ELISA用プレート(ﾌﾞﾛｯｷﾝｸﾞﾚｽﾀｲﾌﾟ)
(旧称：New ELISA plate)
住友ベークライト株式会社
Ｓ－バイオ事業部
当社独自の表面処理技術によりブロッキングﾞ操作なしで低い バックグ
ランドを提供します。
血清などに含まれる種々タンパク質の非特異吸着を抑制します。
予めブロッキング処理がされている為、ブロッキング剤（ＢＳＡ、スキムミ
ルクなど）の 選定が不要です。
ばらつきの少ない安定したバックグランドを提供します。
専用の抗体固定化バッファを使用する事により短時間（２～４時間）で抗
体をプレートに固定化する事ができます。
自家蛍光が少ない素材を使用しています。
約１２０℃の耐熱性があります。（但し、フレームはポリスチレン製の為、
６０℃までの耐熱性です。）
ELISA用プレート（ﾌﾞﾛｯｷﾝｸﾞﾚｽﾀｲﾌﾟ)の特長
抗体 ｳｪﾙ（断面図） 固定化バッファ 固定化バッファ
固定化原理
①
ウェル内面は弊社独自の低吸着表面を施している為、殆どのタン
パク質は吸着しません。
②
キットに付属の専用固定化バッファで固相化用抗体を希釈しウェル
に分注するとバッファと表面処理層が反応し表面処理層がゲル化
します。その際、抗体がゲル内に取り込まれます。（下中図）
③
固定化バッファを除去しますと抗体が固定化されます。（下右図）
ヒト血清の基板への非特異吸着性
HRP標識 抗ﾋﾄIgG当社品は他社品に比べてﾋﾄ血清の非特異吸着が少ないことが判ります。
＊他社品のみﾌﾞﾛｯｷﾝｸﾞ有り当社品：
ﾌﾞﾛｯｷﾝｸﾞなし
でﾋﾄ血清を分注後、抗ﾋﾄIgG抗体と反応
他社品：BSAまたはｽｷﾑﾐﾙｸによりﾌﾞﾛｯｷﾝｸﾞした後、ﾋﾄ血清を分注、抗ﾋﾄIgG抗体と反応
人血清 人血清＊Human Serum AB(20倍希釈)と1h反応
(他社品のみ ｽｷﾑﾐﾙｸ添加） 0 0.4 0.8 1.2 1.6 2 当社品 他社品BSA 他社品ｽｷﾑﾐﾙｸ A bs . 45 0 nm ﾋﾄ血清－ ﾋﾄ血清＋
ウェル間のシグナルばらつき (96穴ウェル)
吸光度
当社品
他社品
ｽｷﾑﾐﾙｸ
ﾌﾞﾛｯｷﾝｸﾞ
他社品
BSA
ﾌﾞﾛｯｷﾝｸﾞ
平均値
1.030
1.229
1.265
標準偏差
0.037
0.033
0.032
CV (%)
3.592
2.749
2.552
ﾗｯﾄ ｱﾙﾌﾞﾐﾝＹ
HRP標識 抗ﾗｯﾄｱﾙﾌﾞﾐﾝ抗体 ｳｻｷﾞギ由来抗ﾗｯ ﾄｱﾙﾌﾞﾐﾝ抗体 ＊他社品のみﾌﾞﾛｯｷﾝｸﾞ有りELISA用プレート（ﾌﾞﾛｯｷﾝｸﾞﾚｽﾀｲﾌﾟ)製品表
•96ウェルプレート
(8ｳｪﾙ×12列)
•プレートシール
•抗体固定化液
•保存液
•プロトコル
•実験実施例２種 等
キット内容
品番 品名 枚/ｹｰｽ 希望小売価格（税別） BS-X7310 ELISA用プレート（ﾌﾞﾛｯｷﾝｸﾞﾚｽﾀｲﾌﾟ)スターターセット 4 7,200円 BS-X7311 ELISA用プレート（ﾌﾞﾛｯｷﾝｸﾞﾚｽﾀｲﾌﾟ) 20 30,000円 BS-X7312 ELISA用プレート（ﾌﾞﾛｯｷﾝｸﾞﾚｽﾀｲﾌﾟ) 50 65,000円Human IL
-
4 Immunoassay Kit
試薬およびスタンダード抗原を調製する スタンダード溶液およびサンプルを各ウェル100 mL ずつ分注し、室温で 2 時間静置 溶液を除き、3 回洗浄 ビオチン標識抗体溶液を各ウェル 100 mL ずつ分注し、室温で 1 時間静置 ストレプトアビジン – HRP 溶液を各ウェル 100 mL ずつ分注し、室温で 30 分静置 基質液を各ウェル 100 mL ずつ分注し、遮光して室温で 25 分静置 停止液を各ウェル 100 mL ずつ分注し、450 nm の吸光度を測定する
本キットのアッセイの流れ
溶液を除き、3 回洗浄 溶液を除き、3 回洗浄Human IL-4 Kit HS Standard Curve 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 0 25 50 75 100 125 antigen concentration (pg/mL) O .D . (A 4 5 0 ) 右図 : この領域を拡大したもの
スタンダード抗原による検量線データ例
感度 : < 1 pg/mL 検出レンジ : 2.0 - 125 pg/mL 高濃度 中濃度 低濃度 125 31.2 2.0 CV値 2.9% 4.3% 6.6% 濃度（pg/mL） 【CV値データ】Human IL-4 Kit HS Standard Curve
0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0 2 4 6 8 10 antigen concentration (pg/mL) O .D . (A 4 5 0 )
・ Human IL-4 Immunoassay Kitについて、同時・日差再現性の検討として、3 日間、N = 3 で 検量線を描くアッセイを行いました。その結果、同時・日差再現性のある検量線が描けることを 確認いたしました。 S.D. : Standard Deviation CV : Coefficient Varidation
同時・日差再現性試験（3 日間, N = 3）
抗原濃度 (pg/mL) Ave. 2.9732 1.7526 0.9034 0.4760 0.2540 0.1560 0.1028 0.0612 1回目 S.D. 0.0951 0.0417 0.0244 0.0385 0.0101 0.0036 0.0016 0.0043 CV(%) 3.2 2.4 2.7 8.1 4.0 2.3 1.5 7.0 Ave. 2.6064 1.4262 0.8376 0.4437 0.2495 0.1437 0.1019 0.0606 2回目 S.D. 0.1526 0.0403 0.0114 0.0112 0.0152 0.0094 0.0047 0.0047 CV(%) 5.9 2.8 1.4 2.5 6.1 6.6 4.7 7.8 Ave. 2.8217 1.6592 0.8722 0.4741 0.2614 0.1491 0.1036 0.0532 3回目 S.D. 0.1242 0.0564 0.0166 0.0095 0.0132 0.0019 0.0036 0.0018 CV(%) 4.4 3.4 1.9 2.0 5.0 1.3 3.5 3.4 125 62.5 31.2 15.6 7.8 3.9 2.0 0SD : Standard Deviation CV : Coefficient Variation
・ Human IL-4 Immunoassay Kitにおいて、以下の 3 水準の濃度（高・中・低）の血清サンプルを 20 回測定した結果の平均値と CV 値を求めました。その結果、どの濃度帯でも CV 値 7% 以下と 良好な結果が得られました。
血清サンプルでの同時再現性試験
Sample 1
Sample 2
Sample 3
Mean (pg/mL)
89.53
15.43
3.01
SD
2.05
0.64
0.20
※ 保存方法 : プレートと乾燥剤（シリカゲルのパック）をアルミ袋に入れ、脱気・シール
・ Human IL-4 Immunoassay Kitのプレートについて、4 ℃での保存安定性を評価しました。 その結果、本プレートは 4 ℃で 1 年相当の保存が可能であることが示されました。
（試験継続実施中）
保存安定性試験
Hu IL-4 Kit HS Standard Curve
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 0 25 50 75 100 125 antigen concentration (pg/mL) O .D . ( A 45 0) 0ヶ月 1ヶ月 1年相当
・ Human IL-4 Immunoassay Kitにおいて、濃度 30 ng/mL で他の抗原との反応を実施しました。 その結果、以下の抗原はクロス反応性がないことを確認しました。
ヒト IL-1b, IL-2, IL-5, IL-6, IL-8, IL-10, IL-13, IL-18, IFN-g, MIP-1b, G-CSF, TNF-a
Over range
特異性試験
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 O .D . ( A 45 0)・ 高感度 : 1 pg/mL オーダーの検出が可能
・ 安定的 : バックグラウンドが低いため、低濃度領域でも Cv 値 7% 以下の安定した測定が可能 ・ 定量性 : 再現性のある検量線が描けるため、定量的なサイトカインの検出が可能
Human IL-4 Immunoassay Kitの特長
【内容物】 ・ 抗ヒト IL-4 モノクローナル抗体固定化プレート（96ウェル） ・ ヒト IL-4 スタンダード抗原 ・ スタンダード希釈液 ・ ビオチン化抗ヒト IL-4 モノクローナル抗体 ・ ストレプトアビジン - ペルオキシダーゼ（HRP） ・ ストレプトアビジン - ペルオキシダーゼ（HRP）希釈液 ・ 洗浄液（10倍濃縮品） ・ 基質液（TMB） ・ 停止液（1N硫酸） ・ プレートシール ・ プロトコール（冊子） 製品外観 感度 < 1.0 pg/mL 検出レンジ 2.0－125 pg/mL 反応時間 3.9h 保存温度 2 ～ 8 ℃ 価格 未定 品番 品名 包装 希望小売価格（税別）
Avidin Plate
１．当社独自の表面処理技術により
ﾌﾞﾛｯｷﾝｸﾞ操作なしで低い
バックグランドを提供します。
•ﾌﾞﾛｯｷﾝｸﾞ剤（BSA,ｽｷﾑﾐﾙｸなど）の
選定の手間が不要です。
•ﾊﾞﾗﾂｷのない安定したバックグランド
を提供します。
２．強固なｱﾋﾞｼﾞﾝ‐ﾋﾞｵﾁﾝ反応をつかって
ﾋﾞｵﾁﾝ化生体分子を結合します。
糖鎖、ペプチドなどの低分子化合物
も固定化できます。
S-BIO Avidin Plate の特長
品番 品名 包装 希望小売価格（税別）
特長１ 低いバックグラウンド
BSA-HRP IgG-HRP Streptavidin(SA)
-HRP アビジン 表面処理層 プレート 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 当社品 他社品A 他社品B O.D.( A4 50 ) ●評価プロトコール ・HRP標識タンパクを分注し、1時間静置 弊社品：PBSTでタンパクを希釈 他社品：PBST+0.1%BSAでタンパクを希釈 ・PBST 300uLでプレートを3回洗浄 ・TMBで発色し、450nmの吸光度を測定 HRP標識タンパク質のプレートへの非特異吸着量を 比較した例です。3種類のHRP標識タンパク質(BSA、 Mouse-IgG、Streptavidin)をプレートに分注して吸着さ せた後、 3,3‘,5,5’テトラメチルベンジジン（TMB）をHRP の基質として用い、基質の発色度からプレートへのタン パク質の非特異吸着量を比較しました。 タンパク質の種類によらず
低いバックグラウンド
を示すと共に、ブロッキングの工程を省く
事によ特長２ 高いビオチンの固定化能
●評価プロトコール ・ﾋﾞｵﾁﾝ-HRPを各濃度に調整し分注、30分静置 弊社品：PBSTでタンパクを希釈 他社品：PBST+0.1%BSAでタンパクを希釈 ・PBST 300uLでプレートを3回洗浄 ・TMBで発色し、450nmの吸光度を測定 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 0 2 4 6 8 Biotin-HRP(ng/mL) O .D .( A 4 5 0 ) 当社品 他社品A 他社品B ビオチン化HRP(ng/mL) ビオチン化HRP アビジン 表面処理層 プレート ビオチン化HRPの固定化量を比較した例です。アビジ ンプレートにビオチン化HRP溶液を分注して固定化させ た後、3,3‘,5,5’テトラメチルベンジジン（TMB）をHRPの基 質として用い、基質の発色度からビオチン化HRPの固定 化量を比較しました。高いビオチン化分子の固定化能
を示します。実験例：サンドイッチELISAによるCRP検出
CRP検出サンドイッチELISAプロトコール
ビオチン標識抗CRP抗体をアビジンプレートに分注し、室温で1時間静置する 各濃度の精製タンパクCRPを100mLずつ分注し、37℃で1.5時間静置 HRP標識抗CRP抗体溶液を各ウェル100mLずつ分注し、37℃で1時間静置 基質液を各ウェル100mLずつ分注し、遮光して25分静置 停止液を各ウェル100mLずつ分注し、450nmの吸光度を測定する ※ 溶液を除き、3回洗浄 ※ ※ ※0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 0 20 40 60 80 100 吸光度 @4 8 5 抗原濃度(ng/mL) 住べ 他社品A
