岡 山 医 誌 (1994) 106, 641∼654
間質性 肺 疾 患 の病 態 に関す る研 究
-気
管支肺 胞洗浄 液 中サ イ
トカインの検討-岡 山大 学 医 学部 第 二 内科 学 教 室(指 導:木 村 郁郎 教 授)
杉
本
啓
介
(平 成6年2月28日 受 稿)Key words:間 質 性 肺 疾 患,気 管 支 肺 胞 洗 浄 法(broncho alveolar lavage: BAL), Interleukin 1(IL-1), transforming growth factor α,
transforming growth factor β
緒 言
間 質 性 肺 疾 患 は 肺 の 間 質 に 種 々 の 病 変 を き た す 疾 患 の 総 称 で あ る.こ の う ち特 発 性 間 質 性 肺 炎(idiopathic interstitial pneumonia: IIP)1) 2) は,原 因 不 明 で 急 性 あ る い は 慢 性 の 経 過 で 発 症 し,再 燃 増 悪 を 繰 り返 し な が ら徐 々 に 線 維 化 の 進 行 す る疾 患 で あ る.一 方 膠 原 病 肺3)-5)は各 種 膠 原 病 の 病 態 を 背 景 と し て 肺 に 病 変 を合 併 し た も の で あ る.そ し て 膠 原 病 に お け る標 的 臓 器 は様 々 で あ る が,病 変 の 主 座 は 全 身 の 結 合 組 織 で あ り, う ち 肺 病 変 と して は 胸 膜 病 変 と共 に 間 質 性 肺 炎 あ る い は 肺 線 維 症 と して 認 め ら れ る もの が 多 い. こ れ ら の 間 質 性 肺 疾 患 に お け る 肺 線 維 化 の 機 序 に は 種 々 の サ イ トカ イ ン の 関 与 が 推 察 さ れ て い る6)-8).そこで 気 管 支 肺 胞 洗 浄 法(broncho alveo lar lavage: BAL)9) 10)によ り肺 局 所 の 病 態 を 反 映 す る上 清 成 分 並 び に 細 胞 成 分 を採 取 し,サ イ
トカ イ ン と してInterleukin 1(IL-1), transform ing growth factor α(TGF-α), transforming growth factor β(TGF-β)に つ い て 測 定 を行 い,間 質 性 肺 疾 患 に お け る肺 線 維 化 病 態 との 関 連 を検 討 し た. 対 象 と 方 法 1.対 象 特 発 性 間 質 性 肺 炎(IIP)7例,年 齢 中 央 値56 歳(50-79歳,全 例 男 性),膠 原 病 肺11例 を 対 象 と し た.膠 原 病 肺 の 内 訳 は,慢 性 関 節 リ ウ マ チ に 合 併 し た 間 質 性 肺 炎(以 下RA+IP)6例, 年 齢 中 央 値59歳(46-65歳,男 女 比3/3),強 皮 症 に 合 併 し た 間 質 性 肺 炎(以 下PSS+IP)3 例,年 齢 中 央 値52歳(50-54歳,男 女 比1/2), 皮 膚 筋 炎 ま た は 多 発 性 筋 炎 に 合 併 した 間 質 性 肺 炎(以 下DM+IP)2例(年 齢45歳, 63歳,男 女 比1/1)で あ り,健 康 人 対 照10例,年 齢 中 央 値27歳(26-40歳,男 女 比9/1)と 比 較 検 討 し た. 尚IIPは1980年 度 の 厚 生 省 特 定 疾 患 肺 線 維 症 研 究 会 の 診 断 基 準11)に よ り診 断 し た.膠 原 病 肺 は,膠 原 病 を各 診 断 基 準12)-14)に よ り診 断 し,こ れ に 胸 部X線 像 に て 間 質 性 陰 影 を認 め る もの を 本 症 と し た. 2.方 法 1)気 管 支 肺 胞 洗 浄 法(BAL) BALは 既 報9) 10)の如 く右 肺 中 葉 の 区 域 気 管 支 B4ま た はB5の い ず れ か に 気 管 支 フ ァ イバ ー ス コ ー プ をwedgeし , 37℃ の 無 菌 生 理 食 塩 水 を1回 に50ml注 射 器 に て 注 入 し,吸 引 器 を用 い て 洗 浄 液 を 回 収 した.こ の 操 作 を4回 繰 り返 し,計200 mlに て 洗 浄 を行 っ た.洗 浄 液 は 回 収 量 を 測 定 し, 滅 菌 ガ ー ゼ で 濾 過 し た の ち,シ リ コ ン処 理 試 験 管 を 用 い て 遠 沈(250G, 10分)し,上 清 と細 胞 成 分 に 分 離 した.上 清 は 測 定 の 時 期 ま で 一 部 を 凍 結 乾 燥 末 に,残 り は そ の ま ま-70℃ に 凍 結 保 存 し た.細 胞 成 分 は 細 胞 分 類 や リ ン パ 球 サ ブ セ ッ トを検 討 した 後,細 胞 数 を1×106コ/mlに 調 整 して, 1%FCS加RPMI-1640に て2日 間 培 養 641
し,遠 沈 後 上 清 を採 取 し た.こ の 培 養 上 清 に 関 し て も測 定 ま で-70℃ に 保 存 し た. 2) BALF上 清 の 濃 縮 BALF上 清 は サ イ ト カ イ ン測 定 用 に 濃 縮 の 必 要 が あ り,分 子 量3,000以 下 の 物 質 を 濾 過 す る セ ン ト リ コ ン3(グ レー ス ジ ャ パ ン 株 式 会 社,ア ミ コ ン 事 業 部)を 用 い て20倍 に 濃 縮 した.各 検 体 を2mlず つ セ ン ト リ コ ン3に 注 入 し ア ン グ ル 型 ロ ー タ の 超 遠 沈 機 で5000G, 3時 間 遠 沈 し, 50 μlに な る ま で 濃 縮 し た.尚, BALF細 胞 培 養 上 清 に 関 し て は,濃 縮 せ ず そ の ま ま で サ イ トカ イ ン を 測 定 し た. 3) TGF-α とIL-1α の 測 定 TGF-α とIL-1α の 測 定 は い ず れ も大 塚 ア ッ セ イ 研 究 所 のTGF-α 測 定 キ ッ ト, IL-1α 測 定 キ ッ トを 用 い て 測 定 し た.あ らか じめ 一 次 抗 体 をcoatingし て あ る プ レー ト(96穴)を 洗 浄 後, 標 準 液 ま た は 検 体 を分 注 し,静 置 後,洗 浄 し続 い て2次 抗 体(抗 ヒ トTGF-α or IL-1α 家 兎 血 清)を 反 応 させ,洗 浄 後3次 抗 体(peroxidase 標 識 抗 家 兎IgG山 羊 抗 体)を 加 え た.最 後 に 洗 浄 後,発 色 剤(O-Phenylenediamine)を 添 加 し 反 応 後ELISAリ ー ダ ー(吸 光 度490nm)に て 吸 光 度 を 測 定 し,検 量 線 か らTGF-α, IL-1α の 各 々 を算 出 し た.検 体 と して は, BALF細 胞 培 養 上 清 と 濃 縮 し たBALF上 清 を 用 い た.ま た TGF-α に 関 し て は,血 清 に つ い て も 測 定 し た. 4) TGF-β の 測 定 TGF-β は ア マ ー シ ャ ム 社 のTGF-β ELISA シ ス テ ム を 用 い て 測 定 し た.測 定 方 法 はTGF-α と ほ ぼ 同 様 で あ り,一 次 抗 体 をcoatingし た プ レー ト(96穴)に,標 準 液 ま た は 検 体 を分 注 し,静 置 後, 2次 抗 体(抗 ヒ トTGF-β ウ サ ギ 血 清), 3次 抗 体(ビ オ チ ン 標 識 抗 ウ サ ギIgG山 羊 抗 体),発 色 剤(O-Phenylenediamine)を 各 々 反 応 さ せELISAリ ー ダ ー(吸 光 度490nm)に て 吸 光 度 を 測 定 し た.こ の シ ス テ ム に 用 い ら れ て い る抗 体 は,活 性 型TGF-β と特 異 的 に 結 合 す る.一 方,生 体 内 で産 生 さ れ るTGF-β は ほ とん ど が 活 性 を 持 た な い 潜 在 型 と して 存 在 し て い る た め,あ らか じめ 検 体 を酸 で 処 理 し潜 在 型 TGF-β を全 て 活 性 型 に 変 換15)して か ら 測 定 を行 っ た.
5) BALF上 清 中procollagen type III(PIII P)の 測 定
BALF上 清 中 のPIIIPはBehring社 の リ ア グ ノ ス トPIIIP coated tubeキ ッ ト を 用 い,イ ム ノ ラ ジ オ メ ト リ ッ ク法 に て 測 定 し た.検 体 と し て は セ ン ト リコ ン3に よ り濃 縮 し たBALF上 清 を用 い た.抗PIIIPマ ウ ス モ ノ ク ロー ナ ル 抗 体 をcoatingし た 試 験 管 に 標 準 血 清,検 体 を 入 れ,振 盪 し な が ら 反 応 さ せ た 後 洗 浄 し,ヨ ウ化 procollagen III peptide mouse monoclonal antibody(125I)を 加 え γ 線scintilation counterで 測 定 し た.
6) BALF中soluble IL-2 receptor(sIL-2R) の 測 定
BALF中sIL-2Rの 測 定 は, BALF凍 結 乾 燥 末 を蒸 留 水 に て 溶 解 し, BALF原 液 に 対 し て 最 終 的 に は10倍 濃 縮 に 調 整 した 検 体 を 用 い て, CELL-FREE IL-2R TEST KIT(T CELL
SCIENCE 社)に よ り測 定 し た.一 次 抗 体(2 R1.2:抗Tac抗 体)をcoatingし た プ レー ト に 標 準 液 ま た は 検 体 を50μlず つ 分 注 し,引 き 続 い て2次 抗 体(7G7/B6: HRP標 識 抗IL-2R 抗 体)を100μlず つ 加 え,室 温 に て3時 間incu bateし 洗 浄 後,発 色 剤 を添 加 し反 応 後, ELISA リー ダ ー(吸 光 度490nm)に て 吸 光 度 を 測 定 し検 量 線 よ りsIL-2R濃 度 を算 出 し た.
結
果
1.間
質 性 肺 疾 患 に お け るBALF
1)回
収 率 と総 細 胞数
対 象症 例 にBALを
実 施 し,そ の 回収 率 と総
細 胞数 を健 康 人 対 照 と比較 した(表1).回
収率
に 関 して は, IIP,膠 原病 肺 群 は 健康 人対 照 に比
較 して1%以
下 の 危 険率 で有 意 に低率 であ った.
また総 細 胞数 を 回収 量 で 除 した総 細 胞 密度 は,
表1 間質性 肺疾患のBALF
間質 性 肺疾 患 の病 態 に 関 す る研 究
643
表2 間質性肺疾患に おけるBAL液
中細胞分類
a)細 胞比 率 b)細 胞密 度 図1 間 質性 肺 疾 患 にお け るBALF中TGF-α IIPのBALF中TGF-α は 健 康 人対 照 に比 べ 有 意(P<0.01)に 高 値 で あ っ た.特 に膠 原病 肺 に お い て 高値 を示 した.
2)間
質 性 肺 疾 患 におけ るBALF中
細 胞成 分 と
細 胞密 度
BALF中
各 細胞 密 度 を比較 した とこ ろ,好 中
球 密度 に関 して は健 康 人対 照 に 比べIIPと
膠 原
病肺 が いず れ も有 意 に高値 を示 した(P<0.05).
リンパ 球 密 度,好 酸 球 密 度 につ い て も, IIP,膠
原病 肺 は対 照 に 比べ 高 値 を と る傾 向 を示 した.
好 塩 基 球 に 関 して は 細 胞1,000個 以 上 の 観 察 で も ほ とん どの 症 例 で 認 め られ なか った(表2). BALF 中T-cell subsetに 関 し て は,健 康 人 対 照 と有 意 差 は 認 め な か っ た が, IIPで はCD4が や や 多 く, CD4/CD8比 が 高 値 と な る傾 向 を 示 し た. 2.間 質 性 肺 疾 患 に お け るBALF上 清 中TGF -α 各 種 間 質 性 肺 疾 患 に お け るBALF上 清 中 TGF-α を 測 定 し た. IIP29.2±6.76pg/ml (mean±SD),膠 原 病 肺29.9±27.5pg/mlに 対 し健 康 人 対 照15.5±10.6pg/mlで あ り, IIP群 で は 健 康 人 対 照 に 比 べ 有 意(P<0.01)に 高 値 で あ り,膠 原 病 肺 も高 値 を と る 傾 向 が み ら れ た(図 1).膠 原 病 肺 の 中 で はRA+IPが, PSS+IP, DM+IPに 比 べ 高 値 と な る 傾 向 を認 め た. 3.間 質 性 肺 疾 患 に お け るBALF上 清 中TGF -β BALF上 清 中TGF-β に 関 し て は, IIP23.7± 13.8ng/ml,膠 原 病 肺25.8±19.2ng/mlに 対 し 健 康 人 対 照 で は9.53±2.59ng/mlで あ り, IIPと 膠 原 病 肺 で は 有 意(P<0.01, P<0.05)に 高 値 で あ っ た(図2).膠 原 病 肺 の 中 で は, TGF-α と 異 な りDM+IP, PSS+IPがRA+IPに 比 べ 高 値 を と っ た. 4.間 質 性 肺 疾 患 に お け るBALF上 清 中IL-1 α BALF上 清 中IL-1α に 関 し て は, 20倍 濃 縮図2 間 質 性 肺 疾 患 に お け るBALF中TGF-β TGF-β はIIP,膠 原 病 肺 に お い て 健 康 人 対 照 に 比 べ 有 意(P<0.01, P<0.05)に 高 値 で あ っ た. の 状 態 で 健 康 人 対 照8例 中5例, IIP5例 中3 例,膠 原 病 肺6例 中3例 が 測 定 限 界 以 下 で あ っ た.測 定 可 能 で あ っ た症 例 に 関 し て はRA+IP に1例 の み 高 値 例 を 認 め た. 5.血 清 中TGF-α の 検 討 血 清 中TGF-α は 健 康 人 対 照460±138pg/ml に 対 し, IIP603±372pg/ml,膠 原 病 肺596±277 pg/mlで あ り疾 患 群 で や や 高 値 で あ っ たがBALF 中TGF-α に 見 ら れ る ほ ど の 差 で は な か っ た. 6.血 清 中 とBALF上 清 中TGF-α 各 症 例 に お い て 血 清 中 とBALF上 清 中 の TGF-α の 関 連 を検 討 す る 目 的 で,各 々 のTGF -α 比(BALF中TGF-α/血 清 中TGF-α)を 求 め 比 較 し た.健 康 人 対 照0.043±0.024に 対 し, IIP0.066±0.033,膠 原 病 肺0.058±0.039で あ り 疾 患 群 で や や 高 い傾 向 で あ っ た.尚,血 清 中 と BALF上 清 中TGF-α の 間 に は 相 関 を 認 め な か っ た. 7. BALF細 胞 培 養 上 清 中 のIL-1とTGF BALF細 胞 の 培 養 を行 い,培 養 液 中 のTGF -α, TGF-β, IL-1α を 各 々 測 定 し た. IL-1α は 図3 間質 性 肺 疾 患 のBALF細 胞 産 生IL-1α BALF細 胞 培 養 上 清 中 のIL-1α は,間 質 性 肺 疾 患症 例 に お い て高 値 例 を 認 め た. 全 例 測 定 可 能 で あ り,健 康 人 対 照 に 比 べ 疾 患 群 に 高 値 例 を認 め た(図3).個 々 の 症 例 に お け る 培 養 液 中 とBALF上 清 中 のIL-1α に は 相 関 を 認 め な か っ た.尚, TGF-α に 関 して は,セ ン ト リ コ ン で 濃 縮 し た 状 態 で も健 康 人 対 照 を含 む ほ とん どの 培 養 液 で,測 定 限 界 以 下 とな りRA+ IPとIIPの 各1例 で の み 測 定 可 能 で あ っ た. ま たTGF-β に 関 し て はBALF細 胞 培 養 液 と コ ン トロ ー ル と し て 測 定 し た 培 養 液(1%FCS 加RPMI-1640)のTGF-β 濃 度 に 差 が み ら れ な か っ た. 8.間 質 性 肺 疾 患 に おけ る肺 機 能 とTGFの 関 連 1)%VCと の 関 連 に つ い て 肺 の 線 維 化 進 展 に 伴 う拘 束 性 変 化 と, BALF 上 清 中TGF-α, TGF-β の 関 連 を見 る 目的 で% VC80%で 症 例 を 区 分 して 比 較 した(図4). TGF -α に 関 して は2群 間 で 差 を認 め なか った がTGF -β で は 拘 束 性 変 化 の 強 い%VC80%以 下 の 群 に お い て,高 値 と な る傾 向 を示 し た. 2) %DLcoと の 関 連 肺 拡 散 能 を 反 映 す る%DLcoと の 関 連 に お い て も, %DLco70%で 症 例 を 区 分 して 比 較 し た.
間質 性 肺疾 患 の病 態 に 関 す る研 究
645
図4 間質 性 肺 疾 患 の 肺 活 量 とTGF %VC80%で 症 例 を 区分 しBALF中 のTGFを 比 較 し た と こ ろTGF-α で は差 を認 め な か った が, TGF -β で は拘 束性 変 化 の 強 い群 で 高値 とな る傾 向 を示 した . 図5 間 質 性 肺 疾 患 に お け る胸 部X線 所 見 とBALF中TGF 胸 部X線 上,線 維 化 進 行 例 でTGF-β は高 値 で あ っ た が, TGF-α は逆 に低 値 とな る傾 向 で あ っ た.BALF上
清 中TGF-α
は%DLco70%以
上 の 軽
度 の 拡散 能 障 害 の群 に お い て高 値 とな る傾 向 を
示 し,
TGF-β
は70%以 下 の 高 度 の拡 散 能 障害 の
群 に お い て高 値 とな る傾 向 を示 した.
9.間
質 性 肺 疾 患 に お け る 胸 部X線
所 見 と
BALF上
清 中TGF
間 質性 肺 疾 患の 胸 部 陰 影 を野辺 地 分 類16)に従
いI型 か らIV型 に 分 け, I型 あ る い はII型 の 陰 影 を 呈 す る 群(I+II型)とIII型 あ る い はIV型 の 陰 影 を呈 す る群(III+IV型)に 症 例 を 区 分 し, BALF上 清 中TGF-α, TGF-β を 比 較 し た(図 5). TGF-α は, III+IV型 に 比 べI+II型 が よ り高 値 を 取 る傾 向 を 示 し, TGF-β はI+II型 に 比 べIII+IV型 す な わ ち 肺 線 維 化 の 進 行 し て い る
図6 間 質性 肺 疾 患 の 活 動 性 とBALF中TGF BALF中TGF-α, TGF-β 共 に 間質 性 肺 疾 患 の 活 動 性 の 高 い群 で 高 値 とな る傾 向 で あ っ た. 図7 BALF中sIL-2RとTGFの 相 関 BALF中TGF-α, TGF-β と も, sIL-2Rと 有 意(p<0.05)の 正 の 相 関 を 認 め た.
群 に お いて よ り高値 を示 す傾 向 で あ っ た.
10.間 質 性 肺疾 患の活 動 性 とBALF上
清 中サイ
トカ イ ン
間質 性 肺 疾 患 の 活動 性 を肺機 能,血 液 ガ ス,
胸 部X線
所 見等 の 変 動 と, Gaシ
ンチ所 見 に 基
づ い て判 定 し,
BAL施
行 時 の 各症 例 を活 動 期群
と非 活動 期 群 に 区分 し, BALF上
清 中TGF-α
並 び にTGF-β
を比較 した(図6).
TGF-α,
TGF-β
は共 に 非 活動 期 に 比べ,活 動 期 と判 定 し
た症 例 で高 値 とな る傾 向 を認 め た.
11. BALF上 清 中procollagen type IIIとTGF の 関 連 BALF上 清 中PIIIPは 健 康 人 対 照0.0286± 0.048に 対 しIIP0.866±1.21,膠 原 病 肺0.175± 0.194で 数 値 の ば らつ きが 大 き く各 群 間 に 有 意 差 は 認 め な か っ た が 間 質 性 肺 疾 患 に お い て 高 値 で あ っ た. BALF上 清 中PIIIPとTGFの 相 関 に つ い て は 例 数 は 少 な い がTGF-α, TGF-β と も 正 の 相 関(r=0.490, r=0.862)が 窺 わ れ,肺 線 維 化 病 態 と肺 局 所 のTGF-α, TGF-β の 関 連 が 示 唆 さ れ た.
間 質性 肺 疾 患 の 病 態 に関 す る研 究
647
マ ク ロ フ ァ ー ジ リ ン パ 球好中球
好酸球
図8 間 質 性 肺 疾 患 に お け るBALF中 細 胞 密 度 とTGF-α BALF中TGF-α とマ ク ロ フ ァー ジ密 度 の 間 に正 の相 関 を 認め た が,そ の他 の 細 胞 成 分 との 相 関 は認 め なか っ た.ま たTGF-β に 関 して は いず れ の 細 胞 成 分 との相 関 も見 られ な か った. 12. BALF上 清 中sIL-2RとTGFの 関 連 BALF上 清 中sIL-2Rは 健 康 人 対 照10.0± 8.19U/mlに 対 し, IIP58.5±61.7,膠 原 病 肺 56.7±71.5で あ り 間 質 性 肺 疾 患 に お い て 著 明 に 高 値 で あ っ た. BALF上 清 中 のsIL-2RとTGF -α, TGF-β の 相 関 を 検 討 し た と こ ろ 各 々 有 意 の 正 の 相 関(r=0.692, r=0.712, P<0.05)を 認 め た(図7). 13. BALF細 胞 密 度 とBALF上 清 中 サ イ トカ イ ン 間 質 性 肺 疾 患 のBALF中 各 細 胞 成 分 の 密 度 とBALF上 清 中TGFの 相 関 を 検 討 し た. TGF -αに 関 し て は, BALF中 の マ ク ロ フ ァ ー ジ密 度 と の 間 に は 正 の 相 関 が 窺 わ れ た が 他 の 細 胞 成 分 と の 間 に は 関 連 を認 め な か っ た(図8).一 方, TGF-β に 関 して は い ず れ の 細 胞 成 分 と も相 関 を 認 め な か っ た.ま たBALF細 胞 の 各T-cell subsetとBALF上 清 中TGF-α, TGF-β と は 相 関 を 示 さ な か っ た.さ ら に, BALF細 胞 培 養液 中IL-1α につ いて も検 討 を行 ったが, BALF
中各細 胞 成分 との相 関 は 認め なか った.
考
察
IIPは 原 因不 明 の 間質 性 肺 炎 で あ るが,そ の病
態 に 関 しては,種 々の検 討が な されて お り17)-22),
何 らか の障 害 あ るい は抗 原 が肺 に お い て炎 症 性
細 胞群 を活 性 化 し種 々 の サ イ トカ イ ン産 生 か ら
胞 隔 に お け る炎 症 が進 展 ・維 持 され,線 維 芽 細
胞 に 対す る これ らのサ イ トカイ ン刺 激 に よ る増
殖,活 性 化 か ら膠 原線 維 の 増加 が もた ら され,
肺 線 維化 が進 行 す る と考 え られ て い る1).これ に
対 し膠 原病 肺 は,免 疫 異 常 に 基づ く血 管 を含 む
結 合 組 織 の炎症 を基 盤 に起 こる もの と推 測3)され
て い る.膠 原 病 性 肺病 変 の主 た る もの は胸 膜 炎
と間質性 肺 炎 であ り,臨 床 的 に は特 に肺 病 変 の
みが 先行 した膠 原病 肺 症例 は,
IIPと の鑑 別 困難
な こ とが 多い.従 って 間質 性 肺 炎 の成 立 機 序 は
異 な って い て も,肺 線維 化 過 程 の 多 くの部 分 は
共通 して い るこ とが 考 え られ る.
サ イ トカ イ ン は 免 疫 応 答,炎 症 反 応 な ど の 生 体 防 御 に 重 要 な 役 割 を果 た して い る生 理 活 性 因 子 で あ り,生 体 の 高 次 機 能 を 維 持 す る た め に 重 要 な 因 子 で あ る.サ イ トカ イ ン は 一 つ の 物 質 で あ り な が ら,多 機 能 を有 す る と 同 時 に 数 種 の も の が 生 理 学 的 に 似 た よ う な 構 造 を 持 ち, target cellに 対 して 同 様 の 反 応 を示 す こ と も 多 い23). ま た サ イ トカ イ ン の 中 に は 異 な るtarget cellを 介 し て,相 反 す る 二 つ の 作 用 を 示 す も の も あ る. 例 え ばTGF-β は,リ ン パ 球 のIL-1 receptor 発 現 の 抑 制 に よ り, IL-1に 対 す る増 殖 反 応 を 抑 制 す る24)一方,マ ク ロ フ ァー ジ や 線 維 芽 細 胞 に 対 し て は 強 力 な 遊 走 因 子 と し て 働 く25). 肺 局 所 に お い て は 種 々 の サ イ トカ イ ン が 巧 妙 な ネ ッ トワ ー ク を 形 成 し,肺 線 維 化 病 態 を 調 節 して い る こ とが 推 察 さ れ る8) 26)-28).肺線 維 化 に 関 与 す るサ イ トカ イ ン29) 30)と し て は, platelet der ived growth factor(PDGF)31)-34), insulin-like growth factor(IGF)35) 36), epidermal growth
factor(EGF), fibroblast growth factor (FGF)36)等 が 今 回 検 討 し たIL-137), TGF-α, TGF-β38)と 共 に 報 告 され て い る. IL-1は 分 子 量 12,000∼15,000の マ ウ ス 胸 腺 細 胞 に 対 す る分 裂 促 進 活 性 を有 す る物 質 と して 報 告39)-41)され た が, 発 熱 物 質 と し て 作 用 す る 他,リ ン パ 球 や 線 維 芽 細 胞 の 増 殖 促 進 作 用,肝 細 胞 に 対 す る 急 性 期 蛋 白 の 産 生 促 進 に も作 用 す る. IL-1に は, IL-1α とIL-1β40) 42)の2種 類 が 区 別 さ れ,ア ミ ノ 酸 レ ベ ル で の 相 同 性 は27%で あ る が,そ の 生 物 活 性 は ほ ぼ 同 一 で あ り レ セ プ ター も 同 じで あ る.今 回 測 定 を行 っ たBALF上 清 中IL-1α に 関 し て はRA+IPの1例 で 著 高 を示 し た の み で,ほ と ん ど の 例 で 測 定 限 界 以 下 で あ っ た.従 っ て 肺 線 維 化 病 態 へ のIL-1α の 関 与 は 乏 しい と考 え られ た. -方 , TGF43)は,正 常 ラ ッ トの 腎 臓 由 来 の fibroblastをtransformed cell様 形 態 に 変 え, か つ 細 胞 に 浮 遊 性 を 与 え る 因 子 と して 見 い だ さ れ た.こ のTGFに もTGF-α44)とTGF-β45) の2種 が あ る.こ れ ら は 共 に 上 記 の よ う な 性 質 を 持 っ て い る が,全 く別 の 物 質 で あ り構 造,生 物 活 性 と も に 異 な っ て い る. TGF-α46)は 分 子 量 5,000∼20,000で 構 造 的 に もEGFと 類 似 し,ま た ほ と ん ど 同 じ生 理 活 性 を持 っ て い る.そ の 作 用 と し て は,上 皮 細 胞,血 管 内 皮 細 胞,線 維 芽 細 胞 を 含 む 多 くの 細 胞 のDNA合 成 を促 進 し 細 胞 形 態 に も影 響 を 与 え る. TGF-α は も と も と, 種 々 の 腫 瘍 ウ イ ル ス に よ っ て トラ ン ス フ ォ ー ム さ れ た 細 胞 に 認 め ら れ,自 然 発 生 癌 で もTGF-α 産 生 能 を 有 す る な ど,悪 性 腫 瘍 の 発 生 や そ の 増 殖 と の 関 連 で 多 くの 報 告 が あ る47) 48).これ に 対 しTGF-β49)は 分 子 量 は約25,000で 基 本 的 には 各 種 細 胞 の 増 殖 を 抑 制 し,線 維 芽 細 胞 に 対 し て は, 分 化 の 強 力 な 誘 導 作 用,細 胞 外 マ ト リ ッ ク ス 蛋 白 の 合 成 促 進 作 用 を示 す.ま た 軟 寒 天 培 地 中 で は 線 維 芽 細 胞 の 増 殖 を促 進 す る な ど細 胞 株 や 培 養 条 件 に よ り異 な っ た 反 応 を 示 す.ヒ ト正 常 線 維 芽 細 胞 のplasminogen activator分 泌 に対 し, TGF-α が 促 進 に 働 き, TGF-β は 逆 に 抑 制 す る50). Plasminogen activatorはplasminogen を 活 性 型plasminに 変 換 し,フ ィ ブ ロ ネ クチ ン, ラ ミニ ン な ど の 細 胞 接 着 蛋 白質 を含 む 種 々 の 蛋 白質 を 非 特 異 的 に 分 解 す る. 今 回 の 検 討 で は 間 質 性 肺 炎 の 活 動 性 との 関 連 でTGF-α とTGF-β とが 共 に 活 動 期 に は 高 値 で あ っ た.し か し な が ら,肺 機 能 や 胸 部X線 陰 影 と の 関 連 に お い て は 肺 活 量,肺 拡 散 能 の 低 下 群 に お い てTGF-β が 高 値 で, TGF-α は 逆 に 低 値 と な る な ど,異 な っ た 動 態 を示 して い た. こ の こ と よ り肺 線 維 化 の 進 展 に お い てTGF-α とTGF-β の 関 与 す る 病 態 が 異 な る と考 え ら れ た. TGF-α は 間 質 性 肺 炎 の 活 動 期 に 線 維 芽 細 胞 の 増 殖 や 胞 隔 内 の 炎 症 維 持 に 関 与 し, TGF-β は 肺 内 の 線 維 芽 細 胞 に働 き膠 原 線 維 を増 加 させ, 肺 線 維 化 を 進 展 させ る よ う に働 い て い る こ とが 推 察 さ れ る.ブ レ オ マ イ シ ン に よ る肺 線 維 症 に お い て,肺 のendothelial cellの 膠 原 線 維 産 生 が,抗TGF-β 抗 体 を加 え る こ とに よ り,阻 害 さ れ る 報 告51) 52)も さ れ て お り, TGF-β が 肺 の 線 維 化 に 重 要 と考 え ら れ た.肺 局 所 に お け る線 維 芽 細 胞 の 増 殖,分 化,線 維 化 進 展 に つ い て は, さ ら に 様 々 な サ イ トカ イ ン や 肺 局 所 に 集 積 す る 好 中 球 あ る い は 好 酸 球 に よ り放 出 さ れ る種 々 の 蛋 白分 解 酵 素,細 胞 接 着 因 子, superoxide, per oxidase等 が 複 雑 に 絡 み 合 い,胞 隔 レベ ル に お け る 炎 症 が 維 持 さ れ,線 維 化 が 進 行 す る もの と
間質 性 肺 疾 患 の病 態 に 関 す る研 究
649
考 え ら れ る53)-56). 膠 原 線 維 は 正 常 肺 組 織 に お い て も重 要 な構 成 成 分 で あ り, I-IV型 に 分 類 さ れ, III型は 主 と して 気 管 支 周 囲 と胞 隔 間 質 に 分 布 し57) 58),間 質 性 肺 疾 患 の 初 期 に 増 加 す る と さ れ て い る59). PIIIP はIII型collagen合 成 上 の 中 間 代 謝 産 物 で, procollagenがaminoproteaseに よ りN末 端 で 切 断 さ れ た もの60)で あ り,膠 原 線 維 の 増 生,線 維 化 を 反 映 す る 因 子 と考 え ら れ て い る.以 前 よ り肝 硬 変 症 や 各 種 悪 性 腫 瘍,骨 髄 線 維 症 な ど で 血 清 中PIIIPの 増 加 が 報 告60)さ れ て お り,筆 者 ら も 間 質 性 肺 疾 患 に お け る 血 清 中PIIIPの 増 加 を報 告61)し て い る.今 回,肺 の 線 維 化 を よ り直 接 的 に 評 価 す る た め に, BALF中PIIIPを 測 定 し, サ イ トカ イ ン の 関 連 を検 討 し た. BALF中PIII Pは 健 康 人 対 照 に 比 べ, IIPと 膠 原 病 肺 に お い て 高 値 を と り, BALF中TGF-α 並 び にTGF -β と正 の 相 関 を認 め た.従 っ て, TGFが 間 質 性 肺 疾 患 に お け る 線 維 化 病 態 と密 接 に 関 連 し て い る と推 察 さ れ た. sIL-2R62) 63)はIL-2結 合 能 に 関 し て,細 胞 表 面 のIL-2 receptorと 同 程 度 で あ り64), IL-2 依 存 性 免 疫 応 答 のdown regulationや 生 体 内 に お け るIL-2の 半 減 期 を延 長 す る 等 の 機 能 が 推 察 さ れ て い る. BALF中sIL-2Rは 肺 局 所 の 免 疫 応 答 活 性 を 反 映 し て お り,間 質 性 肺 炎 の 活 動 性 を 表 す 指 標 の1つ と し てBALF中sIL-2Rを 測 定 し た. IIP並 び に 膠 原 病 肺 のBALF中sIL -2Rは 健 康 人 対 照 に 比 べ 有 意 に 高 値 で あ り,さ らにBALF中TGF-α あ る い はTGF-β と正 の 相 関 を示 し, IL-2の 関 与 す る 病 態 とTGF産 生 との 関 連 が 窺 わ れ た. BALF中 の 各 種 細 胞 成 分 とサ イ トカ イ ン の相 関 を検 討 した とこ ろ, TGF-α に 関 して はBALF 中 マ ク ロ フ ァ ー ジ 密 度 と の 間 に の み 正 の 相 関 が 窺 わ れ た が, TGF-β で は 認 め な か っ た. TGF -α は 前 述 の 如 く腫 瘍 細 胞 の み な らず,活 性 化 さ れ た マ ク ロ フ ァ ー ジ で も産 生 さ れ る こ とが 知 ら れ て い る65). TGF-β に 関 し て は ブ レ オ マ イ シ ン な ど に よ っ て 急 性 に 起 こ る 肺 の 線 維 化 で は 肺 胞 マ ク ロ フ ァ ー ジ で 産 生 さ れ る が, IIPな ど の 慢 性 の 肺 線 維 化 の 場 合 は,マ ク ロ フ ァ ー ジ で は な く 気 管 上 皮 細 胞 やII型 肺 胞 上 皮 に お け るTGF-βの産 生 が 報告66)され てい る.間 質 性 肺 炎 にお いて
も急 性,慢 性 あ るい は活 動 性,非 活 動 性 な ど多
様 な病 態 が あ り,炎症 と線維 化 が 同 時 に進 行 し,
関 与 す る細 胞 成分,液 性 因 子 につ い て も多彩 で
あ り,今 回検 討 したサ イ トカイ ン以 外 の 因 子 に
つ い て の解析 も今 後 必 要 と思 われ た.
結 論 間 質 性 肺 疾 患 に お い てBALF中IL-1α, TGF -α, TGF-β と血 清 中TGF-α の 定 量 を 行 い, そ の 病 態 と の 関 連 で検 討 し た. 1. BALF中 のTGF-α, TGF-β は いつ れ も 健 康 人 対 照 に 比 べ 高 値 と な る 傾 向 で あ っ た. 2. BALF中IL-1α は ほ とん ど 測 定 不 能 で あ っ た が, BALF細 胞 培 養 上 清 中 で は 測 定 可 能 で あ り,間 質 性 肺 疾 患 に お い て 高 値 と な る傾 向 を 示 し た. 3. BALF中TGF-α は 肺 活 量,肺 拡 散 能 の 減 少 が 軽 度 の 群 で 高 値 で あ り,高 度 障 害 群 ではTGF -β が 高 値 で あ っ た.ま た 胸 部X線 上 で 線 維 化 進 展 と の 関 連 で もTGF-α は 軽 度 の 群 で 高 値 で あ り, TGF-β は 高 度 線 維 化 群 で 高 値 で あ っ た. 4. BALF中TGF-α, TGF-β は 共 に 間 質 性 肺 疾 患 の 活 動 期 群 で 高 値 を 示 し た. 5. BALF中TGF-α とTGF-β は 各 々PIIIP あ る い はsIL-2Rと の 間 に 正 の 相 関 を示 し た. 6. BALF中 マ ク ロ フ ァー ジ密 度 とTGF-α の 間 に は 正 の 相 関 を 認 め た が, TGF-β との 間 に は 相 関 性 を 認 め な か っ た. 以 上IL-1α, TGF-α, TGF-β の 検 討 成 績 か ら,各 々 間 質 性 肺 疾 患 の 多 様 な 病 態 と の 関 連 が あ り肺 線 維 化 に 重 要 と考 え られ た. 稿 を終 え る に あ た り,終 始 御 指 導 御 校 閲 を賜 った 恩 師 木 村 郁 郎 教 授 に深 甚 の 謝 意 を表 す と共 に 直 接 御 指 導 頂 い た 多 田慎 也 講 師 に 深 謝 致 し ます. (本論 文 の 要 旨 は,第33回 日本 胸 部 疾 患 学 会 総 会 に お い て発 表 した.)文
献
1) 木 村 郁 郎,多 田 慎 也:特 発 性 間 質 性 肺 炎.呼 吸 と循 環(1988) 36, 941-947.
2) Carrington
CB,
Gaensler EA,
Coutu RE, FitzGerald
MX and Gupta RG: Natural
history and
treated course of usual and desquamative
interstitial
pneumonia.
N Engl J Med (1987) 298,
801-809.
3) Hunninghake
GW and Fauci AS: Pulmonary involvement in the collagen vascular diseases. Am Rev
Respir Dis (1979) 119, 471-503.
4) Eisenberg H: The interstitial
lung diseases associated
with the collagen-vascular
disorders.
Clin
Chest Med (1982) 3, 565-575.
5) 岡 安 大 仁,堀 江 孝 至,澤 田 滋 正:膠 原 病 性 肺 臓 炎.内 科MOOK (1983) 22, 160-165.
6) Crystal RG, Gadek JE, Ferrans VJ, Fulmer JD, Line BR and Hunninghake
GW: Interstitial
lung
disease:
Current concepts of pathogenesis,
staging and therapy.
Am J Med (1981) 70, 542-568.
7) 貫 和 敏 博:肺 細 胞 由来 の 増 殖 因 子.代 謝(1990) 27, 777-786. 8) 貫 和 敏 博,本 間 栄,田 村 尚 亮,高 橋 和 久,吉 良 枝 郎:肺 の 線 維 化 をめ ぐる細 胞 とサ イ トカ イ ン.最 新 医学 (1992) 47, 1303-1309. 9) 木 村 郁 郎:気 管 支 肺 胞 洗 浄 液.免 疫 と疾 患(1982) 4, 329-336. 10) 北 村 諭,石 井 芳樹: BALF検 査 法.日 本 臨 床(1990) 3, 490-496. 11) 田 村 昌士:特 発 性 間質 性 肺 炎 の 診 断 基 準(改 訂案)に つ い て.厚 生 省 特 定 疾 患 間 質 性 肺 疾 患 調 査 研 究 班 昭和 55年 度 研 究 報 告 書(1981) pp4-6.
12) Mitchell DM and Fries JF: An analysis
of the American
Rheumatism
Association
criteria
for
rheumatoid
arthritis.
Arthritis
Rheum (1982) 25, 481-487.
13) 石 川 栄 一,田 村 多 絵 子:汎 発 性 強 皮 症 の 診 断 基 準.臨 床 医(1982) 8, 2433-2438. 14) 木 下 牧 子,横 張 龍 一:皮 膚 筋 炎,多 発 性 筋 炎.治 療(1987) 69, 1407-1412.
15) Brown PD, Wakefield
LM, Levinson AD and Sporn MB: Physicochemical
activation
of recom
binant latent transforming
growth factor-beta's
1, 2, and 3. Growth Factors
(1990) 3, 35-43.
16) 三 上 理 一 郎,野 辺 地 篤 郎:原 因不 明 の び まん性 間 質 性 肺 線 維 症 の 臨 床 病 理 学 的 研 究.日 本 臨 床(1969) 27, 1829-1861.
17) Reid J: The pathogenesis of the Hamman Rich syndrome. Am Rev Tuberc Pulm Dis (1958) 78, 353
-362 .
18) Kravis TC, Ahmed A and Brown TE: Pathogenic mechanisms in pulmonary fibrosis collagen
induced migration inhibition factor production and cytotoxicity mediated by lymphocytes. J Clin
Invest (1976) 58, 1223-1232.
19) Nagay H, Elmore M and Ford CD: Idiopathic interstitial pulmonary fibrosis. An immune complex
disease? Am Rev Respir Dis (1973) 107, 826-830.
20) Kaplan RL, Schockert AL, King TE, Maulitz RM, Good JT, Stanford RE and Sahn AS: A model
of immune complex-mediated pleuropulmonary injury. Evidence of deposition of circulating immune
complexes in the lung. Am J Pathol (1980) 100, 115-130.
21) Gadek JE, Kelman JA and Fells G: Collagenase in the lower respiratory tract of patients with
idiopathic pulmonary fibrosis. N Engl J Med (1979) 301, 737.
22) 田 村 昌 士,鵜 浦 哲 朗:特 発 性 間質 性 肺 炎.臨 床 成 人病(1989) 19, 2105-2110.
pp12-間質 性肺 疾 患 の 病 態 に 関す る研 究
651
24.
24) Dubois CM, Ruscetti FW, Palaszynski EW, Falk LA, Oppenheim JJ and Keller JR: Transforming growth factor ƒÀ is a potent inhibitor of Interleukin 1 (IL-1) receptor expression: Proposed mecha nism of inhibition of IL-1 action. J Exp Med (1990) 172, 737-744.
25) Raghow R: Role of transforming growth factor ƒÀ in repair and fibrosis. Chest/Suppl. (1991) 99, 61S-65S.
26) Shaw RJ: The role of lung macrophages at the interface between chronic inflammation and fibrosis. Respir Med (1991) 85, 267-273.
27) Thornton SC, Por SB, Walsh BJ, Penny R and Breit SN: Interaction of immune and connective tissue cells: The effect of lymphokines and monokines on fibroblast growth. J Leukocyte Biol
(1990) 47, 312-320.
28) Elias JA, Freundlich B, Kern JA and Rosenbloom J: Cytokine networks in the regulation of inflammation and fibrosis in the lung. Chest (1990) 97, 1439-1445.
29) 尾 関 恒 雄,大 内 和 雄,今 西 健 一:線 維 芽 細 胞 成 長 促 進 因 子.医 学 と 薬 学(1987) 18, 1465-1467. 30) 蒲 生 忍,清 水 信 義:線 維 芽 細 胞 と増 殖 因 子 レ セ プ タ ー.日 本 臨 床(1989) 47, 831-835.
31) Brody AR and Bonner JC: Platelet-derived growth factor produced by pulmonary cells. Chest/ Suppl. (1991) 99, 50S-52S.
32) Shaw RJ, Benedict SH, Clark AF and King TE: Pathogenesis of pulmonary fibrosis in interstitial lung disease. Am Rev Respir Dis (1991) 143, 167-173.
33) Marinelli WA, Polunovsky VA, Harmon KR and Bitterman PB: Role of platelet-derived growth factor in pulmonary fibrosis. Am J Respir Cell Mol Biol (1991) 5, 503-504.
34) Nagaoka I, Trapnell BC and Crystal RG: Upregulation of platelet-derived growth factor-A and B gene expression in alveolar macrophages of individuals with idiopathic pulmonary fibrosis. J Clin
Invest (1990) 85, 2023-2027.
35) Mccusker RH, Hubner CC, Bayne ML, Cascieri MA and Clemmons DR: Insulin-like growth factor (IGF) binding to human fibroblast and glioblastoma cells: The modulating effect of cell released IGF binding proteins (IGFBPs). J Cell Physiol (1990) 144, 244-253.
36) Delapp NW and Dieckman DK: Effect of basic fibroblast growth factor (bFGF) and insulin-like growth factors type I (IGF-I) on adult human keratinocyte growth and fibronectin secretion. J Invest Dermatol (1990) 94, 777-780.
37) Singh JP, Adams LD and Bonin PD: Mode of fibroblast growth enhancement by human interleukin -1. J Cell Biol (1988) 106, 813-819.
38) Raghu G, Masta S, Meyers D and Narayanan AS: Collagen synthesis by normal and fibrotic human lung fibroblasts and the effect of transforming growth factor ƒÀ. Am Rev Respir Dis (1989) 140, 95 -100
.
39) Gery I, Gershon RK and Waksman BH: Potentiation of the T-lymphocyte response to mitogens. J Exp Med (1972) 136, 128-142.
40) March CJ, Mosley B, Larsen A, Cerretti DP, Braedt G, Price U, Gillis S, Henney CS, Kronheim SR, Grabstein K, Conlon PJ, Hopp TP and Cosman D: Cloning, sequence and expression of two distinct human interleukin-1 complementary DNAs. Nature (1985) 315, 641-647.
41) 笠 原 忠,向 田 直 史:イ ン タ ー ロ イ キ ン1の 産 生 と 作 用 の 機 構.蛋 白 質 核 酸 酵 素(1991) 36, 1140-1148. 42) 小 林 芳 郎:イ ン タ ー ロ イ キ ン1:サ イ トカ イ ン,大 沢 利 昭 編,東 京 化 学 同 人,東 京(1990) pp 1-12.
specifically blocks binding of epidermal growth factor to cells. Nature (1976) 264, 26-31.
44) Lamontagne LR, Gauldie J, Stadnyk A, Richard C and Jenkins E: In vivo initiation of unstimulated
in vitro Interleukin-1 release by alveolar macrophages. Am Rev Respir Dis (1985) 131, 326-330.
45) Kahlin N, Bereznay O, Sporn M and Greenberg AH: Macrophage production of transforming
growth factor ƒÀ and fibroblast collagen synthesis in chronic pulmonary inflammation. J Exp Med (1989) 170, 727-737.
46) 大 村 栄 治,対 馬 敏 夫: TGF-α の 構 造 と機 能.蛋 白 質 核 酸 酵 素(1991) 36, 1343. 1349.
47) Derynck R, Goeddel DV, Ullrich A, Gutterman JV, Williams RD, Bringman TS and Berger WH:
Synthesis of messenger RNAs for transforming growth factors a and ƒÀ and the epidermal growth factor receptor by human tumors. Cancer Res (1987) 47, 707-712.
48) Ohmura E, Okada M, Onoda N, Kamiya Y, Murakami H, Tsushima T and Shizume K: Insulin -like growth factor I and transforming growth factor ƒ¿ as autocrine growth factors in human
pancreatic cancer cell growth. Cancer Res (1990) 50, 103-107.
49) 宮 園 浩 平: TGF-β の 構 造 と作 用.蛋 白 質 核 酸 酵 素(1991) 36, 1350-1356. 50) 宮 崎 香: TGF-α とTGF-β の 生 理 的 役 割.臨 床 免 疫(1990) 22, 541-550.
51) Phan SH, Gharaee-Kermani M, Wolber F and Ryan US: Stimulation of rat endothelial cell
transforming growth factor ƒÀ production by bleomycin. J Clin Invest (1991) 87, 148-154.
52) Phan SH, Gharaee-Kermani M, Wolber F and Ryan US: Bleomycin stimulates production of
transforming growth factor ƒÀ by rat pulmonary artery endothelial cells. Chest/Suppl. (1991) 99,
66S.
53) 石 崎 武志,宮 保 進:血 管 内皮 細 胞 と間 質 性 肺 病 変.最 新 医 学(1992) 47, 1310-1317.
54) Coggeshall JW, Lefferts PL, Butterfield
MJ, Bernard GR, Carroll FE and Snapper JR: A model
of increased pulmonary microvascular
permeability
pulmonary
edema in sheep. Am Rev Respir Dis
(1987) 136, 1453-1458.
55) Tate RM,
Vanbenthuysen
KM,
Shasby DM,
Mcmurtry
IF and Repine JE:
Oxygen-radical-mediated permeability
edema and vasoconstriction
in isolated perfused rabbit lung. Am Rev Respir
Dis (1982) 126, 802-806.
56) Said SI and Foda HD: Pharmacologic
modulation
of lung injury.
Am Rev Respir Dis (1989) 139,
1553-1564.
57) Madri JA and Furthmayr
H: Collagen polymorphism
in the lung. An immunohistochemical
study of
pulmonary
fibrosis.
Hum Pathol (1980) 11, 355.
58) Bateman
ED and Turner-Warwick
M: Cryptogenic
fibrosing alveolitis:
prediction
of fibrosing
activity from immunohistochemical
studies of collagen types in lung biopsy specimens.
Thorax
(1983) 38, 93.
59) Crystal RG and Kawanami O:
Collagen and collagenase
in occupational
lung disease.
JUOEH
(Suppl) (1982) 4, 85.
60) Low RB, Cutroneo KR, Davis GS and Giancola MS: Lavage type III procollagen
N-terminal
peptide
in human pulmonary
fibrosis and sarcoidosis.
Lab Invest (1983) 48, 755-759.
61) 木 村 郁郎,多 田慎 也,横 田 聡,杉 本 啓 介:各 種 間質 性 肺 疾 患 に お け る血 清 中procollagen type IIIの検 討 . 厚 生 省 特 定 疾 患 び ま ん性 肺 疾 患 調 査 研 究 班 平 成3年 度 研 究報 告 書(1991) pp 91-93.
62) Rubin LA, Kurman CC, Fritz ME, Biddison WE, Boutin B, Yarchoan R and Nelson DL: Soluble
interleukin
2 receptors are released from activated human lymphoid cells in vitro. J Immunol (1985)
間質 性 肺 疾 患 の病 態 に関 す る研 究
653
63) 横 田 聡:膠 原 病 肺 の 病 態 に 関 す る 研 究.第2編 膠 原 病 肺 に お け る 血 清 中 お よ び 気 管 支 肺 胞 洗 浄 液 中 soluble IL-2 receptorの 検 討.岡 山 医 誌(1992) 104, 701-711.
64) Rubin LA, Jay G and Nelson DL: The released interleukin 2 receptor binds interleukin 2 efficiently.
J Immunol (1986) 137, 3841-3844.
65) Madtes DK, Raines EW, Sakariassen KS, Assoian RK, Sporn MB, Bell GI and Ross R: Induction
of transforming growth factor ƒ¿ in activated human alveolar macrophages. Cell (1988) 53,
285-293.
66) Khalil N, O'Connor RN, Unruh HW, Warren PW, Flanders KC, Kemp A, Bereznay OH and
Greenberg AH: Increased production and immunohistochemical localization of transforming growth
The pathogenesis
of interstitial
pneumonia
and the
role
of cytokines
Keisuke
SUGIMOTO
Second Department
of Internal
Medicine,
Okayama
University
Medical School,
Okayama
700, Japan
(Director:
Prof. I. Kimura)
Various cytokines are known to participate in the pathogenesis of interstitial pneumonia
follewed by lung fibrosis due to the proliferation of fibroblasts and production of collagen
fibers.
Patients with interstitial pneumonia including idiopathic interstitial pneumonia (IIP) and interstitial pneumonia with collagen vascular disease (IP with CVD) were examined by bronchoalveolar lavage (BAL). Cytokines such as IL-1ƒ¿, TGF-ƒ¿, and TGF-ƒÀ in BAL fluid were measured by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). The concentrations of TGF -ƒ¿ and TGF-ƒÀ in BAL fluid of patients with IIP and IP with CVD were higher than those of normal control, while IL-1ƒ¿ in BAL fluid was detected in few patients. The level of TGF-ƒÀ in BAL fluid was higher in patients with greater decreases in pulmonary function and overt fibrosis on chest X-ray film, although TGF-ƒ¿ was higher in patients with milder disorders. The concentrations of TGF-ƒ¿ and TGF-ƒÀ showed positive correlation with soluble IL-2
receptor as well as procollagen type III in BAL fluid.
These results indicated that cytokines regulating lung fibrosis play important roles in the
