顕微鏡観察技術を用いた近赤外蛍光プローブの腫瘍イメージング原理の解析に関する研究

Title

顕微鏡観察技術を用いた近赤外蛍光プローブの腫瘍イメー

_{ジング原理の解析に関する研究( 本文(Fulltext) )}

Author(s)

恩田, 伸彦

Report No.(Doctoral

Degree)

博士(獣医学) 乙第159号

Issue Date

2018-03-13

Type

博士論文

Version

ETD

URL

http://hdl.handle.net/20.500.12099/75238

※この資料の著作権は、各資料の著者・学協会・出版社等に帰属します。

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5 ࡟࠾࠸࡚㸪᭱ࡶ㇏ᐩ࡟Ꮡᅾࡍࡿࣉࣟࢸ࢔࣮ࢮࡢ㸯ࡘ࡛࠶ࡾ㸪᪩ᮇ⭘⒆ᛶ⑓ኚ࠿ࡽ⭘⒆㌿ ⛣ᕢ࡟⮳ࡿࡲ࡛㸪ከᵝ࡞⭘⒆⤌⧊࡛Ⓨ⌧ࡢஹ㐍ࡀሗ࿌ࡉࢀ࡚࠸ࡿ [58㸪91] ࠋࡲࡓ㸪⭘ ⒆⣽⬊ෆ࡛⏘⏕ࡉࢀࡓ࢝ࢸࣉࢩࣥB ࡣ㸪⣽⬊ෆࡢࣜࢯࢯ࣮࣒࠿ࡽ㸪⣽⬊⾲㠃࡟⛣⾜࠶ ࡿ࠸ࡣ⣽⬊እ࡟ศἪࡉࢀ࡚㸪⣽⬊እ࣐ࢺࣜࢵࢡࢫࢆศゎࡍࡿࡇ࡜࡛㸪⭘⒆⣽⬊ࡢᾐ₶ቑ Ṫ࡟㛵୚ࡍࡿࡇ࡜ࡶሗ࿌ࡉࢀ࡚࠸ࡿ [24㸪64] ࠋࡇࡢࡼ࠺࡟㸪࢝ࢸࣉࢩࣥ B ࡣ㸪ࡀࢇࡢ Ⓨ⏕࠿ࡽ㐍ᒎࡲ࡛ࡢ㐣⛬࡟࠾࠸࡚୰ᚰⓗ࡞ᙺ๭ࢆᯝࡓࡍࡇ࡜࠿ࡽ㸪໬Ꮫ⒪ἲࡸ໬Ꮫண㜵 ࡢ἞⒪ᶆⓗࡔࡅ࡛࡞ࡃ㸪ࡀࢇ࢖࣓࣮ࢪࣥࢢࡢᶆⓗ࡜ࡋ࡚ࡶ᭷⏝࡛࠶ࡿ࡜⪃࠼ࡽࢀࡿࠋ ࡇࢀࡲ࡛࡟㸪࢝ࢸࣉࢩࣥB ࡢάᛶࢆ᳨ฟࡍࡿࡇ࡜࡛㸪⏕యࡢ⭘⒆⤌⧊ࢆྍど໬ࡍࡿ ⺯ගࣉ࣮ࣟࣈࡀ」ᩘ㛤Ⓨࡉࢀ࡚࠾ࡾ [106㸪107] 㸪୍㒊ࡣ἞㦂࡟㐍ࢇ࡛࠸ࡿ [107] ࠋࡑ ࡢ୰࡛㸪Weissleder ࡽࡀ㛤Ⓨࡋࡓ⺯ගࣉ࣮ࣟࣈ [106] ࡣ㸪࢝ࢸࣉࢩࣥ B ࡀㄆ㆑ࡍࡿ࢔࣑ ࣀ㓟㓄ิ࡟」ᩘࡢ⺯ගⰍ⣲ࡀᾘග≧ែ࡛ᶆ㆑ࡉࢀ࡚࠾ࡾ㸪࢝ࢸࣉࢩࣥB ࡢάᛶࢆཷࡅ ࡚Ⰽ⣲ྠኈࡀ㞳ࢀ࡚ᾘගࡀゎ㝖ࡉࢀࡿࡇ࡜࡛㸪࢝ࢸࣉࢩࣥB ࡢάᛶࢆྍど໬࡛ࡁࡿタ ィ࡜࡞ࡗ࡚࠸ࡿࠋࡉࡽ࡟㸪ࡇࡢࣉ࣮ࣟࣈࡣ㸪࣏࢚ࣜࢳࣞࣥࢢࣜࢥ࣮ࣝࢆᶆ㆑ࡋࡓ࣏࣐ࣜ ࣮࠿ࡽᡂࡿࢼࣀ⢏Ꮚᙧ≧ࢆ࡜ࡗ࡚࠾ࡾ㸪యෆᚠ⎔᫬㛫ࢆ㛗ࡃࡋ࡚㸪⭘⒆࡬ࡢ㞟✚ᛶࢆ㧗 ࡵࡿࡼ࠺࡟タィࡉࢀ࡚࠸ࡿࠋ◊✲⏝࡟ᕷ㈍ࡉࢀ࡚࠸ࡿྠᆺࡢ⺯ගࣉ࣮ࣟࣈProSense ࡣ㸪 ࢝ࢸࣉࢩࣥB άᛶࢆຠ⋡ⓗ࡟ྍど໬ࡍࡿࡀ㸪࢝ࢸࣉࢩࣥ S ࡸ࢝ࢸࣉࢩࣥ L ࡞࡝ࡢࣉࣟ ࢸ࢔࣮ࢮάᛶࡶྍど໬ࡍࡿ࡜ࡉࢀ࡚࠸ࡿࠋඛ⾜◊✲࡟࠾࠸࡚㸪ProSense ࡣ㸪㣗㐨 [28] 㸪 ኱⭠ [22] 㸪⮅⮚ [19] 㸪ங⭢ [62] 㸪༸ᕢ [88] ࡢ⭘⒆ࣔࢹࣝື≀࡛㸪⭘⒆ࢆྍど໬ࡍ ࡿࡇ࡜ࡀሗ࿌ࡉࢀ࡚࠸ࡿࠋProSense ࡟ࡼࡿ⭘⒆⤌⧊ࡢྍど໬ࡣ㸪ࡑࡢタィཎ⌮࠿ࡽ㸪㟼 ⬦ᢞ୚ࡉࢀࡓProSense ࡀ㸪㛗᫬㛫ࡢ⾑ᾮᚠ⎔ࢆ⤒࡚⭘⒆⤌⧊࡟ຠ⋡ⓗ࡟ࢹࣜࣂ࣮ࣜࡉ ࢀ㸪⭘⒆ᚤᑠ⎔ቃୗ࡛࢝ࢸࣉࢩࣥB ࡢάᛶࢆཷࡅࡿࡇ࡜࡟ࡼࡗ࡚⏕ࡌࡿ࡜⪃࠼ࡽࢀࡿࠋ ࡋ࠿ࡋ㸪ࡑࡢ」㞧࡞㐣⛬ࡢࡓࡵ࡟㸪ProSense ࡢ⭘⒆࢖࣓࣮ࢪࣥࢢཎ⌮ࡣヲ⣽࡟ࡣ᳨ドࡉ ࢀ࡚࠸࡞࠸ࠋ ᮏ❶࡛ࡣ㸪ProSense ࡢ⭘⒆࢖࣓࣮ࢪࣥࢢཎ⌮ࢆ᫂ࡽ࠿࡟ࡍࡿࡇ࡜ࢆ┠ⓗ࡜ࡋࡓࠋࡲ ࡎ㸪ࣄࢺ⭘⒆⣽⬊ᰴࢆࢾ࣮ࢻ࣐࢘ࢫ⓶ୗ࡟⛣᳜ࡋࡓᢸࡀࢇ࣐࢘ࢫ࡟࠾࠸࡚㸪ProSense ࡢ

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7

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9

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10

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Scientific㸧࡟࡚཯ᛂࡉࡏ㸪4’,6-diamidino-2-phenylindole, dilactate㸦DAPI; Thermo Fisher Scientific㸧࡟ࡼࡾᑐẚᰁⰍࡋࡓࠋ⺯ග஧㔜ᰁⰍࢆ⾜ࡗࡓศᏊྠኈࡢඹᒁᅾᛶࡣ㸪ඛ⾜ᩥ ⊩࡟ᚑ࠸㸪ホ౯ࢆ⾜ࡗࡓ [114] ࠋ ᇵ ᇵ㣴⣽⬊࢖࣓࣮ࢪࣥࢢ ⣽⬊࡛ࣞ࣋ࣝࡢProSense ࡢ཯ᛂᛶࢆ᳨ウࡍࡿࡓࡵ࡟㸪HT-29 ࡜ RAW 264.7 ࡢᇵ㣴⣽ ⬊ࢆ⏝࠸ࡓࠋࡑࢀࡒࢀࡢ⣽⬊㸦4 x 104 _{cells㸧ࢆࢳࣕࣥࣂ࣮ࢫࣛ࢖ࢻ㸦81 mm}2_{/ࢳࣕࣥࣂ} ࣮㸹 ࢖࣡࢟㸪ᮾி㸧࡟᧛✀ࡋ࡚ 2 ᪥ᚋ࡟㸪ᇵᆅࢆ 5 nM ࡢ ProSense 680/ࣁࣥࢡࢫᖹ⾮ሷ ⁐ᾮ㸦Hank's balanced salt solution; HBSS㸧࡟⨨᥮ࡋ㸪37°C ࡟࡚ 3 ᫬㛫཯ᛂࡉࡏࡓࠋ᰾ࢆ Hoechst 33342㸦Thermo Fisher Scientific㸧࡟࡚ᑐẚᰁⰍࡋ࡚࠿ࡽ㸪VS120-FL ࢆ⏝࠸࡚⏕

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11 ࡋ࡚2 ᪥ᚋ࡟㸪ᇵᆅࢆ E64d㸦0, 5, 25, 50 nM㸧࠶ࡿ࠸ࡣ CA074Me㸦0, 5, 25, 50 nM㸧ࢆྵ ࡴHBSS ࡟⨨᥮ࡋ㸪37°C ࡟࡚ 1 ᫬㛫ᇵ㣴ࡋࡓࠋḟ࡟㸪ྛ㜼ᐖ๣ࢆῧຍࡋࡓ 5 nM ࡢ ProSense ⁐ᾮ࡟⨨᥮ࡋ㸪ࡉࡽ࡟37°C ࡟࡚ 3 ᫬㛫ᇵ㣴ࡋࡓᚋ㸪ProSense ⺯ගࢆほᐹࡋࡓࠋ඲࡚ࡢ ⣽⬊ᐇ㦂ࡣ2 ࢳࣕࣥࣂ࣮ࡎࡘ⾜ࡗࡓࠋ in situ ࢨࢨ࢖ࣔࢢࣛࣇ࢕࣮

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12

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ẚࡣ㸪ᢞ୚๓ࡢ⮬ᐙ⺯ගᙉᗘẚ࡟ẚ࡭࡚㸪᭷ព࡟ቑຍࡋ࡚࠸ࡓ㸦Fig. 1-2b㸧ࠋHT-29 ⭘⒆ ⤌⧊ࡢᶓ᩿㠃ീ࡟࠾࠸࡚㸪⭘⒆࿘⦕㒊࡟ᙉ࠸ ProSense ⺯ගࡀㄆࡵࡽࢀࡓ୍᪉࡛㸪⭘⒆ ୰ᚰ㒊࡛ࡣ㸪ProSense ⺯ගࡣ࡯࡜ࢇ࡝ㄆࡵࡽࢀ࡞࠿ࡗࡓ㸦Fig. 1-2c㸧ࠋHT-29 ⭘⒆⤌⧊࡟ ࠾ࡅࡿProSense ⺯ගࡣ㸪⭘⒆ࡢ㛫㉁⤌⧊࡟㝈ᒁࡋ࡚࠸ࡓ㸦Fig. 1-2d㸧ࠋ࡞࠾㸪⭘⒆௨እ ࡢ⤌⧊࣭⮚ჾ࡟࠾࠸࡚ࡣ㸪⫢⮚ཬࡧ⭈⮚࡛ᙉ࠸ ProSense ⺯ගࢆㄆࡵ㸪⫢⮚࡛ࡣࢡࢵࣃ ࣮⣽⬊㸪⭈⮚࡛ࡣᒀ⣽⟶ୖ⓶⣽⬊࡟ProSense ⺯ගࡀᒁᅾࡋ࡚࠸ࡓ㸦Fig. 1-3; 1-4㸧ࠋ ᢸࡀࢇ࣐࢘ࢫ࡟࠾ࡅࡿProSense ࡢయෆືែ

AngioSense ࡣ㸪㟼⬦ᢞ୚ 1 ᪥ᚋ࡟㸪⭘⒆⤌⧊࡟࠾࠸࡚⺯ගቑᙉࡀㄆࡵࡽࢀࡓ㸦Fig. 1-5a㸧ࠋ

ࡲࡓ㸪1 ᪥ᚋ࡟ࡣ㸪⭘⒆⤌⧊࡟࠾࠸࡚ AngioSense ࡢ⾑⟶እ₃ฟࡶㄆࡵࡽࢀࡓ㸦Fig. 1-5b㸧ࠋ

ProSense ࡶ AngioSense ࡜ྠᵝ࡟㸪㟼⬦ᢞ୚ 1 ᪥ᚋ࡟㸪⭘⒆⤌⧊࡟࠾࠸࡚⺯ගቑᙉࡀㄆ ࡵࡽࢀࡓ㸦Fig. 1-5a, b, c㸧ࠋHT-29 ⭘⒆⤌⧊ࡢ㧗ಸ⋡ほᐹࡢ⤖ᯝ㸪AngioSense ⺯ගࡣ㛫㉁ ⤌⧊࡟ศᕸࡋ࡚࠸ࡓ୍᪉࡛㸪ProSense ࡢ⺯ගࡣ㛫㉁⣽⬊ෆ࡟ᒁᅾࡀㄆࡵࡽࢀࡓ㸦Fig. 1-5c㸧ࠋ୍᪉࡛㸪ṇᖖ࡞⪥ࡢ⤌⧊࡛ࡣ㸪ᢞ୚ 1 ᪥ᚋ࡟࠾࠸࡚ࡶ AngioSense ࡢ⾑⟶እ₃ฟ ࡣࢃࡎ࠿࡛㸪ProSense ࡢ⺯ගࡶㄆࡵࡽࢀ࡞ࡗࡓ㸦Fig. 1-5b㸧ࠋHT-29 ⭘⒆⤌⧊࡟࠾࠸࡚㸪 ⾑⟶ࡢᐦᗘࡣ㸪⭘⒆୰ᚰ㒊ࡼࡾࡶ⭘⒆࿘⦕㒊࡟࠾࠸࡚㧗ࡃ AngioSense ࡢ⾑⟶እ₃ฟࡶ ⭘⒆㎶⦕㒊࡛ከ࠿ࡗࡓ㸦Fig. 1-5d㸧ࠋProSense ⺯ගࡣ㸪⾑⟶ᐦᗘࡀ㧗ࡃ㸪⾑⟶እ₃ฟࡀஹ 㐍ࡋ࡚࠸ࡿ㡿ᇦ࡟ᒁᅾࡋ࡚࠸ࡓ㸦Fig. 1-5d㸧ࠋ

13 HT-29 ⭘⭘⒆⤌⧊࡟࠾ࡅࡿ࢝ࢸࣉࢩࣥⓎ⌧࡜ࡑࡢ⏘⏕⣽⬊ HT-29 ⭘⒆⤌⧊࡟࠾࠸࡚㸪࢝ࢸࣉࢩࣥ B, L, S ࡢⓎ⌧ࡀㄆࡵࡽࢀࡓ㸦Fig. 1-6a, b, c㸧ࠋ ࢝ࢸࣉࢩࣥ B ࡣ㸪㛫㉁⣽⬊ࡢ⣽⬊㉁࡟ᙉ࠸Ⓨ⌧ࡀㄆࡵࡽࢀࡓ୍᪉࡛㸪⭘⒆⣽⬊ࡢ⣽⬊ ㉁࡛ࡢⓎ⌧ࡣ࡯࡜ࢇ࡝ㄆࡵࡽࢀ࡞࠿ࡗࡓ㸦Fig. 1-6a㸧ࠋࡇࢀࡽ࢝ࢸࣉࢩࣥ B 㝧ᛶࡢ㛫㉁ ⣽⬊ࡢከࡃࡣ㸪⭘⒆࿘⦕㒊࡟ศᕸࡋ࡚࠾ࡾ㸪⭘⒆ᐇ㉁㛫࡟ࡣᑡ࡞࠿ࡗࡓࠋ࢝ࢸࣉࢩࣥL ࡣ㸪⭘⒆࿘⦕㒊ࡢ㛫㉁⣽⬊ࡢ⣽⬊㉁࡟ᙅ࠸Ⓨ⌧ࡀㄆࡵࡽࢀࡓ୍᪉࡛㸪⭘⒆⣽⬊࡛ࡢⓎ⌧ ࡣㄆࡵࡽࢀ࡞࠿ࡗࡓ㸦Fig. 1-6b㸧ࠋ࢝ࢸࣉࢩࣥ S ࡣ㸪⭘⒆࿘⦕㒊ཬࡧ⭘⒆ᐇ㉁㛫ࡢ㛫㉁ ⣽⬊ࡢ⣽⬊㉁࡟ᙉ࠸Ⓨ⌧ࡀㄆࡵࡽࢀ㸪⭘⒆⣽⬊࡟࠾࠸࡚ࡶ୰⛬ᗘࡢⓎ⌧ࡀㄆࡵࡽࢀࡓ 㸦Fig. 1-6c㸧ࠋ௨ୖࡼࡾ㸪࢝ࢸࣉࢩࣥࡢච␿⤌⧊໬ᏛᰁⰍ࡟࠾࠸࡚㸪ProSense ࡢ⺯ගศᕸ

࡟᭱ࡶ㏆࠸Ⓨ⌧ศᕸࢆ♧ࡋࡓศᏊࡣ㸪࢝ࢸࣉࢩࣥB ࡛࠶ࡗࡓ㸦Fig. 1-5d, e; Fig. 1-6a, b, c㸧ࠋ

ྠ୍⤌⧊ษ∦࡟࠾࠸࡚ࡶ㸪ProSense ࡢ⺯ගࡣ㸪࢝ࢸࣉࢩࣥ B ࡢⓎ⌧ࡢศᕸ࡜୍⮴ࡋ࡚࠸

ࡓ㸦Fig. 1-6d㸧ࠋ

HT-29 ⭘⒆⤌⧊࡟࠾࠸࡚㸪࢝ࢸࣉࢩࣥ B ࡢⓎ⌧ࡣ㸪CD68 㝧ᛶ࣐ࢡࣟࣇ࢓࣮ࢪࡢᒁᅾ ࡜୍⮴ࡋࡓ㸦Fig. 1-7a㸧ࠋࡲࡓ㸪࢝ࢸࣉࢩࣥ B ࡢⓎ⌧ࡣ㸪௚ࡢ⾑⌫࣐࣮࣮࢝㸦CD45, CD11b, Gr-1, F4/80㸧࡜ࡶඹᒁᅾࢆ♧ࡋࡓ㸦Fig. 1-8㸧ࠋྠ୍⤌⧊ษ∦࡟࠾࠸࡚㸪ProSense ⺯ගࡣ㸪

࢝ࢸࣉࢩࣥB ཬࡧ CD68 ࡢⓎ⌧࡜ඹᒁᅾࢆ♧ࡋࡓ㸦Fig. 1-7d㸧ࠋ୍᪉࡛㸪 -smooth muscle

actin㸦SMA㸧㝧ᛶࡢ⥺⥔ⱆ⣽⬊࠶ࡿ࠸ࡣ CD31 㝧ᛶࡢ⾑⟶ෆ⓶⣽⬊ࡢศᕸ࡜࢝ࢸࣉࢩࣥ B ࡢⓎ⌧ࡢศᕸࡢඹᒁᅾᛶࣉࣟࣇ࢓࢖ࣝࡣ㸪“two-tailed” split ࢆ♧ࡋ㸪ඹᒁᅾࡣㄆࡵࡽࢀ ࡞࠿ࡗࡓ㸦Fig. 1-7b, c㸧ࠋ

HT-29 ⣽⬊࡜ RAW 264.7 ⣽⬊ࡢᇵ㣴⣽⬊࡛ࡣ㸪࢝ࢸࣉࢩࣥ B Ⓨ⌧ᙉᗘࡢᙉ࠸ RAW 264.7 ⣽⬊࡛ ProSense ⺯ගࡀᙉࡃ㸪ProSense ⺯ගᙉᗘ࡜࢝ࢸࣉࢩࣥ B ࡢⓎ⌧࡟┦㛵ࡀㄆ ࡵࡽࢀࡓ㸦Fig. 1-9a, b㸧ࠋRAW 264.7 ⣽⬊࡜ HT-29 ⣽⬊ࡢඹᇵ㣴ୗ࡟࠾࠸࡚ࡶ㸪CD45 ཬ

ࡧ࢝ࢸࣉࢩࣥB 㝧ᛶࡢ RAW 264.7 ⣽⬊ࡀ㸪ᙉ࠸ ProSense ⺯ගࢆ♧ࡋࡓ㸦Fig. 1-9c, d㸧ࠋ

14 ᢥⓗ㜼ᐖ๣ࡢᏑᅾୗ࡛㸪⃰ᗘ౫Ꮡⓗ࡟ῶᙅࡋࡓ㸦Fig. 1-9e, f㸧ࠋ HT-29 ⭘⭘⒆⤌⧊࡟࠾ࡅࡿ⣽⬊ቑṪάᛶ࡜⤌⧊ࣜࣔࢹࣜࣥࢢάᛶ HT-29 ⭘⒆⤌⧊࡛ࡣ㸪⭘⒆୰ᚰ㒊ࡼࡾࡶ⭘⒆࿘⦕㒊࡟࠾࠸࡚⭘⒆⣽⬊ࡢ㧗࠸ቑṪάᛶ ࢆ♧ࡋࡓ㸦Fig. 1-10a㸧ࠋIV ᆺࢥ࣮ࣛࢤࣥࡢⓎ⌧ࡣ㸪⭘⒆୰ᚰ㒊࡛ࡣ㛫㉁⤌⧊࡟ㄆࡵࡽࢀ ࡓ୍᪉࡛㸪⭘⒆࿘⦕㒊ࡢᐇ㉁࡜㛫㉁ࡢቃ⏺㠃࡛ࡣⓎ⌧ࡀㄆࡵࡽࢀ࡞࠿ࡗࡓ㸦Fig. 1-10b㸧ࠋ ᑐ↷ⓗ࡟㸪ࢸࢿ࢖ࢩࣥ C ࡢⓎ⌧ཬࡧࢥࣛࢤࢼ࣮ࢮάᛶࡣ㸪⭘⒆࡜㛫㉁ࡢቃ⏺㠃࡛ほᐹ

ࡉࢀࡓ㸦Fig. 1-10b㸧ࠋࡉࡽ࡟㸪ProSense ࡢ in situ ࢨ࢖ࣔࢢࣛࣇ࢕࣮άᛶࡣ㸪⭘⒆࿘⦕㒊 ࡢࢥ࣮ࣛࢤࣥ⥺⥔࡟ㄆࡵࡽࢀࡓ㸦Fig. 1-10c㸧ࠋ

ࣛࢵࢺ኱⭠Ⓨࡀࢇࣔࢹࣝ࡟࠾ࡅࡿProSense ⺯ගࡢᒁᅾ

AOM ㄏⓎࣛࢵࢺ኱⭠Ⓨࡀࢇࣔࢹࣝࡢ⭘⒆⤌⧊࡟࠾࠸࡚㸪ProSense ࡢ⺯ගቑᙉࡀほᐹ ࡉࢀࡓ㸦Fig. 1-11a㸧ࠋ⭘⒆⤌⧊ෆ࡟࠾ࡅࡿ ProSense ࡢ⺯ගࡣ㸪⾑⟶ᐦᗘࡀ㧗ࡃ㸪⾑⟶㏱ 㐣ᛶࡀஹ㐍ࡋ࡚࠸ࡿ⭘⒆㸫㛫㉁ࡢቃ⏺㡿ᇦ࡟ศᕸࡋ࡚࠸ࡓ㸦Fig. 1-11b㸧ࠋProSense ⺯ග ࡜ྠࡌ㡿ᇦ࡛㸪࢝ࢸࣉࢩࣥ B 㝧ᛶࡢ࣐ࢡࣟࣇ࢓࣮ࢪࡢ㞟✚ࡀㄆࡵࡽࢀࡓ㸦Fig. 1-11c㸧ࠋ ୍᪉࡛㸪 -SMA 㝧ᛶࡢ⥺⥔ⱆ⣽⬊ࡸ CD31 㝧ᛶ⾑⟶ෆ⓶⣽⬊࡛ࡣ㸪࢝ࢸࣉࢩࣥ B ࡢⓎ ⌧ࡣㄆࡵࡽࢀ࡞࠿ࡗࡓࠋ⭘⒆⤌⧊࡟㞄᥋ࡍࡿṇᖖ࡞኱⭠ୖ⓶⣽⬊࡛ࡣ࢝ࢸࣉࢩࣥ B ࡢ Ⓨ⌧ࡣ࡯࡜ࢇ࡝ㄆࡵࡽࢀ࡞࠿ࡗࡓ୍᪉࡛㸪୍㒊ࡢ኱⭠⭘⒆⤌⧊ࡢ⭘⒆⣽⬊࡟࠾࠸࡚࢝ࢸ ࣉࢩࣥB ࡢⓎ⌧ஹ㐍ࡀㄆࡵࡽࢀࡓࠋ

15

⪃

⪃ᐹ

ᢸࡀࢇ࣐࢘ࢫࡢ⭘⒆⤌⧊࡟࠾࠸࡚㸪AngioSense ࡣ㟼⬦ᢞ୚ᚋ࡟㸪᫬㛫౫Ꮡⓗ࡟⭘⒆ ⤌⧊ࡢ⾑⟶࠿ࡽ₃ฟࡋ㸪⭘⒆⤌⧊࡟㞟✚ࡋࡓࠋ⭘⒆⤌⧊࡛ࡣ㸪⭘⒆᪂⏕⾑⟶ࡢ⾑⟶ᵓ㐀 ࡀ⬤ᙅ࡞ࡓࡵ࡟㸪㧗ศᏊ໬ྜ≀ࡀ₃ࢀࡸࡍࡃ㸪࠿ࡘ⭘⒆⤌⧊࡛ࡣࣜࣥࣃ⣔ࡀᮍⓎ㐩࡞ࡓ ࡵ࡟㸪₃ࢀฟࡓ㧗ศᏊ໬ྜ≀ࡀᅇ཰ࡉࢀ࡟ࡃࡃ㸪㧗ศᏊ໬ྜ≀ࡀ㞟✚ࡋࡸࡍ࠸ᛶ㉁ࢆᣢ ࡘࡇ࡜ࡀ▱ࡽࢀ࡚࠾ࡾ㸪enhanced permeability and retention㸦EPR㸧ຠᯝ࡜ࡋ࡚▱ࡽࢀ࡚ ࠸ࡿ [53] ࠋࡇࢀࡽࡢࡇ࡜࠿ࡽ㸪AngioSense ࡣ EPR ຠᯝ࡟ࡼࡗ࡚⭘⒆⤌⧊࡟㞟✚ࡋ࡚࠸

ࡿ࡜⪃࠼ࡽࢀࡓࠋProSense ࡣ㸪㟼⬦ᢞ୚ᚋ㸪AngioSense ࡜ྠᵝ࡟ࡋ࡚᫬㛫౫Ꮡⓗ࡟⭘⒆

⤌⧊࡟㞟✚ࡋࡓࠋࡲࡓ㸪⭘⒆⤌⧊ෆࡢProSense ⺯ගࡣ㸪AngioSense ࡜ྠࡌศᕸࢆ♧ࡋ

ࡓࠋࡇࢀࡽࡢࡇ࡜࠿ࡽ㸪ProSense ࡶ㸪AngioSense ࡜ྠᵝࡢ EPR ຠᯝ࡟ࡼࡗ࡚㸪⾑⟶ᙧ ᡂཬࡧ㏱㐣ᛶࡢஹ㐍ࡋࡓ⭘⒆⤌⧊࡟㞟✚ࡍࡿ࡜⪃࠼ࡽࢀࡓࠋᮏ◊✲࡛ࡣ㸪Ⓨࡀࢇ㐣⛬ࢆ ⤒ࡓ⭘⒆⤌⧊ࡀᙧᡂࡉࢀࡿࣛࢵࢺ኱⭠Ⓨࡀࢇࣔࢹࣝ࡟࠾࠸࡚ࡶ㸪ProSense 㟼⬦ᢞ୚㸯᪥ ᚋ࡟㸪⭘⒆⤌⧊࡛⺯ගቑᙉࢆㄆࡵ㸪ࡑࡢᒁᅾࡣ࣐࢘ࢫ⭘⒆⤌⧊࡜ྠࡌࡃ㸪⾑⟶ᙧᡂཬࡧ ㏱㐣ᛶࡢஹ㐍㒊఩࡛࠶ࡗࡓࠋࡇࡢࡇ࡜࠿ࡽ㸪ProSense ࡣⓎࡀࢇࣔࢹࣝ࡟࠾࠸࡚ࡶ EPR ຠᯝ࡟ࡼࡗ࡚⭘⒆⤌⧊࡟㞟✚ࡋ࡚࠸ࡿ࡜⪃࠼ࡽࢀࡓࠋ௨ୖࡢࡇ࡜࠿ࡽ㸪ProSense ࡣ㸪⮫ ᗋࡢ⭘⒆⤌⧊࡟࠾࠸࡚ࡶ㸪EPR ຠᯝ࡟ࡼࡗ࡚㸪⭘⒆⤌⧊࡟ຠ⋡ⓗ࡟ࢹࣜࣂ࣮ࣜࡉࢀࡿ࡜ ᮇᚅࡉࢀࡓࠋ HT-29 ⭘⒆⤌⧊࡟࠾࠸࡚㸪ProSense ࡢ⺯ගᒁᅾࡣ㸪࢝ࢸࣉࢩࣥ B 㝧ᛶ࣐ࢡࣟࣇ࢓࣮ ࢪࡢᒁᅾ࡜୍⮴ࡋࡓࠋ㑇ఏᏊᨵኚࣔࢹࣝື≀ࢆ⏝࠸ࡓඛ⾜◊✲࡛ࡣ㸪ᑠ⭠࣏࣮ࣜࣉ࡟㞟 ✚ࡋࡓ࣐ࢡࣟࣇ࢓࣮ࢪ࡟࠾࠸࡚㸪ProSense ࡢ⺯ගࡀほᐹࡉࢀ࡚࠸ࡿ [27] ࠋࡲࡓ㸪ࣛࢵ ࢺ⚄⤒⭺⫗⭘⏤᮶⭘⒆⣽⬊ᰴࢆ⛣᳜ࡋࡓᢸࡀࢇ࣐࢘ࢫ࡟࠾࠸࡚ࡶ㸪ProSense 㝧ᛶ࣐ࢡࣟ ࣇ࢓࣮ࢪࡢ㞟✚ࡀሗ࿌ࡉࢀ࡚࠸ࡿ [9] ࠋᮏ◊✲࡛ࡣ㸪࣐࢘ࢫ࣐ࢡࣟࣇ࢓࣮ࢪ⏤᮶⣽⬊ ᰴRAW 264.7 ࡢᇵ㣴⣽⬊࡟࠾࠸࡚ࡶ㸪ProSense ⺯ග࡜࢝ࢸࣉࢩࣥ B ࡢⓎ⌧ࡀ┦㛵ࡍࡿ

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17 ࡣ㸪⫢⮚ࡢࢡࢵࣃ࣮⣽⬊ࡸ RAW 264.7 ᇵ㣴⣽⬊࡟࠾࠸࡚ࡶㄆࡵࡽࢀࡓࡇ࡜࠿ࡽ㸪 ProSense ࡢ⺯ගࡀ⏕ࡌࡿ⤒㊰࡜ࡋ࡚㸪ProSense ࣉ࣮ࣟࣈࡀ⣽⬊ෆ࡟ྲྀࡾ㎸ࡲࢀࡓᚋ㸪ࣜ ࢯࢯ࣮࣒࡟࡚࢝ࢸࣉࢩࣥB ࡢάᛶࢆཷࡅ࡚⺯ගࢆ⏕ࡌࡿྍ⬟ᛶࡶ⪃࠼ࡽࢀࡓࠋ ᮏ◊✲࡛ࡣ㸪ProSense ࡟ࡼࡿ⭘⒆࢖࣓࣮ࢪࣥࢢࡢ᳨ウ࡟㸪AOM ㄏⓎࣛࢵࢺ኱⭠Ⓨࡀ ࢇࣔࢹࣝࡶ⏝࠸ࡓࠋᮏࣔࢹࣝື≀ࡣ㸪ච␿ᛂ⟅⬟ࢆᣢࡕ㸪࠿ࡘⓎࡀࢇ㐣⛬ࢆ⤒࡚⭘⒆ࡀ ᙧᡂࡉࢀࡿࡓࡵ㸪ࡼࡾ⮫ᗋ᮲௳࡟㏆࠸⎔ቃୗ࡛ホ౯࡛ࡁࡿ࡜⪃࠼ࡽࢀࡿࠋᮏ◊✲࡛ࡣ㸪 ࣛࢵࢺ኱⭠⭘⒆⤌⧊࡟࠾࠸࡚ࡶ㸪ProSense ࡢ⺯ගቑᙉࡀㄆࡵࡽࢀࡓࠋࣛࢵࢺ኱⭠⭘⒆⤌ ⧊࡟࠾࠸࡚㸪ProSense ⺯ගࡀほᐹࡉࢀࡓ⭘⒆ቃ⏺㡿ᇦ࡛ࡣ㸪⾑⟶ᙧᡂཬࡧ⾑⟶㏱㐣ᛶࡀ ஹ㐍ࡋ㸪࢝ࢸࣉࢩࣥ B 㝧ᛶ࣐ࢡࣟࣇ࢓࣮ࢪࡀ㞟✚ࡋ࡚࠸ࡓࠋࡇࢀࡲ࡛࡟㸪ච␿ᛂ⟅⬟ ࢆᣢࡘྠ✀⛣᳜ࡢ⭘⒆ࣔࢹࣝື≀࡟࠾࠸࡚ࡶ㸪⭘⒆ቃ⏺㒊࡛ࡢ ProSense ࡢ⺯ගቑᙉࡀ ሗ࿌ࡉࢀ࡚࠸ࡿ [62㸪63] ࠋࡲࡓ㸪ࣄࢺࡢ኱⭠ࡀࢇ⤌⧊࡛ࡣ㸪⭘⒆ࡢᾐ₶㒊఩࡟࠾࠸࡚ ࢝ࢸࣉࢩࣥB ࡀⓎ⌧ࡋ㸪⤌⧊ࣜࣔࢹࣜࣥࢢ࡟స⏝ࡋ࡚࠸ࡿࡇ࡜ࡀሗ࿌ࡉࢀ࡚࠸ࡿ [16㸪 31] ࠋࡇࢀࡽࡢࡇ࡜࠿ࡽ㸪ProSense ࡣ㸪⤌⧊ࣜࣔࢹࣜࣥࢢάᛶࡀஹ㐍ࡋ࡚࠸ࡿ⭘⒆⤌⧊ ࡢᾐ₶㒊఩ࡢ᳨ฟ࡟᭷⏝࡞ྍ⬟ᛶࡀ⪃࠼ࡽࢀࡓࠋ≉࡟㸪ࣄࢺ኱⭠ࡀࢇ⤌⧊࡛ࡣ㸪ࡑࡢᾐ ₶ቃ⏺㡿ᇦ࡟࣐ࢡࣟࣇ࢓࣮ࢪࡀ㞟✚ࡋ࡚࠸ࡿࡇ࡜ࡀሗ࿌ࡉࢀ࡚࠾ࡾ [18㸪20㸪48] 㸪 ProSense ࡟ࡼࡿ࢖࣓࣮ࢪࣥࢢࡀ᭷⏝࡛࠶ࡿ࡜⪃࠼ࡽࢀࡿࠋ ProSense ࡟ࡼࡿ࣐ࢡࣟࣇ࢓࣮ࢪࡢ᳨ฟࡣ㸪⭘⒆⣽⬊ࡢᛶ㉁࡟࡜ࡽࢃࢀࡿࡇ࡜࡞ࡃ㸪 ከᵝ࡞⭘⒆⤌⧊ࢆ᳨ฟࡍࡿྍ⬟ᛶࢆᣢࡘ୍᪉࡛㸪⅖⑕ᛶ⑓ኚࡲ᳨࡛ฟࡋ࡚ࡋࡲ࠺ྍ⬟ᛶ ࡶ⪃࠼ࡽࢀࡿࠋࡇࢀࡲ࡛࡟㸪ProSense ࡣ㸪ᐇ㦂ⓗ࡟ㄏⓎࡋࡓ㛵⠇⅖ [101] 㸪ື⬦◳໬ࣉ ࣮ࣛࢡ [39] 㸪⫵ࡢ⅖⑕ [30] ࡞࡝ࡢྛ✀ࡢ⅖⑕ᛶ⑓ኚࢆ᳨ฟࡍࡿࡇ࡜ࡀሗ࿌ࡉࢀ࡚࠸ ࡿࠋ୍᪉࡛㸪࣐࢘ࢫࡢ኱⭠Ⓨࡀࢇࣔࢹࣝཬࡧ኱⭠⅖ࣔࢹࣝࢆ⏝࠸ࡓඛ⾜◊✲࡛ࡣ㸪 ProSense ࡢ⺯ගࡣ㸪⭘⒆⤌⧊᳨࡛ฟࡉࢀ㸪⅖⑕㒊఩࡛ࡣ᳨ฟࡉࢀ࡚࠸࡞࠸ [113] ࠋࡇࢀ ࡽࡢࡇ࡜࠿ࡽ㸪ProSense ⺯ග࡟ࡼࡗ࡚⭘⒆ᛶ⑓ኚ࡜⅖⑕ᛶ⑓ኚࢆ༊ู࡛ࡁࡿ࠿࡝࠺࠿ࡣ㸪 ⭘⒆⤌⧊࡟㞟✚ࡍࡿ⅖⑕ᛶ⣽⬊ࡢᛶ㉁ࡸ≧ែ࡟ࡼࡿྍ⬟ᛶࡀ⪃࠼ࡽࢀࡿࠋ௒ᚋ㸪 ProSense ࡟ࡼࡗ࡚ྍど໬ࡉࢀࡿᵝࠎ࡞⭘⒆ᛶ⑓ኚࡸ⅖⑕ᛶ⑓ኚࡢゎᯒࢆࡉࡽ࡟㐍ࡵ㸪

18 ProSense ࡟ࡼࡿ᳨ฟࡀ㐺ࡋࡓ⭘⒆ᛶ⑓ኚࢆ᫂ࡽ࠿࡟ࡋ࡚࠸ࡃࡇ࡜ࡀᮇᚅࡉࢀࡿࠋ ᮏ◊✲࡛ࡣ㸪ProSense ࡢ᳨ウẁ㝵࡟ᛂࡌ࡚㸪㸱ࡘࡢ㢧ᚤ㙾ᢏ⾡ࢆ⏝࠸࡚㸪⣽⬊࠿ࡽ ⏕యࣞ࣋ࣝࡲ࡛ࢆ㐃⥆ⓗ࡟ホ౯ࡋࡓࠋࡇࢀࡲ࡛ࡢ⺯ගࣉ࣮ࣟࣈࡢ᳨ウἲࡣ㸪ᑠື≀඲య ࡢᗈど㔝ほᐹࢆ⾜࠸ [15㸪46] 㸪ࡑࡢ⤖ᯝࡢ᳨ドࢆ⤌⧊ษ∦ࡸᇵ㣴⣽⬊ࢆ⏝࠸࡚⾜ࡗ࡚ ࠸ࡓ [46] ࠋᮏ◊✲࡛ࡣ㸪ᑠື≀࢖࣓࣮ࢪࣥࢢ࡜⤌⧊ษ∦࢖࣓࣮ࢪࣥࢢࡢ㛫࡟㸪ⷧษࡋ ࡚࠸࡞࠸⏕⤌⧊ࢆ㧗ศゎ⬟࡛ほᐹ࡛ࡁࡿ࣮ࣞࢨ࣮㉮ᰝᆺ㢧ᚤ㙾ࢩࢫࢸ࣒ [3] ࢆᑟධࡋ ࡓࠋᮏᡭἲࢆ⏝࠸ࡿࡇ࡜࡛㸪᪂㩭᦬ฟᶆᮏ࡟࠾࠸࡚㸪⺯ගࣉ࣮ࣟࣈࡢ⭘⒆⤌⧊ෆ࡛ࡢᒁ ᅾࢆ⣽⬊࡛ࣞ࣋ࣝほᐹ࡛ࡁࡓࠋᮏᡭἲࡢ฼Ⅼࡣ㸪⤌⧊ษ∦࢖࣓࣮ࢪࣥࢢ࡟ẚ࡭࡚㸪⤌⧊ ࢆⷧษࡍࡿࡇ࡜࡞ࡃ㸪㎿㏿࡟⺯ගࣉ࣮ࣟࣈࡢᒁᅾࢆほᐹ࡛ࡁࡿࡇ࡜࡟࠶ࡿࠋᐇ㝿࡟㸪ᮏ ◊✲࡛ࡣ㸪ProSense ࡀ⭘⒆⤌⧊ࡢ㎶⦕ࡢ㛫㉁⣽⬊࡟ᒁᅾࡋ࡚࠸ࡿࡇ࡜ࢆ࠸ࡕࡣࡸࡃぢฟ ࡋ㸪ࡑࡢᚋࡢ⑓⌮࣭⣽⬊ゎᯒࢆ㐍ࡵࡿᡭࡀ࠿ࡾ࡜࡞ࡗࡓࠋࡲࡓ㸪ᮏᡭἲࡣ㸪⤌⧊ࡢ෾⤖ ⼥ゎ࡞࡝ࡢฎ⌮ࡀຍࢃࡽ࡞࠸ࡓࡵ࡟㸪⺯ගࣉ࣮ࣟࣈࡢ᫂ࡿࡉࡸᒁᅾࡀኚ໬ࡍࡿࡇ࡜࡞ࡃ㸪 ⺯ගࢆほᐹ࡛ࡁࡿࡇ࡜ࡶ฼Ⅼ࡜⪃࠼ࡽࢀࡿࠋࡇࢀࡽࡢࡇ࡜࠿ࡽ㸪ᮏᡭἲࡣ㸪ᑠື≀࢖࣓ ࣮ࢪࣥࢢ࡜⑓⌮࣭⣽⬊࢖࣓࣮ࢪࣥࢢࡢᶫΏࡋ࡜࡞ࡿࢹ࣮ࢱࢆྲྀᚓ࡛ࡁࡿࡓࡵ㸪⺯ගࣉࣟ ࣮ࣈࡢ᳨ウ࡟᭷⏝࡛࠶ࡿ࡜⪃࠼ࡽࢀࡓࠋࡲࡓ㸪ᮏ◊✲࡛ࡣ㸪ࢫࣛ࢖ࢻᶆᮏ඲యࡢ⏬ീࢆ ྲྀᚓࡍࡿࣂ࣮ࢳࣕࣝࢫࣛ࢖ࢻ㢧ᚤ㙾ᢏ⾡ [51] ࢆ㸪⤌⧊ษ∦࡜ᇵ㣴⣽⬊ࡢほᐹ࡟⏝࠸࡚㸪 ⺯ගࣉ࣮ࣟࣈࡢཎ⌮ࢆ᳨ウࡋࡓࠋᮏᡭἲࢆ⏝࠸ࡿࡇ࡜࡛㸪ⓎⰍᶆᮏ࡟ẚ࡭࡚ಖᏑᛶࡢຎ ࡿ⺯ගᶆᮏࢆ㟁Ꮚࣇ࢓࢖ࣝ໬ࡋ࡚༙Ọஂⓗ࡟ಖᏑ࡛ࡁࡓࡔࡅ࡛࡞ࡃ㸪᥋║ࣞࣥࢬ㉺ࡋ࡟ ࡣほᐹᅔ㞴࡞㏆㉥እ⺯ගീࡢ඲యീࢆྍど໬࡛ࡁࡓࠋࡇࢀࡽࡢࡇ࡜࠿ࡽ㸪ࣂ࣮ࢳࣕࣝࢫ ࣛ࢖ࢻ㢧ᚤ㙾ࢆ⏝࠸ࡓᡭἲࡣ㸪㏆㉥እ⺯ගࣉ࣮ࣟࣈࡢゎᯒ࡟᭷ຊ࡞ࢶ࣮ࣝ࡟࡞ࡿ࡜⪃࠼ ࡽࢀࡓࠋ ⤖ㄽ࡜ࡋ࡚㸪ProSense ࡣ㸪ᢸࡀࢇ࣐࢘ࢫཬࡧࣛࢵࢺ኱⭠Ⓨࡀࢇࣔࢹࣝࡢ⭘⒆ࢆྍど ໬ࡋࡓࡇ࡜࠿ࡽ㸪⭘⒆࢖࣓࣮ࢪࣥࢢ࡟᭷⏝࡛࠶ࡿ࡜⪃࠼ࡽࢀࡓࠋProSense ࡢ⭘⒆⤌⧊࡟ ࠾ࡅࡿ⺯ගቑᙉࡣ㸪⾑⟶ᙧᡂ࡜⾑⟶㏱㐣ᛶࡢஹ㐍࡟ࡼࡿ EPR ຠᯝ࡟ຍ࠼࡚㸪࢝ࢸࣉࢩ ࣥ B 㝧ᛶ࣐ࢡࣟࣇ࢓࣮ࢪࡀ㛵ࢃࡿ⤌⧊ࣜࣔࢹࣜࣥࢢάᛶ࡟ࡼࡿྍ⬟ᛶࡀ♧၀ࡉࢀࡓࠋ

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21

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22

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transporting polypeptide 1B3㸦OATP1B3㸧ཬࡧ sodium-taurocholate co-transporting polypeptide 㸦NTCP㸧ࡀⓎ⌧ࡋ࡚࠾ࡾ㸪ᇵ㣴⣽⬊࡟࠾࠸࡚㸪ICG ࡢ⣽⬊ෆྲྀࡾ㎸ࡳ࡟㛵୚ࡍࡿࡇ࡜ ࡀ♧ࡉࢀ࡚࠸ࡿ [12] ࠋ⫢⭘⒆࡟࠾࠸࡚ࡣ㸪ICG ࡢ⺯ගࡣ㸪ࡇࢀࡽࡢࢺࣛࣥࢫ࣏࣮ࢱ࣮ ࡢⓎ⌧࡜┦㛵ഴྥ࡟࠶ࡿࡇ࡜ࡀሗ࿌ࡉࢀ࡚࠸ࡿ [37㸪89] ࠋ୍᪉࡛㸪⫢⮚௨እࡢ⭘⒆࡛ ࡣ㸪ICG ࡣ⾑Ύࢱࣥࣃࢡ㉁࡜ྍ㏫ⓗ࡟⤖ྜࡋ࡚㧗ศᏊ໬ࡍࡿࡇ࡜࡛㸪⭘⒆⤌⧊࡟㑅ᢥⓗ ࡟㞟✚ࡍࡿ࡜⪃࠼ࡽࢀ࡚࠸ࡿ [32㸪42㸪52㸪54] ࠋࡲࡓ㸪ᇵ㣴ࡋࡓ⭘⒆⣽⬊ [2] ࡸᐇ㦂 ⓗ⭘⒆ࣔࢹࣝ [57] ࡟࠾࠸࡚㸪ICG ࡀ⣽⬊ෆ࡟ྲྀࡾ㎸ࡲࢀࡿࡇ࡜ࡶሗ࿌ࡉࢀ࡚࠸ࡿࡀ㸪

23 ࡑࡢཎ⌮ࡣ୙࡛᫂࠶ࡿࠋ ᮏ❶࡛ࡣ㸪ICG ࡢࡀࢇ࢖࣓࣮ࢪࣥࢢ࡬ࡢᛂ⏝ࡢྍ⬟ᛶࢆ᥈⣴ࡍࡿࡓࡵ࡟㸪➨ 1 ❶࡛ ᵓ⠏ࡋࡓ㢧ᚤ㙾࡟ࡼࡿゎᯒᡭἲࢆ⏝࠸࡚㸪㟼⬦ᢞ୚ࡋࡓICG ࡢ⭘⒆࢖࣓࣮ࢪࣥࢢࡢᛶ ⬟ཬࡧཎ⌮ࢆ᳨ウࡋࡓࠋࡲࡎ㸪ࣄࢺ኱⭠ࡀࢇ⏤᮶⭘⒆⣽⬊ᰴࢆ⛣᳜ࡋࡓᢸࡀࢇ࣐࢘ࢫࢆ ⏝࠸࡚㸪ICG ࡢయෆືែ࡜⭘⒆⤌⧊ෆືែࢆゎᯒࡋࡓࠋḟ࡟㸪ࣄࢺ኱⭠ࡀࢇ⏤᮶⭘⒆⣽ ⬊ᰴࡢᇵ㣴⣽⬊ࢆ⏝࠸࡚㸪ICG ࡢ⣽⬊ෆືែࢆゎᯒࡋ㸪ICG ࡟ࡼࡿ⭘⒆࢖࣓࣮ࢪࣥࢢ࡟ 㛵ࢃࡿᅉᏊࢆ᥈⣴ࡋࡓࠋ

24

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ྍど໬ࡍࡿࡓࡵ࡟㸪⺯ගⰍ⣲DyLight 488 ࢆᶆ㆑ࡋࡓࢺ࣐ࢺࣞࢡࢳࣥ㸦tomato lectin

conjugated with DyLight 488; TL488; Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA㸧ࢆ⏝࠸ࡓࠋ ICG ࡢయෆືែࢆㄪ࡭ࡿࡓࡵ࡟㸪ẚ㍑ᑐ↷ࣉ࣮ࣟࣈ࡜ࡋ࡚㸪ࢧ࢖ࢬࡢ␗࡞ࡿ⺯ගࣉࣟ

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࢘ࢩ⾑Ύ࢔ࣝࣈ࣑ࣥ㸦bovine serum albumin conjugated with Alexa Fluor 680; BSA680;

Thermo Fisher Scientific, Carlsbad, CA, USA㸧࠶ࡿ࠸ࡣ㸪࣏࣐࣮ࣜᆺࡢ⺯ගࢼࣀ⢏Ꮚ

AngioSense680EX㸦AS680; Perkin Elmer, Waltham, MA, USA㸧ࢆ⏝࠸ࡓࠋపศᏊᆺࡢ⺯ ගࣉ࣮ࣟࣈ࡜ࡋ࡚㸪⺯ගᶆ㆑ࢢࣝࢥ࣮ࢫ㸦2-deoxy-2-[(7-nitro-2,1,3-benzoxadiazol-4-yl) amino]-D-glucose; 2-NBDG; ࣌ࣉࢳࢻ◊✲ᡤ㸪኱㜰㸧ࢆ⏝࠸ࡓࠋ

ICG ࡜ే⏝ࡍࡿ⺯ගࣉ࣮ࣟࣈ࡟ࡣ㸪AS680 ࠶ࡿ࠸ࡣ 5-ALA㸦࿴ග⣧⸆㸪ᮾி㸧ࢆ⏝࠸

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25 ࢫ㸧ࢆ⏝࠸ࡓࠋᇵ㣴⣽⬊ࡢ⺯ගච␿ᰁⰍീࡢほᐹ࡟ࡣ㸪ඹ↔Ⅼ࣮ࣞࢨ࣮㉮ᰝᆺ㢧ᚤ㙾ࢩ ࢫࢸ࣒FV-1200㸦࢜ࣜࣥࣃࢫ㸧ࢆ⏝࠸ࡓࠋ඲࡚ࡢ⺯ග⏬ീࡣ㸪ᨃఝ࣮࡛࢝ࣛ⾲♧ࡋࡓࠋ ⣽ ⣽⬊ᇵ㣴 ࣄࢺ኱⭠ࡀࢇ⏤᮶⭘⒆⣽⬊ᰴ࡜ࡋ࡚㸪ୖ⓶ᵝࡢ⣽⬊ᙧែࡀ␗࡞ࡿHT-29㸪HCT 116㸪 LoVo㸪COLO 320DM㸪DLD-1 ཬࡧ T84 ࢆ⏝࠸ࡓ㸦Table 2-1㸧ࠋࡇࡢ୰࡛㸪DLD-1 ⣽⬊࡜ T84 ⣽⬊ࡣ㸪ᴟᛶࢆᣢࡗࡓୖ⓶ᵝ⣽⬊ࡢᙧែࢆ♧ࡋ࡚࠾ࡾ㸪ࢱ࢖ࢺࢪࣕࣥࢡࢩࣙࣥࢆᙧ ᡂࡍࡿࡇ࡜ࡀ▱ࡽࢀ࡚࠸ࡿ [38㸪67㸪86] ࠋࡲࡓඛ⾜◊✲࡟ࡼࡾ㸪T84 ⣽⬊ࡣ㸪DLD-1 ⣽⬊࡟ẚ࡭࡚㸪ࡼࡾ᏶඲࡞ࢱ࢖ࢺࢪࣕࣥࢡࢩࣙࣥᵓ㐀ࢆᙧᡂࡍࡿࡇ࡜ࡀሗ࿌ࡉࢀ࡚࠸ࡿ [86] ࠋ ⭘⒆ࣔࢹࣝື≀ ᢸࡀࢇ࣐࢘ࢫࢆస〇ࡍࡿࡓࡵ࡟㸪4 㐌㱋ࡢ BALB/c ࢾ࣮ࢻ࣐࢘ࢫࢆ᪥ᮏࢳ࣮ࣕࣝࢫ࣭ ࣜࣂ࣮㸦⚄ዉᕝ㸧ࡼࡾ㉎ධࡋࡓࠋ࣐࢘ࢫࡣ㸪 ᗘ23s3°C㸪‵ᗘ 55s15%㸪↷᫂ࢧ࢖ࢡ ࣝ12 ᫬㛫᫂/12 ᫬㛫ᬯ᮲௳࡛㣫⫱ࡋࡓࠋ㣫⫱ᮇ㛫ࢆ㏻ࡌ࡚㸪CA-1㸦᪥ᮏࢡࣞ࢔㸪ᮾி㸧 ࠾ࡼࡧ㣧ᩱỈࢆ⮬⏤࡟ᦤྲྀࡉࡏࡓࠋ1 㐌㛫㥆໬ࡉࡏࡓᚋ㸪HT-29 ⣽⬊ࡢᠱ⃮ᾮ㸦1~5 x 106 cells/mouse㸧ࢆࢾ࣮ࢻ࣐࢘ࢫࡢ⫼ഃ⓶ୗ࡟⛣᳜ࡋࡓࠋ in vivo ࢖࣓࣮ࢪࣥࢢ࡜ ex vivo ࢖࣓࣮ࢪࣥࢢ ほᐹᐇ㦂ࡣ㸪⭘⒆⣽⬊ࢆ⛣᳜ࡋ࡚࠿ࡽ1~4 㐌㛫ᚋ㸦⭘⒆ᚄ 6~14 mm㸪⭘⒆య✚ 75~384 mm3_{㸧࡟㸪࢖ࢯࣇࣝࣛࣥ㯞㓉ୗ࡟࡚⾜ࡗࡓࠋICG ࡢᢞ୚㔞ࡣ㸪ඛ⾜◊✲ࡼࡾタᐃࡋ㸪150} Pg/mouse㸦Ү7.5 mg/kg㸧࡜ࡋࡓ [52] ࠋ௚ࡢ⺯ගࣉ࣮ࣟࣈࡢᢞ୚㔞࡟ࡘ࠸࡚ࡣ㸪BSA680

ࡣ 100 g/mouse㸪AS680 ࡣ 2 nmol/mouse㸪2-NBDG ࡣ 171 g/mouse㸪5-ALA ࡣ 5 mg/mouse ࡜ࡋࡓࠋྛ⺯ගࣉ࣮ࣟࣈࢆ㸪ᢸࡀࢇ࣐࢘ࢫ࡟㟼⬦ᢞ୚ࡋ㸪୍ᐃ᫬㛫ᚋ࡟ほᐹ

26 ࡿICG ⺯ගࡢ㏥Ⰽ࡬ࡢᙳ㡪ࡣ࡞࠸ࡇ࡜ࢆ☜ㄆࡋࡓ㸦Fig. 2-1㸧ࠋᏳᴦṚࡢ 10 ศ๓࡟㸪100 g/mouse ࡢTL488 ࢆ㟼⬦ᢞ୚ࡋ࡚⾑⟶ࢆ⺯ගᶆ㆑ࡋ࡚࠿ࡽ㸪࢖ࢯࣇࣝࣛࣥ῝㯞㓉ୗ࡟ ࡚ᨺ⾑࡟ࡼࡾᏳᴦṚࡉࡏࡓࠋࡑࡢᚋ㸪⤌⧊ࢆ᦬ฟࡋ࡚ex vivo ࢖࣓࣮ࢪࣥࢢࢆ⾜ࡗࡓࠋ ྛほᐹᐇ㦂࡟ࡣ㸪ᑡ࡞ࡃ࡜ࡶ3 ༉ࡢື≀ࢆ⏝࠸࡚ᐇ᪋ࡋࡓࠋ ື≀ᐇ㦂ィ⏬ࡣ㸪ᅜ❧኱Ꮫἲே ᮾி㎰ᕤ኱Ꮫࡢື≀ᐇ㦂೔⌮ጤဨ఍࡟ᥦฟࡋ࡚ᢎㄆ ࢆཷࡅ㸪ື≀㣫⫱㸪⟶⌮࡟࠶ࡗ࡚ࡣ㸪ᅜ❧኱Ꮫἲே ᮾி㎰ᕤ኱Ꮫࡢᐇ㦂ྲྀᢅ࠸೔⌮つ ᐃ࡟ᚑࡗࡓࠋ ⏕ ⏕⣽⬊࢖࣓࣮ࢪࣥࢢ ᇵ㣴⣽⬊ᐇ㦂ࡣ㸪ࢳࣕࣥࣂ࣮ࢫࣛ࢖ࢻ㸦81 mm2_{/ࢳࣕࣥࣂ࣮㸧ࢆ⏝࠸࡚㸪≉࡟グ㍕ࡀ} ࡞࠸㝈ࡾ㸪⭘⒆⣽⬊㸦2~4 x 104 _{cells㸧ࢆ᧛✀ࡋ࡚ 2 ᪥ᚋ࡟⾜ࡗࡓࠋ⭘⒆⣽⬊ࡢ ICG ࡬}

ࡢ཯ᛂᛶࢆㄪ࡭ࡿࡓࡵ࡟㸪ᇵᆅࢆࣁࣥࢡࢫᖹ⾮ሷ⁐ᾮ㸦Hank's balanced salt solution; HBSS㸧࡟࡚ 2 ᅇὙ࠸㸪ICG ⁐ᾮ㸦25 nM ICG/HBSS㸧࡟⨨᥮ࡋ㸪37°C ࡟࡚ᡤᐃࡢ᫬㛫 ཯ᛂࡉࡏࡓᚋ㸪HBSS ࡟࡚ 2 ᅇὙ࠸㸪ほᐹᐇ㦂ࢆ⾜ࡗࡓࠋICG ࡢ⣽⬊ෆᒁᅾࡢ᳨ウ࡛ࡣ㸪 Table 2-2 ࡟グ㍕ࡢྛ⣽⬊ᑠჾᐁࡢ⺯ග࣐࣮࣮࢝ࢆ⏝࠸࡚㸪ICG ࡜ࡢ஧㔜ᰁⰍ࡟ࡼࡾ⾜ࡗ ࡓࠋICG ࡢ⣽⬊ෆྲྀࡾ㎸ࡳ⤒㊰࡜ࡋ࡚㸪࢚ࣥࢻࢧ࢖ࢺ࣮ࢩࢫ⤒㊰ࡢ㛵୚ࢆ᳨ウࡍࡿࡓࡵ ࡟㸪ICG ⁐ᾮࢆῧຍࡋࡓᇵ㣴⣽⬊ࢆ㸪4°C ᇵ㣴᮲௳ୗ࡟࡚཯ᛂࡉࡏࡓࠋࡲࡓ㸪࢚ࣥࢻࢧ ࢖ࢺ࣮ࢩࢫ㑅ᢥⓗ࡞㜼ᐖ๣ࢆ⏝࠸ࡓᐇ㦂࡛ࡣ㸪ࢡࣛࢫࣜࣥ౫Ꮡᛶ࢚ࣥࢻࢧ࢖ࢺ࣮ࢩࢫ㜼

ᐖ๣Pitstop 2㸦20 PM; Abcam, Cambridge, UK㸧 [103] ࢆ 15 ศ཯ᛂࡉࡏࡓᚋ㸪㜼ᐖ๣ࢆ

ῧຍࡋࡓICG ⁐ᾮ࡛⣽⬊ࢆ཯ᛂࡉࡏࡓࠋࢺࣛࣥࢫ࣏࣮ࢱ࣮⤒㊰ࡢ㛵୚ࢆ᳨ウࡍࡿࡓࡵ

࡟㸪OATP ཬࡧ NTCP ࡢᣕᢠ㜼ᐖ๣࡛࠶ࡿࢫࣝ࣍ࣈࣟࣔࣇࢱࣞ࢖ࣥ㸦sulfobromophthalein;

BSP; 250 PM; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA㸧 [2] ࠶ࡿ࠸ࡣ㸪OATP1B3 ࡢ㑅ᢥⓗ㜼 ᐖ๣cholecystokinin octapeptide㸦CCK-8; 20 PM; Sigma-Aldrich㸧 [94] ࢆ 5 ศ཯ᛂࡉࡏࡓ

ᚋ㸪ྛ㜼ᐖ๣ࢆῧຍࡋࡓICG ⁐ᾮ࡛⣽⬊ࢆ཯ᛂࡉࡏࡓࠋICG ࡢ⣽⬊ෆྲྀࡾ㎸ࡳ࡟࠾ࡅ

27

ࢲࣝ࣋ࢵࢥᨵኚ࢖࣮ࢢࣝᇵᆅ㸦Dulbecco's modified Eagle medium; DMEM; Thermo Fisher Scientific㸧࡟࡚㸪⣽⬊ࢆ 60 ศ㛫ᇵ㣴ࡋࡓᚋ㸪ICG ࢆῧຍࡋ࡚⣽⬊ࢆ཯ᛂࡉࡏࡓࠋ඲࡚ ࡢᇵ㣴⣽⬊ᐇ㦂ࡣ㸪2 ࢳࣕࣥࣂ࣮ࡎࡘ⾜ࡗࡓࠋ ⺯ ⺯ගච␿ᰁⰍ ᇵ㣴⣽⬊࠶ࡿ࠸ࡣ෾⤖⤌⧊ษ∦ࡣ㸪࣓ࢱࣀ࣮ࣝ࠶ࡿ࠸ࡣ4% ࣃ࣒ࣛ࣍ࣝ࢔ࣝࢹࣄࢻ⁐ ᾮ࡟࡚ᅛᐃࡋ㸪Table 2-3 ࡟♧ࡋࡓ୍ḟᢠయ࡜᮲௳࡟࡚㸪཯ᛂࡉࡏࡓࠋࡑࡢᚋ㸪୍ḟᢠయ

ࡢච␿ື≀࡟ᛂࡌࡓAlexa Fluor ⺯ගᶆ㆑஧ḟᢠయ㸦1:200; Thermo Fisher Scientific㸧࡟࡚

཯ᛂࡉࡏ㸪4’,6-diamidino-2-phenylindole, dilactate㸦DAPI; Thermo Fisher Scientific㸧࡟ࡼࡾ ᑐẚᰁⰍࡋࡓࠋ㞄᥋ษ∦ࡣ㸪࣐࣊ࢺ࢟ࢩ࣭࢚ࣜࣥ࢜ࢪࣥᰁⰍࢆ⾜࠸ほᐹࡋࡓࠋ

⤫ィゎᯒ

⺯ග⏬ീࡣ㸪Image J ࢯࣇࢺ࢙࢘࢔㸦National Institutes of Health, Bethesda, MD, USA㸧 ࢆ⏝࠸࡚ゎᯒࡋࡓࠋ⺯ගࡢᖹᆒ㍤ᗘ್ࢆ ᐃࡍࡿࡓࡵ࡟㸪Fig. 2-2 ࡟♧ࡍὀ┠㡿ᇦࢆタ ᐃࡋ㸪 ᐃࡋࡓࠋᩘ್ࡣ㸪ᖹᆒ್±ᶆ‽೫ᕪ࡟࡚⾲♧ࡋࡓࠋ3 ⩌㛫ࡢẚ㍑࡟࠾࠸࡚ࡣ㸪 ྛ⩌ࡢศᩓࢆBartlett ࡢ᪉ἲ᳨࡛ᐃࡋ㸪➼ศᩓ࡛࠶ࡿࡇ࡜ࢆ☜ㄆࡋ㸪Tukey ࡢ᳨ᐃࢆ⾜ ࡗࡓࠋ2 ⩌㛫ࡢẚ㍑࡟࠾࠸࡚ࡣ㸪ྛ⩌ࡢศᩓࢆ F ᳨ᐃ࡟ࡼࡾẚ㍑ࡋ㸪➼ศᩓࡢሙྜࡣ Student ࡢ t ᳨ᐃ㸪୙➼ศᩓࡢሙྜࡣ Aspin-Welch ࡢ t ᳨ᐃࢆ⏝࠸ࡓࠋ⭘⒆ᑐ⓶⭵ࡢಙྕ ᙉᗘẚ࡟ࡘ࠸࡚㸪᫂ど㔝ീ࡜⺯ගീࡢẚ㍑࡟ࡣ㸪Wilcoxon ࡢ➢ྕ௜㡰఩᳨ᐃࢆ⏝࠸ࡓࠋ ࡍ࡭࡚ࡢ⤫ィᏛⓗゎᯒࡣ࢚ࢡࢭࣝ⤫ィ2010 ࢯࣇࢺ࢙࢘࢔㸦♫఍᝟ሗࢧ࣮ࣅࢫᰴᘧ఍♫㸪 ᮾி㸧ࢆ⏝࠸࡚⾜ࡗࡓࠋ

28

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HT-29 ⭘⒆⤌⧊ࡢ ICG ྲྀࡾ㎸ࡳ⬟ ᢸࡀࢇ࣐࢘ࢫ࡟ICG ࢆ㟼⬦ᢞ୚ࡋ࡚ 8 ᫬㛫ᚋ࡟㸪HT-29 ⭘⒆⤌⧊࡟࠾࠸࡚ ICG ࡢ⺯ ගࡀほᐹࡉࢀࡓ㸦Fig. 2-3a㸧ࠋ⭘⒆ࡢᶓ᩿㠃ീ࠿ࡽ㸪ICG ࡢ⺯ගࡣ㸪⭘⒆ᐇ㉁⤌⧊ෆ࡟඲ ᇦ࡟ศᕸࡋ࡚࠸ࡓ㸦Fig. 2-3b㸧ࠋࡲࡓ㸪⭘⒆⤌⧊ࡢ㧗ಸ⋡ほᐹ࠿ࡽ㸪ICG ⺯ගࡣ⾑⟶ෆ࡟ ࡣㄆࡵࡽࢀࡎ㸪⭘⒆ᐇ㉁⤌⧊ࡢ⣽⬊ෆ࡟ྲྀࡾ㎸ࡲࢀ࡚࠸ࡿࡇ࡜ࡀほᐹࡉࢀࡓ㸦Fig. 2-3b, c㸧ࠋ⭘⒆⤌⧊࡟࠾ࡅࡿ ICG 㝧ᛶ⣽⬊ࡣ㸪carcinoembryonic antigen㸦CEA㸧㝧ᛶࡢ⭘⒆⣽ ⬊࡛࠶ࡗࡓ㸦Fig. 2-3d㸧ࠋ୍᪉㸪ṇᖖ࡞኱⭠ୖ⓶⣽⬊࡟࠾࠸࡚㸪ICG ⺯ගࡣ࡯࡜ࢇ࡝ㄆࡵ ࡽࢀ࡞࠿ࡗࡓࠋ

ICG ࡢయෆືែ࡜⮚ჾ࣭⤌⧊ศᕸ

HT-29 ⭘⒆⤌⧊࡟࠾ࡅࡿ ICG ⺯ගࡣ㸪ICG 㟼⬦ᢞ୚ᚋ࡟ᚎࠎ࡟ῶᑡࡋࡓ୍᪉࡛㸪⭘⒆

ᑐṇᖖ⮚ჾ࣭⤌⧊ࡢICG ⺯ගᙉᗘẚࡣ㸪᫬㛫࡜࡜ࡶ࡟ቑຍࡋࡓ㸦Fig. 2-4a, b, c, d㸧ࠋṇ

ᖖ࡞⪥ࡢ⤌⧊࡜⭘⒆⤌⧊ࡢ⾲ᒙࡢ࡝ࡕࡽ࡟࠾࠸࡚ࡶ㸪ICG ᢞ୚ᚋ 5 ศ௨ෆ࡟ ICG ࡢ⾑

⟶እ₃ฟࡀㄆࡵࡽࢀ㸪24 ᫬㛫ᚋ࡟ࡣ㸪ICG ࡢ⺯ගࡣᢞ୚๓ࡢ≧ែ࡟ᡠࡗ࡚࠸ࡓ㸦Fig. 2-4e㸧ࠋ

ICG ࡜ྠᵝࡢ㏿ࡸ࠿࡞⤌⧊㠀≉␗ⓗ࡞⾑⟶እ₃ฟࡣ㸪௚ࡢపศᏊᆺ⺯ගࣉ࣮ࣟࣈ࡛ࡶㄆ ࡵࡽࢀࡓ୍᪉࡛㸪㧗ศᏊᆺࡢ⺯ගࣉ࣮ࣟࣈ࡛ࡣㄆࡵࡽࢀ࡞࠿ࡗࡓ㸦Fig. 2-5㸧ࠋ⭘⒆ᶓ᩿

㠃ࡢ㧗ಸ⋡ほᐹ࡟࠾࠸࡚㸪ICG ᢞ୚ 30 ศᚋ࡟ࡣ ICG 㝧ᛶࡢ⭘⒆⣽⬊ࡀㄆࡵࡽࢀࡓ㸦Fig.

2-4f㸧ࠋࡲࡓ㸪ICG ᢞ୚ 30 ศᚋ࡟ࡣ㸪⫢⣽⬊࡜ᒀ⣽⟶ୖ⓶⣽⬊࡟࠾࠸࡚㸪⭘⒆⣽⬊ࡼࡾ

ࡶᙉ࠸ICG ⺯ගࡀㄆࡵࡽࢀ㸪⫵⤌⧊࡟࠾࠸࡚ࡣ㸪⭘⒆⤌⧊࡜ྠ➼ࡢ ICG ⺯ගࡀㄆࡵࡽ

ࢀࡓ㸦Fig. 2-4; Fig. 2-6㸧ࠋࡋ࠿ࡋ㸪ICG ᢞ୚ 24 ᫬㛫ᚋ࡛ࡣ㸪⭘⒆⣽⬊࡟ྲྀࡾ㎸ࡲࢀࡓ ICG

⺯ගࡣಖᣢࡉࢀࡓࡢ࡟ᑐࡋ㸪⫢⮚㸪⭈⮚㸪⫵⤌⧊࡟࠾ࡅࡿ ICG ⺯ගࡣⴭࡋࡃῶᑡࡋࡓ

29 ⣽⬊ࡸ⭘⒆࿘⦕㒊ࡢ㛫㉁⣽⬊࡟࠾࠸࡚ࡶㄆࡵࡽࢀࡓࡀ㸪ࡑࢀࡒࢀICG ᢞ୚ 6~10㸪25~28 ᫬㛫ᚋ࡟ࡣ᳨ฟࡉࢀ࡞࠿ࡗࡓ㸦Fig. 2-4; Fig. 2-6㸧ࠋHT-29 ⭘⒆⤌⧊࡟࠾࠸࡚㸪㧗ศᏊᆺ ⺯ගࣉ࣮ࣟࣈࡣ㸪⭘⒆ᐇ㉁⤌⧊࡛ࡣ࡞ࡃ㸪⾑⟶ᐦᗘࡀ㧗ࡃ㸪⾑⟶㏱㐣ᛶࡀஹ㐍ࡋ࡚࠸ࡿ ⭘⒆࿘⦕ࡢ㛫㉁⤌⧊࡟㞟✚ࡋࡓ㸦Fig. 2-5㸧ࠋ ⭘ ⭘⒆⣽⬊࡟࠾ࡅࡿICG ࡢྲྀࡾ㎸ࡳ࡜ಖᣢࡢᶵᵓ HT-29 ࡢᇵ㣴⣽⬊࡟࠾࠸࡚㸪ICG ῧຍᚋࡢᇵ㣴᫬㛫࡜࡜ࡶ࡟⣽⬊ෆࡢ ICG ⺯ගࡀቑຍ

ࡋ㸪ྲྀࡾ㎸ࡲࢀࡓICG ࡣ 1 ᪥ᚋࡲ࡛ಖᣢࡉࢀࡓ㸦Fig. 2-7a, b㸧ࠋHT-29 ⣽⬊࡟࠾ࡅࡿ ICG

⺯ගࡣ㸪ICG ῧຍ 1 ศᚋ࡟⣽⬊⭷࡟ほᐹࡉࢀ㸦Fig. 2-7a㸧㸪ICG ῧຍ 30 ศᚋ࡟ࢦࣝࢪయ ࡜ᑠ⬊య㸪24 ᫬㛫࡟ࣜࢯࢯ࣮࣒࡬ࡢ㞟✚ࡀㄆࡵࡽࢀࡓ㸦Fig. 2-7c㸧ࠋࣇࣝ࢜ࣞࢭ࢖ࣥ࠶

ࡿ࠸ࡣ࣓ࢳࣞࣥࣈ࣮ࣝࡣ⣽⬊ෆ࡟ྲྀࡾ㎸ࡲࢀࡓࡶࡢࡢ㸪ICG ࡜ࡣ␗࡞ࡿ⣽⬊ෆᒁᅾࢆ♧

ࡋ㸪⣽⬊ෆಖᣢ᫬㛫ࡶICG ࡟ẚ࡭࡚▷࠿ࡗࡓ㸦Fig. 2-8㸧ࠋHT-29 ⣽⬊࡟࠾ࡅࡿ ICG ࡢྲྀ

ࡾ㎸ࡳࡣ㸪37°C ᮲௳ୗ࡟ẚ࡭࡚ 4°C ᮲௳ୗ࡛᭷ព࡟ῶᑡࡋࡓ㸦Fig. 2-9a, b㸧ࠋICG ⺯ග ࡣ㸪4°C ᮲௳ୗ࡛ࡣ⣽⬊⭷࡟ᒁᅾࡋࡓࡀ㸪37°C ᮲௳ୗ࡟ᡠࡍ࡜⣽⬊ෆ࡟ྲྀࡾ㎸ࡲࢀࡓ 㸦Fig. 2-9c㸧ࠋࡉࡽ࡟㸪HT-29 ⣽⬊࡟ࡼࡿ ICG ࡢྲྀࡾ㎸ࡳࡣ㸪Pitstop 2 ࡟ࡼࡗ࡚ࡶ㜼ᐖࡉ ࢀࡓ㸦Fig. 2-9d㸧ࠋ୍᪉࡛㸪HT-29 ⣽⬊࡟ࡼࡿ ICG ࡢྲྀࡾ㎸ࡳࡣ㸪BSP ࡟ࡼࡗ࡚ࡶ㜼ᐖ ࡉࢀࡓࡀ㸪CCK-8 ࡟ࡼࡗ࡚ࡣ㜼ᐖࡉࢀ࡞࠿ࡗࡓ㸦Fig. 2-9e, f, g㸧ࠋHT-29 ⣽⬊࡟࠾ࡅࡿ OATP1B3 ཬࡧ NTCP ࡢⓎ⌧ࡣ㸪⭘⒆⤌⧊ཬࡧᇵ㣴⭘⒆⣽⬊ࡢ࠸ࡎࢀ࡟࠾࠸࡚ࡶ㸪⣽⬊ ㉁࡜᰾࡟ᒁᅾࡋ࡚࠾ࡾ㸪⣽⬊⭷࡟ࡣࢃࡎ࠿࡛࠶ࡗࡓ㸦Fig. 2-9h; Fig. 2-10a㸧ࠋHT-29 ⭘⒆

⤌⧊୰ࡢCD68 㝧ᛶ࣐ࢡࣟࣇ࢓࣮ࢪࡣ㸪ࢺࣛࣥࢫ࣏࣮ࢱ࣮ศᏊ OATP1B2㸦ࣄࢺ OATP1B3

ࡢࣛࢵࢺ࣮࢜ࢯࣟࢢ㸧ࢆⓎ⌧ࡋ㸪NTCP ࡢⓎ⌧ࡣ㸪⭘⒆⣽⬊࡟ẚ࡭࡚㧗࠿ࡗࡓ㸦Fig. 2-10b㸧ࠋ

ICG ࡢ᤼ἥ࡟㛵ࢃࡿࡇ࡜ࡀ▱ࡽࢀ࡚࠸ࡿࢺࣛࣥࢫ࣏࣮ࢱ࣮ศᏊ multidrug resistance p-glycoproteins㸦MDRs㸧ࡢⓎ⌧ࡣ㸪⫢⣽⬊ࡸ CD68 㝧ᛶ࣐ࢡࣟࣇ࢓࣮ࢪ࡟ẚ࡭࡚㸪HT-29 ⣽⬊࡛ప࠿ࡗࡓ㸦Fig. 2-10c㸧ࠋ

30 ⭘ ⭘⒆⣽⬊࡟࠾࠸࡚ICG ࡀඃඛⓗ࡟ྲྀࡾ㎸ࡲࢀࡿཎ⌮ HT-29 ࡢᢸࡀࢇ࣐࢘ࢫ⤌⧊ࡢ zonula occludens-1㸦ZO-1㸧ࡢච␿ᰁⰍ࠿ࡽ㸪ṇᖖ࡞኱⭠ ୖ⓶⣽⬊࡛ࡣࢱ࢖ࢺࢪࣕࣥࢡࢩࣙࣥࡢᙧᡂࡀㄆࡵࡽࢀࡓ୍᪉࡛㸪⭘⒆⤌⧊࡛ࡣ㸪ࡑࡢᙧ ᡂࡣ୙᏶඲࡛࠶ࡗࡓ㸦Fig. 2-9㸧ࠋୖ⓶ᵝ⣽⬊ࡢᙧែࡀ␗࡞ࡿ㸪6 ✀ࡢࣄࢺ኱⭠ࡀࢇ⏤᮶ ⣽⬊ᰴࡢᇵ㣴⣽⬊࡛ࡣ㸪࠸ࡎࢀࡶ ᗘ౫Ꮡⓗ࡞ICG ࡢྲྀࡾ㎸ࡳࢆ♧ࡋࡓ㸦Fig. 2-12, 2-13㸧ࠋ ࡋ࠿ࡋ࡞ࡀࡽ㸪ICG ࡢ⣽⬊ෆྲྀࡾ㎸ࡳ㔞ࡣ㸪ࢱ࢖ࢺࢪࣕࣥࢡࢩࣙࣥᙧᡂࡢ୙᏶඲࡞ HT-29 ⣽⬊࡟ẚ࡭࡚㸪ࢱ࢖ࢺࢪࣕࣥࢡࢩࣙࣥࢆᙧᡂࡍࡿDLD-1 ⣽⬊࡛ᑡ࡞ࡃ㸪DLD-1 ࡼࡾࡶ ᏶඲࡞ࢱ࢖ࢺࢪࣕࣥࢡࢩࣙࣥࢆᙧᡂࡍࡿT84 ⣽⬊࡛ࡼࡾᑡ࡞࠿ࡗࡓ㸦Fig. 2-11b, c; Fig. 2-12㸧ࠋICG ࡢ⣽⬊ෆ࡬ࡢྲྀࡾ㎸ࡳ⬟ࡣ㸪⣽⬊ࡢࢱ࢖ࢺࢪࣕࣥࢡࢩࣙࣥᙧᡂ⬟࡟㈇ࡢ┦ 㛵ࢆ♧ࡋࡓ㸦Fig. 2-11b, c, d; Fig. 2-12; Fig. 2-14a, b㸧ࠋ࢝ࣝࢩ࣒࢘୙ྵᇵᆅࡢᇵ㣴᮲௳ୗ

࡟࡚㸪T84 ⣽⬊࠶ࡿ࠸ࡣ DLD-1 ⣽⬊ࡢࢱ࢖ࢺࢪࣕࣥࢡࢩࣙࣥᵓ㐀ࢆ◚⥢ࡉࡏࡿ࡜㸪 ICG

ࡢྲྀࡾ㎸ࡳࡀ᭷ព࡟ቑຍࡋࡓ㸦Fig. 2-11e, f; Fig. 2-14c, d㸧ࠋࡲࡓ㸪ࡑࡢྲྀࡾ㎸ࡳࡣ㸪 ᗘ ౫Ꮡⓗ࡛࠶ࡗࡓࠋ

ICG ᳨࡛ฟࡉࢀࡿ⭘⒆ࢧ࢖ࢬ࡜஧Ἴ㛗ほᐹ࡬ࡢᛂ⏝

HT-29 ⭘⒆⤌⧊࡟࠾࠸࡚㸪ICG ࡢ⺯ග࢖࣓࣮ࢪࣥࢢ࡟ࡼࡗ࡚㸪⭘⒆ᚄ 1 mm ௨ୗࡢ⭘ ⒆⤌⧊ࡲ࡛ྍど໬ࡉࢀࡓ㸦Fig. 2-15a㸧ࠋࡲࡓ㸪ࡑࡢࢥࣥࢺࣛࢫࢺࡣ㸪᫂ど㔝ࡢほᐹ᮲௳ ୗࡼࡾࡶ᭷ព࡟㧗࠿ࡗࡓ㸦Fig. 2-15b㸧ࠋHT-29 ⭘⒆⤌⧊࡟࠾࠸࡚㸪ICG ࡜ AS680 ࢆే⏝

ࡋࡓ஧Ἴ㛗⺯ග࢖࣓࣮ࢪࣥࢢ࡟ࡼࡗ࡚㸪ICG ࡣ⭘⒆⣽⬊㸪AS680 ࡣ⭘⒆㛫㉁ࢆᰁࡵศࡅ

࡚ྠ᫬࡟ྍど໬ࡋࡓ㸦Fig. 2-15c, d㸧ࠋࡲࡓ㸪ICG ࡜ 5-ALA ࢆే⏝ࡋࡓ஧Ἴ㛗⺯ග࢖࣓࣮ ࢪࣥࢢ࡛ࡣ㸪5-ALA ࡟ࡼࡗ࡚ㄏᑟࡉࢀࡓ PpIX ࡣ㸪ICG ࡜࡜ࡶ࡟㸪⭘⒆⣽⬊ࢆᶆ㆑ࡋࡓ ࡀ㸪ྛ㝧ᛶ⣽⬊ࡢศᕸࡣ␗࡞ࡗ࡚࠸ࡓ㸦Fig. 2-15e㸧ࠋ

31

⪃

⪃ᐹ

ICG ⺯ග࡟ࡼࡿ⭘⒆࢖࣓࣮ࢪࣥࢢࡣ㸪ᵝࠎ࡞⭘⒆⤌⧊࡛ሗ࿌ࡉࢀ࡚࠸ࡿ [8㸪10㸪26㸪 32㸪36㸪42㸪49㸪50㸪52㸪54㸪57㸪72㸪75㸪99㸪110] ࠋᮏ◊✲࡛⏝࠸ࡓ HT-29 ᢸࡀࢇ ࣐࢘ࢫ࡟࠾࠸࡚ࡶ㸪㟼⬦ᢞ୚ࡉࢀࡓICG ࡢ⺯ගࡀ⭘⒆⤌⧊࡛ほᐹࡉࢀࡓࠋICG ࡢ⭘⒆ ⤌⧊࡬ࡢ㞟✚ཎ⌮ࡢ௬ㄝ࡜ࡋ࡚㸪ICG ࡀ⾑Ύ࢔ࣝࣈ࣑ࣥ࡞࡝ࡢ⾑Ύࢱࣥࣃࢡ㉁࡜ྍ㏫ⓗ

࡟⤖ྜࡋ࡚㧗ศᏊᵝࡢືែࢆ࡜ࡿࡇ࡜࡛㸪enhanced permeability and retention㸦EPR㸧ຠ

ᯝ࡟ࡼࡗ࡚⭘⒆⤌⧊࡟㞟✚ࡍࡿ࡜⪃࠼ࡽࢀ࡚࠸ࡿࡀ㸪ICG ࡢయෆືែࡣ༑ศ࡟ゎᯒࡉࢀ ࡚࠸࡞࠸ [32㸪42㸪52㸪54] ࠋᮏ◊✲࡛ࡣ㸪㟼⬦ᢞ୚ࡉࢀࡓ ICG ࡣ㸪పศᏊᆺ⺯ගࣉࣟ ࣮ࣈ2-NBDG ࡜ྠᵝ࡟㸪⤌⧊㠀≉␗ⓗ࡟㏿ࡸ࠿࡟⾑⟶እ₃ฟࡋࡓࠋ୍᪉࡛㸪EPR ຠᯝ ࢆ♧ࡍ࡜ࡉࢀࡿ⾑Ύ࢔ࣝࣈ࣑ࣥࢆ⺯ගᶆ㆑ࡋࡓ㧗ศᏊᆺ⺯ග⸆๣࡛ࡣ㸪᫬㛫ࢆ࠿ࡅ࡚⭘ ⒆⤌⧊㑅ᢥⓗ࡟㞟✚ࡋࡓࠋHT-29 ⭘⒆⤌⧊࡟࠾࠸࡚㸪ICG ࡣ㸪ᢞ୚ 30 ศᚋ࡟ࡣ⣽⬊ෆ ࡟ྲྀࡾ㎸ࡲࢀ㸪ᑡ࡞ࡃ࡜ࡶ24 ᫬㛫ࡣ⣽⬊ෆ࡟ಖᣢࡉࢀࡓ୍᪉࡛㸪ṇᖖ⤌⧊࡛ࡣ㏿ࡸ࠿ ࡟᤼ἥࡉࢀࡓࠋ୍᪉࡛㸪㧗ศᏊᆺࡢ⺯ගࣉ࣮ࣟࣈࡣ㸪➨1 ❶ࡢ⤖ᯝ࡜ྠᵝ࡟㸪⾑⟶ᐦᗘ ࡀ㧗ࡃ㸪⾑⟶㏱㐣ᛶࡢஹ㐍ࡋࡓ⭘⒆࿘⦕ࡢ㛫㉁⤌⧊࡟㞟✚ࡋࡓࠋࡇࢀࡽࡢࡇ࡜࠿ࡽ㸪ᑡ ࡞ࡃ࡜ࡶHT-29 ᢸࡀࢇ࣐࢘ࢫ࡟࠾ࡅࡿ ICG ࡢ⭘⒆㞟✚ཎ⌮ࡣ㸪EPR ຠᯝ࡟ࡼࡿ⭘⒆㑅 ᢥⓗ࡞㞟✚࡛ࡣ࡞ࡃ㸪⤌⧊㠀≉␗ⓗ࡞ICG ࡢࢹࣜࣂ࣮ࣜ࡜㸪ࡑࡢᚋࡢ⭘⒆⣽⬊࡟ࡼࡿ ICG ࡢྲྀࡾ㎸ࡳཬࡧಖᣢ࡟ࡼࡗ࡚⏕ࡌ࡚࠸ࡿ࡜⪃࠼ࡽࢀࡓࠋ HT-29 ⭘⒆⣽⬊࡟ࡼࡿ ICG ࡢྲྀࡾ㎸ࡳࡣ㸪⭘⒆⤌⧊ࡔࡅ࡛࡞ࡃ㸪ᇵ㣴⣽⬊࡟࠾࠸࡚ ࡶㄆࡵࡽࢀࡓࠋඛ⾜◊✲ࡼࡾ㸪ICG ࡢ⣽⬊ෆྲྀࡾ㎸ࡳ࡟ࡣ㸪ࢺࣛࣥࢫ࣏࣮ࢱ࣮ศᏊࡢ OATP1B3 ࡜ NTCP ࡀ㛵୚ࡋ࡚࠾ࡾ [12] 㸪⫢⭘⒆࡟࠾ࡅࡿ ICG ⺯ගࡣ㸪ࡑࢀࡽࡢⓎ⌧ ࡜┦㛵ഴྥ࡟࠶ࡿࡇ࡜ࡀሗ࿌ࡉࢀ࡚࠸ࡿ [37㸪89] ࠋࡋ࠿ࡋ࡞ࡀࡽ㸪ᮏ◊✲࡟࠾࠸࡚ࡣ㸪 ICG ࡢ⣽⬊ෆྲྀࡾ㎸ࡳࡣ㸪OATPs/NTCP ࢺࣛࣥࢫ࣏࣮ࢱ࣮㜼ᐖ๣ BSP ࡟ࡼࡗ࡚㒊ศⓗ ࡟㜼ᐖࡉࢀࡓࡶࡢࡢ㸪OATP1B3 㑅ᢥⓗ࡞㜼ᐖ๣ CCK-8 ࡟ࡼࡗ࡚ࡣ㜼ᐖࡉࢀ࡞࠿ࡗࡓࠋ

32 ࡲࡓ㸪HT-29 ⣽⬊࡟࠾ࡅࡿ OATP1B3 ࡜ NTCP ࡢⓎ⌧ࡣ㸪ᇵ㣴᮲௳ୗ㸪࣐࢘ࢫ⛣᳜᮲௳ ୗࡢ࠸ࡎࢀ࡟࠾࠸࡚ࡶ⣽⬊㉁࡟ᒁᅾࡋ࡚࠾ࡾ㸪⣽⬊⭷࡟ࡣࢃࡎ࠿࡟ㄆࡵࡽࢀࡔࡅ࡛࠶ࡗ ࡓࠋඛ⾜◊✲࠿ࡽ㸪OATP1B3 ࡣ㸪⭘⒆≉␗ⓗ࡞ࣂࣜ࢔ࣥࢺࡀᏑᅾࡋ㸪ṇᖖศᏊ࡟ẚ࡭ ࡚㍺㏦ᶵ⬟ࡀຎࡿࡇ࡜ࡶሗ࿌ࡉࢀ࡚࠸ࡿ [94] ࠋࡇࢀࡽࡢࡇ࡜࠿ࡽ㸪ICG ࡢ⣽⬊ෆྲྀࡾ ㎸ࡳ࡟࠾࠸࡚㸪ࢺࣛࣥࢫ࣏࣮ࢱ࣮ศᏊࡢస⏝ࡣ㒊ศⓗ࡛࠶ࡾ㸪௚ࡢྲྀࡾ㎸ࡳ⤒㊰ࡢᏑᅾ ࡀ⪃࠼ࡽࢀࡓࠋඛ⾜◊✲ࡼࡾ㸪ICG ࡣ୧ぶ፹ᛶࢆ♧ࡋ [14] 㸪⣽⬊⭷ࢆᵓᡂࡍࡿ୺せᡂ ศࡢࣜࣥ⬡㉁࡟⤖ྜࡍࡿࡇ࡜ࡀሗ࿌ࡉࢀ࡚࠸ࡿ [43㸪111] ࠋࡇࡢ≉ᛶ࠿ࡽ㸪࢚ࣥࢻࢧ࢖ ࢺ࣮ࢩࢫ⤒㊰ [83㸪90] ࡟ࡼࡿ ICG ࡢ⣽⬊ෆྲྀࡾ㎸ࡳࡢྍ⬟ᛶࡀ⪃࠼ࡽࢀࡓࠋᮏ◊✲࡛ ࡣ㸪HT-29 ⣽⬊࡟࠾࠸࡚ ICG ࡣ⣽⬊⭷࡟⤖ྜࡋࡓᚋ㸪 ᗘ౫Ꮡⓗ࡟⣽⬊ෆ࡟ྲྀࡾ㎸ࡲࢀ ࡓࠋࡲࡓ㸪 ICG ࡢ⣽⬊ෆྲྀࡾ㎸ࡳࡣ㸪ࢡࣛࢫࣜࣥ౫Ꮡᛶ࢚ࣥࢻࢧ࢖ࢺ࣮ࢩࢫ㜼ᐖ๣ Pitstop 2 ࡟ࡼࡗ࡚㜼ᐖࡉࢀࡓࠋ௨ୖࡢࡇ࡜࠿ࡽ㸪ICG ࡢ⣽⬊ෆྲྀࡾ㎸ࡳ࡟ࡣ㸪ࢺࣛࣥࢫ ࣏࣮ࢱ࣮⤒㊰࡟ຍ࠼࡚㸪ࢡࣛࢫࣜࣥ౫Ꮡᛶࡢ࢚ࣥࢻࢧ࢖ࢺ࣮ࢩࢫ⤒㊰ࡶᏑᅾࡍࡿࡇ࡜ࡀ ♧၀ࡉࢀࡓࠋ ICG ࡢ⣽⬊ෆྲྀࡾ㎸ࡳࡣ㸪ࢱ࢖ࢺࢪࣕࣥࢡࢩࣙࣥᵓ㐀ࡢ◚⥢ࡋࡓ⭘⒆⣽⬊࡛ㄆࡵࡽ ࢀࡓࠋICG ࡜ࡣ␗࡞ࡿ⺯ගࣉ࣮ࣟࣈࢆ⏝࠸ࡓඛ⾜◊✲࡟࠾࠸࡚㸪ࢱ࢖ࢺࢪࣕࣥࢡࢩࣙࣥ ࡢ◚⥢ࡀ࢚ࣥࢻࢧ࢖ࢺ࣮ࢩࢫࢆஹ㐍ࡉࡏࡿࡇ࡜ࡀሗ࿌ࡉࢀ࡚࠸ࡿ [84] ࠋࡇࡢࡇ࡜࠿ࡽ㸪 ICG ࡢ⭘⒆⣽⬊㑅ᢥᛶࡣ㸪ࢱ࢖ࢺࢪࣕࣥࢡࢩࣙࣥᵓ㐀ࡢ◚⥢࡟ࡼࡿ࢚ࣥࢻࢧ࢖ࢺ࣮ࢩࢫ ࡢஹ㐍࡟ࡼࡗ࡚⏕ࡌ࡚࠸ࡿྍ⬟ᛶࡀ⪃࠼ࡽࢀࡓࠋᮏ◊✲࡟࠾࠸࡚㸪ICG ࡢ⣽⬊ෆྲྀࡾ㎸ ࡳࡣ㸪ࢱ࢖ࢺࢪࣕࣥࢡࢩࣙࣥᙧᡂࡀ୙᏶඲࡞⣽⬊࡟ẚ࡭࡚㸪ࢱ࢖ࢺࢪࣕࣥࢡࢩࣙࣥࢆᙧ ᡂࡍࡿDLD-1 ⣽⬊ࡸ T84 ⣽⬊࡛ᑡ࡞࠿ࡗࡓࠋ୍᪉࡛㸪DLD-1 ⣽⬊ࡸ T-84 ⣽⬊ࢆ㸪࢝ࣝ ࢩ࣒࢘୙ྵᇵᆅୗ࡛ᇵ㣴ࡋ࡚ࢱ࢖ࢺࢪࣕࣥࢡࢩࣙࣥᵓ㐀ࢆ◚⥢ࡉࡏࡿ࡜㸪ICG ࡢ⣽⬊ෆ ྲྀࡾ㎸ࡳࡀቑຍࡋࡓࠋࡲࡓ㸪ࡑࡢྲྀࡾ㎸ࡳࡣ㸪 ᗘ౫Ꮡⓗ࡛࠶ࡗࡓࡇ࡜࠿ࡽ㸪ࢱ࢖ࢺࢪ ࣕࣥࢡࢩࣙࣥᵓ㐀ࡢ◚⥢࡟క࠺ICG ࡢྲྀࡾ㎸ࡳࡢቑຍࡣ㸪࢚ࣥࢻࢧ࢖ࢺ࣮ࢩࢫ⤒㊰ࢆ ௓ࡋ࡚࠸ࡿࡇ࡜ࡀ♧၀ࡉࢀࡓࠋࡇࢀࡽࡢࡇ࡜࠿ࡽ㸪ICG ࡟ࡼࡿ⭘⒆⣽⬊ࡢᶆⓗཎ⌮࡜ࡋ ࡚㸪ICG ໬ྜ≀ࡀᣢࡘ⣽⬊⭷⤖ྜᛶ࡜⭘⒆⣽⬊ࡀᣢࡘࢱ࢖ࢺࢪࣕࣥࢡࢩࣙࣥ◚⥢࡟క࠺

33 ࢚ࣥࢻࢧ࢖ࢺ࣮ࢩࢫࡢஹ㐍ࡢ㸰ࡘࡀ⤌ࡳྜࢃࡉࡗ࡚㸪⭘⒆⣽⬊ࢆཷືⓗ࡟ᶆⓗࡍࡿ࡜⪃ ࠼ࡽࢀࡓࠋ ᮏ◊✲࡛ࡣ㸪HT-29 ⣽⬊ෆ࡟ྲྀࡾ㎸ࡲࢀࡓ ICG ࡣ㸪ᇵ㣴᮲௳ୗ㸪࣐࢘ࢫ⛣᳜᮲௳ୗ ࡢ࠸ࡎࢀ࡟࠾࠸࡚ࡶ㸪ᑡ࡞ࡃ࡜ࡶ24 ᫬㛫ࡣಖᣢࡉࢀࡓࠋᇵ㣴⣽⬊࡟࠾࠸࡚㸪ICG ࡣ㸪 ⣽⬊⭷࡟⤖ྜࡋࡓᚋ㸪⣽⬊ෆ࡟ྲྀࡾ㎸ࡲࢀ㸪ࢦࣝࢪయ࣭ᑠ⬊య࡟㞟✚ࡋ㸪ࡑࡢᚋࣜࢯࢯ ࣮࣒࡟⛣⾜ࡋࡓࠋࣇࣝ࢜ࣞࢭ࢖ࣥࡸ࣓ࢳࣞࣥࣈ࣮ࣝࡣ㸪HT-29 ⣽⬊ෆ࡬ࡢྲྀࡾ㎸ࡳࡀㄆ ࡵࡽࢀࡓࡶࡢࡢ㸪ICG ࡜ࡣ␗࡞ࡿ⣽⬊ෆᒁᅾࢆ♧ࡋ㸪ࡑࡢಖᣢ᫬㛫ࡣ ICG ࡟ẚ࡭࡚▷ ࠿ࡗࡓࠋࡇࢀࡽࡢࡇ࡜࠿ࡽ㸪ICG ࡣࢦࣝࢪయ࡜ᑠ⬊యࡢ⭷㍺㏦⣔࡟㞟✚ࡍࡿࡇ࡜࡛㸪㛗 ᫬㛫ಖᣢࡉࢀࡿ࡜⪃࠼ࡽࢀࡓࠋࡲࡓ㸪ICG ࡣ㸪ࣜࣥ⬡㉁࡜⤖ྜࡍࡿࡇ࡜࡟ࡼࡾᏳᐃ໬ࡍ ࡿࡇ࡜ࡀሗ࿌ࡉࢀ࡚࠸ࡿࡇ࡜࠿ࡽ [43] 㸪⣽⬊ෆ࡟࠾࠸࡚ࡶྠᵝࡢ ICG ࡢᏳᐃ໬ࡀ⏕ࡌ㸪 ⣽⬊ෆ࡛ࡢ㛗᫬㛫ࡢಖᣢ࡟ࡘ࡞ࡀࡿྍ⬟ᛶࡀ⪃࠼ࡽࢀࡓࠋࡉࡽ࡟㸪HT-29 ⭘⒆⤌⧊ࡢ⭘ ⒆⣽⬊࡟࠾ࡅࡿICG ᤼ἥࢺࣛࣥࢫ࣏࣮ࢱ࣮ศᏊ MDRs [33㸪80] ࡢⓎ⌧ࡣ㸪⫢⣽⬊ࡸ⭘ ⒆⤌⧊ࡢ࣐ࢡࣟࣇ࢓࣮ࢪ࡟ẚ࡭࡚ప࠿ࡗࡓࡇ࡜࠿ࡽ㸪HT-29 ⣽⬊࡛ࡣ ICG ࡀ⣽⬊እ࡟᤼ ἥࡉࢀ࡟ࡃ࠸≧ែ࡟࡞ࡗ࡚࠸ࡿྍ⬟ᛶࡶ⪃࠼ࡽࢀࡓࠋ 㟼⬦ᢞ୚ࡉࢀࡓICG ࡣ㸪⭘⒆ᚄ 1 mm ௨ୗࡢ⭘⒆⤌⧊ࢆ㸪ⓑⰍගୗ࡟ẚ࡭࡚㧗࠸ࢥ ࣥࢺࣛࢫࢺ࡛ྍど໬ࡋࡓࠋࡇࡢࡇ࡜࠿ࡽ㸪ICG ࡣ⫗║࡛ࡣ᳨ฟࡋ࡟ࡃ࠸ᚤᑠ⑓ኚࡢ᳨ฟ ࡟᭷⏝࡛࠶ࡿ࡜⪃࠼ࡽࢀࡓࠋICG ࡜ࡣ␗࡞ࡿ⺯ගἼ㛗ࢆᣢࡘ⺯ගࣉ࣮ࣟࣈࢆే⏝ࡋ࡚஧ Ἴ㛗⺯ගほᐹࢆ⾜࠺ࡇ࡜࡛㸪⭘⒆⤌⧊ࡢ␗࡞ࡿᡂศࢆྍど໬ࡋࡓࠋICG ࡜ AS680 ࡢే ⏝࡛ࡣ㸪ICG ࡣ⭘⒆⣽⬊㸪AS680 ࡣ⭘⒆㛫㉁ࢆࡑࢀࡒࢀྍど໬ࡋࡓࡇ࡜࠿ࡽ㸪⭘⒆⤌⧊ ษ㝖᫬ࡢ⭘⒆ቃ⏺ࡢぢᴟࡵ࡟᭷⏝࡛࠶ࡿ࡜⪃࠼ࡽࢀࡓࠋICG ࡜ 5-ALA/PpIX ࡢే⏝࡛ࡣ㸪 ࡝ࡕࡽࡶ⭘⒆⣽⬊ࢆᰁⰍࡋࡓࡶࡢࡢ㸪ࡑࡢᰁⰍࣃࢱ࣮ࣥࡀ␗࡞ࡗࡓࡇ࡜࠿ࡽ㸪⭘⒆⣽⬊ ࡀ୙ᆒ୍࡞㞟ᅋ࡟࡞ࡗ࡚࠸ࡿ࡜⪃࠼ࡽࢀࡓࠋࡇࡢࡇ࡜࠿ࡽ㸪ICG ࡜ 5-ALA/PpIX ࡢే⏝ ࡣ㸪୙ᆒ୍࡞⭘⒆⤌⧊ࢆྲྀࡾࡇࡰࡋ࡞ࡃ᳨ฟࡋ࡚ษ㝖ࡍࡿ㝿࡟᭷⏝࡛࠶ࡿ࡜⪃࠼ࡽࢀࡓࠋ ⮫ᗋ࡟࠾࠸࡚㸪␗ᖖ࡞࢚ࣥࢻࢧ࢖࣮ࢩࢫࡢஹ㐍ࡸࢱ࢖ࢺࢪࣕࣥࢡࢩࣙࣥᵓ㐀ࡢ◚⥢ ࡣ㸪ࡀࢇࡢ≉ᚩ࡜ࡉࢀ࡚࠸ࡿ [65] ࠋᐇ㝿࡟㸪ࣄࢺࡢ⫢⮚ࡀࢇ [47] ࡸ኱⭠ࡀࢇ [104] ࡟

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