影響 関 す 研究 腫 上 皮 及 す

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金沢 大 学 医 学 部 産 科 婦 人 科学 講^{座 ( 主 任 ‥}西田 悦郎 教授)

瀬 ノ^ーl 秀 隆

( 昭和5 2年1月2 0 日受 付)

女 性^におい ては男性^の約2^/3 ^の畳^の比較 的 大嶺 の

a ndrb g^{e n} が分 泌さ れて い る^{. こ の}女 性^にお け^る

a ndr oge n 分泌 状 態は両側 卵 巣 摘 除を行な^{っ て} も^･ はと ん ど全く影響さ れ ず. 副腎 障害ま た は摘 除^によ り 激 減す る^{の で}そのほ とん ど す^べては副 腎^に由 来す る^こ と は明ら かであ る. こ の女 性^にお け る副 腎性 a ndr o^･ ge n の消 長は明ら か^{に a}ge^･depe nde nt であ り^･ 年 令推 移によ り か な り特 徴的な c u r v e を画く^{1 ) 伸}

す な わ ち^, 副 腎 性 a nd^{r o}ge n の代 謝 産 物^であ る 尿 中 1 7^‑keto ste r oi d (1 7^‑K S) ^につ い て ･ わ れ わ れの教 室^で得ら れ た結 果^では^, 女性 尿 中1 ト K S 値は 1 0才 頃ま^では ほ と ん ど上昇 せ ず^. 1 0才 前 後^の pr epu^･

be rt y か ら急 激^に上昇を は じ め, 10才 代 後 半^で は1 0 才代 前 半^の約2倍と な り, 2 0才 代^では, pe ak と な り^, 3 0才 代^では や や減じ, 3 0才 代^, 4 0才 代･5 0才 代と 軽 度漸 減を示す が は ぼ^一 定^の値を保^って いる･ す な わ ち^, 40才 代 末^の卵 巣機 能 閉 止^によ^っては尿 中1 7^‑K S 値は影響さ れ ず^, 閉経 前 後^の 17 ^‑K S 値^の有意^の差 ^は 認め ら れ な^い.

一 方^. 6 0才を過ぎ る と急 激^に減 少し始 め. そ^の後は年 令^の増 加と共に減 少す る^{抑 .}

ま た^. わ れ わ れの教室^にお け る血 中 1 ト K S 値^の年 令 的推 移^につい ても同 様^の傾 向^{の C u r V e が}得ら れ て いる^川).

こ のよ う^に副 腎性 ^{a n}dr oge n 分泌動 態は年 令 推 移^に従^{っ て}甚だ特 徴 的な消 長を示し, age^‑depe nde^･

nt であ ること は明 確^であ る^.

一 方^{. こ の}よ う な特異な消 長を示す副 腎 性 a ndr o^‑ ge n の女 性^{にお け る}生理学 的意 義^{につ い て は ･} 女 性

にお け る pube s. s e x u al de sir e の 発 現推 特^に重 要な作用を呈して いること は知ら れて い る が^{･ そ の}他

の意 義^{につ い て}は な お不明^の点が極めて多^い･ わ れ わ れ^の教 室^では副 腎 性 ^{a n}d^{r o}ge n の主 要 分

画^であ る dehydr o epia ndr o ste r o n e ( D H A) を中 心 と し^{て 一}連^の研 究が行な わ れてきてお り^. D H A ひ い て は副 腎性 ^{a n}dr oge n の女性^に及 ぼ す作用^{の い} くつか が確 認さ れて いる が^. その女 性^にお け る種^{々 の} 臨 床 応用^の可 能 性も示 唆さ れてきて いる^{川 い 潮}

境 人 科 臨 床^におい ては更 年 期 障 害^{の ホル モン}療 法^の

一 つ と して a ndr oge n 療 法が あ る が^. te sto ste r o^･ n e には副 作 用と し^て強^い男化 作 用が あ り, 使_{用 上}大 き な制 約が あ る^. ま た^, 内服 用 ^{a n}dr oge n で あ る 1 7^{‑m et}hyl te sto ste r o n e は適用によ り男 化偵向と共

にし ば し ば重篤な肝 障 害を お^こす危 険 性が あ る. 従^っ

て婦 人 科 臨 床^で は肝 障害を お^こさ ず長 期 連用で きる a ndr oge n 剤. な^いし は男 化 作用 が ご く少く^て鎮 的作 用な どの効 果^の大きい a ndr og^{e n} 剤^の出現 が 望ま れて いる. これ ら^{の 一 つ} と して D H A の 臨床 応 用 が注 目さ れて いる^.

ま た. 女 性にお け る副 腎 性 ^紺d^{r o}g帥 の生理的 意 義^{の 一} つと して. その瞳 上 皮^に及 ぼ す作用 が注目さ れ る^. す な わ ち, 比較的 若年 女 性^で は両 側 卵 巣を 摘除 しても謄 上 皮^の萎 縮は さ ほ ど起ら ず^, ま た 閉経後1 0年 頃まで は腫 上 皮と くに中層細 胞 層^に萎 縮 傾 向が さ^ほど 著 明^にみ ら れ ない の にか か わ ら ず^, 副 腎 性 ^{a ndr og･}

e n の著 滅す る6 0^〜6 5才以降は急 激な畦 上 皮^の萎 縮が 現わ れ る^{. こ の こ}と は 副腎 性 a ndr oge n が畦 上皮^に 密 接な関 連 性を有して いること を強く示唆 し^{て い る2‑ )･} 著 者は副 腎性 a ndr og^{e n} の畦 上 皮^に お け る 意 義 の検 討と共^に, 臨床 応用^の基 礎と して種^{々 の}投 与量 お よ び投 与 期 間^によ る影 響^{につ い て}検 討を 加 え た^･ 副 腎 性 a ndr oge n と しては. ま ず そ^の 分泌 型 と さ れ^る d^ehydr o epia ndr o ste r o n e を 選 び ^. そ^の a c etate(Ac)

につ い て , 両 側 卵 巣 縞 除^{ラッ ト}を 用^{い て, そ の}陸上皮

に生ず る変 化^. 投 与 最^によ る変化, 変 化 部 位^, 瞳 剥脱

Effe cts of ad mi nistr atio n of dehydr o ep i^andro ste ro ne a cetat e o n t he v ag i^{n a}l ep it h^elia of b io v a rie ctomized r at. H i detaka Seg aw a･ De p artm e nt of O bste tric s a nd Gy n e c olo g y ^l

(D i^{r e c}tor : Prof. E^･ Nishida), School of M ed icin e･ Ka n a za w a U nive r sit y^･

D^eh_ydr o epia ndr o ste r o n e の腱 上皮に及ぼす影 響叱関 する研 究 1 9 1

細胞像^の縫 時的 変 化, その他を, pr Oge Ste r O n e(P G ) 投 与^,妊 娠^.産 碍^. ps e udopr egn a n cy ラッ ト陸 上 皮 像と比 較しつ つ , 種々 の面か ら検討^. 考 察し た^.

実験 材 料お よ び実験 方 法

体重2 8 0g 前 後^の同腹 W ista r 系 雌ラッ ト4 0 匹 ( 1 腹5 ^〜 6匹) を 8 群^に分け.A , B, C^. D . E , F ,

G お よ ぴH群と し. ethe r 麻酔 下^に側腹 部よ り両 側卵 巣を摘 除し た^. 飼料と しては, 固型飼 料 (^{ラッ ト}繁 殖 用オリエ ンタ^ル N M F) を自 由に摂 取さ せ. 手 術 後3 週 間放 置し た後^. 各群を次^の如く処 置し た.

A群: D H A^‑Acl 日 1 m g宛連 続 投 与 B群: D H A ^‑Acl 日 2 m g宛連 続 投 与 C群^: D H A ^‑Acl 日 5 ^m g宛連 続 投 与 D群: D H A ^‑Acl 日1 0m g苑連 続 投 与 E群: P G l 日 2 m g宛連 続 投 与 F群^: P G l 日 5 ^m g宛連 続 投 与 G群: P G l 日1 0m g宛連 続 投 与

H群: 無 処置 対 顔 群

各 群共7 日間 連続 投 与後 半 数^を屠 殺し実験 ^に供し.

他^の半数は さ ら^に7 日間計1 4 El問^の連続 投 与を行な^っ た後屠 殺し た^. 屠 殺は ethe r 麻酔 下に心臓よ り脱 血 せ し めて行^っ た. 子 宮お よ び膣を生理的^{食塩 水に浸し}

た濾紙 上^に摘 出し^, 子 宮は乾燥や余 分^の水 分の附着な ど ない様^に充 分 注意し な が ら重畳を測定し, 腹は1 0 % の ホ ルマ^.) ^ンに て固 定し た^. ま た各 ste r oid 投 与 開 始前^の平均 体 重を初 体 重と し, 投 与 終了 翌 日の体重 ( す な わ ち屠 殺 直前^の体 重) を終 体 重と し. 終 体 重と 初 体重^の差を も^っ て体 重 増 加量 と し^. 体重増 加量^の初 体重に対す る百 分比 を も^って体 重 増 加 率と定め た. な お剖検す るに当り. 卵 巣^の摘除が完 全^であ^っ た か否か を再度 確め た.

ホ ルマ リ^ン固 定は4 8時 間以上 行な^い, 包埋に いた る まで の各操作^を行な うにあ たっ ては, 組 織^の変 形や収 縮を来さ し め ることのない様^に充 分注意して同^一 条件

のも とで行な^っ た^. ま た切片は原則 と し^て5〟 の連 続

切片と し. 型の如く実 施し た^. ま た ste r oi d 投与開

始2 日前よ り屠 殺 時ま^で連日陵 内 容塗抹 標 本^を採_{取 し} た^･ す な わ ちラッ ト の膜^に少量^の生 食 水を含ま せ た^ピ

ペ _ット を軽く塙 入し^{ピペ ッ} ト中^の生 食 水を膣 内に注 入 し た後そのま ま再び 吸引しよく清 拭し たオブジ ェ ク ト グラ ス の上にう す く平 等に塗抹し た^. こ の際^{ピペ ッ ト}

の先端^{に て}腹 前庭 部を擦ら な^い様 注 意を払^っ た.

これ は腹 前 庭部は卵 巣 機 能^と関 係な く角 化す る表 皮

で被わ れて いる か ら その部位の表 層 角 化 細 胞 (S｡h｡^.

地n) が混 入す る お そ れ が あ る た めであ る. 塗抹後室

温^で可 及 的 速や かに生 乾きの状 態^にして純^{アル コ ー ル} と^{エ ー} テルと^の等量混 合 液申^に入れ1 5分以上 固 定し^, す^べて2 4時 間 内^に Papa nic ola o u E A 3 5 染 色 法^{に て} 染色を行な^っ た^22)23‑

ま た瞳組 織^に対す る染色 方 法は次^の如くであ る^. 1 ･ He m ato xylin^‑e O Sin 垂 染色( H^.E) ^: Maye r の He m ato xylin 液 を使 周し た.

2 ･ Az a n 染 色( A Z) : Mallo ry の方 法を Hei^･ de nhain つ い で Sch leiche r が改 変し た方 法を 用 い･ H^.E^.と な ら んで結 合 組 織^. 筋 組 織そ^の他^{の 一}般 観 察^に供し た.

3 ^. Pe riod ic a ci d Schi ff 法_{( P A S}) : い わ ゆ る P A S 染 色^の場合, 固 定 液は純アル コ ^ー ル. ま たは

Ca r n oy 液を最 良と す る が本 実 験^では同^一 検 体につ

い て, H^･E^. A Z , P A S の3者を染め あ げ る 必要上,1 0

% ^{の ホル マ} リン液^に統^一 し た^. ま た粘 液お よ び多 糖 短な どの相 対 的な陽 性 度を問題 と し た た め, 糖 原 証 明

に必要な唾 液消 化 試験は と くに行な わ な かっ た. と く に こ の染 色は各群^の間^の相 対 的な色調や染_{ま り}加 減^に

そ の重点を お き, そのた め^, 染 色 時間そ^の他の染色 条 件を全て統 合し. 出 来る限り同^一 条 件と な る様に細心

の注 意を払^った^{2 川 5､}

4 ^. Tolui d in e b lu e 染 色.

0 ･1 % tolui d in e b lu e 水 溶液で約1 D分 間 染 色し た後､ 純 eth 弧 0Ⅰで2回 手 早く洗^い, 乾燥^{し , キ シ}

ロ ^ー ル透 徹, 封 入し た.

判読 方 法

1 ^. 陸 上 皮^の厚 径 計 測には O kula r s chr a ube n^,Mi^. kr o m ete rを使 用し, H 且 標本を 用^いた^. す な わ ち 謄に対し^て厳 密に的確に切 断さ れ た と み な さ れ る切 片 を選び. 出 束る だ け広 範 囲にわ た る様に最 大 径お よ び 最^′ト径を各 切 片^{につ い て}計 測し^. その平 均 値を 最大厚 径^. 最 小 厚径と し た^. こ の場 合^. 最大径は結 合 織^への 上 皮 突 起^の厚 径を示す もの である.

な お, 陸上 皮^の厚さ は部位^によ り か な り厚さ が異^る

の で全 体と して の平 均 的摩 径を求める の はか な り 困難

であ る^. それに比 して , 各切 片^の最 大^. 最 小 厚 径を求 め るのは比 較 的 容 易であ り, 正 確に測定し う る^. 各切 片の平均 値^の最 大 厚径と最 小 厚径を示すことに よ^って 腫上皮の肥 厚^の程 度を 比較す る^こと ができ る^.

2 ^. 障 上 皮の粘 液細 胞 化お よ び P A S 可染性は部 分 的^に見ら れ る も^のを ごく軽 度 陽性( ^±)^. 1 層^{に ほ} と んど全 周^{にわ たっ}て見ら れ る も^のを軽 度 陽 性 ( ⁺ )^, 2 ^〜 3層にみ ら れ る も^のを中等 度 陽 性( ^{+ +}) , 4 層 以上にみ ら れ る も^のを強 陽性 (^{+ + +}) と し た^.

3 ･ 瞳 内容 塗 抹 標 本^の判定は, 有核 細 胞および無 核

細 胞を合わ せて2 00個 数え. 各^{々 の}数を そ^の% と し た^. 白 血 球 数は膣 炎そ^の他に影 響さ れ る^{の で} . ま た粘液^の 有無は生 食 水を使用 して いる た め そ^の結 晶が混 入し粘 液 有無^の判 定^に困 難を き た し たの で各々判 定の基 準か

ら外し た.

な お, 附 加的に本 実験と平 行し^て. 同様 処 置^{ラッ ト}

にD H A‑^Acl 日2 0^m gを連 続 投 与し, その場 合^の組 織 像^につ い ても 比較検 討し た.

さ らに, 子宮 頸管 内 上皮^の陵 内^への侵入の有 無と^い う問題を排 除す る目 的^で ∴両側 卵 巣 摘 除と共に, 子 宮 を全 摘 除し たラ ット につ い ても同様 実 験を行^･な ^っ た^.

ま た. 妊 娠^{ラ ット,} 塵 碍^{ラッ ト,} 偽 妊娠 ps e udo^･

pr eg^{n a n c}y ラッ ト, 脱 落 臆 腫 de ci du o ma 形 成^ラ

ッ ト の各 時期^の腱 上皮^の各 種 染 色組 織 像と D H A ^‑Ac

投 与^ラッ トのそ れ ら と^の類 似 点^. 相 通 点^{につ い て}比較 検討し た.

妊 娠ラッ ト につ い ては, 体 重 約1 8 0g の W ista r 系 成熟 雌^ラッ トを交 配さ せ, 交 配^の翌 日 を 妊娠 第1 日 と し, 妊娠 第6 ^､ 1 2. 1 5, 2 0, 2 1 日目およ び分 娩 後 第 1 , 2 , 3 , .^{4 5 日目の膣を子 宮 頸 部と共に摘 出}

し, 組 織 学 的に検 討を加え た^. 染 色は】

E ^‑E 染 色^. P A S 染 色^. A Z A N 染 色な ど を行ないt D H A ^‑Ac 投 与 群^のそ れ ら と比 較 検 討し た^.

Ps e udopr egn a cy ラッ ト につ い ては, 体 重2 0 0 ^〜 250g の W ista r 系 成 熟 雌^ラッ トを 用^い, 予め性周期

が4 日周 期^であ る^こと を確認 し た後 実験^に供し た.

各^{ラッ ト につ い て} pr o e str u s の午 後7 時と e st^.

r u s の午前7時^の2回^. 子 宮膣部に tap ping に よ

る機 械 的刺 激を 1 分 間 加え た^{. ta}p ping を加える

装 置と し^ては, 直径3^.5^{m m} , 長さ 8 ^{c m の}金 属 棒を装 着し た電 気 clip pe r に変 圧器 を附 加し. tap ping の頻 度を調 節し う る よ うにし た も^のを 用^いた^. こ の よ う^に誘発 さ れ た ps e udopr egn a n cy は 1 2 ^〜 1 6 日 間 継 続し たの で . そ の間^の腫 上 皮^の組 織 像^{につ い て,} D H A ^‑Ac 投 与^. pr oge ste r o n e 単 独 投 与^のもの と 比 較 検 討し た.

ま た, de ci du o m a 形 成^には s c r atch tr a u mati^･

Z atio n 法を用^いた^. す な わ ち , pS e udopr egn a n cy

第4 日目に ethe r 麻 酔 下^に開 腹し, 子 宮 角 下 部を小 さ く切 開し. 子 宮 外 傷針を描入 し子 宮 内 壁を ^一定^の圧

で S C r atCh し た^{. こ の}操 作を両 側 子宮 角^に行ない開

腹し た. 処 置 後 数日^でか な り著 明な de ci du o m a が 形 成さ れ る が^, 本 実験^で は主に tr a u m atiz atio n 後 第5 日目 (ps e udopr egn a n cy 開 始 後 第9 日昌) に

屠 殺し, 腫 上 皮^の組 織 像^につ い て比 較 検 討し た^{26 ト 押}

実験 成績お よ び小 括

A. D H A ^‑Ae 投 与量 お よ び投 与 期 間^の應上 皮 厚 径 お よ び P A S 陽 性 物質に及ぼす 影 響^.

両 側 卵 巣 摘 除^ラッ トに D H A‑^{Ac を 1 日各1 m g,}

T^ab le l. E ffe cts of deh y d^{r o e}pi ^andr( 芯te r O n e a C etate O n the v agin al epitheliu m of

o v arie cto miz ed r ats.

Do sis Du r atio n

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