移植動物癌腫瘍抗原に関する研究第1編
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(2) 678. 只. 細 胞 をdd‑系. マ ウ ス(♂). た り約500×104個. 友. 50匹 の 背 部 皮 下 に1匹. 康. あ. 2). を 移 植 し, 10日 後 に 発 生 した 癌. 0.25M庶. ン グ ブ レ ン ダ ー,ガ. ラス お よ び テ フ ロ ンホ モ ゲ ナ イ. の 沈 澱 に1.5M庶. れ を40P型. 2時 間 超 遠 沈,そ. のpellicleに. 時 間 超 遠 沈21)そ ン(L,. のpellicleを. D, L.)と. し,残. 脂質 定量. a). 総 脂質定量. 1000ml. H. Bragdonの. H2SO4に. 第4節 1). し た.. m1と リポ プ ロ テ イ ン. (表1). て,室 methanl. esterolお b). 脂 も ち い る 方 法22)に. 温 で リ ポ プ ロ テ イ ン 溶 液 に15倍 (4:. 1; v/v)を. 溶 性 の 蛋 白 部 分 は3000rpm 量 のacetoneで2回 water‑acetone. (2:. 上 清 を す て る.こ. 添 加 し, 10分 間,遠. した が つ. 30分. 1;. v/v)で. た70%過. 心 分 離 し5倍. 再 び 懸 濁,遠. お,標. 津 光 電分 光 光 で比. acid,. chol. も ち い て 作 成 した .. リ ン脂 質 定 量 法25)26)56)に. れ にammonium. 塩 素 酸0.4mlを. 冷 却 後 蒸 溜 水2.0mlを. し た が つ てFolch. く振 盪 し, Ｌipoprotein. 38℃. molybdateを. 飽和 し. 加 え 沸 騰 水 浴 槽 中 で10分. 0.3mlお. よ び10%. 素 ガ スflow下. 加 え て 加 熱 し灰 化 す る.. 心 し. of. 加え水浴. 長580mμ. 準 曲 線 はpalmitic. 熱 し た の ち 再 び 冷 却 し2.5%. Isolation. 素. K2Cr2O7を. 溜 水 を 加 え て25. 対 照 と 比 較 し,波. 量 の. の 試 料 は 蛋 白 定 量 に も ち い た. 表1. 間 加 温,蒸. よ びtristearinを. に て 乾 固,こ. 1時 間 静 置,不. 50℃,窒. 10mlを. 抽 出 液 を 灰 化 ビ ン の な か で50℃,窒. 量 のmethylal‑. 遠 心 し た の ち 最 後 に10倍. 方 法24)に し た が い 上 記Folch. れ に 試 薬(20gr. Fiske‑SabbaRow変. methylal‑methanolを. 溶 解 し薄 層 ク. し ベ ッ ク マ ン 型 分 光 光 度 計(島. 度 計QR‑50型)で. 化 学 的分 析. 脱. 素 ガ ス で 蒸 発 乾固. 溶 解 し た も の). 色 定 量 し た.な (H. D. L.)と. 脂 質 抽 出 を お こな い,. ス フ ラ ス コ に 入 れ,. 槽 中 に て100℃, 2. 低 密 度 リポ プ ロテ イ. 渣 を 高 密度. 3). ガ ス に て 乾 固,こ. 蒸 溜 水 を加. え ガ ラ ス ホ モ ゲ ナ イ ザ ー で 懸 濁 し100,000×g,. v/v)に,て 部 は50℃,窒. 抽 出 液 を25m1メ. 量 を 添 加,. ガ ラ ス ホ モ ゲ ナ イ ザ ー に て 再 ホ モ ジ ナ イ ズ し140, 000×g,. 1, ,一. 量 のchloroform:. ら れ た 脂 質 はchlorformに. Joseph. 1時. 糖 溶 液 約5倍. し た が い20倍. ロマ トグ ラ フ ィー 用 の 実験 試 料 と した.. リ. 日 立 分 離 用 超 遠 心 機 で 低 温 下 に140,000×g, 間 遠 心,そ. さ せ,え. 細 切 した. 量 を 添 加 し,ワー. ザ ー を も ち い て ホ モ ジ ネ ー ト と し,こ. (2:. 一 部は定量 に. 水 癌 腫 瘤 約50grを. 糖 溶 液 約5倍. 方 法23)に. methanol. 腫 瘍 組 織 リポ プ ロ テ イ ン 分 画. こ の 摘 出Ehrlich腹 の も,. 脂質 抽出. Folchの. 腫 瘤 を 摘 出 し本 実 験 に も ち い た. 第3節. 雄. ascorbic. ammonium acid. の 恒 温 槽 中 で2時. 0.3mlを. 間加. molybdate 加えてよ. 間 放 置 す る.つ.
(3) 移植動物癌腫瘍抗原 に関す る研究 い で遠 心 分 離 し,青 色 の上 澄 液 を ベ ック マ ン型分 光 光 度 計 にて,波 長820mμ. 洋 科 学 産 業 株 式 会 社 のPower. Supply for Paper Ele. ctrophoresis,セ ル ロ‑ズ 電 気 泳 動 槽)を. で対 照 と比 較 定 量 した.. なお,標 準 曲 線 はKH2PO4を. 679. も ち いて あ らか じめ. 緩 衝 液 に は1%ア pH. 作 成 した.. 8.6イ. ル ブ ミンを 含 む ベ ロナ ー ル緩 衝 液. オ ン強 度0.1使. 用,ロ 紙 は 東 洋 ロ紙No.. c) 中性脂質定量. 51を 使 用,泳 動 条 件 と して は250V,. 総脂質 量よ りリン脂質 量を減 じた ものを中性脂 質. 時 間 泳 動,泳. a) micro‑Kjeldahl法27)に. した が い 試 料 に 濃 硫 酸. 0.1mlを 加 え灰 化 び ん に て灰 化 し,蛋 白 質 中の 窒 素 をNH4HSO4に. し, NaOHで. 中 和 し て, NH3に. 変. 腫 瘍 リポ プ ロ テ イ ン に よ る 感 作 方 法. 前 記L.. D. L.お. よ びH.. 計 に て,波 長420mｵお. ス(♂). よ び500mμ. で 対 照 と比 較. 定 量 した.な お,標 準 曲線 はNH4HSO4を. もちいて. b) 牛 血 清 ア ル ブ ミ ン の 乾 燥 重 量 を あ らか じ め 測 定 して お い て,こ. れ を生 理 食 塩 水 に 溶 解 しベ ック マ. ン型 分 光 光 度 計 に て,標. 準 曲 線 を 作 成 し,血. 清試料. 5). 薄 層 ク ロマ トグ ラ フィ ー. a). 固 定 相:. Merck製Kieselgel. G. 混 じ20×20×0.05cmの. 45grに. 蒸溜水. 薄 層 板 を 作 成,. 展 開 試 料:前. microsyringeに. 述 のchloroform溶. て 約100μ1を. 位 置 に1cmの. 線 状 にspotし. 互 の 間 隔 は2cmと. c) 展 開 溶 媒:リ. (65:. 1,. 25:. v/v)を. た.. も ち い た.. 4,. v/v)を,中. 性脂質. ethylether:. acetic. 間,後. 者 で は 約30分. 闇展開. 開 終 了 後 の 薄 層 板 を 風 乾 し た の ち, molybdate. に つ き 約3mlあ. 無 菌 的 に 飼 育 した発 育 良 好 なEhrlich腹. (NaCl ・7H2O. 用 意 し,. in ethanol溶. 10. 分 間 加 熱 して 発 色 を お こ な つ た.. 7.18, KCl 0.4, CaCl2・2H2O 0.2, MgSO4 0 .2, NaH2PO4・2H2O 0.141, Glucose 4.5, 1.0,酵. 母 エ キ ス1.0,ラ. 溜 水1000ml). 1.0ml加. 験 管6本. 7.0ml,牛. え て 計10mlと. ク トァ ル ブ ミ ン 血 清2.0ml. たは2×105個. を加 え3×104/m1,. D. L.)お. よ び 高 密 度 リ ポ プ ロ テ イ ン(H. 0.001M. EDTAを. 含 む0. .15M. NaC1に. .. . D. L.)を て45時. 2×. に そ れ ぞ れ1.5mlつ. つ 分 注 し, 2重 ゴ ム. 栓 で 密 栓 して 約15度 傾 斜 をつ け て 電 気 艀 卵 器(堂. 阪. 製 作 所)内. で38℃. 48. 時 間 後3本. の 培 養 試 験 管 を取 出 し管 壁 に附 着 発育 し. 静 置培 養 し, 24時 閥 後3本,. た細 胞 を落 さな い よ う に培 養 液 を 静 か にす て,こ に1.5mlク. リス タル 紫 を 加 え38℃,約30分. れ. 間静置. 後 染 色 さ れ た 細 胞 核 を 顕 微 鏡 下 に核 数 計 算 を お こな 上の操作 は滅菌室. 第7節. 細 胞培養実験. 1) 感 作血 清 グ ロ ブ リ ン 有 す るL.. D. L.お よ びH. D. L.. を 前 記 の 方 法 に て 腹 腔 内 に 注 入 したdd‑系 料 の 低 密 度 リポ プ ロ テ イ ン(L. ,試 料. し,こ れ に 上 記JTC‑11細. と な るよ う に し充 分 撹 拝 し細 胞 培 養 用 試. 蛋 白 量1.0mgを. e) 電 気 泳 動 ロ 紙 電 気 泳 動:試. 地. に お い て無 菌 的 に お こ な つ た.. 液 を 薄 層. て 一 様 に 噴 霧 し, 120℃,. 水 癌細 胞. 1系 列 に つ きYLE培. い平 均値 を とつ て 効 果 を 判定.以. 槽 中 で 室 温 に て 飽 和 し た.. ammonium. 細 胞培養方法. 104/ml個. 使用 し展 開に 先だ ち 薄. 層 板 は 前 者 で は 約1.5時. 発 色:展. 第6節. 胞3×105ま. ン 脂 質 の 分 離 に はchloroform:. water. 40:. 解 実験試料を. し相 互 の 混 入 を 防 い だ.. の 分 離 に はpetroleumether:. 板1枚. を腹腔 内. こな つ た.. 5.0,蒸. 薄 層 板 下 縁 か ら2.5. ま た 標 準 物 質 と して はcholesterolを. 5%. マウ. 1週 間 後 約 半 量 を 皮下 に 追 加 感 作 を お こ な. NaHCO3. 110. ℃, 30分 間 加 熱 活 性 化 し た の ち 使 用 し た.. d). で 蛋 白量 を 測 定 しdd‑系. 10匹 に それ ぞ れ 蛋 白 量1,0mg/匹. に注 入,. 株(JTC‑11)を. の 蛋 白 定 量 に も ち い た.. acid (60:. ン酸. つ た.同 時 に 感 染 を防 ぐ 目的 で 抗 生 物 質 の 投 与 を お. 作 成 した.. methanol:. D. L.を0,01Mリ. 緩 衝 液 を加 え ガ ラ ス ホ モゲ ナ イ ザ ー で ホモ ジ ネ ー ト しmicro=Kjeldahl法. spot相. 15分. 第5節. え, Nessler試 薬 に て 発 色 しベ ック マ ン 型 分 光 光 度. cmの. 約7. 用 した28)29)30)31).. 4) 蛋 白質 定 量. b). 20mAで. 動 後 ロ紙 は 恒 温槽 中 に て110℃,. 間 乾 燥 させ た.な お,対 照 に は正 常 マ ウス血 清 を 使. 量とした.. 90m1を. 使用 して,. 間透. (♂)10匹 よ り25日 後 にchloroform麻. マ ウス. 酔 下 に 開 胸,. 心 臓 穿 刺 に て 採 血 し遠 心 分 離 に よ り血 清 を採 集, ioe box内 で50%飽. 和 硫 酸 ア ンtニ ウム(硫 安)0℃. で. 析 を した の ちガ ラス ホ モゲ ナ イ ザ ー で ホ モ ジ ネ ー ト. 沈 澱 させ32)遠心 分 離 に て グ ロ ブ リ ン沈 澱 を 作 り,こ. しSudan. れ に0,01Mリ. Black. Bに. よ り 泳 動 前 染 色 を ほ ど こ し,. 水 平 泳 動 法 で あ るKohn改. 良 型 電 気 泳 動 装 置(東. ン酸 緩 衝液(pH. 添 加 し再 び 溶 解 さ せ た.. 7.2)を. 約2.0ml.
(4) 680. 只. Sephadex. G‑25を0.01Mリ. ン酸 緩 衝 液(pH. で充 分 膨 潤 さ せ た の ち1×30cmの つ め0.01Mリ. 友. 7.2)で. 充 分 洗 い,. 上 記 の 溶 解 した グ ロブ リンを 脱 塩 の 目的 で 同 緩 衝 液 で 溶 出, Toyo Uvicon‑540 業 株 式 会 社)を. Optical unit(東 洋 科 学 産. も ちい 波 長280mμ. 雄. 7.2). カ ラ ム に均 一 に. ン酸 緩 衝 液(pH. 康. で そ の ピー ク を. 集 め 精 製 グ ロ ブ リン と して0℃. に て 保 存,ま. た同. 様 に飼 育 した 正 常 無 感 作 のdd‑系. マ ウ ス(♂)血 清 も. 同 時 に 同 様 の 処 理 を 施 行 して 対 照 と した.. 試 料L.. 蛋 白 量 を 測 定, を 有 す るL,. な る よ うに0.01Mリ. 液 で希 釈 して,あ. らか じめ 滅 菌 処 理 を ほ ど こ した. ン酸緩衝. milipore‑filterに て 滅 菌 し,こ の 試 料1.0mlをJTC‑ 11株. 化癌 細 胞3×105個/10mlに. 加 え, YLE培. で それ ぞ れ 同 一 条 件 の も とで, 38℃,静. 0.5mg,. を 分 離,. 0℃. したが つ て 0,25mgの. 置培 養 し24. 単位. 25日 後 に 採 血,血. 清. 硫 安 沈 澱 法 で グ ロ プ リ ン を 分 離,脱 希 釈,同. 塩,. じ く1.0mlをJTC‑. 11細 胞 に 加 え 同 一 条 件 下 に 細 胞 培 養 し て 効 果 の 判 定 を し た.な. お 対 照 に は 同 様 に 処 理 し た 正 常dd‑系. ウ ス(♂)血. 清 グ ロ ブ リ ン を も ち い た.. 5). 感 作 α,β,γ‑グ. 蛋 白 量1.0mgを. ロ ブ リ ン,脾,リ. 1.0mg/匹)のdd‑系. ンパ節. 白量. マ ウ ス(♂)に 腹 腔 内注 入 感 作. を お こな い, 25日 後 に 採 血,血 清 を 分 離,0℃. 脾(5匹. 分)お. マ. 有 す るL. D. L.を30匹(蛋. 沈 澱 法 で グ ロ ブ リ ンを 分 離,脱 塩.ま 地. 蛋白量. マ ウ ス(♂)に10匹. 同 緩 衝 液 で5.0mg/mlに. 記 標 準 曲線 と比 較対 照 し蛋 白量 を 測 定,各 試. 料 を5.0mg/mlに. 1.0mg,. D. L.をdd‑系. で 腹 腔 内 注 入 感 作 を お こ な い,. こ の グ ロブ リンを ベ ッ クマ ン型 分 光 光 度 計 にて 測 定,前. D. L.をmicro‑Kjeldahl法27)に. 硫安. た 同 マ ウス の. よ び リンパ 節(10匹 分)を 摘 出,ガ ラ. ス お よ び テ フ ロ ンホ モ ゲ ナ イザ ー で ホ モ ジ ネ.一トし,. 時 間, 48時 間 後 に 効果 を ク リス タル 紫 に て 染 色,核. 100,000×gで. 数 計 算 法 で 判 定 した.な お,対 照 試 料 と して は 無 感. 硫 安 沈 澱 法 で グ ロ ブ リ ン様 物 質 を 分 離,脱 塩 した.. カ ラ ム ク ロマ トグ ラ フ イー を お こな い. も ち い た.. 1.0mgの. 蛋 白 量 を 有 す るL.. て 同 様 にdd‑系. D. L.お. よ びH.. D.. マ ウ ス(♂)を 感 作 し, 10日 後. に 脾 お よ び リンパ 節(腋 窩 お よ び頸 部)を 摘 出,脾 は 約5匹 分,リ. ンパ 節 は10匹 分 を0.01Mリ. 7.2)で. イ ザ ー にて ホ モ ジネ ー トし, 40P型. 上 清 に0℃. ン酸 緩. ガ ラ ス お よ び テ フ ロ ンホ モ ゲ ナ. 遠 心 機 で 低 温下 に100,000×g, で50%飽. 日立 分 離 用 超 1時 間 遠 心,そ. の. 和 硫 酸 ア ンモ ニ ウ ムを 加 え硫. 安 沈 澱 を 作 り,前 記 と同 様 の 処 理 お よ び 脱 塩 を お こ な つ た.こ の 試 料 を0.01Mリ 量5.0mg/mlに. 希 釈,同. て. α,β,γ‑グ. ロ ブ リ ン の 分 画 を し た33)34).. 2) 感 作脾 お よ び リ ンパ 節. 衝 液(pH. の上 清 よ り同 様 に0℃. こ の 血 清 グ ロ ブ リ ン をDEAE‑SepbadexA‑50に. 作 正 常 グ ロ ブ リン お よ び リン酸 緩 衝 液 の み の もの を. L.に. 遠 心 分 離,そ. ン酸 緩 衝 液 にて 蛋 白. じ く1.0mlをJTC‑11細. a) dex. DEAE‑Sephadexの A‑50を. の ち,攪. 約800mlの. の 沈 澱 部 分 を0.5N い で ア ル カ リが な くな る. ぎ に0.5N. HCl. 1000mlで. 洗. じ く酸 が な く な る ま で 蒸 溜 水 で 洗 つ た の ち. 7.2に b). 間 膨 脹 さぜ た. 洗 い,つ. ま で 蒸 溜 水 で 洗 い,つ. pH. 蒸 溜 水 で30分. く り 返 す.こ. 1000mlで. い,同. 10grのDEAE‑Sepha. 伴 し30分 静 置 後 に 浮 い た 微 細 粒 子 を 除 去 し,. こ れ を2〜3回 NaOH. 調 製:. 酸 ま た は ア ル カ リ で 調 製 し た35).. 溶 出 装 置:こ. の よ う に し て 作 成 し たDEAE‑Se. phadexA‑50のsuspensionを1.5×30cmの. カ ラム に. 層 が 乱 れ な い よ う に つ め0.01Mリ 7.2). し た.な お,対 照 試 料 に は 同 様 に処 理 した 正 常 脾 お. グ ロ ブ リ ン(硫. 安 沈 澱 を3.0mlの0.01Mリ. よ び 同緩 衝 液 を もち い た.. 緩 衝 液 に 溶 解,. 48時 間 同 緩 衝 液 に て 透 析 を お こ な つ. た も の)を. 3) 感 作 後 の 日数 同 様 に蛋 白量1.0mgを. 有 す るL. D. L.に. てdd‑. 系 マ ウ ス(♂)を10匹 単 位 で 感 作 し, 10日, 15日, 20 日, 25日, 30日 後 に そ れ ぞ れ 採 血,血 硫 安 沈 澱 法 で グ ロ ブ リ ンを分 離,脱 各 試 料 を0.01Mリ 釈,同. 清 を 分 離, 0℃ 塩0℃. ン酸 緩 衝 液 で5.0mg/mlに. じ く1.0mlをJTC‑11細. 保 存. 希. 胞 に加 え て 同 一 条 件. 下 に細 胞 培 養 して 効 果 の判 定 を し た.な お,対 照 に は 正 常dd‑系 4). 感作 量. 1000mlで. ン酸 緩 衝 液(pH. 胞 に加 え て 同 一 条 件 下 に 細 胞 培 養 して 効 果 の 判 定 を. マ ウ ス(♂)血 清 グ ロ ブ リ ンを 用 い た.. 洗 つ て 安 定 さ せ て お き,こ. れ に血 清 ン酸. こ の カ ラ ム の表 面 が 乱 れ な い よ うに注 意. 深 く ピ ペ ッ トで 吸 着 さ せ た. c). Linear. Gradient. 吸 着 さ せToyo. Fraction. 科 学 産 業 株 式 会 社)お uni七 を 使 用 し て, を も つ て10ml分 (mixing れ500ml三. Elutionに. よ る 溶 出:試. Collector. S F‑200. よ びToyo. 0,01Mリ. Uvicon‑540 ン 酸 緩 衝 液(PH. 画 で 溶 出 し0.01M. chamber),. 0.3M. NaCl. 角 コ ル ベ ン に い れ,コ. ム 管 に て 連 結 し 水 平 に 保 ち,ス. NaCl 400mlを. 料を. A(東. 洋. optical 7.2) 400ml それ ぞ. ル ベ ンの底 を ゴ. タ ー ラ ー に よ りマ グ.
(5) 移植動物癌腫瘍抗原 に関す る研究 ネ ッ ト攪 梓 し,リ 出 し た の ち,. ン 酸 緩 衝 液 に よ る 第1ピ. linear gradientに. ー ク を溶. て 溶 出 を お こ な つ た.. 同 様 に処 理 した 正 常dd‑系. 第3章 Apparatus. of. Linear. Gradient. 第1節 1) 定. Elution. マ ウ ス(♂)血 清 グ ロ ブ リ. ンを も ちい た.. (図1). 図1. 681. 実 験. 成. 化学的分析 量. Ehrlich腹. 水 癌 腫 瘤 よ り超 遠 心 法 にて 分 離 した 腫. 瘍 低 密 度 リ ポ プ ロ テ イ ン(L. リ ポ プ ロ テ イ ン(H. 法 で 脱 脂,蛋. D. L.)お. 白 質 部 分 の 窒 素 量 をmicro‑Kjeldahl法. H. D. L.. 白 量 はL.. 7.25mg/ml,総. Bragdon法. D. L.. 出液よ. 法 に し た が つ て 定 量,. H. D. L.. 0.65mg/ml.中. H. D. L.. L. D. L.. 性脂質量 は総. 脂 質 量 よ り リ ン 脂 質 量 を 減 じ て 算 出, mg/ml,. H.. 11.95mg/ml,. ン 脂 質 量 はFolch抽. りFiske‑SabbaRow変 4.91mg/ml,. 出液. 出 液 よ りJoseph. に し た が っ て 定 量, L. D. L. 3.23mg/ml.リ. 2.35mg. 脂 質 量 はFolch抽. お よ びmethylal‑methanol抽. H. D. L.. よび 高密度. D. L.)をmethylal‑methanol. に し た が つ て 定 量 し た.蛋 /ml,. 績. 2.58mg/mlで. L. D. L.. あ つ た.実. ね る た め 超 遠 心 法 で 数 回 のL.. D. L.お. を 分 離 し定 量 を お こ な つ た.多. 7.04. 験 を重. よ びH.. D. L.. 少 の 誤 差 は み られ た. が 全 般 的 に は 一 致 し た 傾 向 を み た.(表2). 表2. 分. 析. 値. L. D. L. mg/ml. H. D. L. mg/ml d). 電 気 泳 動:溶. 電 気 泳 動 装 置,ベ. 出 し た 各 ピ ー ク をKohn改 ロ ナ ー ル 緩 衝 液(pH. ロ ー ズ ァ セ テ ー ト膜 に はSeparax(富 ム 株 式 会 社,東 ml/cm,泳. 京)を. 使 用 し ,塗. 動 条 件 は 室 温 に て0. 良 型. 8.6),セ. ル. 士 写 真 フ イル 付 量 は 約0.008. .8mA/cm,染. 色は ニ. グ ロ シ ン染 色 液36)を 使 用 して 電 気 泳 動 を お こ な つ た . 以 上 の ご と く分 画 し た,感. 作. α,β,γ‑グ. ロブ リ. ン を ビ ス キ ン チ ュ ー ブ で 吸 引 濃 縮 , 0,01Mリ 緩 衝 液(pH. 7.2)で. ン酸. 透 析 した の ち 蛋 白量 を 測 定 し. て そ れ ぞ れ5.0mg/mlと. し て ,そ. の1.0mlをJTC‑. 11細 胞 に 加 え て 細 胞 培 養 を お こ な つ た .同. 時に前記. の ご と く処 理 し た 脾 お よ び リ ン パ 節 グ ロ ブ リ ン を 蛋 白 量5.0mg/mlに. 希 釈,そ. の1.0mlをJTC‑11細. 胞 に 加 え て 細 胞 培 養 を お こ な つ た .な. お,対. 2). 中 性 脂 質 で はL. triglycerideの お よ びH.. D. L.はcholesterolに. 含 有 量 が 少 な い.リ. D. L.と. 表3,. 比 較 して. ン 脂 質 はL.. も にcephalinの. が 注 目 さ れ る.Densitometryの. 3) 照 には. 薄 層 ク ロ マ トグ ラ フ ィ ー. D. L. 含有の 多 い の 結 果 は 図2お. よび. 4に 示 す ご と くで あ る. ロ紙 電 気 泳 動. L. D. L.お. よ びH.. D. L.を. ア ル ブ ミンを 含 む べ.
(6) 682. 只. 図2. Thin. 図3. Layer. Paper. 友. Chromatography. Electrophoresis. of. of. 康. Mice. Mice. 雄. Ehrlich. Ehrlich. Ascites. Aseites. Tumor. Tumor. Lipoproteins. Lipoprotein.
(7) 移植 動物 癌腫瘍抗原 に関す る研究. 表3. Denaitometry Ehrlieh. 表4. of Ascites. Densitometry Ehrlich. of Ascites. ロナ ール 緩 衝 液(pH. Phospholipids Tumor. Mice. 図4. Amti‑Tumor. Activity. of. Immunoglobbulin. Lipogrohein. Neutrallipids Tumor. 8.6)で. in. 683. in. Mice. Lipoprotein. お こな つ た . L. D. L.. で は少 量 の不 純 物 を 認 め る が,対 照 の 血 清 β‑リ ポ プ ロ テ イ ンの位 置 に 一 致 して 一 本 の バ ン ドが み られ. 質 分 画 を 添 加 し,同 様 に細 胞 培 養 を お こな い24時 間. る. H. D. L.で. 後, 48時 間 後 に 核 数 計 算 で 効 果 を 判 定 した .対 照 で. は 分 離 が 不 良 で あ つ た が,わ ず か に. α‑リポ プ ロテ イ ンの位 置 に一 致 す るバ ン ドを み とめ. は3×104個/mlに. た.(図3). ml, 48時 間 後25.6×104個/mlで. 第2節. 細 胞培養実験. た い し, 24時 間 後11.3×104個/ 腫瘍細胞 の増殖 は. 良 好 で あ る.こ れ に た い し, L. D. L.で. 感 作 した 脾. 1) 感 作血 清 グ ロブ リンに よ る増 殖 抑 制. お よ び リンパ 節 グ ロ ブ リン 様 物 質 で は, 24時 間 後. 培 養24時 間後,. 4.5×104個/ml,. JTC‑11細. 6本 の うち3本 の 培 養 試 験 管 内 の. 48時 間 後12 .2×104個/mlで. 腫瘍細. 胞 を 各 々数 視 野 につ いて 核 数 計 算 を お こ. 胞 の 増 殖 を抑 制 して い る が, H. D. L.で 感 作 した も. な い,そ の平 均 値 を もつ て 判 定, 48時 間 後 の も の に. の で は,正 常 脾 お よ び リ ンパ 節 グ ロ ブ リ ン様 物質 と. つ いて も同様 に核 数 計 算 を お こなつ た .対 照 で は3. ほ とん ど同 様 で あ り,腫 瘍 細 胞 増 殖 抑 制 効 果 の ほ と. ×104個/mlに. ん どな い こ と を示 して い る.(図5). た い し24時 間 後10. 48時 間 後29.1×104個/mlで. .5×104個/ml,. 腫 瘍 細 胞 の増 殖 が 良 好. な ことが 観察 さ れ る.こ れ に 反 し, L. D. L.感 ロブ リン添加 群 で は24時 間後3 .8×104個/ml, 間後11.3×104個/mlで て い る. H. D. L.感 19.2×104個/mlで. 作グ 48時. 腫瘍 細 胞 の 増 殖 が 抑制 され 作 グ ロブ リ ンで は, 48時 間 後. 正 常 血 清 グ ロブ リン と ほ と ん ど. 同 じ増 殖 状 態 で あ り,腫 瘍 細 胞 増 殖 抑 制 効 果 の ほ と ん どない こ とが わ か る.(図4) 2) 感 作脾 お よ び リンパ 節 に よ る 増殖 抑 制 感作 後10日 目の 脾 お よ び リンパ 節 グ ロ ブ リン様 物. 3) 感 作 後 日数 の増 殖 抑 制 との 関 係 腫 瘍 細 胞 増 殖 抑 制 を 示 すL. 作後10日,. 15日, 20日,. D. L.で. 感 作 し,感. 25日, 30日 後 の 血 清 グ ロブ. リ ンに つ い て,細 胞 培 養 を お こ な い24時 間 後, 48時 間 後 に 核 数 計 算 で 効果 を 判 定 した.対 104個/mlに. 照 で は3×. たい し, 24時 後8.1×104個/ml,. 後20.2×104個/mlで. 48時 間. 腫 瘍 細 胞 の 増 殖 は良 好 で あ る.. これ に た い し,感 作 後10日 目の 血 清 グ ロブ リンで は, 48時 間 後17.2×104個/ml, /mlで. 15日 目で は18.0×104個. ほ と ん ど増 殖 抑 制 力 を 示 さな い が, 20日 目で.
(8) 684. 只. 図5. Anti‑Tumor and. Spleens. Activity of. Lymphnodes. (Globulin). 友. 康. 雄. は14.5×104個/mlで ま た,. 25日. 増 殖 抑 制 力 が 出 現 し は じ め る.. 目 で は8.3×104個/mlで. 力 が 出 現,. 強い 増殖抑制. 30日 目 で は11.2×104個/mlで. 力 は 減 退 し て い る.す 感 作 後25日. な わ ち,. 増 殖 抑制. L. D. L.感. 作 群 で は,. 目頃 に 最 も強 い腫 瘍 細 胞 増 殖 抑 制 力 の現. わ れ る ご と を 示 し て い る.(図6) 4). 感 作 蛋 白量 の 増 殖 抑 制 能 に お よ ぼ す 影響. L. D. L.の 0.25mgの. 蛋 白 量 を 測 定 し,. 蛋 白 量 を 有 す る3群. こ な い,感. 作 後25日. に わ け て,感. 照 で は2×104個/mlに. 24時 間 後4.7×104個/ml,. 48時. た. 間 後12.0×. 瘍 細 胞 の 増 殖 は や や 不 良 で は あ る が,. 正 常 マ ウ ス 血 清 グ ロ ブ リ ン の48時 /mlに. 作をお. 48時 間 後 に つ き,同 様 に 核 数 計. 算 で 効 果 を 判 定 し た.対. 104個/mlで,腫. 0.5mg,. 目の 血 清 グ ロ ブ リン につ いて 細. 胞 培 養 し, 24時 間 後,. い し,. 1,0mg,. た い し,. mgで. は,. /ml,. 0.25mgで. L. D. L.感. 間 後10.1×104個. 作 血 清 グ ロ ブ リ ン の1.0. 6.5×104個/ml,. 0.5mgで. は,. は8.1×104個/mlで. の 蛋 白 量1.0mg程. 7.8×104個. あ り, L. D. L.. 度 の も の が もつ と も 強 い 腫 瘍 細. 胞 増 殖 抑 制 力 を 示 し て い る.(図7). 図7. 図6. Immunoglobulin. Activity. Antigenicity. of. L. D.. L.. after. Immunization. 5). 血 清 グ ロ ブ リ ンの 分 離. 感 作 血 清 グ ロ ブ リ ン のDEAE‑Sephadex も ち いlinear. gradient法. に よ る カ ラ ム ク ロ マ トグ ラ. フ イ ー で の 溶 出 曲 線 は(図8)の の ピ ー ク に 分 離,こ. A‑50を. れを順次. ご く と 大 き な3つ γ,β,α‑グ. ロブ リン. と し,セ. ル ロ ー ズ ァ セ テ ー ト膜 を も ち い た 電 気 泳 動. で は,グ. ロ ブ リ ン は 良 く分 離 さ れ て い る こ と を 示 し. て い る..
(9) 移植動物癌腫瘍抗原 に関す る研究 図8. Fractionation. 6) α,β,γ‑グ ロ ブ リ ン. of. Immunized. Globulin. 脾 お よ び リンパ 節 グ ロ. ブ リ ン様 物 質 に よ る細 胞 培 養 テ ス ト. with. 685. β‑Lipoprotein. ×104個/mlで. on. DEAF‑Sephadex. A‑50. 腫 瘍 細 胞 の 増 殖 は 良 好 で あ る .ま. 正 常 マ ウ ス 血 清 グ ロ ブ リ ン で は,. この 感 作 後25日 目の α,β,γ‑グ ロ ブ リン,脾 お よ び リンパ 節 グ ロブ リン様 物 質 に つ い て 細 胞 培 養 し,. 104個/ml,α‑グ. 48時. た,. 間 後22.0×. ロ ブ リ ン で は19.3×104個/ml,β‑. グ ロ ブ リ ン で は17.5×104個/ml,γ‑グ. ロ ブ リ ンで. 24時 間 後, 48時 間 後 に につ き,同 様 に 核 数 計 算 で 効. は13.0×104個/ml,脾. 果 の判 定 を お こな つ た.対 照 で は, 3×104個/mlに. 物 質 で は15.0×100個/mlで. たい し, 24時 間後9.7×104個/ml,. が も つ と も 強 い 腫 瘍 細 胞 増 殖 抑 制 力 を 示 し て い る.. 図9. Anti‑Tumor (a,β,γ,. Activity and. of. Lymphnodes,. 48時 間 後25.0 Immunoglobulin. お よ び リ ンパ 節 グ ロ ブ リ ン様 あ り,γ‑グ. ロブ リ ン. (図9). Spleens). 第4章. 総 括 お よび 考 按. 移 植 免疫 の 立 場 よ り観 察 さ れ て きた 癌 の 免 疫 現 象 は,最 近 の 腫 瘍 免 疫 研 究 の 進 歩 に よ り次 第 に 明確 に さ れ つ つ あ る.以 前 よ り異 種 動 物 を癌 組 織 で 感 作 し て 腫 瘍 特 異 抗 体 を 作 る試 み が な され,腫 瘍 特 異 抗 原 の 存 在 は 明 らか に さ れて い るが, Gross5), Goldfeder6), Foley7),武. 田12),相 沢13), Klein17),白 淵18), Haddow. 20),ら の 研 究 に よ り,腫 瘍 の 移 植 の 成 否 も単 にgene ticsの 差 異 に よ つて の み 説 明 され る も の で は な く, こ の 間 に 正 常 組 織 と は異 る腫 瘍 細 胞 に特 異 な抗 原 性 が な ん らか の程 度 に関 与 して い る と考 え られ るよ う に な つ た.腫 瘍 を 免 疫 学 的 に取 扱 う場 合 に は 抗 原 の 存 在 が 基 本 的 な 問題 とな つ て く る. 本 実 験 で はEhrlich腹. 水癌組織 のなかの 不溶性 リ. ポ プ ロ テ イ ンの 抗 原 性 お よ び 感 作 血 清 の 抗 腫 瘍 性 に つ い て 免 疫 化 学 的 研 究 を お こな つ た.リ ポ プ ロテ イ ンは 生 理 的 に は(1)細. 胞 膜,原. 形 質 膜,核. 膜,ミ. トコ ン ドリ ァ の 膜 な ど の お もな 要 素 で あ り37)38), ま た 膜 の透 過 性 に も影 響 を 及 ぼ して い る39). (2)血 液 の な か の脂 質 の95%ま. で が 蛋 白質 と結 合 した 状 態.
(10) 686. 只. 友. 康. 雄. に あ る とい わ れ て い るが,不 溶 性 の 脂質 が リポ プ ロ'. で あ ろ う と し, Toolam48)も 腫 瘍 の 抗 原 性 に関 して. テ イ ン とな る こ とに よ つ て 水 溶 性 とな り,血 漿 と と. は腫 瘍 細胞 の 不 溶 性 な部 分,細 胞 膜 に 注 目 して い る.. もに 運 ば れ,体. 内 の 種 々の 組 織 内 に 移 行 され る39),. 抗 原 性 の 証 明 に は種 々 の 方 法 が あ るが,こ の よ うな. ビ タ ミ ンA,ホ. ル モ ン性 ス テ ロ イ ドも この よ うな形. 不 溶 性 リポ プ ロ テ イ ンの 抗 原 性 お よ び これ に よ り産 生 された抗腫瘍性物質 を知 る た め に 本 実 験 で は. で 体 内 を移 動 す る と考 え られ て い る. (3)Thrombo‑ plastic proteinは 血 液 凝 固 を 促 進 す る酵 素 で,ホ. ス. フ ァタ ー ゼ 作 用 を も有 して い るな どの 酵 素 作用 を も つ て い る40). (4)そ. の他,種. 々の 作 用 を もつて い る. JTC‑11細. 胞 を も ちい て 細 胞 培 養 実 験 を お こな い,. つ ぎ の よ うな 結 果 を え た. L. D. Lお. よ びH.. D. L.で 感 作 したdd‑系. と い わ れ て い る.ま た免 疫 的 に は リポ タ ンパ クそ の. (♂)血 清 グ ロブ リンで は,L.. も の に た い して 特 殊 の抗 体 が 産 生 され,沈. 降反 応 に. に は著 明 な 増 殖 抑 制 力 を み とめ るが, H. D. L.で 感. よ つ て ほ か の 血 漿 タ ンパ ク と ちが つ た抗 原 性 を有 す. 作 した もの で は 抑 制 力 を み とめ な い.こ れ は前 述 の. る41).本 実 験 で はEhrlich腹. 水癌背部皮下移植腫 瘤. D. L.で. マ ウス. 感 作 した もの. リ ン脂 質 の 問 題 と関 連 して非 常 に興 味 あ る点 で あ る.. を 超 遠 心 法 に よ り,分 離 した低 密 度 組 織 リポ タ ンパ. ま た, L. D. L.お. ク(L. D. L.)お. び リ ンパ 節 グ ロ ブ リ ン様 物質 に つ い て も同 様 の結 果. D. L.)に. よ び高 密 度 組 織 リポ タ ンパ ク(H.. つ い て の 化学 的 分 析 で は,蛋. に す れ ば,蛋 白 質:総. 脂 質 はL. D. L.で. 5.6, H. D. L.で. は,. 1:0.45,リ. 質 はL. D. Lで. は,. 1=1.6,. 3.9と. 白量 を 基 準 は,. 1=. は,. 1:. な り, L. D. L.で は リン脂 質 の 含 有 量 が 多 い.. ま た ロ紙 電 気 泳 動 で は, L. D. L.ま. をみ とめ る. L. D. L.感. 作 後10日, 15日, 20日, 25日,. 30日 目の 感 作 血 清 グ ロプ リンに つ い て 同 様 に 同 蛋 白. ン脂 質:中 性 脂 H. D. L.で. よ びH. D. L.に て 感 作 した 脾 お よ. 血 清 β‑リ ポ プ. 量,同 一 条 件 下 に細 胞 培 養 を お こな つ た 結 果, 25日 目 の血 清 グ ロブ リン に もつ と も強 い増 殖 抑 制 力 を示 す こ と を み とめ, 30日 以 後 は減 少 して い る.す な わ ち, こ の ころ に 抗 腫 瘍 性物 質 産 生 の ピー ク が あ る こと. ロ テ イ ンの 泳 動 に一 致 して お り,電 気 泳 動 的 に も低. を示 して い る.こ の こ と はWiesler49)ら. 密 度 リポ プ ロテ イ ンで あ る こ とを 示 して い る.. 癌 細 胞 を 家 兎 へ 静 注,筋. 3)ま. (図. た 上 記 の ご と く化 学 的 組 成 の 面 で も蛋 白,脂. 膜 成 分 の な か に リン脂 質,コ. レ ス テ ロ ー ル な どの. 注,腹 腔 内,皮 下,皮 内へ. 注 入 して 感 作 した の ち4週 報 告,谷. 質 の 割合 も血 清 リポ プ ロテ イ ン と類 似 して い る.. のEhrlich. 目が 抗 体 価 が 高 い とい う. 垣50)の免 疫 マ ウス抗 血 清 を 皮 下 に 投 与 し,. 標 的細 胞 と して 武 田 肉腫 細 胞 を 腹 腔 内移 植 後 経 時 的. 脂 質 が存 在 し,リ ポ プ ロ テ イ ンを 形 成 して い るが,. に腹 水 を 検 鏡 して 腫 瘍 発 生 の 有 無 を しらべ て 移入 血. 脂 質,な. 清 の 障 害 性 を 判 定 し,そ の 結 果,. か で も リン脂 質 を 除 去 す る と膜 成 分 と して. 200万 個 移 植 で は. の い ろ い ろ の 機 能 が 消 失 す る とい わ れ て お り42),ま. 免疫 後15〜27日 の抗 血 清 で は 細 胞 障 害 を 示 す が,免. たmicrosomeの. 疫 後36〜51日 の 抗 血 清 は 細 胞 障 害 を 示 さな かつ た と. 膜 の 透 過 性 は一 部 そ の 構 成 成 分 で. あ る リ ン脂 質 に よ り調 節 され43)44),担 癌 ラ ッテ の 脾. い う報 告 な ど,本 実 験 の 成 績 と ほ ぼ一 致 して い る.. に お け る リン脂 質 が 正 常 に比 較 して 著 明 に増 加 して. 脾 お よ び リ ンパ 節 グ ロブ リン様 物 質 に お いて は,実. い る45)など の リン脂 質 につ い て の 報 告 が あ る ご と く,. 験 条 件 上 感 作 後10日 と25日 の も ので は,細 胞 数 お よ. リポ プ ロ テ イ ンの 抗 原 性 に つ い て もL. D. LとH.. び培 養 条 件 に多 少 の 相 異 が あ る が,対 照 と比較 して. D. L.と. の 間 に 相異 が み とめ られ るの は,こ. の リン. 脂 質 に 関 与 す る と こ ろが 大 き い と考 え られ,は だ 興 味 あ る点 で あ る.中 性 脂 質 に つ い て は,. なは L. D.. 検 討 す れ ば,感 作 後10日 頃 に抗 腫 瘍 性 物質 産 生 能 の 高 い こ とを 示 して い る. 抗 原 と して の 量 的 な 問 題 に つ いて 検 討 して み る と,. L.で はtriglycerideの 含 有 量 が少 な い が,抗 原 性 に. 抗 原 は そ の 相対 応 す る抗 血 清(抗 体)を. つ い て リン脂 質 ほ どの 関 連 性 は な い よ う で あ る.. 生 せ しめ る適 切 な 量 を も ち い る こ とが の ぞ ま しいが,. 本 実 験 の ご と く,細 胞 障 害 性 を 示 標 と す る研 究 で は, Wieter/MK系. ラ ッ ト可 移 植 性MG肉. 腫 のlip. よ り多 く産. しか し,こ れ は 抗 原 性 の 強 さ お よ び 抗 原 の 種 類 によ りそ れ ぞ れ 異 な り,そ の 適 量 を定 め る こ と は出来 な. upolysaceharide抽 出 物 よ り作 成 した 家 兎 免 疫 血 清 が,. い が,カ. 組 織 培 養 され た こ の 腫 瘍 に 特 異 的 にcytotoxicで. 疫 す る場 合,そ の 抗 原 量 は分 子 量15万 以 上 の もの で. る と い う 松 本 の 報 告 が あ り46),ま はHeLa細. あ. たBjorklund47). 胞 に 特 異 的 な 抗 原 は リポ プ ロ テ イ ン に. 関 係 の あ る お そ ら くplasma. membraneの. 一構成分. は5〜10mg,. リ明礬 沈 澱 法51)では,家 兎 を蛋 白抗 原 で免. 15万 以 下 の もの で は20〜60mgを. 免 疫 抗 原 量 と して い る.ま た,多. 基準. くの 研 究 者 は腫瘍. 細 胞 そ の もの を 免 疫 抗 原 と して 使 用 して い る.本 実.
(11) 移植動物癌腫瘍抗原 に関す る研究 験 では,感 作 量 を定 め る た め 蛋 白量 を 基 準.にと り, L. D. L.の. 蛋 白量 を1.0mg,. 0.5mg,. 0.25mgと. 倍. 687. 重 要 性 を 認 め て い る. 脾 お よ び リ ンパ 節 グ ロブ リン様 物 質 に つ い て は,. 数希 釈 を お こな つ て 感 作 し,そ の 効 果 を 細 胞 培 養 で. 細 胞 性 免 疫 を 成 立 させ る た め に は,"生. 判定 し,蛋 白量1.0mgのL.. 抗 原 と す る こ とが の ぞ ま しい と され て い るが54)55),. D. Lに. もつ と も強 い. 抗腫 瘍 性 を 示 す こ とを み と め た. 1.0mg以. 上 の も. の で は,マ ウ ス は餌 摂 取 が わ る くな り,る い そ うの. 本 実 験 に お い て, L. D. L.感. き た細 胞"を. 作 に よ りあ る程 度 の抗. 腫 瘍 性 を示 した こ と は興 味 あ る点 で あ る.. た め死 亡 す る数 が 多 くな り,実 験 に 使 用 す る こ と が. 第5章. 出来 な かつ た.. 結. 語. 感 作血 清 グ ロブ リン(免 疫 グ ロブ リン)に つ いて. Ehrlich腹 水 癌 腫 瘍 よ りの 不 溶 性 脂 蛋 白(組 織 低. は,抗 体 活 性 を もつ グ ロ ブ リ ン とい う程 度 の 意 味 に. 密 度 リポ プ ロテ イ ン)を 抗 原 と しdd‑系 マ ウ ス(♂). もち い られ て い た が,免 疫 成 立 機 序 の 追 求,抗 体 産. を 実 験 材 料 と して,そ. 生機 構 の 究 明,免 疫 グ ロ ブ リ ンの 化学 的 解 析 な ど の. に 細 胞 培 養 実 験 で 抗 腫 瘍 性 を追 求 し,そ の 抗 原 性 に. 免疫 化 学,血 清学 な どの 進 歩 に よ り,抗 体 活 性 を も. つ いて 検 討 した .. つ グ ロ ブ リン に, 7Sγ‑グ ロ ブ リン, 19Sγ‑グ ロ ブ リ. の感 作血 清 グ ロ ブ リンを 中心. 1) 抗 原 は電 気 泳 動 的 に血 清 β‑リポ プ ロテ イ ン と. ンな ど数 種 の グ ロブ リンが あ る こと が証 明 され,ま. 同 様 の 易 動 度 を示 し,ま た 化 学 的 組 成 も類 似 し比 較. た免 疫 グ ロブ リンは,分 子 量 の大 き いH鎖. 的 単 一 化 して い る.. 量 の小 さいL鎖. と分 子. とか ら成 り立 つ な どの 物理 的 構 造. が 明 らか に され,γ‑グ ロ ブ リンが 免 疫 グ ロブ リン と 同 じ意 味 に も ちい られ るよ うに な つ た よ うに,本 実 験 にお い て も, L. D. L.感 をDFAE‑Sephadex. A‑50に. 作 血 清 グ ロ ブ リ ンの 分 画 よ り α,β,γ‑グ. ロブ. リンに 分 離 し,そ の 抗腫 瘍 性 の 存 在 を細 胞 培 養 実 験 で検 討 した 結 果,α,β. に は,ほ. とん ど 抗 腫 瘍 性 を. 2)抗 原 と して の 不 溶 性 脂 蛋 白 は,そ. の リン 脂 質. の 部 分 に抗 原 と して の 重 要 性 を も つ て い る と考 え る. 3) 組 織 低 密 度 リポ プ ロ テ イ ンを 抗 原 と し て マ ウ ス を 感 作 す る に は,蛋. 白量1匹. あ た り1.0mg程. 度. が適 当 で あつ た. 4) 感 作 血 清 グ ロブ リンは γ‑グロブ リンに もつ と も強 い 抗 腫 瘍 性 を有 して い る.. 様に. 5) 組 織 低 密 度 リポプ ロ テ イ ン 感 作血 清 グ ロ ブ リ. 感 作 後25月 目の脾 お よ び リン雌 節 グ ロ ブ リ ン様 物 質. ンの 抗 腫 瘍 性 は,感 作 後25日 頃 が もつ と も強 く, 30. 示 さな い が,γ 分 画 に 強 い 抗 腫 瘍 性 を示 す.同. と比 較 した が,こ の時 期 に お い て は血 清 分 画 に 強 い. 日以 後 で は 減 退 の傾 向 が み られ る.脾 お よ び リンパ. 抗 腫瘍 性 を示 して い る.こ れ は 細 胞 性 抗 体 が 血 清 抗. 節 グ ロプ リン様 物 質 で は,感 作 後10日 頃 に 抗 腫 瘍 性. 体 に 比 して 早 い時 期 に現 わ れ る とい う諸 家 の研 究 に 一致 して い る .ま た,γ‑グ ロブ リン分 画 につ い て は,. が もつ と も強 い.. Flax52)は マ ウス 腹 腔 内 にEhrlich腹 植 後,そ の 腹 腔 内へ 家 兎 抗, Ehrlich腫 リンを注 入 し,対 照 マ ウ スの2倍. 水癌腫瘍 を 移 瘍 γ‑グ ロブ. の 生 存 日数 を 示 し. た と報 告,平 井53)らは移 植 癌 ネ ズ ミに お い て 移 植 を. 稿 を 終 るに の ぞ み 御 指 導,御 校 閲 を 賜 わ つ た 田 中 早 苗 教 授,お. よ び山 本 泰 久 講 師 に 深 甚 の 謝 意 を 表 す. と とも に,細 胞 培 養 に つ い て 多 大 の 御 協 力 を い た だ い た 浜 崎 充 彦 博 士 に 感 謝 す る.. takeし た癌 ネ ズ ミのγ‑グ ロ ブ リン は ほ とん ど例 外 な く減少 し,治 癒 した ネ ズ ミは ほ とん どγ‑グ ロ ブ リンの上 昇 を み せ る との べ て お り,γ‑グ ロ ブ リンの. 文. 1) Haaland, M.: Report Imperial Cancer Res., Fund. 1, 1911 2) Woglom,W. H.: Cancer Rev., 4, 129 (1929) 3) Corer, P. A.: J . Path. Bact., 44, 691 (1937) 47, 231 (1938). (本 論 文 の 要 旨は 第26回 目本 癌 学 会 総 会 お よ び第 40回 日本 生 化 学 学会 に お い て発 表 した). 献. 4) Snell, G.D.: Cancer Res., 17, 2 (1957) 5) Gross, L.: Cancer Res., 3, 326 (1943) 6) Goldfeder, A. : Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 59, 104 (1945) 7) Foley, E. J.: Cancer Res., 13, 835 (1953).
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(13) 移植 動物癌腫瘍抗原 に関す る研究. Antigenicity Part. 1,. of Ehrlich. Antigenicity. of. in Ehrlich. Ascites. Low. Density. Ascites. Tumor. 689. Tumor Lipoprotein. By. Yasuo Department. of Surgery,. Okayama. (Director:. Antigenicity of insoluble lipoprotein its biochemical characters were studied. globulin. was examined. was. moved. was. obtained. cytotoxic. elevated. by. effect. at. decreased showed. by cell culture. electrophoretically. 25. administration was. th. gradually the. similar. highest. mainly. day. 30. cytotoxic. day.. activity. Medical. School. S. Tanaka). technique.. 1 mg. The. serum. protein. at. low. globulin 10 th. day. density. after. per The. fraction. lipoprotein and. concentration fracticn.. with The. insoluble. β‑lipoprotein,. γ‑globulin. immunization th. Prof.. University. (low density lipoprotein) in Ehrlich ascites tumor and The cytotoxic effect of immunized male dd-mice serum. with. existedin. after. after. of. TADATOMO. the. mouse. antitumor. lipoprotein, in. lymph. immunization.. used. maximal. as. antigen.. activity. and nodes. as antigen antigenicity. the and. was. The most. effect. was. spleen. was.
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