貯 蔵 中 にお けるブ ドウ果実脱粒 へ の糸状 菌 の 関与

近 畿 大 農 総 研 報7:97〜 工06(1999)

Bull.

Inst. Compr. Agr. Sci. Kinki Univ. 7 : 97 — 106 (1999)

貯 蔵 中 にお けるブ ドウ果実脱粒 へ の糸状 菌 の 関与

許 玲2)・ 草 刈 眞 一3)・ 豊 田 秀 吉1)・ 大 内 成 志')

Role of Fungi in the Shatterring of Grape Berries during Storage

Ling XtP'2) , Shin-ichi KUSAKARI3) , Hideyoshi TOYODA') ,

Seiji OucHin

Synopsis

Several species of fungi belonging to Genara Alternaria, Botrytis, Cladosporium, Pestalotiopsis, Rhizopus, and Stemphylium, were isolated from shattered berries of cultivars Kyoho, Muscat Bailey A and Delaware collected from grape orchards and markets. Their inoculation experiments indicated that major fungi involved in the shattering were Botrytis cinerea, Altemaria sp. and Rhizopus stolonifer.

Types of shattering were classified into two, physiological shattering and decay shattering. The former was accompanied by the formation of an abscission layer at the bourrelet, while the latter was characterized by the remnant of pericarp at the bourrelet. Ethyelene treatment induced the abscission layer formation, while inoculation with Botrytis cinerea reproduced mainly the decay shattering with an extensive growth of the fungus on inoculated berries. Concomitant treatment with ethylene and the fungal inoculation enhanced berry shattering, reaching to 60% during 24 days of incubation. The results indicate that fungal infection causes not only decay shatterring, but also the physiological

shattering. Spray of iprodione(500 g/ml) on grapes 65 days and 9 days before harvest markedly decreased berry shattering during storage at st for 2 months. Similar protection of grapes was observed when harvested clusters were rapped in SO,- generating paper sheet.

緒 言

収 穫 ブ ドウ の 品 質 保 持 に つ い て は 、 こ れ ま で 、 主 と し て 収 穫 前 や 貯 蔵 中 に お け る 果 実 の 生 理 ・生 化 学 的 変 化 との 関 連 に お い て 研 究 され て き た脚 臥2q21}。しか しな が ら、 収 穫 後 の ブ ドウ 果 実 を低 温 下 で 貯 蔵 し た場 合 に は 果 実 の 呼 吸 や エ チ レ ン 生 産 量 は 低 下 し、 生 理 的 老 化 や 栄 養 成 分 の 変 化 が 比 較 的 緩 慢 に 進 行 す る の で 、 果 実 の 品 質 保 持 の 観 点 か ら は 、 む し ろ 果 実 の 腐 敗 や 脱 粒 の発 生 機 構 が 重 要 な研 究 課 題 と な る 。 特 に 、 ブ ド ウ の 長 期 間 貯 蔵 や 長 距 離 輸 送 が 必 要 と さ れ る 中 国 に お い て は 、 輸 送 や 貯 蔵 中 に 生 じる

1)近 畿 大 学 農 学 部 奈 良 市 中 町3327‑204 Faculty of Agriculture 2)新 彊 農業 大 学:中 国 新 彊 ウ イ グ ル 自 治 区 ウ ル ム チ830⑪52 3)大 阪 府 立 農 林 技 術 セ ン タ ー 大 阪 府 羽 曳 野 尺 度583‑0682

果 実 の 腐 敗 と と も に 、 脱 粒 が 大 き な 問 題 な っ て い る 。 収 穫 後 の ブ ドウ 果 実 の 脱 粒 は 主 と して 果 実 の 生 理 変 化 に起 因 す る も の と考 え ら れ て き た が 、1994〜1996年 の3年 間 に わ た っ て 、 筆 者 ら が 中 国 新 彊 ウ イ グ ル 自 治 区 の 出 荷 ブ ドウ に つ い て 、 長 距 離 輸 送 及 び 長 期 間 貯 蔵 中 の 保 鮮 紙(腐 敗 防 止 用)包 装 効 果 を調 べ た 結 果 、 ブ ドウ の 品 種 に 関 わ り

な く、高 い 防 止 効 果 が 認 め られ た こ とか ら, 菌 類 に よ る 腐 敗 ・脱 粒 が 極 め て 重 要 な 品 質 劣 化 要 因 で あ る こ とが 明 ら か に な っ た16〔8)。

さ ら に 、筆 者 ら は1997年 か ら1998に か け て 、 岡 山 県 、 奈 良 県 、 大 阪 府 及 び 三 重 県 の ブ ド ウ の 腐 敗 果 実 か ら、Boay廊,αado8po加m,

, Kinki University Nara 631-8505 Japan

Xin-Jian Agricultural University Urumqi 830052 China

Osaka Prefectural Agricoltoral and Forestry Reseach Centre , Osaka 583-0682 , Japan.

98 近 畿 大 学 農 学 部 総 合 研 究 所 報 告 第7号(1999)

Alternaria,Pestalotiopsls,Fusarium, Rhzizopus,Aspergilus,Stemphylium,

Penicilliumな ど9属 の 糸 状 菌 を 分 離,同 定 す る と と も に 、 そ れ ら の 腐 敗 歯 が 栽 培 圃 場 に 広 く 分 布 し 、 収 穫 後 の 果 実 の 腐 敗 ・脱 粒 を 原 因 と す る 可 能 性 が 高 い こ と を 指 摘 し た '7・19)

。 こ の よ う な 観 点 か ら 、 本 研 究 で は 長 期 間 貯 蔵 中 の ブ ド ウ 果 実 脱 粒 の 主 因 を 明 ら か に す る こ と を 目 的 と し て 、 脱 粒 に 関 与 す る 病 原 菌 を 特 定 す る と と も に 、 そ れ ら の 菌 に よ る 感 染 脱 粒 及 び 生 理 的 な 脱 粒 を 形 態 的 に 分 類 し 、 ま た 、 有 効 な 防 除 法 に つ い て 検 討 を 行 っ た 。

材料及び方法

大 阪 府 立 農 林 技 術 セ ン タ ー 果 樹 圃 場 で 路 地 栽 培 さ れ た ブ ド ウ̀巨 峰'(Kyoho),

̀マ ス カ ッ ト ・ベ ー リ ーA'(Muscat

BaileyA)及 び 大 阪 府 南 河 内 果 樹 園 で 収 穫 し た̀デ ラ ウ ェ ア'(Delaware)及 び 大 阪 府 、 奈 良 県 内 の 小 売 店 で 採 集 し た 脱 粒 果 実 を 実 験 に 供 試 し た 。 実 験 は 平 成8年6月 か ら9年 度12月 に か け て 行 わ れ た 。

脱 粒 に 関 与 す る 糸 状 菌 の 分 離 及 び 脱 粒 検 定 糸 状 菌 は 、 脱 粒 ブ ドウ の 果 帯 及 び 果 粒 か ら分 離 した 。 分 離 に あ た っ て は 、 こ れ らの 組 織 上 に 形 成 さ れ た 胞 子 を 直 接 分 離 す る 方 法 並 び に70%タ ノ ー ル(30秒)と1%次 亜 塩 素 ナ ト リ ウ ム(1分)で 表 面 殺 菌 した 組 織 を 培 地 上 に 置 床 し、 培 養 す る 方 法 を併 用 し た 。 分 離 に は 、PDA平 板 培 地 を 用 い 、 25℃ で 培 養 し た 。 ま た 、 分 離 菌 の 病 原 性 の 検 定 は 分 離 菌 株 をPDA培 地 上 で 培 養 後 、4

㎜ の デ ィ ス ク に打 ち抜 い た 菌 叢 を 表 面 殺 菌 し た 果 粒 表 面 ま た は 果 帯 部 に 接 着 さ せ て 接 種 し た 。 接 種 に は 、 有 傷 及 び 無 傷 接 種 を併 用 し、 分 離 菌 の 脱 粒 へ の 関 与 に つ い て 検 定 し た 。 病 原 菌 接 種 果 実 ・果 帯 は 湿 室 状 態 に 保 ち 、25℃ 及 び5℃ で20日 間 保 蔵 して 、 脱 粒 状 況 を調 査 した 。

エチ レン処理及び菌接種

生理 的な脱粒 と病原菌感染 に よる脱粒 を

比 較 す る た め 、 生 理 的 な 脱 粒 を 誘 発 す るエ チ レ ン処 理 を行 っ た 。 ま ず 、 果 房(デ ラ ウ ェ ァ)を70%エ タ ノ ー ル に30秒 間 、1%次 亜 塩 素 酸 ナ ト リ ウ ム 液 に60秒 間 浸 漬 し た 後 、 滅 菌 水 で3回 水 洗 し て 表 面 滅 菌 し た 。

果 房 を風 乾 した 後 、200倍 に 希 釈 し た エ テ ホ ン に90秒 間 浸 漬 し た 。 病 原 菌(Botrytis crnerea)接 種 は 表 面 減 菌 果 房 の 果 帯 を胞 子 懸 濁 液(0.7×106)浸 潤 脱 脂 綿 で 包 被 して 行 っ た 。 ま た,エ チ レ ン処 理 と菌 接 種 を 同 時 に行 っ た 区 及 び 無 処 理 対 照 区 を 設 け た 。 各 処 理 に は4房 つ つ(25‑30粒/房)を 用

い 、25℃ 湿 室 状 態24日 間 静 置 で 脱 粒 の 進 展 を観 察 した 。

収 穫 前 の 殺 菌 処 理 及 び 収 穫 直 後 の 保 鮮 紙 包 被 処 理

防 菌 処 理 の 脱 粒 抑 制 効 果 を 確 認 す る た め 、 収 穫 前 の 殺 菌 剤 散 布 及 び 収 穫 直 後 に お け る 保 鮮 紙(筆 者 らが 考 案 し たSO、発 生 紙is>) 包 装 を行 っ た 。 供 試 ブ ドウ 品 種 は̀マ ス カ

ッ ト ・ベ ー リーA'及 び̀巨 峰'で あ っ て 、 各 処 理 区 に は8果 房 を用 い た 。 殺 菌 剤 処 理

に あ た っ て は 、 ロ ブ ラ ー ル 水 和 剤1000倍 希 釈 液(イ プ ロ ジ オ ン500μ91ml)を 収 穫65

日及 び9日 前 に 一 旦 果 実 袋 を は ず した 果 房 に 噴 霧 し、 風 乾 後 、 再 び 果 実 袋 を 被 せ た 。 収 穫 後 に そ れ ら果 房 を5℃ で2カ 月 間 貯 蔵

した 。 ま た 、 保 鮮 紙 被 覆 処 理 貯 蔵 実 験 に つ お い て は 、 無 処 理 果 房 を保 鮮 紙 に包 ん だ後 に 、 ポ リ エ チ レ ン袋 に密 閉 し、 相 対 湿 度 を 95%以 上 、5℃ と した 保 冷室 に2ヶ 月 間 貯 蔵 し た 。 な お 、 保 鮮 紙 は 貯 蔵1ヶ 月 後 に交 換 し た 。 殺 菌 剤 無 処 理 区 を対 照 と して,こ れ ら ブ ドウ 果 実 の 脱 粒 な ら び に腐 敗 の状 況 を 観 察 し,そ の 発 生 率(果 房 あ た りの脱 粒 及 び 腐 敗 粒 数 の 割 合)を 調 査 す る と と も に, 脱 粒 形 態 に つ い て 観 察 し た 。 ま た 、 脱 粒 果 実 か ら は 前 述 の 方 法 に よ っ て 糸 状 菌 の 分 離 を試 み た 。

脱 粒 果 房 組 織 の 電 子 顕 微 鏡 観 察

Botrytlscinerea感 染 に よ っ て 腐 敗 脱 粒 し た̀マ ス カ ッ ト ・ベ ー リ ーA'の 果 帯 部 及 び 果 粒 を 固 定 液(4%グ ル タ ー ル ア ル デ ヒ

許 ・草 刈 ・豊 田 ・大 内:貯 蔵 中 に お け る ブ ドウ果 実 脱 粒 へ の 糸 状 菌 の 関与 99

ドを 含 む0.1M、PH7.0カ コ ジ ル 酢 酸 緩 働 液) で8時 間 固 定 し た後 、 エ タ ノ ー ル ・ア セ ト

ン シ リ ー ズ で 順 次 脱 水 し、 常 法 に よ っ て 酢 酸 イ ソ ア ミ ル に 置 換 し て 、Co、 中 で 臨 界 点 乾 燥 した 。 そ の 後 、 走 査 電 子 顕 微 鏡(日 立 H‑530)を 用 い て 、 果 帯 部 及 び 果 粒 組 織 に

お け る病 原 菌 の 分 布 状 況 を 観 察 した 。

実験結果

脱 粒 へ の 糸 状 菌 の 関 与 と そ の 特 定

出 荷 及 び 貯 蔵 中 脱 粒 果 実 の 果 帯 ・果 粒 か ら は 、Botrytiscinerea,Alternariasp.,

Rhizopusstolonifer,Stemphyliumsp., Pestalotiopsismenezesiana,Cladosporiurnsp.

の6属 糸 状 菌 が 分 離 さ れ た 。 特 に 、

Botrytiscinereaの 分 離 頻 度 は 極 め て 高 く 、 次 い で 、Alternaria菌 の 分 離 頻 度 が 高 か っ た 。 RhzrzopUssfoloniferは 、 常 温 貯 蔵 に 限 っ て 検 出 さ れ た 。 ま た 、Stemphyliumsp.の ほ か 、 稀 にPestalotiopsis及 びCladosporium属 菌 が 検 出 さ れ た 。 そ れ ら の 菌 を 健 全 な̀マ ス カ ッ ト ・ベ ー リ ーA'果 実 に 有 傷 及 び 無 傷 接 種 し た と こ ろ 、 い ず れ の 菌 株 に つ い て も 有 傷 無 傷 に か か わ ら ず 果 実 内 に 侵 入 す る こ と

が 明 ら か に な っ た(Table1)。B.cinereaの

有 傷 接 種 で は25℃ で6日 後 、5℃ で12日 後 に 果 実 の 脱 粒 が 発 生 し、Alternaira属 菌 で は 5℃ で15日 後 に 脱 粒 は認 め ら れ た 。 無 傷 接 種 し た 場 合 に は 、 両 菌 と も25℃ で14口 、

5℃ で20日 後 に 脱 粒 が 観 察 さ れ た 。 そ の 他 の 分 離 菌 株 に つ い て は 低 温 に お い て 菌 糸 の 侵 入 が 認 め ら れ た も の の 、 実 験 期 間 中 の 脱 粒 は ほ と ん ど観 察 さ れ な か っ た 。 ま た 、 低 温 貯 蔵 に お い て はB.clnerea菌 と.4漉ma加 属 菌 が 主 要 な 脱 粒 誘 導 菌 で あ る こ とが 明 ら か

に な っ た 。

R.stolonifer菌 は25℃ で は 付 傷 の 有 無 に か か わ らず 、5日 間 以 内 に 激 し い 脱 粒 を 起 こ し た が 、5℃ 貯 蔵 で は 脱 粒 が 全 く発 生 せ ず 、 菌 糸 の 進 展 も観 察 さ れ な か っ た こ とか ら、 本 菌 は 高 温 型 脱 粒 誘 導 菌 で あ る こ とが 示 唆 さ れ た 。 ま た 、Stemphy∬rum及 び Pestalotiopsis属 菌 は25℃ で 有 傷 接 種 した 場 合 に 限 っ て 脱 粒 を 起 こ した こ とか ら、 一 般 に こ れ ら の 菌 の 脱 粒 活 性 は 低 い と考 え た 。 一 方、Cladosporium属 菌 接 種 の 場 合 に は 、 健 全 な 果 実 に 菌 糸 の 侵 入 は 観 察 さ れ た もの の 、 有 傷 接 種 し た 場 合 で も果 実 の 脱 粒 は全 く起 ら な か っ た こ とか ら 、 本 菌 は 果 実 の 脱 粒 に は 関 与 し な い と考 え た 。

TablelIsolationfrequencyoffungifromdroppedberriesandtheirrelationshiptotheberryshattering

lsolated fungi

IsolationInjured freuency1)25°C5°C

Non‑injured

25°C S°C

IVZ'DB'?DY舶IVDBDY IVDBDYIVDBDY

Botrytiscinerea Altemariasp.

Rhizopusstolonrfer Stemphyliumsp.

Pestalotiopsis mellezesrana

αa伽 ρo加 加sp・ ・

十十十 十十

5) 十 十

±

± +++士±

+++++

b 6 3 10 12

十十

÷十++

]2 15 20 20

za

+‑20+‑20

+++一.

+++++

14 14 S 20 as

+±

十十++

20 ZO ao 20 20

+‑20+‑20

1)Isolationfreuency

±:Occasuionallkyisolated,十:Fregventlisolatey,++:isolatedatahighexfrequency, +++:Mostfrequentlyisolated.

2)IV;FungalInvasionintoberrytissues.

3)DB:Shattringofberries.

4)DY:Daysobservedofberryshattering.

5)Observedonlyofberryclustersstoredatroo皿temperature.

goo 近 畿 大 学 農 学 部 総 合 研 究 所 報 告 第7号(1ggg)

収 穫 後 に お け る エ チ レ ン 処 理 及 び 菌 接 種 が 果 実 の 脱 粒 に 及 ぼ す 影 響

ブ ドウ 果 実 に エ チ レ ン処 理 ま た は 菌 接 種 を行 っ て 、 そ れ ら が 脱 粒 に 及 ぼ す 影 響 に つ い て 検 討 し た 。 エ チ レ ン 処 理 し た 、̀デ ラ ウ ェ ア'果 実 を25℃ に 貯 蔵 した 場 合 、15日 後 か ら脱 粒 が 始 ま り、24日 ま で に53.2%が 脱 粒 した(Fig.1)。 た だ し、 こ の 場 合 の 脱 粒 で は 果 帯 に 明 瞭 な 離 層 が 形 成 さ れ て お り、 通 常 の 生 理 的 な 脱 粒 と 区 別 が で き な か っ た(PlateI‑A)。 一 方 、‑Botrytlscinerea菌 を 接 種 し た 場 合 に は 。 接 種12日 目 に は 1.5%、24日 間 後 に は28.4%脱 粒 した が 、 そ の 果 粒 離 脱 面 の 形 態 は エ チ レ ン処 理 の 場 合 と は 全 く異 な り、 果 帯 に 果 肉 の 一 部 が 付 着 して い た 。 さ ら に 、 エ チ レ ン処 理 と菌 接 種 を 同 時 に 行 っ た 場 合 に は 、12日 後 に4.1%、

24日 間 後 に は61.2%の 脱 粒 が 認 め ら れ た 。 な お 、 滅 菌 果 房 の エ チ レ ン無 処 理 及 び 無 接 種 対 照 果 実 に つ い て は 、 実 験 期 間 中 の 脱 粒

は 全 く観 察 さ れ な か っ た(Fig.1)。

(駅︾ωO旧﹂隔OΩ"O﹂﹄〇一一㊥̀ω

Incubationtimedays)

貯 蔵 中 に お け る 果 実 脱 粒 の 形 態 的 分 類 収 穫 し た 供 試 品 種 の 果 実 を 一 定 期 間 低 温 貯 蔵 し、 脱 粒 や 腐 敗 し た 果 粒 の 出 現 頻 度 を 調 べ る と と も に 、 そ れ ら脱 粒 に つ い て 形 態 的 分 類 を試 み た 。 貯 蔵 果 実 は 、 未 脱 粒 果 実 と脱 粒 果 実 に 分 け ら れ 、 未 脱 粒 果 実 に つ い て は 、 さ ら に 、 健 全 果 実 と腐 敗 果 実 に 分 類 さ れ た 。 腐 敗 果 実 に つ い て は 、 果 帯 接 着 部 以 外 の 果 実 組 織 が 腐 敗 し、 腐 敗 進 行 後 も脱 粒 し な い も の が 認 め ら れ 、 こ れ を未 脱 粒 腐 敗 果 実 と した 。一 方,脱 粒 果 実 に つ い て は 、 果 帯 周 辺 部 に 病 原 菌 の 増 殖 が み ら れ 、 そ の

隣 接 果 肉 組 織 が 軟 化 崩 壊 し て 脱 粒 す る 「腐 敗 脱 粒 」(PlateI‑B)と 、 病 原 菌 に よ る 軟 化 症 状 は 認 め ら れ ず 、 生 理 的 老 化 に伴 っ て 離 層 組 織 が 形 成 さ れ て 脱 粒 す る 「生 理 脱 粒 」

(PlateI‑C)に 分 類 す る こ とが で き た 。 こ の 基 準 に 基 づ い て 、 貯 蔵2カ 月 後 に お け る 果 実 の そ れ ぞ れ の 割 合 を 求 め た 。そ の 結 果 、 殺 菌 剤 無 処 理 区 の 健 全 果 率 は̀巨 峰'で は 全 体 の8.4%,̀マ ス カ ッ ト ・ベ ー リ ーA'

で は 全 体 の 約385%で あ っ て(Table2)、

特 に 、 果 帯 部 周 辺 組 織 が 軟 化 崩 壊 して い る

Fig.1Frequencyofgrapeberryshatterduringstorage fromfruitclusterstreatedwithethyleneor inculatedwithBotrytiscinerea.

GrapeclustersofcultivarDelawareweresterilized, dippedindilutedethephonsolutionoz'inoculated

withconidialsuspensionofBotrytiscinereaand incbatedat25for24days.

a.Treatedwithethylene,b.Inoculated, c.Ethylenetreatedandinoculated, d.Nontreatedcontrol

「腐 敗 脱 粒 」 の 割 合 が 著 し く高 く(PlateI‑

D)、 そ れ が 貯 蔵 期 間 中 に お け る 果 実 脱 粒 の 主 因 で あ る と考 え ら れ た 。 そ こ で 、 「腐 敗 脱 粒 」 した 果 実 の 果 帯 部 お よ び そ の 周 辺 の 果 粒 組 織 か ら 糸 状 菌 の 分 離 を 試 み た と こ ろ 、Botrytis,Altemaria属 菌 が 高 頻 度 に分 離

さ れ た 。 ま た 、 脱 粒 果 実 の 果 帯 及 び そ の 隣 接 果 実 組 織 を 走 査 型 電 子 顕 微 鏡 で 観 察 した

と こ ろ 、 菌 は果 帯 の 表 皮 組 織(PlateII‑A,B) あ る い は 髄(Platell‑A,C)や 維 管 束(Plate

II‑A,D)に ま で 侵 入 して お り、 脱 粒 後 の 時 間 が 経 過 し た もの で は 果 肉 組 織 に お い て も 顕 著 な 菌 糸 の 生 育 が 観 察 さ れ た(Platell‑E)。

A' • V-Al.1• t- .111 • krAi : VAT-RIA'Nor).i?:; ^1- 101

Plate I Morphological characteristics of berry shattering due to fungal infection or ethylene treatment and protection of grape clusters by

preharvest spray of fungicide and posyharvest rapping with a SO,

generating paper

A : Grape cluster treated with ethephone (cv. Delaware).

B : Bourrelet from which berry was shatterred. Note the remnant of pericarp of dropped berry (cv. Muscat Bailey A). AL ;: Abscision

layer, BL : bourrelet.

C : Bpurrelet from which berry wad dropped. Note the abscision layer formation at the center (cv. Muscat Bailey A). MC : mesocarp,

BL : bourrelet.

D : Grape clusters stored at 25°C for 2months. Berries were covered by fungal mycelia and more than 90% of them were decayed and /or chatterred (cv. Kyoho).

E : Grape clusters sprayed with Rovral (iprodione, 500/i g/ml) 15days before harvest and incubated at 25°C for 2months

(cv.Kyoho).

F : Grape clusters rapped after harvest with a S02-ganerating paper and incubated at 25°C for 2months. No shatterring was observed

during the exerimental period (cv. Kyoho).

102 ri- at:k '-'-- t _- f? -1-f17)4s. iNNt,Oiiti:c-- ,A 7 -rf-- (1999)

Plate Scanning election micrographs of filamentous phytopathogenic fungi developed in bourrelet (A-D) and mesocarp (E) of dropped fruit of 'Muscat Bailey A'.

B, C and D represent enlarged photographs of outer surface (indicated by arrow I in bourrelet (A), pith (arrow 2) and vascular bundle (arrow 3) in a transverse section (A) of bourrelet, respectively. Bars in A and B-D represent 500 and 50,u m, respectively.

許 ・草 刈 ・豊 田 ・大 内:貯 蔵 中 に お け る ブ ドウ 果 実 脱 粒 へ の 糸 状 菌 の 関 与 103

Table2 Thedecayanddroppingofgrapeberries'duringstorageasaffectedbythepreharvest treatmentwithafungicideorpostharvestrappingwithSO,‑generatingpaper CultivarsFungicides

treated

Droppedberries(%) Ab)BC)

Non‑droppedbemes(%) healthydecayed

Kyohonon‑treatedcontrol iprodioneの SOZ‑generatingpaper̀s

56.6 2.4 0.5

4.9 6.8 3.8

8.4 83.3 95.3

30.1 2.5 0.4 Muscatnon‑treatedcontrol

BaileyAiprodione

SO2‑generatingpaper

10.9 0.6 0.2

4.8 3.2 2.6

38.5 9b.0 97.2

45.8 a.z O

a)Fruitsclusterswereclassifiedintonon‑droppedanddroppedonesandthelatterwasfurther subdivedintotwotypesonthebasisofmorphologyofbourreletasshowninPiateI,BandC.

b}A:Berrydroppingwithdecay.

c)B:Droppingofhealthy‑lookingberries.

d)Grapeclustersinfieldweresprayedwithrovralsolution(500μg!mliprodione)65daysandg daysboforeharvestingandstoredat5°Cfor2months.

e}HarvestedgrapeclusterswererappedinaSOz‑generatingpaper,sheeldinplasticbagsand storedat5°Cfor2months.

殺 菌 剤 の 圃 場 散 布 及 び 保 鮮 紙 包 装 が 貯 蔵 中 の 果 実 脱 粒 に 及 ぼ す 影 響

収 穫 前 の イ プ ロ ジ オ ン剤 の 圃場 散 布 及 び 貯 蔵 直 前 の 保 鮮 紙 包 装 が 収 穫 後2カ 月 間 の 貯 蔵 果 実 脱 粒 に 及 ぼ す 影 響 に つ い て 調 べ た と こ ろ 、 各 防 菌 処 理 に よ っ て 腐 敗 果 粒 が 顕 著 に 減 少 す る と と も に 「腐 敗 脱 粒 」 も著 し

く減 少 した(Table2)。 イ プ ロ ジ オ ン を 圃 場 散 布 し た̀巨 峰'と̀マ ス カ ッ ト ・ベ ー リWA'で は 「腐 敗 脱 粒 」 が そ れ ぞ れ2,4%

と0.6%で あ っ た 。 特 に 、 保 鮮 紙 包 装 で は 両 品 種 の 「腐 敗 脱 粒 」 は ほ ぼ 完 全 に 抑 制 さ れ 、̀巨 峰'で は0.5%、̀マ ス カ ッ ト ・ベ ー リ ーA'で は0 .2%で 脱 粒 す る に止 まった 。 無 処 理 果 の 「腐 敗 脱 粒 」 率 が̀巨 峰'で は 56.6%、.̀マ ス カ ッ ト ・ベ ー リ ーA'で は 10.g%で あ っ た こ と と比 較 す る と,収 穫 前 殺 菌 剤 散 布 及 び貯 蔵 前 の 保 鮮 紙 防 菌 処 理 は

「腐 敗 脱 粒 」 を 有 効 に 抑 制 す る こ と を示 し て い る(PlateII‑D,E,F)。 一一方 、 離 層 形 成 に よ る 「生 理 脱 粒 」 果 実 の 割 合 は 防 菌 処 理 の 有 無 に か か わ ら ず 低 く、 ほ ぼ 一 定 で あ っ た 。 ま た 、 ブ ドウ 品 種 に よ っ て 、 脱 粒 の 程 度 は 異 な る 。 例 え ば 、2カ 月 間貯 蔵 に お け る 無 処 理̀巨 峰'の 「腐 敗 脱 粒 」 率 は̀マ

ス カ ッ ト ・ベ ー リ ーA'の5.1倍 で あ っ て 、

̀マ ス カ ッ ト ・ベ ー リ ーA'が 耐 貯 蔵 性 が 高 い こ と を 示 し た(Table2)。

考 察

一 般 に

、 植 物 の 葉 、 花 、 果 実 な ど の 離 脱 に つ い て は 生 理 的 老 化 に起 因 す る 現 象 と考 え ら れ て お り、 植 物 ホ ル モ ン で あ る エ チ レ ン や ア ブ シ ジ ン酸 な ど の 関 与 が 指 摘 さ れ て い る2,3,6,7,12,13)。収 穫 後 の ブ ド ウ果 実 の 脱 粒 に つ い て も主 と して 果 実 の 生 理 的 要 因 に よ っ て 誘 導 さ れ る も の と考 え ら れ て お り、 そ れ ら過 程 の 阻 止 に よ る 脱 粒 防 止 の 研 究 が 行 わ れ て き た 。 例 え ば 、 岩 田4>は 収 穫 前 後 の

̀デ ラ ウェ ア'に2・4‑Dも し くはNAAを 噴 霧 処 理 し、 そ れ ら の 脱 粒 抑 制 効 果 を 認 め 、

酒 井 らIq1Dは 、̀巨 峰'の 果 房 に ヤ エ ナ リ種 子 か ら得 た エ チ レ ン生 成 阻 害 タ ンパ ク を 処 理 し て 果 実 脱 粒 の 抑 制 に 成 功 し て い る 。 山 本21)は̀マ ス カ ッ ト ・ベ ー リ ーA'の 開 花 時 の 花 穂 に ジ ベ レ リ ン を 処 理 し、 収 穫 果 房 を低 温 高 湿 下 に 保 存 し た 場 合 に 、 果 梗 の 水 分 含 量 が 保 持 さ れ 、 果 粒 の 離 脱 抵 抗 力 が 強 化 さ れ る と 報 告 して い る 。 しか し な が ら 、

iO4 近 畿 大 学 農 学 部 総 合 研 究所 報 告 第7号(1999)

筆 者 ら は 、 貯 蔵 や 輸 送 中 ブ ドウ 果 実 の 脱 粒 状 況 か ら、脱 粒 に は 生 理 的 老 化 だ け で な く、

糸 状 菌 が 関 与 す る も の と考 え 、 本 研 究 に お い て は 脱 粒 の 主 因 を 微 生 物 学 的 に 明 ら か に した 。 す な わ ち 、 出 荷 及 び 脱 粒 し た 果 実 の 果 帯 や 果 粒 組 織 か らBotrytiscinerea, Alternariasp.,Rhyizopusstolonifer,

Stemphyliumsp.,Pestalotiopsismenezesiana, Cladosporiumsp.の6属 糸 状 菌 を分 離 ・同 定 す る と と も に 、 そ れ ら分 離 菌 を ブ ドウ 果 実 に 接 種 し て 、 脱 粒 率 を 調 べ た 。 そ の 結 果 、 B.cYnerea,Alternaria,Rhzizopus属 菌 接 種 果 実 に お い て は 、 菌 分 離 果 実 と同 様 の 腐 敗 ・ 脱 粒 症 状 が 再 現 され 、 そ れ らの 菌 が 脱 粒 に

関 与 す る こ と を 実 証 し た(Table1)。 脱 粒 に 関 与 す る 菌 は 貯 蔵 温 度 に よ っ て 異 な り 、 低 温 貯 蔵(5℃)で は 、 主 と し てBOtPytlS cinerea,Alternaria属 菌 が 、 常 温 輸 送(25℃

以 上)で は 、 主 にRhlfzqρロ88folonf允rカ§関 与 す る こ と が 明 らか に な っ た 。

本 研 究 で 分 離 さ れ た 糸 状 菌 は 、 い ず れ も ブ ドウ 栽 培 圃 場 に広 く分 布 す る病 原 菌 で あ る こ と が 知 ら れ て お り12,13)、圃 場 で 果 柄 や 果 帯 部 に付 着 した 病 原 菌 が 収 穫 前 ま た は 貯 蔵 期 間 中 に感 染 し、 果 帯 部 周 辺 の 果 肉 組 織 を軟 化 崩 壊 さ せ て 果 実 脱 粒 を 引 き起 こ す も の と考 え た 。 そ こ で 、 こ の よ う な 可 能 性 に つ い て 詳 細 に検 討 す る た め 、 収 穫前 殺 菌 剤 処 理 ま た は 収 穫 直 後 の 保 鮮 紙 包 装 の 果 実 の 脱 粒 ・腐 敗 抑 制 効 果 に つ い て 検 討 し た (Table2)。 貯 蔵 中 に 防 腐 処 理 した ブ ドウ果 実 に お い て は 、 供 試 品 種 に か か わ り な く、

果 実 腐 敗 や 脱 粒 が 著 し く軽 減 さ れ 、 貯 蔵 中 の 脱 粒 に は 病 原 菌 関 与 の 割 合 が 極 め て 大 き い こ と が 明 ら か と な っ た 。 ま た 、 脱 粒 は 病 原 菌 に よ る 脱 粒 と生 理 的 要 因 に よ る 脱 粒 と

に 区 別 さ れ 、 そ れ ぞ れ 「腐 敗 脱 粒 」 と 「生 理 脱 粒 」 と 命 名 し た 。 す な わ ち 、 前 者 の

「腐 敗 脱 粒 」 と は 、 果 帯 周 辺 部 で 病 原 菌 が 増 殖 し 、 そ れ に 隣 接 し た 果 肉 組 織 が 軟 化 崩 壊 す る こ と に起 因 す る 脱 粒 で あ り、 後 者 の

「生 理 脱 粒 」 に つ い て は 、 病 原 菌 に よ る 場 合 の よ う な 軟 化 症 状 は 認 め ら れ ず 、 収 穫 直 後 の 果 房 に エ チ レ ン処 理 し た 場 合 に 誘 起 さ れ る 脱 粒 と 同 様 の 形 態 的 変 化 を と も な う脱

粒 で あ る 。 従 っ て 、 こ の 場 合 に は 離 層 形 成 に よ っ て 誘 起 さ れ る 脱 粒 と定 義 さ れ た 。 離 層 形 成 に よ る 「生 理 脱 粒 」 の 率 は 、 殺 菌 剤 処 理 の 有 無 に か か わ らず 、 ほ ぼ 一 定 で あ っ た こ とか ら 、 貯 蔵 中 脱 粒 に は 生 理 的 老 化 に 起 因 す る脱 粒 も含 ま れ る と考 え た 。

な お 、 病 原 菌 接 種 とエ チ レ ン 処 理 の 効 果 につ い て 調 べ た と こ ろ 、 い ず れ の 場 合 に も 脱 粒 が 認 め ら れ 、 両 処 理 併 用 の 場 合 に は 、 そ れ ぞ れ の 単 独 処 理 に 比 べ て よ り高 頻 度 の 脱 粒 が 認 め ら れ た こ とか ら、 病 原 菌 感 染 に よ る エ チ レ ン生 成 促 進 の 可 能 性 も示 唆 され た 。 一 方 、 滅 菌 無 処 理 果 房 で は24日 間 脱 粒 は 全 く観 察 さ れ な か っ た こ とか ら 、 病 原 菌 が 存 在 し な い 場 合 に は 、 ブ ドウ果 実 の 内 源 エ チ レ ン に よ る 離 層 形 成 誘 導 脱 粒 に は か な りの 時 間 を 要 す る も の と 考 え た 。 従 っ て 、 長 期 間 貯 蔵 ・輸 送 中 の 脱 粒 抑 制 に は 腐 敗 防 止 が 極 め て 重 要 で あ る と考 え ら れ る 。 一一般 に 、 こ れ らの 脱 粒 に 関 与 す る 病 原 菌 に つ い て はペ クチ ナ ー ゼ な ど の 細 胞 壁 分 解 酵 素 を 生 産 す る こ とが 知 ら れ て お り1・5ρ)、さ ら に 、 jB。cinereaにつ い て は 、 ア ブ シ ジ ン酸 の 生 産

も報 告 さ れ て い る7)。今 後 は 、 本 研 究 で 分 離 した 菌 が 生 産 す る 諸 酵 素 の 同 定 とそ れ ら の 脱 粒 機 構 へ の 関 与 に つ い て 解 明 す る必 要 が あ る 。

以 上 の 結 果 か ら 、 収 穫 後 に お け る ブ ドウ 果 実 の 腐 敗 や 脱 粒 に は 糸 状 菌 が 深 く関 与 す る こ とが 明 ら か と な っ た 。 特 に 、 貯 蔵 中 に お け る 「腐 敗 脱 粒 」 は 「生 理 脱 粒 」 に 比 較 して 極 め て 多 い こ とか ら、 そ れ らの 防 止 に あ た っ て は 、 生 理 的 老 化 を 防 ぐだ け で は 不 充 分 で あ っ て 、 糸 状 菌 感 染 の 有 効 な 防 止 対 策 を確 立 す る こ とが 極 め て 重 要 で あ る と考 え られ る 。 一 方 、 ブ ドウ 品 種 の 耐 貯 蔵 性 に つ い て も十 分 に 吟 味 す る 必 要 が あ る 。 例 え ば̀マ ス カ ッ ト ・ベ ー リWA'は̀巨 峰' に比 べ て 腐 敗 や 脱 粒 の 発 生 率 が 低 く、 病 原 菌 に 対 す る 抵 抗 性 が 比 較 的 高 い も の と考 え

られ た 。 こ の よ う な 特 性 を考 慮 して 、 耐 病 性 の 強 い 品 種 を 栽 培 す る こ と に よ っ て 、 長 期 間 貯 蔵 や 長 距 離 輸 送 中 に お け る 脱 粒 を軽 減 す る こ と は 可 能 で あ る が 、 高 品 質 品種 の 場 合 に は 収 穫 前 殺 菌 剤 散 布 な ど の 防 菌 処 理

許 ・草 刈 ・豊 田 ・大 内:貯 蔵 中 に お け る ブ ドウ果 実 脱 粒 へ の 糸 状 菌 の 関 与 105

が必須 と考 え られる。

本研 究 を遂行す るにあた り、貴 重な実験 用 ブ ドウ材料 の提供 を頂 いた大阪府立農林 技術 セ ンター果樹室細見彰洋氏及 び実験遂 行 にあ たって支援 を頂 いた近畿大学農学総 合研 究所松 田克礼講師 に対 して厚礼 を申 し

上げ る。

摘 要

出 荷 及 び 貯 蔵 中 の ブ ド ウ 脱 粒 果 実 か ら Botrytiscinerea,Alternariasp.,Rhlizopus

stolonifer,Stemphyliumsp.,Pestalotiopses

menezesiana,Cladosporiumsp.の6属 糸 状 菌 を 分 離 し,そ れ ら の 接 種 実 験 か ら,主 に 脱 粒 に 関 与 す る 菌 はBotrytrscrnerea,Alternaria sp.,Rhlrzopusstoloniferで あ る こ と を 明 ら か

に し た 。 そ れ ら の 菌 が 関 与 し た 脱 粒 と 生 理 的 要 因 に よ る 脱 粒 を 形 態 的 に 区 別 し,そ れ ぞ れ 「腐 敗 脱 粒 」 と 「生 理 脱 粒 」 と し た 。

「腐 敗 脱 粒 」 に お い て は,果 柄 周 辺 部 で 病 原 菌 が 増 殖 し,そ の 隣 接 果 肉 組 織 が 軟 駕 崩 壊 し た が,「 生 理 脱 粒 」 に お い て は,病 原 菌 に よ る 軟 化 症 状 は 認 め ら れ ず,収 穫 直 後 の 果 房 を エ チ レ ン 処 理 し た 場 合 に 誘 起 さ れ る 脱 粒 と 同 様 な 離 層 形 成 が 観 察 さ れ た 。 エ チ レ ン 処 理 並 び に 菌 接 種 を 同 時 に 行 っ た 場 合 の 脱 粒 率 は 菌 接 種 の2倍,エ チ レ ン 処 理 の1.1倍 と な り,24日 後 に は 約60%に 達 し た 。 し か し,無 処 理 果 実 に お い て は,実 験 期 間 中 の 脱 粒 は 全 く観 察 さ れ な か っ た 。 こ

れ ら の 結 果 か ら.病 原 菌 の 感 染 は,「 腐 敗 脱 粒 」 の み な ら ず,「 生 理 脱 粒 」 に も 関 与 す る も の と 考 え た 。 一 方,長 期 貯 蔵 中 の 腐 敗 を 防 ぐ た め,ロ ブ ラ ー ル 水 和 剤(イ プ ロ

ジ オ ン500μ91ml)の 収 穫 前 散 布 及 び 保 鮮 紙 包 装 の 貯 蔵 効 果 を 比 較 検 討 し た と こ ろ, い ず れ の 処 理 に お い て も2カ 月 貯 蔵 期 間 中 果 実 の 腐 敗 は 抑 制 さ れ.顕 著 な 脱 粒 防 止 効 果 が 認 め ら れ た 。

引用文献

1)荒 井 ・基 夫(1995).カ ビ の セ ル ロ ー ス 分 解 酵 素 遺 転 子 群.日 本 農 芸 化 学 会 誌 69:358‑361.

2)Coombe,B.G.andC.R.Hale(1973).

Thehormonecontentofripeninggrape berriesandtheeffectofgrowthsubstance treatments.PlantPhysiol.51:629‑634.

3)Goto.1VI.,Y.YaguchiandH.Hyodo (1980).Ethyleneproductionincitrus leavesinfectedwithXanthomonascitrr anditsrelationtodefoliation.Physiol.

PlantPathol.16:343‑350.

4)岩 田 隆(1958).ブ ド ウ の 脱 粒 防 止

に 対 す る 生 長 物 質 の 効 果.農 業 お よ び 園 芸32:1703‑1704.

5)北 本 則 行 ・塚 越 規 弘(1995).カ ビ の

ペ ク チ ン 分 解 酵 素 遺 伝 子 群.日 本 農 芸 化 学 会 誌69:369‑372.

6)小 林 章(1970).ブ ド ウ 園 芸.p.284.

養 賢 堂.東 京.

7)Marumo.S.,M.Katayama,E.Komoriand Y.Ozaki(1982}Microbialproduction ofabscisicasidbyBotrytiscinerea.Agr.

Biol.Chem.46:1967‑1.968.

8>松 井 弘 之 ・湯 田 英 二 ・ 中 川 昌 一 ・米 森

敬 三(1980).ブ ド ウ̀デ ラ ウ エ ア'

果 実 の 成 熟 生 理 に 関 す る 研 究(第2 報).園 芸 学 会 雑 誌48:405‑412.

9)大 内 成 志(1990).植 物 感 染 生 理 学.

(西 村 正 陽 ・大 内 成 志 編),pp.1‑58,文 永 堂 出 版,東 京.

10)酒 井 慎 吾 ・馬 場 赴 ・大 田 保 夫(1977).

エ チ レ ン 生 成 阻 害 蛋 白 に よ る ブ ド ウ 巨 峰 の 脱 粒 防 止 の 効 果 に つ い て.農 学 研 究56:217‑223.

11)酒 井 慎 吾 ・馬 場 赴 ・太 田 保 夫(1978).

エ チ レ ン 生 成 阻 害 蛋 白 に よ る ブ ド ウ の 脱 粒 防 止 効 果 に つ い て(II).農 学 研 究57:197‑202.

12)高 橋 信 孝 ・増 田 芳 雄(1994).植 物 ホ ル モ ン ・ ハ ン ド ブ ッ ク.pp.161‑202.

培 風 館,東 京.

106 近 畿 大 学 農 学 部 総 合 研 究所 報 告 第7号(1999)

13)和 田 ア イ 子(1992).落 葉 に お け る 離 層 形 成 過 程 と 細 胞 化 学.化 学 と 生 物.

5:325‑324.

14)王 近 衛 ・堀 内 昭 作 ・尾 形 凡 生 ・松 井 弘 之(1993).ブ ド ウ 無 核 果 形 成 と 内 生 植 物 ホ ル モ ン の 関:連.園 芸 学 会 雑 誌 62:9‑14.

15)謝 春 陽 ・謝 徳 聖 ・溢 彰(1991).葡 萄 充N、,滅 圧 処 理 貯 蔵 効 果.果 樹 科 学 8:100‑1.02.

16)許 玲 ・宋 啓 軍 ・王 吉 徳(1996).葡 萄 保 鮮 紙 対 新 彊 鮮 葡 萄 貯 運 保 鮮 的 効 果.

中 国 果 樹3:26‑29.

17)許 玲 ・豊 田 秀 吉 ・大 内 成 志 ・草 刈 真 一 (1997).収 穫 後 の ブ ド ウ 果 実 か ら 分 離 さ れ る 糸 状 菌 類 と 果 実 腐 敗 ・脱 粒 へ の 影 響.関 西 病 虫 研 報39:35‑36.

18)許 玲 ・豊 田 秀 吉 ・松 田 克 礼 ・草 刈 真 一 ・大 内 成 志(1998)

.保 鮮 紙(亜 硫 酸 ガ ス 発 生 紙)利 用 に よ る ブ ド ウ 貯 蔵 病 害 の 防 除.近 大 農 総 研 報6:109‑

113.

19)許 玲 ・豊 田 秀 吉 ・大 内 成 志 ・草 刈 真 一 (1998).殺 菌 剤 散 布 に よ る ブ ドウ 果 実 の 収 穫 後 腐 敗 の 防 止.関 西 病 中 研 報 40:65‑68.

20)山 村 宏 ・斉 藤 寛(1989).ブ ド ウ

̀デ ラ ウ エ ア'果 皮 組 織 の セ ル ラ ー ゼ 滑 性 に 及 ぼ す ジ ベ レ リ ン の 影 響.島 根 大 農 研 報23:7‑10.

21)山 本 喜 啓(1989).ブ ド ウ の 脱 粒 防 止 法 へ の 知 見.島 根 女 子 短 大 紀 要 27:155‑163.