プロトポルフィリンの抗炎症作用 （皿） 一馬杉腎炎におよぼす影響

プロトポルフィリンの抗炎症作用 （皿）

一馬杉腎炎におよぼす影響

金沢大学医学部第二病理学教室（主任 石川大刀雄教授）

      須  山  忠  和       松   本    剛       佐  伯  良  昭

       （昭和40年11月15日受付）

 プロトポルフィリンが遷延卵黄感作による実験的肝 硬変に対し著しい抑制効果を示し，また実験的肉芽腫 や痘瘡ワクチンの発痘等に対しても抑制効果をもつこ となどから，プロトポルフィリンに抗炎症作用のある ことが明らかにされた1）．その後，即時型および遅発 型アレルギーに対してもかなりの抑制効果のあること が確認されたが，ここで注目されることはプロトポル フィリンが生体の感染防禦抗体の産生をおさえること なく，抗炎症作用を示すことである2），たとえばSal・

monella enteritidis（gaertneri）を用いてのマウス 感染防禦実験において，対照として用いたプレドニソ ロンが著明に感染防禦能を抑制したのに反し，プロト ポルフィリンはむしろそれを高めている．プロトポル フィリンのこのような作用は，その網内野賦活作用3、

やin vitroにおける補体作用抑制効果4）等と関連し て興味深いものがある．

 最：近，いわゆる  hepatic glomerulosclerosis という名の下に，肝硬変や他の肝傷害に伴なう腎糸球 体の変化が5）6）7），電顕的にみとめられているが，プロ トポルフィリンが肝硬変抑制効果や抗炎症作用・抗補 体作用をもつ以上，この物質の糸球体病変におよぼす 影響をしらべてみることは意義のあることと考えられ たので，本報では，いわゆる馬杉腎炎をつくり，それ に対するプロトポルフィリンの影響をコルチコステロ イドとの対比において検索した．

実験材料および実験方法

 実験的腎炎は家兎に対し抗家兎腎アヒル血清を注射 する方法で作成した．

 1．家兎腎抗原：

 体重2〜2．5kgの家兎を頸動脈潟血により殺し，

胸部大動脈よりカニューレを挿入，生理食塩水10βで 灌流後，腎を摘出し，腎皮質のみを細切，ホモジナイ ズし，ガーゼで濾過後生理食塩水で20％エマルジョン とした．これに1／5000の割合にマーゾニンを加え，抗 原として使用に供した．

 2．抗家兎腎アヒル血清（ネフロトキシン）：

 体重約2．5kgのアヒルの腹腔内に上述の20％腎皮 質エマルジョンを5m1ずつ週2回の割合で9週間，

計18回注射して免疫した．最終免疫後8〜9日にアヒ ルを全採血して血清を分離し，560C 30分非働化し，

1／10，000にマーゾニンを加えて使用まで4GCに保存 した．抗血清はアヒルの個体差により抗体価に変動が あったが，ネフロトキシンとして使用する場合，すべ てをプールして使用した．プールしたネフロトキシン の家兎腎エマルジョンに対する抗体価は，重層沈降反 応および寒天ゲル内二重拡散法により測定したが，そ の場合抗原は上記20％腎エムルジョンをさらに5倍に 生食水で稀釈し，3000r．p．m．5分間遠沈上清を用い た．寒天ゲル内二重拡散法では抗体稀釈で×8まで沈 降線をみとめ，また重層法では上記遠沈上清をさらに 16倍稀釈したものを抗原とし，抗体稀釈で×64まで陽 性であった．

 3．ネフロトキシン注射法：

 馬杉8）はネフロトキシン5〜6m1を2〜4回注射し て腎炎を発生させている．一方Spuhler et al 9）は 1回注射で腎炎を発症させている．我々の予備実験で もそれを確認したので，体重2．Okg前後の健康な家 兎を用い，上記のプールしたネフロトキシン3．Omll kgを1回静注する方法をとった．

 Anti・inflammatory Effects of Protoporphyrin （III）． Effects on Experimental Immune Mephritis（Masugi）， Tadakazu Suyama， Tsuyoshi Matsumoto＆Yoshi aki Saheki，

Department of Pathology（Director：Pro￡T． Ishikawa）， School of Medicine， Kanazawa

Ulliversity．

プロトポルフィリンの抗炎作用 （皿） 207

 4．使用薬物および薬物投与法：

 プロトポルフィリン・ナトリウム塩（以下NAPP と略記）はミドリ十字K．K．より提供を受け，これを 5％ブドウ糖に0．5〜1％の割合に溶解し，滅菌後静 脈内に投与した．コルチコステロイドとしては市販の プレドニソロンを使用し，筋肉内注射した．また対照

（腎炎無治療群）としてはNAPPの溶媒すなわち5

％ブドウ糖のみを静脈内注射した．

 実験は腎炎の発症抑制実験と治療実験とに大別し た．方法の概略は表1に示した．

表1 馬杉腎炎に対する薬物投与法

処  置 ^・・ﾋ・・ 抑制蕪群剖へ

ネ7ロトキシン

克ﾋ後 日数 一7        0        7       14       21

発症抑制実験

対 照 iブドウ糖注）

ored l㎎／k昏 mAPP 2．5㎎／k督 mAPP 5㎎／kg

       IOOOOOOOIOOOOOOOOOOOOOO

@      と       o△△△4△△48凸ム心△△△△ △△△△6ムム

@      8

治療実験 ^対 照

iブドウ糖｝主）

ored 2㎎／kg mAPP l㎎／k警 mAPP 2・5㎎／k曾

11        oooooooooooooo F1     6△△△ムムムムム凸△△凸△

e，         ▲▲▲4▲▲▲▲▲▲▲▲ゐム

 董）抑制実験：ネフロトキシン注射1週二二より NAPPおよびプレドニソロンの投与を始め，ネフロ トキシン注射後も2週間引続き薬物投与を行ない，そ の聞下記の臨床観察を行なった．結局薬物を3週間毎

日計21回投与後，動物を空気栓塞で殺し，腎の肉眼 的，組織学的検索を行なった．この実験では動物を予 め次の4群に分けた．すなわち，

 第1群・5％ブドウ糖投与（対照，腎炎無治療群）

 第2群・NAPP 2．5mg／kg！日，連日投与，計3週 間

 第3群・NAPP 5．Omg／kg／日，連日投与，計3週 間

 第4群・プレドニソロン1mg／kg／日，連日投与，

計3週間

 各群はそれぞれ5匹ずつの家兎を用いた．

 ii）治療実験：ネフロトキシン投与1週間後，腎炎 の臨床症状の発現することを確かめてから薬物投与を 開始し，その後1〜2週間，連日投与を続け，その間 臨床観察を行なった．家兎は薬物投与の1週間の末か

ら2週末にかけて剖検，腎の肉眼的所見，組織所見を 検査した．この実験では家兎を予め次の4群に分け た．すなわち，

 第1群・5％ブドウ糖投与（対照，腎炎無治療）

 第2i群・NAPP lmg／kg／日，連日静注，計1〜2

週に至る．

 第3群・NAPP 2．5mg／kg／日，連日静注，計1〜

2週に至る．

 第4群・プレドニソロン2mg／kg／日，連日筋注，

計1〜2週に至る．

 各州はそれぞれ7匹ずつの家兎を用いた．

 なお，家兎の飼育は実中研兎湘固形飼料を自由採汗 せしめ，水分補給のためキャベツを毎日350gずつ与

えた，

 5，臨床検査：

 発症抑制実験および治療実験を通じて次の臨床的観 察を行なった．

 i）体重：最初の体重2．0〜2．2kgの家兎を用 い，毎日一定時に測定した．

 ii）血圧：川口氏法10）により耳中心動脈で非観血的 に1週に2〜3回測定した．

 iii）尿：採尿ビンにはトルエンを1m1ずつ予め加 えておき，毎日尿量をはかった．尿蛋白は，採取した 尿を4枚のガーゼで濾過後，Esbach法により測定し た．尿沈渣は尿5m1に酢酸約0．2m1を加え，1000 r．p．m．5分遠心した沈渣につき鏡検した．潜血反応 はオルトトリジン法またはHemastix試験紙（Ames Co。製）によった．

 iv）血中非蛋白性窒素および血清蛋白：耳より1m1 採血し血清分離後Rappaportの方法11、によりNPN

（非蛋白性窒素）を測定した．血清蛋白は屈折蛋白計

（日立）によった．

実 験 結 果  1．腎炎発症抑制実験：

 ネフロトキシン注射1週間前より薬物投与を開始し NAPP，プレドニソロンの効果を対照（腎炎無治療）

群と比較した．

 1．臨床所見：i）尿所見（図1，2・表2）．対照腎 炎群の尿蛋白はネフロトキシン注射後5日目で全例陰 性，7〜8日で全例陽性となり，10日目で最高（5匹 の平均13．3％）に達してから次第に減少の傾向をたど ったが，14日目の剖検時においてもエスバッハで5・3

〜10．8％の蛋白をみた．ただ家兎No．1のみは13日 目で痕跡程度，14日目では陰性であった．また家兎 No．4では10日目には最高25．0％にも達した．尿沈 渣，殊に赤血球，潜血の変化もほぼ蛋白の変動と同様 な経過をたどった．尿量は特に減少の傾向は認められ なかった．

 NAPP 2．5mg／kgを毎日投与した群では，尿蛋白 は，対照腎炎群同様7〜8日目で出現し始めたが，10

日目で最高に達した時ですら平均7．2％であり，対照 群に比して明らかに有意の減少を示した．沈渣所見で も家兎No，11を除いては，赤血球はごくまれにしか みられなかった．尿量は全般に対照腎炎群よりも増加 の傾向がある．ところがNAPP 5．Omg／kg投与群で は，尿蛋白はネフロトキシン注射後2〜3日で，家兎 No．16以外は全例陽性となり，7日目で早くも最高

（平均28，0％）に達しその後急速に減少した．沈渣所 見，潜血反応もこれに平行した経過をたどった．

15

10

5

 図1 尿蛋白（Esbach）一発症抑制実験一     1群5匹の平均値を示す．

％o

         κNAPP 5㎎／kg 15          ／l

         l     Conし

        ノ 1       10

脚6  ●4   −2   0   2   4   6   8   10  12  14   day

〈一一一『一一一一  薬物投与（毎日） 一一一一＿＿＿＿＿〉

 プレドニソロン1mg／kg投与群では，尿蛋白，沈 渣，潜血卜いずれもNAPP 2．5mg／kg投与群と同 程度あるいはそれ以上の抑制効果がみとめられたが尿 量はやや減少の傾向をたどった．

 ii）血圧．図3に示したように，対照腎炎群では，

ネフロトキシン注射後7〜8日で有意の上昇がみら れ，正常血圧とみなされる82mmHg以上を示し，

家兎No．5では7日目で120 mmHgを示した． し かし9日目でわずかな上昇（85mmHg）がみられた

図2 尿量一発症抑制実験一  1群5匹の平均値を示す，

        ノ   ゆ   く  ／薫    ／

︿＼鳶

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励 ㎜ 恥

90@ 70

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NAPP 5㎎／kg   テ

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〈        薬物投与（毎日） ＿一

旧2 丁60

140

120

100

80

表2 尿沈渣所見（発症抑制実験）

家兎恥−凸2n64凸5678910

「11 12 13 14 15

戸07︒只UQりAU−占ーム噌1¶⊥9臼

所 見

ネブロトキシン投与後日数

対 照

プレドニソロン 1mg／kg

NAPP  2．5mg／kg

NAPP 5mg／kg

赤 血 球

6i1・114

円 柱

61・・1・4

甘柵球帯柵

闘什醐＋＋

一・騨＋什＋

＋＋＋＋什

十十十∴十朴＋十十

十 十

十

皆＋廿︑什

十ム十十 ^十 十一十一十

十

十 十

十

十十冊辮柵柵柵

帯＋＋什什

十

白血球，上 皮等 6巨・1・4

潜 血

61・・114

幽什＋∴什

＋柵粁＋什

柵什＋柑＋

門戸＋＋什＋十什十＋十幽十一十

十

十︑

十

十十柵什二丁冊

柵甘言珊珊 ＋＋幽什︑＋

十

什＋∴＋＋

十占十∴十 十十十十十

十

十

十

十什十

プロトポルフィリンの抗炎作用 （皿） 209

ものもあった（家兎No．1）．

 NAPP 2．5mg／kgおよび5mg／kg投与群では終 始，血圧は正常範囲にとどまった．プレドニソロン 1mg／kg投与群では10〜11日目で正常域をこえる血 圧上昇がみられ，剖検時においては105mmHgを示

したものもあり（家兎No．9），対照腎炎群を上回る 傾向すらみられた．

 iii）血中非蛋白性窒素（NPN）．図4に示すように 対照腎炎群では尿蛋白の出現，血圧の変化によりおく れて，10日目頃より正常域の上限である55mg／d1を こえるわずかの上昇を示したが，家兎No．2は114 mg／dlまで上昇した．

 NAPP 2．5mg／kg投与群でもやはり10日目頃より 正常域上限をわずかにこえる上昇を示したが，最も上 昇を示した家兎No．15でも78 mg／d1にとどまっ た． ところがNAPP 5 mg／kg投与群では7〜8日

目より上昇がみられ135．Omg／d1を示したものすら あった（家兎No．18）．プレドニソロン投与群は最終 まで正常範囲にとどまった．     一

 iv）血清蛋白． 対照腎炎群；NAPP投与群共に8 日目より正常値の下限とみなされる5．2％以下に減少

100

90

 図3 血圧（川口氏法）一発症抑制実験一      1群5匹の平均値を示．

mHg

ネフ气VンA

    Pred． lmg／kg

   、夕    ∫，。nt

 軸1・・．．ll．ごγ

ぜ

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バ

80

70

100

90

一6   −4   ρ2   0   2   4   6   8   10   12  14

     薬物投与（毎日）

したが，NAPP 2．5mg／kg投与群では急速に正常域 に回復した．一方プレドニソロン1mg／kg投与群で は，ネフロトキシン投与5日前すなわち薬物投与2〜

3日頃より正常値の上限とみなされる6．0％をこえ，

特にネフロトキシン注射後は急速に上昇傾向をたどっ た（図5）．

 v）体重．対照腎炎群にくらべNAPP投与群は特 に有意の変動を示さなかったが，プレドニソロン投与 群においては体重の減少が著しかった（図6）．

 2．病理所見：i）肉眼所見（写真1）では，対照腎 炎群は一般に腎の腫大を示し，表面は蒼白，時にかな りの点状出血をみる．割面はやや浮腫状，蒼白で貧血 状を示し，皮質狭小となり．点状出血もみられた．

NAPP 2．51ng／kg投与群では腎の腫大はほとんどみ られず，色調の変化，割面の状態もほぼ正常に近かっ たが，1例（家兎No．14）のみが皮質狭小化を示し た．NAPP 5 mg／kg投与群では，色調の変化はみら れなかったが．割面はやや浮腫状で，点状出血を示す ものが2例あった．プレドニソロン投与群では表面や や蒼白で腎腫大し，割面で浮腫，点状出血等が軽度に みられた．

％

図5 血清蛋白 一発症抑制実験一   1群5匹の平均値を示す．

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／尻一一鴫・鴨，、窪

％70

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0009  0000    00876543

㎎／dl

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血中非蛋白性窒素 一発症抑制実験一  1群5群の平均値を示す．

ネフロトキシン  ，主射

浮＼剛・・馬、、昏

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．6曜4・202468101214day

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…← 0

図6 体重の変化 一発症抑制実験一   1群5匹の平均値を示す．

一100

・200

一300

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ネフﾓシ㌧

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←一一｝一一一一  薬物投与（毎日》 輔一｝一一咽一一シ

 ii）組織学均所見では，対照腎炎群は糸球体血管貧 血状でやや膨化し，ボウマン氏嚢腔に好エオジン性無 構造の蛋白を入れるものが多かった．1例に定型的な 増殖性糸球体炎像がみられ（写真2），細尿管は上皮 の硝子滴変性を示すものがあり，硝子円柱，赤血球円 柱（写真3）の形成も一般に強かった，

 NAPP 2．5mg／kg投与群ではボウマン氏嚢腔の滲 出や蹄係細胞の増殖は一般に軽く，それをみとめる例 でも，おかされた糸球体の数は少なかった（写真4＞．

なお円柱形成とくに赤血球円柱や細尿管上皮の変化も やや弱い，細尿管上皮が硝子滴変性を示す例でも，変 性細尿管の分布が狭かった．NAPP 5 mg／kg投与 群では，ボウマン氏嚢腔への滲出がむしろ強く（写真 5），他に対照群とくらべて異なった点はみ出せなか った，プレドニソロン1mg／kg投与群では，糸球体 の貧血が対照腎炎群にくらべてやや弱く，ボウマン民 嚢腔の蛋白滲出や糸球体細胞の増殖機転もやや弱かっ

た、以上の病理所見は総括して表3に示した．

 五．腎炎治療実験：

 ネフロトキシン注射後7日目すなわち腎炎症状出現 の頃より薬物投与を開始し，NAPP，プレドニソロン の効果を対照腎炎群の所見と比較した．

 1．臨床所見：1i）尿所見（7，8図・表4），対照 腎炎群の蛋白は，ネフロトキシン注射後5日目で全例 陰性，7〜8日で全例陽性となり，10日目では最高 で，家兎No．1， No．4では35匂・以上に達した．その 後全般に次第に減少の傾向をたどったが，剖検時にお いても3．2〜7．8芸；・，の蛋白をみた．しかし家兎No．5で は25日日の剖検時には陰性となった．尿沈渣，潜血等 は蛋白の変動と同様な経過を示したが尿量は3〜10日 でかなりの減少を示した．

 NAPP投与群では，1mg／kg，2．5mg／kg投与群 共に尿所見において著しい改善所見がみ られたが，と くにNAPP 2．5mg／kg投与群では投与開始後4〜5 表3 腎の病理学所見一発症抑制実験一

投

与

薬

物

対 照

5％ブドウ糖

Pred．

1mg／kg

NAPP

2．5mg／kg

NAPP

5mg／kg

兎

番

号

1234568910唱⊥Qリバ噛﹁ひ11よ一工¶⊥ ρ0ワ5n◎Q︾11義ーユーユ 十重  ︶量g ︵

右 7．30 11．55 8．45 9．85 9．75 8．25 9，60 10．50 8．30 10，65  925 11．50 6．65 11．90 8．95 11．0 9．25

左 7．55 11．20 7．75 9．30 9，85 8．40 9．45 10．75 8．25 10．95 9．40 11．45 6，65 11．58 8．80 10．85

肉 眼 所 見

腎

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十

9・401＋

割

面

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十十÷÷十

十

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血

十

十十十

十

十 皮 質 狭 小 化

十÷∴十

貧

血

十鉢山十＋十

組 織 学的 所見 糸 球体

蹄

血 貧 血

十十

÷

十十÷十 細胞増殖^{ボウマン嚢腔蛋白滲出}

十甘十÷十十÷ム十

÷

十

細 尿 管 上

皮 変

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・醐

¥∴÷十

＋什∴∴什十∴十 十十

十 硝 子

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十十÷十＋÷什＋÷÷＋＋十十

赤 血 球

円柱什÷＋＋十十甘十

十

間質毛細管充血

十

プロトポルフィリンの抗炎作用 （皿） 211

5日）で著しい増加傾向を示し，18〜19日目では170 mlに達し，家兎No．25， No．29では尿量200 m1 以上を示した．

日目すなわちネフロトキシン注射後11〜12日目で，尿 蛋白の著明な減少，尿沈渣殊に赤血球，潜血の改善所 見がみられた．尿量も11〜12日目NAPP投与後4〜

図8 尿量 一治療実験一 1群7匹の平均値を示す．

醐60 範 20 00 0

鋤而 襯 惚 ⑩ 8

％15   10   5

6  8  10  12  14  16  18  20  22  day 一  薬物投与〔毎則  ＿＿＿＿＿ら．

図7 尿蛋白 一治療実験一 1群7匹の平均値を示す．

脇 15@  10   5

ネフロトキシン圧射

   ←    1・、 1、   ＼ぐ㈱

     ℃＼

∠ ㍉蛮も、日歩

・2  0  2  4  6  810121416182022da〜嶋

←薬物投与（毎日♪一一一一一一一ウ

表4 尿沈渣所見（治療実験）

血 白血球，上皮等 潜

柱

円赤血球

見 所

6 10 14 18 6 10 14 18

6 10 14 18 6 10 14 18

ネフロトキシン 投与後日数

家兎四 十∴脚＋山十十占・剛十十 什＋＋＋＋什＋十十十十十十十＋＋＋什＋土工＋＋＋＋什＋^{什＋騨甘＋＋粁山骨占粁∴止血柵下柵＋柵柵柵柵甘柵素甘十四＋粁}

﹇∴十粁∴甘

什＋＋枡什什

上意＋四阿柵

占十山朴四十

十・闘剛十十一

粁＋＋什＋＋

上高＋柑甘＋

什＋綱＋＋＋

照

対︑

−晶9一n64凸5ρり ＋＋十一＋＋＋柵＋軒＋＋柵＋辮柵甘柵／柵粁辮柵＋＋／什＋軒＋柵＋僧門＋粁柵甘＋＋柵什柵真白柵什粁下血＋軒＋＋＋剛甘一十一＋粁＋二上＋＋＋什＋什什＋＋＋＋甘骨＋粁＋＋什＋甘＋什 ＋＋＋

プレドニソロン   2mg／kg

9101112131416

幽

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E一

Q一・蝋占∴

什＋＋噺＋＋＋

＋＋粁一＋＋＋

＋督＋＋＋＋＋

昔早急一門∴十

三冊朴柵山子什

＋＋朴＋一＋什

十十一 醐十

粁什＋甘柵什＋

什＋柵柵什什什

十十朴∴十十十

﹇∴∴

・鰯・轍  嫡十十十

粁什甘∴十十什

＋＋什一＋＋＋

NAPP

lmg／kg

17 P8 P9 Q0 Q1 Q2 Q3

∴ 脚層噛山

十脚占山・脚十

什＋＋什昔＋

一軸

一

∴∴

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十十占山∴・繍

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一

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朴什十∴占一

甘十十∴∴一

喘一 一

∴∴一一幽

昔＋＋＋什＋

甘＋＋一門粁

 NAPP

2．5mg／kg 24

Q5 Q7ﾁ2930

ネフロトキシン投与後7日目より薬物投与開始

 フ。レドニソロン2mg／kg投与群では，尿蛋白は15 日頃まで有意の減少を示さず，16日をすぎた頃よりか えって増加の傾向をたどった．尿量は対照腎炎群とく らべて有意の増減は示さず，改善所見はとくにみとめ られないようであった．

 ii）血圧（図9）．対照腎炎群では尿所見と同様ネ フロトキシン注射後7〜8日で正常血圧の上限とみな される82mmHgより高い値を示し，家兎No．4で は100mmHgを示した．しかし一般に期待したほど の著しい上昇は示さなかった．

 NAPP l mg／kg投与群では対照腎炎群とくらべて 有意の差を示さなかった．しかしNAPP 2．5mg／kg 投与にもいては7〜8日目に血圧正常値をわずかに上 回る傾向を示したが，その頃よりのNAPP投与開始 により急速に下降してその後，22日目の剖検時まで終 始正常範囲の血圧を維持した．ただ家兎No．27のみ は最高98mmHg（18日目）の血圧上昇をみせたが全 般的に治療効果を示唆する結果を得た．これに反し，

プレドニソロン2mg／ka投与群では対照腎炎群より もさらに著しい血圧上昇を示し剖検時においてすら，

86〜96mmHgで増悪の影響をみせていた．

 iii）血中非蛋白性窒素（図10）．対照腎炎群では尿 蛋白，血圧等の所見よりも1〜2日おくれ，ネフロト キシン注射後8〜10日目より正常上限値とみなされる 55mg／dlをこえて増加し，12日目頃に最高に達した，

とくに家兎No．1では150 mg／d1にも達したが，正 常域をわずかにこえる値68mg／dlしか示さないもの

も1例あった（家兎No．3）．

 NAPP l mg／kg投与群では， NPNの増加は終始 対照腎炎群を下回った．NAPP 2．5mg／kg投与群で はNPN値の上昇は全般に認められず正常範囲内にと どまってその治療効果を示した．一方，プレドニソロ ン2mg／kg群では発症抑制実験の場合と異なり，対 照腎炎群よりも増加の傾向を示したが，22日目の剖検 時においては対照腎炎群と同様に正常域の上限値にま で減少した．

 iv）血清蛋白（図11）．対照腎炎群は正常範囲の下 限より減少する傾向すら示したが，NAPP投与では，

1mg／kg群および2．5mg／kg投与群共に終始正常 値を維持して好ましい影響を与えていることを示唆し た．なおプレドニソロン2mg／kg投与群では，15〜

17日目より正常値の上限6．0％をわずかにこえる上昇 を示した．

 v）体重の変化（図12）．NAPP lmg／kg投与群は 対照腎炎群にくらべて有意の差を見出し得なかった が，NAPP 2．5mg／kg投与群において増加傾向を示

㎜Hg 100

90

図9 血圧（川口氏法）一治療実験一   1群7匹の平均値を示す．

80

70

ネフqトキシン，王射

x

ズ

八難

        た    ・，／NAP戸r噂

㎎Hg 100

go

麟灘釜蕩鎌纏 

70

mg／dl 日0

100 90 80 70 60 50 40

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      ←一薬物投与（毎日） 一一→

図10血中非蛋白性窒素 一治療実験一       t 「    1群7匹の平均値を示す．

ネフロトキソノ庄司

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      《一一一一 藁物投与（毎日♪一一一

    L図1111血清蛋白 一治療実験一興 押｝脚ソ @1群7匹の平均値を示す．  、二 

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        60

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        50

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＋400

＋300

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＋100 0

弓〜0246810121416182022day

      ←  薬物投与（毎日｝→

図12 体重の変化 一治療実験一  1群7匹の平均値を示す．

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弓20246810121416182022day

      ←一 薬物投与〔毎日）

・200

プロトポルフィリンの抗炎作用 （皿：） 213

し，とくにNo．24， No．25では著しかった．ところ がプレドニソロン投与群では全般的にかなりの減少傾 向を示した．

 2．病理学所見：i）肉眼的（写真6）には，対照腎 炎群は，腎の腫大を示し，表面・割面共に蒼白，貧血 状で，点状出血を示すが，それはNo．1， No．4， No．

6の家兎において著しかった．また割面における浮腫 および皮髄境界の不鮮明化がかなりにみられた．

 NAPP lmg／kg投与群では，全般に対照腎炎群よ りも軽度の変化がみとめられた． とくに色調は正常 腎とほぼ同様で，貧血を思わせる所見はみられなかっ た．NAPP 2．5mg／kg投与群では変化はさらに軽

く，腎腫大は家兎No．29を除いてほとんどみられ ず，また割面の浮腫，点状出血等もなくわずかに家兎 No．29において皮質の狭小化がみられたにすぎない．

色調も正常腎と異なる所はなかった．

 プレドニソロン2mg／kg投与群は全般に点状出血 が対照腎炎にくらべ一段と著しく，表面・割三共に蒼 白・貧血状であり，また腫大・浮腫等も対照腎炎群と 同程度であった．

 ii）組織学的所見では，対照腎炎群は一般に糸球体 蹄係血管が貧血状で，ボウマン三才腔にエオジンに好 士する均質な蛋白を入れるもの（写真7）が多く，定 型的な増殖性糸球体炎の像を多少とも示すもの（写真 8）が2例あった．細尿管上皮は硝子滴変性を示すも のが多く，硝子様円柱（写真9），赤血球円柱がかな り著明でまれに細胞円柱（写真10）をみるものもあっ

た，

 NAPP投与群で目につくことは，1mg／kg群およ         の

び2．5mg／kg投与群共に，ボウマン一戸腔への蛋白 滲出が一般に弱いことで（写真11），糸球体の増殖性 変化も対照腎炎群と比較して多少とも弱かった．間質 表5 腎の病理学的所見一治療実験一

投

与

薬

物

対 照

5％ブドウ糖

Pred．

2mg／kg

NAPP

2．5mg／kg 家

兎

番

号

噌120δ45んり91012131415164一b7・只︶9︵U9臼9一22260

腎

重

量

（9）

右 左

肉 眼 所 見

9．75 8．25 8．45 9．85 8．80 11．55 8．30 8．40 8．25 10．55 9．60 8．30 11．80 11．00 11．90 9．25 9．25 6．45 7．95

9．85 7．85 7．75 9．30 8．80 11．25 8．25 8．20 8．40 10．85 9．45 8．25 11．80 10．85 11．85 9．40 8．40 6．45 7．55

腎

腫

大

十十∴十÷

十

十

∴

∴ 十

割

面

浮

腫 十÷・醐十占十 点

状

出

血

十∴柵十

嬉野＋＋＋柵＋

皮

質

狭 小

ヒイ十∴÷十∴十 貧 血

十

十・一・一骨・醐十

組 織 学 的 所 見

糸  球  体 蹄

係 貧 血

十÷∴

十

十・闘十十

十

細  胞  増  殖

ボウマン嚢腔蛋白滲出十占

占÷∴

十

十∴十

十

十

糸球体周囲炎

細  尿  管 上

皮 変 性

十十十 管 腔 拡

張 十

硝

子

円

柱

十

骨÷十∴十十粁

÷∴∴∴什÷轟

十 十

赤 血 球

円柱

十

十一・什÷十

十

細

尿

管

充 盈

⊥Tよ・︒〒←一9〒十十十十十

血管の充盈は一般にかなり著しいが，細尿管上皮の変 性傾向はやや弱く，円柱形成も対照腎炎群にくらべて 弱いものが多かった．

 プレドニソロン2mg／kg投与群では，ボウマン氏 嚢腔への蛋白滲出の強い例（写真12）がやや多い点を 除くと，糸球体変化は対照腎炎群と大差がなく，また 間質細血管の充盈のやや弱いものが多かったが，硝子 様円柱，赤血球円柱形成は対照腎炎群よりもむしろ強 かった．なお細尿管上皮の空胞変性・解離・核破壊，

石灰沈着を示すもの（写真13），尿管拡張の強いもの

（写真14）があった．

 以上の病理学的検索の結果は表5に総括して示し

た．

総 括

 抗家兎腎抗体（ネフロトキシン）を1回注射して馬 杉腎炎をおこさせた家兎に，NAPPを投与してその 効果を検討し，臨床所見および病理学的所見から，

NAPPが適量においてかなりの発症抑制および治療 効果を示すことがわかった．

 まず腎炎発症抑制実験では，ネフロトキシン注射1 週間前より薬物投与を開始し計3週間連日投与した，

NAPP 2．5mg／kg投与群では投与総量50 mg／kg に達したが，尿所見において尿量，尿蛋白，沈渣等す べてにNAPPのかなりの抑制または改善効果がみら れ，また血圧の上昇も抑制された．しかし血中残余窒 素の消長に関しては，対照腎炎群のNPNが定型的な 上昇を示さなかったこともあって，有意の差異はみと められなかった．しかし腎の組織病理学的検索結果で は，NAPP 2．5mg／kg投与群では対照腎炎群に比較

して全般に糸球体および細尿管の変化は軽いかまたは 完全に抑制されており，NAPPがこの実験的腎炎に 対し，臨床・病理の両面からかなりの発症抑制効果を もつことがわかった．ところがNAPP 5 mg／kg投 与群では投与総量100mg／kgに達したが，臨床所 見，病理所見共に必ずしも抑制効果を示したとはいい 難く，尿蛋白，沈渣およびNPNにおいても，またボ ウマン両両腔の蛋白滲出の程度においても，むしろ対 照より悪い成績をすら思わせるものが時にみられた．

このことはNAPP投与量に最適量のあることを示唆 している．プレドニソロン1mg／kg投与群（投与総 量20mg／kg）では，糸球体変化が最もよく抑制され ており，また尿蛋白の出現も対照にくらべて軽度であ ったが，尿量はむしろ減少の傾向を示した．

 次に治療実験では，腎炎の臨床症状が現われたこと を確認してから薬物投与を開始し，連日使用した．

この場合，発症抑制実験の結果を考慮して，1回の NAPP投与量を1mg／kgおよび2．5mg／kgの2 群とした．NAPP 2．5mg／kg投与群では，投与総量 25mg／kg〜35 mg／kgであったが，治療開始後3〜

5日で臨床症状は急速に回復に向つた． とくに尿所 見，血圧および血中残余窒素等の諸症状がすべて平行

して治癒の傾向を示したことはとくに興味深い．さら に剖検においても肉眼的，組織学的に腎の変化は対照 腎炎群に比較して弱く，とくにボウマン氏嚢腔への蛋 白滲出の弱いことが目立つた．投与量が1mg／kg（投 与総量10〜14mg／kg）ですら，尿所見の改善はかな りの程度に認められ，その他の点でも治癒傾向がうか がわれた．ところがプレドニソロン2mg／kg投与群

（総量20日目／kg〜28 mg／kg）では，臨床所見はむし 表6 馬杉腎炎におよぼすNAPPの影響 （総括）

投与薬物

発症抑制実験治療実験

Pred．

NAPP

Pred．

NAPP一

投与：量

mg／kg

1．0 1．0 2．5 5．0 1．0 1。0 2．5 5．0

尿

到蛋白1髄

／十

0 0

什／ ／

十

十甘／ 十／十十／

血 圧 0

／什

十

0

十／

血  液

NPN儂蕾

＋／0

0

＋／ ／＋0

十

＋／

体 重

︶︻／︵ ？？ ︶︸？︵ ？

／

病理所見

／十

・一〜0 0

＋／

   ぷ総括効果

十

／ 十 0

十／

什：著効，十：効果あり，÷：やや効果あり，0：効果なし，一：増悪効果

＊総括所見とは臨床および病理所見を参考として主観的に大凡の判定を下したものである．

プロトポルフィリンの抗炎作用 （皿） 215

ろ悪化の傾向を示し，組織学的にもボウマン氏嚢空へ の蛋白滲出が強い傾向にあり，細尿管の変化も著しか

った．

 馬杉腎炎に対してNAPPが発症抑制および治療効 果を示すことを以上に述べたが，しかし1回投与量が 5mg／kg以上になると腎炎変化がむしろ悪化する傾 向寮うかがわれたζとは，この薬物に最適有効量の存 在することを示唆するものであろう．結局総投与量と して50mg／kg．と100 mg／kgの問に，効果に関し ての投与量の限界が考えられる．NAPPの腎炎抑制 ないし治癒機転に関してはまだ伊野的なことを述べら れない．しかし，NAPPがin vitroにおいて抗補体 作用を示してimmune hemolysisを抑制することは 知られており4｝，我々もまたこれを確かめたが2），も

し馬杉腎炎における腎の組織傷害に補体の結合が関与 しているならば15）16）17）18），NAPPのこの抗体作用は 腎炎の治癒機転にとって重要な意義をもつであろう．

最近，抗補体作用をもつheparinも実験的免疫腎炎 に対して抑制効果を示すことが報告されている18）．ま

たNAPPの効果とNAPPの網理系機能充進作用と の関連は免疫病理学の立場から注目する必要があろ

う．

結 論

 プロトポリフィリン・ナトリウム塩（NAPP）は家 兎を用いての馬杉腎炎に対してかなりの発症抑制効果 および治療効果を示す．

 これらは尿所見，血圧，NPN等の臨床所見および 病理組織学的検索の結果より確かめられた，

 とくに治療実験においては，腎炎の臨床症状が現わ れてから約1週聞の投与で効果をみるが，これらの効 果は2．5mg／kg／日またはそれ以下の投与量で著明で あり，5mg／kg／日以上でば無効かあるいは時に悪化 の傾向すら示す．

 このことは，この薬物に至適有効量の存在すること を示唆し，それは総投与量として50mg／kgと100 mg／kgの間にある．

 プレドニソロン（1mg／kg／日）は腎炎の発症をよ く抑制するが，治療実験（投与量2mg／kg／日）にお いては，むしろ有害ですらある．

文 献

1）須山忠和・松本 剛＝十全医会誌，70，694

（1964）， 2）須山忠和・松本 剛・小黒義五郎：

十全医会誌，投稿中．  3）田上清貞・橘 和代：

十全医会誌，69， （1963）．   4）進藤宙二＝

personal communication．   5）Sakagロchi，

H．，Dachs， S．， Mautner， W．， Grishman， E．＆

Churg，」．： Lab． Invest．，13，1418（1964）．

6）Sakaguchi， H．， Dachs， S．＆Grishma皿，

E．＝ Lab． Invest．，14，533 （1965）．    ・ 7）Salomon， M．， Sakaguchi， H．， Churg．」．，

：Dachs． S．， Grishman． E．， Mautner， W．，

Raronetto， F．＆Rosentha1， W．3Arch．

Intern． Med．，115，704（1965）．

8）］Masllgi，］』1．3 Beitr． path． Anat．92，429

（1934），        9）Spuhler，0．， Zollinger，

H．U．＆Enderlin， M．3Schw． Med． WschL

81．，904 （1954）．      10） 川1口  浩 ；

千葉医学会誌，9，293（1931）．       11）

Rappaport：J． Lab，＆Clin． Med．，32，1034

（1947）．   12）Sarre， H．＆Wirtz， H．3 Klin． Wschr．，18，1548（1939）．     13）

Pressman， D．， Eisen， H． N．＆Fitzgerald，

P．」．3 」．ImmunoL，64，281（1950）．

14）Hi11， A． G． S．＆Cr腿ickshank， B．3Brit．

J．Exp． Path．，34，27 （1953）．

15）Barkholder， P． M．3J． Exp． Med．，114，

605（1961）．      16）L，achmann， P．」り M髄lle卜Ebe止ard， H．」．， Kunke1， H． T．＆

Paronetto， F．：J． Exp． Med．，115，63（1962）．

17）Halpem， B．，］Milliez， P．， Lagrue， G．，

Fray， A．，＆Morard，」． C．＝Nature．，205，

257（1965）．  18）西岡久寿弥＝アレルギー，

13，285 （1964）．

 おわりに，石川大刀雄教授，倉田自章助教授および武川昭男講 師に深謝致します，また神戸医大・辻内科，藤田嘉一講師・日和 佐一良先生の御助言に対し厚く御礼申し上げます・

       Abstract /

  The action of protoporphyrin on immune nephritis (Masugi), induced in rabbits by inje‑

ction of duck anti･rabbit kidney serum (nephrotoxin), has been investigated. The resu!ts obtained from its clinical and pathological examinations indicate that protoporphyrin exerts a marked preventive and tlierapeutic effect on this experimental nephritis in a dose of 2.5 mglkg!day, or less. In a larger dose of 5mg/kg/day, however, neither clinical nor patho‑

logical findings are improved and sometimes even adverse effects are noted in the experi‑

mental condition reported here. There would be a limitation of effective dose somewhere between 50mg!kg and 100mg!kg of total administered protoporphyrin.

プロトポルフィリンの抗炎作用 （皿） 217

鵜灘

懸魏

灘

翻

ご劉．

韻 慧 駕

国国羅

磯寧 曲懲

懲譲

鎧鋸

鎌i離離

鱒・

轍 蝦

国国灘継濫 鵬織『

劉襲業︒・露騒騒

・畿9・．

。ド総総濃、

喉戴 写真1 抑制実験

     左：対照腎炎；腎腫大，色は蒼白，点状出血斑出現，皮髄界不鮮明化，浮腫状．

     右：NAPP 2．5mg／kg投与腎；腫大なし，色調や割面の状態は正常に近い．

難輝1

  欝欝鷺

写真2 糸球体増殖性変化（抑制実験，対照） 写真3 赤血球円柱（抑制実験，対照）

1繊

写真4 病変の：最も強いものでも，増殖性変化を     示す糸球体が稀に見いだされる程度（抑     制実験，NAPP 2．5mg／kg投与）

蠣

写真5 NAPP 5．Omg／kg投与群では糸球体変     化の強い例がある．（抑制実験）

写真7ボウマン腔への強い滲出（治療実験対

    照）

写真8 糸球体の増殖性変化（治療実験，対照）

プロトポルフィリンの抗炎作用 （皿） 219

写真 6  治 療実験

写真9 高度の硝子様円柱形成（治療実験，対照）

艶謙蕪i

写真10 細胞円柱（治療実験，対照）

灘

．鐸璽懸綴鱗

鍵，鍵  灘 灘、

写真11 この群で最も強い糸球体滲出（治療実験，

    NAPP 2．5mg／kg投与群）

鳴糊]

嚢懸盤．ぞ》

轟灘嚇灘懇難騨

騒繊懸欝欝撚・・纏・ 華繕

鯛嚢戴莚藻蟻ず

鍵盤 灘難

写頁12 強い糸球体滲出（治療実験，Pred．2mg     ／kg）

写真13細尿管上皮の変性・解離・核変化・石灰      沈着（治療実験，Pred．2mg／kg）

難、覧勢

   醗1 写真14

蹴藻之

鉱

  難 欝1

細尿管拡張（治療実験，Pred．2n｝g／kg）