Negative Mode

Indole N H

APCI Positive Mode

Dinitrobenzotrifluoride F F F N O- O N O O

APCI Negative Mode

Crystal violet N+

N N

ESI Positive Mode

Agilent

Agilent

マルチイオン源

マルチイオン源

min 0.5 1 1.5 2 2.5 min 0.5 1 1.5 2 2.5 min 0.5 1 1.5 2 2.5

APCI

ESI

ESI-APCIミックスモード Indole Indole Crystal Violet Crystal Violet min 0.5 1 1.5 2 2.5 min 0.5 1 1.5 2 2.5 min 0.5 1 1.5 2 2.5 Dinitrobenzotrifluoride Hexanesulfonic acid Dinitrobenzotrifluoride Hexanesulfonic acid

APCI

ESI

ESI-APCIミックスモード

正イオン

負イオン

正、

、負単独イオンモード

負単独イオンモード

(21)

 October 2005 Page 41 min 0.5 1 1.5 2 2.5 min 0.5 1 1.5 2 2.5 正イオンモード Indole Crystal Violet 負イオンモード Dinitrobenzotrifluoride Hexanesulfonic acid

ミックスモードによる正

ミックスモードによる正

/

/

負切り替え測定

負切り替え測定

min 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 mAU 0 10 20 30 40 min 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 0 100000 200000 300000 400000 min 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 0 100000 200000 300000 400000 500000 0.020 min 0.034 min 4 scans 12 scans 10 scans across the peak

5 scans

Mixed mode ESI+APCI, one signal

Simulated ESI/APCI switching using two signals

DAD

Taxol Progesterone

ミックスモードによる

(22)

 October 2005 Page 43 Mixed モードによる測定 = 各モード毎での測 定に対してスループットのロス無しにより多く の情報が得られる Good Better Best 様々な化合物に対 する応答 IRエミッタ−により乾燥効率が向上 Best OK Best 乾燥 Mixed モード (あるいはS/Wによるイオン化モ ードの切替え)の利用:サンプル分析のスケジ ューリング、装置運用の効率化 Good Good Best

Open Access Lab

IRエミッタ−により乾燥効率が向上 N.A. Good Best 流量>0.4ml/min での感度 N.A. Best Good 質量数<200 でのESI+での感度 N.A. Good Best 質量数>300 でのESI+での感度 Comment APCI/ APPI ESI MM イオン源   比較 

従来のイオン源とマルチイオン源との比較

HPLC          : Agilent 1100

Column : Zorbax Eclipse XDB C18 (150mm,2.1mm,3.5um) Mobile phase : A:MeOH B:10mMCH3COONH4

10%A/B---(30min)---100%A Column temp : 40C

Sample volume : 20ul Flow rate : 0.2ml/min

MS : Agilent1100MSD SL Ionization : Multi source  Mixモード Scan range : m/z 100-500

SIM ion : Base peak ion Drying gas : 6 L/min at 350℃ Nebulizer gas : 50psi

Fragmentor : 100V Vcap : 4000V Charging voltage : 2000V Vaporizer temp : 240℃

マルチイオン源によるカビ毒の分析条件

マルチイオン源によるカビ毒の分析条件

(23)

 October 2005 Page 45 min 5 10 15 20 25 30 20000 60000 100000 140000 180000 min 5 10 15 20 25 30 50000 100000 150000 200000 1 2 3 4 5 10 11 12 13 6 7 8 9 1.Nivalenol 2.Deoxynivalenol 3.Fusarenon -X 4.3-Acetyl-DON 5.15-Acetyl-DON 6.Aflatoxin G2 7.Aflatoxin G1 8.Aflatoxin B2 9.Aflatoxin B1 10.Diacetoxyscirpenol 11.HT-2 toxin 12.T-2 toxin 13.Zearalenone 1 2 3 4,5 11 13 正イオンモード 負イオンモード

マルチイオン源によるかび毒の

マルチイオン源によるかび毒の

TIC

TIC

マルチイオン源によるかび毒の

マルチイオン源によるかび毒の

SIM

SIM

クロマトグラム

クロマトグラム

(APCI

(APCI

モードとミックスモードの比較

モードとミックスモードの比較

)

)

min 5 10 15 20 25 30 0 5000 10000 15000 20000 25000 30000 35000

ESI+APCI(MM)

1 2 3 45 10 11 12 13 6 7 8 9 5 10 15 20 25 30

APCI

4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 1 2 3 0 5000 10000 15000 20000 25000 30000 35000

(24)

 October 2005 Page 47

Agilent LC/MSD ロードマップ

LC/MSD IonTrap - 2000 構造解析のための MS/MS LC/MSD TOF - 2003 精密質量測定による 組成解析のためのMS 定量のためのMS/MS LC/MSD QQQ - 2006 LC/MSD QqTOF - 2006 精密質量測定による 組成解析および構造解 析のためのMS/MS LC/MSD QMS - 1997 LCのための 質量分析検出器

参照

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