組織内分布 動 変 ( )値 陽性細胞 内分泌環 境 変化 伴 う 乳癌

金沢大学十 全医 学会雑 誌 第9 1巻 第5 号 6 95‑^{て1 3 (1 9 8 2)}

内分 泌 環境^{変 化 に}伴う ^ラ ッ ト乳 癌 ^{の エ ス トロ ゲ ン}

レ セ プ タ ^ー (^{E R}) 値^{お よび E R} 陽性 細 胞^の 組 織 内分 布 ^の変動

金沢 大学 医学 部 外科 学 第二講座 ( 指 導^:宮 崎 逸 未教 授)

桧 葉 明

(昭和5 7年9 月² 日受 付)

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卵摘や^エスト ラ ジ オ^{ー ル} (Estr ad iol) 投 与等の内 分泌 環 境変 化^に伴 う乳 癌の^エスト^ロゲン レ セプ タ

ー (Estr oge n r e c ep t^{o r,} 以 下E R と略) 価お よ び E R 陽性 細 胞の組 織 内 分布の変 動を 7, 12 ^‑ジ メ チル ベ

ンズ ア^ントラ^{セ ン} (7,1 2 ^‑d im ethylbe n z(a) anthr a c e n e) 誘 発ラット乳 癌^{をモデルと し て デ キスト ランチ}

ャ^ー コ ^ー ル(De xtr a n ^‑ C O atedcha r c o al) 法^によ る E R 測 定と著 者ら の開発し た凍 結切 片^の3H ^‑エスト ラ ジオ^{ー ル}オ^ー ト ラ ジ オグラフ イ によ り検 討し た. 腰 痛の卵 摘 効 果は有効, 中間, 無 効の 3 群^に分け ら れ た.

卵摘時^に切 除 ( 部 分切除) さ れ た腰 痛 ( 初回腰痛) ^{で は}有 効 群と中間 群の両者 間^にE R の有 意 差は認め ら れ な か^った が, E R 陽性 細胞 分 布^に若 干の相 違が認め ら れ た^. 即ち, 前 者の腰 痛は E R 強 陽性お よ び弱 陽性 細胞から な り, 後者^の腫瘍^にはこれ らの E R 陽性 細 胞の他, E R 陰性細胞の混 在が認め られ た^･卵摘 後1週で は 開 扉^{およ び}中間群^{のE R} 値は有意^に低 下し, 組織学 的に多発性の壊死 や義胞形成が認め られ た^･ E R 強陽性細胞は これ らの変性組湖周 辺^{に の}み限局して観察さ れ E R 強 陽性 細 胞集 団が卵 摘^によ り壊 死に陥った と考え ら れ た･

ま た, 卵摘後1 0過 迄に有 効 群の大 部 分の腰痛は消 失し, 中 間群の腫 瘍は再 増大を 示 し た が, そ の E R 値は 更^に低 下する傾 向を示 し,初回 E R 陽 性 腰痛の 64% が卵 摘後1 0週 迄^に E R 陰 性^へと変化し た･ これ ら の E R

陰性 化した腫瘍 組 織^の殆ん どが E R 陰性 細 胞で占め ら れ た が,な お少 数の E R 強 陽性細 胞の残存が観 察さ れ,

更^にエスト ラ ジ オ ^{ー ル}(_{10 鵬}/ 遇^×4週) 投 与 後1 遇で は腰 痛の E R 値の有 意な 上昇と共に E R 強 陽性 細 胞 分布の増加が認め ら れ た.

一方, 無 効 群の腰痛には E R 陽性 細 胞は殆ん ど認め ら れず, そ の E R 値も卵 摘や

ェスト ラ ジ オ ^{ー ル}投 与の影 響を受けず 初回 よ り低 値の ま ま推 移し た^. 以 上よ り^, E R 陽性 腫 瘍は卵 摘^によ り E R 陽性細 胞が壊 死^に陥り^一旦締 少す る が, 混 在し た E R陰 性細 胞が残 存, 増 殖す る為腰 痛の陰性 化^およ び 再増大が起^こること が明ら かにな り,更^に腰 瘍の E R 陽 性細 胞の組 織 内 分 布を検 索す る^こと が乳癌の内分 泌 療法^の効果を 予測す る上に有用 であること が 示唆さ れ た^.

K ey ^{w o r}d^s M a m m a ry c a n c e r_, Estr og^{e n r e c e}p t^{o r}, H o r m o n al _the r ap y

18 96年Be ats o n^l)が末 期乳 癌 患 者^に対し て初め て卵 巣摘除術を施行し効 果を収め て以 来, 乳 癌は ホ^{ル モ ン} 依存性腫瘍と して認 識さ れ, 本疾 患の治 療と し て内 分 泌療法が手術, 放射 線お よ び化 学療 法 等と 並 び, 重 要 な位置^を占め ている. 即 ち, 主に進 行 乳 癌 あ^るいは再 発乳癌を対象と し て男性ホ^{ル モ ン}や大 量の女 性^{ホ ル モ}

ン投与^によ る内科 的 内分 泌 療法, あ るいは卵 巣, 副 腎,

下 垂体摘除術 等^{によ る}外 科 的 内分泌療 法が施 行さ れ て

いる^. し か し, これ ら の内分 泌 療法の効果は過去の多 数の報 告^から, 乳 癌全 体の約3 0% であること が明ら か と な り²⁾,残り の約7 0% ^の無効 例^に対して は無意 味な外 科 的浸 襲や副作用 を与え て^いた^ことにな る. 従^って,

乳癌^の内 分 泌 療法^の効 果を 予測す る^こと が今世 紀 初め からの懸 案であり, そ^の予測 方 法と し て種々 の試み が 成さ れ て き た^. 近 年,Je n s e n ら³⁾⁴⁾が 子宮な ど^のエスト

ロ ゲン(Estr oge n) 標 的臓 器^{にエストロゲン レ セプ タ}

Va riatio n of Estr og^{e n} R e c ep t^{o r}(^{E R}) ^{V alu e s a nd D istributio n s of E R P o sitiv e C ells} followi ng C ha ng^{e o}f H o r m o n al Statu s in D M B A^‑ind^{u c e}d R at M a m m a ry C a n c e r^･ A kir a

M ats uba_, Dep^{a r}tm e nt of Su rg^{e r}y (^ⅠⅠ)^,(^{D ir e cto r : Pr of.I. M iyazak i})^{, Sch o ol of M ed icin e,} Ka n aza w a u niv e r si_{t y}.

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ー (Estr og^{e n r e c e}p t^{o r,} 以下E R と略) が存 在す るこ と を発 見し, 更に ホ ル モ ン依 存 性の乳 癌 組織 内で の存 在も確 認さ れ る^に至^った⁵⁾⁶⁾. この E R 測 定⁷⁾が内 分泌 療 法^の効 果を予測し得る定 量 性お よ び再 現 性の高㌧^ゝ方 法 と し て評 価^{さ れ8)},最 近 広く臨 床に応用 さ れ て^いる. し か し な が ら, ヒト乳癌 全体^の E R 陽 性率は 5 0^〜60% で あり, ま た E R 陽性 乳 癌^の内 分泌 療 法 有 効例は そ の約 6 0% ^に過 ぎず,残り の約4 0% が無 効例である^こと も判 明し て き た^{2)9). こ}の原 因と して乳 癌 細 胞^の細 胞 質^にE R が存 在し て も^エ スト^ロ ゲンの細 胞 内で のホ ル モ ン作用 発現迄の過 程に障 害が あ れ ば腰 痛は ホル モ ン非 依 存 性

の状 態と な^{っ て い}ること が考え ら れ る^{1 0)I l).} そ の為,更

にエスト^ロゲン作 用発 現の m a rke r と して プ^ロジ^エステ

ロ ンレセプ タ^ー(Pr oge ste r o n e r e c ep to r, 以下P_gR と 略)^{1 2‑1札}や核 内の E R の測定^{1 5)1 6)へ} と発 展し ている. し

かし,^, これ ら の方法^によ る陽 性 例^にも依 然2 0 ^〜3 0% の 内分 泌 療法 無 効例が存 在し, 前 述の障 害 以外^に低 濃度 の^エスト^ロゲ^ン環境で も増 殖し得る E R 陽性 乳 癌が存在 す る可 能性も考え ら れて いる^{1 7)1 8)}

一 方, E R 陽性 乳癌^{は そ の}自然 経 過 中, E R が保 持さ れ る^こと が ^一般 的^に認め ら れ て^いる が^Ⅰ9),E R 陽性 乳 癌 が内 分 泌 療 法 後, E R 陰 性 ^へと変 化し得る^こと が臨 床^{2 0卜2 2)}並 びに動 物 実験^{2 3ト2 6)に}於^いて明ら か と な^って き た^{. こ}の現 象は E R 陽 性 乳癌^にも内 分泌 療 法 無効 例が存 在す る 理由の ^一 つと考え ら れ る と共に,

一旦内 分 泌療 法に奏効^し退 縮^{し た}乳 癌の多く が そ^の後ホル モ ン非依 存性と な り再 発す る原 因である と考え ら れ る.従って,

この E R 陽 性 乳癌が E R 陰性 化す る機 序を解 明す る^こ と は臨 床上 も重 要な課 題である と考え ら れ る.

そ^こで著者は ラット乳 癌を^モデルと し て内 分泌 環 境 の変化^に伴 う 乳癌E R の変 動を検 討し,更^に著 者^の考 案 し た凍 結 組 織切 片^{によ る3B}‑^エス ト ラ ジ オ^{ー ル} (³H‑

e str adiol) オ ^ー ト ラ ジ オ グ ラフ イを用^いて E R 陽性 細 胞の組 織 内分 布状 態を検 討し,E R 陽性 乳 癌の E R 陰性 化の機 序お よ び内分 泌 療法 効 果^{に つ い}て解 明を試み,

いく^つか

●

の興 味あ る知 見を得た の でこ こ に報 告す る.

材 料お よ び方法

Ⅰ. ラッ ト乳 癌作 成

Spr a ngu eDa wley 系雌 性ラッ ト( 生 後4 8 E], 体重 1 50 g 前後) ^に対し, 発癌 剤と し てゴマ油1 mlに溶 解 し た 7, 1 2 ^‑ジ メ チ^ルベ ンズ ア^ント ラ^{セ ン} (7, 1 2 ^‑ d im ethyl be n z(^a)^{a nt}he r a c e n e, 以 下D M B A と略) 1 0

m g を 2 週 間 隔で 2 臥 計2 0 m g を ア トムチ^{ュ ー} ブ 6 号

にて ラット胃 内^へ強 制 投 与し た. 投 与 終 了後4週以降 毎週1回視 触 診を行^い, 発 生し て き た腫瘍^の最大 径を 経 時的^に測 定し た.

I L 卵摘^およ び^エス ト ラ ジ オ ^ー ル 沌^str ad iol) 投与 と腫 瘍部 分切除

1 . 卵 摘と初回腰 痛 切 除

腫 癌の最 大 径が約2 c m に達し た時 点^{でエ ー} テ ル

(Ethe r) 麻 酔 下, 無 菌操 作^によ り, 約1/3の腫瘍部分 切 除と両 側の卵 巣 摘 除術を施 行し た.

2 ^. 卵 摘 後1週の腫 瘍 部 分切 除

次^に, 卵 摘 後1週で初回 と同^一 腫瘍の部分切除 (半 切 除) を行^った^.

3 ^. 卵 摘 効 果 判 定と卵 摘 後10 週^の腫 瘍切 除 卵 摘 後¹0 過で腫瘍^に対す る卵 摘 効 果を,① 卵摘有効 群 ( 卵 摘 後3 週以 上^にわ た り腰痛 径が縮 少し, その後 も増 大傾 向^のないも の) ②卵 摘 中 間群 ( 卵摘 後3遇以 上腫 瘍 径^が縮 小す る が,そ の後1 0週以内に再増大 する も の) ③ 卵 摘無 効 群 ( 卵 摘後も縮小傾 向が な^いか ある いは, 3週以内^に再増大す る も^の) ^の3 群^に分けて判定 す る と共^に, 腫 癌が残 存し て^いる も^{の に}対し更に腫瘍 部 分切 除を行った.

4 ^{. エ}スト ラ ジ オ ^{ー ル}投 与と腰 痛 切 除

卵摘 後10 週よ り,持続 性^{エ ス}ト ラ ジ オ ^ー ル である プ

ロギ ノ^ンデ ポ ^ー(Pr og y^{n o n}

‑Depot_, Sche ring社)を

1 0 _〟g遡1 臥 4 週 間 皮下注^にて投 与し,投与終了後1 週 ( 卵 摘 後^{1 4}週) お よ び 1 0週 ( 卵摘 後23 過) で同様

に腰 痛 部 分 切 除を行^った.

尚, 初回以 降の腰 痛 部 分 切 除は^いずれ も 腰痛の 切除 癖痕を避け て行^い, ま た腫 瘍切 離 端は 圧迫止 血 を充分 に行^い, 血 腫形 成^や縫 合 糸な どの異 物^を残さ^ぬように

配 慮し た^.

以上^の初回,卵 摘 後¹遇お よ び10 週の各段 階で得ら れ た腰 痛 組 織^を直ちに超 低 温 冷 蔵 庫 (Tabai P luto

fr e e z e rP F l l) ^{に て ‑}8 0^OCで凍結 保 存し, E R 測定^お よ び³B ^{‑ エ}スト ラ ジ オ^ー ルオ^ー ト ラ ジオ グ ラフ イ に供し た. ま た腰 痛の ^一 部を 1 0% ホルマ リン( F^{o r m a}Iin)^に 固 定し た後, H & E 染色 組織 標 本を作製し^て乳癌^であ ること を確 認し た^. 尚,

一 部の腰 痛^にみ ら れ た線椎腺 腫 等はこ の実 験 系か ら除外し た.

Ⅲ. デ キ^スト ラ^ンチャ ^ー コ ^ー ル(De xtr a n ^‑C O ated

cha r e o al, 以 下 D C C と略) 法^によるE R 測定

( 図1)

得ら れ た腫 瘍^の細 胞質E R を 以下の方 法で測定,算出 し た.

1 ^. Cy to s olの調 整

一^800C下^に凍 結保 存し た腰 痛 組 織 約0^.5 g を切出し ナ イフで細 切 衡 4倍量の T E Dp綬 衝 液[^{1 O m M トリ}

ス塩 酸 (Tris‑ ^{H C l}), 1 ^.5 m M ^エチ^{レ ン}ジ ア^{ミ ン}四酢 酸 (Ethyle n edia min e tetr a a c etic a cid) , 0･5mM D ithiothr eitol, 2 5 0 m M サッカ^{ロ ー ス}( S^{a c c}ha r o s e)･