Posted at the Institutional Resources for Unique Collection and Academic Archives at Tokyo Dental College, Available from http://ir.tdc.ac.jp/
Title
№３６：Treponema denticola へのPorphyromonas
gingivalis Hgp４４の付着ドメイン解析
Author(s)
吉川, 幸輝; 喜田, 大智; 菊池, 有一郎; 国分, 栄仁;
山下, 慶子; 北村, 友里恵; 深澤, 俊也; 今村, 健太郎;
齋藤, 淳; 石原, 和幸
Journal
歯科学報, 119(3): 251-251
URL
http://hdl.handle.net/10130/4933
Right
Description
目 的：Porphyromonas gingivalis お よ び Treponema
denticolaは，慢性歯周炎において高頻度に検出され
る菌群‘red complex’に分類される。近年，P.
gin-givalisが産生する RgpA の赤血球凝集／付着ドメイ ンの一部である Hgp４４が T. denticola との共凝集に おいて重要な付着因子であることが報告された。本 研究は T. denticola に対する P. gingivalis Hgp４４の付 着ドメインを明らかにすることを目的とした。 方 法：P. gingivalis ATCC ３３２７７の Hgp４４（ア ミ ノ 酸配列１−４１９）を含むプラスミドベクターをテン プレートとし，PCR 法にて増幅後，計７個の Hgp ４４の一部を含むプラスミドを作製した。これらを Escherichia coliに形質転換し，リコンビナント Hgp ４４タンパク質（r-Hgp４４）の精製，発現を確認した。 各 r- Hg p４４を 用 い た T. denticola ATCC ３５４０５， Fusobacterium nucleatumATCC ２５５８６への付着は， ELISA にて評価した。Coaggregation assay にて， r-Hgp４４が P. gingivalis，T. denticola の共凝集に及ぼ す影響を評価した。走査型電子顕微鏡（SEM）お よび共焦点レーザー顕微鏡（CLSM）にてこの両菌 のバイオフィルム形成に及ぼす影響を評価した。 結果および考察：ELISA では，r-Hgp４４：１９９−３１６と T. denticola，F. nucleatum の付着はコントロールに比 較して有意に高い値を示した。Coaggregation as-say の結果，r-Hgp４４：１９９−３１６はコントロールに比較し て P. gingivalis，T. denticola の共凝集を有意に阻害 し た。SEM お よ び CLSM に よ る 解 析 の 結 果，r-Hgp４４：１９９−３１６はこの両菌のバイオフィルム形成を阻 害した。以上の結果より，Hgp４４において T. denti-colaとの付着に関わる主たるドメインは，アミノ酸 配 列 の１９９−３１６間 に 存 在 し，こ の ド メ イ ン は T. denticolaにおいて特異的ではなく，他の歯周病原細 菌との付着にも関わることが示唆された。今後他菌 種のバイオフィルム形成への影響の評価を行ってい く。
目的：Intraoral Fluoride Releasing Device（IFRD） は，口腔内のフッ化物イオン濃度を長期間一定に維 持することが可能であり，低濃度のフッ化物が歯質 に効果的に取り込まれる費用対効果に優れたフッ化 物応用法として注目されている。本研究は３D プリ ンタの複数同時成型および高い設計自由度に着目 し，積層造形技術を IFRD へ応用することによる新 規フッ化物徐放装置の開発と耐酸性向上による齲 抑制効果の検討を目的とした。 方法：上顎歯 顎 模 型（D１８FE-５００E，Nissin）の 形 状は光学スキ ャ ナ（Atos Core，GOM）を 用 い て stl（standardized triangular language）データとし て 採 得 し，得 ら れ た stl デ ー タ を 基 と し て CAD ソ フ ト ウ ェ ア（３-matic，Materialise）を 用 い て IFRD トレーの設計を行った。設計後，生体適合性 透明樹脂（MED ６１０，Stratasys）を基材として３ D プ リ ン タ（Objet ２６０ Connex，Stratasys）に て 試作型上顎 IFRD トレーを成型した。フッ化物徐放 ゲルはカチオン化ヒドロキシエチルセルロースを ベースに合成し，さらに試作ゲルの配合を改良した ゲル（Gel-２）も作製した。ゲルのフッ化物イオン 徐放量はサンプルに TISAB Ⅲを添加し，遊離した イオン濃度を複合形フッ化物イオン選択性電極（D-７３, ６５６１S-１０C，HORIBA）によるフッ化 物 イ オ ン 電極法にて１２時間連続して測定した。 結果および考察：試作型トレーは上顎歯顎模型に適 合し機械的維持が認められた。トレー内部のリザー バータンク内には約２００mg のフッ化物徐放ゲルを 収納することが可能であった。本実験で作製した 試作フッ化物徐放ゲル（Gel-１）は１００mg あたり ０．０４１３mgF，最大１２時間の徐放能を示した。改良 型の Gel-２ではフッ化物イオン徐放量を２∼３倍ま で向上させることに成功した。本研究で開発された IFRD は義歯や矯正装置の内部にも設計可能な大き さであり，オペ後の顎間固定時における口腔内や介 護施設など頻回の口腔ケアが困難な現場の患者口腔 内でも効果を発揮できる。またゲル成分の変更によ り，口腔乾燥症や粘膜疾患への転用も可能である。 本研究により患者一人ひとりの口腔と症状に合わせ た予防歯科医療の実現が期待できる。
№３６：Treponema denticola への Porphyromonas gingivalis Hgp４４の付着ドメイン解析
吉川幸輝１）２），喜田大智１），菊池有一郎２）３），国分栄仁２）３），山下慶子１）２），北村友里恵１）２）， 深澤俊也１），今村健太郎１）２），齋藤 淳１）２），石原和幸２）３）（東歯大・歯周）１）（東歯大・口科研）２） （東歯大・微生）３）
